Alba Alonso Couso María Álvarez Díaz

RECOGIDA, TRANSPORTE, CONSERVACIÓN Y MANIPULACIÓN DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS

CLÍNICO

Curso 2011/2012

ÍNDICE  Obtención de muestras biológicas para análisis clínicos  Solicitud de pruebas analíticas  Recogida de muestras de sangre  Recogida de muestras de orina  Recogida de muestras de heces  Recogida de otras muestras  Manipulación de muestras biológicas  Sistema de transporte de muestras  Procesamiento de las muestras  Efectos de la conservación sobre las muestras 2 .

fecha de solicitud…)  Facultativo que hace la petición  A veces otros datos que pide el laboratorio tales como si es urgente. la manipulación. El paciente no hospitalizado acude al laboratorio con cita previa y entrega su impreso en la zona de administración del laboratorio donde debe ser informado del lugar de recogida de muestras. historia clínica… La mayoría de las veces los impresos son diferentes según el tipo de análisis que se solicite pero a veces un único impreso es para todas las peticiones sean del tipo que sean. RECOGIDA DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS CLÍNICOS El laboratorio de análisis se utiliza para establecer el diagnóstico y el tratamiento de un paciente con el fin de aportar informes analíticos. así como en el conocimiento del microorganismo causante de la enfermedad o de la respuesta del sistema inmune frente a este. Toda la información diagnóstica que el laboratorio puede proporcionar. SOLICITUD DE LAS PRUEBAS ANALÍTICAS Los clínicos la realizan normalmente a través de un impreso especial donde se incluyen:  Una relación de pruebas  Los datos del paciente (identificación. es necesario recoger adecuadamente una muestra y analizarla en el laboratorio. Así que los técnicos de laboratorio deben hacer una correcta utilización del material y de los reactivos. el transporte al laboratorio y su conservación. escasa o mal transportada. El término calidad incluye la selección apropiada de la muestra. Son fundamentales la recogida. una muestra mal tomada. tratamiento del paciente. el procesamiento y la conservación de las muestras.INTRODUCCIÓN El diagnóstico de las enfermedades infecciosas se basa en el estudio de los síntomas y signos clínicos. Allí se le asignará un número de entrada que figurará en todos los impresos y tubos o recipientes de muestras de dicho paciente. e incluso a un tratamiento inadecuado del enfermo. Para ello. la recogida. depende de la calidad de la muestra recibida. En caso de estar hospitalizado 3 . Por ello. determinará un posible fallo en la recuperación de los agentes patógenos. edad. después de una adecuada manipulación. que puede inducir a errores diagnósticos.

4 mm) o a veces en pacientes geriátricos.1 mm). Se limpia con alcohol de 70º o isopropílico y se deja secar 4. venosa o arterial.el personal sanitario de la planta se ocupa de llevar la petición analítica al laboratorio y las muestras. Calentar la zonar a menos de 42ºC para aumentar el flujo de sangre 3. Se debe informar al mismo que para algunas pruebas conviene o estar en ayunas o haber realizado una dieta previa antes del análisis de lo cual el técnico del laboratorio debe cerciorarse antes de comenzar la toma además de tranquilizar al paciente. El procedimiento de la punción cutánea es el método más utilizado en los niños (en los mayores de un año en la superficie palmar de la última falange de los dedos 2º a 4º y a profundidad menor de 3. sobretodo recién nacidos (en la zona del talón a una profundidad menor de 2.  Compresor. Se realizará con:  Tubos de recogida. En esta técnica se seguirán estos pasos: 1. Hay que seleccionar el punto adecuado de punción según las características del paciente 2. con una presión muy suave en el dedo pulgar 6. Se lava la zona y se coloca una gasa estéril y se efectúa una leve presión. Para hacerlo se pueden utilizar 3 procedimientos: punción cutánea. 4 .  Algodón y gasa.  Lancetas. Se realiza la punción con una lanceta estéril de forma rápida y paralela a la piel 5. RECOGIDA DE MUESTRAS DE SANGRE La sangre es el fluído más utilizado dentro del laboratorio con el fin de ser analizado. Desechamos la primera gota de sengre.  Alcohol 96º-70º.  Jeringas (para la extracción de pacientes con venas finas o fragiles) o sistema de vacío (la forma más frecuente de extracción y que permite el paso de la sangre directamente al tubo y que permite la rapida mezcla con el anticoagulante). Para realizar dicha recogida debe colocarse al paciente tumbado o sentado de manera confortable con el brazo extendido. La extración se lleva a cabo por una serie de etapas que empiezan identificando y asignando un número al paciente. Se sella el capilar con plastilina 7.

