I. LA CLULA Y LA BASE FISICO-QUIMICA DE LA VIDA 1. BASE FSICO-QUMICA.

1.1 Composicin de los seres vivos: bioelementos y biomolculas. La materia constituyente de los seres vivos est compuesta por molculas, tambin denominadas biomolculas, formadas a su vez por la unin de tomos de ciertos elementos qumicos. Estos elementos presentes en las biomolculas reciben el nombre de bioelementos o elementos biognicos, de los que existen unos 70 diferentes. Todos los bioelementos estn incluidos en la tabla peridica, es decir, no hay elementos especiales o distintos a los que se encuentran en las molculas que conforman la materia general del universo. No son, por tanto, elementos qumicos exclusivos de los seres vivos. Sin embargo, los bioelementos mayoritarios no coinciden (salvo el oxgeno) con los elementos qumicos ms abundantes en la corteza terrestre. As, mientras que el O, el Si, el Al y el Fe son los elementos ms comunes en la composicin del planeta, los bioelementos que se encuentran en mayor proporcin en las molculas biolgicas son el C, el H, el O, el N, el P y el S. La razn por la que el carbono, el hidrgeno, el oxgeno, el nitrgeno, el fsforo y el azufre componen los bioelementos mayoritarios de las molculas biolgicas reside, precisamente, en las propiedades que presentan: 1. Los seis elementos tienen capas electrnicas externas incompletas. De este modo pueden formar enlaces covalentes fcilmente y dar lugar a las biomolculas que constituirn las estructuras biolgicas y llevarn a cabo las funciones vitales. 2. Poseen un nmero atmico bajo, por lo que los electrones compartidos en la formacin de los enlaces se hallan prximos al ncleo y las molculas originadas son estables. 3. Dado que el oxgeno y el nitrgeno son elementos electronegativos, muchas biomolculas son polares y por ello solubles en agua, requisito imprescindible para que tengan lugar las reacciones biolgicas fundamentales de la actividad vital. 4. Por ltimo, los bioelementos mayoritarios pueden incorporarse fcilmente a los seres vivos desde el medio externo, ya que se encuentran en molculas (CO2, H2O, nitratos) que pueden ser captadas de manera sencilla. Este hecho asegura el intercambio constante de materia entre los organismos vivos y su medio ambiente. Entre los bioelementos, el carbono desempea un papel fundamental. Tiene cuatro orbitales con electrones desapareados que se disponen en una estructura tetradrica. La existencia de los electrones desapareados hace posible la formacin de enlaces covalentes con otros tomos de carbono, lo que origina cadenas estables cuya morfologa y tamao variables les permiten adquirir, a su vez, estructuras espaciales complejas. Estas molculas, caractersticas de los organismos vivos, son tambin responsables de algunas de sus propiedades ms importantes. Por otra parte, los tomos de carbono pueden formar enlaces covalentes con otros tomos distintos, dando lugar a grupos funcionales que, al interaccionar entre s, constituyen la base qumica de la actividad vital.

A) Clasificacin de los Bioelementos Se han descrito 70 bioelementos, 25 de los cuales estn presentes en todos los seres vivos y el resto slo aparece en determinados grupos. Segn la proporcin en que se encuentran en la materia viva se clasifican en: - Bioelementos primarios o mayoritarios. Se trata de un grupo formado por los seis bioelementos antes mencionados (C, H, 0, N, P y S), que constituyen, aproximadamente, el 99 % del total de la materia viva y son los componentes fundamentales de las biomolculas. - Bioelementos secundarios. Forman parte de todos los organismos vivos, aunque en menor proporcin que los anteriores. Se incluyen en este grupo el Na, el K, el Ca, el Mg y el Cl. - Oligoelementos. Aunque se encuentran en proporciones inferiores al 0,1 %, estos elementos son imprescindibles, pues desempean funciones esenciales en diferentes procesos bioqumicos y fisiolgicos. Algunos oligoelementos, como el Fe, el Cu, el Zn, el Mn, el I, el Ni y el Co, aparecen en la mayora de los organismos y otros, como el Si, el F, el Cr, el Li, el B, el Mo y el Al, slo estn presentes en grupos concretos. B) Biomolculas Los elementos biognicos se unen por enlaces qumicos para formar las molculas constituyentes de los organismos vivos, que reciben el nombre de biomolculas o principios inmediatos. Mediante diferentes tcnicas de anlisis basadas en mtodos fsicos, como la filtracin, la destilacin, la centrifugacin y la decantacin, es posible separar las biomolculas de un ser vivo sin que sufran alteracin alguna. A pesar de la enorme variedad de biomolculas (se calcula que una clula animal o vegetal contiene ms de 10000 molculas distintas), casi todas pueden incluirse en dos grandes grupos: biomolculas inorgnicas (comunes a los seres vivos e inertes, en las que el enlace inico juega un importante papel) como el agua y algunas sales minerales, y biomolculas orgnicas(exclusivas de los seres vivos, caracterizadas por el enlace covalente) que son los glcidos, lpidos, prtidos y cidos nucleicos. 1. 2. El agua. El agua es un componente muy importante de los seres vivos, ya que es la molcula que se encuentra en mayor proporcin en todos los organismos (supone, aproximadamente, entre el 50 y el 95 % de su peso). La cantidad de agua presente en los seres vivos depende de tres factores: la especie de que se trate, la edad del individuo y el tipo de tejido u rgano. - Especie. Los organismos acuticos contienen un porcentaje muy elevado de agua, que puede alcanzar el 99 % de su peso, mientras que los valores ms bajos corresponden a especies adaptadas a vivir en condiciones de desecacin o en zonas desrticas. - Edad del individuo. Las estructuras biolgicas de los organismos jvenes presentan una proporcin de agua mayor que las de los individuos de ms edad. - Tipo de tejido u rgano. Dado que las reacciones biolgicas se llevan a cabo en un medio acuoso, los tejidos con una gran actividad bioqumica contienen una proporcin de agua mayor que los ms pasivos. En cambio, las estructuras esquelticas animales, que constituyen los rganos de sostn del individuo, poseen los porcentajes de agua ms bajos. 1.2.1 y 1.2.2. Estructura y propiedades del agua La molcula de agua consta de un tomo de oxgeno y dos de hidrgeno. La unin entre el oxgeno y los hidrgenos se realiza mediante enlaces covalentes, en los que cada tomo de hidrgeno de una molcula comparte
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un par de electrones con el tomo de oxgeno. Sin embargo, como la electronegatividad del oxgeno es mayor que la del hidrgeno, los pares de electrones compartidos se ven atrados con ms fuerza por el ncleo del oxgeno que por el del hidrgeno. Por otra parte, el oxgeno posee cuatro electrones ms sin compartir, lo que tiene dos consecuencias: La geometra triangular que posee la molcula de agua, de manera que los tomos de hidrgeno forman respecto al oxgeno un ngulo de 104,5. La presencia de una carga negativa dbil en la zona donde se sitan los electrones no compartidos. Este ltimo hecho, unido a la menor electronegatividad de los tomos de hidrgeno, crea una asimetra elctrica en la molcula de agua que provoca la aparicin de cargas elctricas parciales opuestas (representadas por el smbolo ), de manera que la zona de los electrones no compartidos del oxgeno es negativa y la zona donde se sitan los hidrgenos es positiva. Por esta razn, y a pesar de ser elctricamente neutra pues no presenta carga elctrica neta, la molcula de agua tiene carcter dipolar.

Esta polaridad favorece la interaccin entre las molculas de agua, de forma que la zona con carga elctrica parcial negativa de una de ellas es atrada por la zona con carga parcial positiva de otra, establecindose entre ambas un tipo de enlace denominado enlace o puente de hidrgeno, que convierte al agua en una sustancia altamente cohesiva, ya que cada molcula de agua puede establecer cuatro puentes de hidrgeno con otras tantas molculas.

Tambin se pueden formar puentes de hidrgeno entre el agua y otras molculas polares distintas (alcoholes, aminas, etc.). Los enlaces por puentes de hidrgeno son mucho ms dbiles que los enlaces covalentes o los inicos. As mismo, el tiempo de vida de los puentes de hidrgeno es muy breve (en promedio, cada uno dura 1/1011 segundos). Sin embargo, los puentes de hidrgeno se rompen y se forman nuevamente de manera constante, lo que mantiene las interacciones y permite que las molculas de agua se unan con una fuerza considerable. 1.2.2 y 1.2.3. Propiedades y funciones del agua El agua posee unas propiedades caractersticas, derivadas de su estructura, que le confieren una importancia extraordinaria para la existencia y el desarrollo de la vida en nuestro planeta. A) Derivadas del carcter dipolar Debido a la polaridad de su molcula, el agua se puede interponer entre los iones de las redes cristalinas de los compuestos inicos, lo que origina una disminucin importante de la atraccin entre ellos y provoca su separacin y, en definitiva, su disolucin. Tambin puede formar puentes de hidrgeno con otras molculas no inicas, pero que tienen grupos polares (como muchas de las biomolculas), y causar as mismo su disolucin. Dado que las molculas deben encontrarse disueltas en un medio lquido para reaccionar entre s, el agua desempea un papel fundamental como medio donde tienen lugar las reacciones bioqumicas caractersticas de la actividad vital. Algunas biomolculas (lpidos y ciertas protenas), como se ver ms adelante, son insolubles en agua. Esto les permite llevar a cabo funciones caractersticas, como, por ejemplo, constituir estructuras celulares slidas. B) Propiedades derivadas de la existencia de los enlaces por puentes de hidrogeno Los enlaces por puentes de hidrgeno proporcionan a las molculas de agua otras caractersticas muy interesantes: - Estado lquido del agua a temperatura ambiente. La elevada fuerza de cohesin entre sus molculas permite que el agua se mantenga lquida a temperaturas no extremas. Gracias a esta propiedad, el agua acta como vehculo de transporte en el interior de un organismo vivo y como medio lubricante en las estructuras de movimiento. - Lquido prcticamente incompresible. Debido tambin al elevado grado de cohesin entre sus molculas, el volumen del agua lquida, como el de la mayora de los lquidos, no disminuye apreciablemente aunque se apliquen presiones muy altas. Esta propiedad controla las deformaciones citoplasmticas y permite que el agua acte como esqueleto hidrosttico en las clulas vegetales. - Capilaridad. Como ya se ha dicho, la unin entre las molculas de agua por los puentes de hidrgeno les confiere un grado de cohesin muy alto, que, combinado con la adhesin a la superficie de otras estructuras (debida a su polaridad), permite que el agua pueda ascender a lo largo de conductos estrechos. Esta propiedad resulta fundamental para el ascenso de la savia bruta por los tubos del xilema en los vegetales. - Elevada tensin superficial. En el interior de una masa de agua, las molculas se cohesionan con otras mediante los puentes de hidrgeno, en todas las direcciones del espacio, por lo que las fuerzas se compensan. Sin embargo, las molculas de agua situadas en la superficie nicamente estn sometidas a la accin de las molculas de agua del interior del lquido al no existir fuerzas de cohesin con las molculas del aire. Esta propiedad es la causa de la mayora de las deformaciones celulares y de los movimientos citoplasmticos.
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- Elevado calor especfico. El movimiento de las molculas de agua est limitado por la unin entre ellas. Por esta razn, cuando se aplica calor al agua, parte de la energa comunicada se emplea en romper los puentes de hidrgeno y no en elevar la temperatura (que es una medida de la energa cintica de las molculas). Lo cual hace posible que los organismos acuticos puedan (vivir en un ambiente con pocas fluctuaciones trmicas. La temperatura corporal debe mantenerse estable entre ciertos lmites para evitar la alteracin de muchas biomolculas y para que las reacciones biolgicas se realicen correctamente. - Elevado calor de vaporizacin. Para pasar del estado lquido al gaseoso es necesario que los puentes de hidrgeno se rompan, lo cual requiere un aporte considerable de energa. Esta energa se toma del entorno, lo que hace que la temperatura de ste disminuya. La extensin de una pelcula de agua sobre una superficie biolgica provoca su refrigeracin, ya que al evaporarse tomando energa trmica del medio provoca el enfriamiento del conjunto. - Menor densidad del hielo que del agua lquida. Cuando un lquido cualquiera se congela, aumenta su densidad, pues el grado de empaquetamiento molecular es mayor. Sin embargo, cuando la temperatura del agua desciende por debajo de 4C, sus molculas se acercan tanto que cada una de ellas puede formar enlaces mediante puentes de hidrgeno con otras cuatro molculas, y cuando la temperatura alcanza 0 C, se forma un retculo espacial estable que ocupa ms volumen que el agua lquida, por lo que el hielo es menos denso y flota en ella. Este hecho tiene una importante consecuencia biolgica: cuando se produce un enfriamiento del agua de los mares y ros, la superficie se congela pero el fondo permanece lquido porque la capa de hielo superficial acta como aislante trmico, lo cual permite la supervivencia de los organismos acuticos durante el invierno. C) Ionizacin del agua Algunas molculas de agua sufren un proceso de ionizacin cuando un tomo de hidrgeno de una de ellas se une, mediante un enlace covalente, al tomo de oxgeno de otra molcula a la que estaba unida por un puente de hidrgeno. Se obtienen as dos iones, H30+ y HO-, con carga opuesta, en igual concentracin (los iones H30+ suelen representarse simplemente como H+). La concentracin de molculas ionizadas en el agua pura es muy baja: a 25C es de 10-14 mol/L y, por tanto, [H+] = [HO-] = 10-7. Sin embargo, cuando se disuelve un cido en agua, la [H+] aumenta, y si es una base, disminuye. Por consiguiente, en una disolucin acuosa de un cido existirn ms H+ que OH-, mientras que en la disolucin de una base se producir el efecto contrario. Para expresar el grado de acidez de una disolucin se utiliza el trmino pH, que se define como el logaritmo del inverso de la [H+]. pH = log 1/[H+] = - log [H+] As, por ejemplo, el pH de una disolucin cuya [H+] es de 10-5 ser 5. La utilizacin de trminos pH permite simplificar el manejo de los valores) exponenciales y bajos de la [H+]. Los valores de pH pueden oscilar entre 0 y 14, rango en el que un valor de pH 7 corresponde a disoluciones neutras; los valores inferiores a ste, a disoluciones cidas; y los valores superiores, a disoluciones bsicas. El agua y sus productos de ionizacin participan en una serie de reacciones biolgicas importantes, entre las que destacan las denominadas reacciones de hidrlisis (una molcula de agua lleva a cabo la rotura de una molcula orgnica). La hidrlisis es el procedimiento empleado para obtener las molculas constituyentes de otra molcula mayor, como sucede, por ejemplo, 5

durante los procesos digestivos y en otros procesos metablicos. El proceso inverso a la hidrlisis se denomina condensacin (molculas sencillas se unen para obtener otras mayores), el cual origina molculas de agua que se denominan agua metablica. 1.2.4. Disoluciones acuosas: sales minerales. Los organismos vivos estn formados tambin por sales minerales, compuestos inorgnicos que pueden ser solubles o insolubles en agua. En este ltimo caso, las sales se encuentran precipitadas y constituyen estructuras slidas en los seres vivientes, como esqueletos, caparazones o depsitos diversos. Lo ms usual, sin embargo, es que las sales minerales aparezcan disueltas y disociadas en sus iones componentes, aniones y cationes. Entre los aniones y cationes ms frecuentes figuran los siguientes: Aniones Cationes ClNa CO3 K+ HCO3 Ca2+ PO4 Mg2+ SO4 Fe2+ Fe3+

Algunos cationes pueden aparecer tambin asociados a determinadas molculas orgnicas (protenas), como el in ferroso, que interviene en el transporte del oxgeno asociado a la hemoglobina.

Funciones de minerales Las sales minerales desempean diversas funciones en los seres vivos: - Constitucin de estructuras de sostn y proteccin duras. Los huesos, las conchas, los caparazones y las espculas de algunos organismos estn formados por sales precipitadas, como fosfatos, carbonato clcico e incluso slice. Algunas inclusiones citoplasmticas o los depsitos de algunas paredes celulares en rganos vegetales, como ciertas semillas y frutos, tambin estn compuestos por sales minerales. - Funciones fisiolgica y bioqumica. Muchos procesos biolgicos slo se pueden realizar con la intervencin de determinados iones. - Mantenimiento de concentraciones osmticas adecuadas. Todos los medios lquidos biolgicos (sangre, plasma intersticial, lquido cefalorraqudeo, etc.) constituyen disoluciones de sales en agua de cuyo grado de concentracin depende la estabilidad celular y la realizacin de algunas funciones fundamentales. Los procesos biolgicos dependientes de la concentracin de soluto (molculas e iones) en agua se denominan osmticos y tienen lugar cuando
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existen dos disoluciones de diferente concentracin separadas por una membrana semipermeable que no deja pasar el so luto pero s el disolvente. Se observa, entonces, el paso del disolvente (agua en los medios celulares) desde la disolucin ms diluida (hipotnica o hipoosmtica) hacia la ms concentrada (hipertnica o hiperosmtica) a travs de la membrana.

Cuando el agua pasa a la disolucin hipertnica, sta se diluye, mientras que la disolucin hipotnica se concentra al perderla. El proceso contina hasta que ambas disoluciones igualan su concentracin, es decir, se hacen isotnicas o isoosmticas. Para evitar el paso de agua sera necesario aplicar una presin, denominada presin osmtica, tanto ms intensa cuanto mayor fuera la diferencia de concentracin entre ambas disoluciones. Como la membrana plasmtica es semipermeable, es necesario mantener una concentracin salina dentro de la clula igual a la del medio externo para que sta no tenga prdida ni ganancia neta de agua. Si la concentracin del medio intracelular es mayor que la del medio externo, la entrada excesiva de agua producir un hinchamiento, conocido como turgencia celular, que puede provocar la rotura de la membrana y la muerte de la clula. Si, por el contrario, la concentracin en el medio interno es menor que en el medio externo, la clula pierde agua y disminuye su volumen, proceso que recibe el nombre de plasmlisis y puede ocasionar tambin la muerte celular. Las clulas poseen sistemas de regulacin para evitar problemas osmticos cuando el medio externo es hipotnico o hipertnico en relacin con el medio intracelular. - Mantenimiento del pH en estructuras y medios biolgicos. Algunos aniones (P ej HCO-3, PO43-) pueden absorber o ceder H + ,y participan en los sistemas amortiguadores que permiten mantener constante el pH ante ligeras variaciones en la concentracin de H+ del medio interno. Se denominan sistemas tampn. H2PO4H2C03
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HPO4 2- + H+ HCO3 - + H+

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1.3. Glcidos. Concepto y clasificacin. Los glcidos son molculas orgnicas que contienen tomos de C, H y O. A menudo se denominan azcares, ya que muchos de ellos tienen sabor dulce, y tambin reciben el nombre de hidratos de carbono. Se trata, fundamentalmente, de molculas energticas, es decir, son utilizadas por los seres vivos como material para obtener energa, aunque tambin existen otros glcidos no energticos que cumplen diversas funciones. Se puede realizar una clasificacin de los glcidos atendiendo a los siguientes criterios: - Segn el tipo de grupo funcional que poseen, se dividen en: Aldosas: el grupo carbonilo es un aldehdo. Cetosas: llevan un grupo cetona.

Segn su complejidad, se diferencian en:

Monosacridos u osas. Son aldehdos o cetonas con dos o ms grupos hidroxilo (-OH). Comprenden los glcidos ms simples y no pueden ser hidrolizados. sidos. Son molculas ms grandes, formadas por la unin de varios monosacridos. Pueden llevar a cabo reacciones de hidrlisis que liberan los monosacridos componentes. Segn el nmero de monosacridos que presentan se clasifican en: Oligosacridos: compuestos por la unin de dos a nueve monosacridos. Polisacridos: compuestos por un nmero elevado de monosacridos. 1.3.2. Monosacridos: estructura y funciones. A) Propiedades de los monosacridos Todos los monosacridos son slidos cristalinos e incoloros, perfectamente solubles en agua, y tienen sabor dulce. La presencia del grupo carbonilo les confiere, adems, propiedades reductoras que, como se ver ms adelante, se utilizan para identificados. Los glcidos, en general, y los monosacridos, en particular, presentan una propiedad fundamental que se denomina estereoisomera. La estereoisomera consiste en la existencia de molculas con la misma frmula plana pero distinta estructura espacial. Esto sucede siempre que hay algn tomo de carbono asimtrico, es decir, un carbono que est unido a cuatro grupos distintos. Estos carbonos asimtricos son frecuentes en los glcidos y se identifican en la molcula con un asterisco (*).

Las disoluciones de estereoismeros son capaces de desviar el plano de polarizacin a la derecha (ismero dextrgiro) o a la izquierda (ismero levgiro). En el primer caso se simboliza con el signo (+), y en el segundo, con el signo (-). Para nombrar los estereoismeros de los monosacridos se ha establecido el siguiente convenio: si al escribir la frmula plana, segn la proyeccin de Fischer, el grupo -OH del carbono asimtrico queda a la derecha y el grupo H a la izquierda, el estereoismero se denomina D. Si, por el contrario, el grupo -OH queda a la izquierda, el estereoismero se llama L No existe relacin entre la actividad ptica, dextrgira o levgira, y el carcter D o L de un determinado estereoismero. Dentro de los estereoismeros se pueden diferenciar aquellos que son imgenes especulares (figura 3.3.) entre s (denominados enantiomorfos o enantimeros) y aquellos que no lo son (llamados epmeros). Los enantiomorfos conservan el mismo nombre aadiendo la indicacin D o L, mientras que los epmeros reciben distintos nombres.

B) Clasificacin de los monosacridos Los monosacridos se clasifican segn el nmero de tomos de carbono que contengan en triosas (3), tetrosas (4), pentosas (5), hexosas (6), etc. Triosas Contienen tres tomos de carbono. Existen dos triosas, GAP y DHAP. Tetrosas Son monosacridos compuestos por cuatro tomos de carbono Pentosas Presentan cinco tomos de carbono. Algunas pentosas desempean importantes funciones biolgicas, como la D-ribosa (una aldopentosa) que es un componente fundamental de los ribonucletidos que constituyen el ARN. Otra aldopentosa muy semejante, la desoxirribosa (sin grupo -OH en el carbono 2), se encuentra en los desoxirribonucletidos que forman el ADN. Hexosas Tienen seis tomos de carbono en su molcula.
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la glucosa, la molcula energtica ms utilizada por los seres vivos. Se localiza en estado libre en el citoplasma celular, en el plasma sanguneo (en concentraciones constantes) y en algunos frutos, como las uvas o los. dtiles. la galactosa, se encuentra libre en la leche o formando parte de disacridos como la lactosa (presente igualmente en la leche. la fructosa, es una ceto-hexosa que se encuentra en estado libre en frutos y en algunos medios lquidos biolgicos, como el semen, adems de formar parte del disacrido sacarosa.

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C) Estructura de los monosacridos en disolucin Cuando los monosacridos de cinco carbonos o ms estn disueltos se presenta constituyendo molculas cclicas con anillos de cinco o seis tomos. Estas estructuras cclicas se originan al reaccionar el grupo carbonilo con uno de los grupos hidroxilo. Se obtiene as un hemiacetal. Como resultado de la ciclacin, el carbono del grupo carbonilo (llamado ahora anomrico), pasa a ser asimtrico, y, por tanto, se originan dos nuevos estereoismeros, que reciben el nombre de anmeros. Los ciclos pentagonales se denominan furanosas, y los hexagonales, piranosas. Los anmeros se diferencian en la posicin del grupo hidroxilo unido al carbono anomrico. Si en la frmula plana el grupo hidroxilo se representa hacia abajo, el anmero se denomina , y si se representa hacia arriba, el anmero se llama .

1.3.2. Enlace glucosdico. Disacridos y polisacridos. Los disacridos estn formados por la unin de dos monosacridos mediante un enlace O-glucosdico, que libera una molcula de agua. Cuando los dos grupos -OH implicados en el enlace son anomricos, ste se denomina enlace dicarbonlico, mientras que si uno de ellos no es anomrico, el enlace se llama monocarbonlico. En el primer caso, la molcula no posee poder reductor, pues ste deriva de la existencia de -OH anomricos libres. En el segundo caso, el disacrido es reductor, ya que le queda un grupo anomrico libre, como a los monosacridos.

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A) Propiedades de los disacridos Los disacridos presentan las mismas propiedades que los monosacridos: son solubles en agua, cristalizables, incoloros y tienen sabor dulce. Su capacidad reductora, segn se ha dicho, est condicionada por la existencia de un grupo anomrico libre. B) Disacridos ms importantes Sacarosa: (glucosa + fructosa), la sacarosa es el azcar de consumo habitual, tanto de caa como de remolacha. Los monosacridos constituyentes son la glucosa y la fructosa, y no tiene carcter reductor. Lactosa: (glucosa + galactosa), se encuentra libre en la leche y unida a otras molculas constituyendo algunos glucolpidos. Otros disacridos solo aparecen cuando los polisacridos son hidrolizados parcialmente. - Maltosa: (dos glucosas alfa), procede de la hidrlisis del almidn y del glucogeno. Se encuentra en las semillas en germinacin. - Celobiosa: (dos glucosas beta) se obtiene en la hidrlisis del polisacrido celulosa. C) Polisacridos Los polisacridos estn formados por largas cadenas de monosacridos unidos mediante enlaces O-glucosdicos, por lo que son molculas gigantescas o macromolculas. Estas cadenas pueden ser lineales o ramificadas. Propiedades de los polisacridos Al ser macromolculas, los polisacridos no se disuelven fcilmente en agua y pueden ser insolubles u originar dispersiones coloidales. Adems, no son cristalinos ni tienen sabor dulce. Tampoco poseen carcter reductor, ya que no contienen carbonos anomricos con grupos hidroxilo libres. Clasificacin de los polisacridos Segn sus componentes se distinguen dos grupos de polisacridos: los homopolisacridos, cuyos monmeros son iguales, y los heteropolisacridos, que incluyen dos o ms tipos diferentes de monosacridos. C.1. Homopolisacridos Si se trata de anmeros , el polisacrido desempea la funcin de reserva energtica, pues pueden hidrolizarse fcilmente liberando mono y
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disacridos. La existencia de anmeros confiere una gran resistencia a la hidrlisis del polisacrido, por lo que estos polisacridos realizan funciones estructurales. - Polisacridos de reserva Almidn. Se encuentra en los amiloplastos de las clulas vegetales, sobre todo en las semillas, las races y los tallos. Tambin aparece en algunos protoctistas. El almidn se compone en realidad de dos molculas: o Amilosa. Sin ramificar, helicoidal. o Amilopectina. Ramificacin cada doce monmeros. Glucgeno. Constituye el polisacrido de reserva propio de los hongos y de los animales, en los que forma grnulos visibles y abundantes en el hgado y en los msculos estriados. Aparece tambin en algunas bacterias. Estructura semejante a la amilopectina, aunque con ramificaciones ms frecuentes, (cada ocho o diez molculas de glucosa). Dextranos. Son los polisacridos de reserva de las levaduras. - Polisacridos estructurales Celulosa. Es el componente fundamental de las paredes celulares de los tejidos vegetales. Pectina. Es otro componente de la pared de las clulas vegetales. Quitina. Este polisacrido estructural es el componente principal de las cutculas y del esqueleto externo de los artrpodos. C.2. Heteropolisacridos Hemicelulosa. Es uno de los componentes de la matriz de la pared celular de los vegetales. Gomas. Forman parte de algunas secreciones vegetales y se considera que desempean un papel defensivo (por ejemplo, taponar heridas). Muclagos. Todos tienen la propiedad de absorber gran cantidad de agua y se encuentran en los vegetales, las bacterias y las algas. Citar el agaragar (producido por algas rodofceas), y se utiliza en la industria alimentara como espesante en la elaboracin de Sopas, flanes, helados, etc. Tambin se emplea en investigaciones microbiolgicas como base para reparar medios de cultivo slidos. Mucopolisacridos. Suelen asociarse a protenas para formar productos viscosos que actan como sustancias intercelulares y, en ocasiones, lubricantes. Los ms importantes son: o cido hialurnico. En los tejidos conectivos, en el lquido sinovial. o Condroitina. Se localiza en los huesos y los cartlagos. o Heparina. Inhibe la coagulacin de la sangre y se halla en la sustancia intercelular del hgado y los pulmones, y en la pared de las arterias.

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1.4. Lipidos.
1.4.1. Concepto y clasificacin.

Constituyen un grupo muy heterogneo, tanto en lo que se refiere a su composicin qumica como a la funcin que desempean. Siempre presentan C, H y O, este en baja proporcin. No obstante, todos los lpidos comparten una serie de propiedades fsicas: No son solubles en agua y otros disolventes polares, pero s son solubles en disolventes orgnicos, como el benceno, el ter o la acetona. Presentan un aspecto graso, es decir, poseen un brillo caracterstico y son untuosos al tacto. Los lpidos contienen tomos de C, H y 0, y algunos tambin de P y N. Realizan funciones muy variadas. Algunos lpidos son energticos; otros son componentes estructurales fundamentales de todas las membranas celulares o forman cubiertas externas en los vegetales. As mismo, existen lpidos que, aun en pequeas cantidades, poseen una gran actividad biolgica, como es el caso de ciertas hormonas y vitaminas. Todos los lpidos saponificables son steres y, por tanto, su hidrlisis produce un alcohol (glicerina) y un cido carboxlico (graso). La hidrlisis alcalina de un ster recibe el nombre de saponificacin.

La sntesis de estos lpidos mediante la unin del alcohol y el cido, con liberacin de una molcula de agua, se denomina esterificacin. El cido carboxlico siempre pertenece a los denominados cidos grasos. 1.4.2. cidos grasos; estructura y propiedades. Los cidos grasos son cidos carboxlicos formados por largas cadenas carbonadas (a partir de doce carbonos), con un nmero par de carbonos. La cadena de carbonos puede ser saturada (cuando slo tiene enlaces simples) o insaturada (presentan uno o varios enlaces dobles). Cuanto ms larga y saturada es la cadena, mayor es tambin el punto de fusin. Los compuestos totalmente saturados presentan cadenas extendidas que se pueden empaquetar estrechamente estableciendo interacciones de Van der Waals entre los tomos de las cadenas vecinas. Esto hace que a temperatura ambiente los cidos grasos saturados adquieran una consistencia crea. Por el contrario, las cadenas insaturadas muestran angulaciones que no permiten un empaquetamiento tan fuerte como en las saturadas, por lo que las interacciones entre ellas son ms dbiles y ms fciles de desordenar por efecto de la energa trmica. Por esta razn, su punto de fusin es ms bajo y a temperatura ambiente son lquidos oleosos.

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Los cidos grasos poseen una caracterstica muy particular, su carcter anfiptico en la molcula haya una pequea parte soluble (hidrfila), llamada cabeza, y una porcin larga, denominada cola, apolar e insoluble en agua (hidrfoba). Al entrar en contacto con el agua, da lugar a la formacin de estructuras esfricas (micelas) o en empalizada, en este caso tanto en monocapas como en bicapas. Esto ha originado la aparicin de las membranas celulares.

Muchos cidos grasos pueden ser sintetizados por el propio organismo, pero otros no. Estos ltimos se denominan cidos grasos esenciales y deben ser incorporados a la dieta. 1.4.3. Clasificacin. A) Lpidos saponificables A.1. Grasas (triacilglicridos) Son molculas orgnicas abundantes en todos los organismos vivos. Las grasas estn compuestas por tristeres del alcohol glicerina (propanotriol) y tres cidos grasas.

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Las grasas slidas (sebos, mantecas) poseen un punto de fusin superior a 40 C. En las grasas lquidas (aceites), por el contrario, el punto de fusin es inferior a 15 C, y, en las semislidas (mantequillas, margarinas) se encuentra en un punto intermedio. Las grasas son las molculas que generan ms cantidad de energa: un gramo de grasa metabolizada produce 9 kcal, ms del doble de energa que un gramo de glcido (3,75 kcal/g). Las grasas constituyen la reserva energtica de los organismos, sobre todo en los animales. Adems actan como amortiguadores mecnicos en algunos rganos y aislantes trmicos. A. 2. Ceras Monoesteres de un cido graso y un monoalcohol de cadena larga (28-30 carbonos). Funcin de proteccin recubriendo la superficie de rganos vegetales (frutos, tallos), como impermeabilizante de algunas estructuras tegumentarias de los animales (por ejemplo, las plumas de las aves) o en los panales construidos por las abejas. A.3. Fosfoglicridos (fosfolpidos) Son triesteres de glicerina, dos son cidos grasos y el tercero en un cido ortofosfrico. Su unin con un alcohol origina el fosfoglicrido completo. Poseen una cabeza polar de la que sobresale la parte apolar de los cidos grasos. Se caracterizan por su comportamiento anfiptico. De esta propiedad deriva su funcin biolgica. Todas las membranas celulares, estn constituidas por una doble capa fosfolipdica.

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A.4. Esfingolpidos Son componentes de las membranas celulares y abundan en el tejido nervioso. Estn formados por la unin de un alcohol (esfingosina), un cido graso, y una molcula polar (glcido, fosforilcolina). Segn la naturaleza de la molcula polar se distinguen dos clases de esfingolpidos: esfingomielinas y glucoesfingolpidos. Esfingomielinas. Son abundantes en las vainas de mielina. Glucoesfingolpidos. Desempean un papel fundamental como antgenos celulares. P.ej. ganglisidos, cerebrsidos.. B) Lpidos insaponificables B. 1. Terpenos

Son polmeros de la molcula de isopreno (2-metil 1,3-butadieno), por lo que tambin se denominan lpidos isoprenoides. Segn el nmero de isoprenos que componen el terpeno se clasifican en: - Monoterpenos. Contienen dos molculas de isopreno. Este grupo comprende compuestos voltiles responsables de ciertos aromas vegetales (mentol, alcanfor, geraniol...). - Diterpenos. Estn formados por la unin de cuatro isoprenos. El fitol, componente de la clorofila, se incluye en este grupo. - Triterpenos. Constituidos por seis molculas de isopreno. Entre ellos se encuentra el escualeno, un precursor del colesterol. - Tetraterpenos. Formados por la unin de ocho molculas de isopreno. Destacan en este grupo los carotenoides, pigmentos que participan en la fotosntesis absorbiendo energa lumnica de longitudes de onda distintas a las que absorbe la clorofila. Entre los carotenoides ms importantes se encuentran la xantofila (amarilla), el licopeno (rojo) y el -caroteno (anaranjado). Este ltimo se considera tambin un precursor de la vitamina A, ya que la rotura de un enlace central del -caroteno origina dos molculas de esta vitamina. - Politerpenos. Estn formados por la unin de muchos isoprenos. El caucho natural se incluye en este grupo. B. 2. Esteroides Derivado del ciclopentano perhidrofenantreno o esterano.

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La presencia de diferentes sustituyentes en algunas posiciones y la existencia de dobles enlaces en los anillos originan los distintos tipos de esteroides. El colesterol forma parte de las membranas celulares animales y se encuentra tambin unido a protenas en el plasma sanguneo. El colesterol puede originar otros esteroides, entre los que destacan: Algunas hormonas, como las sexuales o los corticoides. (aldosterona, controla el metabolismo de iones; cortisol, controla el metabolismo de glcidos). cidos biliares, que provocan la emulsin de las grasas durante los procesos digestivos de stas. 7-deshidrocolesterol, molcula que se transforma en la vitamina D3, por la accin de la luz ultravioleta. B. 3. Prostagladinas Se forman por ciclacin de cidos grasos poliinsaturados, como el cido araquidnico. Las funciones de las protaglandinas son muy variadas: estimulan la agregacin de las plaquetas, activan las respuestas inflamatorias de los tejidos al iniciar la vasodilatacin de los capilares, provocan la subida de la temperatura corporal y controlan el descenso de la presin arterial al favorecer la eliminacin de sustancias en el rin. Intervienen tambin en la contraccin del msculo uterino y en la produccin de mucus en el estomago, y regulan la secrecin del HCl en ste. Adems, algunas prostaglandinas llevan a cabo la modulacin de ciertas actividades hormonales.

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1.5. Protenas. 1.5.1. Concepto e importancia biolgica.

