BACILOSCOPIA

La tuberculosis es una enfermedad infectocontagiosa producida por agentes del grupo Mycobacterium tuberculosis complex, especialmente por el Mycobacterium tuberculosis o bacilo de Koch (BK). Es la infección crónica más importante del mundo en cuanto a morbilidad y mortalidad. La localización más frecuente es en el aparato respiratorio, seguida a gran distancia por la afectación de cualquier otro lugar. Anatomopatológicamente se caracteriza por la formación de granulomas.

M. tuberculosis es un patógeno intracelular capaz de producir infecciones de por vida. No se conoce aún la compleja existencia intracelular de esta bacteria, pero se está aclarando con lentitud. En el período de exposición, M. tuberculosis ingresa en las vías respiratorias y las diminutas partículas infecciosas alcanzan los alvéolos, y son digeridas por los macrófagos alveolares. A diferencia de la mayor parte de las bacterias fagocitadas, M. tuberculosis impide la fusión del fagosoma con los lisosomas (al inhibir la molécula de unión específica, el antígeno endosomal específico 1 [EEA1]). No obstante, el fagosoma es capaz de fusionarse a otras vesículas intracelulares para facilitar el acceso del patógeno a nutrientes y su proceso de replicación intravacuolar. Las bacterias fagocitadas también pueden eludir la destrucción mediada por los macrófagos con la formación de intermediarios reactivos del nitrógeno creados entre el óxido nítrico y los aniones superóxido al catabolizar catalíticamente los oxidantes generados. Fisiología y estructura: Bacilo aerobio, grampositivo débil y fuertemente acidorresistente Pared celular rica en lípidos, lo que hace al microorganismo resistente a desinfectantes, detergentes, antibióticos antibacterianos frecuentes y tinciones tradicionales Virulencia:

con mayor capacidad agresiva.UU. etambutol. la infección es causada por la inhalación de las secreciones respiratorias mitidas por un adulto con enfermedad tuberculosa pulmonar con esputo positivo a BK. Existen dos factores que determinan esta evolución: a) la facilidad de exposición a un adulto enfermo.000 nuevos casos en EE. ta piracinamida y el etambutol o el levofloxacino se utilizan durante 12 meses después de estar expuesto a M. tuberculosis multirresistente Se hace profilaxis con BCG en los países endémicos El control de la enfermedad se hace con vigilancia activa. No todos los casos desarrollaran la enfermedad.8 millones de casos cada año y 2 millones de muertes la enfermedad es más frecuente en el sudeste asiático. los alcohólicos y los adictos a drogas. formado por el chancro de inoculación o nódulo de Gohn.Capaz de crecimiento intracelular en los macrófagos alveolares Inactivados ta enfermedad depende fundamentalmente de la respuesta del anfitrión frente a la infección Epidemiología: Universal. en 2003 la población con mayor riesgo de padecer la enfermedad son Los pacientes inmunodeprimidos (fundamentalmente los infectados por VIH). la linfangitis . van a ser capaces de llegar al alveolo y ser fagocitados por los macrófagos alveolares. África subsahariana y el este de Europa Hubo alrededor de 15. Se constituye el llamado complejo primario. como la tuberculosis miliar o la meningitis tuberculosa. rifampicina durante 4 meses. un tercio de la población mundial está infectada por este microorganismo Hay 8. piracinamida y rifampicina durante 2 meses seguidos de 4 a 6 meses de INH y rifampicina u otras combinaciones alternativas de antimicrobianos ta profilaxis de la exposición a la tuberculosis puede incluir INH durante 9 meses.Los niños menores de un año son los que tienen mas probabilidades de desarrollar formas graves de enfermedad. Patogenia Solamente las partículas inhaladas más pequeñas. Unos bacilos son destruidos y otros. tienen la facultad de resistir los mecanismos defensivos celulares y provocar una primoinfección tuberculosa. los Vagabundos y aquellos que están expuestos a otros individuos infectados El hombre es el único reservorio natural la transmisión de una persona a otra ocurre a través de aerosoles infectados Tratamiento. las que contienen entre 1-3 bacilos. prevención y control: Se necesitan pautas con múltiples fármacos y cursos de tratamiento prolongados para prevenir la aparición de cepas resistentes a fármacos Isoniacida (INH). y b) las condiciones inmunológicas propias del huésped. o rifampicina y piracinamida durante 2 meses. medidas profilácticas y terapéuticas y un control exhaustivo de cada caso Mecanismo de contagio En más del 98% de los casos.

