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Aproximadamente 503 de las especies conocidas de aves se clasifican como "en peligro" o crtico".

programas de reproduccin en cautividad han demostrado su utilidad en el mantenimiento de la diversidad gentica y la restauracin de las poblaciones silvestres de algunas especies, como el halcn peregrino, cndor de California y ferina gra. La inseminacin artificial (IA) tiene el potencial de la solucin de problemas inherentes a la salud reproductiva gestin de pequeas y cerradas las poblaciones de aves en peligro de extincin, incluido el tratamiento de la inestabilidad demogrfica, fsica y discapacidad del comportamiento, la incompatibilidad sexual, la falta de sincrona, y la necesidad de mantener la diversidad gentica. En esta revisin, nos dirigimos a la mtodos necesarios y los factores que permiten a Amnista Internacional a la aplicacin eficaz para gestionar las poblaciones de aves raras. Es evidente que el semen disponibilidad y la calidad son los mayores factores limitantes a la aplicacin consistente y exitoso de Amnista Internacional para las aves. Comportamiento sensibilidad a la manipulacin de los animales y la capacidad de minimizar el estrs en las aves individuales tambin son claves para el xito. Mltiples, en el fondo vaginal inseminaciones se puede mejorar la fertilidad, sobre todo cuando la calidad del semen es marginal. laparoscpica mtodos de transferencia de esperma tambin tienen produce los huevos frtiles. Todas estas prcticas que conduzcan al xito de la IA siguen dependiendo de tener conocimientos bsicos adecuados de Situacin de las mujeres reproductiva, el comportamiento copulatorio, perfiles endocrinos y la duracin de la fertilidad, especialmente en lo relacionado con la oviposicin. La mayor desafo global y la ms alta prioridad es la definicin de estas caractersticas normativas, que son muy especficos de la especie. # 2008 Publicado por Elsevier Inc. 1. Estado del arte 1.1. Breve perspectiva histrica de la gripe aviar AI La inseminacin artificial (IA) fue el primer xito en las aves casi un siglo atrs, cuando Ivanov producido frtiles huevos de gallina con semen recuperado del conducto deferente [1]. La tcnica ms ampliamente utilizada de inseminacin intravaginal se inform por primera vez por Quinn y Burrows en 1936 [1]. Desde entonces, Amnista Internacional ha evolucionado para convertido en un mtodo importante, sin embargo, la produccin comn para la industria avcola. Esta reproduccin asistida tcnica de ahora es parte integral de pavos comerciales de produccin, resultando en ms de 300 millones de nacidos pavitos anualmente en los Estados Unidos (USDA Servicio de Estadstica [2]). Este mismo proceso tambin ha sido adaptado con xito para producir pollos en ms de 40 tipos de aves silvestres, incluyendo especies de aves rapaces, grullas, aves acuticas, psitcidos y paseriformes [3]. Algunos esfuerzos han sido emblemticas del potencial. Por ejemplo, Samour inform incubar ms de 90 peregrinos polluelos de halcn en un intervalo de 8 y con Amnista Internacional [4]. Adems, no hay evidencia de que la reproduccin el xito se ve comprometida por la cra artificial, ya que la fertilidad de la IA era comparable a la monta natural en el cerncalo americano [5]. 1.2. El uso actual de la IA en la conservacin de aves programas La mayora de los esfuerzos de la gripe aviar en especies de aves silvestres han sido orientada a la investigacin y / o con fines de demostracin, en lugar de manejo gentico y

la conservacin. Sin embargo, hay una necesidad sustancial de forma consistente xito de Amnista Internacional para ayudar a crear viables, la auto- el mantenimiento de las poblaciones. De los 9.672 existentes conocidos especies de aves, ms de 5% se clasifican oficialmente como 'Vulnerable', 'en peligro' o 'en peligro crtico' (Es decir, casi 500 especies estn en grave riesgo para la extincin) [6]. A pesar de la ms alta prioridad siempre es garantizar especies en la naturaleza, la cra ex situ ha desempeado un papel importante en la recuperacin de determinadas especies de aves. Por ejemplo, las instituciones sin fines de lucro producido y puesto en libertad 6000 criados en cautividad halcones peregrinos en 34 estados de EE.UU. desde 1974 hasta 1997. Eso, combinado con organizada proteccin de los sitios de anidacin y hbitats de alimentacin, dado lugar a una de las especies de mayor xito restauraciones de programas cada vez [7]. ex situ la actualidad, otros esfuerzos estn regresando especies similares espectacular naturaleza (por ejemplo, el cndor de California, el cerncalo de Mauricio, Ferina de la gra, el guila calva americana [8]). Sin embargo, es evidente que son muy pocos de recuperacin programas en los que la conservacin in situ y ex situ esfuerzos de mejoramiento o la investigacin con xito vinculados. Por otra parte, hay ejemplos an menos cuando Amnista Internacional ha tenido un impacto mensurable. Sin embargo, hay son programas importantes que ahora estn como modelos para mostrar cmo reproduccin asistida pueden contribuir a las especies recuperacin (por ejemplo, el halcn peregrino, [7]; avutarda hubara [9]). Lo ms impresionante han sido los esfuerzos dedicados a la grulla blanca, donde el xito se puede atribuir a una intensa investigacin en la biologa de la reproduccin combinado con la ciencia campo nico para restaurar las aves a la naturaleza. En 1941, la poblacin migratoria de grulla blanca se estim en 15 aves. Afortunadamente, con la colaboracin de la participacin de Patuxent Centro de Vida Silvestre de los EE.UU. Servicio de Pesca y Vida Silvestre, la Servicio Canadiense de Vida Silvestre y el Fondo Crane Foundation, ahora son aproximadamente 190 gras ferina en la poblacin Aransas-Wood Buffalo, 75 en el rebao de la Florida no migratorias, y $ 120 aves adultas en cautiverio. Este crecimiento de la poblacin en gran medida el resultado de estudios sistemticos de entender comportamiento de las aves, la gentica, la ganadera, la cra de pollo, y requisitos mdicos, as como bsica y aplicada biologa de la reproduccin [10]. Especialmente importante ha sido el desarrollo de recogida de esperma, evaluacin, procesamiento, y AI, que en conjunto ha contribuido a la gestin de las especies efectiva [10,11]. 1.3. Valor de la gripe aviar y la introduccin a sus limitaciones para las especies de aves silvestres Hay mltiples razones por reproduccin asistida indispensables para los programas de propagacin para las especies de aves raras. La mayora estn relacionados con la incapacidad de los compaeros designados para lograr la copulacin natural, normalmente a causa de una bonos par suficiente en el inicio de la puesta de huevos. Incluso en presencia de un vnculo de pareja bien establecida, deposicin del semen ineficaz puede ser consecuencia de los combates de la agresin, el estrs, la falta de libido o la confianza, los intentos de su compaero con los objetos inanimados, o fsica discapacidades. Asincrona en la pareja tambin es comn. Por ejemplo, en nuestra experiencia, las mujeres mayores a principios laicos en la poca en que muchos hombres an no estn produciendo eyaculados con una alta concentracin de adultos espermatozoides. Mal manejo de los animales, nutricionales deficiencias, y las enfermedades asociadas son comunes contribuyen a la calidad seminal