Limpiar con alcohol y dejar secar 3. CO2) en sangre que a veces es imprescindible para el diagnóstico de algunas enfermedades (neumonías. En una extracción se puede producir una hemólisis (desintegración de los eritrocitos) lo cual altera muchas pruebas por:  Forzar el paso de la sangre  Agitar los tubos enérgicamente  No dejar secar el desinfectante  Sacar sangre de un hematoma La punción arterial sirve para la determinación de gases (O2. La extracción puede ser con una jeringa o sistema de vacío. Se selecciona o la radial o la femoral 3. Se retira el compresor. Si es con jeringa una vez entrado en la vena se tira del émbolo suavemente hasta que entre dentro la sangre y si es con sistema de vacío se introduce el tubo dentro del portatubos se perfora el tapón y la sangre entra. Con un algodón se presiona la zona de la punción y se mantiene unos minutos. Se pide al paciente que cierre el puño para que las venas sean más palpables 5. Se suele anestesiar al paciente para evitar hiperventilación 5 . embolia pulmonar…) Es más difícil que la venosa y sigue los siguientes pasos: 1. Se aplica un compresor colocándolo varios centímetros por la zona de punción con un nudo fácil de soltar.El 2º procedimiento: la punción venosa es el principal método para la obtención de sangre en el laboratorio y se siguen estos pasos: 1. 8. Esto facilita la visión de las venas y la punción pero no debe estar colocado más de 2 minutos. Se realiza la punción con un ángulo de 30º y el bisel de la aguja hacia arriba 7. Tranquilizar al paciente y tenerlo en posición de descanso durante unos minutos 2. una vez lleno se cambia y se repite el proceso. Elegir la vena adecuada y si no es posible en la vena elegida puede ser en la femoral o en la yugular en el caso de los niños 2. 4. se pide al paciente que abra la mano y se saca la aguja 9. Se fijan las venas por encima y debajo de la zona de punción mediante los dedos índice y pulgar 6.

donde se debe despreciar la primera orina de la mañana. pH. Sirve para analizar glucosa. Otra prueba es 6 . Se realiza con una jeringa con heparina. Se realiza la prueba de Allen comprimiendo las aterias radial y cubital hasta que la mano palidezca. Es importante tanto la hora como el volumen recogido. se limpia la zona y colocamos el dedo sobre la arteria. La muestra se debe llevar rapidamente al laboratorio con un baño de hielo a veces y debe ser rápidamente analizada porque los leucocitos consumen el O2 y se altera el resultado. El examen se puede realizar bajo tres puntos de vista:  Bioquímico para analizar niveles de metabolitos  Bacteriológico para verificar la presencia de microorganismos contaminantes  Microscópico para comprobar los elementos formes en la orina La recogida de una muestra puede realizarse al azar. Un caso de esta modalidad es la recogida de orina de 24 h.4. Retiramos la aguja. La extracción al azar es la indicada para los análisis de rutina y se prefiere que no sea la primera micción sin importar el volumen. Expulsamos las burbujas de aire si las hubiera 8. Retiramos la jeringa y con una gasa presionamos unos segundos 7. RECOGIDA DE MUESTRAS DE ORINA Son para diagnosticar y controlar el tratamiento de enfermedades del tracto urinario o el riñón o algunas alteraciones metabólicas. de una forma u otra según el parámetro que utilicemos. tapamos la jeringa y con un movimiento suave de inversión se mezcla la sangre con el anticoagulante. Cuando entre la sangre en la jeringa presionamos el émbolo 6. recogiendo todas las demás micciones incluida la primera de la siguiente mañana y luego serán todas ellas trasladadas al laboratorio. se debe hacer directamente en el recipiente con una tapa que se ajuste bien y con la identificación del paciente. hematíes… Para realizar la recogida de esta debe ser en condiciones higiénicas enjuagándose los genitales con agua y jabón. sino vuelve a enrojecer no se puede pinchar en esa arteria 5. Si es recogida en un tiempo predeterminado se realiza a un horario previsto y es importante que el paciente este bien informado para atenerse a este así como de la dieta previa que debe hacer. Debemos utilizar un recipiente esteril si es microbiológico y quimicamente limpio para otro tipo de análisis. Se palpa la arteria. en una sola micción o en un tiempo predeterminado. proteínas.

