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ESCUELA POLITCNICA DEL EJRCITO

FACULTAD DE INGENIERA EN CIENCIAS AGROPECUARIAS

IASA I
Asignatura Nombres Nivel Fecha :Agrobiotecnologa : Altamirano T. Anita G. Cahuasqu P. Pablo E. Crdenas M. Mnica A. : SextoB : 09/04/12

Hcda. El Prado

Empleo de Vitaminas y aminoacidos en cultivoS in vitro


I. OBJETIVO:

Investigar las vitaminas y aminocidos que son importantes en un medio de cultivo in vitro. Conocer el papel que desempean los componentes orgnicos (vitaminas y aminocidos), dentro de la agrobiotecnologa en un cultivo in vitro.

II.

INTRODUCCIN:

Los requerimientos para que un tejido vegetal crezca in vitro, en general, son similares a aquellos de las plantas intactas creciendo en la naturaleza. Sin embargo, en la mayora de los casos slo se cultivan tejidos aislados o una parte pequea de los rganos de la planta; estos tejidos u rganos aislados carecen de la capacidad para sintetizar sus propios carbohidratos, la mayora de las vitaminas, y las sustancias de crecimiento vegetales. Por lo tanto, todas las sustancias que necesitara una planta intacta en la naturaleza deben ser suministradas artificialmente a los tejidos cultivados. El establecimiento y crecimiento exitoso de un tejido vegetal in vitro, generalmente est determinado por la naturaleza del explante, por la composicin del medio nutritivo, y varios factores ambientales (luz, temperatura, etc.). Las investigaciones sobre el cultivo de tejidos proporcionaron ms informacin sobre la necesidad de Vitaminas en las plantas. Los intentos de cultivar puntas de races cortadas fracasaban si el medio de cultivo in vitro solo contena azcar y minerales necesarios. La solucin de cultivo se completaba aadiendo extracto de levadura.

En 1937, W.J.Robbins y M.A. Barthey, demostraron que la Vitamina B1 poda sustituir al extracto de levadura, por ser esencial para el desarrollo de races cortadas; otros investigadores indican que la Niacina (B12) y la Piridoxina (B6) son tambin esenciales para el crecimiento de las races cortadas. Vitaminas: Favorecen el crecimiento de los tejidos en cultivos "in vitro" y no se excluye que la falta de alguna de ellas pueda ser un factor limitante de los fenmenos de organognesis. (Dr. Gonzlez, S ). Son necesarias para llevar a cabo una serie de reacciones catalticas en el metabolismo y son requeridas en pequeas cantidades. Las vitaminas favorecedoras del desarrollo de cultivos in vitro y que se aaden rutinariamente en la mayora de los medios de cultivo son: tiamina (B1) es la que ms se utiliza y se la considera un ingrediente esencial, piridoxina (B6) y cido nicotnico (Krikorian, 1991). Otras vitaminas tambin han demostrado tener un efecto positivo en el crecimiento in vitro, como son: cido nicotnico (B3) y pantotenato clcico, (B5),(VILLALOBOS y TORPE citado por ROCA y MROGINSKI, 1991). Vitaminas tales como biotina, cido flico, cido ascrbico, cido pantotnico, vitamina E (tocoferol), riboflavina, y cido p-aminobenzoico se han incluido en algunos medios de cultivo celular. Los requisitos de estas vitaminas por cultivos de clulas vegetales es generalmente despreciable, y no son considera crecimiento-factores limitantes. Estas vitaminas se aaden generalmente al medio de cultivo slo cuando la concentracin de tiamina est por debajo del nivel deseado o cuando es deseable para crecer las clulas en las densidades de poblacin muy baja. El compuesto que ms frecuentemente se aade a los medios de cultivo es el mio-inositol, que estimula el crecimiento de cultivos de clulas determinadas. Su presencia en el medio de cultivo no es esencial, pero en pequeas cantidades estimula el crecimiento celular en la mayora de las especie, mio-inositol se utiliza generalmente en la clula vegetal y de los medios de cultivo de tejidos a concentraciones de 50-5000 mg / litro, su efecto se evidencia sobre la proliferacin de tejidos y sobre la activacin de la organognesis. El cido ascrbico (1 10 mg/L) y el cido ctrico (50 100 mg/L) se utilizan en ocasiones no como vitaminas sino como antioxidantes para evitar el oscurecimiento de determinados tejidos. La tiamina es la vitamina que es, bsicamente, requerido por todos las clulas para el crecimiento.La tiamina se utiliza normalmente en concentraciones que van desde 0,1 a 10,0 mg / litro. El cido nicotnico y piridoxina se aade a menudo a los medios de cultivo, pero no son esenciales para la clula el crecimiento de muchas especies. El cido nicotnico se utiliza normalmente en concentraciones de 0.1-5.0 mg / litro; piridoxina se utiliza en 0.1-10.0 mg / litro El cido ascrbicose usa en combinacin con cido ctrico para evitar oxidacin de los explantes.(MURASHIGE, 1974). El cido ascrbico (vitamina C) se considera benfico en algunos casos, pero problablemente debido ms a su capacidad reductora que a su papel como vitamina.