pobres, sin xito la cpula, o evertion oviductales (que se traduce en disminucin de la fertilidad). Como resultado de todos estos retos, las poblaciones de aves en cautividad rara general tienen una preponderancia de organismos sub-representados (O no representados) fundadores, es decir, muy personas valiosas con los genomas que se puede remontar a las contrapartes salvajes. Cuando dicha persona no reproducir, la consecuencia es prdida de heterocigosidad gentica y una disminucin en la aptitud, como la reduccin de mejoramiento de competencias. Afortunadamente, todos los problemas sealados anteriormente pueden ser eludirse mediante el uso prudente y eficaz de AI. Incluso cuando el 80-85% de los huevos son frtiles, la fertilidad puede se incrementar en otro 5-10% simplemente aadiendo AI el programa de reproduccin [12]. Adems, Amnista Internacional en teora se convierte en una herramienta an ms poderosa, dado que los espermatozoides pueden sobrevivir a la criopreservacin. La capacidad de mantener la viabilidad post-descongelacin de espermatozoides ofrece importantes oportunidades para el sostenimiento de la diversidad gentica, facilitando el transporte de espermatozoides viables entre las poblaciones geogrficamente dispares o re- materiales que le correspondan gentico de los espermatozoides muertos hace mucho tiempo los donantes. Aunque hay enormes beneficios del uso de semen fresco y descongelado a travs de la IA de aves silvestres raras especies, hay retos importantes para la prctica aplicacin para mejorar la conservacin. La primaria limitacin que parece ser la incapacidad para siempre recoger el semen que es de una calidad lo suficientemente alto para dar lugar a la fertilidad post-IA. A diferencia de las aves de corral, la calidad del semen en el medio silvestre donantes masculinos generalmente es pobre (Es decir, bajo volumen y la concentracin de espermatozoides), con eyacula frecuentemente contaminados con la orina. Aunque hay pocos datos objetivos de aves silvestres especie, est bien establecido que el estrs es un importante interrumpir factor de xito en la aplicacin de la asistencia mejoramiento en la industria de aves de corral comerciales [13]. Los resultados han incluido la ovulacin retrasada, prematuros colocacin de los huevos de cscara blanda, o la oviposicin interrumpido [13,14]. Dado que estas perturbaciones graves en acciones comunes, domesticados, es lgico esperar otros sucesos similares, si no ms graves en el medio silvestre contrapartes. A este respecto, la mayora de los salvajes individuos en cautiverio demuestran clara del comportamiento ndices de nerviosismo y de estrs "durante el manejo de de recogida de esperma e inseminacin artificial conyugal. Ese estrs puede contribuyen a la falta de coherencia en la recopilacin de buenas muestras de la calidad del semen de los machos en algunos cautivos poblaciones. Por lo tanto, una alta prioridad en el xito programas ha sido la utilizacin de los individuos socializados, especialmente los impresos en los seres humanos y de preferencia los del plantel fundador valiosa. Por supuesto, esto a menudo no es el caso general, como fundadores son salvajes nacido, a menudo discapacitados (la razn por la que se celebran ahora ex situ), pero con temperamentos muy friable. La alta prioridad que otra es la necesidad de aumentar nuestra base de conocimientos fundamentales de la reproduccin y procesos de comportamiento de cada especie. Reproductiva mecanismos relativos a la estacionalidad, la ciclicidad, los comportamientos de copulacin, y la duracin de la fertilidad son tan diversos como el nmero, morfologa y distribucin geogrfica de las especies existentes. Tener acceso a este derecho fundamental la informacin es el fundamento de la concepcin y aplicacin de un exitoso programa de inseminacin artificial para las especies de la fauna silvestre. El resto de este manuscrito pone de relieve estos 'Factores limitantes, as como las "mejores prcticas

conocidas, a partir de datos publicados en la literatura o de los autores experiencias. Al final, ser necesario para los interesados en la aplicacin de la IA a un ave silvestre gestionados programa de atencin para hacer frente a las cuatro preguntas siguientes: 1. La experiencia de las especies realmente graves desafos para la reproduccin natural que contribuye a la falla reproductiva, la diversidad gentica pobres, y en- representada fundadores? 2. Si un nmero suficiente de aves (demostrado los donantes de semen y saludable congneres femeninas) disponibles durante el temporada de reproduccin para la investigacin bsica y aplicada, incluyendo los intentos de la IA? 3. Hay suficientes, por lo menos preliminar acadmicos y conocimientos prcticos sobre la especie (es decir, la informacin fundamental en la fisiologa, el comportamiento, el temperamento, la anatoma, y la sensibilidad al estrs) para justificar la posibilidades de xito final? 4. Son suficientes los recursos disponibles en trminos de conocimientos cientficos y la cra, el tiempo, y el equipo? Todas estas preguntas requieren una afirmacin positiva antes de comenzar una iniciativa seria.