Las protenas constituyen el grupo de molculas orgnicas ms abundantes en los seres vivos, ya que, por trmino medio, suponen el 50 % del peso celular seco. Su importancia, sin embargo, no radica exclusivamente en su abundancia, sino tambin en las variadas funciones biolgicas que desempean, ya sea en calidad de molculas estructurales o como partcipes en multitud de procesos: transporte de otras molculas, movimiento, regulacin hormonal, etc. Destaca especialmente su accin como catalizadores en las reacciones metablicas, imprescindibles para el mantenimiento de los procesos vitales. Por el contrario, no se suelen emplear para producir energa (salvo que sea necesario debido a la falta de molculas energticas). Una caracterstica fundamental de las protenas es su especificidad, lo cual quiere decir que cada organismo posee algunas protenas exclusivas que marcan su identidad biolgica. Hasta tal punto esto es as que, en el caso de los gemelos univitelinos (individuos que proceden de un nico cigoto y, por consiguiente, presentan los mismos genes), las protenas de ambos son las mismas y las caractersticas biolgicas hereditarias son prcticamente idnticas. Las protenas son polmeros constituidos por la unin de unas molculas llamadas aminocidos. 1.5.2. Aminocidos. Enlace peptidico. Son molculas que poseen, al menos, un grupo amino (-NH2) y un grupo cido carboxlico (-COOH). Los aminocidos que constituyen las protenas son -aminocidos, pues el grupo amino est unido al carbono , el contiguo al grupo carboxlico.

Existen 20 aminocidos distintos de este tipo, que se diferencian por el otro grupo unido al carbono , el llamado grupo R o cadena lateral.En los seres vivos se han encontrado unos 150 aminocidos que no forman parte de las cadenas proteicas, pero que desempean fuciones propias. Entre estos, figuran algunos neurotransmisores, como el cido -aminobutrico; ciertos precursores vitamnicos, como la -alanina. A) Propiedades de los aminocidos Carcter anftero. Puede comportarse como un cido o como una base dependiendo del pH del medio donde se encuentre. Al pH existente habitualmente en los medios biolgicos, ambos grupos suelen estar ionizados y los aminocidos aparecen como iones dobles.
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Estereoisomera. Como el carbono es asimtrico existen dos estereoismeros con distinta actividad ptica. El grupo amino se sita a la derecha para representar el estereoismero D y a la izquierda para representar el estereoismero L. Todos los aminocidos proteicos son ismeros L, aunque es posible encontrar D-aminocidos en determinados compuestos biolgicos, como en la pared bacteriana o en ciertos antibiticos B) Clasificacin de los aminocidos Segn la naturaleza de su cadena lateral, los 20 aminocidos proteicos se clasifican en tres grupos: - Aminocidos neutros. La cadena lateral no posee carboxilo ni amino y, por tanto, a pH neutro su carga elctrica neta es O. Estos aminocidos se subdividen en: Polares: su cadena lateral posee grupos hidrfilos que permiten formar puentes de hidrgeno con molculas polares, debido a lo cual son muy solubles en agua. Apolares: la cadena lateral es hidrfoba y, por tanto, su solubilidad en agua es menor. - Aminocidos cidos. Presentan un grupo carboxilo en la cadena lateral y poseen carga elctrica negativa, ya que ese grupo desprende H+. - Aminocidos bsicos. Contienen algn grupo amino en la cadena lateral que, debido a su carcter bsico, puede tomar H+ lo que har que el aminocido tenga carga positiva

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. C) El enlace peptdico El grupo carboxilo de un aminocido puede interaccionar con el grupo amino de otro, quedando unidos ambos aminocidos y liberndose una molcula de agua. El compuesto as obtenido se denomina dipptido. El enlace creado es de tipo amida y se denomina enlace peptdico. A su vez, este enlace puede ser hidrolizado separndose los dos aminocidos.

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El enlace peptdico se estabiliza porque los tomos de carbono, oxgeno y nitrgeno comparten electrones, lo que hace que aparezcan dos formas resonantes. Se puede afirmar, por tanto, que el enlace peptdico tiene un carcter parcial de doble enlace. Este hecho impide que se efecten torsiones alrededor del enlace peptdico, lo que determina que los tomos de carbono, oxgeno y nitrgeno se siten en el mismo plano. El dipptido puede unirse a otro aminocido y se formara un tripptido. De nuevo, ste podra seguir adicionando nuevos aminocidos y dar lugar a tetrapptidos, pentapptidos, etc. La unin de muchos aminocidos constituye un polipptido. 1.5.3. Estructura de las protenas. Propiedades. A) Estructura. A.1. Estructura primaria Es la secuencia de los aminocidos en la cadena polipeptdica. El nmero, el tipo y el orden o la secuencia de los aminocidos que constituyen la estructura primaria son distintos en cada protena. Siempre existe un extremo con un aminocido, cuyo grupo amino est libre y otro extremo con un aminocido con su grupo carboxilo libre. Por convenio, los aminocidos de la cadena se numeran comenzando por el que posee el extremo amino libre.

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A.2. Estructura secundaria Disposicin de la cadena polipeptdica en el espacio. Este plegamiento estable se denomina estructura secundaria, de la que existen dos tipos bsicos:

Estructura en -hlice Consiste en un plegamiento en espiral de la cadena polipeptdica sobre s misma. Este enrollamiento sigue el sentido de giro de las agujas del reloj y contiene 3,6 aminocidos por cada vuelta. El plegamiento se mantiene estable por medio de puentes de hidrgeno entre el grupo -NH (que forma parte de un enlace peptdico) de un aminocido y el grupo -CO (que forma parte de otro enlace peptdico) del cuarto aminocido que le sigue en la cadena lineal. Las cadenas laterales de los aminocidos no intervienen en los enlaces y aparecen proyectadas hacia la parte externa de la -hlice. Si se sitan uno al lado del otro aminocido con cadenas laterales muy voluminosas o con cargas elctricas del mismo signo, la estructura se desestabiliza. As, en una misma protena es posible encontrar tramos en los que la -hlice est desorganizada y no se puede reconocer.

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Lamina plegada Tambin se conoce como estructura . El plegamiento origina una especie de fuelle o lmina plegada en zigzag, originada por el acoplamiento de segmentos de la misma cadena polipeptdica o de distintas cadenas, unidos entre s por puentes de hidrgeno transversales anlogos a los que estabilizan la -hlice. Las cadenas laterales (grupos R) de los aminocidos se disponen alternativamente por encima y por debajo de esta estructura. Adems existen otros tipos de estructura secundaria, como la triple hlice del colgeno. Esta protena, muy rica en el aminocido prolina y en un derivado de ste, la hidroxiprolina, no puede formar muchos de los puentes de H. En su lugar se asocian tres cadenas trenzadas que originan una triple hlice. A.3. Estructura terciaria La estructura secundaria no es el ltimo nivel de plegamiento de las protenas que adquieren una disposicin espacial tridimensional estable caracterstica. De la estructura terciaria depende de la funcin de la protena, por lo que cualquier cambio en la disposicin de esta estructura puede provocar Ia prdida de su actividad biolgica. La estructura terciaria es un conjunto de plegamientos caractersticos. Los enlaces pueden ser de cuatro tipos: - Puentes disulfuro. - Fuerzas electrostticas. - Puentes de hidrgeno. - Fuerzas de Van der Waals e interacciones hidrofbicas. En general, se puede decir que existen dos tipos de estructuras tridimensionales proteicas: - Globulares. Poseen un alto grado de plegamiento y dan lugar a estructuras con formas esferoidales. - Fibrilares. El plegamiento de la cadena polipeptdica es menor, por lo que estas estructuras presentan formas alargadas. A.4. Estructura cuaternaria En ocasiones existe otro nivel estructural por encima del anterior. Esto ocurre nicamente cuando la protena est constituida por ms de una cadena polipetdica, denominadas en este caso subunidades proteicas. La estructura cuaternaria es, sencillamente, la disposicin relativa que adoptan las subunidades proteicas entre s. La unin entre ellas se realiza mediante los mismos tipos de enlaces que mantienen la estructura terciaria. La hemoglobina, las protenas musculares, los complejos multienzimticos y las inmunoglobulinas, entre otras, tienen estructura cuaternaria. B) Propiedades de las protenas Son consecuencia de la secuencia de aminocidos y de su conformacin espacial. B.1. Solubilidad Se debe a la estructura terciaria. Normalmente, las protenas con
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estructura terciaria fibrilar son insolubles en agua, mientras que las que poseen estructura globular son solubles. Debido a su elevada masa molecular, cuando las protenas son solubles forman disoluciones coloidales. Existe una capa de solvatacin de agua alrededor de cada molcula proteica que impide la unin entre ellas. Si esta capa se pierde, las molculas de protena se unen entre s y forman un agregado insoluble, lo que provoca su precipitacin. Esto ocurre cuando aparecen iones. B.2. Alteracin de la estructura espacial: desnaturalizacin. La funcin biolgica de las protenas depende de su estructura tridimensional (estructura cuaternaria si la hay, si no de la terciaria; lgicamente, los cambios de la estructura secundaria deben afectar a las dos anteriores) Cualquier cambio afecta a la funcionalidad biolgica de la protena. Este proceso recibe el nombre de desnaturalizacin y puede ser reversible o irreversible. Entre los factores que pueden provocar la desnaturalizacin proteica se encuentran las variaciones de presin y el aumento de temperatura (agentes fsicos) y las variaciones de pH, as como los cambios en la concentracin salina (agentes qumicos). B.3. Especificidad Cada especie biolgica posee algunas protenas que otros organismos no tienen. Incluso protenas que presentan la misma funcin y una estructura tridimensional muy semejante suelen tener una secuencia peptdica algo diferente en distintos organismos, por lo que la especificidad es consecuencia de la estructura primaria. Este hecho permite llevar a cabo estudios filogenticos y establecer el parentesco evolutivo entre especies. La especificidad proteica se observa incluso en individuos de una misma especie y causa rechazos de transplantes. 1.5.4. Funciones biolgicas y clasificacin de las protenas Entre las funciones de las protenas que se podran denominar estticas destacan las siguientes: - Estructural. Membranas celulares, fibras contrctiles... - Almacn de aminocidos. Las protenas activas, que componen el grupo ms numeroso y complejo realizan mltiples funciones. - Fisiolgica. Este grupo comprende las protenas que intervienen en los movimientos, los procesos homeostticos (incluido el mantenimiento del pH), el transporte de otras molculas, hormonas, etc. - Regulacin gentica. - Catalizadora. Reciben el nombre de enzimas. Actan como biocatalizadores favoreciendo las reacciones qumicas que se producen en los seres vivos. - Inmunitaria. Ciertas protenas proporcionan la identidad molecular de los organismos vivos (antgenos), mientras que otras (anticuerpos) rechazan cualquier molcula extraa que se introduzca en ellos. - Reconocimiento molecular y celular, pues los receptores de membrana son, en michos casos, de naturaleza proteica. Los prtidos ms sencillos son los aminocidos, que pueden unirse en grupos de hasta 10, llamados oligopptidos (dipptidos, tripptidos..) de hasta 100 (polipptidos), o de ms (protenas). Aunque en ocasiones se emplea una clasificacin funcional de las protenas con frecuencia se recurre a otros criterios, como su composicin y complejidad, que permiten divididas en dos grandes grupos: - Holoprotenas o protenas simples. Estn formadas nicamente por cadenas polipeptdicas, ya que en su hidrlisis slo se obtienen aminocidos.
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- Heteroprotenas, protenas complejas o conjugadas. Adems de las cadenas po!ipeptdicas, estn compuestas tambin por una parte no proteica que se denomina grupo prosttico. A) Holoprotenas Segn su estructura tridimensional, las holoprotenas se subdividen en protenas globulares (con un alto grado de plegamiento y normalmente solubles) y fibrilares (con una estructura terciaria menos compleja e insolubles). Entre las protenas globulares destacan las siguientes: - Albminas. Funciones de transporte de otras molculas o de reserva de aminocidos. Lactoalbminas, ovoalbminas y seroalbminas, segn se localicen en la leche, en la clara de huevo o en el plasma sanguneo, respectivamente. - Globulinas. Son las protenas ms grandes, pudiendo llegar a alcanzar masas moleculares de 1 000000. Lla hemoglobina. - Histonas. Asociadas al ADN, forman parte de la cromatina. Las protenas fibrilares realizan generalmente funciones estructurales - Queratina. Presente en las clulas de la epidermis de la piel y en estructuras cutneas como pelos, plumas, uas y escamas. - Colgeno. Su resistencia al estiramiento justifica su presencia en los tejidos conjuntivo, cartilaginoso y seo. - Miosina. Esta protena participa activamente en la contraccin de los msculos. - Elastina. Se encuentra en rganos sometidos a deformaciones reversibles, como los pulmones, las arterias o la dermis de la piel. B) Heteroprotenas Segn la naturaleza del grupo prosttico, se clasifican en: - Fosfoprotenas. cido ortofosfrico. vitelina, presente en la yema de huevo, y la casena, abundante en la leche y protena principal del queso. - Glucoprotenas. Glcido. En las membranas celulares, donde desempean una funcin antignica. Las gammaglobulinas con funcin de anticuerpos. - Lipoprotenas. Un lpido. En las paredes bacterianas y en el plasma sanguneo, donde sirven como transportadores de grasas y colesterol. - Cromoprotenas. Molculas complejas. Se distinguen: * Compuestos porfirnicos. Su grupo prosttico est compuesto por una metaloporfirina. Entre las metalporfirinas destacan las siguientes: Hemoglobina y mioglobina. Su metalporfirina, que suele denominarse grupo hemo, lleva Fe2+ y tiene color rojo. La hemoglobina se une al oxgeno en la sangre de los vertebrados, y la mioglobina, en los msculos estriados. Citocromos. Tambin contienen hierro, pasando de estado Fe2+ a Fe3+. Se utilizan en las reacciones de oxidacin-reduccin de procesos metabIicos importantes en los que existe un transporte ectrnico (respiracin aerobia y fase lumnica de la fotosntesis). Peroxidasas y catalasas. Clorofilas. Metaloporfirina con Mg2+, se encuentran en los cloroplastos de los vegetales fotosintticos Cianocobalamina o vitamina B12. * Compuestos no porfirnicos. Dos ejemplos muy conocidos son la rodopsina y la hemocianina. Rodopsina. Es imprescindible para realizar el proceso visual. Hemocianina. Semejante a la hemoglobina en algunos invertebrados. Nucleoprotenas. Su grupo prosttico est formado por cidos nucleicos.
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1.6. Enzimas. 1.6.1. Concepto y estructura. Los catalizadores biolgicos o biocatalizadores de las reacciones metablicas son unas protenas denominadas enzimas. Del grado de actividad de estos catalizadores dependen el tipo y la velocidad de las reacciones que se lleven a cabo entre los compuestos biolgicos y, en consecuencia, los procesos vitales derivados de ellos. Resulta evidente, por tanto, que el estudio de las enzimas es fundamental para comprender los mecanismos bsicos de estas reacciones, imprescindibles para el mantenimiento de la actividad vital de los seres vivos Todas las enzimas son protenas, pero pueden estar formadas nicamente por cadenas polipeptdicas o contener, adems, otro grupo no proteico. En este ltimo caso, la parte proteica recibe el nombre de apoenzima, mientras que la parte no proteica se denomina grupo prosttico cuando su unin a la apoenzima es permanente, y cofactor cuando, como es habitual, no es permanente. - La apoenzima se encarga de proporcionar la estructura espacial especfica que permite la unin a las molculas sobre las que actan las enzimas en las reacciones qumicas y que se denominan sustratos. - El cofactor o el grupo prosttico son los componentes enzimticos que llevan a cabo la propia reaccin, es decir, la catlisis en sentido estricto. El cofactor puede ser, sencillamente, un catin metlico o una molcula orgnica, y en ese caso se llama coenzima. Las coenzimas constituyen un grupo molecular muy diverso que comprende numerosos derivados vitamnicos. La enorme importancia de las vitaminas radica, precisamente, en su participacin en los procesos metablicos en forma de coenzimas, razn por la que se dedica la ltima parte de esta unidad a su estudio. Si la enzima consta slo de parte proteica, sta se encarga de fijar especficamente el sustrato y de llevar a cabo la reaccin sobre l. Por su carcter proteico, las enzimas poseen las mismas propiedades que las protenas, es decir, se desnaturalizan al ser sometidas a cambios de pH, a variaciones de temperatura y a elevadas concentraciones salinas, y presentan un alto grado de especificidad, en este caso, tanto en la seleccin de los sustratos como en la reaccin que catalizan sobre ellos. El grado de especificidad del sus trato, aunque normalmente es elevado, puede variar. As, hay enzimas que muestran una especificidad absoluta y slo actan sobre un tipo concreto de sustrato, llegando a diferenciar incluso estereoismeros y otras que, por ejemplo, slo muestran especificidad con respecto a un grupo funcional, como las enzimas esterasas que llevan a cabo la saponificacin de cualquier lpido con grupos ster. La especificidad de reaccin significa que para cada tipo de reaccin qumica hay una enzima diferente, es decir, una enzima cataliza una sola reaccin qumica o un grupo de reacciones estrechamente relacionadas. Adems de las propiedades citadas, las enzimas, por ser catalizadores, no se consumen en el transcurso de las reacciones, por lo que la misma molcula puede actuar repetidamente. As, las necesidades enzimticas son muy bajas y cantidades mnimas de enzima pueden transformar grandes cantidades de sustrato. 1.6.2. Mecanismo de accin y cintica enzimtica. La accin catalizadora de las enzimas consiste en rebajar la energa de activacin para llegar fcilmente al estado de transicin y permitir que la reaccin se lleve a cabo. En definitiva, sin la presencia del catalizador no es posible alcanzar el estado de transicin espontneamente, y con l, s es posible.
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Los catalizadores realizan su accin favoreciendo la aproximacin de las molculas de los reactivos, pero como no actan como tales, no se consumen. nicamente ayudan a que se produzca la reaccin. Todas las reacciones metablicas (salvo alguna excepcin) son reacciones catalizadas por enzimas.

Cuando un sustrato se encuentra con la enzima correspondiente, la reaccin cataizada se produce en tres etapas: La especificidad enzimtica se debe a la estructura proteica de la apoenzima, la cual presenta una zona, denominada centro activo, con una forma espacial caracterstica en la que se acopla el sustrato. Este acoplamiento se ha comparado con el que existe entre una llave y su cerradura: solo es posible abrirla si los salientes y entrantes de una y otra encajan exactamente, por lo que cualquier cambio que se produzca en la forma impedir su acoplamiento. La teora de la llave-cerradura, propuesta en 1890 por Emil Fischer, se considera esencialmente correcta, aunque en la actualidad se ha probado que en algunas enzimas el centro activo es capaz de modificar su forma para adaptarse al sustrato (figura 15.8), de ah que a este proceso, postulado por Daniel E. Koshland Jr. en 1958, se le denomine de ajuste o acoplamiento inducido. Sera algo semejante a la introduccin de una mano en un guante. La propia mano (que en esta comparacin equivaldra al sustrato) hace que el guante (equivalente al centro activo de la apoenzima) se adapte mejor cuando se introduce en l. La unin es reversible, pues una parte del complejo enzima-sustrato (ES) se disocia y, debido precisamente a esa reversibilidad, esta primera etapa es la ms lenta. E + S < ES La unin de los radicales de los aminocidos del centro activo al sustrato, consigue debilitar sus enlaces provocando cambios energticos que permiten alcanzar ms fcilmente el estado de transicin. 2. Una vez formado el complejo enzima-sustrato, el cofactor lleva a cabol a reaccin y se obtiene el producto final (P). Esta etapa es muy rpida e irreversible. ESE + P En el caso de que no existan cofactores, la accin cataltica la realizan algunos aminocidos del propio centro activo. 3. El producto se libera del centro activo y la apoenzima queda libre para volver a unirse a nuevas molculas de sustrato. La coenzima puede liberarse intacta o liberarse quedando modificada. Si se representa grficamente la velocidad con que aparece el producto (moles de producto que se forman por unidad de tiempo), para una cantidad constante de enzima al aumentar la concentracin de sustrato, aumenta tambin la velocidad de la reaccin. Pero se alcanza una velocidad mxima que no es posible superar. Esta es la constante de Michaelis-Menten o KM y
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se define como la concentracin de sustrato para la cual la reaccin alcanza la velocidad semimxima. La KM es caracterstica de cada enzima y cuanto menor sea su valor, mayor afinidad tendr la enzima por el sustrato, ya que se alcanza antes la velocidad semimxima.

1.6.3. Regulacin de la actividad enzimtica: temperatura, pH, inhibidores.

Las reacciones catalizadas por enzimas no se producen siempre a la misma velocidad. Entre los factores que pueden modificar la velocidad de dichas reacciones se pueden citar los siguientes: - La concentracin del sustrato. Como se ha visto en el epgrafe anterior, al aumentar la concentracin de sus trato existen ms centros activos ocupados y la velocidad de la reaccin aumenta hasta que no quedan centros activos libres; a partir de ese momento, un aumento de la concentracin del sus trato no supone un aumento de la velocidad de la reaccin. - El pH. Cada enzima tiene un pH ptimo de actuacin. Los valores por encima o por debajo de este valor ptimo provocan un descenso de la velocidad enzimtica, debido a cambios elctricos en los radicales de los aminocidos que constituyen el centro activo. De este modo, pueden aparecer o desaparecer enlaces por fuerzas electrostticas que alteren la estructura espacial del centro activo. Tambin pueden cambiar las cargas elctricas en el sustrato. En cualquier caso, el acoplamiento del sus trato al centro activo se ver dificultado y la velocidad de la reaccin disminuir. Por debajo de un pH mnimo y por encima de un pH mximo, se produce la desnaturalizacin de la enzima y su actividad se anula por completo. La temperatura. Como en el caso anterior, existe tambin una temperatura ptima en la que la actividad enzimtica es mxima. Las temperaturas inferiores a este valor ptimo dan lugar a una disminucin de la vibracin
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molecular que hace ms lento el proceso, mientras que temperaturas superiores a la ptima pueden provocar la desnaturalizacin de la enzima y la prdida total de su funcionalidad. Los cambios de pH y temperatura influyen en la velocidad de las reacciones enzimticas, pero habitualmente estos valores no cambian en un organismo vivo, por lo que se utilizan otros mecanismos de regulacin, como la activacin y la inhibicin enzimticas y el alosterismo. A) Activacin enzimtica La presencia de activadores permite que ciertas enzimas que se mantenan inactivas lleven a cabo su accin, es decir, se activen. Algunos cationes, como Mg2+ o Ca2+ desempean un papel importante como activadores enzimticos. Tambin pueden actuar como activadores diversas molculas orgnicas, incluso el propio sustrato.

B) Inhibicin enzimtica Los inhibidores enzimticos son sustancias que disminuyen o anulan la actividad de una enzima puede ser algn ion o tambin alguna molcula orgnica y, muy frecuentemente, el producto final de la reaccin. En este ltimo caso se habla de inhibicin feed-back o retroinhibicin. La inhibicin puede ser irreversible, cuando el inhibidor, que se denomina veneno metablico, se une covalentemente a la enzima alterando su estructura e inutilizndola de forma permanente. La inhibicin reversible, ms comn, tiene lugar cuando la enzima vuelve a tener actividad una vez eliminada la sustancia inhibidora. Se diferencian dos tipos de inhibicin reversible. - Inhibicin competitiva: el inhibidor debe tener gran semejanza con la del sustrato. Por eso, a estos inhibidores se les llama anlogos metablicos. - Inhibicin no competitiva. El inhibidor no compite con el sustrato, sino que se une en otra zona de la enzima distinta del centro activo. Esta unin modifica la estructura de la enzima al tiempo que dificulta el acoplamiento del sustrato.

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C) Alosterismo El alosterismo constituye un sistema de regulacin enzimtica sumamente preciso. Las enzimas alostricas catalizan algunas reacciones importantes, como, por ejemplo, el primer paso de una ruta metablica compuesta por varias reacciones consecutivas. Tambin suelen encontrarse en los puntos de ramificacin de las rutas mctablicas desde los que se pueden seguir varios caminos alternativos. Estas enzimas presentan las siguientes caractersticas: - Estn formadas por varias subunidades, por lo que tienen estructura cuaternaria. - Poseen varios centros de regulacin; es decir, existen varios sitios para la unin de activadores e inhibidores. - Existe un efecto cooperativo entre las subunidades, de modo que la activacin o inhibicin de una de ellas provoca el mismo efecto en todas las dems. Esto permite una regulacin ms rpida y con menor cantidad de activadores e inhibidores. Su cintica es diferente a la del resto de las enzimas, como se puede observar en la grfica de la velocidad de reaccin frente a la concentracin del sustrato, que es una curva sigmoidea.

D) Clasificacin de las enzimas Se conocen alrededor de 2000. Para nombrarlas se emplea un trmino que alude al sustrato y al tipo de reaccin catalizada, al que se aade la terminacin asa. Se clasifican en seis clases: Oxirreductasas. Transferasas. Hidrolasas. Liasas. Isomerasas. Ligasas, sintetasas o sintasas.
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1.7. cidos nucleicos. 1.7.1. Concepto e importancia biolgica. Todos los seres vivos poseen los mismos tipos de molculas. Sin embargo, algunas de estas molculas son propias de cada especie, e incluso de cada organismo, como sucede con ciertas protenas. Pero a qu se debe la enorme diversidad molecular de las protenas? Todos los organismos poseen unas molculas que dirigen y controlan la sntesis de sus protenas, proporcionando la informacin que determina su especificidad y sus caractersticas biolgicas. Estas molculas, que reciben el nombre de cidos nucleicos, contienen las instrucciones necesarias para realizar los procesos vitales y son las responsables de todas las funciones bsicas de los seres vivos. Podra decirse que lo que un organismo es o puede llegar a ser, en trminos biolgicos, aparece programado en estas molculas. Los cidos nucleicos (el ADN y el ARN) son macromolculas formadas por la unin de muchos monmeros denominados nucletidos. Hoy sabemos que la molcula que contiene la informacin de las caractersticas biolgicas de los seres vivos es el ADN. Sin embargo, la demostracin de que este cido nucleico constitua el material hereditario solo fue posible gracias a la paciente labor de investigacin de muchos cientficos durante la primera mitad del siglo XX. Ya en 1928, en el curso de sus experimentos con la bacteria Streptococcus pneumoniae, agente causante de la neumona, Frederick Griffith demostr que la capacidad biolgica para producir una cpsula (hecho que determina la virulencia de las bacterias) poda ser adquirida de otra cepa por medio de una sustancia, todava no identificada, a la que se dio el nombre factor transformante. En 1944, Qswald T.Avery, Maclyn McCarty y Colin MacLeod observaron que la capacidad transformante de las cepas virulentas de Streptococcus pneumoniae desapareca cuando se agregaban enzimas que destruan el ADN Dedujeron que el factor transformante era la molcula de ADN. La prueba definitiva fue obtenida en 1952 por Alfred Hershey y Martha Chase, quienes demostraron de forma concluyente que el ADN, y no una protena, era el material gentico del bacterifago T2.. Su experimento fue marcar radiactivamente dos virus, uno en su ADN con P32 y otro en sus protenas con S35 . Los virus procedentes de cultivos marcados con P estaban tambin marcados, no as los que provenan de los marcados con S. 1.7.2. Nucletidos. Enlace fosfodister. Funciones de los nucletidos. A) Nucletidos. Cada nucletido es una molcula relativamente compleja, compuesta por la unin de tres unidades: un monosacrido (una pentosa), una base nitrogenada y uno o varios grupos fosfato. Tanto la base nitrogenada como los grupos fosfato se encuentran unidos a la pentosa.

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La pentosa siempre es una aldopentosa, ya sea - D-ribofuranosa, y en este caso el nucletido se denomina ribonucletido, o -D-2-desoxirribofuranosa, constituyente de los desoxirribonucletidos (el prefijo desoxi- indica que la pentosa carece de un tomo de oxgeno). La base nitrogenada puede ser de dos tipos: prica, derivada de la purina, o pirimidnica, derivada del anillo de pirimidina. La presencia de los tomos de nitrgeno proporciona, en ambos casos, carcter bsico a estos compuestos. La existencia de distintos radicales hace que puedan aparecer varias base nitrogenadas; concretamente, las presentes en los cidos nucleicos son dos, bases derivadas de la purina, la adenina (A) y la guanina (G), y tres derivadas de la pirimidina, la citosina (C), la timina (T) y el uracilo (U). La porcin constituida por la pentosa y la base nitrogenada se denomina nuclesido. La unin de uno o varios grupos fosfato al carbono 3 o al 5 de la pentosa da lugar al nucletido completo.
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Cuando existe ms de un grupo fosfato, se unen en cadena, uno a continuacin de otro. Con frecuencia se emplean abreviaturas para nombrar a los nucletidos. As, GTP indica guanosn trifosfato. Los nucletidos son molculas que poseen un gran inters biolgico, ya que, adems de constituir los cidos nucleicos, llevan a cabo algunas funciones bsicas para los seres vivos. B) Enlace fosfodister (nucleotdico). La existencia de grupos hidroxilo, tanto en la pentosa como en el fosfato permite la unin de los nucletidos mediante la formacin de enlaces entre ambos grupos. La unin es una esterificacin que se realiza entre el grupo fosfato situado en posicin 5' de un nucletido y el grupo hidroxilo que se encuentra en el carbono 3' de otro nucletido.

Se trata, por tanto, de una condensacin, en la que se obtiene un compuesto denominado dinucletido y se libera una molcula de agua. El nuevo enlace, de tipo ster fosfrico (fosfodister), se denomina enlace nucleotdico. La hidrlisis del dinucletido libera los dos mononucletidos. Dado que existen an grupos hidroxilo libres, el dinucletido se puede unir a ms nucletidos y formar trinucletidos, tetranucletidos, etc. La unin de cientos o miles de nucletidos constituye cadenas de cidos nucleicos o polinucletidos, molculas gigantescas con una masa molecular muy elevada. C) Funciones de los nucletidos. C.1. Molculas acumuladoras y donantes de energa: ATP ATP ADP + P + Energa. El enlace formado/ roto es altamente energtico. C.2. Adenosn monofosfato cclico (AMPc) Desempea un papel clave en el desencadenamiento de las respuestas de la clula ante las informaciones que recibe del medio extracelular: segundo mensajero. C.3. Molculas con funcin coenzimatica Nicotinamn adenn dinucletido (NAD +) Nicotinamn adenn dinucletido fosfato (NADP+) Flavn adenn dinucletido (FAD)

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1.7.3. Tipos de cidos nucleicos. Estructura, localizacin y funciones. Estas molculas cidas fueron aisladas, por primera vez, en 1869 por el mdico suizo Friedrich Miescher a partir de extractos de ncleos celulares. Posteriormente, se observ tambin su presencia en el citoplasma, aunque se conserv la denominacin de nucleicos para designar estos compuestos. Existen dos tipos de cidos nucleicos: el ADN y el ARN. A) cido desoxirribonucleico El ADN est formado por la unin de desoxirribonucletidos, es decir, sus nucletidos componentes contienen desoxirribosa. En cuanto a las bases nitrogenadas pueden ser adenina, guanina, citosina y timina, pero nunca uracilo. Con excepcin de algunos virus (como el X174), el ADN est constituido por dos cadenas polinucleotdicas unidas entre s en toda su longitud. Esta doble cadena puede disponerse en forma lineal (ADN del ncleo de las clulas eucariotas) o en forma circular (ADN de las clulas procariotas, de ciertos virus y de algunos orgnulos citoplasmticos de las clulas eucariotas). La molcula de ADN porta la informacin necesaria para el desarrollo de las caractersticas biolgicas de un individuo y contiene los mensajes e instrucciones para que las clulas realicen sus funciones. Es decir, lleva codificada la informacin a partir de la cual se forma un organismo vivo, por lo que constituye el material gentico. El ADN es una molcula altamente estructurada en la que, de manera semejante a las protenas, se distinguen varios niveles de complejidad. A.1.Estructura primaria Est formada por la secuencia de desoxirribonucletidos, en cuyo extremo 5' de la cadena existe un fosfato y en el extremo 3' una pentosa con el OH del carbono 3' libre. Como todos los nucletidos contienen desoxirribosa, la diferencia entre las molculas de ADN de los distintos organismos radica nicamente en el orden de las bases nitrogenadas que cuelgan de las pentosas. Es decir, la secuencia precisa en que aparecen los cuatro tipos de bases de las, molculas de ADN determina las caractersticas biolgicas de la clula o del individuo que la contiene.

A.2.Estructura secundaria La secuencia polinucleotdica se dispone en el espacio en forma de una doble hlice, segn la estructura propuesta por James Watson y Francis Crick en 1953. Dos descubrimientos previos abrieron el camino a este modelo de
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estructura secundaria del ADN aceptado en la actualidad. En 1950, Erwin Chargaff, tras estudiar gran cantidad de muestras de ADN pertenecientes a diversas especies de organismos, observ que siempre exista la misma cantidad de bases nitrogenadas pricas y pirimidnicas. Descubri adems, que el nmero de adeninas siempre es igual al de timinas, y el de guaninas, al de citosinas. Estos resultados constituyen la denominada ley de equivalencia de bases de Chargaff. Por otra parte, en esta misma poca, Rosalind Franklin y Maurice Wilkins aplicaron el mtodo de difraccin de rayos X al ADN y dedujeron que esta molcula posee una estructura helicoidal con dos periodicidades, una cada 0,34 nm y otra cada 3,4 nm.

A partir de estos datos, Watson y Crick elaboraron su modelo de estructura tridimensional del ADN, que presenta las siguientes caractersticas: - El ADN est constituido por dos cadenas polinucleotdicas unidas entre s en toda su longitud. - Las dos cadenas son antiparalelas, lo que significa que el extremo 3' de una de ellas se enfrenta con el extremo 5' de la otra. - La unin entre las cadenas se realiza por medio de puentes de hidrgeno entre las bases nitrogenadas de ambas: concretamente, la adenina forma dos de estos puentes con la timina y la guanina tres con la citosina. Resulta evidente que las dos cadenas no son idnticas, sino complementarias, ya que una de ellas tiene la secuencia de bases complementaria de la otra. (Si se conoce una secuencia es posible deducir inmediatamente la complementaria.). - Las dos cadenas estn enrolladas en espiral formando una doble hlice alrededor de un eje imaginario. - Las bases nitrogenadas quedan en el interior de la doble hlice, mientras que los esqueletos pentosa-fosfato se sitan en la parte externa. De esta forma, las cargas negativas de los grupos fosfato se unen a las cargas positivas de cationes o de otras molculas presentes en el medio, estabilizando la estructura. - Los planos de las bases nitrogenadas enfrentadas son paralelos entre s y perpendiculares al eje de la hlice.
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- El enrollamiento de la doble hlice es plectonmico, es decir, las cadenas no se pueden separar sin desenrolladas. - La doble hlice es dextrgira: el enrollamiento gira en el sentido de las agujas del reloj. El trmino dextrgiro aplicado a la doble hlice de ADN no guarda relacin alguna con la actividad ptica, sino nicamente con el sentido de su enrollamiento. - La anchura de la hlice es de 2 nm, mientras que la longitud de cada vuelta es de 3,4 nm y cada 0,34 nm se encuentra un par de bases complementarias. Puede deducirse, por tanto, que existen 10 pares de nucletidos por cada vuelta. Adems de la estructura descrita, que corresponde a la denominada forma B, se conocen otros dos tipos de estructura en doble hlice del ADN: la forma A, en la que los planos de las bases nitrogenadas no son perpendiculares al eje de la hlice, y la forma Z, donde la doble hlice presenta irregularidades y es levgira. Aunque an se desconoce el papel exacto que desempean estas dos formas de doble hlice, se cree que podran estar relacionadas con los mecanismos de regulacin de la expresin de los genes.