Aminocidos: los aminocidos no son esenciales para el crecimiento de los tejidos in vitro, sin embargo proporcionan una fuente inmediata de nitrgeno y de fcil asimilacin por parte del tejido. El papel de los aminocidos en la nutricin de los tejidos y clulas vegetales es complejo, ya que los tejidos responden en forma diversa a su suplemento. En general, si los aminocidos corresponden a la forma D son inhibidores, mientras que en la forma L tienen accin benfica (Krikorian, 1991). Aunque las clulas cultivadas son capaces de sintetizar todos los aminocidos necesarios, la adicin de L-glutamina (2 - 8 mM) o una mezcla de aminocidos es a menudo beneficiosa. Esto es particularmente importante en cultivo de clulas y protoplstos. Los ms utilizado son glutamina, asparagina, arginina, serina, cistena (agente reductor). El aporte de aminocidos favorece la proliferacin de callos, aunque cuando ms se acude a los mismos es en las experiencias sobre la rganognesis y en la multiplicacin vegetativa "in vitro". Algunos aminocidos como arginina, cido asprtico, cido glutmico y tirosina, pueden ser ventajosos en el medio de multiplicacin de rganos. Las mezclas de aminocidos parecen tambin presentar efectos sinrgicos estimulando fuertemente la proliferacin de callos y la rgano gnesis. Los efectos obtenidos mediante el aporte de aminocidos parecen muy variables segn la especie y el tipo de morfognesis estudiada. MARGARA (1988), tiamina entre 0,1 y 5 mg/L, pues es esencial para el crecimiento continuo En cantidades pequeas, la adicin de cido paraminobenzoico, cido flico, cloruro de clorocolina (aunque segn THORPE (1981), la considera inefectiva), riboflavina o cido ascrbico puede estimular el crecimiento (GAMBORG et al., 1976). Los aminocidos proporcionan clulas vegetales con una fuente inmediatamente disponible de nitrgeno, que en general puede ser absorbido por las clulas ms rpidamente que el nitrgeno inorgnico. Las fuentes ms comunes de nitrgeno orgnico utilizado en medios de cultivo son mezclas de aminocidos (Por ejemplo, hidrolizado de casena), L-glutamina, L asparagina, y adenina. La casena es hidrolizado generalmente se utiliza a concentraciones entre 0,05 y 0,1 por ciento. Cuando los aminocidos se aaden solo, se debe tener cuidado, ya que pueden tener efectos inhibidores del crecimiento celular. Ejemplos de aminocidos incluidos en los medios de cultivo para aumentar el crecimiento celular son glicina a 2 mg / litro, glutamina hasta 8 mm, asparagina a 100 mg / litro, L-arginina y cistena a 10 mg / litro, y L-tirosina a 100 mg / litro. La tirosina se ha utilizado para estimular la morfognesis en cultivos de clulas, pero slo se debe utilizar en un medio de agar. La suplementacin del medio de cultivo con sulfato de adenina puede estimular clulas el crecimiento y mejoran en gran medida la formacin de brotes.

III.

CONCLUSIONES:

o La mayor parte de las plantas sintetizan casi todas las vitaminas esenciales, pero aparentemente lo hacen en cantidades infraptimas, para lograr un buen crecimiento es necesario a menudo suplementar al medio con una o ms vitaminas. o La adicin de compuestos orgnicos es de suma importancia para el desarrollo y aclimatacin no solo de plntulas, sino de muchas especies, estos compuestos favorecen en gran medida el crecimiento, as como la formacin de races y pseudobulbos por la alta concentracin de vitaminas, azucares o aminocidos y, lo que posibilita a tener una mejor sobrevivencia en invernadero. IV. BIBLIOGRAFA: http://translate.google.com.ec/translate?hl=es&langpair=en|es&u=http://www.phyto techlab.com/pdf/TissueCultureMediaComposition.pdfhttp://es.scribd.com/doc/1957 3539/Clase-1Ppt-Edith arandanosbit.netii.net/web_documents/medio_de_cultivo.doc http://www.portalbonsai.com/historico/categoria.asp?idcat=37325 http://www.monografias.com/trabajos57/aloe-vera-platanos/aloe-veraplatanos2.shtml http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/andrea.menendez/archivos/GuiadePra cticas2010-11-completa-public2.pdf