2. Mtodos y observaciones asociadas a aves AI 2.1. De recogida de esperma A diferencia de las aves de corral domsticas, donde se encuentran las manadas en condiciones ambientales destinadas a maximizar huevo y de produccin de semen durante 3060 semanas, las aves silvestres invariablemente una experiencia corta (30 a 120 d) de la temporada la actividad sexual. Las consecuencias incluyen restringido (1) perodos de tiempo para la investigacin y (2) oportunidades para de recogida de esperma, el procesamiento, almacenamiento y uso [15,16]. Estacionalidad y comportamientos naturales silvestres tambin requieren que los las aves se acondicionarn para el manejo y recoleccin de antes inicio de la produccin de espermatozoides [17]. Tres mtodos de recoleccin de semen se han utilizado xito en las aves. La primera, una "cooperativa" enfoque, fue iniciado por cetreros utilizando sexual aves impreso de presa [18]. Aqu, las aves voluntariamente copulan en los dispositivos especiales en respuesta a un comportamiento estmulo (por ejemplo, la vocalizacin, alimentos, y el nido transferencia de material, seguido de una exhibicin de copulacin). No hay manipulacin de los animales, por lo que el estrs y el riesgo de trauma (A las aves o el controlador) se reducen al mnimo. La ventaja de este mtodo es que la eyaculacin por lo general no se ve muy contaminadas por la orina o las heces. Sin embargo, el influyente el volumen vara considerablemente entre los individuos, y algunas aves realizar el comportamiento copulatorio, pero no eyacular o producen pocos espermatozoides o no. Mejora resultados han sido elaborados mediante una vagina artificial El pato criollo [19] o una mujer 'dummy' en el avutarda hubara [9]. Un segundo mtodo es la

electroeyaculacin que se ha aplicado a los patos y los gansos [20], las palomas [21] y una variedad de psitcidos [22]. Aunque seguro cuando se realiza correctamente, la anestesia es necesario, y eyacula con frecuencia contaminados con la orina. En consecuencia, el tercer mtodo, masaje abdominal [1], ha surgido claramente como el ms prctico y, a menudo utiliz el procedimiento de recuperacin de esperma de aves. En 1936, Burrows y Quinn describi por primera vez este no invasiva mtodo para recoger el semen de aves de corral [1]. El macho es moderada, seguida de una suave caricia, pero rpida de la regin de la espalda detrs de las alas hacia la cola. La mayora de los hombres responden con la tumescencia flica, en la que momento en que el controlador aprieta suavemente la cloaca, que expresan semen a travs de la papila externa del conducto deferente. Recoleccin de semen de esta manera desde pequeos paseriformes es relativamente fcil [23]. Durante la poca reproductiva, la mayora de aves cantoras tienen una bien desarrollada protuberancia cloacal, un guisante, como la hinchazn en el dorso labios cloacales donde se almacena el semen [24]. Pequeas volmenes de semen se puede obtener mediante la aplicacin de suaves, presin constante a la protuberancia. Debido a una volumen del eyaculado minuto, diluyente se agrega inmediatamente para prevenir la deshidratacin esperma. Adaptaciones en el masaje mtodo de recogida se han hecho para las aves acuticas, rtidas, pavas, perdices y, debido a que estas especies tener un pene-como apndice copulatorio [25]. Para las aves produccin de volumen del eyaculado limitada, el operador debe darles la vuelta con falo temprano en el proceso de recoleccin, y un dispositivo de succin se utiliza a menudo para evitar la prdida de semen en la superficie flica [15]. Semen de mayor tamao personas (es decir, grullas, cigeas, guilas) se recupera con el pjaro en una posicin de pie [26]. El macho es vacunado entre las piernas de un asistente, con la cabeza del ave y en el cuello detrs de la gua y el pecho del animal apoyada en el muslo del asistente. Seguridad para el ave y el operador es crtico [3]. Durante la temporada de cra, Las gras pueden ser agresivos, y una escoba se utiliza a menudo como un objeto para el hombre para atacar y para ayudar a corral el pjaro de retencin [17]. Claro, tubos de plstico rgido, un poco ms grande que el cuerpo de un ave, se han modificado para los loros [3], en gran medida la eliminacin de graves mordeduras. La aves se coloca de cabeza en un tubo que es lo suficientemente tiempo para asegurar que la cabeza permanece completamente protegidas. La cola del pjaro y la cloaca son accesibles a partir del final contralateral con los pies fijados con los pihuelas a travs de agujeros en la parte inferior del tubo. Este posicionamiento an permite al hombre ser adecuadamente acarici. Las aves se liberan con facilidad a travs del frente del tubo despus de la recoleccin. 2.2. Eyaculado calidad y caractersticas del semen Hay una variacin notable en el volumen de eyaculado y la concentracin espermtica y la calidad de los aviar especies, incluso las especies de tamao similar [27,28]. Por ejemplo, el cerncalo americano produce un diminutivo volumen de eyaculacin (10-15 ml), con un contenido inferior 0.03 106sperm/mL (en comparacin con el nacional pavo eyacular con un promedio de 300 a 400 ml, que contiene 08.12 109sperm/mL A) [12]. El mtodo de recoleccin de y la frecuencia de la influencia de monta natural eyaculado volumen [17]. Aunque la cantidad de esperma es bajo principios y al final de la temporada de reproduccin, volumen limitado tambin puede se producen durante la temporada alta de cra debido a los frecuentes cpulas [16]. El incremento del volumen de semen se han

