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Revista Digital del Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias de Venezuela

CENIAP HOY No 4 enero-abril 2004

TODO LO QUE SE DEBE SABER SOBRE BRUCELOSIS EN BOVINOS


Nelly Candelo de Arriojas

Coordinadora de Investigacin Regional CENIAP-INIA, Maracay ncandelo@inia.gov.ve


Introduccin La brucelosis es una zoonosis de importancia mundial. En humanos es tambin llamada Melitococcia, fiebre ondulante, fiebre de Malta, fiebre del Mediterrneo. En animales, aborto infeccioso, aborto contagioso, aborto epizotico y enfermedad de Bang en los bovinos. Afecta principalmente a los animales domsticos, as como tambin a los animales silvestres. Recientemente se han aislado diferentes cepas en delfines y focas (mamferos marinos). Siete especies han sido reconocidas: Brucella melitensis, B. abortus, B. suis, B. ovis, B. canis, B. Neotom y B. maris. Pueden ser diferenciadas por los requerimientos de CO2 , produccin de H2S, susceptibilidad a fagos, antgenos de superficie y sensibilidad a colorantes. En 1887 David Bruce asla formas de micrococos en tejidos de bazos de soldados muertos en la Isla de Malta, y al cual se le llam Enfermedad de Malta. De acuerdo con Hughes, en 1897, esta enfermedad haba sido descrita por Hipcrates (AC 460). En 1897, el veterinario Bernard Laurits Fredrik Bang (Dinamarca) identifica un bacilo intracelular que causa aborto en bovinos y que denomin Bacilus abortus, la infeccin fue llamada Enfermedad de Bang. Caractersticas culturales y qumicas El gnero Brucella es definido en relacin con su composicin del cido desoxiribonucleico (ADN) y sus propiedades morfolgicas, culturales y bioqumicas. Es una bacteria facultativa, intracelular, capaz de sobrevivir y multiplicarse en las clulas del sistema retculo-endotelial, no mvil, no esporulada, no encapsuladas, variables en su forma, desde bacilos muy cortos hasta cocos o cocobacilos, con una longitud de 0.5 a 0.7 micras de ancho por 0.5 a 1.5 micras de longitud. Pueden presentarse solas, en parejas, agrupadas o en cadenas cortas. Son Gram Negativos, se tien de rojo sobre fondo azul por el mtodo de coloracin Ziehl Neelsen modificado y de color rojo anaranjado sobre fondo rosado por el mtodo de Koster modificado. Son aerobios estrictos, aunque algunos biotipos pueden ser microaeroflico, precisando una tensin de 10% de CO2 Las caractersticas morfolgicas y culturales no son suficientes para diferenciar las especies o sus biotipos, como tampoco al husped de donde se aslan. Inmunidad En el caso de la B. abortus fcilmente escapa de los efectos bactericida de los anticuerpos y complemento en el plasma. La inmunidad protectiva depende principalmente de la respuesta mediadas por clulas, en la cual la actividad bactericida de los macrfagos est aumentada por la activacin de las linfoquininas, originadas por los linfocitos T. Los anticuerpos tienen efectos de opsonizacin, ayudando a la muerte de las bacterias intracelulares, pero sigue siendo una inmunidad pobre. Se ha demostrado que el germen se multiplica ms lentamente en los macrfagos de terneros vacunados que en los no vacunados. Luego de una infeccin, las inmunoglobulinas IgM son las primeras en aparecer en el suero y su mximo alcanza cerca de las dos semanas. La inmunoglobulina IgG aparece enseguida pero no excede a la IgM, para tener el mximo nivel de 4 a6 semanas, para luego persistir por cierto tiempo.