La técnica es la siguiente: con un hisopo de algodón se toma una muestra  7 . La técnica para la recogida de la muestra es la siguiente: bajar la lengua mediante un depresor y con un hisopo raspar una pequeña zona con exudado. la forma y la presencia de moco son datos a tener en cuenta. Si no es posible. ictericia destructiva… El examen comprende:  La observación macroscópica  Análisis químicos  Examen bacteriológico y parasitológico de las heces La cantidad. conservar en heladera a 4ºC hasta 12 horas.  Exudados faríngeos: se utiliza para el diagnóstico de faringitis estreptocócica. la lengua ni los dientes. RECOGIDA DE OTRAS MUESTRAS Exudados corporales: la llevarán a cabo los laboratorios de microbiología.la SOG (sobrecarga oral de glucosa) que sirve al médico para determinar diabetes y se le administra al paciente una cantidad de glucosa haciendo distintas tomas de orina y de sangre a lo largo de la prueba con una duración de más o menos 3 horas. el color. casos de malabsorción. diarrea. no está relacionada con la comida ingerida porque el aparato gastrointestinal no puede realizarse completamente por eso se hace de 3 días seguidos la recogida y luego se realiza un promedio de los resultados. La cantidad de heces en 24 h. Exudados nasal: esta muestra solo se utiliza para buscar portadores de Staphylococcus aureus o en el diagnóstico de impétigo. la úvula. RECOGIDA DE MUESTRAS DE HECES Es útil para el diagnóstico de enfermedades parasitarias. En lo posible no tocar la mucosa oral. Se recoge la muestra en un recipiente limpio evitando que se contamine con orina ya que podría afectar. Se recoge hacia un utensilio de transporte con un depresor lingual limpio. N TRANSPORTE Y CONSERVACION: Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas). En niños menores de 2 años se utiliza un sistema de bolsa de plástico que se adhiere a la goma anal del niño y así no hay contaminación posible.

La técnica es la siguiente: se limpia el canal auditivo con un desinfectante. N TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN: Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas)  Esputos: Dan información sobre neumonía y tuberculosis. Se debe utilizar un hisopo para cada ojo. La técnica es la siguiente: con un hisopo mojado en suero fisiológico se frota sobre la conjuntiva tarsal inferior de afuera hacia adentro. descartándose las que tienen saliva. De todas maneras se solicita que se haga la toma de muestra de ambos sacos conjuntivales por separado. Se tendrá en cuenta utilizar hisopos distintos para cada oído. Esta técnica se llevará a cabo en pacientes con fiebre de origen desconocida y de más de 3 días. previamente embebido en suero fisiológico. Cuando no sea posible se utilizarán hisopos con medios de transporte. La muestra válida es la que procede de la primera expectoración del día. porque tiene gran cantidad de contaminantes. que se mantendrán a temperatura ambiente. porque es la que tiene mayor contenido purulento o mucoso. La técnica es la siguiente: el paciente recogerá la muestra en un recipiente estéril. 8 . Exudado ótico: Solo se utiliza para conocer la etiología en caso de otitis externa. cuando hay un cuadro de septicemia. y la lleva al laboratorio para que se procese. N TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN: Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas)  Exudados conjuntivales: Este tipo de muestras sirve para el diagnóstico de conjuntivitis de causa bacteriana. y se introduce un hisopo estéril con cuidado de no dañar el tímpano y arrastramos una pequeña cantidad de exudado. Hemocultivos: La presencia de microorganismos en sangre refleja que hay una infección activa y diseminada cara otros tejidos. N TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN: El transporte deberá ser inmediato. Suele tratarse de muestras de mala calidad y en ningún caso resultan representativas de los microorganismos existentes en el oído medio.profunda de ambas fosas nasales con el mismo hisopo. enfermos debilitados o después de una intervención quirúrgica. así como distintas siembras para cada oído.