asociadas a los hombres en un par experimentando compro- fertilidad mised, en contraste con los pares muy fecunda en el macho es eyacular un volumen menor [29]. Coleccin de los primeros intentos de la maana tambin puede mejorar la produccin de esperma y, por tanto, es estndar protocolo para explotaciones de pavos domsticos estudios, as como para algunas especies silvestres (por ejemplo, la pava de tubera [30]). Entre especies diferencias en la morfologa de los espermatozoides, nmero de mitocondrias, el metabolismo, la motilidad y duracin del almacenamiento en la mujer tambin son importantes. Estas variaciones, a su vez, influyen marcadamente en las estrategias para inseminacin artificial y lquidos de almacenamiento de esperma / criopreservacin. morfologa de los espermatozoides vara desde una simple sauropsid forma (por ejemplo, las aves de corral) a un tipo helicoidal complejo con una membrana exterior en forma de cinta y largo flagelo (por ejemplo, paseriformes) con una forma redondeada, aplanada (Por ejemplo, el cerncalo americano) [31]. tamao de los espermatozoides aviar (jefe de longitud de la punta flagelo) va de 30 a 300 mm y se sin relacin a la masa de aves [31]. En las muestras de semen fresco, pleomorphisms espermatozoides son poco comunes, aunque uno estudio de hubaras revel que hasta el 64% de espermatozoides con ncleos ms grandes, tal vez debido a la aberrante espermatognesis [32]. La pieza intermedia parece ser el componente ms variable de espermatozoides aviar [33], especialmente en el nmero de mitocondrias que proporcionan la energa para la motilidad celular. Aunque es similar en aspecto ultraestructural, los espermatozoides codorniz japonesa contienen ms de 1400 mitocondrias, en comparacin con slo 20-30 para el pavo [34]. Las aves de corral y los espermatozoides de pavo tienen una morfologa similar y los nmeros de las mitocondrias, sin embargo, los primeros son capaces de la gluclisis anaerbica, mientras que el segundo depende de la oxidacin aerbica [35]. Esto sugiere que puede haber variaciones en la energa requisitos para la motilidad de los espermatozoides o la supervivencia en el aparato reproductor femenino. 2.3. Reproductivo femenino caractersticas de inters El aparato reproductor aviar es de por s compleja (Revisado en [39]), y esta revisin se centra estrictamente en aquellos aspectos que tiene el potencial de influir en la IA xito. Las aves suelen presentar un solo, ovario y el oviducto funcional en el lado izquierdo del cuerpo. Como resultado, el procedimiento de IA debe ser dirigida hacia el lado izquierdo de la cloaca. El oviducto es compuesto por cinco morfolgicamente distinguibles regiones: infundibulum, magnum, istmo, shellgland, y la vagina. El xito de la IA requiere un operador que se muy familiarizado con las caractersticas anatmicas especficas de las especies de inters, incluyendo el tener la habilidad para ubicar el orificio vaginal. Tanto el ovario y el oviducto tamao y aumento de peso notablemente a medida que la reproduccin se acerca la temporada, en gran medida como consecuencia del aumento de esteroidognesis [36]. Al mismo tiempo, hay mayor tamao, vascularizacin y la produccin de moco en la vagina, el desarrollo del parche de incubacin (a rea en el pecho y el abdomen compuesto de la piel sin plumas en el tejido subcutneo se modifica para una mejor superficie de contacto con huevos de incubacin), distensin abdominal y aumento de la flexibilidad y la distancia entre los huesos del pubis, siendo todos los colectivos indicadores de un momento ideal para la influenza aviar. Hay que hizo hincapi en que el oviducto es susceptible a la enfermedad. La inseminacin debe realizarse con cuidado. Si no, uno puede exponer a la vagina a la

infeccin, traumatismo o estrs que, a su vez, puede causar (1) peritonitis yema de huevo (es decir, yema de entrar en la cavidad abdominal [37]) o hiperperistaltismo que puede provocar prematura por el que se softshelled de los huevos [38]. Todas las aves domsticas y silvestres examinados hasta la fecha tienen en el extremo anterior de la vagina, una unin tero vaginal (UUV) y especializada invaginaciones tubulares de la epitelio superficial conocida como tbulos de almacenamiento de esperma (SST) [39]. Esta adaptacin importante, sin duda mejora la aptitud reproductiva en general, garantizando la presencia de espermatozoides, potencialmente importante en el caso de un hembra silvestre perder su compaero, lo que permite un "reclutch. En un programa de reproduccin ex situ, la TSM sirve como un reservorio de espermatozoides para facilitar la fertilizacin entre inseminaciones. Aunque la duracin de almacenamiento de esperma es desconocidos para la mayora de las especies, los huevos frtiles han sido produce hasta 45 das despus de la IA en el pavo domstico [40]. Tpicamente 6-10-d intervalos entre sucesivas inseminaciones se utilizan en la industria de aves de corral comerciales programas para asegurar la fertilidad. El SST tambin ha sido observ al microscopio en los pliegues de la mucosa del el cerncalo americano [41], el halcn peregrino, Europeo bho real y el Aguilucho lagunero [42]. Aunque el fisicoqumicas mecanismo para el almacenamiento de esperma y liberacin no ha sido bien estudiado para las aves, la presencia de la TSM ofrece una ventaja nica para la influenza aviar de Amnista Internacional programas mediante la ampliacin de la ventana de oportunidad para fertilizacin y reducir el nmero requerido de inseminaciones. Esta es una zona rica y fascinante para la investigacin futura. 2.4. Tcnica de inseminacin artificial y equipo 2.4.1. Inseminacin en incondicionado (no cooperativas) las aves programas de cra en cautividad a menudo estn compuestos de capturados en la naturaleza las aves que se han convertido en discapacitados fsicos. Aunque algunos de estos animales puede estar condicionado a acepta de forma voluntaria de Amnista Internacional despus de varias temporadas de cra, la mayora no puede. Hay tres pasos para artificialmente inseminar estas aves tipo. La primera consiste en las mujeres sistema de seguridad que se debe hacer de manera rpida y preferiblemente en el jaula de pjaro en casa para evitar el estrs relacionado con el transporte. La controlador acerca a la hembra desde atrs y asegura cada pierna y alas correspondientes lado, cada lado con una mano. Esto permite a la mujer para ser colocado en un posicin de monta natural. La cabeza del pjaro est cubierto inmediatamente con una capucha o una toalla para reducir el miedo y evitar morder. Por otra parte, en el ms grande y de cuello largo especies (por ejemplo, gras o buitres), la cabeza se dirige hacia atrs desde el controlador. En raras ocasiones es recomendable que una mujer se permitir a pie o tomar en una percha durante el procedimiento, ya que esto permite que el incentivo de aves y la compra de moverse en exceso, lo que complica la inseminacin. Riesgo de auto-lesin tambin se puede reducir asegurando garras en sacos lder especial. Hay varias excepciones a estas recomendaciones. Por ejemplo, cuando evertion oviductales pleno en especies de gran tamao (por ejemplo, las guilas), entonces no puede haber una ventaja de permitir que los pies en el suelo o garras colocada en una percha. En tales casos, la hembra puede mejorar contraer los msculos que, a su vez, facilitar oviductales saliente. Adems, si un espculo vaginal es ser utilizado en las aves de mayor tamao y evertion no es necesario, le recomendamos la celebracin de la mujer cabeza suspendida hacia abajo en un ngulo de 908