A.3. Estructura terciaria La estructura en doble hlice sufre nuevos plegamientos que dan lugar a un tercer nivel estructural. Esto es necesario por dos razones fundamentales:
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Las largas cadenas de ADN deben acoplarse en el reducido espacio disponible en el interior celular. La complejidad del plegamiento y el grado de empaquetamiento del ADN es mucho mayor en el caso de las clulas eucariotas, ya que la longitud de la cadena es muy grande y debe estar incluida en el interior del ncleo. La regulacin de la actividad del ADN depende en gran medida del grado de plegamiento que posea la molcula. La estructura terciaria es compleja y no ha sido totalmente elucidada, aunque se sabe que existen protenas asociadas al ADN que organizan la estructura. Como resultado final, el ADN aparece constituyendo la cromatina o los cromosomas. De todo ello nos ocuparemos al estudiar la estructura celular en las prximas unidades. A.4. El ADN en las c l ul a s e u c a r i o t a s y p r o c a r i o t a s En ambos tipos celulares, el ADN puede adoptar diversas formas y niveles de omplejidad. En procariotas existe una molcula de ADN circular, es decir, con sus extremos cerrados, que recibe el nombre de cromosoma bacteriano. Adems, a veces contiene otras molculas cir-, culares ms pequeas llamadas plsmidos. En eucariotas, el ADN se presenta como largas molculas lineales asociadas a protenas bsicas en el interior del ncleo. Cada molcula de ADN, con sus protenas asociadas, forma una fibra visible al microscopio electrnico. El conjunto de todas estas fibras constituye la cromatina. Cuando la clula se va a dividir, cada fibra de cromatina se compacta y forma los cromosomas. Se calcula que todo el ADN presente en los 46 cromosomas de una clula humana mide unos 2,36 metros. Aunque la mayor parte del ADN de las clulas eucariotas est confinada en el ncleo, en las mitocondrias y cloroplastos tambin hay ADN, que codifica algunas de las protenas propias de estos orgnulos. Normalmente, cada orgnulo contiene varias copias de su ADN, que forma un anillo similar al de los procariontes, aunque de menor longitud. En los virus, el ADN puede adoptar mltiples formas. Los virus contienen una sola molcula, que puede ser monocatenaria o bicatenaria, segn est compuesta de una sola hebra de ADN o de dos. Adems, ambos tipos pueden presentarse en forma lineal o circular. B) cido ribonucleico (ARN) El ARN, al igual que el ADN, es un polmero no ramificado, compuesto por una serie de nucletidos unidos por enlaces ster fosfricos. El ARN difiere del ADN en que la pentosa de los nucletidos constituyentes es la ribosa, en lugar de la desoxirribosa, y en que en las cuatro bases nitrogenadas mayoritarias presentes aparece uracilo en lugar de timina. El uracilo, como ocurra con la timina, puede emparejarse con la adenina. En algunos tipos de ARN, como el ARN de transferencia (ARNt), se localizan otras bases especiales derivadas de estas (dihidrouracilo, metilguanina, etc.), aunque son siempre minoritarias . Las cadenas de ARN son ms cortas que las de ADN y pueden aparecer tanto en el ncleo como en el citoplasma celular. Excepto en los reovirus, el ARN est constituido por una nica cadena, aunque en el ARN de transferencia existe un apareamiento de bases intracatenario, lo que hace que aparezcan tramos bicatenarios, originados por el plegamiento de la cadena sobre s misma. El ARN es la molcula encargada de sintetizar las protenas especficas de un organismo transmitiendo el mensaje gentico codificado por el ADN. As, mientras el ADN contiene la informacin, el ARN la utiliza para que se produzcan en las protenas especficas del individuo. Este proceso es sumamente complejo y requiere la intervencin de varios tipos de ARN.
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B.1. ARN mensajero (ARNm) El ARNm es una copia de una parte del ADN (la que corresponde a cada gen o grupo de genes que vaya a expresarse) que ser utilizada por los ribosomas como informacin para poder unir los aminocidos en el orden adecuado y constituir una protena concreta. Las cadenas de ARN mensajero tienen una vida muy corta, ya que si no fueran destruidas (mediante enzimas ribonucleasas) la sntesis proteica se prolongara indefinidamente y se originara una superproduccin de protenas. As, cuando se necesita sintetizar una protena concreta, se fabrica de nuevo el ARN mensajero correspondiente. El ARNm constituye, aproximadamente, entre el 3 y e1 5 % del total del ARN celular. B.2. ARN ribosmico (ARNr) El ARNr forma parte de los ribosomas y participa, por tanto, en el proceso de unin de los aminocidos para sintetizar las protenas. No constituye una molcula especfica de cada organismo, pues, a diferencia del ARNm, no contiene informacin sobre la clase de protena que se va a sintetizar. Existen varias cadenas distintas de ARNr, que se diferencian por su coeficiente de sedimentacin. El ARNr es el tipo ms abundante, ya que corresponde al 80-85 % del ARN celular total. B.3. ARN de transferencia (ARNt) El ARNt se encarga de transportar los aminocidos presentes en el citoplasma celular hasta los ribosomas, donde se unirn para constituir las protenas. Cada molcula de ARNt transporta un aminocido especfico. Las diferencias entre ellos son debidas, fundamentalmente, a una secuencia de tres bases nitrogenadas, denominada anticodn, que vara entre los distintos ARNt. Los ARNt estn formados por cadenas cortas (entre 70 y 90 nucletidos) que contienen un 10 % de bases nitrogenadas diferentes a las cuatro mayoritarias, como ya se ha indicado. Las molculas de ARNt poseen una estructura
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secundaria muy caracterstica, en la que existen tramos de doble cadena, por emparejamiento intracatenario. Estos tramos se denominan brazos y hay cuatro en cada molcula, aunque tambin puede aparecer un quinto brazo ms corto que los otros. En los extremos de tres de los brazos existen zonas sin emparejar que componen los denominados bucles. El extremo 3' de la cadena tiene siempre la secuencia de bases CCA. A este nucletido terminal de adenina se une el aminocido que va a ser transportado. En el extremo 5' siempre existe un nucletido con guanina. La estructura extendida del ARNt tiene forma de hoja de trbol, aunque en la realidad los brazos se disponen plegados, constituyendo una estructura acodada que recibe el nombre de estructura en boomerang. El ARNt constituye, aproximadamente, el 1O % del ARN celular total.

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2.

ORGANIZACIN Y FISIOLOGA CELULAR.

El trmino cellula o clula fue acuado en 1665 por el cientfico ingls Robert Hooke al observar bajo las lentes de un microscopio rudimentario las celdillas constituyentes del corcho y otros tejidos vegetales (que correspondan, en realidad, a restos celulares y no a clulas vivas). En 1674, Antony van Leeuwenhoek, un comerciante de telas holands aficionado a pulir lentes, describi que la sangre estaba compuesta por diminutos glbulos que fluan a lo largo de delgados capilares y realiz numerosas observaciones de diversos animlculos u organismos microscpicos, a menudo unicelulares, que hoy conocemos como microorganismos. El siglo XIX constituyo sin embargo, el verdadero punto de partida para el estudio de la clula y su funcin, que se desarroll paralelamente a los avances de la microscopia y a la aparicin, en la dcada de los aos treinta, del microscopio compuesto. En 1831, el botnico escocs Robert Brown introdujo la nocin de ncleo celular y en 1838, el botnico Matthias Schleiden y el zologo Theodor Schwann enunciaron el postulado bsico de la teora celular, segn el cual todos los seres vivos, vegetales y animales, estn formados por clulas, a las que consideraron las unidades vitales fundamentales. En 1839 Purkinje denomin protoplasma al contenido celular. Estudios posteriores completaron el conocimiento de la clula. As, en 1855, el patlogo Rudolf Virchow estableci que todas las clulas proceden de otras ya existentes (omnis cellula ex cellula) y, ya a principios del siglo XX, las investigaciones sobre la estructura del sistema nervioso del histlogo espaol Santiago Ramn y Cajal, Premio Nobel de Fisiologa y Medicina en 1906, demostraron la individualidad de las neuronas y pusieron de manifiesto la universalidad de la teora celular al aplicarla tambin al tejido nervioso. 2.1. Teora celular.

La teora celular postula que la clula es la unidad fundamental de los seres vivos, desde los ms sencillos (microorganismos) hasta los organismos superiores ms complejos (animales y vegetales), tanto en lo que se refiere, a su estructura como a su funcin. Actualmente, la teora celular se resume en los siguientes puntos: Todos los organismos vivos estn compuestos por clulas. La clula es la unidad estructural y fisiolgica de los seres vivos. Las clulas constituyen las unidades bsicas de la reproduccin: cada clula procede de la divisin de otras clulas preexistentes, siendo idntica a estas gentica, estructural y funcionalmente. La clula es la unidad de vida independiente ms elemental.
2.2. Clula procaritica y eucaritica. Diversidad celular. Origen evolutivo de las clulas.

La clula es la unidad estructural y funcional bsica de los seres vivos. Sin embargo, a pesar de compartir una serie de caractersticas esenciales en cuanto a estructura y funcin, no todas las clulas presentan el mismo nivel de complejidad, pudindose distinguir, tal como seal Chatton en 1925, dos modelos diferentes de organizacin celular: clulas procariotas y clulas eucariotas. Los trminos acuados por Chatton fueron procarionte y eucarionte, del griego pro (antes), eu (bueno) y karyon (ncleo) Todas las clulas tienen unos componentes esenciales comunes:

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o Presentan una membrana plasmtica que las asla del medio que las rodea y constituye la principal barrera selectiva para el intercambio de sustancias con el exterior. o El interior celular o citoplasma contiene una serie de elementos (inclusiones y, en el caso de las eucariotas, orgnulos) imprescindibles para el correcto funcionamiento de la clula. o Todas las clulas poseen informacin gentica en unas macromolculas esenciales (ADN y ARN), as como ribosomas implicados en la sntesis de protenas. 2.2.1. Estructura de la clula procariota Las clulas procariotas son estructuralmente ms simples que las clulas eucariotas y se sitan en la base evolutiva de los seres vivos. La estructura procariota es caracterstica y exclusiva de las bacterias (reino monera). La mayora de las clulas procariotas son de pequeo tamao, desde menos de una micra hasta unas pocas micras, igual al tamao de algunos orgnulos de las clulas eucariotas. Bsicamente, una clula procariota presenta la siguiente estructura: Una membrana plasmtica que delimita el citoplasma celular. Rodeando a la membrana existe una pared celular rgida responsable de la forma de la clula. La composicin y estructura de la pared vara entre los principales grupos bacterianos, aunque est presente en todos ellos, excepto en los rnicoplasmas, las nicas clulas procariotas desprovistas de pared celular. El citoplasma, de aspecto granuloso, con ribosomas 70 S y diversas inclusiones rodeadas o no de membrana {fundamentalmente con materiales de reserva de carbono, nitrgeno, fsforo, etc.). La zona del nucleoide, situada en el centro de la clula y no separada del resto del citoplasma por membrana alguna (por ello no se considera un ncleo verdadero), que contiene el material gentico en forma de ADN, densamente empaquetado. El nucleoide, de aspecto fibrilar, alberga un cromosoma principal, constituido por una molcula de ADN circular bicatenario, y plsmidos, compuestos igualmente por una doble hlice de ADN circular, que portan informacin adicional, como la resistencia a los antibiticos, el mecanismo de degradacin de sustancias difcilmente biodegradables o la capacidad de unirse a otras bacterias a travs de pelos conjugativos. Algunas bacterias contienen adems otros elementos, cuya presencia o no vara de unos grupos a otros: o Flagelos: apndices externos implicados en el movimiento. o Pelos y fimbrias: apndices rgidos que participan en el intercambio de informacin gentica (conjugacin) o en la adhesin al hospedador. o Cpsulas y capas mucosas: envolturas de naturaleza mucosa externas a la pared celular. o Sistemas internos de membrana: aunque escasos entre las bacterias, algunas, como muchas bacterias auttrofas, presentan sistemas internos de membrana, conectados o no con la membrana celular, y asociados en general con determinados procesos metablicos.

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Estructura de las clulas eucariotas Excepto las bacterias y algunos otros microorganismos, el resto de los seres vivos (reinos protoctistas, hongos, plantas y animales), desde los protoctistas unicelulares (protistas) hasta los organismos pluricelulares complejos, con tejidos diferenciados, presentan una organizacin celular eucariota. La estructura de una clula eucariota tipo consta de los siguientes elementos: o La membrana plasmtica. que constituye el lmite externo de la clula y cuya funcin primordial consiste en regular el transporte e intercambio de sustancias con el medio exterior.

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o En ocasiones, rodeando a la membrana plasmtica, existe una pared celular rgida, fundamentalmente de celulosa en las clulas vegetales y de quitina en el caso de algunos hongos. o El citoplasma celular contiene los orgnulos celulares y est ocupado por un entramado de filamentos proteicos que compone el esqueleto celular o citoesqueleto, implicado tambin en la formacin de clios y flagelos, los movimientos intracelulares y la divisin celular. o Los ribosomas presentan un coeficiente de sedimentacin de 80 S, mayor que en las clulas procariotas, y su funcin, al igual que en stas, consiste en la sntesis de protenas. o Mitocondrias y cloroplastos, orgnulos relacionados con la obtencin de energa mediante los procesos de respiracin y fotosntesis, respectivamente. Ambos orgnulos estn rodeados por una membrana doble, si bien los cloroplastos son exclusivos de las clulas vegetales. o Las clulas eucariotas poseen un complejo sistema interno de membranas constituido por el retculo endoplasmtico, conectado con la membrana nuclear, y el complejo de Golgi, orgnulos relacionados con la biosntesis de molculas y su distribucin dentro de la clula, as como con la secrecin de sustancias al exterior. Otros orgnulos membranosos son las vacuolas, que alcanzan un gran desarrollo en las clulas vegetales, y los lisosomas, relacionados con el complejo de Golgi, que contienen enzimas esenciales para la degradacin de sustancias en el interior de vacuolas digestivas. o Por ltimo, todas las clulas eucariotas presentan un ncleo delimitado por una doble membrana. En su interior se encuentra la cromatina, constituida por ADN asociado a histonas y cuya unidad estructural es el nucleosoma. La membrana nuclear doble tiene unos poros que comunican el nucleoplasma y el citoplasma. 2.2.2. Diversidad celular: clula animal y vegetal. Aunque la organizacin bsica de todas las clulas eucariotas es semejante, podemos distinguir dos grandes tipos, clulas animales y clulas vegetales, que se diferencian en los siguientes aspectos: Las clulas vegetales suelen ser de mayor tamao que las animales y presentan una cubierta rgida de celulosa, denominada pared celular, que recubre a la membrana plasmtica. Las clulas animales carecen de pared celular. En las clulas vegetales las vacuolas estn muy desarrolladas y existen unos orgnulos especiales, los plastos, cuya funcin es la sntesis y acumulacin de determinadas sustancias. Las clulas animales tienen las vacuolas poco desarrolladas y carecen de plastos. Las clulas animales contienen unos orgnulos, que reciben el nombre de centrolos, relacionados con la organizacin del huso acromtico y de los cilios y flagelos. Las clulas vegetales tpicas carecen de centrolos.

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2.2.3. Origen evolutivo de las clulas. La clula procaritica posee un nico compartimento, el citosol, limitado por una membrana celular. En el transcurso de la evolucin, una invaginacin de la membrana celular, asociada a un modo de nutricin por fagocitosis, habra desencadenado una compartimentacin superior de la clula ancestral (urcariota) dando lugar a una clula eucaritica. Esta clula se caracteriza por la presencia de un verdadero ncleo y unos orgnulos citoplsmicos limitados por membranas intracelulares. Este conjunto de membranas limitantes del ncleo y de los orgnulos explica la compartimentacin total de la clula, que permite la especializacin funcional de los orgnulos. Es ms, la asociacin de los diferentes compartimentos es necesaria e imprescindible para el funcionamiento integrado de toda la clula. En todos ellos se realizan simultneamente variados y complejos procesos metablicos mediante reacciones bioqumicas (catalizadas por enzimas) y que no podran realizarse en el mismo espacio, por ser incompatibles entre s. En general, en cualquier clula eucaritica se pueden distinguir dos tipos de compartimentacin: - Sistemas internos de membrana. Formados por el retculo endoplsmico (liso y rugoso), que es la continuacin de la membrana nuclear y el complejo o aparato de Golgi. - Orgnulos membranosos. Entre ellos se encuentran el ncleo, las mitocondrias, los plastos (exclusivos de vegetales), los peroxisomas, los lisosomas y las vacuolas (frecuentes en vegetales). La compartimentacin de la clula precursora de la eucaritica supuso un importante paso evolutivo. Originalmente, esta clula ancestral posea una nica membrana celular que era la encargada de realizar todas las funciones
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asociadas a las actuales estructuras membranosas, como la obtencin de energa, la sntesis proteica y lipdica, la sntesis de ATP, etc. Teniendo en cuenta que cualquier clula eucaritica tiene un tamao entre 1000 Y 10000 veces superior al de cualquier procaritica, la nica forma de haber conseguido este incremento de tamao solo ha podido ser mediante el desarrollo de sistemas de membrana internos capaces de realizar todas aquellas funciones que originalmente realizaba la membrana celular. La evolucin de estos sistemas de membrana se pudo realizar desde dos vas: 1. A partir de invaginaciones de la membrana celular que habran dado lugar a la membrana nuclear, el retculo endoplsmico, el aparato de Golgi, los endosomas y los lisosomas. De esta forma se podra explicar la compleja red de comunicaciones que existe entre los componentes de este entramado de endomembranas con los dems orgnulos y el exterior celular. 2. A partir de relaciones de simbiosis entre las primitivas clulas eucariticas (urcariotas) y bacterias que fueron ingeridas (endocitadas) por estas. Esta teora explicara el hecho de que tanto las mitocondrias como los cloroplastos tengan doble membrana, adems de un genoma propio capaz de sintetizar algunas de sus protenas.

2.3. 3. Clula eucaritica. Componentes estructurales y funciones. 2.3.3.1. Membranas celulares: composicin, estructura y funciones.

La membrana plasmtica, citoplsmica o plasmalema, representa el lmite entre el medio, extracelular y el intracelular. Debido a su pequeo grosor, de unos 75 , no es observable a microscopio ptico, solo se observa con el microscopio electrnico de transmisin. A) Composicin qumica. Del anlisis bioqumico de las membranas plasmticas aisladas se deduce que estn compuestas puestas por lpidos, protenas y en menor cantidad glcidos. A. 1.Lpidos Las membranas biolgicas de todas las clulas eucariticas estn constituidas por tres tipos de lpidos: fosfolpidos, glucolpidos y esteroles (entre los que se encuentra el colesterol) Todos ellos tienen carcter anfiptico y, por tanto, cuando se encuentran en un medio acuoso se orientan formando micelas esfricas o bicapas lipdicas. Estos lpidos se distribuyen en la membrana de una manera asimtrica y heterognea, existiendo zonas ms o menos fluidas, segn el tipo de lpidos. La membrana plasmtica no es una estructura esttica: sus componentes tienen posibilidad de movimiento, lo que le proporciona una cierta fluidez. Los movimientos que pueden realizar los lpidos son:
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- De rotacin: supone el giro de la molcula lipdica en torno a su eje mayor. Es muy frecuente y el responsable, en gran medida, de los otros dos movimientos. - De difusin lateral: las molculas lipdicas pueden difundirse libremente de manera lateral dentro de la bicapa. Es el movimiento ms frecuente. - Flip-flop: es el movimiento de la molcula lipdica de una monocapa a la otra gracias a unas enzimas llamadas lipasas. Es el movimiento menos frecuente, por ser muy desfavorable energticamente. La fluidez o viscosidad es una de las caractersticas ms importantes de las membranas. Depende de factores como la temperatura (la fluidez aumenta al incrementarse la temperatura), la naturaleza de los lpidos (la presencia de lpidos insaturados y de cadena corta favorece el aumento de la fluidez) y la presencia de colesterol (endurece las membranas, reduciendo su fluidez y permeabilidad). De la fluidez dependen importantes funciones de la membrana, como el transporte, la adhesin celular o la funcin inmunitaria. Por ello, las membranas poseen mecanismos de adaptacin homeoviscosa encargados de mantener la fluidez. A.2. Protenas. Las protenas confieren sus funciones especficas y son caractersticas de cada especie. Al igual que los lpidos, poseen un movimiento de difusin lateral, con lo que contribuyen a la fluidez de la membrana. La mayora de ellas tienen estructura globular segn sea el lugar que ocupen en la membrana. A.3. Glcidos. Estn representados en su mayora por oligosacridos unidos covalentemente a los dominios extracelulares de las protenas y de los lpidos, formando glucoprotenas y glucolpidos. Su distribucin es asimtrica, solo se localizan en la cara externa de la membrana plasmtica de las clulas eucariticas. Constituyen la cubierta celular o glucoclix, a la que se atribuyen funciones fundamentales: - Protege la superficie de las clulas de posibles lesiones. - Se relaciona con las molculas de la matriz extracelular - Confiere viscosidad a las superficies celulares, permitiendo el deslizamiento de clulas en movimiento, como, por ejemplo, las sanguneas. - Presenta propiedades inmunitarias, dado que los glcidos constituyentes del glucoclix de los eritrocitos representan los antgenos propios de los grupos sanguneos. - Interviene en los fenmenos de reconocimiento celular, particularmente importantes durante el desarrollo embrionario. - Contribuye al reconocimiento y fijacin de determinadas sustancias que la clula incorporar mediante fagocitosis o pinocitosis. B) Estructura de la membrana. Modelo del mosaico fluido.

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Con los datos ofrecidos por la microscopia electrnica y los anlisis bioqumicos se han ido elaborando varios modelos a lo largo del desarrollo de la biologa celular. En la actualidad, el modelo ms aceptado es el propuesto por Singer y Nicholson [1972], denominado modelo del mosaico fluido, que presenta las siguientes caractersticas: - Considera que la membrana es como un mosaico fluido en el que la bicapa lipdica es la red cementante y las protenas estn embebidas en ella, interaccionando unas con otras y con los lpidos. Tanto las protenas como los lpidos pueden desplazarse lateralmente. - Los lpidos y las protenas integrales se hallan dispuestos en mosaico. - Las membranas son estructuras asimtricas en cuanto a la distribucin de todos sus componentes qumicos: lpidos, protenas y glcidos. Pese a ser el modelo ms completo existente hasta la fecha, la realidad es que presenta algunas limitaciones, dado que la libre difusin de lpidos y protenas en el plano de la membrana no es del todo cierta. C) Fisiologa de la membrana. La membrana acta como un filtro selectivo bidireccional. Debido a su interior hidrofbico, impide prcticamente el paso de todas las molculas solubles en agua. Sin embargo, su permeabilidad selectiva permite la salida de catabolitos y de algunas sustancias de sntesis y la entrada hacia el citosol de las sustancias necesarias para el correcto funcionamiento celular. C.1. Receptores de membrana La transduccin de seales es la respuesta de la clula a estmulos externos. La membrana desempea un papel importante en este proceso. Las clulas son capaces de responder a estmulos y seales externas gracias a ciertas molculas situadas en la membrana plasmtica denominadas receptores de membrana. Estas molculas, de naturaleza generalmente proteica, reconocen de forma especfica a una determinada molcula-mensaje. Las clulas dotadas con receptores de membrana: reciben el nombre de clulas diana. La actividad fisiolgica de las clulas diana se ve afectada por un solo tipo de molcula-mensaje. Sin embargo, una misma molcula-mensaje puede interactuar con varios receptores. Las molculasmensaje pueden ser hormonas, neurotransmisores o factores qumicos, entre los que se encuentran los factores de crecimiento. A la molcula-mensaje se la denomina primer mensajero, y al unirse a su receptor de membrana induce en este un cambio en la conformacin molecular que produce una seal de activacin de una molcula o segundo mensajero. Este acta estimulando o deprimiendo alguna actividad bioqumica. Entre las molculas que actan como segundos mensajeros se encuentran el AMP cclico (AMPc) y el GMP cclico (GPMc).

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.C.2. Transporte a travs de la membrana La comunicacin de la clula con el medio extracelular est mediada por la membrana plasmtica que la rodea y que debe permitir el intercambio de molculas necesarias para la vida celular. La membrana contiene, por tanto, los mecanismos para transportar fsicamente molculas, permitiendo que la clula ingrese los metabolitos necesarios para su metabolismo, construya sus macromolculas y, adems, libere los productos del catabolismo celular y las sustancias de secrecin. La membrana acta como una barrera semipermeable, permitiendo el paso, mediante mecanismos diversos, de determinadas sustancias a favor o en contra de un gradiente de concentracin, osmtico o elctrico. C.2.1. Transporte de molculas de baja masa molecular.

C.2.1.1 Transporte p a s i v o : Se efecta a favor de gradiente y, por tanto, sin consumo de energa. Difusin simple. Gracias a este mecanismo atraviesan la membrana sustancias solubles en ella, como 02, C02, etanol, urea, etc., deslizndose entre los fosfolpidos. Se trata de molculas sin carga o con carga neta cero. Determinadas protenas de la membrana, llamadas protenas canal, forman "canales acuosos" a travs de la bicapa lipdica que permiten el paso de sustancias con carga elctrica, incluyendo pequeos iones, a favor del gradiente de concentracin. Difusin facilitada. Transporta molculas polares, como glcidos, nucletidos, aminocidos Es llevado a cabo por las llamadas protenas transportadoras o "carriers", que se unen a la molcula que se va a transportar y sufren un cambio de conformacin. Este hecho les permite atravesar la membrana de un lado a otro con la molcula incorporada.

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C.2.1.2.Transporte activo

Se realiza en contra de gradiente, ya sea de concentracin, de presin osmtica o bien elctrico, e implica un consumo de energa. Solo pueden realizarlo algunos tipos de protenas especializadas. Bomba de sodio-potasio. Es uno de los mecanismos ms importantes de este tipo de transporte. La mayor parte de las clulas animales tienen en su medio interno una elevada concentracin de iones K +, mientras que la de Na* es superior en el medio extracelular. Las diferencias de concentracin son debidas a la actividad de la bomba de Na/K*, que bombea, de manera simultnea, tres iones Na* hacia el exterior y dos iones K+ hacia el interior, en contra del gradiente de concentracin, para lo cual se necesita consumir la energa liberada en la hidrlisis del ATP. La bomba de Na/K+ tambin tiene actividad enzimtica ATPasa. Desde el punto de vista estructural, la bomba de Na/K* est constituida por un tetrmero que consta de dos subunidades: una subunidad grande, llamada a, que se encarga del transporte, y una subunidad ms pequea, P, que mantiene la bomba unida a la membrana. Esta segunda es una glucoprotena. La bomba es responsable del mantenimiento del potencial de membrana, ya que crea a ambos lados de esta un desequilibrio elctrico. El exterior de la misma es positivo, frente al interior, que es negativo. Tambin regula el volumen celular e interviene en otros sistemas de transporte, debido a que en algunas clulas es capaz de transportar glucosa y aminocidos desde el exterior al interior. C.2.2. Transporte de molculas de elevada masa molecular Para el transporte de este tipo de molculas existen tres mecanismo principales: endocitosis, exocitosis y transcitosis. En cualquiera de ellos es fundamental el papel que desempean las llamadas vesculas revestidas.
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Estas vesculas tienen un tamao que oscila entre 50 4 200 nm de dimetro, y al microscopio electrnico se observan como vesculas rodeadas por una red de microfilamentos proteicos de clatrina y otros polipptidos menores que le dan un aspecto aterciopelado.

Endocitosis: Es el proceso por el que la clula capta partculas del medio externo; 10 hace mediante una invaginacin de la membrana en la que se engloba la partcula a ingerir, se produce la estrangulacin de la invaginacin originndose una vescula que encierra el material ingerido. Los lisosomas se unen a las vesculas para que el material ingerido sea degradado y utilizado posteriormente por la clula. Segn la naturaleza y el tamao de las partculas englobadas, se distinguen diversos tipos de endocitosis: fagocitosis (slidos), pinocitosis (lquidos) y endocitosis mediada por receptor. La endocitosis mediada por receptor es un mecanismo en el que solo se endocita la sustancia para la cual existe el correspondiente receptor en la membrana. Una vez formado el complejo ligando-receptor, se forma la correspondiente vescula endoctica revestida, que sufrir diversos procesos en el interior celular. Es un procedimiento caracterstico para la incorporacin de macromolculas como la insulina, el colesterol o el hierro, que pueden estar presentes en concentraciones no muy altas en el medio extracelular. Esta modalidad de endocitosis es tpica de clulas como los macrfagos, los histiocitos o los neutrfilos. Exocitosis: Es el mecanismo por el cual las macromolculas contenidas en vesculas citoplsmicas son transportadas desde el interior celular hasta la
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membrana plasmtica, para ser vertidas al medio extracelular. Este vertido requiere que la membrana de la vescula y la membrana plasmtica se fusionen generando un poro a travs del cual se puede liberar el contenido de la vescula citoplasmtica. En este proceso es necesaria la colaboracin del calcio y de protenas como las anexinas y la calmodulina. Cuando una vescula secretora se fusiona con la membrana plasmtica para descargar su contenido, la superficie interna de la membrana de la vescula se convierte en la superficie externa de la membrana plasmtica, mientras que la superficie externa de la membrana de la vescula secretora formar parte de la superficie interna de la membrana plasmtica. Mediante este mecanismo, las clulas son capaces de eliminar sustancias sintetizadas por la clula o bien sustancias de desecho. En toda clula existe un equilibrio entre la exocitosis y la endocitosis, para mantener la membrana plasmtica y que quede asegurado el mantenimiento del volumen celular. Transcitosis: Es el conjunto de fenmenos que permiten a una sustancia atravesar todo el citoplasma celular desde un polo al otro de la clula. Implica el doble proceso endocitosis-exocitosis. Es tpico de las clulas endoteliales que constituyen los capilares sanguneos, transportndose as las sustancias desde el medio sanguneo hasta los tejidos que rodean a los capilares. 2.3.3.2. Pared celular en clulas vegetales. La pared celular es una cubierta externa que acta como exoesqueleto; es gruesa y rgida, y la desarrollan las clulas vegetales, algas y hongos sobre la membrana plasmtica. A) Composicin qumica Es muy variada, pero en general la pared celular de todas las clulas eucariticas est formada; principalmente por polisacridos. En los hongos, el polisacrido es la quitina -polmero de la N-acetilglucosamina-, y en la mayora de las algas y plantas superiores es la celulosa. La celulosa es un polmero lineal de glucosa constituido por miles de monmeros que forman cadenas largas y fuertes que se asocian en paralelo formando microfibrillas de gran longitud. Estas microfibrillas se encuentran en la pared celular embutidas en una matriz de naturaleza proteica con otros dos polisacridos, la hemicelulosa y la pectina. B) Estructura La pared celular de las clulas vegetales recin formadas est constituida por dos capas: la lmina media y la pared primaria. Generalmente, cuando la clula: madura y finaliza el crecimiento, produce una tercera capa llamada pared secundaria, situada entre la membrana plasmtica y la pared primaria. - Lmina media. Se localiza entre las lminas primarias de clulas vecinas, excepto en los lugares donde se encuentran los meatos o plasmodesmos, que son puentes de intercomunicacin celular. Est compuesta fundamentalmente por pectina, pudiendo impregnarse con lignina cuando las clulas del xilema -tejido conductor de la savia bruta- mueren. - La pared primaria. Es propia de las clulas en crecimiento. Es delgada y flexible, permitiendo que la clula se expanda y crezca. Sus principales componentes son: celulosa, hemicelulosa y pectina. - Pared secundaria. Cuando cesa el crecimiento de la clula se diferencia una tercera capa, la pared secundaria, ms gruesa y ms rgida que la primaria, y formada por un nmero variable de estratos. Qumicamente est constituida por pequeas cantidades de pectina y por abundante celulosa que forma microfibrillas regularmente ordenadas en cada estrato, pero con una orientacin diferente en cada uno, teniendo el conjunto una orientacin helicoidal. Muchas paredes secundarias tambin contienen lignina, que es la responsable de la dureza de a madera. Se localiza preferentemente en las
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clulas de los tejidos especializados en el sostenimieto mecnico de la planta -esclernquima- y en los conductores, como el xilema. C) Funciones - Constituye un exoesqueleto que protege a la clula, le da forma y le confiere resistencia, pero sin impedir con ello su crecimiento. - Es la responsable de que la planta se mantenga erguida. - Impide que la clula se rompa, ya que interviene activamente en el mantenimiento de la presin osmtica intracelular. 2.3.3.3. Citosol y ribosomas. Citoesqueleto. Centrosoma. Cilios y flagelos. A) Citosol. La membrana plasmtica es la frontera entre el medio extracelular y el intracelular. El medio intracelular est formado por una solucin lquida denominada hialoplasma o citosol y unos orgnulos que pueden o no estar delimitados por membranas. El conjunto formado por el citosoI y todos los orgnulos (a excepcin del ncleo) recibe el nombre de citoplasma. A.1. Estructura y composicin: En las clulas eucariticas, el citosol o hialoplasma ocupa un volumen entre el 50 y el 80 % del total de la clula. Al tratarse fundamentalmente de un lquido, se puede separar del resto de los componentes celulares por centrifugacin diferencial de clulas aisladas y rotas. Tras esta centrifugacin se obtiene, en la parte superior de los tubos utilizados, una porcin denominada sobrenadante o fraccin soluble, que se corresponde con el citosol. EI citosol es un lquido acuoso y, como tal, carece de estructura. Contiene entre un 70 y un 80% de agua, mientras que el resto de sus componentes que estn en solucin son, en su mayora, de naturaleza proteica (30-20%), aunque tambin contiene iones y molculas orgnicas de pequeo tamao: aminocidos, glcidos y ATP. La variacin que existe en el citosol en cuanto a su contenido en agua se debe a que puede presentar dos estados fsicos con diferente consistencia. El estado de gel, que posee una consistencia viscosa, y el estado de sol, de consistencia fluida. Los cambios del citosol de estado sol a gel, y viceversa, se producen segn las necesidades metablicas de la clula. Estos cambios juegan un papel muy importante en la locomocin celular y, particularmente, en el movimiento ameboide. A.2. Funciones: El citosol acta como regulador del pH intracelular y, adems, en este compartimento es donde se realizan la mayora de las reacciones metablicas celulares, aunque un gran nmero de ellas requieren tambin la participacin de orgnulos citoplasmticos especficos, como las mitocondrias, los plastos o los ribosomas. Las protenas citoslicas estn representadas por un conjunto de enzimas fundamentales en el mantenimiento de la vida celular, por intervenir en diversos procesos metablicos: - Glucogenognesis, en el que se producen las reacciones de sntesis del glucgeno. - Glucogenolisis, que rene los procesos de degradacin del glucgeno. - Biosntesis de los aminocidos y su activacin para la sntesis de protenas. - Modificaciones que sufren las protenas recin formadas. - Biosntesis de los cigos grasos. - Muchas de las reacciones en las que intervienen el ATP y el ARNt. B) Ribosomas. Descubiertos en 1953, recibieron el nombre de grnulos de Palade en honor a su descubridor. Los ribosomas son partculas sin membrana, observables solamente con el microscopio electrnico, como granulaciones densas ms o menos esferoidales o elpticas. Son partculas compactas, formadas a partes iguales por ARNr y por protenas, es decir, ribonucleoprotenas. En general, existen en todas las clulas, pero son muy escasos en los glbulos rojos e
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inexistentes en los espermatozoides maduros. Se pueden encontrar en diferentes compartimentos celulares: - Libes en el citoplasma, ya sea aislados o unidos entre s formando polisomas o polirribosomas; en este ltimo caso, la unin se realiza mediante un filamento de ARNm. - Adheridos al retculo endoplsmico rugoso o a la membrana nuclear externa. - Libres en la matriz de las mitocondrias (mitorribosomas) y de los cloroplastos. B.1. Estructura En 1959, Slayter y Hall demostraron que el ribosoma estaba formado por dos subunidadesdes, y en 1970, Leake elabor un modelo tridimensional segn el cual cada ribosoma consta de dos subunidades desiguales, una grande y otra pequea, separadas por una hendidura transversal, perpendicular al eje mayor del ribosoma. Cada una de las subunidades se caracteriza por tener un coeficiente de sedimentacin distinto. Las dos subunidades ribosomales se forman en el ncliolo donde se unen sus dos componentes: el ARNr y las protenas ribosomales. Las clulas procariotas tienen un coeficiente de sedimentacin de 70 S, igual que el de los mitorribosomas y plastirribosomas. Los ribosomas de las clulas tienen un coeficiente de sedimentacin de 80 S.

B.2. Funciones Los ribosomas intervienen en la sntesis de protenas uniendo los aminocidos en un orden predeterminado. C) Citoesqueleto El citoesqueleto es el conjunto de filamentos proteicos, situados en el citosol, que pueden formar estructuras reticulares ms o menos complejas y que contribuyen a la morfologa celular, a la organizacin interna de los orgnulos citoplsmicos y al movimiento celular. El citoesqueleto est formado por microfilamentos de actina, filamentos intermedios y microtbulos. C.1. Microfilamentos de actina Se encuentran en las clulas eucariticas y son imprescindibles para el desarrollo de los movimientos celulares. Estructura y composicin Los microfilamentos de actina son estructuras con extremos de diferente polaridad y que pueden polimerizarse y despolimerizarse con facilidad. Se presentan de dos formas:

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- Actina G. Representa el 50 % de la actina existente en una clula. Se trata de una protena globular asociada a otra protena, la profilina, que evita su polimerizacin; de ah que se denomine actina no polimerizada. - Actina F. Es un polmero constituido por dos hbras de actina G de 4 nm de dimetro enrolladas en doble hlice en sentido dextrgiro. Se denomina tambin actina polimerizada. Adems de la actina, estos microfilamentos llevan otras protenas denominadas protenas asociadas, que modifican sus propiedades y se clasifican en dos grupos: - Protenas estructurales. Vinculina o distrofina. - Protenas reguladoras. Miosina. Funciones de los microfilamentos de actina. - Contraccin muscular - Formacin del esqueleto mecnico de las microvellosidades. - Cariocinesis o clivaje celular. Se forma un anillo contrctil. - Movimiento ameboide. Mediante la formacin de pseudpodos.

