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2 Estructura y organizacin molecular del citoesqueleto

Definicin: El citoesqueleto es una estructura dinmica de las clulas eucariotas que permite mantener o cambiar la forma celular reaccionando a estmulos externos o internos. Est formada por tres tipos de filamentos de protenas de diferente composicin, funcin y caractersticas:

Filamentos de actina conocidos tambin como microfilamentos Microtubulos Filamentos intermedios.

Cada uno de estos filamentos se forma por polimerizacin de miles de protenas iguales. Estos filamentos constituyen el andamiaje celular al que se pueden asociar muchos tipos de protenas diferentes para realizar funciones muy diversas. Estos tres tipos de filamentos actan de forma coordinada para poder realizar sus funciones. El citoesqueleto es un factor crucial en la evolucin de las clulas eucariotas. El citoesqueleto es una compleja red de filamentos caracterstica de las clulas eucariotas imprescindible para el buen funcionamiento celular. Est formado por tres tipos de filamentos: los microtubulos, los microfilamentos y los filamentos intermedios.

6.2.1 Microtubulos: Cuerpo basal y centriolo.

Los microtbulos son estructuras tubulares de 25 nm de dimetro que se originan en los centros organizadores de microtbulos y que se extienden a lo largo de todo el Citoplasma. Se pueden polimerizar y despolimerizar segn las necesidades de la clula. Se hallan en las clulas eucariotas y estn formados por la polimerizacin de un dmero de dos protenas globulares, la alfa y la beta tubulina. Cada microtbulo est compuesto de 13 protofilamentos formados por los dmeros de tubulina. Intervienen en diversos procesos celulares que involucran desplazamiento de vesculas de secrecin, movimiento de orgnulos, transporte intracelular de sustancias, as como en la divisin celular (mitosis y [meiosis), ya que forman el huso mittico]). Adems, constituyen la estructura interna de los cilios y los flagelos. Los microtbulos son ms flexibles pero ms duros que la actina.

Un cuerpo basal o cinetosoma es un orgnulo formado a partir de un centriolo. Se presenta en la base de los undilopodios eucariotas (cilios o flagelos) y sirve como punto de nucleacin parta el crecimiento de los microtbulos del axonema. Los centriolos, a partir de los cuales se forma el cuerpo basal, actan como puntos de anclaje para las protenas, que a su vez anclan los microtubulos en los centrosomas, un tipo de centro organizativo de microtubulos. Estos microtubulos proporcionan la estructura y facilitan el movimiento de las vesculas y orgnulos dentro de muchas clulas eucariticas. Los cuerpos basales, sin embargo, son especficamente bases para los cilios y flagelos que se extienden fuera de la clula. Los cuerpos basales se derivan de los centriolos a travs de un proceso en gran parte desconocido. Son estructuralmente iguales, cada uno de ellos contiene una configuracin helicoidal en terna de microtubulos 9+0 formando un cilindro hueco. La regulacin de la produccin del cuerpo basal y su orientacin espacial es una funcin del dominio de enlace de los nucletidos de la -tubulina (Shang et al, 2005). Son filamentos del citoesqueleto que se caracterizan por estar construidos a partir de tubulina, protena dimrica (subunidades alfa y beta) que se autoensambla para originar a los microtubulos en un proceso dependiente de GTP. Los microtubulos tienen un dimetro de 25 NM y se originan en los centros organizadores de microtubulos (principalmente centrosomas), adoptando una organizacin radial en las clulas interfsicas. Forman tambin parte del huso mittico de todas las clulas eucariticas; se localizan en forma de haces en el axn neuronal, y tambin estn presentes en el aparato locomotor de cilios y flagelos. Los microtubulos son estructuras altamente dinmicas, estabilizadas por un grupo de protenas denominadas protenas asociadas a microtubulos (MAPs). En una clula se produce un recambio continuo de la red de microtubulos. La vida media de un microtubulos individual es de 10 minutos, mientras que la vida media de una molcula de tubulina, desde su sntesis a su degradacin proteoltica, es de ms de 20 hrs. As pues cada molcula de tubulina participa en la formacin y