con la vertical, el cuerpo ligeramente inclinado hacia la derecha. Una mesa porttil de pequeo tamao se puede utilizar para apoyar el pecho del ave para aumentar bienestar del animal. La principal ventaja de este enfoque es evitar la contaminacin inseminar. Excreta la orina puede inhibir la localizacin de la vagina, con flujo de la orina se especialmente voluminosos, cuando una mujer est cerca del inicio de oviposicin o en un perodo de puesta de huevos. Vertical posicionamiento ayuda a retener la orina en la urodeum, evitando que fluye en el oviducto y el esperma o perjudiciales, es ms grave, causando infecciones de las vas (Fig. 1). El segundo paso de la IA es la determinacin de la ptima sitio de inseminacin, de los cuales hay tres posibilidades: inseminacin cloacales, intravaginal o intramagnal. inseminacin cloaca es mucho ms fcil, ms rpido, y menos estresante en comparacin con los otros dos enfoques. Sin embargo, la fertilidad es aproximadamente cuatro veces mayor cuando los espermatozoides se depositan en la vagina en comparacin a la cloaca (utilizando el mismo nmero de espermatozoides viables; Blanco, observaciones no publicadas). Sin embargo, este fertilidad comprometida a veces puede ser eludido al aumentar tanto el nmero de espermatozoides inseminados (Por lo general a ms de 15 clulas mviles 106total) y inseminacin frecuencia a tres o ms veces por semana. Esta estrategia ha permitido cloacales AI dar lugar a 80% de fertilidad en las especies de la gra [11,17,43]. Sin duda, un enfoque intravaginal se utiliza ms a menudo en las aves. Hay dos maneras de identificar la oviducto, ya sea por la simple visualizacin o de forma manual eversin del oviducto en la cloaca. Este ltimo es ventajosa en la prestacin de un espacio considerable para depsito de grandes volmenes seminales, mientras que al mismo tiempo ayudar a prevenir el peristaltismo del tracto que puede expulsar el transfiere el semen. El oviducto se vuelca por la aplicacin de un masaje estimulante (similar a la descrita anteriormente para la recoleccin de semen), seguido de la manipulacin digital de la zona paracloacal. Este procedimiento es ms aplicables a los paseriformes, pero puede ser estresante para la mayora de otras aves silvestres y, por tanto, se utiliza muy poco. En las aves ms grandes (Por ejemplo, de oro o el guila imperial), eversin por lo general es difcil, si no es un caparazn duro masa de huevo en el tero. Por el contrario, el oviducto de las aves pequeas (por ejemplo, la codorniz, o Red perdiz) en realidad es ms fcil de Evert manualmente en el presencia de una masa de huevos del tero que ejerce alguna la presin de facilitacin. Cabe sealar que las mujeres a menudo reaccionan positivamente a el masaje inicial, levantando la cola, extendiendo la cola plumas, bajando plumas abdominal, y la exposicin de la cloaca. Sin embargo, la resistencia a la eversin final ocurre cuando el rea paracloacal se toca. Esto puede requerir obligado manipulacin, con el xito que varan segn las especies e individual. Para este proceso, se intenta estabilizar la cloaca con firmeza retraccin de la piel de los aspectos a la izquierda y dorsal, mientras que suavemente la aplicacin rgida y la presin continua en el abdomen bajo para exponer el oviducto. Para aves ms grandes (por ejemplo, las guilas), este procedimiento requiere dos personas, una restriccin de la individuales y exponer el oviducto, mientras que el otro realiza la IA. Un enfoque alternativo consiste en utilizar un espculo vaginal (tamao de acuerdo a la meta especies) que se introduce superficialmente, mientras que la aplicacin de la presin a la regin paracloacal. Esta tcnica por lo general es mucho ms simple, ms rpido y menos estresante que eversin manual, especialmente para especies como el Halcn peregrino y el guila. Hojas del espculo se introducido en la cloaca se dirige hacia la izquierda para identificar ms fcilmente el orificio vaginal que puede ser observar visualmente con la asistencia de un lado fro Fuente de luz (Fig. 2). Durante la insercin del