C.2. Filamentos intermedios Se denominan as porque su dimetro (unos 10 nm) es intermedio entre el de los microfilamentos de actina y el de los microtbulos. Estructura y composicin Son estructuras formadas por protenas fibrosas, muy resistentes, estables y que se encuentran en todas las clulas eucariticas, pero especficas para cada tipo celular. Se pueden agrupar en tres clases: - Filamentos de queratina. Confieren una elevada resistencia mecnica. - Los neurofilamentos. Localizados en el axn y en las dendritas de las neuronas. Funciones Realizan funciones estructurales, evitando rupturas de membranas celulares. Contribuyen adems al mantenimiento de la forma celular. C.3. Microtbulos Son formaciones cilndricas, uniformes y rectilneas, que se encuentran dispersas por el citoplasma o formando parte de cilios y centrolos. Son estructuras dinmicas, ya que se pueden formar o bien destruir segn las necesidades fisiolgicas de la clula.
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Estructura y composicin Los microtbulos tienen una longitud variable y al seccionarlos transversalmente aparecen formados por trece subunidades o protofilametnes, dejando una cavidad central. Qumicamente estn formados por una protena llamada tubulina. Funciones - Formacin del huso mittico. - Transporte intracelular de vesculas a travs del citoplasma. Tambin transportan, asociados a ellos, algunos orgnulos, como las mitocondrias. - Movimiento de la clula mediante la formacin de pseudpodos y constituyendo el armazn de los cilios y de los flagelos. D) Centrosoma El centrosoma o centro celular es una estructura, sin membrana, presente en todas las clulas animales susceptibles de dividirse. Salvo algunas excepciones, no existe en clulas vegetales. D.1. Estructura y composicin El centrosoma consta de un cuerpo central, formado por dos centrolos, rodeado por el material pericentriolar, electrnicamente denso y amorfo. En la actualidad, al conjunto de estos dos componentes se le llama centro organizador de microtbulos (COMT). Al microscopio electrnico se observa que ambos centrolos se disponen uno perpendicular al otro. Cada centrolo es una estructura cilndrica de 0,2 m de dimetro cuyas paredes estn formadas por nueve grupos de tres microtbulos o tripletes formando la denominada estructura 9.+ O. Los tres microtbulos que constituyen cada triplete estn estrechamente asociados los unos a los otros y ligeramente desplazados con respecto a la generatriz de cilindro.

Los microtbulos que forman los tripletes se denominan microtbulo A (el ms interno y ms prximo al eje del cilindro), microtbulo C (el ms externo) y microtbulo B (situado entre los anteriores). Los tripletes que se encuentran adyacentes estn unidos entre si mediante una protena, la nexina. Origen y funcin del centrosoma Intervienen en la formacin de los nuevos centrolos y de los corpsculos basales de los cilios. El centrosoma es el centro organizador de los microtbulos. De l derivan todas aquellas estructuras que, como las cilios o los flagelos, estn formadas por microtbulos, incluido el huso mittico. En el caso de las clulas vegetales, que carecen de centrosoma, los microtbulos se forman a partir de una zona difusa que hace las veces de centro organizador de microtbulos. E) Cilios y flagelos Son derivados centriolares a modo de expansiones citoplsmicas filiformes mviles localizados en la superficie libre de algunas clulas. Los cilios son
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cortos y muy numerosos, mientras que los flagelos son largos y escasos; generalmente, solo existe uno. E.1. Ultraestructura y composicin Los cilios y los flagelos responden a un mismo patrn estructural. Estn formados por un tallo o axonema, una zona de transicin, el corpsculo basal y las races ciliares, que no siempre estn presentes. - Tallo o axonema. Contiene en su interior nueve pares de microtbulos perifricos y un par de microtbulos centrales, todos paralelos al eje mayor del cilio o del flagelo, formando una estructura del tipo 9 + 2. - Zona de transicin. Es la base del cilio o del flagelo. En esta zona desaparecen el par de tbulos centrales y aparece la denominada placa basal, que conecta la base del cilio o del flagelo con la membrana plasmtica. - Corpsculo basal. Presenta una ultraestructura idntica a la del centrolo y, por tanto responde al modelo 9 + 0. - Races ciliares. Son unos microfilamentos estriados que salen del extremo inferior del corpsculo basal, cuya funcin parece que est relacionada con la coordinacin del movimiento de los cilios, ya que propagan el estmulo.

E.2. Funciones de los cilios y de los flagelos Su funcin est relacionada con el movimiento, ya que permiten que una clula se pueda desplazar activamente a travs de un medio lquido, como es el caso de algunos protozoos o de los espermatozoides. Tambin pueden provocar que sea el lquido o las partculas extracelulares situadas sobre la superficie ciliar las que se muevan. Es lo que ocurre en las clulas que recubren las trompas de Falopio y en las clulas epiteliales ciliadas, tanto de la trquea como de los bronquios.

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2.3.3.4. Orgnulos celulares: mitocondrias, peroxisomas, cloroplastos, retculo

endoplasmtico, Complejo de Golgi, lisosomas y vacuolas. A) Mitocondrias Son orgnulos celulares descritos por primera vez por Altman en 1886, a los que denomin bioblastos. Estn presentes en todas las clulas eucariticas aerobias. En la actualidad se sabe que son orgnulos capaces de realizar la mayora de las oxidaciones celulares y producir la mayor parte del ATP de la clula. Debido a su tamao y bajo ndice de refraccin, su observacin in vivo es muy difcil. Sin embargo, pueden visualizarse al microscopio ptico utilizando un colorante vital como el verde Jano.

A.1. Ultraestructura: Al microscopio electrnico, las mitocondiras se observan formadas por: - Matriz mitocondrial. Contiene: o Molculas de ADN mitocondrial, circular, bicatenario. o Molculas de ARN mitocondrial formando los mitorribosomas. o Enzimas. o Iones. - Cmara externa o espacio intermembrana. Membrana mitocondrial interna. Presenta unos repliegues hacia la cmara interna denominados crestas mitocondriales. Ms de 50 protenas en esta membrana. ATP-sintetasa, protenas de la cadena respiratoria, enzimas de la -oxidacin de los cidos grasos, enzimas de la foforilacin oxidativa y transferasas. - Membrana mitocondrial externa. Partculas elementales F. Sobre la cara externa de las crestas. Son complejos de ATP-sintetasa. A. 2. Distribucin y morfologa Las mitocondrias se encuentran distribuidas de manera uniforme por todo el citoplasma, existiendo numerosas excepciones relacionadas con las necesidades energticas de la clula, de las que tambin depende su nmero, difcil de precisar, dado que vara entre amplios lmites. Al conjunto de mitocondrias de una clula se le denomina condrioma celular. En una
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clula heptica, por ejemplo, pueden existir entre 1000 y 1600 mitocondrias. Se dividen por biparticin, lo que, unido a la presencia de mitorribosomas 70S y de ADN circular bicatenario hace suponer que se originaron por endosimbiosis con una bacteria primitiva. Su forma es muy variable, observndose al microscopio ptico como formaciones filamentosas o granulares. En realidad se trata de estructuras plsticas que pueden cambiar de aspecto, fusionarse, dividirse, etc., segn el estado funcional de la clula. Su dimetro suele ser constante y oscila entre las 0,5 y 1m, pero la longitud es muy variable, pudiendo alcanzar hasta 7m. A.3. Funciones - Ciclo de Krebs. - Cadena respiratoria. - Fosforilacin oxidativa. - La -oxidacin de los cidos grasos. B) Peroxisomas Son pequeos rgnulos con una gran variedad de enzimas implicadas en distintas rutas metablicas, como la oxidacin de los cidos grasos, el ciclo del glioxilato y la fotorrespiracin. Son capaces de llevar a cabo reacciones de oxidacin de sustratos diferentes gracias a unas enzimas denominadas oxidasas. En la reaccin se produce perxido de hidrgeno (H2O2), sustancia muy txica para la clula que se elimina gracias a otra enzima de los peroxisomas, la catalasa. Cloroplastos Son orgnulos celulares exclusivos de las clulas vegetales. Descritos por Schimper en 1883, aunque ya haban sido observados en algunas algas filamentosas por Leeuwenhoek. Se caracterizan por poseer pigmentos (clorofila y carotenoides) y por su capacidad para sintetizar y acumular sustancias de reserva (almidn, aceites y protenas). Se clasifican en dos grandes grupos: - Leucoplastos. Son plastos que carecen de pigmentos y en la mayora de los casos almacenan diversas sustancias, como almidn (amiloplastos), grasas (oleoplastos) y protenas (proteoplastos). Se localizan en las clulas vegetales que forman los cotiledones, los esbozos foliares del tallo y ciertas zonas de la raz. - Cromoplastos. Son plastos que llevan en su interior un pigmento que les da color. As, por ejemplo, los que contienen clorofila son de color verde y se llaman cloroplastos, mientras que los que tienen ficoeritrina son de color rojo y se denominan rodoplastos. C.1. Cloroplastos Son los plastos de mayor importancia biolgica, ya que por medio de la fotosntesis transforman la energa lumnica en energa qumica qua puede ser aprovechada por los vegetales. Su morfologa es diversa. En los vegetales superiores suelen ser ovoides o lenticulares, pero en algunas algas tienen formas diferentes: de hlice, de copa. El tamao vara, pero por trmino medio suelen medir de 2 a 6 m de dimetro y de 5 a 10 m de longitud. En las plantas de umbra los cloroplastos son de mayor tamao. Se encuentran localizados en el citoplasma. Estn sometidos a movimientos de ciclosis debido a la corrientes citoplsmicas. C)

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C.2. Ultraestructura

Al microscopio electrnico se observan como orgnulos constituidos por una doble membrana (externa e interna), un espacio intermembranoso y un espacio interior o estroma, en el seno del cual se localizan formaciones membranosas denominadas tilacoides. Los tilacoides tienen forma de sculos aplanados, que se pueden encontrar aislados o superpuestos, como si se tratara de una pila de monedas. Cada apilamiiento se denomina granum. El conjunto de todos los granum es la grana. Igual que las mitocondrias, se dividen por biparticin, lo que, unido a la presencia de ribosomas 70S y de ADN circular bicatenario hace suponer que se originaron por endosimbiosis con una bacteria primitiva. C.3. Funciones Las funciones principales que realizan los cloroplastos son: - Fotosntesis. - Biosntesis de cidos grasos. - Reduccin de nitratos a nitritos. D) Retculo endoplasmtico Su nombre procede de la primitiva creencia de que se trataba de una red de canalculos exclusivamente de localizacin endoplsmica. Hoy da se sabe que es un sistema membranoso: intracelular que se extiende entre las membranas plasmtica y nuclear. Constituye ms de la mitad del componente membranoso total de una clula. La membrana que lo delimita se contina con la membrana nuclear y la membrana plasmtica. En consecuencia, el contenido lquido, del citoplasma queda dividido en dos compartimentos: el espacio luminal o cisternal contenido en el interior del retculo endoplsmico y el espacio citoslico que comprende el exterior del retculo endoplsmico. En 1950, Sjostrand, Palade y Porter lo describieron al microscopio electrnico como una red membranosa citoplsmica constituida por dos compartimentos interconectados, pero con distinta composicin qumica y funcin: el retculo endoplsmico rugoso (RER), ergastoplasma o citomembranas y el retculo endoplsmico liso (REL) o -citomembranas.

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D.1. Estructura del retculo endoplsmico rugoso Se denomina as porque lleva adheridos ribosomas a la cara citoslica de sus membranas. La adhesin de los ribosomas se lleva a cabo por su subunidad mayor, estando esta unin mediada por la presencia en la membrana reticular de unas glucoprotenas transmembranosas grupo de las riboforinas, que no se encuentran en el REL. Est constituido por sacos aplanados o cisternas de 400 de espesor y vesculas de tamao muy variable, desde 5000 de dimetro. Su lumen est ocupado, en general, por un material poco denso, aunque en ocasiones puede presentar inclusiones densas o cristales. El retculo endoplsmico rugoso se encuentra muy desarrollado en aquellas clulas que participan activamente en la sntesis de protenas, como las clulas acinares del pncreas o las clulas secretoras de moco que revisten el conducto digestivo. Est presente en todas las clulas, excepto en las procariticas y en los glbulos rojos de mamferos, aunque su distribucin depende del tipo de clula que se trate. D.2. Funciones del retculo endoplsmico rugoso - Sntesis y almacenamiento de protenas. - Glucosilacin de las protenas. D.3. Estructura del retculo endoplsmico liso

Es una red tubular, constituida por finos tbulos o canalculos interconectados y cuyas membranas se continan con las del RER, pero sin llevar adheridos ribosomas. La mayor parte de las clulas tienen un retculo endoplsmico liso escaso, pero es particularmente abundante en: Clulas musculares estriadas, en las que constituye el llamado "retculo sarcoplsmico", muy importante en la liberacin del Ca2+ que participa en la contraccin muscular. - Clulas intersticiales ovricas, de Leydig del testculo y clulas de la corteza suprarrenal, secretoras de hormonas esteroideas. - Hepatocitos, donde interviene en la produccin de partculas lipoproteicas para su exportacin. D.4. Funciones del retculo endoplsmico liso - Sntesis de lpidos. - Contraccin muscular. La liberacin del calcio acumulado en el interior del retculo sarcoplstico es indispensable para los procesos de contraccin muscular. - Detoxificacin. Consiste en la eliminacin de todas aquellas sustancias que puedan resultar nocivas al organismo. Las clulas implicadas en la detoxificacin pertenecen a rganos como la piel, el intestino, el pulmn, el hgado o el rin. - Liberacin de glucosa a partir de los grnulos de glucgeno presentes en los hepatocitos. E) Complejo de Golgi En 1898, Camilo Golgi, cientfico italiano contemporneo de Cajal, observando con el microscopio ptico neuronas impregnadas con sales de plata, descubri alrededor del ncleo una redecilla que llam "aparato
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reticular interno". Aos ms tarde, con la aplicacin del microscopio electrnico, se identific como un conjunto de sacos membranosos aplanados o cisternas y una serie de vesculas asociadas, denominndose a todo el conjunto aparato o complejo de Golgi. Se encuentra en todas las clulas eucariticas, excepto en los glbulos rojos de mamferos, y su localizacin es relativamente fija para cada tipo de clula.

E.1. Ultraestructura El microscopio electrnico permiti constatar que el complejo de Golgi est constituido por una o varias unidades morfofuncionales denominadas dictiosomas, que constituyen un sistema membranoso formado por la agrupacin de varios sacos aplanados (sculos o cisternas) y vesculas asociadas. Los dictiosomas pueden presentar continuidad con otros componentes del sistema de endomembranas, como es el retculo endoplsmico. E.2. Funciones - Mecanismo de transporte golgiano. Las proteinas exportadas por el RER van englobadas en vesculas que se unen a la regin cis. Sufren aqu una fosforilacin, si es que llegan sin fosforilar. - Glucosilacin de lpidos y protenas. Produce el ensamblaje de oligosacridos a lpidos y protenas para formar glucolpidos y glucoprotenas. F) Lisosomas Son orgnulos que contienen en su interior alrededor de 50 enzimas hidrolasas cidas. Los lisosomas actan como un sistema digestivo celular, degradando el material captado del exterior por pinocitosis o fagocitosis y digiriendo material obsoleto de la propia clula por autofagia. Los lisosomas que se forman a partir de vesculas que se desprenden del aparato de Golgi son conocidos como lisosomas primarios. Cuando la clula incorpora por endocitosis el material, se forma una vescula endoctica. Es entonces cuando un lisosoma primario se adhiere a esta formando un lisosoma secundario, en el que las enzimas hidrolticas degradan las sustancias para que puedan ser utilizadas por la clula. Cuando el material que se necesita digerir proviene del interior de la clula, se habla de autofagia: se forma una vescula o autofagosoma a la que se une
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un lisosoma primario, que realiza la digestin correspondiente.

G) Vacuolas Son orgnulos celulares, a modo de cisternas membranosas, ms caractersticas y abundantes en las clulas vegetales, pero no exclusivas de ellas. Consta de una membrana que la delimita del resto del citoplasma y que recibe el nombre de membrana tonoplstica o tonoplasto. En el interior se encuentra el llamado jugo vacuolar amorfo, cuyo principal componente es el agua. Las funciones principales son: - Mantenimiento de la turgencia celular. - Digestin celular. - Almacenamiento de sustancias diversas. De reserva y, en ocaciones, sustancias txicas.

2.3.3.5. Ncleo: envoltura nuclear, nucleoplasma, cromatina y nuclolo. En 1830, Brown estableci que el ncleo era una constante dentro de la estructura celular; pero hoy da, aun manteniendo este concepto, hay que precisar que esto es as solo en las clulas eucariticas, tanto vegetales como animales. El ncleo como orgnulo celular alberga en su interior la informacin gentica en forma de ADN y es el lugar donde se realiza la replicacin del ADN y la sntesis de todos los ARN. Estructuralmente, el aspecto del ncleo depende del momento del ciclo celular en el que se encuentre la clula: se habla de ncleo interfsico (mal llamado antiguamente ncleo en reposo), cuando la clula no est en fase de divisin, y de ncleo mittico, en el que se diferencian los cromosomas. El ncleo est presente en todas las clulas eucariticas, excepto en los glbulos rojos de los vertebrados superiores y en las clulas epidrmicas del estrato crneo superficial.
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 Componentes. El ncleo consta de una envoltura nuclear y una matriz nuclear o nucleoplasma en cuyo seno se encuentran la cromatina (ADN y protenas asociadas) y el nuclolo (donde se sintetiza el ARN ribosmico). Forma. Es muy variable; depende del tipo de clula y del momento del ciclo en el que est.
Tamao. Puede oscilar entre las 5 y las 25 m de dimetro, pero dentro de un mismo tipo de clula es constante. Generalmente, el tamao del ncleo es proporcional al que tiene la clula, ocupando normalmente un 10 % del volumen total de la misma.

Nmero. Suele haber un ncleo por clula, pero existen algunas excepciones. Por ejemplo, existen clulas anucleadas, como los eritrocitos de los mamferos, que han perdido el ncleo durante su proceso de diferenciacin, y otras como los paramecios (protozoos ciliados), que de manera constante presentan dos ncleos: un macroncleo y un microncleo. En los hepatocitos tambin es normal la situacin binucleada, mientras que los osteoblastos y las clulas musculares estriadas esquelticas son plurinucleadas. La condicin plurinucleada de algunas clulas puede originarse mediante dos mecanismos: a) Divisin sucesiva de un primitivo ncleo sin que ocurra la consiguiente divisin celular, dando origen a una clula denominada plasmodio. b) Fusin de varias clulas uninucleadas, denominndose sincitio a la clula resultante. Posicin. La posicin del ncleo es caracterstica de cada clula En las clulas embrionarias (meristemos, blastmeros) ocupa una posicin central; en las adiposas, ocupadas en su mayora por una gran gota de grasa, el ncleo queda lateralizado; en las secretoras se sita basalmente, quedando el resto de orgnulos citoplsmicos entre l y el polo secretor.

A) La envoltura nuclear La envoltura nuclear representa una compleja organizacin en la frontera entre el ncleo y el citoplasma de una clula eucaritica. Al microscopio ptico, la envoltura nuclear se observa solo como un "lmite" entre el citoplasma y el ncleo, pero al microscopio electrnico se aprecia que, en realidad, es una doble membrana con un espacio intermembranoso.
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 La membrana nuclear externa tiene una anchura de 7 a 8 nm y al microscopio electrnico muestra una ultraestructura trilaminar. Sobre su cara externa o citoplsmica presenta ribosomas adosados. Esta membrana suele estar unida a la del retculo endoplsmico, sea liso o rugoso. El espacio perinuclear o intermembranoso comprendido entre las dos membranas tiene una anchura de 10 a 20 nm, aunque en algunos lugares puede presentar dilataciones de hasta 70 nm. Se encuentra en continuidad con el espacio reticular. La membrana nuclear interna presenta, asociado a ella, en la cara nucleoplsmica, un material electrodenso de natulaleza fibrilar denominado lmina fibrosa o corteza nuclear. Se trata de tres polipptidos o lminas dispuestos en tres capas y con caractersticas semejantes a las de los filamentos intermedios del citoesqueleto. A la corteza nuclear se le atribuyen funciones de servir de anclaje al material cromatnico y regular el crecimiento de la envoltura nuclear.

B) Poros nucleares En todos los ncleos, las dos membranas que forman la envoltura nuclear se fusionan en algunos lugares, dando origen a unas perforaciones circulares denominadas poros nucleares, que para cada tipo de clula presentan el mismo dimetro. Se trata de estructuras dinmicas, capaces de formarse y desaparecer, dependiendo del estado funcional de la propia clula. Son canales acuosos que regulan los intercambios de molculas entre el ncleo y el citosol. Permiten la circulacin libre de molculas hidrosolubles, y en el caso de macromolculas como e ARN o las protenas, que no son hidrosolubles, regulan mecanismos de transporte activo. Cuando se utiliza el microscopio electrnico se observa que los poros no son simples orificios en la envoltura nuclear, sino estructuras complejas que se denominan complejo de poro. Constan de: o Un anillo o estructura cilndrica que se proyecta tanto hacia la cara citoplsmica como a la nucleoplsmica, y que est constituido por ocho partculas proteicas de unos 20 nm de dimetro dispuestas en octgonos. Asociado a las partculas se encuentra un material denso, el diafragma, que disminuye la luz del poro, dejando libre solo unos 10 nm. o En ocasiones se ha identificado en el centro del poro un grnulo central, que en realidad se corresponde a ribosomas recin formados o sustancias que van de un lado a otro de la membrana nuclear. Se han descrito fibrillas proteicas que se extienden a ambos lados del poro. La cantidad de poros nucleares es muy variable. En los ncleos de eritrocitos de aves es de 2-4 poros/m2, en la membrana nuclear de un ovocito puede haber hasta 60 poros/ m2. En general, las clulas que tienen mayor actividad transcripcional (hepatocitos, neuronas y fibras musculares) contienen un elevado nmero de poros, mientras que
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las de menor actividad poseen menos. Una clula de mamfero contiene de media unos 3 000 poros nucleares. C) La cromatina En el ncleo de las clulas eucariticas el ADN est asociado a protenas formando una estructura empaquetada y compacta denominada cromatina, que representa el genoma de las clulas eucariticas. Debe su nombre [cromatina, del griego chroma, coloreado] a la avidez tintorial que presenta por los colorantes bsicos utilizados en microscopia ptica. La cromatina consta de ADN y protenas. Las protenas pueden ser de dos tipos: histonas y no histonas. En contraste con el escaso nmero de protenas histnicas, son muy numerosas las protenas no histnicas que se han aislado de la cromatina. Aproximadamente la mitad corresponden a enzimas implicadas en la replicacin, transcripcin y regulacin del ADN. La observacin de la cromatina al microscopio electrnico revela una constitucin fibrilar. Cada fibra cromatnica aislada presenta el aspecto de un "collar de cuentas". A cada "cuenta", con forma esfrica, discoidal o ligeramente cilndrica, Dudet y colaboradores [1975] le dieron el nombre de nucleosoma. Cada nucleosoma consta de un ncleo y de un filamento de ADN que lo rodea; cada ncleo est formado por un octmero de histonas. En el momento de iniciar la mitosis, la cromatina se compacta para formar los cromosomas. Se diferencian dos tipos de cromatina: - Eucromatina: de aspecto claro, difuso, es el 10% de la cromatina celular, donde se da la transcripcin. - Heterocromatina: de aspecto denso, es el 90% restante de la cromatina, que no se transcribe.

D) Nucleoplasma Tambin llamado carioplasma o matriz nuclear. Es una matriz semifluida situada en el interior del ncleo que contiene tanto el material cromatico [ADN y protenas cromosomales] como el no cromatinico [protenas]. Consta de varios componentes. o Los grnulos de intercromatina miden 20-25 nm de dimetro y contienen particulas de ribonucleoproteinas y diversas enzimas: ATPasa, GTPasa, glicerofosfatasa y pirofosfatasa. Estos grnulos se encuentran diseminados por todo el ncleo.

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o Los grnulos de pericromatina miden 30-50 nm y se localizan en la periferia de la cromatina. Estn formados por fibrillas densamente empaquetadas de ARNr de bajo peso molecular. o Las partculas de ribonucleoprotena nucleares pequeas. E) Nucleolo Fue descubierto por Fontana (1781) como una estructura constante en el interior del ncleo celular. Generalmente hay uno por ncleo, pero no son raras las clulas en las que se observan dos o ms, como, por ejemplo, en algunas neuronas o ciertos hepatocitos. En un orgnulo ms o menos redondeado, muy refringente, basfilo, debido a su alto contenido en ARN y protenas, y, generalmente, localizado prximo a la envoltura nuclear. El tamao del nuclolo est relacionado con el grado de actividad celular. Es mayor en las clulas que presentan una gran actividad de sntesis de protenas, llegando a ocupar hasta el 25 % del volumen nuclear. I A microscopia ptica y utilizando tcnicas de tincin argnticas, se pone de manifiesto cmo algunos nuclolos presentan un componente filamentoso muy replegado sobre s mismo o nucleolonema, embutido en un componente amorfo o parte amorfa. El nuclolo solo se observa con microscopa ptica durante el periodo interfsico, ya que durante la mitosis desaparece al mismo tiempo que los cromosomas van alcanzando su mximo nivel de compactacin. Aparece de nuevo posteriormente durante la telofase. Funciones del nucleolo: En el nuclolo se realiza la sntesis del ARNr y el procesado y empaquetamiento de subunidades ribosomales que posteriormente son exportadas al citosol. Es indispensable para el desarrollo normal de la mitosis, si bien desaparece durante la misma.

2.4. Clula eucaritica. Funcin de reproduccin. 2.4.1. El ciclo celular: interfase y divisin celular. Las clulas que pierde un organismo deben ser sustituidas por otras; de ello se ocupa la divisin celular, que permite obtener, a partir de una clula, dos clulas hijas idnticas a su progenitora. Este proceso supone para la clula madre: Duplicar su material hereditario, que luego ha de repartirse equitativamente entre las clulas hijas. Dividir en dos su citoplasma. El ciclo celular es el conjunto de cambios que sufre una clula desde que se ha formado, por divisin de otra preexistente, hasta que se divide para dar origen a dos clulas hijas. Su duracin vara de unas pocas horas a varios aos, segn el tipo celular. En las clulas eucariticas el ciclo celular se divide en dos fases: la interfase, en la que la clula crece y sintetiza diversas sustancias, y la fase M, en la que ocurren la mitosis y la citocinesis. La fase M no suele durar ms de una o dos horas. As pues, la duracin del ciclo celular depende fundamentalmente de la duracin de la interfase. Interfase Es el periodo de tiempo que transcurre entre dos mitosis sucesivas, y ocupa la mayor parte del ciclo celular. Durante la interfase hay una gran actividad metablica en la que se produce un aumento del tamao de la clula.

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Se distinguen tres periodos o fases: Fase G1. Su nombre viene del ingls gap, intervalo. En ella se sintetizan las protenas necesarias para que la clula aumente de tamao. Comienza cuando termina la fase M y dura hasta que se inicia la replicacin del ADN. Su duracin es muy variable, dependiendo del tipo celular. En las clulas que no entran nunca en mitosis esta fase es permanente y recibe el nombre de G0. Se dice entonces que la clula se encuentra en estado de reposo o quiescencia. Se da en clulas que han sufrido un proceso importante de diferenciacin, como las neuronas o las fibras musculares estriadas. Fase S. Se produce la replicacin del ADN y se sintetizan las histonas [S de sntesis]. En los mamferos esta fase dura unas siete horas. Como resultado de la replicacin, cada cromosoma est formado por dos cromtidas, que estn unidas mediante el centrmero. Fase G2. Tiene una duracin muy corta [alrededor de tres horas en los mamferos], y en ella la clula puede aumentar ligeramente de tamao. Se transcriben y traducen genes que codifican las protenas, necesarias para que la clula se divida, y se duplican los centrolos. Esta fase finaliza en el momento en que se inicia la condensacin de los cromosomas para comenzar la mitosis. 2.4.2. Mitosis: etapas y significado biolgico de la mitosis. Tras la replicacin del ADN se puede llevar a cabo la divisin celular o fase M. la divisin celular consta de dos procesos: la mitosis propiamente dicho, en la que se produce la divisin del ncleo, y la citocinesis, que consiste en la divisin del citoplasma. El objetivo de la divisin celular es producir dos clulas hijas con idntico material gentico. La mitosis, tambin llamada cariocinesis (del griego, "movimiento del ncleo"), tiene por objeto repartir de manera equitativa el material hereditario, que se ha duplicado en la fase S, entre las dos clulas hijas que se van a producir. Se divide en varias etapas sucesivas. Profase Se produce una condensacin de la cromatina, con lo que los cromosomas comienzan a hacerse visibles. Como ya se ha producido la replicacin durante la fase S, cada uno est formado por dos cromtidas unidas por el centrmero. Los centrolos, que se duplicaron en la fase G2, comienzan a separarse hasta que se sitan en polos opuestos de la clula. A medida que se separan los centrolos, se forman entre ellos los microtbulos polares, que constituyen el huso acromtico o huso mittico.
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 La membrana nuclear y el nuclolo desaparecen, y los cromosomas se dispersan por el citoplasma. En los centrmeros de cada cromosoma se forman los cinetocoros, a partir de los cuales se originan los microtbulos cinetocricos.

Metafase Los cromosomas alcanzan el grado mximo de condensacin. El huso acromtico est formado y se extiende entre los dos polos de la clula. Los microtbulos cinetocricos empujan a los cromosomas de manera lenta y progresiva hasta situarlos en el plano medio del huso acromtico, donde formar la placa ecuatorial o metafsica. Los centrmeros se colocan perpendiculares al eje formado por los dos centrolos, de manera que cada una de las cromtidas que forman el cromosoma metafsico queda orientada hacia un polo.

Anafase Las dos cromtidas de cada cromosoma inician de forma simultnea un movimiento de separacin hacia polos opuestos arrastradas por los microtbulos cinetocricos, que se acortan por despolimerizacin. La separacin de ambas cromtidas se inicia por el centrmero y de forma sincronizada en todos los cromosomas de la placa metafsica. Los microtbulos polares se alargan por polimerizacin y separan los dos polos del huso acromtico. La anafase concluye cuando los cromosomas llegan a los polos.

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Telofase Los nuclolos reaparecen y los cromosomas comienzan a descondensarse, con lo que dejan de ser visibles. La membrana nuclear reaparece alrededor de cada grupo de cromosomas, delimitndose as dos zonas nucleares, una en caca polo de la clula. Las membranas se forman a partir del retculo endoplsmico.

2.4.3. Citocinesis en clulas animales y vegetales. A) Citocinesis La divisin celular no termina con la mitosis; con ella se ha repartido la dotacin gentica de la clula, pero an es necesario que el citoplasma se divida entre las dos clulas hijas y que los orgnulos citoplasmticos se repartan de la manera ms equitativa posible. Este proceso se denomina citocinesis, y ocurre de modo diferente en las clulas animales y vegetales: En las clulas animales se produce un estrangulamiento que divide en dos a la clula madre. A la altura de la placa ecuatorial aparece un anillo contrctil formado por filamentos de actina y miosina. Este anillo se va estrechando y origina un surco de segmentacin que cada vez se hace ms estrecho hasta que se produce el estrangulamiento total y la separacin de las dos clulas hijas. En las clulas vegetales no existe estrangulamiento del citoplasma. A la altura de la placa ecuatorial se forma un tabique de separacin entre las dos clulas hijas denominado fragmoplasto. Se forma por fusin de las vesculas del aparato de Golgi, que contienen los componentes que originan la pared celular, y los restos de los microtbulos que formaban el huso acromtico. El fragmoplasto no se cierra completamente, sino que se halla perforado por finos puentes citoplasmticos o plasmodesmos que aseguran la comunicacin entre las dos clulas hijas.

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B) Tipos especiales de divisin celular El proceso de divisin celular que hemos descrito da como resultado dos clulas hijas iguales. Se denomina biparticin o divisin binaria. Aunque es el tipo de divisin mas frecuente, no siempre ocurre as. A veces el reparto de material citoplasmtico es asimtrico o se produce un mayor nmero de clulas hijas. Gemacin. Se produce un reparto asimtrico de material citoplsmico. El huso acromtico se desplaza a la periferia de la clula y la clula hija surge, como una yema, de un lateral de la madre. A veces la clula hija permanece unida a la madre y a su vez se reproduce, formndose cadenas de clulas. Este tipo de divisin se da, por ejemplo, en las levaduras. Esporulacin. Se producen varias mitosis sucesivas en el interior de una clula, sin que ocurra la citocinesis, de modo que se forman clulas multinucleadas. Cuando se alcanza un cierto nmero de ncleos, se rodean de una membrana plasmtica y una porcin de citoplasma y se liberan por rotura de la clula madre. Este proceso es frecuente en los protozoos. 2.4.4. La meiosis. Etapas e importancia biolgica. A) Etapas. Es un tipo de divisin celular cuyo objetivo es producir clulas haploides, es decir, con la mitad del contenido de ADN. Estas clulas son los gametos de los organismos que se reproducen sexualmente. Las caractersticas bsicas de la meiosis son: A partir de una clula diploide se obtienen cuatro clulas haploides genticamente diferentes entre s y diferentes de la clula madre. El nmero de cromosomas se reduce a la mitad (meiosis viene del griego, "disminucin"). Se produce un fenmeno de recombinacin gnica o intercambio de material hereditario entre las cromtidas de los cromosomas homlogos. La meiosis consta de dos divisiones sucesivas, la meiosis I y la meiosis II, que al igual que la mitosis estn divididas en varias etapas. En la interfase previa a la meiosis I, como resultado de la replicacin del ADN, se produce la duplicacin de los cromosomas, que quedan formados por dos cromtidas unidas por el centrmero.

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A.1. Meiosis I En esta primera divisin meitica se aparean los cromosomas homlogos, que ya estn duplicados, es decir, formados cada uno por dos cromtidas,y se produce el intercambio de material hereditario. En ella el nmero de cromosomas se reduce a la mitad (n), aunque cada uno de ellos est formado por dos cromtidas. Se divide en fases parecidas a las de la mitosis. - Profase I. Es la etapa ms compleja y est dividida a su vez en cinco subfases. En ella se recombinan los cromosomas homlogos, intercambiando genes, lo que aumenta la variabilidad. - Metafase I. Es similar a la metafase mittica, pero con la diferencia de que en la placa ecuatorial se disponen las ttradas, unidas por los quiasmas. Los centrmeros de cada par de homlogos se disponen en lados opuestos de la placa, pero los cinetocoros de las cromtidas que pertenecen al mismo cromosoma estn fusionados y se orientan hacia el mismo polo. - Anafase I. Los pares de cromosomas homlogos comienzan a separarse al ser arrastrados por las fibras del huso acromtico hacia polos opuestos de la clula. Como los dos cinetocoros de un cromosoma se han fusionado, no se separan cromtidas como en la anafase mittica, sino cromosomas completos. Cada cromosoma de un par de homlogos, formado por dos cromtidas, en las que ha habido recombinacin gentica, se dirige a un polo de la clula. - Telofase I. Reaparecen la membrana nuclear y el nuclolo, mientras que los cromosomas sufren una pequea descondensacin. Se obtienen dos clulas hijas, con la mitad de los cromosomas que tena la clula madre, y con dos cromtidas cada cromosoma.

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A.2. Meiosis II Tambin recibe el nombre de segunda divisin meitica. Se desarrolla del mismo modo que la mitosis y ocurre simultneamente en las dos clulas hijas. Separa las dos cromtidas que formaban cada uno de los cromosomas. Antes de comenzar se produce una corta interfase en la que no hay sntesis de ADN. Sus fases son las mismas que las de la mitosis. - En la profase II desaparece la membrana nuclear, los cromosomas se condensan y se forma el huso acromtico. - En la metafase II los cromosomas se sitan en la placa ecuatorial. Cada uno est formado por dos cromtidas unidas por el centrmero, y cada cromtida tiene asociado un cinetocoro. - En la anafase II se separan los centr meros y cada cromtida emigra hacia polos opuestos. - En la telofase II se forma la membrana nuclear alrededor de los cromosomas, que se descondensan. Se produce la citocinesis y se obtienen cuatro clulas hijas, cada una de las cuales tiene la mitad de los cromosomas de la clula madre. Son clulas haploides y genticamente distintas, ya que tienen algunos de sus cromosomas recombinados. B) Importancia biolgica. Tanto la mitosis como la meiosis son dos tipos de divisin celular; sin embargo, tienen una funcin diferente: La mitosis interviene en el crecimiento de los organismos pluricelulares y en la reproduccin asexual de los organismos.

La meiosis es imprescindible en la reproduccin sexual.