desmantelamiento de muchos microtubulos durante su periodo de vida. Los microtubulos individuales crecen hacia la periferia celular a una velocidad constante durante cierto periodo de tiempo y entonces de repente acortan rpidamente hacia el centrosoma. Pueden acortarse parcialmente y entonces continuar el crecimiento, o desaparecer por completo, siendo substituidos por un microtubulos distinto. Este comportamiento, llamado inestabilidad dinmica, juega un papel muy importante en el posicionamiento de los microtubulos en la clula.

6.2.1.1 Protenas asociadas y motoras

Los microtubulos estn formados por la polimerizacin de un dmero formado por alfa y beta tubulina. Son filamentos rgidos y huecos de unos 25 nanmetros. Los microtubulos son filamentos polarizados que crecen por un extremo y por el otro se degradan si no estn estabilizados. Los dmeros de tubulina unidos a GTP son ms estables que si estn unidos a GDP. Sobre estos microtubulos, y tambin sobre filamentos de actina, se pueden asociar las protenas motoras, que gracias a repetidos ciclos de hidrlisis de ATP pueden ir movindose a lo largo de estos filamentos pudiendo transportar vesculas e incluso orgnulos. Existen varios tipos de estas protenas motoras dependiendo del elemento que transporten, orgnulos o vesculas, y de la direccin que tomen. Por ejemplo, las kinesinas se dirigen hacia el extremo positivo (por donde crecen los microtubulos) y las dinenas hacia el negativo (por donde se degradan). Es importante que exista un orden y una regulacin en el movimiento de los distintos elementos intracelulares para el correcto desarrollo de funciones celulares como el trfico vesicular, en el que las vesculas deben dirigirse desde el retculo endoplsmico al aparato de Golgi. Los microtubulos son esenciales tambin para la estabilidad de distintos orgnulos como el retculo endoplsmico y el aparato de Golgi y para la organizacin y distribucin de cromosomas en la mitosis. Tambin forman estructuras capaces de moverse como cilios y flagelos. Los microfilamentos o filamentos de actina forman una red cerca de la membrana plasmtica. Son ms flexibles que los

microtubulos y tienen un grosor de 5 a 9 nanmetros. Se forman por polimerizacin de la molcula actina. La orientacin de estos filamentos est controlada por complejos que se forman en la membrana y pueden cambiar por seales externas. Estos complejos actan como lugares de nucleacin de filamentos de actina que tambin estn polarizados. A la actina tambin se le unen gran nmero de protenas que le dan la capacidad de poder realizar una gran variedad de movimientos superficiales como fagocitosis o citocinesis en los cuales es fundamental la densidad y orientacin de filamentos as como el tipo de protena asociada. En el caso particular del tejido muscular la asociacin de actina y miosina (que es una kinesina) confiere la capacidad contrctil a este tipo de clulas. Los filamentos intermedios tienen un grosor de 8-10 nanmetros que es intermedio entre los microtubulos y los filamentos de actina (de ah su nombre). A diferencia de los microtubulos y los filamentos de actina que estn formados por protenas globulares, los filamentos intermedios estn formados por protenas filamentosas polimerizadas. Varios filamentos intermedios se enrollan sobre s mismos a modo de cuerdas. Existen varios tipos de monmeros, que varan en sus extremos amino y carboxilo terminal, que forman estos filamentos. Por ejemplo, la lmina nuclear es un tipo de filamento intermedio distinto al que hay en el citosol o a los que forman la queratina en las clulas epiteliales. Otra diferencia muy importante con respecto a los otros tipos de filamentos es que los filamentos intermedios no estn polarizados. Los filamentos intermedios se distribuyen en la clula formando una red densa cerca del ncleo que se prolonga hasta la membrana, interaccionando con ella. La funcin principal de estos filamentos es la de soportar la tensin mecnica que sufre una clula as como participar en uniones celulares contribuyendo a la cohesin tisular.

