Indicadores naturales de cidos y bases.

Manuelita Sotelo1

Objetivos Reconocer algunos compuestos naturales como indicadores cido-base. Afianzar la preparacin de diluciones seriadas. Desarrollar clculos estquiometricos pertinentes para la preparacin de concentraciones especficas y diluciones. Comparar la relacin entre concentracin y pH. Marco terico Un indicador es un cido o base dbil con un color caracterstico que en su forma disociada adopta otra coloracin, debido a que estn formados por anillos bencnicos resonantes, que le permite distribuir distintamente sus cargas 1, de esta manera algunos pigmentos naturales pueden debido a que estn compuestos por este tipo de molculas servir como indicadores cido-base. Generalmente estas molculas indicadoras pertenecen al grupo de los flavonoides, especficamente a las antocianinas2. En esta prctica se trabajar con dichos pigmentos naturales y se evidenciar su funcionamiento o no como indicadores de pH.

Materiales y Mtodos Materiales 3 morteros. 13 tubos de ensayo. 1 gradilla. 2 pipetas graduadas de 5mL 1 pipeta aforada de 0.5mL 1 plancha agitadora. Etanol 96%. cido clorhdrico 36.23%.
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Universidad Nacional de Colombia, mcsotelo@unal.edu.co

Hidrxido de sodio slido. Papel filtro. 1 secador. 1 pH metro. 4 frascos oscuros. Lquen grisaceo rupicola folioso. Repollo morado (Brassica oleracea var. Capitata). Hojas de planta del genero Bougainvillea. Moras de Castilla (Rubus glaucus) 2 vasos de precipitado 1 embudo. 1 pipeta Pasteur desechable. 1 Vidrio de reloj. Mtodos Para la extraccin de los pigmentos caractersticos de las moras de castilla (Rubus glaucus), las hojas de planta del genero Bouganvillea y el lquen, se macer en un mortero cada uno con un poco de etanol 96% (cantidad no especficada). El repollo morado (Brassica oleracea var. Capitata), se troce manualmente en pequeos pedazos que fueron depositados en un vaso de precipitado al que se agreg agua hasta cubrirlos y posteriormente puesto sobre el agitador donde se someti a calentamiento aproximadamente durante tres minutos. Finalmente los extractos fueron filtrados en un embudo, con ayuda de papel filtro hacia frascos mbar, uno por cada pigmento extrado. Para poder comprobar la posible utilidad de los compuestos en los pigmentos extraidos como indicadores cido-base, se prepar con Acido clorhdrico 36.23% una solucin que correspondiera aproximadamente a pH 1, tomando 1mL de cido en 99mL de agua y con base en esta se prepar una serie de 5 diluciones (fd:1/10) de tal modo que cada una correspondiera aproximadamente a los pH 2-6 ; del mismo modo, se prepar con hidrxido de sodio una solucin que correspondiera aproximadamente a pH 13, tomando 0.3544 g de NaOH slido en 100mL de agua, con base en esta se prepar una serie de 5 diluciones (fd:1/10) de tal modo que cada una correspondiera aproximadamente a los pH 12-8. Por medio de un gotero fue extrada una gota de cada uno de los extractos por separado, lavando el gotero cada vez que se pasaba a un extracto diferente para no contaminar la muestra. Las gotas extradas fueron depositadas en un papel filtro, separadas una de la

otra de manera que no tuvieran contacto y con un secador se expuso el papel filtro a aire para agilizar el proceso de secado. Este procedimiento se repiti doce veces, en doce papeles de filtro diferente, cada papel se le marco de 1 a 13.Para todos los extractos menos el de Mora de castilla fue necesario marcar el papel con 4 gotas ms a la inicial, dado que la gota no era visible con facilidad debido a su color. Finalmente, para los trozos de papel filtro marcados del 1 al 6 se les agreg a cada uno y en cada gota extracto, una gota de las soluciones cidas respectivas aproximadas de pH1-6 . A los trozos 8 a 13 de papel filtro se agreg a cada uno y en cada gota extracto, una gota de las soluciones bsicas respectivas aproximadas a los pH 8-13 . Resultados Para encontrar el volumen de cido clorhdrico 36.23% necesaria para preparar una solucin pH 1, y a partir de este generar las diluciones 1/10 hasta pH 6 los clculos realizados fueron: pH 1 = - log [H+] ; [H+]= 0.1 M Como el cido clorhdrico es un cido fuerte y se disocia completamente tenemos que [H+]= [HCl] Luego para 100 ml de disolucin usando cido clorhdrico 36.23% peso/peso de una densidad de 1.18 g/mL, se calcul necesario:

Dado que no se contaba con una pipeta adecuada para medir ste volumen con exactitud, se tom 1 mL del cido, con el que se estimaba un valor de pH :     

Para encontrar la masa de NaOH necesaria para preparar una solucin pH 13, y a partir de este generar las diluciones 1/10 hasta pH 8 los clculos realizados fueron: pH 13 = pOH 1= - log [0H-] ; [OH-]= 0.1 M^ Como el hidrxido de sodio es una base fuerte y se disocia completamente tenemos que [OH-]= [NaOH] Luego para 100 ml de disolucin usando hidrxido de sodio slido, se calcul necesario:

La masa real medida fue de 0.3544 g, con el que se estimaba un valor de pH : 

La tabla 1. Muestra los valores de pH medidos por un pH metro de las soluciones iniciales pH 0.92 y pH 12.95 terico y las soluciones derivadas por diluciones de estas para los pH faltantes en la escala. Tabla 1. Medicin con pH metro de las 13 soluciones y blanco. pH medido por el pH Error porcentual metro 1,02 10,87 2,05 6,77 3,04 4,11 4,27 8,93 5,45 10,77 5,2 12,16 5,74 18,00 8,79 10,57 9,3 3,91 10,05 1,01 10,93 0,18 12,01 0,50 13,01 0,46

pH terico 0,92 1,92 2,92 3,92 4,92 5,92 7 7,95 8,95 9,95 10,95 11,95 12,95

En la extraccin de los pigmentos naturales se observ que, para la buganvilla y las moras, el etanol 96% adquira el color caracterstico de los objetos sometidos a maceracin, en el liquen la extraccin dio al etanol 96% un color amarillo y para el repollo, el agua se torno del color morado caracterstico del vegetal y las hojas perdieron color. Papel filtro con extractos de pigmentos:

A continuacin se muestran las imgenes obtenidas al probar los extractos como indicadores. Extractos en papel filtro evaluados en:

pH =1.02

pH= 2.05

pH= 3.04

pH = 4. 27

pH = 5.45

pH= 5.2

pH =5.74

pH= 8.79

pH= 9.3

pH= 10.05

pH= 10.93

pH= 12.01

pH = 13.01

Los resultados en el cambi de color se resumen en la tabla 2. Tabla 2. Cambio de color en los pigmentos expuestos a los diferentes pH

MATERIAL VEGETAL

pH

COLOR

1-2 Buganvilla 5-12 13

Morado-azul Verde azuloso Verde

1-2 Repollo 6-9 12-13

Fucsia Azul verde

Mora

1-2 13

Fucsia Azul Rey

Liquen

1-13

Sin cambios

Discusiones Los datos de la tabla 1. Indican que las soluciones realizadas no son de los valores tericos de pH que se esperaban tras realizar los clculos, si no que difieren del valor real medido con diferentes porcentajes de error. Esto lo causan varios incidentes, tales como que la medicin del agua cuyo pH debi ser neutro, indic un valor para pH cido a pesar de que el agua era destilada, a su vez esto pudo ser ocasionado porque que no haba sido recientemente destilada y por tanto el recipiente donde estaba contenida estaba contaminado con CO2 causante de la acidificacin del blanco, todo esto provoco el cambio en el pH de las soluciones realizadas con esta agua. Tambin al realizar el proceso de homogenizacin de una dilucin, esta entra en contacto con el aire dentro del baln que contiene cantidades variables de dixido de carbono, al mismo tiempo, el proceso de homogenizacin se realiz en forma diferente para las distintas diluciones, esto puede afectar el pH indistintamente, pues no se puede garantizar que en cada dilucin la misma cantidad de gas se disuelva. Por otro lado, se sabe que las concentraciones de cido y base, disminuyen exponencialmente al acercarse su pH a 7, de manera que pequesimas variaciones en las concentraciones, pueden cambiar enormemente el pH. En estos pH de muy baja concentracin es cada vez ms fcil introducir errores experimentales, an ms cuando los errores se acumulan siendo el producto de una dilucin seriada. El agua donde se calentaron las hojas del repollo adquiere la coloracin caracterstica de este vegetal porque su pigmento principal, la cianidina, es soluble en agua2, Para el repollo se obtuvieron cuatro cambios significativos en el color inicial de la gota extracto, esto fue para los pH cidos 1.02 y 2.05 y para los pH bsicos 12.01 y 13.01, esto responde a los cambios conformacionales que sufre la cianidina, segn se encontr en la literatura, este pigmento cambia en medios cidos tomando una coloracin roja y en medios bsicos tomando una coloracin verdosa, coloracin que efectivamente se observ. Tambin aunque de manera menos notoria en los pH 5.72 5.74 y 8.79, se encontr que, este pigmento tom una coloracin azulosa, tambin en las referencias mencionan que para pH 7-8 el color del pigmento se torna azul. Los cambios estructurales de la cianidina se muestran a continuacin.