La reproduccin es la capacidad que poseen todos los seres vivos para producir individuos iguales o semejantes a ellos. Existen dos modos bsicos de reproduccin de los organismos vivos:
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B.1. Reproduccin asexual Se caracteriza porque interviene un solo organismo que produce copias idnticas de si mismo. Se da prcticamente en todos los seres unicelulares. Tambin es frecuente en pa-'; y hongos y ocurre en algunos animales. En los seres unicelulares la reproduccin asexual se produce por medio de una mitosis. A partir de la clula madre se obtienen dos clulas hijas. En los seres pluricelulares se producen, tambin mediante mitosis, una clula o un grupo de clulas que van a producir un organismo completo. Mediante la reproduccin asexual no se genera variabilidad gentica. Como es un mtodo muy sencillo y rpido, un organismo que est bien adaptado a un medio puede dar lugar a un gran nmero de descendientes en poco tiempo y colonizarlo. Sin embargo, si las condiciones del medio cambian, toda la poblacin, que es genticamente homognea, puede sucumbir por no estar preparada para las nuevas condiciones. B. 2. Reproduccin sexual Intervienen dos individuos que combinan su informacin gentica para formar un nuevo individuo que tendr una mezcla de los caracteres de los progenitores. Se da en los seres pluricelulares y en algunos unicelulares. Dos progenitores aportan cada uno una clula reproductora haploide o gameto (n), que ha producido mediante un proceso de meiosis. En la fecundacin se fusionan los dos gametos y forman una sola clula, el cigoto, en el que se restituye el nmero de cromosomas (2n de la especie. El cigoto es la primera clula del nuevo individuo. Su desarrollo dar origen a organismo adulto. La reproduccin sexual es ms compleja que la asexual, tanto por el proceso de la meiosis: como por la fecundacin, que requiere que se encuentren dos gametos de sexo opuesto. S la reproduccin sexual se mantiene, pese a estos inconvenientes, es porque aporta un incremento de la variabilidad gentica en la descendencia, lo cual puede ser ventajoso para lo organismos. Esta variabilidad es consecuencia del mecanismo de la meiosis y de la fecundacin: 1. La recombinacin gentica ocurrida en la meiosis hace que cada cromosoma intercambia fragmentos con su homlogo. 2. Durante la meiosis, los cromosomas se distribuyen al azar para que vaya uno solo de cada par de homlogos a cada gameto. 3. En la fecundacin, cada gameto se une con otro, el cual aporta un conjunto de genes diferentes. El incremento de variabilidad gentica puede contribuir a que en un individuo se produzca) una mezcla de caracteres ms favorable que la que tena cualquiera de sus progenitores. Esto aumenta las posibilidades de supervivencia de la especie si el medio cambia, y las posibilidades de conquistar y prosperar en nuevos ambientes (siempre habr individuos mejor adaptados a condiciones diferentes). Algunos organismos, cuando las condiciones del medio son favorables, se reproducen muy rpidamente por reproduccin asexual; sin embargo, cuando las condiciones del medio son adversas, emplean la reproduccin sexual. Los plipos o los helechos presentan reproduccin alternante, en la que se alterna una fase con reproduccin sexual y otra con reproduccin asexual.

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2.5.

Clula eucaritica. Funcin de nutricin.

2.5.1. Concepto de nutricin. Nutricin auttrofa y hetertrofa. Los seres vivos necesitamos transformar la energa y la materia del medio en nuestro propio beneficio, as como eliminar los residuos producidos. A esto se le llama funciones de nutricin. Distinguimos: - N hetertrofa, que toma la materia ya elaborada (alimento), como fuente de materia y de energa. La presentan los animales. - N auttrofa, que solo toma la materia inorgnica y la transforma en materia orgnica aprovechando la energa luminosa o qumica (ojo, los hetertrofos tambin incorporamos materia inorgnica: agua, sales). Dentro de ella, se diferencian: - N auttrofa fotosinttica en la que la energa se toma de la luz solar transformando la materia inorgnica en orgnica. - N auttrofa quimiosinttica, en la que se transforman sustancias del medio para aprovechar la energa contenida en sus enlaces; esta energa se usa para transformar la materia inorgnica en orgnica. 2.5.2. Ingestin. Ver membrana celular. celular
2.5.2.1. 2.5.2.2.

Permeabilidad celular: difusin y transporte. Ver membrana Endocitosis: pinocitosis y fagocitosis. Ver membrana celular

2.5.1. Digestin celular. Orgnulos implicados. Ver lisosoma. 2.5.2. Excrecin: exocitosis. Ver membrana celular.

2.5.3. Metabolismo. 2.5.5.1. Concepto de metabolismo, catabolismo y anabolismo. Es el conjunto de reacciones qumicas intracelulares, cuyos productos, denominados metabolitos, van transformndose en una cadena de reacciones enzimticas acopladas (rutas o vas metablicas). A la primer metabolito que se transforma se le llama sustrato, al ltimo que se forma, producto. El metabolismo se divide en: Anabolismo: transforma sutancias sencillas en complejas, absorbiendo energa. Son reacciones en general divergentes. Ej fotosntesis. Catabolismo: transforma sustancias complejas en sencillas, para desprender la energa contenida en sus enlaces qumicos. Son reacciones en general convergentes. Ej respiracin. 2.5.5.2. Aspectos generales del metabolismo: reacciones de oxidorreduccin y ATP. Las rutas ana y catablicas coinciden obligatoriamente en el comienzo y el final, pero los pasos intermedios pueden ser diferentes. Existe una fase III, anfiblica, que integra ana y catabolismo. En ella se liberan precursores que se unen dando sustancias complejas. Las reacciones del metabolismo son redox, en las que hay una transferencia de electrones y unas sustancias se oxidan y otras se reducen. Las reacciones estn acopladas, y la energa desprendida en las exergnicas se aprovecha en las endergnicas. El vector de energa es el ATP, que desprende 7,3 Kcal/mol, para el movimiento, transporte, construccin de macromolculas 2.5.5.3. Estrategias de obtencin de energa: energa qumica y energa solar. Ver nutricin auttrofa. 2.5.5.4. Caractersticas generales del catabolismo celular: convergencia metablica y obtencin de energa. Son las reacciones del metabolismo que transforman sustancias complejas en sencillas, para desprender la energa contenida en sus enlaces qumicos, liberando poder energtico (ATP) y poder reductor (NADH+ H +). Son reacciones en general convergentes en el acetilcoenzima A. Ej respiracin.
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2.5.5.4.1. Glucolisis. Ocurre en el citoplasma, en anaerobiosis (sin oxgeno, no lo necesita). Una glucosa se transforma en dos pirvicos, liberando 2 ATP y 2 NADH2 .A partir de ella, hay dos posibilidades: - Si entra el Pir en la mitocondria, en condiciones de aerobiosis (con oxgeno) sigue la respiracin (oxidacin completa,que consta de transporte electrnico y fosforilacin oxidativa), como ocurre en el msculo en ejercicio normal. Si las condiciones son anaerobias (msculo en ejercicio excesivo, microbios formadores del vino o del yogurt),se da una combustin incompleta (fermentacin).

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2.5.5.4.2. Fermentacin. La fermentacin es un proceso catablico de oxidacin incompleta, totalmente anaerbico, ya que se produce en ausencia de oxgeno. El proceso es similar al de la gluclisis hasta la obtencin de pirvico, a partir de la cual podremos diferenciar dos tipos de fermentacin: Alcohlica: Pir+ NADH2 Etanol+CO2 +NAD+ Lctica: Pir+ NADH2 AcLctico +NAD+

A) Fermentacin alcohlica Consiste en una descarboxilacin hasta etanol. Podemos destacar la levadura Saccharomyces cerevisiae como uno de los microorganismos ms representativos, que est presente en la fermentacin de productos como el vino, la cerveza, etc.... B) Fermentacin lctica En ella el pirvico se reduce a lctico, sin descarboxilarse. Destacamos el lactobacillus bulgaricus, y los cocobacillus, responsables de la fermentacin de la leche en yogurt. Tambin la realiza el msculo cuando hace un ejercicio excesivo, sin oxgeno suficiente, lo que forma agujetas de cido lctico. 2.5.5.4.3. Beta oxidacin. Los AG son una fuente muy importante de carbono y energa para la clula, pues al degradarse dan muchas ms molculas de ATP por unidad de peso que la glucosa. Se degradan en la matriz mitocondrial, en la beta oxidacin, que libera unidades de 2 carbonos unidas al coenzima A (acetil coA), que se incorpora al ciclo de Krebs y a la fosoforilacin oxidativa. Para entrar en la mitocondria se unen a un transportador, la carnitina, que luego se separa y vuelve a salir. Ya dentro, se unen al coenzima A, con gasto inicial de energa, y sufren un proceso en cuatro etapas ( deshidrogenacin, hidratacin, oxidacin y tiolisis o rotura de dos carbonos a partir del extremo carboxilo). El proceso se va repitiendo cclicamente, pero con diferentes sustancias provenientes del ciclo anterior (en la llamada hlice de Lynnen), liberando: - energa (ATP), - los carbonos del AG de dos en dos (en forma de acetil coA, un precursor metablico) poder reductor (NADH 2y FADH 2) 2.5.5.4.4. Respiracin: ciclo de Krebs, cadena respiratoria y fosforilacin oxidativa. A) Ciclo de Krebs. El ciclo de Krebs es la ruta metablica a travs de la cual el pirvico descarboxilado y unido al coenzima A va a completar su oxidacin en la matriz mitocondrial. No es solo la ltima etapa de degradacin de los azcares, pues otros compuestos (cidos grasos, aminocidos), tambin son degradados a acetil coenzima A e integrados en el ciclo de Krebs. Por tanto, es la va fundamental para la degradacin de la mayora de los compuestos orgnicos y para la obtencinm de coenzimas reductoras.

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Io) Condensacin de la acetil coenzima A con el acido oxalactico para formar acido ctrico. En este proceso se recupera la coenzima A-SH 2o) Transformacin del acido ctrico en su ismero, el acido isoctrico 3o) Descarboxilacin oxidativa del acido isoctrico que se trasforma en alfacetoglutrico (a-KG) con la formacin de C02 y NDH+H+ 4o) Descarboxilacin oxidativa del acido (a-KG) con la formacin de CO2, NDH+H + y un GTP (~ ATP). El a-KG se transforma en cido succnico 5o) Oxidacin del cido succnico a cido fumrico. Esta oxidacin se realiza por la formacin de un doble enlace. Los electrones son transferidos al FAD que pasa a FADH2. 6o) Adicin de agua al doble enlace formndose el cido mlico. 7o) Oxidacin por el NAD+ del alcohol del acido mlico, que se transforma en el cido oxalactico, completndose el ciclo. Una glucosa se transforma en dos pirvicos. Cada pirvico da una vuelta al ciclo, originando: 4 NADH2 , 1 FADH2, , 1 GTP (equivale a 1 ATP) Por tanto, cada glucosa origina el doble ( 8NADH2, 2 FADH2 y 2 ATP) en el ciclo, a lo que hay que aadir lo originado durante la gluclisis. B) Cadena respiratoria o transportadora de electrones. La cadena respiratoria ocurre en la cresta mitocondrial: los electrones del NADH 2 y del FADH2 son cedidos a unas molculas transportadoras (NAD deshidrogenasa, cofactor Q, citocromos b, c y a), y van pasando de unas a otras hasta un compuesto final aceptor de electrones, formndose agua.
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C) Fosforilacin oxidativa. La fosforilacin oxidativa es el mecanismo de sntesis de ATP en la respiracin. Tiene lugar en la mitocondria, en concreto en la membrana interna, en las llamadas partculas elementales, de Fernndez- Morn o ATPasas. La energa aportada por el transporte de los electrones hace que se una un grupo fosfato al ADP, originando ATP. Segn la hiptesis quimiosmtica (Mitchell), los responsables de todo el proceso seran los protones liberados por el NADH2 y el FADH2,que atravesaran las ATPasas, creando un gradiente electroqumico formador de ATP.

2.5.5.4.5. Balance energtico del catabolismo de la glucosa. En la gluclis, cada glucosa se transforma en dos pirvicos, dando 2 ATP y 2 NADH2 . En El ciclo de Krebs, al ser dos pirvicos y dar dos vueltas, se originan un total de 8 NADH2, 2 FADH2 y 2 GTP (2 ATP). En la cadena respiratoria, cada NADH2 da 3 ATP, y cada FADH2 da 2 ATP. Esto arroja un total de 38 ATP (hgado y corazn). En el msculo, se producen 36 ATP, pues los dos NADH2 de la glucolisis siguen una lanzadera (va metablica) diferente, y cada uno ellos origina dos ATP en vez de tres.
2.5.5.5. Caractersticas generales del anabolismo celular: divergencia metablica y necesidades energticas. Es la parte del metabolismo encargada de la sntesis de molculas orgnicas ms complejas a partir de otras ms sencillas, con requerimiento de energa (ATP). El anabolismo es el responsable tanto de la formacin de los componentes celulares ( y por tanto de los tejidos corporales) como del almacenamiento de energa mediante enlaces qumicos en molculas orgnicas. Las clulas obtienen la energa del medio ambiente mediante dos tipos de fuente de energa: la luz solar en la fotosntesis, y los compuestos qumicos en la quimiosntesis. 81

2.5.5.5.1. Concepto e importancia biolgica de la fotosntesis en evolucin, agricultura y biosfera. A) Concepto e importancia biolgica. La fotosntesis es uno de los procesos metablicos de los que se valen las clulas de las plantas y de las algas para obtener energa.

Es un proceso complejo, mediante el cual los seres vivos poseedores de clorofila y otros pigmentos, captan energa luminosa procedente del sol y la transforman en energa qumica (ATP) y en compuestos reductores (NADPH2), y con ellos transforman el agua y el CO2 en compuestos orgnicos reducidos (glucosa y otros), liberando oxgeno:

La energa captada en la fotosntesis y el poder reductor adquirido en el proceso, hacen posible la reduccin y la asimilacin de los bioelementos necesarios, como nitrgeno y azufre, adems de carbono, para formar materia viva. La radiacin luminosa llega a la tierra en forma de "pequeos paquetes", conocidos como cuantos o fotones. Los seres fotosintticos captan la luz mediante diversos pigmentos fotosensibles, entre los que destacan por su abundancia las clorofilas y carotenos. Al absorber los pigmentos la luz, electrones de sus molculas adquieren niveles energticos superiores, cuando vuelven a su nivel inicial liberan la energa que sirve para activar una reaccin qumica: una molcula de pigmento se oxida al perder un electrn que es recogido por otra sustancia, que se reduce. As la clorofila puede transformar la energa luminosa en energa qumica. Su importancia biolgica es trascendental por dos razones: - origina el primer eslabn de las cadenas trficas (productores), sin el cual no existiran los dems (consumidores primarios, secundarios...) - Produce oxgeno (necesario para la respiracin) y elimina dixido de carbono (gas con efecto invernadero). Los factores que afectan a la fotosntesis son:

Concentracin de CO2: al subir aumenta la FS (es un sustrato)

- Concentracin de O2: en teora deba bajar la FS, pero en la prctica apenas influye (aunque sea un producto).
- Presencia de agua: aumenta la velocidad de reaccin de la FS (es un sustrato). - Intensidad luminosa: cada planta tiene su propio intervalo, con un mnimo, ptimo y mximo propios (plantas de interior...). - Temperatura: al subir, va subiendo la FS hasta un mximo, en general algo superior a los 40C, a partir del cual decae rpidamente ( por desnaturalizacin, pues es una reaccin enzimtica), llegando a 0 hacia los 60C, aunque existen diferencias entre plantas por adaptaciones a diferentes medios.
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En la fotosntesis se diferencian dos etapas, con dos tipos de reacciones:

1. Fase luminosa: en el tilacoide; en ella se producen transferencias de electrones. 2.

Fase oscura: en el estroma; en ella se realiza la fijacin de carbono

B) Importancia en la evolucin. - La atmsfera primitiva era reductora, sin oxgeno, compuesta de metano, amonaco, hidrgeno... Segn la teora de Oparin, verificada por el experimento de Miller, en el medio acuoso aparecieron sustancias orgnicas abiticas (aminocidos, urea...). En un primer momento, dichas sustancias eran fermentadas por seres vivos similares a las bacterias para obtener ATP. Posteriormente, apareci la fotofosforilacin cclica: hay una fotosntesis anoxignica, pues no rompe agua ni libera oxgeno, sino que parte del SH2 para obtener ATP y NADH 2 . - En tercer lugar aparecen las cianobacterias, con dos fotosistemas que captan diferentes longitudes de onda, captando energa suficiente para romper el agua (fotolisis) y liberar oxgeno, protones y electrones (fotosntesis oxignica). - A partir de cianobacterias evolucionan las algas (eucariotas) y las plantas terrestres, colonizando nuevos medios ( no solo donde hubiese materia orgnica, sino donde hubiese luz). La atmsfera reductora pasa a oxidante, con tres consecuencias trascendentales: - dejan de aparecer sustancias orgnicas abiticas. - el oxgeno permite el desarrollo de los seres vivos aerobios que son mucho ms eficientes y colonizadores. - la capa de ozono formada a partir del oxgeno protege y permite la vida fuera del agua.

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2.5.5.5.2. Etapas de la fotosntesis y su localizacin. A) Fase luminosa. Los hechos que ocurren en la fase luminosa de la fotosntesis se pueden resumir en estos puntos:
1. Sntesis de ATP o fotofosforilacin que puede ser: acclica (o abierta) o bien cclica (o cerrada). 2. 3.

Sntesis de poder reductor NADPH2 Fotolisis del agua

Los pigmentos presentes en los tilacoides de los cloroplastos se encuentran organizados en fotosistemas (conjuntos funcionales formados por ms de 200 molculas de pigmentos); la luz captada en ellos por pigmentos que hacen de antena, es llevada hasta la molcula de "clorofila diana" que es la molcula que se oxida al liberar un electrn, que es el que ir pasando por una serie de transportadores, en cuyo recorrido liberar la energa.

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Existen dos tipos de fotosistemas, el fotosistema I (FSI), est asociado a molculas de clorofila que absorben a longitudes de ondas largas (700 nm) y se conoce como P700. El fotosistema II (FSII), est asociado a molculas de clorofila que absorben a 680 nm. Por eso se denomina P680. La luz es recibida en el FSII por la clorofila P680 que se oxida al liberar un electrn que asciende a un nivel superior de energa; ese electrn es recogido por una sustancia aceptora de electrones que se reduce, la Plastoquinona y desde sta va pasando a lo largo de una cadena transportadora de electrones, entre los que estn varios citocromos y as llega hasta la plastocianina que se los ceder a molculas de clorofila del FSI.

En el descenso por esta cadena, con oxidacin y reduccin en cada paso, el electrn va liberando la energa que tena en exceso; energa que se utiliza para bombear protones de hidrgeno desde el estroma hasta el interior de los tilacoides, generando un gradiente electroqumico de protones. Estos protones vuelven al estroma a travs de la ATP-asa y se originan molculas de ATP.

El fotosistema II se reduce al recibir electrones procedentes de una molcula de H2O, que tambin por accin de la luz, se descompone en hidrgeno y oxgeno, en el proceso llamado fotlisis del H2O. De este modo se puede mantener un flujo continuo de electrones desde el agua hacia el fotosistema II y de ste al fotosistema I.

En el fotosistema I la luz produce el mismo efecto sobre la clorofila P700, de modo que algn electrn adquiere un nivel energtico superior y abandona la molcula, es recogido por otro aceptor de electrones, la ferredoxina y pasa por una nueva cadena de transporte hasta llegar a una molcula de NADP que es reducida a NADPH2, al recibir dos electrones y un protn H+ que tambin procede de la descomposicin del H2O.

Los dos fotosistemas pueden actuar conjuntamente - proceso conocido como esquema en Z, para producir la fotofosforilacin (obtencin de ATP) o hacerlo solamente el fotosistema I; se diferencia entonces entre fosforilacin no cclica o acclica cuando actan los dos, y fotofosforilacin cclica, cuando acta el fotosistema I nicamente. En la fotofosforilacin acclica se obtiene ATP y se reduce el NADP a NADPH2, mientras que en la fotofosforilacin cclica nicamente se obtiene ATP y no se libera oxgeno. B) Fase oscura En esta fase, se va a utilizar la energa qumica obtenida en la fase luminosa, en reducir CO2, Nitratos y Sulfatos y asimilar los bioelementos C, H, y S, con el fin de sintetizar glcidos, aminocidos y otras sustancias. Las plantas obtiene el CO2 del aire a travs de los estomas de sus hojas. El proceso de reduccin del carbono es cclico y se conoce como Ciclo de Calvin, en honor de su descubridor M. Calvin.
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La fijacin del CO2 se produce en tres fases:

1. Carboxilativa: El CO2 se fija a una molcula de 5C, la ribulosa 1,5 difosfato, formndose un compuesto inestable de 6C, que se divide en dos molculas de cido 3 fosfoglicrico conocido tambin con las siglas de PGA 2. Reductiva: El cido 3 fosfoglicrico se reduce a gliceraldehido 3 fosfato, tambin conocido como PGAL, utilizndose ATP Y NADPH2 3. Regenerativa/Sinttica: Las molculas de gliceraldehido 3 fosfato formadas siguen diversas rutas; de cada seis molculas, cinco se utilizan para regenerar la ribulosa 1,5 difosfato y hacer que el ciclo de calvin pueda seguir, y una ser empleada para poder sintetizar molculas de glucosa (va de las hexosas), cidos grasos, aminocidos, etc, y en general todas las molculas que necesita la clula.

2.5.5.5.3. Quimiosntesis. La quimiosntesis consiste en la sntesis del ATP a partir de la energa que se desprende de determinadas sustancias inorgnicas en las reacciones de oxidacin. Los organismos que realizan estos procesos se llaman quimioauttrofos. Todos son bacterias. Son microorganismos que cierran los ciclos biogeoqumicos, posibilitando la vida en el planeta y devolviendo al sustrato las sustancias procedentes de la oxidacin de materia de descomposicin de los organismos muertos. De este modo, los restos de los seres vivos se transforman en sales minerales de nitrgeno o azufre que pueden ser de nuevo absorbidas por los vegetales. Fases de la quimiosntesis: En una primera fase, se obtiene ATP y poder reductor (NADH en las bacterias en lugar de NADPH como en las plantas), gracias a la oxidacin de sustancias inorgnicas, que constituye la fuente de energa para la fosforilacin oxidativa del ADP. Parte del ATP se emplea en provocar un transporte inverso en la cadena respiratoria de electrones para la obtencin de NADH. En una segunda fase, las vas metablicas seguidas coinciden con la fase
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oscura de la fotosntesis, mediante el ciclo de Calvin.

Algunas especies de bacterias pueden incorporar nitrgeno a partir del nitrgeno atmosfrico. Tipos de bacterias quimiosintticas: A) Bacterias incoloras del azufre: responsables de la fijacin del SH2 procedente de la descomposicin de la materia orgnica, que abunda en aguas residuales. H 2S+ O2---S + H2O + energa 2S + 3 O2 + 2 H2 O--2SO + 4 H + energa H 2S 2O3 + O-- SO + 2H + S + energa B) Bacterias del nitrgeno: oxidan compuestos reducidos del nitrgeno, como el amoniaco, procedente de la descomposicin de cadveres animales y de restos vegetales, y los convierte en nitratos asimilables por las plantas. 2NH3 + 3 O 2 --2 NO2 + 2H + 2 H 2O + energa C) Bacterias del hierro: transforman los depsitos minerales de carbonatos de hierro en yacimientos de xidos de hierro. 4 FE + 4H + O2---4 FE +2 H 2O + energa D) Bacterias del hidrogeno: estas bacterias son quimioauttrofos facultativos, que pueden utilizar el hidrogeno molecular. H2 + O2--- H 2 O + energa

2.5.5.6. Integracin del catabolismo y del anabolismo. Como vemos en el esquema siguiente, la integracin del anabolismo y del catabolismo se realiza fundamentalmente a dos niveles: - La ETAPA III, llamada anfiblica, es comn a ambos. - las reacciones estn en muchas ocasiones acopladasaprovechndose la energa que desprenden las exergnicas para realizar las endergnicas.

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III. LA BASE QUMICA DE LA HERENCIA

3.1. Gentica molecular. 3.1.1. El ADN como portador de la informacin gentica. La primera evidencia de que el ADN es el material hereditario fue obtenida en 1938 por F. Griffith cuando buscaba una vacuna contra la neumona provocada por la bacteria Streptococcus pneumoniae. Descubri que existan dos cepas de bacterias distintas: Cepas S (del ingls smooth, liso): las bacterias de esta cepa poseen una cpsula gelatinosa de polisacridos y son capaces de provocar la enfermedad cuando se inoculan a un animal sano. Por la presencia de cpsula, sus colonias tienen un aspecto liso. Cepas R (del ingls rough, rugoso): estas bacterias no provocan la enfermedad. Carecen de cpsula gelatinosa, por lo que sus colonias tienen un aspecto ms rugoso que las S. Pens que se podran inmunizar ratones inyectndoles bacterias virulentas (S) muertas por el calor o bien hacerlo con bacterias vivas no virulentas(R). En sus experimentos obtuvo algn resultado inesperado. Los resultados del ensayo llevaron a Griffith a deducir que en las bacterias muertas exista "algo", que llam principio transformante, que era captado por Has bacterias vivas no virulentas y transformaba sus caracteres hereditarios convirtindolas en virulentas. En 1944, Avery y sus colaboradores demostraron que el principio transformante de Griffith era el ADN, pues para que un extracto de clulas S transformara una cepa de clulas R, el nico componente que deba contener necesariamente era el ADN. Esto demostraba que el ADN era el material gentico en bacterias, pero no fue hasta 1952 cuando se tuvo la certeza de que era as en el resto de los organismos. La demostracin experimental se debi a Alfred D. Hershey y Martha Chase, que trabajaron con el bacterifago T2, un virus que ataca a la bacteria E. coli y que est formado nicamente de ADN y protenas, las dos sustancias de las que se sospechaba que podra estar formado el material hereditario. Las protenas del virus poseen azufre pero no fsforo, mientras que el ADN lleva fsforo, pero no azufre. Marcaron radiactivamente un grupo de virus con 3Z P y el otro con 35S. Con cada grupo infectaron un cultivo bacteriano diferente, que posteriormente se someti a agitacin y centrifugacin para separar los restos de virus de las bacterias. Se midi la radiactividad, tanto del medio extracelular como del intracelular, y observaron que el 35S haba quedado en el exterior de las clulas mientras que el 32P haba entrado en las clulas con el ADN y provocado la formacin de nuevos virus. El virus inyecta su ADN en la bacteria, donde se integra en el cromosoma bacteriano y dirige la formacin de las protenas de los nuevos virus. 3.1.1.1. ADN y cromosomas. Ver cromatina. 3.1.1.2. Concepto de gen. Segn la gentica clsica, un gen es una unidad de informacin hereditaria que se expresa determinando una caracterstica observable o fenotipo. Equivale al factor hereditario de Mendel. Tambin podemos definir gen como el segmento de un cromosoma que controla la aparicin de un carcter. La gentica molecular ocupa de estudiar la naturaleza de los genes y la forma en que se expresan. En la dcada de los aos cuarenta, G. Beadle y E. Tatum fueron los primeros en establecer la existencia de una relacin directa entre la molcula de ADN y la secuencia de aminocidos de una enzima, y propusieron la hiptesis de "un gen, una enzima". Segn esta hiptesis, un gen contiene la informacin para que los aminocidos se unan en un determinado orden y formen una enzima.
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Para establecer esta hiptesis trabajaron con el hongo comn del pan Neurospora crassa, al que sometieron a elevadas dosis de rayos X con la finalidad de aumentar la tasa de mutacin, y observaron que un cierto nmero de mutaciones afectaban a determinadas enzimas, que perdan su actividad normal. Posteriormente, puesto que no todas las protenas son enzimas y que algunas protenas estn formadas por ms de una cadena polipeptdica, la hiptesis "un gen, una enzima" se transform en la de "un gen, una cadena polipeptdica". El siguiente paso en el conocimiento de la funcin de los genes era averiguar la razn por la que una protena pierde su actividad biolgica cuando el gen que la determina ha sufrido una mutacin. La respuesta a esta incgnita la dio Linus Pauling al descubrir que la anemia falciforme se deba a un cambio en la estructura normal de la hemoglobina sangunea (sustitucin de Glu por Val, un aminocido de un total de 600). 3.1.1.1.3. Conservacin de la informacin: la replicacin del ADN. Un acontecimiento clave en el ciclo celular, e imprescindible para que se realice la divisin celular, es la replicacin (o duplicacin) del ADN, que ocurre en la fase S de la interfase. El mecanismo general de la replicacin fue intuido por Watson y Crick cuando establecieron la estructura de doble hlice y la complementariedad de las bases. Propusieron que la doble hlice del ADN se abre y las dos cadenas de nucletidos se separan; a partir de cada una de las dos cadenas se forma una nueva, que es complementaria de la que le ha servido como patrn. Sin embargo, la aceptacin de este modelo requiri una demostracin, pues el proceso podra ocurrir de otras maneras. Se plantearon tres modelos posibles: Modelo conservativo: una doble hlice conserva las dos cadenas originales y la otra est formada por las dos de nueva sntesis. Modelo dispersivo: cada una de las cadenas hijas contiene fragmentos de la cadena original y fragmentos de nueva sntesis. Modelo semiconservativo: el propuesto por Watson y Crick. Cada doble hlice conserva una hlice de las dos originales y sintetiza una nueva.

La r ep li ca ci n semiconservativa Meselson y Stahl, en 1957, demostraron experimentalmente que el modelo correcto era el semiconservativo. En primer lugar, comprobaron en un experimento control que el ADN de bacterias cultivadas durante varias generaciones en un medio con 15N (istopo pesado del nitrgeno] era ms pesado que el ADN de bacterias cultivadas en un medio normal, con 14N. Adems, ambos ADN se podan separar por ultracentrifugacin.
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A partir del control, desarrollaron su experimento: Cultivaron bacterias [E. coli) durante varias generaciones en un medio con 1SN, para que el ADN de la poblacin incorporara el istopo. Transfirieron las bacterias a un medio con 14N y dejaron que se produjeran varias generaciones o ciclos de replicacin-divisin en este medio. Tomaron tras cada generacin una muestra de bacterias, les extrajeron el ADN y lo centrifugaron para ver cmo se incorporaba el 14N. Obtuvieron los siguientes resultados: En la primera generacin obtuvieron una sola banda en posicin intermedia, lo que les indic que todas las molculas de ADN tenan la misma densidad y contenan 14N y 15N en la misma proporcin. Este resultado descarta el modelo conservativo. En la segunda y en la tercera generacin se mantuvo la banda intermedia y apareci una banda correspondiente a ADN con 14N. Este resultado descarta la hiptesis dispersiva. El nico modelo compatible con los resultados es el modelo semiconservativo.

Hoy da, basndose sobre todo en experimentos realizados con la bacteria E coli, se ha desentraado, en gran parte, la secuencia de reacciones que conducen a la replicacin del ADN. Este proceso se divide en dos etapas: la iniciacin y la elongacin. Adems, durante la elongacin see lleva a cabo la correccin de errores que se hayan podido producir. Fase de iniciacin Consiste, bsicamente, en el desenrollamiento y apertura de la doble hlice. Se inicia en una regin del ADN llamada oriC o punto de iniciacin. Es una zona donde abundan las secuencias de bases GATC. Durante la iniciacin se producen varios acontecimientos: El punto de iniciacin es reconocido por unas protenas especficas que se unen a l. Las enzimas helicasas rompen los enlaces de hidrgeno entre las bases nitrogenadas y la doble hlice se abre como una cremallera. Cuando la doble hlice se abre se produce desenrollamiento en esa zona, lo que crea en las zonas prximas unas tensiones que podran provocar un mayor enrollamiento. La accin de otras enzimas, las girasas y las topoisomerasas, evita esas tensiones rompiendo y soldando de nuevo la hlice de ADN en estos puntos. Las protenas SSB (del ingls Single Strand Binding-DNA, protenas de unin a la cadena sencilla) se unen a las hebras molde e impiden que se vuelvan a enrollar. Dejan libre la parte de la hebra que lleva las bases, de modo que estas sean accesibles para otras molculas. En el lugar de origen de la replicacin, alrededor de oriC, se ha formado una burbuja de replicacin en la que hay dos zonas, con forma de Y, denominadas horquillas de replicacin, donde se van a sintetizar las nuevas hebras de ADN. La burbuja de replicacin se va extendiendo a lo largo del cromosoma en los dos sentidos, de ah que se diga que la replicacin es bidireccional. A) Fase de elongacin Es la fase en la que se sintetiza una nueva hebra de ADN sobre cada hebra de la doble hlice original. Adems de las enzimas que actan en la fase de iniciacin, en la elongacin intervienen las ADN polimerasas, de varios tipos, I, II y III. Su funcin es doble:
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 Actividad polimerasa. Unen entre s los nucletidos que formarn el ADN. Para ello, recorren la hebra molde, seleccionan el desoxirribonucletido cuya base es complementaria con la de la hebra molde, y lo unen. Las nuevas cadenas de ADN se sintetizan por unin de desoxirribonucletidos trifosfatos. La energa para el nuevo enlace se obtiene de la hidrlisis de los dos grupos fosfato del nucletido entrante. Actividad exonucleasa. Eliminan nucletidos, cuyas bases nitrogenadas estn mal apareadas, as como fragmentos de ARN. B) Mecanismo de elongacin Las ADN polimerasas no pueden iniciar de cero la sntesis de una nueva cadena de ADr Necesitan un fragmento de unos 10 nucletidos de ARN, denominado cebador o primer, con u extremo hidroxilo 3' libre al que aadir los nuevos nucletidos. El cebador es sintetizado por un ARN polimerasa llamada primasa. Una vez comenzada la sntesis, la propia cadena de ADN y sintetizada acta como cebador.

Al descubrir el modo de accin de la ADN polimerasa se encontr u obstculo que impeda explicar cmo se desarrollaba este proceso. Se observ que la ADN polimerasa recorre las hebras molde en sentido 3'-5' y va uniendo los nuevos nucletidos en el extremo 3' hasta que se forman las hebras replicadas. Sin embargo, como las dos cadenas del ADN son antiparalelas, cuando se forma la horquilla de replicacin la ADN polimerasa solo puede sintetizar nucletidos en uno de los dos sentidos. La sntesis de nueva hebra orientada en sentido 3'-5' se realiza sin interrupciones A esta hebra se la denomina conductora o lder. El mecanismo de sntesis de la hebra orientada en sentido 5'-3 (hebra retardada] fue descubierto en 1973 por R. Okazaki. Consiste en una sntesis discontinua de pequeos fragmentos de ADN de un mil nucletidos (fragmentos de Okazaki). Cada uno de los fragmentos requiere un cebador ( ARN sintetizado por la primasa cada ciertos intervalos. La ADN polimerasa va eliminando cebador y sustituyndolo por ADN. Finalmente, la ADN ligasa suelda todos los fragmentos obtenidos.

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Durante la replicacin e frecuente que se produzcan errores y se incorporen nucletidos que no tengan correctamente apareadas sus bases. La ADN polimerasa acta entonces como exonucleasa y elimina los nucletidos mal apareados. El mecanismo de correccin es muy eficiente, pero a veces queda un error sin corregir, lo que puede ser importante en evolucin ( vaiabilidad). C) Replicacin en eucariontes. La replicacin del ADN en los organismos eucariontes es muy parecida a la de los procariontes, salvo diferencias derivadas, en parte, de la mayor complejidad del material gentico de los eucariontes. Las principales diferencias son: Los cromosomas de los eucariontes contienen molculas de ADN muy largas. Para abreviar el proceso, la replicacin se inicia de manera simultnea en varios puntos de cada cromosoma denominados replicones. En Drosophila melanogaster el mayor cromosoma contiene unas seis mil horquillas de replicacin, y el proceso dura aproximadamente tres minutos. Existen cinco tipos de ADN polimerasas (a, (3, y, 8 y e), que se reparten todas las tareas de la elongacin (replicacin de la hebra lder y la retardada) y correccin de errores. La y interviene en la replicacin del ADN mitocondrial. En los cromosomas de los organismos eucariontes el ADN se encuentra asociado a las historias, protenas bsicas que no tienen los procariontes, y que durante la replicacin se duplican. Las histonas, junto con el ADN, forman un nucleosoma. Parece ser que los nuevos ncleosomas se incorporan a la hebra retardada, mientras que los viejos se quedan en la conductora.
El proceso de replicacin del ADN se va completando normalmente hasta llegar al extremo del cromosoma, el telmero. Cuando se elimina el ltimo ARN cebador la hebra retardada quedar incompleta, ya que la ADN polimerasa no podr rellenar el hueco, al ser incapaz de sintetizar en direccin 3'-5'. Para poder completar esta cadena, la polimerasa necesitara un extremo hidroxilo 3' libre donde iniciar un nuevo fragmento. Este hecho hace que el telmero se vaya acortando un poco cada vez que la clula se divide, fenmeno que se asocia a los procesos de envejecimiento y muerte celular.

