Uso de Sustancias Antioxidantes en el Enraizamiento de Estacas de Yerba Mate

Tarrag, Jos R. - Sansberro, Pedro A. - Mroginski, Luis A.

Facultad de Ciencias Agrarias -UNNE - Ctedra de Fisiologa Vegetal, Instituto de Botnica del Nordeste. CC: 209 - (3400) Corrientes, Argentina. E-mail: ibone@espacio.com.ar INTRODUCCIN La yerba Mate (Ilex paraguariensis St. Hil.), es una especie dioica que se propaga por semillas, lo cual trae el inconveniente de la heterogeneidad en las plantaciones resultantes. Por ello, se requiere de un mtodo eficiente en la multiplicacin vegetativa de esta especie, ya que la seleccin de plantas con caractersticas fenotpicas destacadas y su posterior multiplicacin, constituye un mtodo relativamente rpido para obtener material superior en los caracteres elegidos. En general, el material adulto proveniente de especies leosas; presenta una elevada cantidad de compuestos fenlicos, los cuales, son liberados de los compartimentos celulares en respuesta a un dao fsico (por ejemplo, durante la preparacin de las estacas). Estos fenoles pueden ser oxidados por el oxgeno del aire, peroxidasas o polifenoloxidasas y forman otros compuestos llamados quinonas; stas se polimerizan rpidamente y forman uniones covalentes con las protenas, ocasionando el cese de la actividad enzimtica (Preece y Compton 1991), lo cual desencadena el declinamiento y muerte de la estaca. Si bien, las sustancias antioxidantes, no impiden la oxidacin de los compuestos fenlicos, previenen la polimerizacin de las quinonas y reducen la probabilidad de que stas reaccionen con las protenas (Compton y Preece 1986). El propsito de este trabajo es estudiar el efecto que ejercen varias sustancias antioxidantes en el enraizamiento de estacas plurinodales de yerba mate. MATERIALES Y MTODOS Se emplearon trozos de ramas con 4-6 entrenudos y con dimetros entre 3 y 5 mm, extrados de varios individuos adultos (9 aos de edad) que crecan en condiciones de campo (cedidas gentilmente por el Establecimiento La Cachuera S.A.). Estas fueron acondicionadas, para su transporte, en bolsas plsticas y transportadas en condiciones refrigeradas (12-15 C). Los tratamientos se efectuaron dentro de las 24 hs de su extraccin. Antes del inicio del experimento, se cortaron todas las lminas foliares, salvo la ms cercana al pice, de la cual slo se dej la mitad. Previo al tratamiento con la mezcla enraizante, las estacas tuvieron los 2 cm basales sumergidos, durante 24 hs en 15 mM de Phloroglucinol (1,3,5-trihydroxybenzene), Catechol (1,2benzenediol), 4-cloro resorcinol (1,3-dihydroxy-4-chlorobenzene), PPZ (1-phenyl, 3-methyl, pyrazol -5- ona), cido ascrbico en 0.5 % de PVP (polyvinylpyrrolidone, PVP-40). Se emplearon las siguientes mezclas enraizantes: 1- IBA (cido indolbutrico) 1.5% + sacarosa 10% + Captan 10% (composicin modificada de Caso et al 1993) 2- ANA (cido naftalenactico) 1.5 % + sacarosa 10% + Captan 10% En ambos casos, se emple como vehculo talco inerte. Todas las drogas utilizadas en este experimento tiene ms del 98% de pureza (Sigma, Chemical Co). Para el enraizamiento las estacas se colocaron en tubetes (150 cm3, HIKO V-150, Paul Forestal S.R.L., Buenos Aires, Argentina) con perlita. Las condiciones ambientales fueron dadas por una cmara diseada para tal fin, la cual consta de 3 mdulos de 200 x 150 x 220 cm, provista de un sistema automtico que permite mantener la humedad del ambiente en el valor deseado a travs de un sistema de niebla. Adems, cuenta con 2 extractores de aire, que permiten renovar la fase gaseosa en forma automtica a travs de un control digital. La temperatura en la fase area se mantuvo entre 22 y 27 C y la temperatura del substrato se mantuvo entre 20 y 25 C mediante el empleo de mantas trmicas (Hotbox Heatwave, Compaa ArgentinaHolandesa S.A., Buenos Aires, Argentina).

Se emplearon 10 estacas por tratamiento, realizndose 3 repeticiones. Cada 7 das se monitore la oxidacin en cada uno de los tratamientos y al cabo de 70 das se determin el nmero de estacas enraizadas. RESULTADOS Es importante destacar el comportamiento de la curva de oxidacin a travs del tiempo, en la cual se observ que, en la mayora de los casos, el pre-tratamiento con sustancias antioxidantes es efectivo durante las primeras 6 semanas, momento en que aumenta la oxidacin cuyo valor final depende del tratamiento efectuado. En todos los casos, la oxidacin fue menor cuando se emple IBA en la mezcla enraizante (Fig. 1 a-b). Si bien, se ha inducido el enraizamiento de estacas, empleando el cido naftalenactico (ANA), la auxina, sin duda ms utilizada en el enraizamiento de material adulto, es el cido indolbutrico (IBA) debido a su mayor persistencia en la estaca (Blakesley 1994). En tal sentido, el empleo de IBA en la mezcla enraizante, permiti que un mayor nmero de estacas enrace y en general, estas presentaron un mayor nmero de races principales respecto a los tratamientos con ANA (Tabla 1), esto favorece una ms rpida implantacin y una mejor exploracin del suelo una vez trasplantadas.