La pared celular rica en lípidos y ácidos carboxílicos (ácido micólico) que tienen la propiedad . después de la tinción con colorantes básicos. que se manifiesta antes de los 5 años que siguen al contagio se cataloga como tuberculosis primaria. — Enfermedad tuberculosa. pueden abarcar: • • • • • • • • • Tos (algunas veces con flema) Expectoración con sangre Sudoración excesiva. Síntomas La fase primaria de la enfermedad normalmente no tiene síntomas. Sólo la prueba de tuberculina es positiva. el ácido mi cólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido. y aquella que se desarrolla más tarde se denomina tuberculosis posprimaria. especialmente en la noche Fatiga Fiebre Pérdida involuntaria de peso Dificultad respiratoria Dolor torácico Sibilancias LA TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica. Presenta manifestaciones clínicas. La repercusión sobre el pulmón se traduce en dos situaciones patológicas distintas: — Primo infección tuberculosa subclínica (primo infección latente. La enfermedad. viraje tuberculínico o infección tuberculosa). Otros síntomas que pueden ocurrir con esta enfermedad: Por esto se denominan bacilos ácido-alcohol resistente o BAAR. enfermedad tuberculosa o primoinfección patente. bacteriológicas e inmunológicas. Se caracteriza por la ausencia de síntomas y signos clínicos. radiológicos y bacteriológicos. que se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (por ejemplo. Cuando los síntomas en verdad ocurren. secundaria o de tipo adulto. radiológicas.regional y la adenopatía satélite.

Franz Ziehl (1859 to 1926). La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. un patólogo. Una vez que se forma este complejo colorante-pared. ni siquiera la acción conjunta del ácido y del alcohol puede deshacerlo. un bacteriólogo y Friedrich Neelsen (1854 a 1894).de unirse excepcionalmente fuerte al colorante primario (fuscina de Ziehl) cuando se usa el calor como mordiente. ya que las paredes retienen el colorante en forma "resistente". MATERIALES Y METODOS . La tinción fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes. Las mico bacterias como M. marinum y los parásitos coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. tuberculosis y M.

• Luego se Desecha el aplicador y guantes. Varillas de vidrio u otro soporte inoxidable. preferentemente de gas aunque puede utilizarse uno de alcohol. carbolfucsina al 1% acido-alcohol al 1% azul de metileno al 0.2% PREPARACIÓN Y FIJACIÓN DEL EXTENDIDO: • se Destapó con cuidado el envase. • Tomar una parte del aplicador con la mano izquierda y la otra con la derecha. Enrollarla en una de los dos partes del aplicador con la ayuda de la otra. • Se colocaron las partículas seleccionadas sobre el portaobjetos y se extendieron con el aplicador con movimientos suaves. entre el pulgar y el índice. Una pinza. y se obtuvieron puntas ásperas. Etanol al 70% o xilol. circulares. de dimensiones adecuadas para sostener láminas portaobjetos durante la tinción. • La lámina se deja secar al aire.(a) • Se Dejó el extendido en un soporte ubicado al costado de la mesada para que se seque a temperatura ambiente. Un hisopo. Aceite de inmersión. Envases para recolección de muestras.MATERIALES: • • • • • • • • • • • • • • Microscopio con objetivo de inmersión. limpiadas con alcohol y secadas al aire. . Un mechero. Aplicadores. y con los extremos irregulares seleccionar la partícula más densa o purulenta de la muestra de esputo. Láminas portaobjetos nuevas. • Se Partió un aplicador en dos. dispersándolas de forma homogénea en el centro de la lámina. Un soporte para sostener láminas portaobjetos durante la preparación de extendidos.

No calentar con mechero. esto fue suficiente para que la fucsina penetre adecuadamente en el bacilo y se fijara a sus lípidos.• Se Toma el extendido con una pinza manteniendo la cara que contiene la muestra hacia arriba. con un frasco o un grifo. se levantó cuidadosamente la lámina portaobjetos desde el extremo más cercano. • En el término de aproximadamente cinco minutos se calentó tres veces hasta emisión de vapores. Se tuvo cuidado de no hervir la fucsina porque la pared de los bacilos puede destruirse y colorearse mal. hasta que observe que se desprenden los primeros vapores blancos. Y se dispersó el colorante con suavidad a lo largo de todo el extendido (1) • Con la llama de un hisopo embebido en alcohol calentar suavemente por debajo de los extendidos.(2) • Con una pinza. (b) • Se Colocó la lamina en el soporte destinado para la coloración. B A TINCIÓN DE ÁCIDOALCOHOL RESISTENCIA (ZIEHLNEELSEN) Coloración • se Cubrió totalmente la superficie del extendido con fucsina básica fenicada. y se pasa rápidamente sobre la llama de un mechero tres o cuatro veces cuidando que no se caliente demasiado. con movimientos de vaivén. Se Enjuagó con abundante agua a baja presión. Y .

