PRCTICA # 5 DETERMINACIN POR ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA DE ASPIRINA Y CAFENA EN TABLETAS DE CAFIASPIRINA Y ASPIRINA.

OBJETIVO

Que el estudiante determine el contenido de aspirina y cafena en tabletas de cafiaspirina y aspirina.

INTODUCCIN La espectroscopia visible es una de las tcnicas ms ampliamente y ms frecuentemente empleadas en el anlisis qumico. Para que una sustancia sea activa en el visible debe ser colorida: el que una sustancia tenga color, es debido a que absorbe ciertas frecuencias o longitudes de onda del espectro visible y transmite otras ms. El rango visible se considera de los 380 a los 750 nm. La base de la espectroscopia Visible y Ultravioleta consiste en medir la intensidad del color (o de la radiacin absorbida en UV) a una longitud de onda especfica comparndola con otras soluciones de concentracin conocida (soluciones estndar) que contengan la misma especie absorbente. Para tener esta relacin se emplea la Ley de Beer, que establece que para una misma especie absorbente en una celda de espesor constante, la absorbancia es directamente proporcional a la concentracin. La coloracin de la solucin se debe a la especie absorbente y esta coloracin puede ser natural o inducida. Diferentes regiones del espectro Ultravioleta y visible y sus rangos o zonas comprendidas:

La coloracin natural puede ser la base de la cuantificacin de una especie; Ms frecuentemente, se induce a la formacin de un complejo colorido que absorba en el visible, y que sea especfico para el elemento o compuesto que se desea cuantificar colorimtricamente. Para esto se requiere de un control de ciertas condiciones, que inhiben o favorecen la formacin de compuestos coloridos:

pH: El pH es un factor determinante en la formacin de ciertos complejos o compuestos coloridos. Cuando el pH influye en la tcnica analtica, se requiere de un control adecuado de este valor para lo cual se agrega alguna solucin buffer, o estabilizador de pH. Temperatura: La temperatura es factor importante, sobre todo en reacciones en las cuales el factor cintico es la base del anlisis. Tiempo: En ciertas reacciones, se requiere de un tiempo determinado para que se tenga una lectura estable de absorbancia de la solucin producida.

Es tambin factible que los complejos o compuestos formados sean lbiles, estos es que despus de un cierto tiempo se descompongan a otros productos diferentes, por lo que el tiempo indicado al que debe hacerse la lectura debe establecerse con base a la experiencia y los resultados que se tengan. DISOLVENTES.- Las consideraciones que se tienen que hacer al elegir un disolvente no solo con respecto a su transparencia, sino tambin respecto a sus posibles efectos sobre el sistema absorbente. Normalmente, los disolventes polares tales como el agua, alcoholes, steres y cetonas tienden a eliminar la estructura fina del espectro como resultado de los efectos vibracionales. Se observan ms fcilmente en disolventes no polares como los hidrocarburos. Adems, las posiciones de los mximos de absorbancia estn afectadas por la naturaleza del disolvente.

Entre los disolventes comunes para espectroscopia UV se incluyen el agua, el etanol del 95%, el ciclohexano y el 1,4 dioxano. El disolvente no debe absorber radiacin en las bandas de estudio, de ah la importancia de conocer las transiciones electrnicas de un disolvente. El espectro Ultravioleta de una molcula se obtiene generalmente en forma adicional al espectro infrarrojo de la misma especie. Este espectro IR frecuentemente sirve como dato confirmativo de la ausencia o presencia de ciertos grupos funcionales. Aspirina El origen del cido acetilsaliclico proviene de la corteza del sauce, que los antiguos pobladores desde el continente Americano hasta Europeo, emplearon para ayudar a aliviar algunos tipos de dolor. A principios del siglo XIX era conocido como salicilina, como se le llam al principio activo de la corteza del sauce. En 1835, el qumico Berlins, Karl Jacob Lowing, produjo una sustancia conocida como el cido saliclico. Pero no fue hasta que el cientfico francs Charles Freder Gerhardt, produce una reaccin entre el cloruro de acetilo y el salicilato sdico que obtiene el principio activo de la aspirina: el cido acetilsaliclico. Aos ms tarde, Felix Hoffmann perfeccionara el medicamento haciendo de esta sustancia, una forma pura y estable, en forma de una tableta redonda con lo que Bayer comenzara a dar la vuelta al globo contribuyendo a aliviar los dolores de cabeza y otros malestares con el nombre de Aspirina. Propiedades qumicas La Aspirina contiene un nico principio activo: el cido acetilsaliclico. Es un ster acetilado del cido saliclico. Su estructura molecular es:

O OH O O
Cafena:

Peso molecular: 180.2 Su proceso de sntesis consiste en tratar el cido saliclico con anhdrido actico, en presencia de un poco de cido sulfrico que acta como catalizador. Sus cristales blanquecino. son alargados, de sabor ligeramente amargo y de color

CH3

La cafena un tipo de droga de la familia de los alcaloides. Hay numerosos compuestos dentro de este grupo, pero distinguiremos a la cafena, a la teofilina y a la teobromina Se encuentran, entre otros lugares nueces de cola, granos de caf, t, habas de cacao, mate y otras plantas. Estos compuestos tienen acciones bioqumicas diferentes y estn presentes en diferentes cantidades en sus respectivas fuentes. La cantidad en cada una de las fuentes se detalla a continuacin: Fuentes: Caf, t, nueces de cola, mate, guaran. Expreso 100 mg (1.5-2oz) Caf descafeinado, de filtro 3- 4 mg T, instantneo 30 mg Barra de Chocolate 30 mg Migral 100 mg Caf de filtro 80-135 mg Caf descafeinado, instantneo 2- 3 mg Mate 25-150 mg Cafiaspirina Bayer 40 mg Alikal 50 mg Caf instantneo 65-100 mg T, ings 60 mg Cola 30- 45 mg Cafiaspirina Plus 65 mg

Estructura de la cafena: 1,-3,-7-trimetil-xantina

Contenido de la cafiaspirina: Cada comprimido de Cafiaspirina contiene 500 mg de AAS y 40 mg de cafena

Las tabletas APC son una mezcla de aspirina, fenacetina y cafena, cada una de estas substancias tiene una absorcin caracterstica en la regin del ultravioleta, con los mximos principales a 277 nm para la aspirina, 275 nm para la cafena y 250 nm para la fenacetina. En el procedimiento una tableta pulverizada se disuelve en cloroformo; la aspirina se separa de la fenacetina y de la cafena, extrayndola con solucin de bicarbonato de sodio. La aspirina separada se extrae con cloroformo, acidificando la capa acuosa; despus se mide en el espectrofotmetro a 277 nm, la fenacetina y la cafena que queda en la capa original de cloroformo se determinan mezcladas, como se ilustra continuacin.

La principal impureza de los comprimidos de aspirina (cido acetilsaliclico prcticamente puro) es el cido saliclico (AS), el cual se produce por hidrlisis del cido acetilsaliclico (AAS) si las condiciones de almacenamiento no son las adecuadas (humedad, oxgeno atmosfrico, luz etc.)

Tambin se produce cido actico (HAc) en la reaccin de hidrlisis, pero al ser voltil se evapora gradualmente. Por tanto, para evaluar la pureza de la aspirina, resulta ms sencillo determinar el AS que medir el AAS presente. Esto es lo que recomienda la Farmacopea Europea que adems establece una tolerancia del 0,15% de AS en tabletas de aspirina. Se pone ese lmite de tolerancia de AS en aspirina tan bajo porque dicho cido causa una irritacin muy fuerte en las paredes estomacales, mucho ms que el AAS. Una vez que el AAS pasa a travs del estmago se hidroliza a AS, de modo que la funcin del grupo acetilo del AAS es simplemente la de proteger las paredes estomacales. As pues, la forma analgsica activa de la aspirina es el AS y no el mismo AAS. Una forma de determinar AS en aspirina es usando la tcnica de espectroscopia UV de segunda derivada. El espectro fundamental (de orden cero) del AAS se caracteriza por tener un mximo a unos 285 nm aproximadamente pudiendo existir un hombro alrededor de 312-318 nm (segn el disolvente) que indica la presencia de AS proveniente de la hidrlisis del AAS. Si se observa que este espectro es ruidoso debe hacerse un suavizado medio del mismo antes de proceder a obtener el espectro derivado. Al trazar el espectro de segunda derivada (muy til cuando existen seales solapadas o interferencias) este hombro se convierte en una seal ms compleja que presenta un mnimo a la max del hombro y un pico satlite o pequeo mximo alrededor de 328 nm ( se mejora as la resolucin). La altura del pico (L) a 328 es proporcional a la cantidad de AS presente. Por lo tanto, el contenido de AS en una muestra puede determinarse fcilmente midiendo la altura L en el espectro de segunda derivada e interpolando en una recta de calibrado previamente preparada con patrones de AS.