La actina y la tubulina son protenas muy conservadas evolutivamente y los filamentos que forman participan de forma coordinada en la polarizacin de la clula.

El citoesqueleto es una estructura supramolecular o red tridimensional de filamentos que contribuye a la integridad de la clula. Define la forma y arquitectura (distribucin) celular, permite el movimiento y transporte intracelular (por medio de protenas motoras), media procesos de endocitosis y exocitosis, participa activamente en la mitosis y en los procesos de modulacin de receptores de superficie (define la conformacin y funcin de los receptores), crea compartimientos (favorece la organizacin funcional); y participa en los procesos de interacciones intercelulares. El citoesqueleto est formado por tres tipos de estructuras bien definidas: Los microtubulos, Los microfilamentos (filamentos de actina) y Los filamentos intermedios. Cada una de estas estructuras posee protenas asociadas caractersticas. Asociados a las tubulinas, se encuentran adems unas protenas minoritarias llamadas protenas asociadas a los microtbulos (PAMTs) que desempean una funcin estabilizadora e iniciadora de la reaccin de polimerizacin. Diferentes estructuras microtubulares (husos mitticos o fibras axonales) contienen diferentes PAMTs Microtubulos y protenas motoras Los microtubulos son responsables del movimiento de cilios y flagelos y del movimiento de vesculas intracelularmente. Esto es el resultado de la polimerizacin y despolimerizacin de microtubulos y de la accin de protenas motoras. En algunos casos los movimientos celulares son debidos a ambos mecanismos (por ejemplo, la separacin de cromosomas durante la meiosis). Los microtubulos son polmeros de la protena tubulina, un heterodmero de y tubulina de unos 55 kD, de secuencias igualmente muy conservadas. Estas protenas guardan una homologa grande con la protena bacteriana FtsZ (ver plenaria XX) que juega un papel importante en la divisin celular. Varios de los movimientos celulares dependen de la interaccin entre filamentos de actina la protena motora miosina, una APTasa que se mueve a lo largo de los filamentos de actina y acopla la hidrlisis del ATP a cambios conformacionales. Los anlisis genmicos muestran que existen varios genes altamente conservados, especialmente, en la regin responsable del "motor".

6.2.1.2 Disposicin de los microtubulos en clula animal y vegetal. En las clulas animales el par de centriolos se ha dividido en interfase y ha dado lugar a dos pares de centriolos que constituirn los focos de unas ordenaciones radiales de microtubulos: los steres. Los dos steres que al principio estn juntos se separan a polos opuestos de la clula y los haces de microtubulos que surgen de ellos se alargan y forman un huso mittico o huso acromtico bipolar. Los microtbulos tienen un papel organizador crucial en todas las clulas eucariotas. Las subunidades de tubulina que los forman se unen unas con otras formando la pared de un cilindro alargado. Los microtbulos estn formados por 13 protofilamentos paralelos. Son tubos de protena largos y relativamente rgidos que pueden desensamblarse y reensamblarse fcilmente. En una clula animal tpica, los microtbulos crecen a partir de una pequea estructura prxima al centro de la clula llamada centrosoma. Se extienden hacia la periferia celular, generando un sistema de guas dentro de la clula, a lo largo de las cuales pueden desplazarse orgnulos, vesculas y otros componentes celulares. Estos microtbulos citoplasmticos son la parte del citoesqueleto responsable de determinar la posicin de los orgnulos rodeados de membrana dentro de la clula y de dirigir el transporte intracelular. Cuando una clula entra en mitosis, los microtbulos citoplasmticos se desensamblan y se vuelven a ensamblar formando una compleja estructura llamada huso mittico. El huso mittico proporciona la