Decoloración • Se Cubrió la totalidad del extendido con solución decolorante y se dejó actuar aproximadamente 3 minutos (4) • Inmediatamente se Enjuagó el extendido con abundante agua a baja presión. apoyándolas en posición vertical en un soporte.(6) • se Enjuagaron las láminas en ambas caras con agua a baja presión.(5) • Verificar que el extendido se ha decolorado • Se inclino el portaobjetos para eliminar el exceso de agua. Coloración de fondo 6 • se Cubre todo el extendido con solución de azul de metileno. Se Giró el extendido y se lavó con cuidado la parte posterior.(7) • Luego se Dejaron secar las láminas a temperatura ambiente. sin tocar el preparado con el gotero. Dejando actuar durante un minuto.posteriormente se Lavó muy suave la superficie eliminando totalmente la solución de fucsina.(3) • Se Inclinó el portaobjetos para eliminar el exceso de agua para evitar la dilución de los reactivos que se utilizados en el resto de la tinción.(8) Lectura de extendidos coloreados por Ziehl Neelsen • Se Depositó una gota de aceite de inmersión en un extremo del frotis. .

• Se Observó cada campo microscópico en superficie y profundidad. con la lente 100x de inmersión.• Se Enfocó el extendido donde ha colocado la gota de aceite. moviendo permanentemente el tornillo micrométrico. antes de desplazarse al campo contiguo. • Luego se Siguió un recorrido en líneas rectas. • Se Contaron el número de campos y el número de BAAR que han identificado. . sistemático para recorrer el extendido evitando repetir la lectura de algunos campos. de izquierda a derecha.

Coloración azul del medio debida al azul de metileno Figura 1.ANALISIS DE RESULTADOS Al realizar la tinción de Ziehl Neelsen se observo una coloración azulada del fondo del extendido pero sin la presencia de microorganismos de coloración fucsiarojiza. . la metacromasia es la capacidad de los colorantes que al reaccionar con un poli anión producen un viraje en la coloración por esta razón se usa como medio de contraste ya que reacciona con todos las sustancias que se encuentren en el extendido menos con los bacilos que han sido teñidos fucsina dando una coloración azulada (figura 1). Esta coloración se debe a que el azul de metileno es un colorante básico metacromatico. Resultado de bacilos copia en caso de prueba positiva (presencia de BAARs ). Mycobacterium tuberculosis (bacilosacido alcohol resistente) Figura 2.

el esputo observado es Estos resultados se deben a que el paciente del cual se extrajo la muestra de esputo no presenta tuberculosis pulmonar dado a que si el presentara al enfermedad eliminaría por el esputo los microorganismos y al hacer el extendido se observaría estos bacilos en cantidades variables dependiendo del grado de enfermedad. el ácido mi cólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con este alcohol-ácido. Resultado obtenido luego de la observación de 100 campos al microscopio. de esta manera retienen el colorante y al observarlo microscopio se pueden observar solo los microorganismos que tengan esta propiedad como son los bacilos del genero de las mycobacterias. .La coloración fucsia-rojiza de algunos microorganismos en esta prueba se debe a la fucsina un colorante básico que penetra todas las células dándoles una coloración fucsia-rojiza por esta razón la nuestra es sometida a decoloración dado que si el extendido en estas condiciones se coloca al microscopio todo se observaría de esta coloración por esta razón se usa el acido-alcohol dado a que esta sustancia remueve la coloración de todas las células menos los bacilos acido alcohol resistentes dado a que estos presentan ácidos grasos (por ejemplo.