En animales vacunados, las inmunoglobulinas IgM tambin son las primeras en aparecer en el suero, y alcanzan su mximo a los quince das para luego desaparecer al mes. Las inmunoglobulinas IgG aparecen un poco ms tarde y desaparecen a los seis meses en promedio. Aunque no ha sido posible dilucidar exactamente cuales son los mecanismos que llevan a la inmunidad adquirida frente a la brucelosis bovina, los animales infectados con cepas de campo desarrollan un cierto nivel de inmunidad, pero sta no es capaz de eliminar la infeccin. Por lo general, los animales permanecen infectados por vida. Aparentemente la inmunidad adquirida a travs de la infeccin s es capaz de evitar abortos posteriores al primer o segundo aborto. Los anticuerpos, incluyendo aquellos contra el antgeno O, que se desarrollan despus de la infeccin o de la vacunacin con cepa 19, no son capaces de proteger a los bovinos contra la infeccin. La inmunidad que protege contra la infeccin es la inmunidad celular y no est relacionada a los niveles de anticuerpos. Esta inmunidad se puede producir con vacunas y se basa en el desarrollo de los linfocitos T que reaccionan especficamente con los antgenos de Brucella, produciendo interfern gamma e interlleukina-2. Este concepto es importante para entender la capacidad protectora de la nueva vacuna B. abortus cepa RB51. Patogenia Una vez que la brucela penetra en el organismo a travs de la piel o mucosas de inmediato, por medio de los polimorfonucleares invaden los ganglios correspondientes a la zona de entrada El microorganismo sobrevive en el sistema reticuloendotelial, particularmente dentro de los fagocitos. Pueden vivir en las clulas que se derivan del ectodermo o mesodermo pero no son capaces de invadir tejidos del endodermo. Evaden la actividad bactericida de las clulas fagocitarias y se replican dentro de ellas. Son transportadas a los ndulos linfticos donde los macrfagos y fagocitos mueren, producindose liberacin de ms bacterias. En animales donde la infeccin no es controlada, las bacterias se diseminan y se pueden localizar en el hgado y bazo. La enfermedad se manifiesta segn las diferentes especies. En las especies unguladas los microrganismos muestran marcado tropismo por la placenta, debido a la presencia del Eritrol, que aumenta el crecimiento de la bacteria. En humanos, la enfermedad se localiza principalmente en el sistema reticuloendotelial. La infeccin por Brucella abortus ocurre principalmente a travs de las mucosas orales, respiratorias y conjuntivales. La replicacin es en gran parte intracelular y ocurre especficamente dentro de los macrfagos. Desde los ganglios locales la B. abortus se esparce va sangunea a varios rganos como hgado, bazo, ubre y, en el caso de la hembra preada, el tero gestante, produciendo una infeccin en la placenta y en el feto. Las bacterias se replican dentro de sus trofblastos y finalmente producen el aborto. En los toros se ubica en los testculos y glndulas genitales causando inflamacin e infertilidad. En relacin con el contagio de la enfermedad, la brucelosis se transmite por va oral principalmente, razn por la cual los alimentos y aguas contaminadas son el vehculo de contaminacin. Las mucosas conjuntivales, los genitales externos, la va respiratoria y va cutnea son de importancia. Entre las vas de eliminacin de bacterias (brucelas) se tienen:

Cubiertas fetales, lquido amnitico, con gran cantidad de grmenes Excrementos de animales recin nacidos, se excretan durante varias semanas Secreciones vaginales luego del aborto. La leche, va de importancia para la transmisin de la enfermedad. Puede haber secreciones en heces y secreciones nasales en pequeas cantidades.

Las cabras la eliminan frecuentemente a travs de la orina.


