Cromatografia

Prof Ms Helineide C Campos Brum

Definio:
Cromatografia mtodo fsico-qumico de separao dos componentes da mistura distribuindo-os em 2 fases:
Fase estacionria Fase mvel

Na passagem da fase mvel sobre a fase estacionria os componentes se distribuem nestas fases e so seletivamente retidos na fase estacionria com migraes diferentes

Classificao:
Critrios a serem considerados: Tcnica empregada; Mecanismo de separao; Tipos de fases usadas.

Forma fsica define a tcnica geral: Cromatografia em coluna

Fase estacionria colocada em tubo cilindrico

Cromatografia planar
Fase estacionria disposta em superfcie plana

Considerando o estado fsico da fase mvel:

Cromatografia gasosa:
Fase mvel um gs

Cromatografia lquida:
Fase mvel um lquido

Cromatografia super crtica:

Fase mvel usa vapor pressurizado em temperatura crtica

Cromatografia lquida
Cromatografia lquida clssica
Em coluna de vidro Presso atmosfrica Fluxo deve-se fora da gravidade

Cromatografia lquida eficincia (CLAE)

Coluna metlica Presso elevada da fase mvel Elevada eficincia

de

alta

Classificao por mecanismos de separao:

Processos fsicos: Adsoro; absoro Processos qumicos: troca inica; bioafinidade Processos mecnico: cromatografia por excluso Adsoro: slica ou alumina como fase estacionria, adsoro do soluto ocorre na interfase pela presena de grupos ativos na superfcie (CCD, CGS e CLS) Absoro: fase estacionria lquida espalhada na superfcie do suporte slido, baseia-se na solubilidade (CP, CGL, CLL)

Cromatografia em papel
Separao e identificao compostos polares (antibiticos, c orgnicos, ons metlicos)

Pequena qntd de amostra, boa resoluo Separao relaciona-se com diferena de solubilidade dos componentes da fase mvel e fase estacionria

Cromatografia em camada delgada

Separa os componentes da mistura atravs da migrao diferencial sobre uma camada delgada de absorvente retido numa superfcie plana. Absorventes: alumina, poliamida slica, celulose,

Cromatografia gasosa
Permite separar volatilizveis gases ou substncias

Fase estacionria: slida ou lquida Fase mvel: gasosa

Vantagens e desvantagens
Vantagens: Poder de resoluo; Anlise de vrias substncias na mesma amostra; Quantificao de picograma a miligrama Desvantagens: Substncias no voltil ou termoinstvel Preparo da amostra longo e complexo Tcnicas auxiliares para identificao

Processo da CG

CG
Na CG utiliza-se a eluio. Temperatura melhora a separao e diminue o tempo de anlise Comea com temperaturas aumenta durante a anlise menores e

Classificaao da CG:
Cromatografia gs-slido
Fase estacionria slido, grande rea superficial Separao mecanismos de adsoro Anlise de gases e compostos apolares de baixa massa molecular

Cromatografia gs-lquido
Fase estacionria lquido pouco voltil Separao mecanismos de partio 95% das aplicaes.

Cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE / HPLC)

Utiliza pequenas colunas recheadas e uma fase mvel eluda sob altas presses; Separao e anlise quantitativa rapidamente; Alta resoluo, eficincia e sensibilidade Separao de espcies inicas ou macromolculas de interesse biolgico, produtos naturais lbeis, compostos com alta massa molecular e baixa estabilidade trmica.

CLAE
Vantagens:
Menor tempo de anlise Alta resoluo Resultados quantitativos Boa sensibilidade Versatilidade Automatizao

Desvantagens:
Alto custo instrumento Alto custo operao Difcil anlise qualitativa Falta detector universal sensvel Experincia no manuseio

Anlise quali e quanti dos componentes (comp) aps fabricao

Aplicao:

Nveis de permanncia de anticonvulsivantes no soro Anlise de vitaminas Inseticidas

Cromatgrafo lquido - CLAE

Introduao da amostra