espculo puede realmente permitir que las cuchillas para entrar en el oviducto, con lo que causar desorientacin y la contaminacin. Por ltimo, un palpacin mtodo tambin se ha descrito para la localizacin de el oviducto de las gras y los avestruces [12]. En lugar de una espculo, esta tcnica consiste en la palpacin de la vagina con una sonda estril (con la inseminacin adjunta cnula) o el dedo. El tercer enfoque para finalmente lograr el xito de AI es a travs de una ruta intramagnal. Nuestro laboratorio ha demostrado la viabilidad de este mnimamente invasiva tcnica [28]. Originalmente, la anestesia fue necesario, pero mejoras ms recientes han permitido la insercin de un endoscopio a travs de las vas y en la magna del muchos individuos (por ejemplo, las especies de guila sobre todo varios) sin anestesia qumica o sedacin. La hembra es colocado en posicin de decbito ventro-dorsal, el oviducto observado con la ayuda de un espculo vaginal, y luego un catter (de dimetro apropiado de cada especie) introducido. La longitud de la insercin en la zona es determinado por las evaluaciones anteriores de las aves observadas en la autopsia o como resultado de los estudios de medio de contraste. Estas longitudes son especficos de la especie y asegurar que los espermatozoides con el tiempo se entregan a la ubicacin de las vas correctas. Esto es la principal ventaja, lo que reduce sustancialmente el nmero total de espermatozoides requeridos para la entrega. La limitacin al enfoque intramagnal es que requiere el conocimiento y la habilidad del operador importante, de lo contrario, el procedimiento puede ser demasiado prolongado y estresante. Tambin evita la competencia intensa en el esperma vagina y los permisos de esperma de otro modo no aptos expulsados por la vagina para rellenar la parte superior del oviducto [34]. En consecuencia, la duracin de la fertilidad por lo general no ms de 24-48 h dependiendo de la especie (Blanco, no publicadosobservaciones publicados). Este enfoque de by-pass tambin limita la capacidad de la mujer a 'seleccionar' espermatozoides, lo que puede ser importante. Por ejemplo, la falta de seleccin en las aves de corral se ha decidido a aumentar embrionarias la mortalidad de una normal de 9 a 57% [45]. Por supuesto, tambin es el potencial de riesgo de contaminacin mayor a los aspectos proximal del tracto reproductivo, que requieren un cuidado extremo, catteres esterilizados y lavados espermatozoides. El paso final consiste en el semen para IA real deposicin en el tracto. Cuando volcado o con un espculo, el oviducto sobresala, hinchada es 'volcnica' en apariencia. El dispositivo de inseminacin preferido es un catter de plstico por va intravenosa que est disponible en una amplia gama de variedad de dimetros y longitudes (es decir, Nipro1, Terumo1). "Francs" de catteres con punta roma son ideal, con la ventaja de residual mnima mensaje volumen de inseminacin. Vidrio dispositivos de inseminacin se evitan, y catteres comerciales producidos para la industria de aves de corral tienen una aplicacin poco salvaje las aves y no se recomiendan. El catter se inserta a una profundidad de cada especie, sobre la base de mltiples factores (vase ms adelante). Una vez que el dispositivo de inseminacin en lugar, el semen se entrega con la ayuda de un 1 mL (Estril) jeringa de plstico no txico con un mbolo de aire junto al mbolo para asegurarse de la expulsin de lquido, todos los con una retirada coordinada de la sonda como esperma se inyecta. La hembra puede ser puesto en libertad inmediatamente en su gabinete. 2.4.2. Inseminacin en aves acondicionado Una formacin adecuada, las mujeres impreso podr establecer un par vnculo con el cuidador que estimula el cortejo muestra y la vocalizacin que, a su vez, provocan copulatorio posturas y la exposicin del oviducto. El

enorme ventaja de esta respuesta inusual es que no hay sistema de seguridad se requiere, y no se produce el estrs. A menudo, basta con aplicar presin de la mano de luz sobre la baja de la espalda del ave hace que un copulatorio reflejo (dependiendo de la especie). Por lo general, la operador puede usar una mano para dirigir las plumas de la cola ligeramente craneal, mientras con la otra mano para insertar el inseminacin dispositivo directamente en el oviducto evertido seguido por la inyeccin de esperma y el catter simultnea retirada. La principal limitacin es la significativa tiempo invertido inicialmente para entrenar a cada ave para aceptar la procedimiento (por lo general dos veces al da durante varias semanas o incluso meses). Sin embargo, una vez al vnculo de pareja se establece entre el animal y su gua, el pjaro permitir que esta inseminacin enfoque para el resto de su vida reproductiva. Un beneficio adicional es que este tcnica se ha demostrado para estimular ovipositioning y la produccin total de huevos frtiles de aves rapaces en varias especie (es decir, guila real y el halcn peregrino; Blanco, observaciones no publicadas) (Fig. 3). Por lo tanto, las hembras se gestiona adecuadamente, impreso por el que se inicio antes, producir ms huevos totales, y la experiencia global mayor fecundidad en comparacin con no entrenados o no condicionada contrapartes. Excelente descripcin de la formacin de aves acondicionado, impreso, sobre todo rapaces, grullas, cigeas y aves acuticas, se encuentran disponibles [46-48].

2.5.

Gestin

seleccin

de

candidatos

AI

Hemos encontrado que ciertos procedimientos maximizar fertilidad. En primer lugar, es prudente considerar el ayuno Mujer de 24 h antes de una prevista de Amnista Internacional, en gran medida a minimizar la presencia de uratos acumulada y fecales escombros en el urodeum. En segundo lugar, es importante capturar y manejar las aves en un rea fsica de distancia del nido para evitar la rotura accidental de huevo. En tercer lugar, inseminaciones deben llevarse a cabo en las aves que han tuvieron la oportunidad de aparearse naturalmente o expresar una copulatorio pantalla, ya que ambas actividades facilitan esperma puesto de transporte-AI. Por ltimo, todas las mujeres (independientemente de tipo) son recompensados con una comida favorita de inmediato despus de la deposicin de esperma. Aunque los candidatos para la influenza aviar incluyen tanto las aves incondicionada y condicionada, claramente los mejores objetivos para