MATERIAL
Matraz aforado de 50 ml 1 Propipeta 1 Pipeta volumtrica de 5 ml 2 Esptula 1 Pizeta SUSTANCIAS cido sulfrico Cloroformo Balanza analtica Tableta de cafiaspirina Bicarbonato de sodio Tableta de aspirina cido clorhdrico EQUIPO: Espectrofotmetro UV Matraz aforado de 100 ml 2 Celda / espectro 5 Pipeta graduada de 10 ml 1 Vidrio de reloj 1 Embudo de extraccin Matraz aforado de 25 ml 1 Pipeta graduada de 2ml 2 Pipeta volumtrica de 10ml 2 Matraz aforado de 10 ml 5 Probeta 50ml

PROCEDIMIENTO:

o o o

Pesar y anotar el peso de una tableta de cafiaspirina. Esto debe ser equivalente a aproximadamente 500 mg de aspirina y 40 mg de cafena, para reducir las diluciones necesarias y ahorrar disolventes, cortar la tableta en cuatro partes y pesar una de ellas para analizarla. Moler en un mortero hasta obtener un polvo fino. Aadir con agitacin 20 ml de cloroformo; despus transferir la mezcla cuantitativamente a un embudo de separacin de 60 ml, lavando todas las partculas con otro poco de cloroformo. Extraer la aspirina de la solucin de cloroformo con 2 porciones de 7.5 ml de bicarbonato de sodio al 4% muy fri, al cual se habrn aadido dos gotas de acido clorhdrico, y despus con una porcin de 5 ml agua. Lavar los extractos combinados con tres porciones de 10 ml de cloroformo y aadir las soluciones de lavado a la solucin original de cloroformo. Dejar el extracto acuoso en un embudo de separacin. Filtrar la solucin de cloroformo a travs de de papel humedecido previamente con cloroformo (para eliminar trazas de agua) a un matraz volumtrico de 50 ml con cloroformo en un matraz volumtrico. Aforar y diluir una porcin de 5 ml de esta solucin a 10 ml con cloroformo en un matraz volumtrico. De esta nueva solucin tomar 5 ml y diluir a 10ml de cloroformo y as sucesivamente 2 veces ms. Registrar las curvas de absorbancia versus longitud de onda de las soluciones estndar y las soluciones problema. Se busca el mximo de absorcin de la solucin concentrada y despus se busca las absorciones de las muestras problema. Empleando las absorbancia de la solucin estndar y el problema de aspirina a 277 nm, calcular el porcentaje de aspirina en las tabletas y el nmero de miligramos de aspirina por tableta, teniendo en cuento las diluciones.

o o o

RESULTADOS:
Peso de la tableta de cafiaspirina: 0.6182g Reaccin:
O C-OH
+ NaHCO3

O C-OO-C-CH3 O

+ H2CO3 H2CO3 H2O + CO2

O-C-CH3 O

Y la cafena se disuelve en el cloroformo. Absorbancia mxima de la solucin estndar: Solucin madre A 340 2.461 350 2.096 360 1.860 380 1.540 400 1.320 420 1.151 440 1.113 460 1.020

Clculos de la concentracin de la tableta (En mol/ml): Aspirina:

0.6182 g 0.500 g = 0.5724 g 0.540 g

Que corresponden a los gramos de aspirina que contiene la tableta pesada.