3.1.1.1.4. Expresin de la informacin gentica (flujo de la informacin gentica): transcripcin, maduracin y traduccin..
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A) Flujo de la informacin gentica. El ADN se copia a s mismo en un proceso llamado replicacin, con objeto de perpetuar su informacin en las clulas hijas. Adems, La informacin contenida en el ADN ha de manifestarse en forma de protenas. El papel intermediario lo realiza el ARN, dado que el ADN no sale del ncleo y las protenas las sintetizan los ribosomas del citoplasma. De este modo, el flujo de la informacin gentica lo podemos representar en el mal llamado dogma central de la biologa molecular, debido a Watson.

Tras el descubrimiento en algunos virus (retrovirus) de la enzima transcriptasa inversa, que sintetiza ADN a partir de ARN, hubo que redefinir este dogma, lo que demuestra que la ciencia no puede ni debe ser dogmtica.

B) Transcripcin. El proceso de transcripcin, como su nombre indica, consiste en copiar una parte del mensaje gentico desde su forma original (ADN) a otra (ARN) que se pueda utilizar directamente para la sntesis de protenas especficas. Dado que la maquinaria sintetizadora solo puede funcionar con informaciones codificadas en molculas de ARN, se comprende que la transcripcin sea imprescindible como paso previo para la sntesis proteica. Por otra parte, tambin resulta fundamental en la regulacin de la expresin gnica. En el proceso de transcripcin se forma una cadena de ARN cuya secuencia de bases nitrogenadas es la misma que la de una de las hebras de la doble hlice de ADN. La sntesis de ARN se produce gracias a la accin de una enzima, la ARN polimerasa ADN dependiente, que presenta las siguientes caractersticas: Une nucletidos mediante enlaces fosfodister (nucleotdicos), siempre en sentido 5' 3'. Utiliza nucletidos trifosfato. Necesita una molcula de ADN como molde o patrn para poder establecer la secuencia especfica de bases del ARN que se va a sintetizar. Se fija a regiones especficas del ADN (regiones o genes promotores) para comenzar su accin a partir de ese punto.

El proceso, en lneas generales, es el mismo en todas las clulas, aunque

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existen algunas diferencias entre las procariotas y las eucariotas. B.1. Transcripcin en clulas procariotas En las clulas procariotas existe una nica ARN polimerasa, y es necesario que la ARN polimerasa se una al llamado factor sigma, tras lo cual cambia de conformacin y es capaz de reconocer y fijarse a la regin promotora, una zona del ADN rica en las bases timina y adenina, algunas de cuyas secuencias se han podido identificar, como, por ejemplo, TATAATG. Una vez fijada la ARN polimerasa, el factor sigma () se libera. La ARN polimerasa fijada al ADN produce el desenrollamiento de una vuelta de la doble hlice. A continuacin comienza la actividad sintetizadora del ARN. La formacin de la cadena de ARN finaliza cuando la polimerasa llega a una zona del ADN, denominada seal de terminacin, que posee una secuencia con muchas bases guanina y citosina. En esta fase interviene, el factor rho (), una protena capaz de reconocer la seal de terminacin. La velocidad de transcripcin es alta (de 30 a 40 nucletidos unidos por segundo).

La transcripcin es necesaria para obtener los tres tipos de ARN. En el caso del ARNm, la cadena sintetizada se puede utilizar directamente para la sntesis proteica. De hecho, esta suele comenzar sin que la transcripcin haya finalizado por completo. Sin embargo, los ARN transcritos que originarn los ARNr y ARNt requieren un proceso adicional de maduracin para ser funcionales. Durante este proceso, se producen recortes y uniones de fragmentos que permiten obtener los ARN definitivos funcionales. B.2.Transcripcin en clulas eucariotas El proceso de transcripcin en clulas eucariotas es ms complejo que en clulas procariotas, ya que intervienen en l diversos factores proteicos. Existen, adems, tres ARN polimerasas diferentes que constan, cada una de ellas, de varias subunidades. Para que la transcripcin se pueda llevar a cabo es imprescindible que el ADN sea asequible a las ARN polimerasas. Para ello ha de estar desespiralizado y no debe existir un bloqueo por parte de las histonas que impida el acceso de las enzimas. A diferencia de los procariotas, no existe el factor para facilitar la identificacin de estas secuencias y la fijacin de la ARN polimerasa. En su lugar existen unos factores basales de la transcripcin, y se requieren, adems, varios activadores y coactivadores. Cuando el proceso de transcripcin ya est en marcha y se han unido los primeros 30 ribonucletidos, se aade al extremo 5 una caperuza constituida por 7metilguanosina trifosfato, que permitir identificar este extremo en el proceso de traduccin posterior. Como en los procariotas, hay una secuencia en el ADN (TTATTT) que indica el final de las transcripcin. A continuacin, sobre el extremo 3del ARN se aaden unos 200 ribonucletidos de adenina (cola poli-A) por accin de la poli-A polimerasa.

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B.3. Nuevos trminos usados en transcripcin.

C) Maduracin

El ARN transcrito an no es funcional, pues debe experimentar un proceso de maduracin consistente en la eliminacin de los intrones ( secuencias de bases que se transcriben y no se traducen) y la unin de los exones (secuencia de bases que se transcriben y se traducen) entre s. D) Traduccin Se lleva a cabo en los ribosomas. Constituidos por varios tipos de ARNr y de protenas, tienen una estructura molecular dinmica que permite la correcta
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realizacin del proceso en sus diferentes etapas. Bsicamente, la biosntesis de protenas se desarrolla de la misma manera en las clulas procariotas y eucariotas, aunque existen algunas diferencias. Antes de que se inicie propiamente la sntesis de las protenas es preciso que los aminocidos que van a ser unidos se activen. En esta fase previa, que tiene lugar en el citoplasma y no en los ribosomas, cada aminocido se une a una molcula de ARNt especfica gracias a la accin de las enzimas aminoacil ARNt sintetasas. Para ello es necesario el aporte energtico obtenido por la hidrlisis de ATP, que pasa a AMP y dos grupos fosfato. Las molculas de ARNt actan como sistemas intermediarios D.1 Iniciacin

El ARNm se une a los ribosomas citoplasmticos, cuyas dos subunidades, que se encuentran separadas cuando no estn realizando su funcin, debern acoplarse. - En primer lugar, el ARNm se une por su extremo 5 a la subunidad menor del ribosoma gracias a un factor proteico de iniciacin (lF3). - A continuacin se produce la fijacin del primer aminoacil ARNt por la formacin de puentes de hidrgeno entre las bases complementarias del anticodn del ARNt y las del codn del ARNm. El primer codn o codn de iniciacin siempre es 5 AUG 3 y, por tanto, el anticodn del primer ARNt es UAC. El aminocido unido a este primer ARNt es la formil metionina, por lo que supuestamente todas las cadenas proteicas deberan empezar por ste. Dado que no es as, posteriormente este primer aminocido suele ser eliminado. En el proceso de fijacin entre ambos ARN interviene otro factor de iniciacin (lF2). - Por ltimo, se produce el acoplamiento de la subunidad mayor del ribosoma, para lo cual se precisa otro factor de iniciacin diferente (lF1). Queda formado as el denominado complejo de iniciacin, que constituye la maquinaria sintetizadora activa. La porcin de ARNm cubierta por el ribosoma corresponde a seis nucletidos, es decir, a dos codones. Sobre el primero de ellos, AUG, ya est situado el aminoacil ARNt correspondiente, en el lugar denominado sitio P. La zona donde se encuentra el segundo codn es el sitio A. El proceso de iniciacin precisa energa, que se obtiene por la hidrlisis del GTP. GTP GDP + P D.2 Elongacin o alargamiento En esta etapa, la cadena peptdica se sintetiza por la unin de los sucesivos aminocidos que se van situando en el ribosoma transportados por los correspondientes ARNt. Para ello es necesario el desplazamiento del ribosoma a lo largo de la cadena del ARNm.

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En este proceso se pueden diferenciar tres subetapas: - Unin de un aminoacil ARNt al sitio A. Esto slo es posible si el anticodn del ARNt es complementario del codn del ARNm que se encuentra all. En esta subetapa se precisa la hidrlisis de GTP para proporcionar la energa necesaria y dos factores proteicos de elongacin (EFTs y EF-Tu). - Formacin del enlace peptdico. Una vez anclados los dos aminoacil ARNt, uno en el sitio P y otro en el sitio A, se produce la unin entre los dos aminocidos gracias a la enzima peptidil transferasa, localizada en la subunidad mayor del ribosoma. Al unirse el primer aminocido (formil metionina) al segundo se desprende de su ARNt, el cual se libera del ribosoma. Se forma de esta manera un dipptido que permanece unido al segundo ARNt, el cual se localiza en el sitio A. Translocacin del dipptido al sitio P. Se produce el desplazamiento del ribosoma sobre el ARNm en sentido 5' 3'. As, el segundo codn con el ARNt fijado sobre l (el cual lleva unido a su vez el dipptido recin sintetizado) pasa al sitio P, quedando libre el sitio A, que es ocupado por el tercer codn del ARNm. Sobre ste se fija un nuevo aminoacil ARNt, con la participacin de otro factor de elongacin (EF-G). A continuacin, se forma un nuevo enlace peptdico entre este aminocido y el dipptido situado en el sitio P, con lo que todo el proceso de translocacin descrito comienza nuevamente. De este modo, mientras el ribosoma recorre el ARNm, los sucesivos aminoacil ARNt que se van fijando al sitio A van incorporando su aminocido correspondiente a la cadena peptdica en formacin mediante la accin de la enzima peptidil transferasa. En la fijacin de cada ARNt se utiliza la energa suministrada por la hidrlisis del GTP. Debido a la complementariedad existente entre los anticodones del ARNt y los codones del ARNm, la secuencia de bases nitrogenadas de este ltimo se refleja en la secuencia de aminocidos de la protena que se sintetiza. D.3 Terminacin Existen tres codones de terminacin (UAA, UAG y UGA) en el ARNm para los que no hay ARNt con los correspondientes anticodones. Por esta razn, cuando el ribosoma llega a uno de ellos, no se sita ningn aminoacil ARNt en el sitio A y la cadena peptdica se acaba.

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Como consecuencia del proceso de traduccin se libera: - La cadena proteica que, conforme se ha ido sintetizando, ha adquirido su estructura secundaria y terciaria caractersticas. - Las dos subunidades ribosmicas separadas. - El ARNm, que puede volver a ser utilizado, aunque por lo general es destruido inmediatamente e incluso, en ocasiones, se degrada segn es ledo por los ribosomas. La velocidad de sntesis proteica es alta (se pueden unir hasta 1400 aminocidos por minuto). Las cadenas de ARNm, por otra parte, suelen ser ledas por ms de un ribosoma simultneamente (polirribosomas o polisomas).

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3.1.1.1.5. El cdigo gentico.

Segn el diccionario de la Real Academia de la Lengua Espaola, un cdigo es "un sistema de signos o seales y reglas para dar otra forma a un mensaje". El cdigo gentico establece una relacin de correspondencia entre las bases nitrogenadas del ARN y los aminocidos que codifica. Una vez conocida la funcin de intermediario que realiza el ARNm entre el ADN y las protenas, quedaba por dilucidar cmo la secuencia de nucletidos del ARN se poda traducir en una secuencia de aminocidos. El problema planteaba cmo pasar de un lenguaje de cuatro letras (las cuatro bases nitrogenadas que forman el ARN: A, G, C, U] a otro formado por elementos distintos (los 20 aminocidos que forman las protenas). Se necesitaba un "diccionario" con el que poder realizar la traduccin; este diccionario es el cdigo gentico. El descubrimiento del cdigo gentico es un ejemplo del progreso de la ciencia y de la colaboracin entre distintos grupos de investigacin. Algunos hitos de tal proceso fueron:
Para descifrar el cdigo se utiliz como hiptesis de trabajo que cada tres bases nitrogenadas codifican un aminocido, ya que el nmero de posibles secuencias formadas por tres nucletidos es 64, nmero ms que suficiente para codificar los 20 aminocidos proteicos. A cada una de estas combinaciones se la denomina codn. Los trabajos partieron del descubrimiento realizado por Severo Ochoa en 1955 de una enzima, la polinucletido fosforilasa, que cataliza la sntesis de un ARNm sin necesidad de utilizar un molde de ADN. Esta enzima simplemente une los ribonucletidos que se encuentren en el medio. Ochoa desarroll un procedimiento de laboratorio con el que obtuvo un ARN al que llam "poli U", pues estaba formado exclusivamente por uracilo.

En 1961, M. W. Nirenberg y J. H. Matthaei demostraron que el ARN dirige la sntesis de las protenas. Utilizando el polinucletido descubierto por S. Ochoa, consiguieron demostrar que este "poli U" codificaba un polipptido formado por la repeticin de un solo aminocido, la fenilalanina. El cdigo gentico comprende toda la informacin almacenada en el ADN. Cada uno de los 64 codones identifican a los 20 aminocidos proteicos y a varias seales de iniciacin y terminacin de la sntesis proteica. Este cdigo gentico presenta unas caractersticas que ayudan al cumplimiento de su funcin: Es universal. El cdigo es compartido por todos los organismos conocidos, incluyendo virus; as, por ejemplo, el codn UUG codifica para el aminocido leucina tanto en los procariontes como en los eucariontes, lo mismo que ocurre con todos los codones. Este hecho indica que el cdigo ha tenido
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un solo origen evolutivo. Gracias a la gentica molecular, recientemente se ha descubierto que esta universalidad tiene excepciones: concretamente, las mitocondrias y algunos protozoos, como Tetrahymena, utilizan un cdigo gentico ligeramente diferente. Es degenerado. Este trmino indica que la mayor parte de los aminocidos, a excepcin de la metionina y el triptfano, estn codificados por ms de un codn. Los distintos codones que codifican para un mismo aminocido se denominan codones sinnimos; esto supone una ventaja, ya que en el caso de que se produzcan cambios en algn nucletido, es decir, que haya mutaciones, no se tiene por qu alterar el orden de los aminocidos que forman una protena.
No presenta imperfeccin. Ningn codn codifica ms de un aminocido; lo contrario conllevara problemas considerables, pues a partir de un gen se sintetizaran protenas diferentes. Carece de solapamiento. Los tripletes de bases se hallan dispuestos de manera lineal y continua, sin que entre ellos existan comas ni espacios y sin que compartan ninguna base nitrogenada. Su lectura se hace en un solo sentido (5'-3'), desde el codn que indica el comienzoi de la protena hasta el que indica su final. Sin embargo, existe la posibilidad de que un mismo) ARNm contenga varios codones de iniciacin. Esto significara que se podran realizar varias fases de lectura y se sintetizara ms de un polipptido.

3.1.2. Alteraciones de la informacin gentica. 3.1.2.1. Concepto de mutacin. El trmino mutacin fue introducido por Hugo de Vries en 1901. En la actualidad, el trmino mutacin se emplea para designar los cambios que se producen en la secuencia o en el nmero de nucletidos del ADN de una clula. Puesto que los cambios en el material gentico se traducen en cambios en las protenas, las mutaciones pueden afectar a las posibilidades de supervivencia del organismo. Las hay que son perjudiciales para el organismo, llegando a causar la muerte del organismo; otras son beneficiosas, al aumentar la probabilidad de supervivencia; tambin pueden ser neutras, si no producen beneficios ni perjuicios significativos. Si las mutaciones afectan a clulas somticas no se transmiten a la descendencia aunque s pueden causar enfermedades graves al individuo (la aparicin de clulas cancerosas puede deberse a ciertos cambios en el material gentico principalmente si afectan a protenas que estimulan o inhiben la divisin celular). Si las mutaciones afectan a clulas germinales, se transmitir a la descendencia y sobre ellas actuar la seleccin natural. 3.1.2.2. Causas de las mutaciones. Las mutaciones pueden producirse por: causas naturales, como errores en la replicacin, o en la meiosis, o pueden deberse a la presencia en el medio de agentes fsicos o qumicos. Estas son mutaciones inducidas por agentes mutagnicos. (agentes fsicos o qumicos que daan el ADN o alteran su estructura y aumentan la tasa de mutacin espontnea de la especie). A) Agentes mutagnicos fsicos Las radiaciones ionizantes como los rayos X y , las partculas y y los neutrones emitidos en procesos radiactivos pueden causar roturas del cromosoma, modificar bases nitrogenadas, etc. Las radiaciones no ionizantes como los rayos ultravioletas pueden provocar la formacin de dmeros de citosina o dmeros de timina originando transiciones.
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B) Agentes mutagnicos qumicos. Pueden producir emparejamientos errneos de las bases nitrogenadas debido a que modifican las bases nitrogenadas (el gas mostaza es un agente alquilante, el cido nitroso acta en reacciones de desaminacin) o sustituyen las bases (sustancias anlogas a las bases nitrogenadas: 5 bromouracilo por timina) Hay sustancias que pueden intercalarse entre las bases de una cadena (algunos colorantes: naranja de acridina) o entre las dos cadenas del ADN (los alquitranes) y provocar mutaciones. 3.1.2.3. Consecuencias de las mutaciones. 3.1.2.3.1. Consecuencias evolutivas. Para que acte la seleccin natural es necesaria la existencia previa de variabilidad entre los individuos de una poblacin. Las principales causas de variabilidad gentica son la recombinacin gentica y las mutaciones. En la recombinacin gnica los genes existentes en la poblacin se reordenan y aparecen nuevos genotipos. Las mutaciones permiten la aparicin de genes que antes no existan, por lo cual las posibilidades biolgicas se amplan enormemente. Sin embargo, la mayora de las mutaciones son negativas. Si el gen mutado proporciona algn beneficio a los individuos que lo llevan, ir sustituyendo paulatinamente al gen original en la poblacin, ya que la proporcin de los individuos portadores ir aumentando. Se produce as una evolucin molecular que se reflejar en las caractersticas biolgicas de los individuos. En la adaptacin de una poblacin a un entorno nuevo como consecuencia de cambios ambientales o porque se coloniza una nueva rea geogrfica la presin selectiva aumenta lo que favorece la supervivencia de aquellos individuos que portan las mutaciones adaptativas ms favorables. En el neodarwinismo o teora sinttica no se considera al individuo aislado como unidad evolutiva debido a que su genotipo no cambia a lo largo de su vida. La unidad evolutiva por excelencia ser la poblacin, que define como un conjunto de individuos de la misma especie unidos por lazos de apareamiento y parentesco. Tiene continuidad de generacin en generacin y su constitucin gentica puede cambiar a travs de las generaciones. El conjunto de los genotipos de todos los individuos que componen la poblacin constituye el acervo gnico. La evolucin se produce de una manera gradual como consecuencia de pequeos cambios evolutivos que van surgiendo en una poblacin, con lo que el proceso para que aparezca una nueva especie es muy largo. La teora sinttica integra en una nica teora evolucionista los aportes de tres disciplinas: la gentica, la paleontologa y la sistemtica. Sus aspectos fundamentales se deben a T. Dobzhansky que publica en 1937 el libro La gentica y el origen de las especies, donde detalla el proceso evolutivo en trminos genticos; a G.G. Simpson que interpreta las series filogenticas fsiles como el resultado de una acumulacin progresiva de pequeos cambios y a Ernst Mayr especialista en sistemtica que introduce el concepto de poblacin como principal unidad evolutiva. 3.1.2.3.2. Efectos perjudiciales Las mutaciones pueden clasificarse segn la extensin del material gentico afectado en:
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A) Mutaciones gnicas. Las mutaciones gnicas son las que alteran la secuencia de nucletidos de un solo gen, por lo que se denominan puntuales. Pueden deberse a errores no corregidos durante la replicacin del ADN o a determinados agentes como las radiaciones o sustancias que alteran el ADN. Hay enzimas encargadas de corregir errores, ya sea durante la incorporacin de los nucletidos en la replicacin o tras la finalizacin de la sntesis de una nueva hebra. Los dmeros de timina formados por la accin de la luz UV se eliminan por las enzimas fotorreactivas. Se pueden distinguir dos tipos de mutaciones gnicas: A.1. Mutaciones por sustitucin de una base por otra distinta. Pueden ser transiciones si se sustituye base prica por otra prica, o pirimidnica por pirimidnica. En las transversiones se sustituye prica por pirimidnica o viceversa. Como el cdigo gentico es degenerado, el triplete puede sustituirse por otro que codifique el mismo aminocido; estaramos ante una mutacin silenciosa. En caso de codificar un aminocido diferente podr tener consecuencias graves si el aminocido conforma el centro activo de la protena, si crea un codn de terminacin (se forma una protena ms corta) o si ocurre en el codn de terminacin (con lo que la protena ser ms larga). A.2. Mutaciones por corrimiento de la pauta de lectura. La adicin o prdida de algn nucletido se denominan respectivamente inserciones o deleciones. Son ms graves que las anteriores ya que a partir del punto de insercin o delecin el mensaje ser totalmente distinto. B) Mutaciones cromosmicas. Afectan a la estructura de los cromosomas. Pueden existir cambios en el nmero de genes o en su disposicin lineal en los cromosomas (los genes pueden estar repetidos o faltar). Cuando estos cromosomas homlogos pero no idnticos se aparean en meiosis adoptan formas caractersticas que permiten detectarlos al microscopio. B.1. Alteraciones por la existencia de un nmero de genes incorrecto Cuando se pierde un segmento de un cromosoma y, por tanto, los genes en l contenidos. Tendremos deficiencias o deleciones si el segmento se pierde del extremo o de otro lugar del cromosoma respectivamente. En las duplicaciones un segmento del cromosoma puede estar repetido. Esto conlleva un aumento en el nmero de genes, la aparicin de nuevas variantes gnicas en mutaciones posteriores y en definitiva la evolucin de las especies.En las deleciones y duplicaciones no existe el nmero de genes correcto, se pueden producir desequilibrios en su expresin y tener consecuencias graves. B.2. Alteraciones en el orden de los genes Normalmente afectan poco al portador salvo que el gen se separe de la regin que controla su expresin. Con frecuencia disminuyen la fertilidad al entorpecer el emparejamiento correcto de los cromosomas homlogos en meiosis. Entre las enfermedades asociadas a translocaciones est la translocacin 14/21en la que los individuos reciben dos copias del cromosoma 21, una normal y la otra translocada en su mayora al cromosoma 14 que produce el llamado sndrome de Down familiar. Inversiones. En el cromosoma se dan dos roturas y cuando el segmento roto se inserta lo hace con un giro de 180. Translocaciones. El segmento cromosmico cambia de posicin, trasladndose a otro lugar del cromosoma, a su homlogo o a otro
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cualquiera. Puede ser un intercambio recproco o no, en cuyo caso se denomina transposicin. C) Mutaciones genmicas o numricas. Son variaciones en el nmero normal de cromosomas de una especie. Generalmente se producen por una segregacin anmala de los cromosomas o de las cromtidas durante la meiosis. Producen siempre alteraciones graves, las ms tolerables son las que afectan a cromosomas pequeos o a cromosomas sexuales (caso de las aneuploidas). C.1.Euploidas. cromosmicas. Son alteraciones en el nmero normal de dotaciones

Monoploidas. Cuando existe un solo cromosoma de cada par (n) o una dotacin cromosmica completa. Cuando es su nmero normal, caso de los gametos, hablamos de clulas haploides. El trmino monoploide se emplea para clulas con n cromosomas que deberan tener 2n cromosomas. Sin embargo la monoploida es la condicin normal de algunas bacterias, hongos, insectos y arcnidos. Poliploidas. Cuando existen ms de dos juegos completos de cromosomas. Pueden ser triploides (3n), tetraploides (4n), hexaploides (6n), ... como ocurre con muchas plantas de cultivo como pltanos, patatas o trigo respectivamente. En vegetales los poliploides suelen tener mayor tamao, por lo que la poliploida se provoca artificialmente mediante sustancias como la colchicina. Algunas especies de plantas se pueden hibridar, caso de la alopoliploida, al incorporar una especie un juego de cromosomas que pertenece a otra especie. C.2.Aneuploidas. Los individuos afectados poseen un cromosoma de ms o de menos respecto a su dotacin normal. Monosomas. Los individuos carecen en un cromosoma de una pareja de homlogos. Su dotacin cromosmica es 2n 1. la carencia de un cromosoma autosmico es letal. S puede faltar un cromosoma sexual. Las personas con sndrome de Turner (XO) solo tienen un cromosoma X, son mujeres estriles. Trisomas. Los portadores poseen un cromosoma de ms (2n + 1). Puede afectar a los autosomas como el sndrome de Down (trisoma 21), y ms graves o letales el sndrome de Edwards (trisoma 18) y el sndrome de Patau (trisoma 13). Las trisomas en los cromosomas sexuales son ms frecuentes. El desequilibrio gentico parece no ser tan grave. Con retraso mental moderado encontramos: el sndrome de Klinefelter (trisoma XXY) hombres estriles, y el sdrome triplo X (trisoma XXX) mujeres normales. Con posibles trastornos de conducta (agresividad) el cariotipo XYY (o duplo Y) son hombres normales. El sndrome del duplo Y es muy polmico, y no es aceptado en la actualidad por gran nmero de cientficos.

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3. 2. Gentica mendeliana La herencia establece la continuidad de las formas de vida. Aunque ascendentes y descendentes en una generacin concreta pueden parecer diferentes, existe sin embargo una semejanza bsica que se transmite de generacin en generacin en cualquier especie de planta o animal. Lo que realmente hereda un individuo de sus padres es cierto tipo de organizacin germinal (genes) que, bajo la influencia de factores ambientales, gua la secuencia pasos de la diferenciacin desde el huevo fecundado hasta el adulto, que lleva los caracteres fsicos tal como los vemos. En el siglo XIX, los criadores de plantas y animales utilizaban la hibridacin artificial para conseguir distintas variedades de una misma especie con caractersticas que las hicieran ms rentables. Sin embargo, estas caractersticas desaparecan y surgan de nuevo, aparentemente al azar, en los descendientes. A mediados del siglo XIX, Gregor Mendel, tras una lectura minuciosa de los trabajos publicados sobre hbridos, decidi abordar su estudio. Era la herencia de los caracteres resultado del azar o existan algunos principios bsicos que la regan? El primer objetivo de Mendel fue buscar la especie con la que iba a experimentar. Deseaba una planta fcil de cultivar que presentase caracteres con alternativas bien diferenciadas y fciles de seguir en la descendencia. La especie elegida fue el guisante de jardn (Pisum sativum). En segundo lugar estableci el mtodo que iba a seguir en sus experimentos y que, en esencia, consista en:
Obtener individuos de razas puras que se diferenciaran en uno o varios caracteres. Cruzar dos razas puras que diferan en uno o varios caracteres y estudiar su presencia en los descendientes. Las razas puras que se cruzan constituyen la generacin parental (P) y sus descendientes hbridos, la primera generacin filial (F1). Cruzar entre s los hbridos de la F, o, si fuese posible, dejar que se autofecundaran para estudiar los caracteres que manifiestan los descendientes de la segunda generacin filial (F2).

Mendel inici sus ensayos cruzando variedades de planta de guisante que solo se diferenciaban en un carcter, como el color de las flores o el color de las semillas: - Cruce de variedades puras. Eligi dos variedades puras que diferan en un carcter y forz la fecundacin cruzada entre ellas. En uno de sus experimentos utiliz una variedad que produca semillas amarillas y otra que produca semillas verdes. Al observar el carcter elegido en los descendientes hbridos de la F1, comprob que todas las plantas producan semillas amarillas. Repiti los cruces con razas puras que diferan en otros caracteres y comprob que en todos los casos la descendencia obtenida era uniforme y que los hbridos de la F, manifestaban el carcter correspondiente a uno de los progenitores de manera que el otro carcter no apareca. A partir de ese momento, a los caracteres que aparecan en los hbridos los denomin dominantes y a los que no aparecan, recesivos. - Autofecundacin de los hbridos. A continuacin, Mendel dej autofecundarse a los hbridos de la F1, obtenidos del cruce entre razas puras de plantas con semillas amarillas y plantas con semillas verdes. Al estudiar la descendencia obtenida, la F2, comprob que no era uniforme. De cada cuatro semillas producidas por estas plantas, tres manifestaban el carcter dominante, color amarillo, y una el carcter recesivo, el verde. Repiti el experimento con otros caracteres y obtuvo resultados similares y siempre prximos a la proporcin 3:1.
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Para explicar sus resultados, Mendel propuso la existencia de unos factores internos responsables de los caracteres expresados por la planta. El factor responsable del carcter dominante coincida en los hbridos con el recesivo, y por eso este permaneca oculto. 3.2.1. Conceptos bsicos de herencia biolgica.

3.2.1.1. Genotipo y fenotipo. La gentica es la rama de la biologa que estudia la herencia de los caracteres. Esta ciencia, que naci con las investigaciones de Mendel, ha generado un vocabulario propio y nos ha proporcionado datos que l desconoca:
La informacin responsable de cada uno de los caracteres hereditarios recibe el nombre de gen y los genes estn en los cromosomas. Los factores a los que Mendel se refera son los genes. En la meiosis cada gameto recibe uno solo de los cromosomas de cada pareja de homlogos. Eso explica que los genes o factores que coinciden en un hbrido se separen intactos al formarse los gametos. En la fecundacin los genes aportados por cada gameto se renen en el cigoto.

Genes y alelos: cada gen presenta diferentes versiones llamadas alelos. As, el gen que lleva informacin para el color de las semillas puede determinar que sean amarillas o verdes. El alelo dominante se representa con una letra mayscula, por ejemplo (A), y el recesivo con una minscula (a). Homocigoto y heterocigoto: Cada individuo lleva dos alelos para cada carcter, uno de cada progenitor. As, para el carcter color de la semilla, pueden darse las siguientes posibilidades:
Que los dos alelos sean iguales (AA o aa). Si en un individuo los dos alelos de un gen son idnticos, se dice que es homocigoto o puro para ese carcter. Que los dos alelos sean diferentes En este caso, el individuo es heterocigoto o hbrido para ese carcter. Fenotipo y genotipo: Los genes que un individuo posee para un carcter constituyen su genotipo (AA, Aa o aa) y la expresin externa de ese genotipo se denomina fenotipo. En el caso del color de los guisantes, los hbridos, de genotipo (Aa) tienen el fenotipo amarillo.

3.2.2. Aportaciones de Mendel al estudio de la herencia. El primero en formular los puntos cardinales de la herencia fue Gregor Mendel (monje agustino). Los experimentos los desarroll en un pequeo jardn del monasterio. Mendel examin minuciosamente la progenie de muchos tipos de plantas. Sus descubrimientos, publicados en 1.866, fueron de gran importancia. Aparecieron inmediatamente tras la publicacin del Origen de las especies de Darwin. Sus hallazgos permanecieron despreciados y olvidados hasta 1.900, unos 35 aos despus. Las denominadas Leyes de Mendel son tres: - Primera ley de Mendel o de la uniformidad - Segunda ley de Mendel o de la segregacin - Tercera ley de Mendel o principio de la combinacin independiente

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3.2.2.1. Leyes de Mendel Primera ley de Mendel o de la uniformidad

Segunda ley de Mendel o de la segregacin

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Tercera ley de Mendel o principio de la combinacin independiente: Mendel dej que las plantas heterocigotas de la F1 de fenotipo amarillo liso se autofecundaran. En la meiosis, cada gameto producido por los heterocigotos AaLl recibe al azar un gen para cada carcter. Existen pues 4 tipos de gametos: AL, Al, aL y al. Al cruzarse entre s (cuadrado de Punnet), se originan 16 combinaciones de genotipos y 4 fenotipos distintos (amarillo liso, amarillo rugoso, verde liso y verde rugoso) en la proporin 9:3:3:1. Como el total de amarillos (12) es el triple que el de verdes (4), y como el total de lisos (12) es tambin el triple de rugosos (4), podemos deducir la tercera ley de Mendel: en los heterocigotos para dos o ms caracteres, cada carcter se transmite a la siguiente generacin filial independientemente de cualquier otro carcter. 3.2.2.2.Cruzamiento de prueba y retrocruzamiento. Consiste en cruzar un individuo de fenotipo dominante con uno recesivo (aa). Si los descendientes son todos de fenotipo dominante, es porque el progenitor es homocigoto (AA), y la descendencia es toda heterocigoto (Aa). Si aproximadamente la mitad de los descendientes tiene fenotipo dominante y la otra mitad lo tiene recesivo, es debido a que el progenitor es heterocigoto (Aa). 3.2.2.3. Ejemplos de herencia mendeliana en animales y plantas. En todos los caracteres estudiados por Mendel exista una dominancia absoluta de una alternativa sobre otra, de forma que el fenotipo del heterocigoto coincide con el de uno de los progenitores, pero no siempre es as. Herencia intermedia: en algunos casos, el heterocigoto manifiesta un fenotipo intermedio entre los correspondientes a sus progenitores. As ocurre, por ejemplo, en el color de las flores del dondiego de noche, en las que al cruzar dos plantas homocigotos de flores rojas y blancas se obtienen plantas heterocigotos de flores rosas. Herencia codominante: Ocurre cuando los hbridos tienen rasgos de los dos progenitores. La raza de ganado Shortorn muestra este tipo de herencia, pues los descendientes de un toro rojo y una vaca blanca son ruanos (pelo blanco y rojo entremezclado). Ver problemas de gentica. 3.2.3. Teora cromosmica de la herencia. 3.2.3.1. Los genes y los cromosomas. Los factores de la herencia mendelianos se corresponden con lo que hoy denominamos genes, Un gen es una porcin de cromosoma que controla la aparicin de un carcter. 3.2.3.2. La meiosis y su relacin con las leyes de Mendel. En 1902 y de forma independiente,Walter Sutton, un estudiante norteamericano de doctorado, y Theodor Boveri, bilogo alemn, concluyeron que los factores de Mendel, o genes, se comportaban durante la produccin de los gametos del guisante, de forma similar a como lo hacen los cromosomas durante la meiosis: - los genes se presentan en parejas, como los cromosomas. - los miembros de una pareja de alelos se distribuyen uniformemente entre los gametos, como ocurre en la meiosis con los miembros homlogos de cada pareja de cromosomas. - las diferentes parejas de alelos se reparten de forma independiente, igual que hacen los cromosomas de los diferentes pares de homlogos. Por ello, propusieron la Teora cromosmica de la herencia. Los genes estn en los cromosomas. Esta teora supuso una autntica revolucin a comienzos del siglo XX, y levant una fuerte polmica. Fueron necesarios nuevos descubrimientos y pruebas contundentes para su total aceptacin. Las aport el laboratorio de T.H. Morgan, investigando la mosca del vinagre (Drosophila melanogaster), por lo que recibi el Nobel en 1934. Morgan no solo confirm la teora cromosmica de la herencia, sino la relacin cromosomassexo, los caracteres ligados al sexo.
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3.2.3.3. Determinismo del sexo y herencia ligada al sexo. A) Determinacin del sexo En numerosos organismos, entre ellos la especie humana, la determinacin del sexo se realiza por la presencia de cromosomas especiales llamados sexuales o heterocromosomas, que se diferencian del resto, que son los autosomas o cromosomas autosmicos. - Sistema XX/XY. Es el tipo de determinacin de la especie humana y de otros muchos animales [mamferos, equinodermos, moluscos y gran nmero de artrpodos]. Los cromosomas sexuales se denominan X e Y, en funcin de su forma. Las hembras tienen una dotacin XX y son de sexo homogamtico, ya que todos los gametos que producen llevan el cromosoma X, mientras que los machos son XY, es decir, de sexo heterogamtico, puesto que la mitad de los gametos producidos portan el cromosoma X y la otra mitad el Y. - Sistema XX/XO o ZZ/ZO. Determinacin propia de algunos insectos caracterizados por que uno de los dos sexos solo tiene un cromosoma sexual - Sistema ZZ/ZW. Tipo de determinacin propia de las aves, de algunos anfibios y reptiles y de los lepidpteros (mariposas). Se utiliza la notacin ZZ/ZW para no confundirse con la determinacin XX/XY. ya que en este sistema las hembras son el sexo heterogamtico (ZW), mientras que los machos son el sexo homogamtico (ZZ). En algunos grupos de insectos sociales (abejas, avispas y hormigas) no existen cromosomas sexuales. El sexo se halla determinado por el nmero de dotaciones cromosmicas; as, los individuos diploides (2n) son hembras y los haploides (n) son machos. Las hembras se desarrollan a partir de vulos fecundados, mientras que los machos lo hacen a partir de vulos sin fecundar. En el caso de las abejas, la reina, con dotacin cromosmica diploide, posee vulos, que si no son fecundados desarrollarn por partenognesis machos o znganos, mientras que si son fecundados se originarn hembras, una de las cuales ser alimentada con jalea real y se convertir en la reina, nica hembra frtil de la colmena. En algunos animales, la determinacin del sexo depende de circunstancias ambientales. Factores externos influyen en ciertos aspectos del metabolismo de clulas genticamente idnticas, modificando su desarrollo y decidiendo as la manifestacin del sexo. Entre los grandes saurios [cocodrilos, aligtores y caimanes] el sexo est determinado por la temperatura a la que se incuban los huevos: si es superior a los 27 C se obtendrn machos, y si es inferior nacern hembras. B) Herencia ligada al sexo Los cromosomas sexuales tambin son portadores de otros genes que no tienen relacin con el sexo: El cromosoma Y es muy pequeo y posee muy pocos genes. Cualquier carcter situado en el cromosoma Y lo heredarn todos los hijos varones. El cromosoma X es grande y contiene muchos genes que no estn en el cromosoma Y. Los rasgos basados en dichos genes se denominar caracteres ligados al sexo o ligados al cromosoma X. La herencia de los caracteres cuyos genes se encuentran en el cromosoma X presenta algunas particularidades: - en los hombres este tipo de caracteres solo est controlado por un alelo
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situado en su nico cromosoma X, no son homocigotos ni heterocigotos, y todos los genes del cromosoma X se manifestarn, sean dominantes o recesivos. - Las mujeres llevan dos alelos para ese carcter, uno en cada cromosoma X. As, su genotipo podr ser tanto homocigoto como heterocigoto. Las mujeres heterocigotos son portadoras, ya que llevan el alelo recesivo, pero no se manifiesta en su fenotipo. El daltonismo (ceguera para los colores) se da en un 8% de los hombres y en solo el 1 % de las mujeres. La hemofilia da problemas de coagulacin de la sangre, con graves problemas de hemorragias internas y externas entre otros. Como la frecuencia del gen es muy baja, la probabilidad de que aparezcan mujeres hemoflicas es casi nula. Adems, antes los hemoflicos moran jvenes y no tenan descendencia. As, tomaremos como ejemplo de herencia ligada al sexo estas dos enfermedades, debidas a un gen recesivo ( Xd para el daltonismo y Xh para la hemofilia). C) Los grupos sanguneos En la especie humana, el alelo IA da fenotipo grupo A, el alelo IB da fenotipo grupo B, siendo ambos codominantes (IA IB da fenotipo grupo AB). El alelo i, causante del grupo 0, es recesivo respecto de los otros dos, por lo que los individuos con fenotipo grupo 0 tienen genotipo ii. Los individuos con fenotipo grupo A pueden ser, por tanto, IA IA o IA i. Igualmente, los individuos con fenotipo grupo B pueden ser IB IB o IB i.