el desarrollo de un nuevo programa o aumentar las probabilidades de la produccin de cras se imprimen los individuos. Cualquier pjaro que se destac notablemente es propenso a prematuros, interrumpido, o se detiene ovipositioning, rotura de huevos, y el esperma rechazo. Impreso por lo menos son las personas sensibles a las perturbaciones tales, especialmente si se gestiona adecuada para mantener el vnculo de pareja con la cuidador / controlador. Esta relacin se ve reforzada por vocalizaciones de persona a animal o muestra fsica, proporcionar ms alimentos o material de nidificacin, y el masaje bajar el pjaro de nuevo y el rea paracloacal. El protocolo es sustancialmente diferente de la contraparte incondicionado, nonimprinted. Aqu, la mayora de la atencin se centra en seguimiento intensivo y minucioso de la cra comportamiento y, ms recientemente, la evaluacin no invasiva longitudinal de metabolitos endocrinos extrado de heces [49]. Mientras que las mujeres imprimen rutinariamente tolerar inseminaciones mltiples, el nmero de gripe aviar en las aves incondicionado se reduce al mnimo, contando con la medida de lo posible en la experiencia o los datos empricos sobre el nmero mnimo de espermatozoides necesarios y las estimaciones de la supervivencia en la TSM (ver supra). 2.6. Inseminacin artificial de tiempo

En las especies en general, aves de mayor tamao (por ejemplo, las guilas y gras) se inseminaron dos veces por semana durante la semana 2 antes del inicio de la puesta de huevos, y despus de cada oviposicin. Por el contrario, las contrapartes ms pequeas (por ejemplo, guila calzada o el halcn Eleonoras) son inseminadas tres veces durante la semana antes de la oviposicin comienza. De Por supuesto, ptima protocolos de IA son especies dependientes y relacionados con las normas especficas biolgica. Los tres ms factores crticos son: el mtodo ms prctico de inseminacin (Vase la seccin 2.4), requiere mnimo de espermatozoides nmero (vase la Seccin 2.8), y la duracin de la mujer la fertilidad de las especies de inters. Para las especies ms grandes por slo uno o dos huevos por temporada de reproduccin, es recomendable comenzar inseminaciones 7.14 d antes de la primera oviposicin. Por ejemplo, la fertilidad es ptima alcanzado en las gras inseminadas 10-14 das antes de la primer huevo [3]. Algunas aves (es decir, Sandhill Mississippi gra) fcilmente tolerar dos veces por semana para inseminaciones dos o tres semanas consecutivas con antelacin, y unos pocos

horas despus de cada oviposicin [17]. Dos o tres inseminaciones en das alternos o 3 cada d, tambin ha dado excelentes resultados en faisanes [50]. Japons codornices a menudo se inseminan cada dos das [51], Considerando que una buena fertilidad, se produce en los pavos por inseminacin slo una vez cada 3 semanas [40]. Para las especies o individuos propensos al estrs, es prudente para inseminar una sola vez en el da antes de la primera oviposicin, con lo que 'sacrificar' el primer huevo para asegurar la fertilidad en el segundo y huevos posteriores. De lo contrario, como las mujeres sensibles pueden se niegan a establecer, o la oviposicin se retrasa en la cara de restricciones mltiples. Sin embargo, una vez por el que se inicia, el huevo produccin rara vez se ve interrumpida por la inseminacin, independientemente del tipo de aves. En general, cuanto menor sea la masa corporal, menor ser el duracin de la fertilidad. Adems, parece que el esperma retencin en la TSM es mejor (al menos en el pavo) por inseminar antes de la puesta del primer huevo [52]. Recientes datos de monitoreo endocrinas de nuestro laboratorio tambin sugieren que existen rasgos de perfil hormonal durante un pocos das antes de la oviposicin en primer lugar que tambin seal de una entorno altamente acomodar a los espermatozoides, un perodo en que la hembra acepta fcilmente la cpula en una mayor de frecuencia. Estudios en el pavo han demostrado que la entrega de los espermatozoides inmediatamente antes de la produccin de huevos inicio maximiza espermatozoides llenado la TSM, con lo que la promocin de la fertilidad en todo el intervalo por el que se [53]. Tambin es claro que la IA debe ser realizada tan pronto como sea posible despus de cada oviposicin. Sin embargo, el oviducto peristaltismo asociadas a la expulsin por el que se sigue por lo menos durante 30 minutos, lo que compromete el ascendente transporte pasivo de los espermatozoides depositados. Por lo tanto, Amnista Internacional debe ocurrir coincidente con el antiperistalsis asociadas a la contraccin del tero. En contraste, la IA inmediatamente antes de la liberacin de huevos se ha relacionado con disminucin de la fertilidad, tal vez porque menos espermatozoides alcanzan la TSM o ms estn siendo expulsados durante la puesta de huevos [54]. La viabilidad real de inseminacin poco despus cada huevo se pone depende del tiempo mnimo requerido entre la IA y la puesta de huevos que, a su vez, es la especie especfica. Por ejemplo, este intervalo es de 60 h en el Halcn peregrino [48]. Por lo tanto, para las mujeres de tal manera que poner un huevo cada dos das, una inseminacin dada fertilizar

el tercer huevo en una secuencia, pero no el que se produce en al da siguiente despus de la IA. Inseminacin eficiencia global tambin puede estar influenciada por el tiempo dentro de la cra temporada. La sugerencia de que est incompleto llenado de la TSM la fase inicial de produccin de huevos seguido por almacenamiento ineficaces tarde en la temporada ha sido refutada por Robinson et al. [55]. Del mismo modo, ha habido por lo menos un informe que sugiere que los huevos de oro guila establecidas ms adelante en la secuencia son ms frtiles que las contrapartes anteriores [47]. Por ltimo, se ha afirmado que las mujeres mayores probablemente requerir ms (y ms frecuente) inseminaciones como el envejecimiento influye de manera negativa la integridad de SST y / o la funcin [39]. 2.7. Profundidad de la inseminacin