P /V =

0.5724 g 0.011448 g = = 11.448mg / ml 50mL ml 0.011448 g / ml = 6.3529 10 5 mol / ml 180.2 g / mol

6.3529 10 5 mol 1000mmol 0.0635mmol = ml ml 1mol

Cafena:

0.6182 g 0.040 g = 0.0458 g Que corresponden a la cantidad de cafena que contiene la tableta pesada. 0.540 g

P /V =

0.0458 g 0.000916 g = = 0.916mg / ml 50mL ml 0.000916 g / ml 4.7170 10 3 mmol = 4.7170 10 6 mol / ml = 194.19 g / mol ml
Clculo para determinar concentracin de cafena en soluciones problema (mol/ml):

Ccafena =
Donde: o o

(4.7170 103 )(5ml ) = 2.3585 10 3 mmol / ml 10ml

5ml corresponden a la alcuota tomada 10ml corresponden al volumen aforado

Datos de la concentracin: Muestra Sol. Madre 1 2 3 4 Conc. (mmol/ml) 0.004717 0.0023585 0.00117925 0.000589625 0.000294813 Cafena Absorbanci a 2.461 2.465 2.5 2.521 2.54

GRFICA DE LA CAFENA 2.56 2.54 2.52 2.5 2.48 2.46 2.44 2.42 2.4 0.004717 0.0023585 0.00117925 0.000589625 0.000294813

Absorbancia

Concentracin (mmol/ml)

CAFENA

Lineal (CAFENA)

Curva patrn de acido acetilsaliclico: 1) 2) Pesar 25mg de aspirina y transferirla a un matraz aforado de 100ml con cloroformo y prepara diluciones a partir de esta tomando primero 0.2ml y aforar a 10ml, de esta tomar 0.5ml y aforar a 10ml, de esta tomar 0.5ml y aforar a 10ml y por ltimo de esta tomar 1ml y aforar a 10ml. Medir la absorbancia de las soluciones a 340nm.

2.5 10 4 g / ml 1.3873 10 3 mmol 0.025 g 4 C aspirina = = 1.3873 10 6 mol / ml = = 2.5 10 g / ml 180.2 g / mol ml 100ml (1.3873 10 3 )(0.2ml ) C Solucin1 = = 2.7747 10 5 mmol / ml 10ml
Concentracin Absorbanci Muestra (mol/ml)) a Sol. Madre 0.001387347 2.434 1 2.77469E-05 2.5 2 1.38735E-06 2.221 3 1.10988E-07 2.045 4 1.10988E-08 2.096

CURVA PATRON
3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 1.10988E-08 1.10988E-07 1.38735E-06 2.77469E-05 0.001387347 CONCENTRACIN (mmol/ml) ASPIRINA Lnea de tendencia ABSORBANCIA (A)

3)

De la solucin acuosa obtenida del primer procedimiento: o Acidular (agregar lentamente) 2 ml de H2SO4 hasta llegar a pH 2

o o o o

Extraer con CHCl3 ocho porciones de 10ml y filtrar la solucin con Na2SO4 anhidro La solucin resultante aforar a 100ml en CHCl3 Tomar 5ml de esta solucin y aforar a 25ml en CHCl3 Medir su absorbancia y determinar su concentracin.

Absorbancia mediada: 2.500 Por lo tanto corresponde a una concentracin de 2.7747 x 10-5mmol/ml

DISCUSIN DE RESULTADOS:

