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Universidad Nacional de Trujillo

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS.


ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE BIOLOGA

CURSO

Biologa Celular y Molecular

DOCENTE

Dr. Juan Cesar Muro Morey

TEMA

Observacin De La Accin Lisosomal En Exudado Intraperitoneal De Mus musculus

ALUMNO

Rosas Quiroz Daniel

CICLO :

VI-B

TRUJILLO PER 2011

INTRODUCCIN
Los lisosomas son orgnulos relativamente grandes, formados por el retculo endoplasmtico rugoso (RER) y luego empaquetadas por el complejo de Golgi, que contienen enzimas hidrolticas y proteolticas que sirven para digerir los materiales de origen externo (heterofagia) o interno (autofagia) que llegan a ellos. Es decir, se encargan de la digestin celular. El pH en el interior de los lisosomas es de 4,8 (bastante menor que el del citosol, que es neutro) debido a que las enzimas proteolticas funcionan mejor con un pH cido. La membrana del + lisosoma estabiliza el pH bajo bombeando iones (H ) desde el citosol, y as mismo, protege al citosol e igualmente al resto de la clula de las enzimas digestivas que hay en el interior del lisosoma. Las enzimas lisosomales son capaces de digerir bacterias y otras sustancias que entran en la clula por fagocitosis, u otros procesos de endocitosis. Los lisosomas utilizan sus enzimas para reciclar los diferentes orgnulos de la clula, englobndolos, digirindolos y liberando sus residuos en el citosol. De esta forma los orgnulos de la clula se estn continuamente reponiendo. El proceso de digestin de los orgnulos se llama autofagia. Por ejemplo, las clulas hepticas se reconstituyen por completo una vez cada dos semanas. Las enzimas ms importantes del lisosoma son: Lipasas, que digiere lpidos, Glucosidasas, que digiere carbohidratos, Proteasas, que digiere protenas, Nucleasas, que digiere cidos nucleicos.

Slo estn presentes en clulas animales. Los lisosomas primarios son orgnulos derivados del sistema de endomembranas. Cada lisosoma primario es una vescula que brota del aparato de Golgi, con un contenido de enzimas hidrolticas (hidrolasas). Las hidrolasas son sintetizadas en el retculo endoplasmatico rugoso y viajan hasta el aparato de Golgi por transporte vesicular. All sufren una glicosilacin terminal (proceso qumico en el que se adiciona un carbohidrato a otra molcula) de la cual resultan con cadenas glucdicas ricas en manosa-6-fosfato (manosa-6-P). La manosa-6-P es el marcador molecular, la estampilla que dirige a las enzimas hacia la ruta de los lisosomas. Se

ha estudiado una enfermedad en la cual las hidrolasas no llevan su marcador; las membranas del aparato de Golgi no las reconocen como tales y las empaquetan en vesculas de secrecin para ser exocitadas. Quienes padecen esta enfermedad acumulan hidrolasas en el medio extracelular, mientras sus clulas carecen de ellas. Los lisosomas primarios contienen una variedad de enzimas hidrolticas capaces de degradar casi todas las molculas orgnicas. Estas hidrolasas se ponen en contacto con sus sustratos cuando los lisosomas primarios se fusionan con otras vesculas. El producto de la fusin es un lisosoma secundario. Por lo tanto, la digestin de molculas orgnicas se lleva a cabo en los lisosomas secundarios, ya que stos contienen a la vez los sustratos y las enzimas capaces de degradarlos. Existen diversas formas de lisosomas secundarios, segn el origen de la vescula que se fusiona con el lisosoma primario: Fagolisosomas. Se originan de la fusin del lisosoma primario con una vescula procedente de la fagocitosis, denominada fagosoma. Se encuentran, por ejemplo, en los glbulos blancos, capaces de fagocitar partculas extraas que luego son digeridas por estas clulas. Endosomas tardos. Surgen al unirse los lisosomas primarios con materiales provenientes de los endosomas tempranos. Los endosomas tempranos contienen macromolculas que ingresan por los mecanismos de endocitosis inespecfica y endocitosis mediada por receptor. Este ltimo es utilizado por las clulas para incorporar, por ejemplo, las lipoprotenas de baja densidad o LDL. Autofagolisosomas. Es el producto de la fusin entre un lisosoma primario y una vescula autofgica o autofagosoma. Algunos orgnulos citoplasmticos son englobados en vesculas, con membranas que provienen de las cisternas del retculo endoplasmtico, para luego ser reciclados cuando estas vesculas autofgicas se unen con los lisosomas primarios.

Lo que queda del lisosoma secundario despus de la absorcin es un cuerpo residual. Los cuerpos residuales contienen desechos no digeribles que en algunos casos se exocitan y en otros no, acumulndose en el citosol a medida que la clula envejece. Un ejemplo de cuerpos residuales son los grnulos de lipofuscina que se observan en clulas de larga vida, como 1 las neuronas.

Objetivos:
Demostrar la accin fagocitaria de los polimorfonucleado de Mus musculus ante la invasin bacteriana en el espacio intraperitoneal. Diferenciar, en el ML, las clulas que han realizado la fagocitosis.

MATERIALES Y MTODOS
Ratn Mus musculus

Microscopio Torunda de algodn Laminas porta y cubre objetos Mechero Equipo de tincin Gram Jeringa de tuberculina Solucin de Stafilococcus Equipo de diseccin

Procedimiento:
1. Etapa inicial: a. Preparar una suspensin de Stafilococcus. b. Inocular intraperitonealmente al roedor con 2 ml de Stafilococcus vivo c. Dejar al ratn en reposo. 2. Etapa terminal: a. Sacrificar al roedor mediante la dislocacin cervical. Disectar ventralmente y obtener el exudado intraperitoneal con una torunda de algodn. b. Usando la torunda, colocar muestra del exudado en lminas portaobjetos. c. Dejar secar las lminas. d. Colorear con Gram. e. Observar en el microscopio a inmersin.

RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. http://es.wikipedia.org/wiki/Lisosoma

ANEXOS