Signos clnicos En la brucelosis por B. abortus el signo clnico caracterstico en la vaca es el aborto, que ocurre despus del quinto mes de gestacin. La bacteria produce inflamacin del alantocorin, interfiere con la circulacin hacia el feto y pasa endotoxinas que posteriormente causan la muerte del feto y expulsin. La placenta se observa difusa y gruesa, los cotiledones con reas de necrosis, el feto edematoso y con petequias, contenido estomacal turbio. La infeccin en la ubre es comn e intermitente. Los animales jvenes son bastante resistentes a la B. abortus, pero su susceptibilidad aumenta con el desarrollo sexual y la preez. En toros se produce orquitis con presencia de abscesos, inflamacin del epiddimo y rganos accesorios reproductivos. La orquitis puede ser unilateral o bilateral. Semen proveniente de animales infectados transmite la enfermedad al usarlo en inseminacin artificial; existen razas que son ms susceptibles que otras. Epidemiologa Una hembra infectada es el medio ms importante para la diseminacin de la enfermedad, tanto para el rebao al que pertenece como para otros rebaos donde sea movilizado el animal. La reaccin serolgica positiva en la brucelosis es tarda, puede aparecer hasta algunas semanas despus de la infeccin, por lo que es probable que animales recientemente infectados puedan estar en periodo de incubacin de la enfermedad en el momento de la compra, sin dar reaccin en ese momento, aunque luego resulta reaccionante despus de su introduccin en la finca. Por lo tanto es importante realizar por lo menos dos pruebas consecutivas cada 30 das para animales sanos que van a ingresar al rebao. La enfermedad puede entrar al hato a travs de terneras alimentadas con leche descremadas de fuentes contaminadas. Fetos abortados y envolturas fetales pueden ser movilizadas de una explotacin a otra por medio de perros, zorros, coyotes, como tambin roedores y pjaros, segn algunos autores. Los camiones que no han sido bien lavados y desinfectados son importantes para la diseminacin de la enfermedad, de una finca a otra. El mercado y ferias de exposicin son otros medios de importancia para el contagio de la infeccin. Prevencin Se dispone de vacunas de escasa virulencia con microorganismo vivos como la Cepa 19 de B. abortus, ampliamente usada en todo el mundo como una herramienta efectiva contra la brucelosis en el ganado bovino; desde su prueba en campo con becerros, en 1941. La cepa 19 es eficaz para prevenir la infeccin y los abortos. Sin embargo induce pruebas sanguneas falso positivas en pequeo porcentaje, interfiriendo con la identificacin del ganado infectado con cepas de campo. La vacuna es preparada con organismo atenuados, cuya virulencia es estable. Puede producir abortos cuando es inoculada en altas dosis, pero el porcentaje es bajo, y ha habido evidencia de diseminacin. Si se vacunan hembras sexualmente aptas puede observarse un pequeo porcentaje de animales con infeccin en la glndula mamaria, aunque luego se recobran. Se recomienda el uso de la vacuna va subcutnea utilizando 30 x 109 bacterias vivas en dosis de 2 ml en hembreas de 4 a 8 meses de edad. Los machos no se vacunan ya que sus ttulos persisten por mucho ms tiempo y puede ocurrir infeccin en los testculos. La vacunacin en animales infectados no produce ningn efecto sobre el curso de la enfermedad. Se recomienda usar la vacuna liofilizada el mismo da que se procede a reconstituirla. El desarrollo de la cepa RB51 elimina los problemas de diagnstico, pues es una cepa altamente atenuada, estable y carente del antgeno "O". Al no poseer este antgeno, permite que la vacunacin de los bovinos no induzca anticuerpos correspondientes, por consiguiente los animales vacunados con esta cepa se mantienen serolgicamente negativos, permitiendo una fcil diferenciacin entre los animales infectados y los vacunados.