Al igual que en el repollo, el pigmento principal de la mora es una antocianina; las antocianinas son solubles en etanol3 por este motivo el etanol en la maceracin tomo la coloracin tpica de las moras. Tres cambios fueron observados para este pigmento, para pH cidos en 1.02 y 2.05 y para pH bsico en 13. Las antocianinas tienen un cambio tpico de coloracin, rojo para pH cido y azul para pH bsico3, y en efecto ese fue el cambio que se detect, sin embargo dado que el pigmento es color rosado, para los pH cidos el cambio no es tan evidente como para el pH bsico, pues como es obvio, el contraste entre el color inicial y el generado por la acidez es muy bajo. Se especula que el extracto del liquen no tuvo cambios en el experimento debido a que no era de alguno de los gneros que en la literatura se mencionan como poseedores del pigmento eritrolitmina que funciona como indicador acido-base. Debido a que no presenta cambios en los primeros 12 valores de pH, no permite su aplicacin para determinar acidez o basicidad, excepto para cuando se necesite comprobar basicidades extremas. Al analizar los resultados arrojados por la prueba realizada al extracto de buganvilla, observamos cuatro colores principales diferentes. Se observa un cambio en el color del extracto de morado a morado azuloso en pH menor a 2.05; un cambio de morado hacia un color verde azuloso en valores de pH comprendido entre 4.92 y 11.95; y un ltimo cambio notable de morado hacia verde que durante exposicin a la luz y condiciones ambientales se transforma en un color amarillo. Esto hace pensar que existen dos pigmentos que son capaces de actuar como indicadores, como nos confirma la literatura (cita) al indicarnos que existen 2 antocianinas: una de ellas con una coloracin magenta que cambia a amarillo en pH mayor a 4.92; as como una antocianina que cambia de violeta a azul en pH mayor a 4.92 y que en su forma azul se degrada fcilmente en condiciones ambientales (ambas citas) y en pH muy alto.

De esta forma, el color morado azuloso ser una mezcla entre los pigmentos protonados magenta y violeta. El color verde azuloso tendr los pigmentos en la forma menos protonada de color azul y este color predominara sobre el amarillo del otro pigmento; Por ltimo, el verde estar conformado ambos pigmentos, sin embargo, los pigmentos azules en condiciones de extrema basicidad se degradan muy fcilmente disminuyendo la cantidad de azul y dejndonos un verde que con el tiempo se convierte en amarillo.

Conclusiones El valor de pH de una solucin es muy susceptible a cambios debido a factores ambientales y/o experimentales inevitables. Los pigmentos de los materiales vegetales empleados son solubles en sustancias polares. Los pigmentos naturales de tipo antocianina sirven como indicadores acido-base. La cianidina del repollo es mejor indicador para pH cidos que el tipo de antocianina de la mora en tanto que el contraste en el cambio de coloracin es mucho ms evidente. Los componentes de los pigmentos en la buganvilla, seran mejores indicadores si se separan, especialmente el pigmento rojo pues tiene mayor resistencia a la degradacin por los factores ambientales.

Bibliografa

1. http://www.heurema.com/QG7.htm
2. http://www.geocities.ws/fericart/epracticas.html 3. http://www.murciencia.com/UPLOAD/COMUNICACIONES/colores_mutantes.pdf

Kanda, N.; Asano, T.; Itoh T., 1995, Preparing Chameleon Balls from Natural Plants, Journal of chemical Education, volume 72, No 12. P.1131-1132. Bernal de Ramirez, I., 1988, Contribucin al estudio de los pigmentos de algunas flores como indicadores cido-base, Qumica e Industria, p. 19-23.