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ANEXO: PROBLEMAS DE GENTICA

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IV. MICROBIOLOGA Y BIOTECNOLOGA

Microorganismos Concepto de microorganismo. Llamamos microorganismo a un ser vivo que, por su pequeo tamao (menor de 1 mm), no es visible a simple vista, y se estudia con ayuda del microscopio. Ms modernamente, se definen como un grupo diverso y complejo de seres vivos que, a diferencia de los pluricelulares, pueden llevar a cabo todos los procesos vitales de crecimiento, relacin y reproduccin, bien como clulas individuales bien como agrupaciones simples. Criterios de clasificacin. Grupos principalesde seres vivos. La clasificacin tradicional de los seres vivos (animales y plantas) ha sufrido varias modificaciones desde finales del SXX: - la ausencia de verdadero ncleo en los procariontes hizo que se incluyeran en un reino aparte, Mneras. - Los hongos poseen caractersticas peculiares, distintas de las del reino animal y del vegetal, por lo que se incluyeron en el reino Fung. - Un quinto reino, Protoctista, incluye a organismos que no son plantas ni animales, ni hongos ni procariontes (ej una ameba, un alga gigante). Esta clasificacin en 5 reinos, fue propuesta por Whitaker en 1969 y modificada por Lynn Margulis y Karlene Schwartz.
Carcter Tipo celular Ncleo Cromosoma Mitocondrias Fotosntesis Nutricin Pared N de clulas Tamao celular m Mneras Procariota No ADN circular No Variable Auto y hetertrofa Polisacridos y aminoac. Unicelular 1-10 Protoctistas Eucariota Si Tpico Variable Variable Auto y hetertrofa Variable Variable 10-100 Hongos Eucariota Si Tpico Variable No Hetertrofa Polisacridos Variable 10-100 Plantas Eucariota Si Tpico Si Si Auttrofa Polisacridos Pluricelular 10-100 Animales Eucariota Si Tpico Si No Hetrtrofa No Pluricelular 10-100

Aunque est aceptada, es una clasificacin discutible. Carl Woose, en 1991, utilizando las comparaciones de las secuencias de nucletidos de un tipo de ARNr propuso la agrupacin de los organismos en 3 grandes grupos o dominios: - Bacteria. - Archaea. - Eukarya, subdividida en: Hongos, Animales, Vegetales, Macrosporidios, Flagelados y Ciliados. Dentro de los seres vivos, los microorganismos, caracterizados por su pequeo tamao (visibles al microscopio) y su simplicidad estructural, los diferenciamos como sigue: - virus: acelulares, con un solo tipo de AN, parsitos celulares obligados. - bacterias: procariotas. - Resto de microorganismos: eucariotas, subdivididos en: - algas: caractersticas vegetales, fotosintticos. - protozoos: caractersticas animales. - hongos: caractersticas vegetales, no fotosintticos. Sus caractesticas detalladas se estudian ms adelante.

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Formas acelulares: virus. Composicin, estructura y actividad biolgica. Por su estructura y por su ciclo vital, los virus no pueden considerarse seres celulares, sino acelulares, pues estn constituidos bsicamente por un fragmento de un cido nucleico rodeado de una cubierta proteica. Los virus contienen su propia informacin gentica en forma de ADN o ARN, nunca ambos a la vez. Los virus son capaces de replicarse, pero para ello necesitan de la maquinaria metablica de una clula, que se denomina hospedadora. Son, por tanto, parsitos intracelulares obligados, alternando una fase extracelular inerte y una fase intracelular activa. En funcin del hospedador que parasitan hay tres grupos de virus: - Virus bacterianos o bacterifagos. de animales. de plantas En general, los virus se caracterizan por su pequeo tamao y su simplicidad estructural. A) Estructura y composicin de los virus. La partcula vrica o virin est constituida por un fragmento de cido nucleico encerrado en una cubierta proteica, la cpsida. Algunos virus presentan una envoltura membranosa compuesta de una bicapa lipdica procedente de la clula hospedadora, y se los denomina virus con envoltura; cuando no la tienen son virus desnudos. El cido nucleico de los virus puede ser ADN o ARN, mono o bicatenario; se han descrito tambin familias de virus con ADN bicatenario. En la mayora de los virus la informacin gentica puede encontrarse en una nica molcula lineal o circular, o bien en fragmentos. La cpsida est formada por capsmeros, unidades constituidas por una o varias subunidades proteicas, los protmeros. Se diferencian tres tipos: - Virus con simetra helicoidal: son alargados, en los que los cpasmeros por lo general estn constituidos por un solo tipo de protenaEj el virus del mosaico del tabaco, VMT. - Virus con simetra icosadrica: tienen estructura polidrica, compuesta por 20 caras triangulares, en las que los capsmeros estn formados por 5-6 subunidades proteicas. Ej virus de la hepatitis A. - Virus complejos: estn constituidos por varias partes, con formas y simetras diversas. Algunos virus bacterifagos tienen cabeza con simetra icosadrica y colas con simetra helicoidal. Ej fagos de la serie T.

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A.1. Virus bacterifagos. Son en su mayora virus complejos (hay algunas familias con cpsidas icosadricas o helicoidales) y prcticamente todos son virus desnudos. Tienen ADN o ARN, y la mayora sigue un ciclo ltico, virulento, aunque los hay con ciclo lisognico. A.2. Virus de animales y de vegetales. Son principalmente virus icosadricos o helicoidales, muchos de ellos con envoltura. Los de animales tienen los dos tipos de AN (bien ADN bien ARN), los de vegetales son fundamentalmente de ARN monocatenario. La infeccin vrica puede ser, en ambos: - Infeccin ltica, que puede destruir la clula hospedadora. - Infeccin persistente, que causa alteraciones citolgicas y de crecimiento. Las partculas se liberan lentamente. Casos descritos en animales: - Infecciones latentes: los virus permanecen en ciertas clulas del organismo, y la multiplicacin es inapreciable hasta que se presenta un estmulo que la activa. Esta latencia puede ser por la integracin del AN viral en el genoma del hospedador. - Algunos virus de animales pueden transformar las clulas hospedadoras en cancerosas: virus oncognicos. Casi todos estos virus contienen dan excepto los retrovirus. - Los virus de vegetales provocan infecciones cuyos sntomas ms visibles pueden ser: mosaico (decoloracin), alteracin de los brotes, anillos necrticos, alteracin del desarrollo de la planta... Ciclos de vida de los virus: litico y Iisognico. El virus necesita la mquina replicativa de la clula hospedadora para generar nuevas partculas vricas, en un proceso llamado ciclo ltico. Algunos virus penetran en la clula hospedadora y permanecen en ella sin manifestarse, como en el ciclo lisognico de los bacterifagos, o en las infecciones latentes de virus de animales y de vegetales. A) Ciclo ltico.

- - Entrada de los virus en la clula hospedadora. En la mayora de los casos va precedida de una adsorcin especfica, que implica el reconocimiento y la unin de las protenas de la cpsida o la envoltura del virus a receptores especficos de la clula hospedadora. Ciertos virus, sobre todo vegetales, penetran a travs de heridas. A continuacin viene la penetracin del AN, que puede ser por inyeccin o por fusin de membranas y posterior liberacin del AN por rotura de la cpsida (descapsidacin).
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- - Replicacin y sntesis de componentes vricos. Tras liberarse el AN en la clula hospedadora se produce la replicacin de los componentes virales: + sntesis de protenas del virus, en el citoplasma celular. + replicacin del AN viral, bien en el citoplasma bien en el ncleo celular. Los retrovirus, como el VIH causante del SIDA, tienen dos copias idnticas de ARN monocatenario, que se replican de manera inusual a travs de una forma intermedia de ADN bicatenario. Este proceso lo lleva a cabo la reversotranscriptasa o transcriptasa inversa, que dirige la sntesis de ADN a partir de ARN. - Maduracin y ensamblaje: una vez sintetizados los componentes de los nuevos viriones, las cpsidas se ensamblan con los AN. - Liberacin: cuando el ciclo de multiplicacin finaliza, los nuevos viriones salen de la clula, bien provocando la lisis de esta bien por gemacin. Los virus con envoltura la adquieren a partir de la membrana celular. B) Ciclo lisognico.

En l los virus incorporan su AN al genoma del hospedador (estado de profago), replicndose con el sin que se produzca la sntesis de los componentes virales ni la liberacin de nuevos virus. Solo ciertos agentes inductores, en general agentes fsicos o qumicos que daan el ADN, provocan la liberacin del AN del virus, que entonces seguir un ciclo ltico. Estos virus se denominan atemperados o atenuados. AMPLIACIN DE VIRUS Origen de los virus. Por su sencillez estructural, durante mucho tiempo se les llam preclulas, y se crey que haban surgido en las primeras etapas de la evolucin biolgica. Otras hiptesis sostienen que los virus podran ser restos evolutivos de microorganismos parsitos celulares muy sencillos que, tras perder su complejidad al adaptarse al parasitismo, conservaron nicamente la informacin esencial para su replicacin. Hay cientficos que opinan que se han originado a partir de elementos gnicos d las clulas hospedadoras, que evolucionaron independizndose de la clula inicial (evolucin regresiva). Finalmente, aparecen nuevos virus por cambios genticos, por transferencia a otros hospedadores (el VIH se cree que procede de un virus de chimpancs).... Patologa vrica: la gripe aviar, la gripe A. Aunque se percibe la gripe como un trastorno banal, afecta anualmente al 10-20 % de la poblacin humana, con una mortalidad aproximada del 07 por 1000 y causa la prdida de incontables horas de trabajo. Sin embargo, cada cierto tiempo existen pandemias terribles, de origen aviar cierto o supuesto, como la mal llamada gripe espaola de 1918, que caus 50.000.000 muertes, la gripe asitica de 1957, que mat a 1.000.000, o la gripe de Hong-Kong, que
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caus 750.000 fallecimientos. En aos anteriores hubo noticias alarmantes: en 1997 existi un brote de gripe aviar en Asia que mat hizo sacrificar a 1millones de aves, pero en definitiva afect a unos pocos cientos de personas. Se trataba del H5N1. Hoy da nos encontramos inmersos en una pandemia de miedo (fomentada por los medios de comunicacin y la ineptitud y ansias de protagonismo de los polticos), a la gripe A (H1N1), que va a aportar pinges beneficios a los laboratorios fabricantes de una vacuna que han encargado masivamente algunos gobiernos, sin considerar que dicha vacuna: - se ha fabricado antes de que el virus mute (puede no ser efectiva). - no ha seguido los protocolos de seguridad antes de ser autorizada (no es segura) - segn algunos estudios, puede originar secuelas neurolgicas (no es segura). Otras formas acelulares. Hasta la segunda mitad del S XX, los virus se consideraban los agentes infecciosos ms sencillos, pero se han descubierto partculas subvirales causantes de enfermedades infecciosas: viroides (ARN) y priones (protenas). - Viroides: Son molculas de ARN monocatenario circular con forma de varilla, no asociados a protenas. No codifican para protenas y es probable que su efecto se produzca por la interaccin con el genoma de la clula hospedadora o con su control. Algunos investigadores opinan que los viroides podran representar un tipo de virus primitivo, derivado de los intrones (regiones no codificantes) que se habran liberado antes de la traduccin del ARNm. En las plantas provocan enfermedades relacionadas principalmente con el crecimiento: atrofia en la tomatera, enfermedad del tubrculo filiforme en la patata. - Priones: Los priones estn constituidos exclusivamente por protenas. Se asocian a enfermedades degenerativas del SNC de desarrollo lento, en el ser humano y en los animales: prurito lumbar de ovejas, enfermedad de las vacas locas, enfermedad de Creuzfeld-Jacobs, que produce demencia en el hombre. Los priones son infectivos, es decir se transmiten de unos individuos a otros. Son protenas anormales, muy semejantes a las protenas celulares normales. Aparentemente, los priones modifican la protena celular normal o la actividad de los genes que la codifican: la protena prinica podra inducir un cambio qumico o conformacional en la protena normal, o bien activar enzimas que llevaran a cabo esta transformacin... o estar asociadas a agentes infecciosos o a AN no detectables. En cualquier caso, la transformacin puede transmitirse a la herencia, por lo que la enfermedad producida por el prin es hereditaria. 4.4. Bacterias. Englobadas en el reino Mneras, son organismos procariontes, unicelulares, aislados o coloniales. Se subdividen en dos grupos, segn la composicin de su pared celular y las caractersticas de la sntesis de ARN y protenas: - Arquibacterias: incluye bacterias que viven en ambientes extremos de T, sal... - Eubacterias: bacterias tpicas, forman un grupo diverso, desde parsitas (Clamydias) hasta Cianobacterias (Cianofceas, algas verdeazules). 4.4.1. Caractersticas estructurales. Ver clula procariota 4.4.2. Caractersticas funcionales: tipos de nutricin. Ver relaciones entre los microorganismos y la especie humana
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4.5. Microorganismos eucariticos. 4.5.1. Principales caractersticas de algas, hongos y protozoos. A) Reino Protoctistas: algas y protozoos. Considerado como un cajn de sastre, aparte de las algas y protozoos, incluye un grupo de eucariontes, de difcil clasificacin, con la nica condicin de que no puedan incluirse en otros grupos: - No son mneras, pues son eucariontes. - No son hongos, pues suelen tener cilios o flagelos en alguna fase de su vida. - No son plantas: carecen de tejidos y no se desarrollan a partir de un embrin. - No son animales: y de blstula. B.1. Protozoos: unicelulares con caractersticas animales. Abundan en las charcas (amebas, que se desplazan por pseudpodos; paramecios, recubiertos de cilios) y causan enfermedades (tripanosoma, enfermedad del sueo; plasmodio, malaria). B.2. Algas: unicelulares, ej diatomeas, o pluricelulares, ej laminaria, que puede superar los 100 mts (pero en este caso, carecen de tejidos verdaderos). Poseen clorofila, son fotosintticas, y su color es verde, pardo o rojo. B) Reino Hongos. Descomponen la materia orgnica en inorgnica, que queda a disposicin de los vegetales. Reproduccin asexual por esporas, que germinan dando hifas, las cuales forman una masa filamentosa, el micelio. En algunas especies las esporas se forman en unas estructuras llamadas setas, muy visibles. Pueden tener mecanismos sexuales mediante la fusin de hifas. Su clasificacin es muy discutida y compleja. Ejs: Mohos (Mucor mucedo, hongo del pan) - Levaduras (Saccharomyces cerevissiae, que interviene en la fermentacin del pan y de bebidas alcohlicas). - Micorrizas, formadas por simbiosis de races de plantas y hongos. - Lquenes, por simbiosis alga-hongo. - Setas de algunos hongos, apreciadas en gastronoma. - Algunos hongos tienen gran importancia, como Penicillium productor de la penicilina, usada como antibitico y descubierta por A. Fleming en 1928. 4.6. Relaciones entre los microorganismos y la especie humana. Las caractersticas particulares de los microorganismos convierten a estos seres vivos en habitantes habituales de todo tipo de ambientes: el aire, el suelo, el agua, nuestra propia piel o incluso el interior de nuestro cuerpo y el de otros seres vivos. Gracias a su enorme diversidad metablica intervienen activamente en los ciclos de la materia y llevan a cabo procesos que ningn otro organismo podra realizar, como la fotosntesis anoxignica o la utilizacin de elementos inorgnicos (azufre, hidrgeno, hierro, amonio, etc.) como fuente de energa. Algunos de estos seres, demasiado pequeos para ser observados a simple vista y en su mayor parte inocuos, pueden convertirse, sin embargo, en los ms feroces enemigos de la salud humana y producir una amplia gama de patologas, desde el catarro comn o la gripe, hasta enfermedades tan graves como el sida, las meningitis o el paludismo. En condiciones naturales, los organismos no viven aislados, sino en seno de complejas comunidades formadas por poblaciones de organismos que interaccionan entre s y con el medio abitico que les rodea. Las
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actividades metablicas de una especie determinada pueden provocar una variacin las condiciones fsico- qumicas del medio, como, por ejemplo, una reduccin del pH por la liberacin de productos cidos, que, a su vez, limitar el crecimiento de otras poblaciones. La materia circula en la naturaleza entre los seres vivos y el medio abitico en un sistema cerrado. Los organismos productores sintetizan los compuestos orgnicos a partir de un compuesto inorgnico, el CO2, utilizando como fuente de energa la luz o compuestos inorgnicos simples (fotoauttrofos y quimiolitoauttrofos, respectivamente). La materia orgnica elaborada por los organismos productores es esencial para el resto de los organismos vivos (consumidores y descomponedores), todos ellos hetrtrofos. Los consumidores (herbvoros y carnvoros) y detritvoros, aprovechan la materia orgnica sintetizada por los productores, alimentndose directamente de ellos o de otros organismos consumidores. Por ltimo, los descomponedores son microorganismos que degradan materia orgnica en descomposicin y la remineralizan de forma que pueda ser de nuevo utilizada por los productores originando un nuevo ciclo. Los ciclos biogeoqumicos describen el proceso de transformacin de los distintos elementos qumicos por la actividad biolgica, y su intercambio entre los componentes biticos y abiticos de la ecosfera. Como se ha apuntado en la introduccin, los microorganismos paricipan activamente en estos ciclos debido a los siguientes factores: - Su amplia distribucin en todo tipo de ambientes. - Su facilidad de dispersin. - Su diversidad metablica. - Su pequeo tamao y su condicin unicelular, que favorecen un rpido intercambio de nutrientes y productos del metabolismo con el medio ambiente. 4.6.1. Beneficiosas. Desde que nace, el ser humano entra en contacto con multitud de microorganismos, muchos de los cuales son inocuos o incluso ejercen un efecto beneficioso, mientras que otros causan un desequilibrio en la funcin normal del organismo y originan diversas enfermedades. Se denomina microbiota normal al conjunto de microorganismos asociados a un tejido, rgano o superficie corporal, sin producir en estos, efectos negativos. El trmino biota o microbiota con el que se designa el conjunto de seres microscpicos que habitan en el organismo ha sustituido a su antigua denominacin de flora normal, ya que los microorganismos constituyen un grupo independiente de los reinos Plantas o Animales y, por tanto, no se pueden considerar como flora o fauna. Los parsitos son microorganismos que viven a expensas de otros organismos hospedadores produciendo en estos un efecto negativo. Cuando el parsito ocasiona un dao o lesin a las clulas u rganos del individuo parasitado, ocasionando en este el desarrollo de una enfermedad recibe el nombre de patgeno. La patogenicidad se define como la capacidad potencial de un microorganismo para producir una enfermedad, mientras que la virulencia es el grado de patogeneidad (medida como el nmero de microorganismos necesarios para producir la enfermedad). La infeccin, por ltimo, consiste en el crecimiento y colonizacin de microorganismos patgenos en un individuo. Los microorganismos que normalmente no causan enfermedades en su hbitat natural y se convierten en patgenos solo bajo determinadas circunstancias, como, por ejemplo, con el debilitamiento de las defensas inmunitarias, se denominan patgenos oportunistas.
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A) Biota normal Las superficies corporales expuestas ofrecen un ambiente propicio, rico en nutrientes, para el crecimiento de algunos microorganismos. La biota normal se localiza principalmente en la piel, la cavidad oral y los tractos respiratorio, intestinal y genitourinario. En condiciones normales, estos microorganismos no tienen efectos negativos y compiten con otras bacterias que s pueden tener un efecto patgeno, evitando as su proliferacin. En la piel y la cavidad oral proliferan sobre todo bacterias grampositivas, levaduras y estafilococos. Ocasionalmente, algunas especies pueden causar infecciones y contribuyen al desarrollo del acn, como Propionibacterium acnes, o producen caries, como los estreptococos de la placa dental. En el tracto intestinal, sin embargo, son ms comunes las bacterias anaerobias, tanto grampositivas como gramnegativas, como Escherichia coli, tiene un efecto beneficioso, ya que contribuye a la digestin de los cidos biliares y aporta vitaminas al organismo. En las mucosas genitales habita tambin un gran nmero de bacterias y hongos (por ejemplo, Candida albicans) que pueden originar infecciones vaginales ante un descenso ocasional del pH. Perjudiciales: enfermedades producidas por microorganismos en la especie humana, animales y plantas. Para crecer a expensas de un organismo hospedador y causar una enfermedad, los agentes patgenos desarrollan una serie de estrategias especficas que se resumen en cinco pasos: entrada en el hospedador, adhesin a los tejidos del hospedador, invasin de las clulas del organismo, desarrollo de la infeccin y evasin de las defensas del hospedador.
4.6.2.

Muchos microorganismos pueden causar una alteracin en el estado normal del individuo, es decir, una enfermedad. El agente causal de la enfermedad puede transmitirse dentro de una poblacin, directamente o a travs de vehculos diversos, por lo que se dice que los microorganismos patgenos causan enfermedades transmisibles o infecciosas. En trminos de su incidencia podemos hablar de una enfermedad espordica, cuando ocurre de forma ocasional, como, por ejemplo, el clera en los pases desarrollados. Por el contrario, una enfermedad epidmica es aquella que se difunde rpidamente en un rea en un perodo de tiempo muy corto (por ejemplo, las epidemias de clera que surgen ante graves desastres ambientales, como riadas o terremotos, sobre todo en pases poco desarrollados). En el caso de que la epidemia se disemine por un amplio sector de la poblacin mundial se habla de una pandemia (en la segunda mitad del siglo XX el sida constituy una de las principales pandemias). En las ltimas dcadas han resurgido o aparecido muchas enfermedades, algunas de las cuales se pensaba que estaban controladas en los pases desarrollados. El sida, las hepatitis B o C, algunos tipos de meningitis, la legionelosis o la criptosporidiosis, son ejemplos claros de nuestra historia reciente. En algunos casos, como en la tuberculosis o la fiebre amarilla, los medios de prevencin y control se haban relajado. Los factores que favorecen esta situacin son muy diversos: en primer lugar, el desarrollo de rpidos sistemas de transporte permite reducir el tiempo en el que un individuo infectado asintomtico alcanza una nueva poblacin; por otro lado, la Tierra est sufriendo cambios que alteran, por ejemplo, el desarrollo de depredadores competidores de animales que pueden servir como reservorios o vectores; han variado los hbitos sociales producindose cambios en la conducta, e por ejemplo, un aumento en el consumo de drogas en ciertos sectores favorecen la diseminacin de muchos microorganismos patgenos, como el virus de la hepatitis B, el sida o la tuberculosis, entre otros.
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Es importante, por tanto, el desarrollo de sistemas de control de la salud pblica y estudios epidemiolgicos que permitan prevenir estos problemas. 4.7. Importancia de los microorganismos en investigacin e industria. Agricultura. A) Produccin de biofertilizantes Muchos de los fertilizantes utilizados por los agricultores se componen de una fuente de nitrgeno, concretamente nitratos, capaz de ser utilizada por las plantas. Una alternativa al uso de los nitratos es la utilizacin de ciertos microorganismos que viven en el suelo, como algunas bacterias fijadoras de nitrgeno, que pueden utilizar el nitrgeno molecular como fuente de nitrgeno. Muchas de estas bacterias viven en zonas cercanas a las races de las plantas y algunas, como Rhizobium, establecen asociaciones simbiticas con las plantas leguminosas. B) Produccin de insecticidas biolgicos La utilizacin de los insecticidas qumicos tradicionales tiene el inconveniente de que estos productos, txicos en muchos casos, son absorbidos parcialmente por los vegetales y se acumulan en las races, las hojas o los frutos, por lo que pueden ser ingeridos por el ser humano al consumirlos. La bacteria Bacillus thuringiensis produce una protena, no txica para los seres humanos, que se acumula en sus esporas y acta como un insecticida natural. Cuando las larvas de los insectos ingieren las clulas y las esporas de esta bacteria, que se encuentran en el suelo o sobre las plantas, se produce un doble efecto: - La protena se degrada en el intestino y los productos resultantes atacan la pared intestinal. - Parte de las esporas ingeridas germinan y comienzan a dividirse, originando clulas vegetativas que invaden otros tejidos del insecto. Estas producen nuevas endosporas y toxinas que alcanzan niveles letales para la larva. C) Obtencin de plantas mejores Resistentes a herbicidas, o a plagas, o bien tomates que tardan ms en estropearse... o maz transgnico con el gen Bt incorporado, que se autodefiende de las plagas D) Obtencin de animales transgnicos Salmones de mayor tamao que los silvestres Farmacia y Sanidad. La obtencin de productos farmacolgicos ms puros y ms baratos constituye uno de los campos de aplicacin de la biotecnologa que ms progresos ha experimentado en los ltimos decenios del siglo XX. Una gran parte de la produccin industrial farmacutica se centra en la obtencin de vacunas y antibiticos nuevos. A) La obtencin de vacunas. Ver Inmunologa. B) La produccin de antibiticos La penicilina fue el primer antibitico que se aisl. En 1929, cuando estudiaba las infecciones de heridas causadas por Staphylococcus a Alexander Fleming observ que una sustancia producida por un hongo llamado Penicillium impeda el crecimiento de la bacteria patgena. Llam a esta sustancia penicilina, aunque no consigui aislarla. Once aos ms tarde dos qumicos britnicos, Howard Florey y Ernst Chain, lograron aislarla. Sin embargo, la produccin en masa de la penicilina para su comercializacin no se inici hasta los aos cuarenta, hacia el fin de la Segunda Guerra Mundial. El descubrimiento de la penicilina impuls la bsqueda de nuevos antibiticos y de los microorganismos que los produce. Otros tipos de
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antibiticos obtenidos por fermentacin industrial son: Las cefalosporinas, un grupo de antibiticos cuya composicin qumica muy semejante a la de las penicilinas. Ambos grupos presentan una estructura llamada -lactamasa; de ah que tambin se denominen antibiticos lactmicos. Las cefalosporinas son producidas por hongos del genero Cephalosporium y su uso teraputico es de amplio espectro. Los antibiticos producidos por los actinomicetos, un grupo de bacerias, grampositivas aerobias que viven en el suelo. Entre ellas cabe destacar las bacterias del gnero Streptomyces, de las que se obtienen antibiticos como la estreptomicina (producida por Streptomyces griseus) tratamiento de la tuberculosis; el cloranfenicol (producido por Streptomyces venezuelae), indicado para infecciones oculares o para las fiebres tifoideas; y la eritromicina (producida por Streptomyces erythreus) o la tetraciclina (producida por Streptomyces rmosus), que se usan como tratamiento alternativo en personas alrgicas a la penicilina. La obtencin de rendimientos ptimos en la produccin comercial de antibiticos se basa fundamentalmente en dos factores esenciales: - Seleccin de estirpes del microorganismo productor. Tradicionalmente se ha trabajado con estirpes seleccionadas (obtenidas por tcnicas genticas clsicas, como la mutacin y la recombinacin), que reciben el nombre de superproductores, debido a la elevada eficacia en la sntesis del compuesto. Actualmente existen cepas modificadas por ingeniera gentica, diseadas especialmente para ciertos aspectos de la produccin. - Diseo de tcnicas de cultivo que permitan el crecimiento de los microorganismos en condiciones ptimas para la produccin de los antibiticos, por ejemplo, mediante el control del pH y de la temperatura, aporte de oxgeno, suministro de nutrientes, etctera. En la actualidad, los procedimientos de bsqueda de frmacos nuevos son radicalmente diferentes, debido en particular al extraordinario avance en el conocimiento de la biologa molecular, al desarrollo de la ingeniera gentica, al anlisis de las estructuras qumicas y a la utilizacin de tcnicas informticas. Todo ello se dirige al diseo racional de los frmacos. Los procedimientos para obtener estos frmacos de diseo se basan fundamentalmente en: El conocimiento de la enfermedad a nivel molecular, es decir, de los mecanismos moleculares responsables del cuadro clnico. El diseo dirigido de una molcula biolgicamente activa que, al interaccionar con las molculas biolgicas adecuadas, contrarreste los efectos - moleculares de la enfermedad. C) Produccin microbiana de enzimas Entre las enzimas microbianas de inters industrial hay que destacar: Las proteasas bacterianas, que se utilizan como aditivos en los detergentes para lavadoras llamados bioactivos, a los que tambin se agregan otras enzimas, como amilasas y lipasas. Muchas de estas enzimas se obtienen de bacterias alcalinfilas, adaptadas a vivir en ambientes alcalinos q presentan pH ptimos entre 9 y 10, y, por tanto, se muestran activas a los elevados pH de las soluciones de este tipo de detergentes. Tambin se emplean enzimas obtenidas de bacterias termfilas, organismos capaces de resistir elevadas temperaturas. Sus enzimas alcanzan el mximo de actividad a temperaturas superiores a los 60C, habituales durante el lavado. Otra enzima microbiana de gran inters comercial es la renina, emplea desde 1965 en la fabricacin de quesos. La renina producida por microorganismos es tan eficaz como la renina de rumiantes que se utilizaba antiguamente y mucho ms barata. Tambin son importantes para la industria las amilasas y glucoamilasas, con las que se obtiene glucosa a partir de almidn. Esta glucosa sirve de sustrato
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para otra enzima, la glucosa isomerasa, que produce la fructosa que se emplea como edulcorante. Otro caso de microorganismo productor de enzimas de inters lo constituye Lactobacillus casei, que produce una enzima, la dihidrofolato reductasa, relativamente econmica de obtener, de gran importancia en el tratamiento del cncer. El metotrexato es un medicamento utilizado con frecuencia en la terapia anticancerosa, cuyo mecanismo de accin consiste en daar a la enzima dihidrofolato reductasa, que participa en la produccin de determinados compuestos imprescindibles para las clulas cancerosas. Con el fin de administrar la dosis mnima de metotrexato, ha de conocerse la cantidad exacta de medicamento en sangre; para determinarla se realiza un ensayo con la dihidrofolato reductasa obtenida industrialmente a partir de L. casei. Alimentacin. A) La fabricacin del pan Los microorganismos que intervienen en la fabricacin del pan son levaduras de la especie Saccharomyces cerevisiae, las cuales llevan a cabo una fermentacin alcohlica que emplea como sustratos de fermentacin los glcidos presentes en la harina de trigo. Los productos obtenidos en la fermentacin son: etanol, que se evapora en la coccin, y CO2, responsable de que la masa aumente de volumen y se esponje. La reaccin de la fermentacin alcohlica es la siguiente: C6H12O6 2CH3 CH2OH + 2CO2 + 2ATP B) La fabricacin del vino y la cerveza En la fabricacin del vino y la cerveza tambin interviene la levadura, Saccharomyces cerevisiae (figura 26.2), que realiza una fermentacin alcohlica semejante a la estudiada en el proceso de elaboracin del pan. En el caso del vino, el sustrato de fermentacin lo constituyen los glcidos presentes en el mosto, el zumo natural de las uvas, rico en fructosa y glucosa. La levadura, que se encuentra de forma natural sobre la piel de las uvas, transforma estos azcares en etanol y CO2. C) La fabricacin del queso y las leches fermentadas En la elaboracin del queso y productos como el yogur o la cuajada interviene un grupo de bacterias, llamadas bacterias lcticas, que fermentan glcidos sencillos para producir cido lctico. La reaccin de la fermentacin lctica es la siguiente: C6H12O6 2CH3 CHOHCOOH + 2ATP Estas bacterias, que tienen unos efectos muy beneficiosos para el ser humano, se encuentran de forma natural en la leche sin esterilizar. Las importantes son Lactobacillus (vase la figura 26.8) y Lactococcus. Las tcnicas de fabricacin del queso y las leches fermentadas son muy antiguas y probablemente surgieron como un medio de conservar la leche. Procesos de inters ambiental. A) Contaminacin e impactos. Es posible encontrar en cualquier ambiente una poblacin microbiana adaptada a ese entorno que participa activamente en el reciclaje de la materia. Esta propiedad de los microorganismos es aprovechada por diversos procesos biotecnolgicos cuya finalidad principal consiste en la conservacin y preservacin del medio ambiente. A medida que los pases se desarrollan, aumenta el consumo de nuevos productos y se genera una mayor cantidad de residuos y subproductos. La acumulacin de residuos derivados de la actividad industrial y del consumo humano es un problema que exige soluciones a corto y medio plazo, para evitar que nuestro planeta se convierta en un enorme basurero y se alteren todos los equilibrios ecolgicos. La biotecnologa puede aportar soluciones
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eficaces a este problema, y por ello los aspectos medioambientales son importantes en industria biotecnolgica. Las actuaciones biotecnolgicas ambientales se centran en dos aspectos: Biodegradacin: consiste en la descomposicin, mediante microorganismos, de materiales como papel, pintura, textiles, hormign e hidrocarburos. Biorreparacin o biorremediacin: es la utilizacin de microorganismos para eliminar del medio ambiente sustancias contaminantes. Por ejemplo, hay una estirpe de Pseudomonas, modificada geneticamente y patentada en 1974, que contiene genes en un plsmido que le permiten degradar eficazmente hidrocarburos. Un aspecto importante de biorreparacin mediante microorganismos es la detoxificacin y eliminacin de los PCB (bifenilos policlorados), compuestos difciles de degradar y muy contaminantes. Se ha comprobado que microorganismos anaerobios naturales, presentes en el cieno del ro Hudson (Nueva York), llevan a cabo una deshalogenacin parcial de los PCB, lo que facilita su degradacin posterior por bacterias aerobias. Algunas bacterias son capaces de utilizar muchos herbicidas e insecticidas y, en general, los llamados compuestos xenobiticos, como fuente de carbono. Estas bacterias pertenecen al grupo de las Pseudomonas. Actualmente, en muchos vertederos urbanos se est poniendo en marcha un proceso para el tratamiento microbiano de las basuras, que recibe nombre de compostaje, en el cual los mismos microorganismos presentas en la basura llevan a cabo una fermentacin mediante la que eliminan una parte importante de los residuos y se obtiene un producto (compost) utilizable como sustrato para el cultivo vegetal. El tratamiento o depuracin de las aguas residuales es una de las aplicaciones ms conocidas de la biotecnologa. En este proceso se combinan tratamientos fsico-qumicos con tratamientos microbianos, con la fin de eliminar la materia orgnica y los productos txicos presentes en el agua residual. Los residuos plsticos constituyen un problema ecolgico realmente grave, ya que muy pocos microorganismos son capaces de degradarlos. La solucin a este problema, sin embargo, se encuentra una vez ms en el mundo microbiano. Algunas bacterias almacenan sus reservas de carbono en forma de unos compuestos llamados poli-beta-hidroxialcanos o polihidroxialcanoatos (PHA). Estos compuestos son polisteres, es decir, verdaderos plsticos, que cuentan con la enorme ventaja de ser biodegradables. Las bacterias producen diferentes tipos de PHA, dependiendo de cul sea su fuente de carbono. Manipulando la longitud de la cadena se pueden obtener bioplsticos transparentes como el cristal, para envases, o largos y resistentes, para fabricar tejidos. B) Biotecnologa y minera. En algunas circunstancias las tcnicas tradicionales en la minera no resultan rentables, y se han desarrollado nuevas tecnologas que utilizan microorganismos para la extraccin de ciertos metales, uranio o petrleo: Algunas de ellas son: Biolixiviacin. Cuando en zonas mineras hay menas metlicas secundarias con baja concentracin en el metal, como cobre o hierro, se utilizan algunas bacterias como Thiobacillus ferrooxidans, que provocan la solubilizacin de estos metales y permiten su obtencin a bajo coste, mediante una precipitacin posterior. Recuperacin de petrleo cautivo. La extraccin primaria del petrleo se efecta por la presin del propio yacimiento, y la secundaria mediante inyeccin de agua o gases en el pozo. Con este sistema se extrae hasta un 50% del petrleo del yacimiento. El resto no extrado se llama petrleo cautivo, y para hacerlo aflorar a la superficie se inyecta a presin agua espesada con polisacridos de origen bacteriano, llamados goma de xantano.
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La bacteria Xantomonas campestris produce este polisacrido, que es un agente espesante muy eficaz.
4.8. Biotecnologa: concepto y aplicaciones.