Mover suavemente el frasco para mezclar el contenido y evitar la coagulación. 3.No se debe realizar un hemocultivo si el paciente está con un tratamiento antibiótico. Limpiar la zona de punción con el antiséptico haciendo movimientos circulares de dentro hacia fuera y la membrana de los frascos de hemocultivo con el desinfectante. en el primero sacar aguja y jeringa al mismo tiempo para evitar que entre aire en el frasco 6. 2. Estos criterios son: • Muestra no etiquetada o etiquetada de forma que puede llevar a confusión • Transporte inadecuado • Tiempo excesivo desde la obtención de la muestra • Contenedor inadecuado o no estéril • Contenedor roto o muestra derramada • Muestras con contaminación evidente • Contaminación exógena obvia 9 . esta etapa es delicada para muestras como por ejemplo la sangre porque las células sanguíneas y elementos formes son muy frágiles. Cualquier vena asequible servirá para hacer la extracción. MANIPULACIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS Una vez que la muestra se obtuvo esta tiene que llegar al laboratorio adecuado. Inocular sangre extraída en dos frascos primero en el anaerobio y luego en el aerobio. Etiquetar correctamente la muestra. La técnica para un hemocultivo es la siguiente: 1. adultos entre 5. porque este hace que los gérmenes supervivientes no crezcan bien en los medios de cultivo aunque sí sean capaces de restablecer el cuadro. rotura de tubos… Además los técnicos que operan con las muestras deben protegerse con equipos adecuados. cambios de identificación. Terminada la extracción. 5. Colocar al paciente preferiblemente en decúbito supino. Durante la manipulación de las muestras se ha de ser cuidadoso para evitar pérdidas o derrames. 7.10 ml y niños entre 1-4 ml. pero en los niños se preferirá la vena yugular. Realizar la extracción. retirar la aguja y jeringa. estos establecen unos criterios de rechazo de las muestras mediante los cuales se solicita una nueva muestra. comprimir el punto de punción y colocar el aposito. 4. Para evitar fallos en los laboratorios.