. EXAMEN MICROSCOPICO PREPARADO DE ORIENTACION Espermatozoos……………………...mg/dl DIAGNOSTICO……………………………………………………… . Espermiofagia…………………….mg/dl Fosfatasa acida………………………...mg/dl Acido cítrico………………. Aglutinación……………………………… Células……………………………....ESPERMATOGRAMA INFORME DE ANALISIS DE LÍQUIDO SEMINAL Nombre: Edad: CONDICIONES DEL EXAMEN Hora de eyaculación: 1:45 pm Método de obtención: masturbacion Hora de examen: 3:40 Abstinencia sexual …………………..………………... Tiempo de transporte ……………… Ultimo proceso febril …………………….. Leucocitos……………………………. NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML: MOVILIDAD Inmóviles: 40% Movilidad total: 60 % Activa 40% Pasiva: 20 % VITALIDAD Espermatozoos teñidos: 40% Índice de vitalidad: 60% ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales: 90% Espermatozoos anormales: 20% Alteraciones de cabeza: 20% Macros: 50% Micros: 50% Alteraciones de Seg.. BIOQUIMICA Fructosa……………………….UI/ml Zinc……….... Cristalización……………………………. EXAMEN MACROSCOPICO Volumen: 1 ml Color: blanquesino Olor: característico Viscosidad: normal Aspecto: sui generis Licuación: positiva Filancia: positiva Ph………………………. Leucocitos por campo…………………….. Otras células…………………………. Int: 20% Alteraciones de cola: 40% Alteraciones mixtaa: 0% Células de espermiogenesis ………….……………….……..

Leucocitos…………………………….Nombre: Paul A.. Tiempo de transporte ……………… Ultimo proceso febril ……………………. Veas Najar Edad: 23 años CONDICIONES DEL EXAMEN Hora de eyaculación: 2:00 pm Método de obtención: masturbacion Hora de examen: 3:40 Abstinencia sexual ………………….. EXAMEN MICROSCOPICO PREPARADO DE ORIENTACION Espermatozoos……………………..mg/dl Acido cítrico………………...mg/dl DIAGNOSTICO……………………………………………………… . Int: 03% Alteraciones de cola: 02% Alteraciones mixtaa: 0% Células de espermiogenesis ………….……………….. NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML: MOVILIDAD Inmóviles: 11% Movilidad total: 89 % Activa 67% Pasiva: 23 % VITALIDAD Espermatozoos teñidos: 20% Índice de vitalidad: 80% ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales: 80% Espermatozoos anormales: 20% Alteraciones de cabeza: 15% Macros: 60% Micros:40% Alteraciones de Seg. BIOQUIMICA Fructosa………………………..mg/dl Fosfatasa acida………………………. Espermiofagia……………………... Leucocitos por campo……………………... Cristalización……………………………. EXAMEN MACROSCOPICO Volumen: 4 ml Color: blanquesino Olor: característico Viscosidad: normal Aspecto: sui generis Licuación: positiva Filancia: positiva Ph………………………. Otras células…………………………...UI/ml Zinc………..……. Aglutinación……………………………… Células…………………………….....……………….

. NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML: MOVILIDAD Inmóviles: 23% Movilidad total: 77 % Activa 52% Pasiva:48 % VITALIDAD Espermatozoos teñidos: 30% Índice de vitalidad: 70% ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales: 70% Espermatozoos anormales: 30% Alteraciones de cabeza: 21% Macros: 70% Micros: 30% Alteraciones de Seg......UI/ml Zinc………. Aglutinación……………………………… Células…………………………….. Leucocitos……………………………..mg/dl Acido cítrico……………….mg/dl DIAGNOSTICO……………………………………………………… ..mg/dl Fosfatasa acida………………………. Cristalización…………………………….……. Tiempo de transporte ……………… Ultimo proceso febril ……………………. Espermiofagia……………………. EXAMEN MICROSCOPICO PREPARADO DE ORIENTACION Espermatozoos……………………...……………….. Otras células………………………….………………..... BIOQUIMICA Fructosa………………………. Salcedo Ramos Edad: años CONDICIONES DEL EXAMEN Hora de eyaculación: 2:15 pm Método de obtención: masturbacion Hora de examen: 3:40 Abstinencia sexual ………………….. EXAMEN MACROSCOPICO Volumen: 3 ml Color: blanquesino Olor: característico Viscosidad: normal Aspecto: sui generis Licuación: positiva Filancia: positiva Ph………………………. Int: 05% Alteraciones de cola: 04% Alteraciones mixtaa: 0% Células de espermiogenesis …………. Leucocitos por campo……………………..Nombre: Brando D.

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA BACTERIOLOGIA Docente: LIC. TM. DAVID MATOS INFORME DE PRACTICAS BACILOSCOPIA Y ESPERMATOGRAMA Alumno: Paul Anthony veas najar Código: 2008230437 .

CUSCO .2011 .

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