En el primer procedimiento se peso una tableta de cafiaspirina, la cul deba de pesar 0.540g, sin embargo, la masa pesada fue de 0.6182g. Se puede observar en los resultados la reaccin que se tomo a lugar ente la aspirina y el bicarbonato de sodio, la cul dio la sal sdica del cido acetilsaliclico y cido carbnico, el cul se descompone en agua y dixido de carbono, el cul se desprende en forma de gas (esto sucedi en la fase acuosa). En cuanto a la cafena esta qued en la fase orgnica disuelta en cloroformo. Se determin el mximo de absorcin de la solucin estndar preparada en la cul se obtuvo un mximo de absorcin de 2.461 a una de 340nm, esto debido a que el espectrofotmetro no daba una absorbancia menor, sin embargo, como se muestra en la teora, se puede observar que para la cafena, el mximo de absorcin es de 275nm, por lo que los datos observados en esta prctica no se encuentran bien calibrados debido al espectrofotmetro. Por medio de una regla de 3, en base a la concentracin de aspirina y cafiaspirina que debera contener por tableta cada 540mg de cafiaspirina (a los cules equivalen 0.5g de aspirina y 0.04g de cafena) en la cul para la aspirina se obtuvieron 0.5724g y para la cafena 0.0458g de los 0.6182g de tableta pesada. A partir de los datos anteriores se trabajo con los datos de la cafena ya que fue la solucin que se utiliz (La fase orgnica, que era donde se encontraba el cloroformo y la cafena) y se determin la concentracin de esta a partir del volumen realizado en las extracciones en cul fue de 0.916mg/ml y a este dato se le determino su concentracin en mmol/ml la cual fue de 4.7170 x 10-3. A partir de este dato se determin la concentracin de las diluciones realizadas y se les determin su absorbancia a 340nm a las 5 soluciones las cules se muestran en la tabla y estas se graficaron. Se puede observar que a menor concentracin se observaba mayor absorbancia. En el segundo procedimiento se realiz una curva patrn en base a una tableta de aspirina pura, se midieron 0.0025g de aspirina, es decir 25mg en 100ml de cloroformo y se determin su concentracin la cul fue de 1.3873 x 10-5mmol/ml. Se realizaron 4 diluciones a diferentes proporciones y se les determin su concentracin, para medir su absorbancia y as realizar la curva patrn. Datos observados en la ltima tabla. Con la solucin que se obtuvo de la fase acuosa de la cafiaspirina (que ya se encontraba diluida) y despus se volvi a diluir ms mediante el procedimiento se midi su absorbancia y esta correspondi a 2.500, lo cual indic en base a la curva patrn que su concentracin corresponda a 2.7747 x 10-5mmol/ml

CUESTIONARIO
1. Cuales son los tipos principales de drogas y narcticos?

2. Cules son los dos pasos principales del anlisis de drogas? Un procedimiento de aislamiento y purificacin y el anlisis propiamente dicho. 3. Citar dos procedimientos que se emplean frecuentemente para analizar drogas. Extraccin con disolventes y la cromatografa de intercambio inico. 4. Qu tipo de drogas se determina mejor en la sangre y cuales se determinaran mejor en la orina? Por qu? En general los sedantes (barbituratos) tranquilizantes y compuestos neutros tienden a concentrarse en la sangre, mientras que las anfetaminas y narcticos (alcaloides) se encuentran mas concentrados en la orina. 5. Como pueden clasificarse las drogas basndose en sus propiedades para extraccin con disolventes? Bases orgnicas, cidos orgnicos y neutros. 6. Sugerir un procedimiento para determinar trazas de morfina en la orina? La morfina puede extraerse con cloroformo-isopropanol 4:1 directamente de la orina a un pH 6. 7. En que consiste el procedimiento Dole para anlisis de drogas? Es la combinacin de intercambio inico y extraccin con disolvente. 8. En que consiste el procedimiento Davidow para anlisis de drogas? Es una extraccin sencilla con disolvente para anlisis cualitativo por cromatografa en capa fina. Demostrando que con una sola extraccin con cloroformo a pH 9.5 se recobran cantidades suficientes de drogas cidas, bsicas y neutras, para proceder a su anlisis.

CONCLUSIONES:
Por medio de esta prctica se logro determinar el contenido de 2 compuestos (cafena y aspirina) en una tableta analgsica de uso comercial a diferentes diluciones y por lo tanto concentraciones por medio de la tcnica de espectrofotometra UV en las cules no se observ ningn color debido a que la longitud de onda era muy pequea y corresponda al ultravioleta cercano, por lo cul no se transmita ningn color en las soluciones ya que el espectro visible corresponde al rango entre 380-750nm y nosotros medimos a 340nm, razn de lo anterior. Tambin se puede concluir que a partir de una curva patrn de una solucin determinada se puede obtener la concentracin de una solucin del mismo reactivo que es desconocida.
REFERENCIAS: Gary, D. C.: Qumica Analtica , ED, Limusa, ed. 2, pp: 621-631 http://www1.us.es/pautadatos/publico/asignaturas/26409/6178/2ASPIRINADERIVADA.pdf http://www.fcq.uach.mx/archivos/espectroscopia/ANTOLOGIA/lectura6.pdf http://www.aspirina.com.mx/ http://www.quimica.ull.es/Jornadas04/QO/Aspirina.htm http://www.elistas.net/lista/enfermeria_argentina/archivo/indice/392/msg/416/