En el caso de que las muestras tengan un agente infeccioso el tapón del contenedor primario tiene que ir sellado con una especie de cinta adhesiva. Así por ejemplo en un hospital las muestras se suelen transportar utilizando un sistema de tubos neumáticos. que van desde donde se hace la toma de muestras hasta el laboratorio. En otros hospitales se utilizan la entrega en mano. y esto son unos compartimentos forrados de goma espuma de unos 10 cm con capacidad para varias muestras. y por lo tanto más posibilidades de accidentes con las muestras y mayor exposición de la muestra a cosas no controladas. Cuando la muestra necesita refrigeración se usan cajas en las que el interior es de acero inoxidable y se coloca un refrigerante comercial. Además ese contenedor tiene que ir enrollado en un material absorbente y luego se introducen en otro contenedor. Si se envía una muestra de un laboratorio a otro el que lo envía tiene que facilitar información e instrucciones para su manipulación que el laboratorio que lo recibe tiene que cumplir. En el caso en el que las muestras vienen a un laboratorio centralizado desde zonas que están situadas fuera del centro. y se desplazan a lo largo de una especie de tubería. y se meten en las cajas de transporte. En este caso los tubos se meten en gradillas. y esto va a condicionar el sistema de transporte. Los envases grandes se transportan en una especie de bolsas de plástico cerradas.• Muestras duplicadas tomadas a la vez • Muestras recogidas en el mismo día con la misma petición (excepto sangre para cultivo) • Muestras no adecuadas para la petición realizada • Cantidad insuficiente para el estudio solicitado • Toda muestra biológica previamente manipulada. en la que una persona del centro se encarga de recoger las muestras y las lleva personalmente al laboratorio. 10 . Las condiciones de transporte con el tubo neumático están controladas y son parecidas independientemente de donde venga la muestra. SISTEMA DE TRANSPORTE DE MUESTRAS El laboratorio donde se realiza el análisis de la muestra puede estar más o menos alejado del centro donde se hace la recogida y la extracción de la muestra. pero esto conlleva mayor tiempo en el transporte. para eso se utilizan unas cajas de transporte resistentes y reutilizables.

Si se va a analizar en la orina sustancias que son sensibles a la luz la orina se recoge en un recipiente de color ámbar y sino en un recipiente envuelto con papel de aluminio. así se identifican fracciones alícuotas de las muestras. 5. De no ser así la muestra se debe mantener refrigerada entre 4-6 ºC pero no se debe refrigerar la sangre para preparar suero o plasma porque podría aumentar mucho los niveles de potasio debido a que el frío frena o inhibe la bomba Na/K. Una vez clasificadas y centrifugadas se distribuyen en tubos. 6. Se comienza por sacar las muestras de las cajas. Precentrifugación. La conservación de la muestra de orina es esencial para su integridad porque la orina sufre descomposición microbiológica y alteraciones químicas. Las heces y otras muestras biológicas. Este proceso consta de una serie de etapas que son técnicas preparatorias de las muestras. Por último. 2. Se marcan las muestras con etiquetas. sobre todo cuando son destinadas para análisis bacteriológicos o parasicológicos deben conservarse en unas condiciones requeridas por el germen a estudiar. es necesaria en todo procesamiento. 4. Se separan las muestras urgentes para que sean analizadas y procesadas con prioridad. Normalmente se refrigeran o se les añade un conservante. 3.PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS Se entiende por procesamiento de las muestras el período de tiempo comprendido desde que las muestras llegan al laboratorio hasta que son analizadas. leucocitos o bilirrubina se pueden descomponer rápidamente. A temperatura ambiente las reacciones biológicas transcurren unas 4 veces más rápidas que como lo hacen en el organismo. así que las muestras se conserva bien si el tiempo desde que se obtuvieron hasta que se hace el análisis no es mayor a 1 h. 11 . que previamente están identificados. Centrifugación. así se obtiene distintas fracciones en función del gradiente de densidad. que consiste en clasificar las muestras según el tipo de procesado que les vayamos a dar y eso va a depender de las determinaciones que vayamos a realizar. porque una muestra se puede utilizar en varias secciones. que normalmente se utilizan etiquetas con códigos de barras. 1. Algunos elementos que puede haber en la orina como hematíes. se realiza con las centrífugas y en condiciones estándar. se colocan esas fracciones de muestra en gradillas y se reparten por las distintas secciones del laboratorio.

La congelación a largo plazo también origina alteraciones en las muestras porque actúa sobre sistemas enzimáticos y además produce cambios en la concentración de algunos componentes.EFECTOS DE LA CONSERVACIÓN SOBRE LAS MUESTRAS En las muestras conservadas en refrigerador durante mucho tiempo se va a producir una proliferación bacteriana y este aumento va a producir una degradación sobre la muestra. por ejemplo las proteínas que son moléculas grandes pueden sufrir cambios en su estructura debido a los cristales de hielo que se originan al congelar. La descongelación de la muestra ha de hacerse lo más rápidamente posible. 12 .

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