A) Concepto. En un sentido amplio, la biotecnologa es la disciplina basada en la utilizacin de seres vivos o sus componentes, para realizar determinados procesos qumicos con finalidad industrial. Hay procedimientos biotecnolgicos clsicos, como la fermentacin alcohlica, lctica... cuyo origen se remonta a civilizaciones muy antiguas. Actualmente, el trmino se relaciona con los importantes descubrimientos en el campo de la gentica molecular, que han hecho posible el desarrollo de complejos procedimientos, denominados en conjunto ingeniera gentica, y que permiten el aislamiento, modificacin y expresin del material gentico. B) Aplicaciones. B.1. Clonacin de genes (Tecnologa del ADN recombinante) Clonar un gen es obtener un conjunto de genes idnticos, procedentes de dicho gen concreto. La tcnica de clonacin comprende varias etapas: -Obtencin del fragmento de ADN que contiene el gen que se quiere clonar. Unas veces se asla el ADN a partir de extractos celulares, otras se obtiene un ADN complementario del ARNm. - Insercin del gen en un vector de clonacin. Este puede ser un plsmido (ADN circular bacteriano), genoma de un virus, microbalas de metales nobles.. - Introduccin del vector de clonacin en la clula hospedadora elegida. Por transformacin artificial, por transduccin, por mecanismos de microinyeccin similares a una escopeta de aire comprimido.. - Deteccin del gen clonado. Bien porque se introduzca con el gen otro de fcil deteccin en el fenotipo, bien con sondas de ADN radioactivo, que se hibridan con el gen clonado. - Multiplicacin de la clula hospedadora para obtener muchas copias del gen. En cultivos adecuados, en placas de Petri... B.2. Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR). Con ADN pol se obtienen copias del ADN. Para que acte es preciso: - una cadena molde de ADN, que es una de las hebras de la doble hlice - una mezcla de desoxinucletidos trifosfato - un cebador, que es un corto fragmento de ADN monocatenario complementario de un extremo de la cadena molde, Para ello, se desnaturaliza la doble cadena de ADN por calor, y cada una de las hebras acta como molde, obtenindose en el laboratorio mltiples copias de un fragmento determinado de ADN: tras 20 ciclos de sntesis se pueden obtener en torno a un milln de copias. Sus utilidades son muchas: -clonacin de genes -estudios evolutivos de organismo ya extinguidos, a partir de cantidades mnimas de ADN de los fsiles, que se compara con el de organismos vivos. -estudios histricos y arqueolgicos -huellas dactilares de ADN, huellas genticas, para identificar individuos a partir de muestras de sangre, semen, piel o cabellos; esto se usa en medicina forense e investigaciones policiales, as como en pruebas de paternidad.
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V. INMUNOLOGA 5.1.Concepto de infeccin. Entendemos por infeccin la entrada y desarrollo en el organismo de agentes vivos patgenos, especialmente bacterias y virus, o parsitos determinados. La alteracin subsecuente que estos pueden llegar a producir, la prdida de la salud, es la enfermedad infecciosa, cuyos sntomas y gravedad varan enormemente segn los casos. Se denomina inmunidad al estado de invulnerabilidad de un determinado organismo ante un microbio o agente patgeno concreto. Esto se consigue porque todos los seres vivos cuentan con una serie de complejos mecanismos defensivos, llamados respuesta inmune, debidos al Sistema Inmunitario (SI). Estos les permiten protegerse frente a infecciones microbianas y rechazar molculas extraas a su organismo, o molculas propias que no se reconocen como tales por haber sufrido algn tipo de modificacin (antgenos, Ag). Los Ags pueden ser protenas, polisacridos, fragmentos bacterianos Las clulas del SI son fundamentalmente leucocitos, de distintos tipos y con diferentes funciones, pero todos formados en la mdula sea y localizados en la sangre, linfa, ganglios linfticos e incluso espacios intercelulares de los tejidos. Las molculas con accin inmunitaria son bsicamente unas protenas especficas, los anticuerpos (Ac), sintetizadas contra los eptopos de los Ag. 5.2.Mecanismos de defensa orgnica. 5.2.1. Inespecificos. Barreras naturales y respuesta inflamatoria. A) Barreras naturales. Antes de poner en marcha los mecanismos defensivos, los SV tienen otros sistemas muy eficaces de proteccin, las defensas externas o barreras pasivas, como son: - Estructurales: piel y mucosas, pues solo cuando existen daos en ellas penetran los patgenos (heridas, quemaduras, lceras..) - Mecnicas, que favorecen el arrastre de los organismos: cilios y mucus de las vas respiratorias, flujo de orina... - Bioqumicas: son sustancias y secreciones, como la lisozima de la saliva y lgrimas, que rompe la pared bacteriana; los ac grasos y el ac lctico de la piel, que bajan el pH de la misma; jugo gstrico, cuyo HCl acta igual. - Ecolgicas: biota de superficie y ap digestivo, respiratorio y reporductor, que impide el crecimiento de los patgenos. Cuando estas barreras son superadas, actan las defensas internas, que pueden ser especficas o inespecficas. B) Defensas internas inespecficas Actan con gran rapidez contra cualquier sustancia extraa o agente extrao que invada al organismo. Son: B.1. Inflamacin. Sus sntomas son calor, enrojecimiento, dolor y tumefaccin. Ante invasin o traumatismo, las clulas afectadas liberan los mediadores de la inflamacin (Factor Estimulador de la Leucocitosis, Leucotrienos, Histamina, Bradiquinina, Prostaglandina E) que, junto con ciertas protenas del plasma sanguneo (Complemento) y los productos del metabolismo y de la destruccin de las bacterias, tienen los siguientes efectos: aumento de leucocitos en sangre,
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vasodilatacin, aumento de la permeabilidad capilar, activacin de los fagocitos, quimitactismo, sensacin de dolor... Todo ello aumenta la presencia de clulas y molculas defensivas y su eficacia en la zona, y la presencia de fibringeno, que coagula e impide la diseminacin del invasor. B.2. Fagocitos. Son leucocitos de la serie mieloide, que se desplazan por pseudpodos y engloban al Ag por fagocitosis, degradndolo con las enzimas de los lisosomas. La fagocitosis es favorecida por las llamadas opsoninas, molculas que hacen de puente entre los receptores del fagocito y la pared bacteriana. Las principales opsoninas son los anticuerpos (Ac) y otras protenas denominadas complemento. Una vez destruidos se forma el pus, que son restos de bacterias, fagocitos... Este grupo de clulas comprende los leucocitos polimorfonucleares (basfilos, neutrfilos y eosinfilos) y los monocitos, que cuando salen de los capilares crecen y aumentan su capacidad fagoctica, transformndose en macrfagos (libres) o histiocitos (fijos en tejidos).

Los leucocitos linfoides, los linfocitos, no pertenecen a los fagocitos, sino actan en las defensas especficas. B.3. Complemento. Son 30 protenas, llamadas componentes (C), que estn en el plasma sanguneo y actan defensivamente con gran rapidez. Acta como mediador de la inflamacin, interviene en la opsonizacin de clulas extraas y provoca la rotura de su membrana plasmtica. Previamente, el complemento ha de activarse, lo que se realiza en cascada: el Ag activa al C 1, este al C2, que a su vez activa al C3 ... pues el producto final de cada reaccin acta como enzima de la siguiente. B.4. Interfern. Las clulas infectadas por un virus sintetizan y liberan unas protenas, llamadas interfern, que impiden que la infeccin se propague con dos acciones bsicas: - Impide la replicacin del virus en clulas infectadas que an no han sido destruidas por la accin vrica, pues origina la sntesis de unas enzimas, las protenas antivricas (AVP), que interfieren en la fabricacin de protenas del virus. - Activa a unos linfocitos, los NK (Natural Killer, clulas asesinas naturales), que reconocen clulas infectadas por el virus o cancerosas y las eliminan. Adems, el interfern tiene otras acciones secundarias: activa a los macrfagos y linfocitos B, y modulan la sntesis de Ac y linfocinas. El interfern protege frente a todos los virus que puedan infectar a una especie, pero no protege a los individuos de otras especies, es especfico a nivel de organismo, no de virus. Con ingeniera gentica se ha obtenido interfern humano, eficaz contra el herpes, algunas hepatitis crnicas y ciertas leucemias.
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5.2.2. Especficos. Concepto de respuesta inmunitaria. Se dirigen contra un tipo de Ag concreto, y crean una memoria inmunitaria que permite rechazar el mismo Ag en la siguiente invasin con mayor efectividad. La realizan los linfocitos. A) Linfocitos y rganos linfoides. Los linfocitos no fagocitan ni son mviles, y existen tres tipos: - Linf B: sintetizan protenas especficas, Acs, ante la presencia de Ag. Como se difunden por los lquidos orgnicos, su inmunidad se denomina humoral. - Linf T: no fabrican Acs, dan la I celular, destruyendo clulas alteradas (diana), y algunos regulan la actuacin del SI. - Linf no T-no B, que destruyen clulas diana, pero de forma inespecfica. Las clulas precursoras de los linfocitos se originan en la mdula sea y se convierten en linfocitos maduros en los rganos linfoides, que pueden ser: - rganos Linfoides Primarios: en ellos se diferencian los linfocitos, los B en la misma mdula sea, los T en el Timo. - rganos Linfoides Secundarios: en ellos se acumulan e interactan los linfocitos: ganglios linfticos y bazo, y tambin el apndice, las placas de Peyer intestinales, amgdalas y adenoides (junto a la nariz). B) Mecanismos de accin de la inmunidad especfica. Es un mecanismo muy complejo, que acta por fases: - Identificacin y reconocimiento del Ag extrao, al tomar contacto con la membrana de los linfocitos. Aunque a veces se haga directamente, lo normal es que las clulas presentadoras de Ags los fagociten y digieran, situando determinados fragmentos del Ag en su superficie y dirigindose a los rganos linfoides, donde los presentan a los linfocitos. - Activacin de los linfocitos: tras reconocer al Ag, sufren cambios metablicos y fisiolgicos, y empiezan a dividirse activamente. - Desencadenamiento de la RI: los linf B se transforman en clulas plasmticas, liberadoras de gran cantidad de Acs especficos, los linf T destruyen las clulas diana.

La accin defensiva debe estar perfectamente regulada para no ser deficiente ni excesiva, lo que se consigue por otros linf T.

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5.3.Inmunidad y sistema inmuntario. 5.3.1. Componentes del sistema inmuntario. Ver concepto de infeccin y mecanismos de defensa.

5.3.2. Concepto y naturaleza de los antgenos. Antgenos (Ag) son molculas ajenas a un organismo, y/o reconocidas como tales, y que provocan una respuesta inmune (RI). Los Ag son diferentes en los distintos seres vivos: una molcula que posee carcter antignico en un organismo determinado no lo posee en otro. Caractersticas de los Ag: - Son molculas de gran tamao, fundamentalmente protenas (independientes o unidas a glcidos o a lpidos) y polisacridos complejos (p ej dextranos). Numerosas molculas sintticas actan tambin como Ag. Existen, adems, ciertas molculas, los Haptenos, de baja masa molecular, que por s mismas no son antignicas, pero si lo son si se unen a protenas pertenecientes al organismo en que son introducidas. - Pueden ser molculas libres o formar parte de determinadas estructuras biolgicas (membrana plasmtica, glicoclix, flagelos, pared bacteriana, envuelta de virus..) . - Son reconocidos como Ag cuando se unen a los receptores antignicos de la membrana plasmtica de algunas clulas del organismo, con los que son complementarios espacialmente. Se une solo una parte del Ag, el determinante antignico o eptopo (4-5 aminocidos), de los que cada Ag posee muchos, diferentes o iguales entre si. 5.3.3. Tipos de respuesta inmunitaria: humoral y celular. Ver apartados 4 y 5. 5.4. Respuesta humoral. 5.4.1. Concepto, estructura y tipos de anticuerpos. Se debe a los anticuerpos (Acs), protenas especficas fabricadas por los linfocitos B contra los Ags extraos, que se distribuyen por los fluidos del organismo.

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Los Acs, inmunoglobulinas (Ig) o gammaglobulinas son protenas con una pequea parte glucdica. Tienen 4 cadenas polipeptdicas, 2 mayores (cadenas pesadas o H, de 420-440 aa) y 2 menores (cadenas ligeras o L, de 210-230 aa). Existen puentes disulfuro (S-S) entre cadenas pesadas y ligeras, dando una estructura en Y, en la que hay una regin constante que es la misma para cada tipo de IG y que los une a la membrana del propio linf, a los fagocitos o al complemento, segn los casos. Existe tambin una regin variable, distinta en cada Ac especfico, que corresponde a los extremos de los brazos de la Y. En ella est el partopo, complementario del eptopo, donde se une el Ag. Cada molcula de Ac puede unirse a dos Ags (valencia 2), pero si se unen 2 Y (dmero) o 5 Y (pentmero) la valencia cambia. La parte glucdica del AC se une covalentemente a la regin constante, y su funcin no est clara. Hay 5 tipos de IG: G, A, M, D, E.

5.4.2. Clulas productoras de anticuerpos: linfocitos B. Los Linf B se forman y diferencian en la mdula sea, adquiriendo inmunocompetencia (capacidad para producir Acs). En ella se generan millones de Linf B, genticamente diferentes, cada uno de los cuales fabricar distintos Acs. Normalmente hay unos pocos Linf B diferenciados, que adems se encuentran inactivos hasta que aparece un Ag, que se une a los Acs de la membrana de un determinado Linf B activndolo: por rpidas divisiones se origina un clon de clulas productoras del mismo Ac. La mayora de los Linf B activados se transforma en clulas plasmticas, de gran tamao y capacidad: 10000 molculas de Ac/ cel/ min). S.e. algunos dan clulas de memoria, de vida ilimitada, para rechazar futuras invasiones del mismo Ag. 5.4.3. Reaccin antgeno-anticuerpo. Los Acs estn en la sangre y en muchas secreciones (mucus, saliva, leche)
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en los lquidos intersticiales y en la membrana de los Linf B. Tipos: ver tabla. Al unirse al Ag especfico los Acs dan una serie de efectos: - Directos: son las denominadas reacciones Ag-Ac o serolgicas: + Neutralizacin, que elimina los efectos negativos en el organismo invadido: los Acs actan como antitoxinas contra las exotoxinas de los microorganismos o se unen a la cpsida o a la envoltura de un virus, por lo que estos no pueden unirse a la superficie de las clulas a las que infectan.. + Precipitacin: si el Ag es soluble y tiene 2 o ms sitios de unin a los Acs, se forma un gran agregado de ambos tipos de molculas, lo que hace precipitar a los Ags y facilita el ataque de los fagocitos. + Aglutinacin: si los Ags forman parte de clulas o de partculas, la unin con los Ags forma puentes entre ellas, agregndolas y facilitando su destruccin. Estas dos ltimas reacciones se usan como diagnstico de laboratorio.

- Indirectos: facilita la eliminacin del Ag por opsonizacin( que facilita la fagocitosis) y la activacin del complemento. 5.5. Respuesta celular. 5.5.1. Concepto. Ocurre sin produccin de Acs y es muy eficaz para la destruccin de: - Clulas extraas, de otro individuo, aunque sea de la misma especie (p ej trasplantes). - Clulas propias tumorales. - Clulas infectadas por virus. - Clulas que contienen microorganismos de crecimiento intracelular (Mycobactherium, Leishmania). 5.5.2. Tipos de clulas implicadas: linfocitos T, macrfagos. Existen dos tipos de linfocitos implicados; los T y los noT-noB: - Linfocitos T: Se diferencian en el Timo y hay dos grupos principales, segn sean las protenas de su membrana:
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+ Linf T4: que se subdividen en Linf TH o cooperadores, que estimulan a los linf B y a otros linf T; Linf TD que estimulan a los macrfagos. + Linf T8: que se subdividen en Linf TC o citotxicos, destructores de las clulas diana; Linf TS o supresores que evitan una RI excesiva. Los receptores de los Linf T no identifican Ags libres, y han de reconocer simultneamente al Ag extrao y a una molcula propia, glucoproteica, llamada autoAg, de la cel diana en que se encuentra. Las clulas presentadoras (macrfagos) realizan una degradacin parcial del Ag y lo colocan en su membrana junto con el autoAg, presentndolo para su unin al Linf T. que los destruye. Funciones de los Linf T: + Citotoxicidad: lisis de las cels diana por los Linf TC : tras unirse a ellas, el Linf segrega unas protenas, las perforinas, que destruyen la membrana de la cel diana y la matan. + Regulacin de la RI: los Linf TH la intensifican; los Linf TS la disminuyen, desactivando a los otros linfocitos y provocando tolerancia inmunolgica a los propios Ags, por lo que su mal funcionamiento puede provocar alergias y enfermedades autoinmunes. - Linfocitos noT-noB: son menos del 3% del total de linfocitos, y actan de forma inespecfica, sin aumentar su nmero un dar memoria inmunolgica. Tipos: + Clulas K o asesinas: atacan clulas cubiertas por Acs segregando perforinas. + Clulas NK o asesinas naturales que destruyen clulas afectadas por virus, cancerosas y de rganos trasplantados, de forma similar a las anteriores. 5.6. Respuestas primaria y secundaria. Memoria inmunolgica. La memoria inmunolgica se debe a los Linf B, que quedan en el organismo incluso tras la completa eliminacin del Ag. Estos linfocitos se activan rpidamente ante una nueva invasin del mismo Ag: mientras que la respuesta primaria tarda en desarrollarse de una a dos semanas y se debe a Ig M, la secundaria tarda muy pocos das y se debe a Ig G, ms afn al Ac y fabricada en mayor cantidad, por lo que son ms eficaces. Esta es la causa de que tras padecer y superar una enfermedad infecciosa la reinfeccin no sea posible en un perodo de tiempo, que en algunos casos (sarampin, varicela, rubola) dura toda la vida.

La vacunacin es un sistema de inmunizacin activa producido sin desarrollar una actividad patolgica, basado en la fabricacin de Linf B de memoria por inoculacin de grmenes no virulentos en un individuo sano, para inducir la sntesis de Acs.
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5.7. Tipos de inmunidad. Sueros y vacunas. 5.7.1. Congnita y adquirida. 5.7.2. Natural y artificial. 5.7.3. Pasiva y activa. La inmunidad puede ser congnita (desde el nacimiento) o adquirida en un momento dado de la vida del individuo, y esta ltima puede deberse a procesos naturales (Inmunidad natural, IN), o intervenir ciertas tcnicas cientficas, (Inmunidad artificial, IA), y en cada uno de esos dos tipos (IA e IN ) puede ser activa (IA, si el individuo fabrica sus propios anticuerpos tras la introduccin del Ag) o pasiva (IP, si los recibe fabricados por otro organismo), P. ej: - INP: paso de Acs de la madre al nio por la placenta o la lactancia. - INA: tras superar una enfermedad, quedan Acs y linfocitos de memoria. - IAP: Sueros. - IAA: Vacunas. 5.7.4. Sueros y vacunas. A) Sueros. Producen una inmunizacin pasiva; en ella se introducen Acs previamente sintetizados por otra persona o animal. Una vez que se le ha inyectado el microbio, el animal fabrica Acs especficos, y se le extrae sangre peridicamente. Tras ser purificado y esterilizado el suero, se le inyecta al individuo que lo necesita. Proporciona proteccin inmediata, y es til en sujetos inmunodeficientes, pero su duracin es limitada, puede transmitir enfermedades padecidas por el individuo fabricante de los Acs, y, si estos los ha fabricado un animal, puede haber reacciones de rechazo contra protenas de este. El suero propiamente dicho contiene un solo Ac, las gammaglobulinas son una mezcla que contiene el Ac que interesa. Son muy tiles en la lucha contra la rabia, ttanos y difteria en personas no vacunadas, pues se desarrollan con gran rapidez y son enfermedades muy graves. Igualmente son tiles contra enfermedades para las que no existen vacunas eficaces, como la hepatitis A. B) Vacunas B.1. Descubrimiento histrico. La bsqueda de un sistema para evitar el contagio de enfermedades infecciosas ha sido siempre una aspiracin del ser humano. Desde tiempos muy remotos se han observado que las personas que sobrevivan a enfermedades infecciosas no volvan a contraerlas. Por esta razn se les dedicaba al cuidado de los enfermos durante las epidemias. Los primeros intentos mdicos de provocar una inmunizacin sin padecer previamente la infeccin se llevaron a cabo en China en pocas muy lejanas. Se elaboraba un preparado desecado a partir de costras de enfermos de viruela, que se haca inhalar a una persona sana o se aplicaba sobre una erosin producida en la piel, de esta manera en muchos casos se consegua que el individuo se inmunizara. Sin embargo, era relativamente frecuente tambin que se produjera el contagio de la enfermedad piola propia inoculacin del preparado e incluso la muerte del paciente. Este mtodo conocido como variolizacin, fue introducido en Europa a finales del siglo XVIII. En la misma poca, el mdico rural ingls Edward Jenner observ que los ganaderos padecan una enfermedad benigna, denominada viruela vacuna, que los haca inmunes a la viruela negra humana. Aplicando un extracto de las pstulas de una persona afectada por la enfermedad de las vacas, al que denomin vaccinia o vacuna, consigui una proteccin eficaz sin los riesgos de la variolizacin, mtodo al que sustituyo rpidamente. Esto result posible porque los microorganismos que producen b viruela vacuna y la viruela humana tienen
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antgenos comunes y se produce una inmunidad cruzada. En 1880, Louis Pasteur descubri que algunos factores modificaban la capacidad infectiva de los microbios causantes de las enfermedades infecciosas. Observ que un cultivo de laboratorio de la bacteria que produce el clera de las gallinas perda su virulencia despus de unos meses, pero al inocularlo en animales sanos estos desarrollaban inmunidad frente al agente patgeno. Comprob el mismo fenmeno en el ntrax del ganado al calentar un cultivo de la bacteria causante de esta enfermedad. En 1885 consigui inmunizar a un nio que haba sido mordido por un perro y que an no haba desarrollado la rabia con un extracto seco de la mdula espina extrada de animales rabiosos. En honor a la vacuna de Jenner, Pasteur bautiz este mtodo que permita la inmunizacin inoculando microorganismos no virulentos con el nombre de vacunacin. Por la misma poca, Emil von Behring y Shibasaburo Kitasato descubrieron La inmunizacin pasiva al suministrar suero de animales inmunes para el ttanos. A lias sustancias antitxicas presentes en el suero se les llam anticuerpos. Posteriormente se elaboraron sueros contra la toxina diftrica. Tambin a finales del siglo XIX, Paul Ehrlich descubri la diferencia entre la respuesta inmune secundaria y primaria, y llev a cabo otros estudios que sentaron las bases de los aspectos cuantitativos de la inmunizacin. Aunque hoy la viruela es una enfermedad extinta, cuyo virus se conserva en algunos laboratorios de alta seguridad, era en el pasado una enfermedad de alta mortalidad, (30%) que elimin a millones de personas. De hecho se cree que su llegada accidental a Mxico fue un factor ms de la victoria de Hernn Corts sobre los indgenas en Tenochtitln en 1503. Tras el descubrimiento de Jenner en 1798, comenz una vacunacin masiva en Europa. Sin embargo, no era fcil saltar el Atlntico: los viajes superaban el mes, con lo que cualquier persona inoculada con la vacuna desarrollara la enfermedad y la superara antes de llegar a Amrica. En esta poca, bajo el reinado de Carlos IV, parti en 1803 una expedicin de La Corua a cargo del mdico alicantino Balms: la Real Expedicin Filantrpica de la vacuna de la viruela. Embarcaron en el Mara Pita 22 nios expsitos corueses, a los que se iba infectando de dos en dos, mediante contacto brazo a brazo del fluido de pstulas frescas (antes de que desarrollaran la enfermedad, en los primeros das). De este modo, y almacenando Balms los fluidos vacunos en ampollas, se llev la vacuna a Tenerife, Venezuela, Mxico, Panam, Colombia... B.2. Tipos de vacunas. Las vacunas han dado resultados espectaculares en la lucha contra las enfermedades infecciosas, algunas de las cuales han sido erradicadas. Una buena vacuna ha de tener capacidad inmungena,(provocar una RI eficaz, aunque ninguna es efectiva en el 100% de los casos), ha de ser segura (no causar la enfermedad) y no producir efectos secundarios importantes. Tipos: - Atenuadas: contienen microbios vivos aunque debilitados, que dan una infeccin muy limitada: cepas mutantes no virulentas, obtenidas a partir de cepas normales cultivadas en condiciones subptimas ( ej T cercana al mximo tolerable) hasta que pierden los elementos causantes de la patogenicidad, pero sin daar los Ags. Ej polio, sarampin y rubola. - Inactivadas: los microbios estn muertos( formol, calor intenso), por lo que hay que dar una dosis mayor, a veces dosis de recuerdo. Ej rabia, fiebre tifoidea, tos ferina y difteria.

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- Acelulares: contienen solo partes o productos de los microorganismos, como son: + toxoides (toxinas alteradas por calor o agentes qumicos, usadas contra ttanos y difteria, debidas a potentes exotoxinas) . + antgenos aislados, como algunos polisacridos usados en vacunas contra el neumococo. Gracias a la ingeniera gentica hay vacunas de este tipo contra la hepatitis B y la meningitis meningoccica. Tambin se usan pptidos cortos contra la glosopeda del ganado. Un caso especial es la vacuna contra la malaria de Patarroyo, que se ha obtenido uniendo tres fragmentos antignicos diferentes del Plasmodium, con lo que ha creado una molcula nueva con capacidad inmungena. Su inconveniente es la escasa capacidad inmungena en nios (en torno al 40%). + antiidiotpica: utilizan como Ag un Ac producido contra otro Ac. Ver fotocopia. Se ha usado con xito contra la rabia y otras enfermedades en animales de laboratorio, y se prev su uso en humanos.

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5.7.4.1. Importancia de las vacunas en la salud. En cuanto a la importancia sanitaria de la prevencin de enfermedades basta citar las tres grandes pandemias de gripe del SXX: espaola, en 1918, asitica en 1957, y de Hong-Kong en 1968, todas debidas a la cepa A, subtipos H1 N1 , H2 N2 , y H3 N2 respectivamente, o al hecho de que afecta anualmente al 10-20 de la poblacin, o a que causa 114000 hospitalizaciones y 36000 muertes anuales por complicaciones relacionadas con ella en USA, a la prdida de incontables horas de trabajo... Por su dramatismo y actualidad, repasemos los datos sobre la gran pandemia del SIDA: a casi un cuarto de siglo de su comienzo (1981) los datos referidos a 2003 de ONUSIDA arrojan un balance de 40 millones de infectados (5 millones de ellos en dicho ao, en el que murieron 3 millones de personas por el SIDA). La cifra de muertos desde el inicio supera los 30 millones. Si a esto aadimos las diferencias entre ricos y pobres (19 millones de infectados en el frica subsahariana, medio milln en Europa, de los cuales unos 54000 se localizan en Espaa), las diferentes expectativas y calidad de vida de unos y otros, pues los tratamientos antiretrovirales son muy caros... podemos comprender la importancia de las vacunaciones y de gestos como el del colombiano Elkin Patarroyo, premio Prncipe de Asturias, que ha cedido la patente sobre la vacuna contra la malaria a la ONU y OMS, con lo que su precio es muy bajo y los habitantes de los pases pobres pueden acceder a ella. Por otro lado, en 1999 se contabilizaron 13 millones de muertes por enfermedades prevenibles por vacunas y sueros existentes, muchas ms que por SIDA. 5.8. Alteraciones del sistema inmunitario. En ocasiones se producen anomalas en el funcionamiento del SI, que dan una respuesta insuficiente o, al contrario, excesiva o innecesaria. 5.8.1. Hipersensibilidad (alergia). Es una respuesta excesiva que daa al propio organismo. Tipos: A) Tipo I, inmediata o anafilctica. Llamada alergia, es muy rpida (10-20 min). El Ag (alrgeno) puede ser veneno de abejas (fosfolipasa A), protenas el polen, heces de caros, penicilina, mariscosy los Linf B fabrican Ig E, que se une dos tipos de clulas: los mastocitos y basfilos. Una nueva exposicin a AG hace que el este se una a las Igs E y se de la desgranulacin de los mastocitos y basfilos, que liberan mediadores de la inflamacin. Esto causa unos efectos que van desde enrojecimiento, picor y goteo hasta muerte por asfixia o por un brutal descenso de la presin sangunea (choque anafilctico). Se trata con antihistamnicos y broncodilatadores, pero lo ideal es la desensibilizacin sistemtica con dosis crecientes. B) Tipo II, citotxica. Las Igs G o M se unen a Ags de clulas humanas, dando algunas enfermedades autoinmunes, incompatibilidad de grupos sanguneos y rechazo rpido de trasplantes (48h). C) Tipo III, mediada por complejos inmunitarios. Muy semejante a la II, pero los Ags circulan libres en la sangre. Pueden causarla infecciones crnicas, un suero procedente de un animal... y algunas enfermedades autoinmunes pertenecen a este grupo. D) Tipo IV, retardada. Aparece incluso semanas despus de la exposicin, y no se debe a Acs, sino a Linf T. Causa dermatitis de contacto por cosmticos, ropa, bisutera... mal llamadas alergias de contacto. Tambin causa el rechazo tardo de trasplantes.
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5.8.2. Autoinmunidad. Normalmente el SI elimina a los Linf que actan sobre los propios Ags, pero a veces no lo hace, apareciendo enfermedades lentas y progresivas (artritis reumatoide, esclerosis mltiple, enfermedad de Hasimoto, enfermedad de Adisson...). No se conoce la causa ltima, se cree que puede ser por cambios en los Ags propios, aparicin de Ags extraos similares a los propios, que dan reaccin tambin contra estos, aparicin de clulas que no suelen contactar con los Linf.... 5.8.3. Inmunodeficiencia. Son incapacidades para desarrollar una RI adecuada ante un Ag, que puede daar gravemente al hospedador. Pueden ser A) Congnitas. No son frecuentes, pero son muy graves. Se desarrollan en los primeros aos de la vida. Las anomalas de las defensas inespecficas son: - Enfermedad granulomatosa crnica, ligada al cromosoma X. Los neutrfilos no fagocitan, por lo que sufren frecuentes infecciones bacterianas. - Deficiencia en C5 del complemento, por lo que este no se activa. Las anomalas de las defensas especficas son: - Agammaglobulinemia, ligada al cromosoma X: por deficiencia en Linf B, no producen Acs, (en ocasiones nicamente dejan de producir las Igs A). - Sndrome de Di George: por carencia del Timo, no maduran los Linf T. - Inmunodeficiencia combinada grave de Linf B y T: padecen continuas infecciones, que llevan a la muerte salvo transplante de mdula. B) Adquiridas. Son ms frecuentes, y aparecen en cualquier momento de la vida por leucemia, irradiaciones, tratamiento largo con inmunosupresores como los esteroides... P. ej el SIDA (Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida) se debe a un virus, el VIH (virus de la inmunodeficiencia humana). 5.8.3.1. Inmunodeficiencia adquirida: el SIDA. El SIDA (Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida) se debe a un virus, el VIH, que es un retrovirus, ARNvirus monocatenario, pero que tiene dos cadenas iguales, una cpsida icosadrica y una compleja cubierta lipoproteica.

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Desarrollo:
- El VIH penetra en el cuerpo de un individuo sano procedente de un enfermo o portador: directamente, por transfusin de sangre o por jeringuilla contaminada, por relaciones sexuales en que el semen o las secreciones vaginales contacten con microheridas y erosiones, o de madre a hijo, en el embarazo o parto. No penetra por alimentos, insectos, dar la mano - Alcanza el sistema circulatorio y se une a los Linf Th o cooperadores; tambin puede unirse a los macrfagos. - Se funden la envoltura vrica y la membrana del Linf, penetrando el AN y la reversotranscriptasa, fabricndose ADN a partir del ARN. Cada divisin de los Linf transmite este ADN a las clulas hijas. Adems el virus se multiplica lentamente y se libera por gemacin, daando a largo plazo a los linfocitos. - Los Linf mueren, su n cae de 500 a menos de 150 / mm3, apareciendo la inmunodeficiencia grave, y muerte por infecciones oportunistas: tuberculosis pulmonar, neumona... y cnceres raros de la piel (Sarcoma de Kaposi). El tiempo entre infeccin y enfermedad es de 5-10 aos, en los que el individuo portador (o seropositivo: tiene Acs en el suero sanguneo, pero no presenta sntomas de la enfermedad) puede transmitir el virus sin ser consciente. No hay tratamiento curativo eficaz, solo se retarda la progresin con frmacos que interfieren con la reversotranscriptasa, con la unin virus receptor de los Linf, o con la enzima proteasa que forma la cpsida del virus. Esto alarga la vida y la mejora su calidad, pero ante la falta de vacuna, la prevencin ms eficaz son las campaas informativas para evitar las situaciones y prcticas de riesgo.

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5.9. El sistema inmunitario y los trasplantes. El sistema inmunitario protege al cuerpo de sustancias potencialmente nocivas tales como microorganismos, toxinas y clulas cancergenas. Estas sustancias dainas tienen protenas llamadas antgenos en su superficie y si el sistema inmunitario identifica a dichos antgenos que son extraos (que no forman parte del cuerpo), los atacar. De la misma manera, la sangre o tejido extrao en el cuerpo puede desencadenar una reaccin a la transfusin de sangre o un rechazo al trasplante. Para ayudar a evitar esto, antes del procedimiento de trasplante, se "tipifica" el tejido para identificar los antgenos que contiene. Aunque la tipificacin del tejido asegura que el rgano o tejido sea lo ms similar posible a los tejidos del receptor, la compatibilidad generalmente no es perfecta. Ninguna persona tiene antgenos de tejido idnticos a otra, exceptuando los gemelos idnticos. El rechazo puede ser rpido (48 horas) debido a hipersensibbilidad de tipo ii, citotxica, mediada por Ig G o M, o ser tardo (semanas); es la hipersensibilidad de tipo IV, retardada, debida a linfocitos T) Los medicamentos inmunodepresores son necesarios para prevenir un rechazo al trasplante o, de lo contrario, el trasplante de rganos y tejidos casi siempre ocasionara una respuesta inmunitaria y provocara la destruccin del tejido extrao. Sin embargo, se presentan algunas excepciones. Los trasplantes de crnea rara vez sufren un rechazo debido a que carecen del suministro de sangre y por lo tanto las clulas inmunolgicas y los anticuerpos no llegan a la crnea para causar el rechazo. Adems, los trasplantes entre gemelos idnticos casi nunca causan rechazo. Sntomas
El rgano no funciona adecuadamente Molestia generalizada, indisposicin o sensacin de enfermedad Dolor o inflamacin donde est ubicado el rgano (rara vez) Fiebre (rara vez)

Los sntomas varan dependiendo del rgano o tejido trasplantado. Por ejemplo, los pacientes que rechazan un rin pueden tener menos orina, y los pacientes que rechazan un corazn pueden presentar sntomas de insuficiencia cardiaca.

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