PRCTICA N1: OBJETIVO:

SEPARACIN DE PIGMENTOS EN MEDIO LQUIDO.

Extraer y separar distintos pigmentos vegetales. MATERIALES: - Tubos de ensayo - Pipeta - Gradilla - Erlenmeyer de 200ml - Embudo - Embudo de decantacin - Mechero - Alcohol etlico - ter - Solucin concentrada de hidrxido potsico en alcohol metlico. FUNDAMENTO TERICO: Clorofila Las clorofilas son una familia de pigmentos que se encuentran en las cianobacterias y en todos aquellos organismos que contienen plastos en sus clulas, lo que incluye a las plantas y a los diversos grupos de protistas que son llamados algas. El principal papel de las clorofilas en la fotosntesis es la absorcin de fotones de luz con la consiguiente excitacin de un electrn. Fuera de las plantas verdes, que son de este color, las clorofilas van acompaadas de grandes cantidades de pigmentos auxiliares, principalmente carotenoides y ficobilinas, que son de distinto color y dominan el conjunto, tiendo al organismo de colores como el amarillo dorado tpico de los cromfitos, o el rojo prpura de las algas rojas.

PRCTICA N1:

SEPARACIN DE PIGMENTOS EN MEDIO LQUIDO.

Estructura de la clorofila La molcula de clorofila es grande y est formada en su mayor parte por carbono e hidrgeno; ocupa el centro de la molcula un nico tomo de magnesio rodeado por un grupo de tomos que contienen nitrgeno y se llama anillo de porfirinas. La estructura recuerda a la del componente activo de la hemoglobina de la sangre. De este ncleo central parte una larga cadena de tomos de carbono e hidrgeno que une la molcula de clorofila a la membrana interna del cloroplasto, el orgnulo celular donde tiene lugar la fotosntesis. Cuando la molcula de clorofila absorbe un fotn, sus electrones se excitan y saltan a un nivel de energa superior esto inicia en el cloroplasto una compleja serie de reacciones que dan lugar al almacenamiento de energa en forma de enlaces qumicos. Hay varios tipos de clorofilas que se diferencian en detalles de su estructura molecular y que absorben longitudes de onda luminosas algo distintas. Adems de las clorofilas a y b, en el cloroplasto de plantas superiores, hay otro grupo de pigmentos que son los carotenoides y las xantofilas. Existen otros pigmentos, como son las antocianinas, que se encuentran en clulas de vegetales superiores y que determinan, en especial, el color de las flores y algunos matices en hojas y otras estructuras de la planta. Los pigmentos accesorios que incluyen a la clorofila b (tambin c, d, y e en algas y protistas) y los carotenoides, como el beta caroteno y las xantofilas (carotenoide de color amarillo), absorben la energa no absorbida por la clorofila. En esta prctica vamos a separar los pigmentos vegetales mediante una extraccin y para esto es importante saber a que nos referimos cuando hablamos de extraccin. La extraccin es la tcnica empleada para separar un producto orgnico de una mezcla de reaccin o para aislado de sus fuentes naturales. Puede definirse como la separacin de un componente de una mezcla por medio de un disolvente. Disolventes orgnicos muy utilizados son: tolueno, ter de petrleo (mezcla de alcanos de bajo peso molecular), cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono, acetato de etilo y butanol. La eleccin del disolvente se realiza en cada caso teniendo en cuenta la solubilidad en el mismo de la sustancia a extraer y la facilidad con que puede separarse sta del disolvente.

PRCTICA N1: TCNICA

SEPARACIN DE PIGMENTOS EN MEDIO LQUIDO.

1. En un Erlenmeyer de 200ml. colocar trozos de hoja que hayan sido expuestos a

la luz.
2. Aadir alcohol etlico y calentar suavemente sin que llegue a hervir. Los

pigmentos vegetales se disuelven en alcohol de forma que las hojas quedan blancas.
3. Pasar la disolucin a un tubo de ensayo. Esta solucin de alcohol contiene:

clorofila a, clorofila b, caroteno y xantofila. La clorofila a es de color verde azulado, la clorofila b es de color verde oliva, el caroteno de color naranja y la xantofila de color amarillo.
4. Verter 5ml de esta solucin en 10ml. de ter y agitar. 5. Tomar 5ml. de esta nueva solucin y aadir 2,5ml. de una solucin concentrada

de hidrxido potsico en alcohol metlico.

6. Aadir agua de 1 en 1ml., agitando fuertemente hasta un total de 7ml. 7. Agitar

dejar

en

reposo

durante

15

minutos.

Aparecern dos capas: la superior contiene el caroteno y la xantofila, y la inferior contiene las dos clorofilas.
8. Llevamos el conjunto a un embudo de decantacin y una vez sealizadas las

dos fases, obtenemos la inferior en un tubo de ensayo.

9. Con esta fase, que contiene las dos clorofilas, aadimos una cantidad similar de

alcohol metlico. ste disuelve a la clorofila b, quedando un color verde puro. La capa inferior, etrea contiene la clorofila a y es de un color verde azulado. Esta separacin tarda cierto tiempo en aparecer.
10. A la fase superior que resta en el embudo de decantacin, una vez recogida en

un tubo de ensayo, le aadimos ter en exceso y alcohol metlico.

11. Agitar fuertemente y dejar en reposo, se separan dos capas la superior

alcohlica contiene xantofila y la inferior etrea contiene caroteno. CONCLUSIONES: A travs de esta prctica pudimos comprobar la existencia de diferentes pigmentos que existen y que poseen diferentes propiedades qumicas.

PRCTICA N1:

SEPARACIN DE PIGMENTOS EN MEDIO LQUIDO.