La RB51, derivada de la B. abortus cepa 2308, es rugosa con tendencia a la autoaglutinacin, por lo que es importante que la vacuna sea agitada repetida y frecuentemente antes de la vacunacin. Diagnstico La brucelosis es una de las enfermedades donde se han implementado ms mtodos para el diagnostico: Pruebas bacteriolgicas El examen bacteriolgico es importante para el diagnstico, ya que el aislamiento de la brucela es conclusivo, sin embargo es lento y complejo para ser aplicado sistemticamente a un programa de erradicacin. Para el aislamiento de la B. abortus debe tomarse muestra de tejido del abomaso del feto, pulmones fetales, placenta. Las bacterias tambin pueden estar presentes en secreciones vaginales, semen y ndulos linfticos especialmente los supramamarios. Pruebas serolgicas El examen serolgico presenta dificultades para el diagnstico de la brucelosis, ya que animales que han sufrido la infeccin pueden permanecer seronegativos por largos perodos. En infecciones crnicas, los animales presentan bajos niveles de anticuerpos; animales vacunados con cepas lisas producen anticuerpos las cuales pueden persistir y ocasionalmente puede haber reaccin cruzada con otros microorganismos. Pruebas de diagnstico para la Brucelosis bovina Prueba Placa Tubo Rosa de Bengala o Card test Mercaptoetanol Rivanol Fijacin de Complemento Prueba de anillo o Ring test Anticuerpos IgM IgM, IgG IgG IgG1 IgG2 IgG IgG1 IgG1 IgA Caractersticas Aglutinacin Aglutinacin Aglutinacin cido interfiere con IgM Aglutinacin Inactivacin IgM Aglutinacin Precipitacin IgM Complejo Ag-Ac no lisis de eritrocitos Presencia anticuerpos Produccin en glndula

Recoleccin y envo de muestras para bacteriologa

La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso y libre de contaminacin. Deben tomarse de 10 a 15 cm de muestra, y colocarlos en envases estriles, a prueba de
filtracin, y por separado, si son de distintos rganos (bazo, hgado, ganglios, membranas fetales)

Las muestras recolectadas deben mantenerse bajo refrigeracin. Al tomar la muestra se debe estar seguro de que no se ha administrado ningn antibitico.

Identificar debidamente la muestra. Enviar la muestra inmediatamente al laboratorio. Utilizar guantes y evitar que el recipiente se contamine por la parte externa, desinfectndola si
se ensucia.

Eliminar adecuadamente el material del cual se tom la muestra, incinerndolo. Recolectar la sangre sin anticoagulante (15 a 20 ml), previa desinfeccin de la la zona. Los abscesos deben tomarse completos o aspirarlos con jeringa, no usar hisopados. Las muestras de leche deben recolectarse de todos los pezones, ya que las brucelas se pueden
localizar en uno o varios de ellos. Recoger primero las muestra de leche de los pezones ms prximos al operador y luego los pezones ms alejados.

El chorro de leche no debe tener contacto con las manos del ordeador y descartar el primer
chorro.

Enfriar la leche y enviarla al laboratorio (24-48 horas).


Erradicacin El diseo de un programa y campaa de control y eventual eliminacin de la brucelosis de un predio y de una regin o pas, depende en gran medida de los recursos humanos y econmicos que se pueden poner a disposicin. Los programas deben considerar el uso de cuarentenas para prevenir la transmisin de finca a finca; monitoreo serolgico continuo con eliminacin de los animales positivos (especialmente hembras antes del parto), vacunacin, programa de manejo de rebaos individuales para disminuir el contacto entre animales susceptibles e infectados, educacin y entrenamiento a todos los individuos participantes en la campaa, para fomentar el entendimiento del problema. El uso de vacunas solamente no es suficiente para la erradicacin de la enfermedad, ya que el efecto de la vacuna es disminuir la susceptibilidad de los animales a la infeccin y no protege a todos los animales del rebao con la misma efectividad. Por lo general, en reas de baja incidencia, las vacunas son ms efectivas en controlar la incidencia. Sin embargo, lo ms recomendable es la vigilancia continua y la implantacin de medidas preventivas que eviten la entrada del patgeno al rebao.

Referencia de este artculo: Candelo de Arriojas, Nelly. 2004. TODO LO QUE SE DEBE SABER SOBRE BRUCELOSIS EN BOVINOS. CENIAP HOY no. 4, enero-abril 2004. Maracay, Aragua, Venezuela. URL: http://www.ceniap.gov.ve/ceniaphoy/articulos/n4/texto/ncandelo.htm

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