Tabla 1: Efecto de la combinacin de diferentes sustancias antioxidantes con ANA IBA sobre el enraizamiento de estacas de Yerba Mate.

Estacas con races (%)

Pre-tratamiento Control Phloroglucinol Catechol 4-cloro resorcinol PVP PPZ cido ascrbico

Nmero de races/estaca
ANA 33.3 16.6 33.3 33.3 0 55.5 29.3 61.1 5.5 44.4 22.2 50.0 28.8 IBA 83.3 8.3 52.4 2.3 85.7 8.2 38.1 11.9 66.7 22.0 56.6 8.3 36.7 11.6 ANA 3.5 1.5 3.0 1.0 0 3.5 1.8 5.4 0.9 6.2 3.3 4.0 1.7 IBA 7.6 2.3 7.0 3.1 10.3 2.1 5.0 1.4 8.0 2.7 6.1 1.2 4.8 1.5

* Error estndar de la media (SEM) CONCLUSIN 1) La mezcla enraizante que contiene IBA permiti en general- un mayor nmero de estacas enraizadas y un mayor nmero de races por estaca. 2) El empleo de sustancias antioxidantes no incrementa el porcentaje de estacas enraizadas. Por el contrario en la mayora de los casos, producen una disminucin de dicho porcentaje. El empleo de catechol si bien no increment el nmero de estacas enraizadas, cuando se emple la mezcla que contena IBA, posibilit una mayor cantidad de races. BIBLIOGRAFA Blakesley D 1994. In TD Davis; BE Haissig (Eds), Biology of adventitious root formation. Plenum Press, New York; pp. 143-154. Caso OH, LA Dotta, P Esteves 1993. In Actas XX Reunin Argentina de Fisiologa Vegetal: 310-311. Compton ME, JE Preece 1986. IAPTC NewsLetter 50: 9-18. Preece JE, ME Compton 1991. In YPS Bajaj (Ed), Biotechnology in Agriculture and Forestry. Vol. 17. Springer-Verlag, Berlin; pp. 168-189.

Fig 1a: Efec to del pretratamiento c on diferentes antioxidantes sobre el ennegrec imiento de estac as de Yerba Mate. I. Interac cin con IBA
a) Contro l
100

Est acas en n eg recidas en %

75

Mezcla enraizante : IBA 1.5 % + sac arosa 10% + Captan 10%

50

25

0 1er 2da 3er 4ta 5ta 6ta 7m a 8va 9na 10m a Sem an a

Tiempo d e in cu baci n

b) Phl orog lucinol 15 mM

100

c) Catechol 15 mM
100

Estac as enne grecidas en %

75

Es tacas e nnegrecidas en %

75

50

50

25

25

er

da

er

ta

ta

ta

ma

va

n a

10

ma

0 1
ra

da

ra

ta

ta

ta

ma

va

na

10

ma

d) 4-Cl Resorci no l 15 mM
1 00

e) P VP 0 .5 %
100

Estaca s ene ngrecida s en %

Esta cas e nnegrecida s en %

75

75

50

50

25

25

0 1
ra

0 2
d a

ra

ta

ta

ta

ma

va

n a

10

ma

er

da

er

ta

ta

ta

ma

va

na

10

ma

f) PPZ 1 5 mM
10 0

g ) ci do ascrbico 1 5 mM
100

Es ta cas ennegrecidas en %

Esta cas e nnegrecida s en %

75

75

50

50

25

25

0 1
er

d a

er

ta

ta

ta

ma

va

na

10

ma

er

da

er

ta

ta

ta

ma

va

na

10

ma

Fig 1b: Efecto del pretratamiento con diferentes antioxidantes en el ennegrecimiento de estacas de Yerba Mate. II. Interaccin con ANA
a) Cont rol
100

Esta cas ennegrecidas en %

75

Mezcla enraizante : ANA 1.5 % + sacarosa 10% + Captan 10%

50

25

0 1
ra

da

ra

ta

ta

ta

ma

va

na

10

ma

Semana

Tiempo de incubacin

b) Phl oroglucinol 15 mM
100

c) Catechol 15 mM
1 00

Esta cas ennegrecidas en %

75

Estac as e nnegrecidas e n %

75

50

50

25

25

1ra

2da

3r a

4ta

5ta

6ta

7m a

8va

9na

10ma

er

da

er

ta

ta

ta

ma

va

na

10

ma

d) 4-Cl Resorcinol 15 mM
1 00

e) P VP 0.5 %
100

Es taca s enn egrecidas en %

Esta ca s enne gre cid as e n %

75

75

50

50

25

25

0 1
er

0
2
da

er

ta

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ta

ma

va

na

10

ma

1er

2da

3er

4ta

5ta

6ta

7 ma

8va

9na

10ma

f) PPZ 15 mM
100

g) cido ascrbico 15 mM
100

Estaca s ennegrecidas en %

75

Es ta cas enne grecida s e n %

1
er

75

50

50

25

25

0 2
da

er

ta

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ta

ma

va

na

10

ma

0 1
er

da

er

ta

ta

ta

ma

va

na

10

ma