maquinaria que permitir la segregacin de las cromtidas hermanas en dicho proceso de divisin celular. Los cilios son estructuras parecidas a pestaas que se extienden por la superficie de muchas clulas eucariotas. Son cortos y numerosos. La funcin primaria de los cilios es la de mover el fluido por encima de la superficie celular, o la de impulsar a la clula a travs de un fluido. Por ejemplo, algunos protozoos utilizan los cilios tanto para la captura de partculas nutritivas como para la locomocin. Los cilios de la pared del oviducto generan una corriente que impulsa al vulo a lo largo del mismo. Los flagelos tienen una estructura parecida a los cilios. Se diferencian en que no son tan numerosos y que son ms largos. Estn diseados para desplazar a la clula como sera el caso de los espermatozoides. Tantos cilios como flagelos estn formados por microtbulos pero estos son ligeramente distintos a los microtbulos citoplasmticos; estn dispuestos de una forma curiosa y diferencial. Un corte transversal a travs de un cilio permite observar nueve dobletes de microtbulos dispuestos en anillo alrededor de un par de microtbulos sencillos. Esta disposicin de "9+2" es caracterstica de todas las formas de cilios y flagelos eucariotas, desde los protozoos hasta los humanos. En la divisin de clulas vegetales no hay centriolos ni steres pero no obstante s se organiza el HUSO ACROMTICO. Las CLULAS VEGETALES no tienen centriolos y el huso acromtico se forma a partir del CENTROSOMA (estos centros organizadores de

MICROTBULOS tienen su origen en una zona prxima al ncleo al inicio de la mitosis, que recibe el nombre de zona clara). Estos husos sin centriolo se llaman HUSOS ANASTRALES y estn menos centrados en los polos. Por otro lado, en clulas vegetales, la pared rgida requiere que una placa celular sea sintetizada entre las dos clulas hijas. La CITOCINESIS en la clula vegetal se caracteriza, pues, por la formacin de una placa celular en el citoplasma: las fibras del huso son usadas para atraer vesculas que se alinean a lo largo de la placa celular y producen una nueva pared celular. En pocas palabras, carecen de centriolos pero no de centrosoma.

6.2.1.3 Funcin de los microtubulos

MICROTUBULOS Los microtbulos tienen una funcin de soporte dando forma a la clula, pero tambin sirven para el transporte de sustancias y orgnulos a travs del citosol. Tambin asisten a la clula en sus movimientos como en la formacin de pseudopodos y el movimiento de vesculas en los procesos de endocitosis y secrecin. Funciones en las diferentes clulas Los haces de microtbulos adoptan diversas formas y aspectos y tienen funciones variadas:

En los eritrocitos de vertebrados inferiores, un anillo de microtbulos se extiende justamente debajo de la membrana. En estas clulas, la funcin sera de la mantener la forma de las clulas, ya que esta se mantiene incluso si la membrana se solubiliza con detergentes

En las neuronas, los microtbulos y los filamentos intermedios se extienden a lo largo de los axones y dendritas desde el cuerpo de la clula hasta su terminal En fibroblastos no mitticos cultivados in vitro, los microtbulos forman una compleja red citoplasmtica que cruza toda la clula. Los microtbulos estn concentrados cerca del ncleo en unas reas llamadas "centros de organizacin microtubular, COMTs" o centrosomas. En el centro de estas reas se encuentra el centriolo. Durante la mitosis, el centriolo y los COMTs forman los polos del huso mittico. Durante la mitosis, esta red microtubular desaparece y se forma un huso. Los tbulos utilizados para formar dichos husos provienen muy probablemente de los microtbulos existentes en la interfase Los microtbulos son igualmente esenciales para la generacin de movimientos en cilios y flagelos

En la mitosis la formacin del huso mittico es a base de la produccin de microtubulos que se unen a los cromosomas y separan las cromtidas. En algunas clulas los microtubulos participan como vas de desplazamiento de vesculas de secrecin, en los axones de las neuronas y en la citocinesis de las clulas vegetales.