Aunque mucho ms eficaz que la inseminacin cloacales, vaginales IA sigue siendo muy ineficiente. Por ejemplo, en el pinzn bengal, 95-99% de los depsitos de fugas de semen casi inmediatamente de la vagina y se perdi [23]. Por lo tanto, en el fondo intravaginal AI es el mejor enfoque para el logro de altas tasas de fecundidad, mientras la profundidad de insercin que no se sabe muy bien por pasar el tero vaginal SST. Longitudes de insercin compatible con el intramagnal tcnica de IA (vase la Seccin 2.4.1) debe limitarse a las circunstancias especiales en que slo unos pocos espermatozoides estn disponibles, y la inseminacin se ha previsto durante un tiempo conocido de la ovulacin. Profundidad de la inseminacin depende en gran medida de las especies el tamao y la presencia / ausencia de los huevos completamente formadas. Por ejemplo, en el caso de la longitud de este ltimo, de insercin en los perdicera o guila de oro disminuye de 35 a 25 mm. En tiempos anteriores a la aparicin de la puesta de huevos, el nivel de receptividad femenina y el estado endocrino de manera significativa influencia de la profundidad de la insercin de cnula. Adems, si el oviducto no se ha volcado, la cnula requiere una penetracin ms profunda para compensar la ausencia de protrusin del oviducto. 2.8. el para volumen del la semen, dilucin, y el almacenamiento Inteligencia considerablemente de las especies y in vitro Artificial

volmenes espera que,

Insemine varan segn

varan el tamao

y, como la eyaculacin

de calidad. volmenes Insemine rango de 5 a 10 ml en paseriformes [44], 33 a 150 ml en el medio de los tamaos de las especies (Es decir, halcones, monals, trapogans) [48,50], de 100 a 200 ml en gras [26] y 600 mL de avestruces 1400 [44]. La menor tamao de la hembra, obviamente, menor ser la capacidad de para dar cabida a un mayor volumen inseminar. Lo que se refieremenos, la preferencia siempre es de Amnista Internacional con un nmero limitado de volumen que contiene una alta concentracin de espermatozoides, con lo que reducir las posibilidades de expulsin y la prdida de semen. Un volumen del eyaculado grande no se traduce necesariamente en ms de espermatozoides recuperados (muestras de semen de aves puede ser muy diluida con una concentracin baja de la esperma). Por lo tanto, puede ser necesario para inseminar a una mayor volumen conveniente para garantizar un nmero adecuado de depositados los espermatozoides. fertilidad ptima tambin se asegura con semen fresco, diluido, con las recomendaciones slo dilucin recomienda para alta viscosidad eyaculados con elevado contenido en las concentraciones de esperma, tales como se observa en paseriformes, o cuando el semen no se utiliza inmediatamente para la inseminacin. Para estas especies y circunstancias, la dilucin debe ser una semen parte a parte un diluyente. A falta de una diluyente especfico de la especie, Beltsville semen de aves de corral Extender (BPSE) o Lago de diluyente (mximo, un 01:02 relacin) se puede utilizar. Sin embargo, es importante reducir al mnimo dilucin que permitan conservar valiosas protenas y espermatozoides viscosidad que puede en realidad aumentar la fertilidad post-IA [56]. Poco se sabe acerca de la especie-especficos mnimos nmero de espermatozoides necesarios para maximizar la fertilidad. Por lo general, un inseminar contiene todos los espermatozoides viables disponible de un hombre determinado para ese da en particular. Comprender la sensibilidad de la fertilizacin en las aves de nmero de esperma para la asistencia (as como naturales) de cra es una alta prioridad para la investigacin futura. No hay resultados duda son influenciado por especie, edad, calidad de los espermatozoides (concentracin, la motilidad, la integridad estructural), tiempo de oviposicin, y tipo de enfoque utiliza la inseminacin. Ms de 16 106sperm A dos veces por semana, produce excelentes la fertilidad en las gras [17], mientras que 8 106cells general son suficientes en halcones. En general, la influenza aviar de aves silvestres requiere alrededor de 20 106spermatozoa para lograr la fertilidad. Est ms all del alcance de este trabajo para abordar las cuestiones asociados con el almacenamiento a corto o largo plazo de la gripe aviar espermatozoides. Los detallados estn disponibles [12,44]. Es

Es de notar que la fertilidad con el refrigerado o descongelado espermatozoides en el guila de oro ha imitado el xito utilizando semen fresco logrado (Blanco, indito observaciones). Sin embargo, inevitablemente se produce una prdida de la integridad de espermatozoides, la movilidad, y probablemente la funcin de el estrs relacionado con el crio-, que requieren la final inseminadas nmero de espermatozoides se incrementar para dar cuenta de esta prdida. 3. Control de la enfermedad y AI

Las aves presentan retos especiales en el control de la enfermedad. Aviar anatoma predispone a una muestra de semen para fecales la contaminacin y, por tanto, una serie de problemas que causan bacterias, siendo el ms comn E. coli [57]. El semen diluyente puede ser otra fuente comn de contaminacin, especialmente para E. coli y pseudomonas [58]. Estos agentes pueden desencadenar la mortalidad espermatozoides significativo en bruto o eyaculado diluido y, cuando se utilizan para la influenza aviar, puede causar tanto enfermedad sistmica y la infertilidad [58]. Este problema es comnmente tratados por la adicin de antibiticos al diluyente (es decir, la penicilina y estreptomicina), aunque estos frmacos pueden negativamente en la viabilidad de los espermatozoides de impacto [59], un problema que merece la investigacin ms atencin. Otros patgenos tambin son dignos de mencin. Por ejemplo, un organismo ureaplasma relacionados con espermatozoides malformados y la infertilidad se ha detectado en el semen de un poco de pavo cepas [14]. Tambin se sabe que pasterellosis y salmonelosis puede inducir cambios histopatolgicos en los testculos aviar que conduce a la produccin de espermatozoides disminuye y anomalas aumentado. Aunque no est claro si estas enfermedades pueden transmitirse a travs de Amnista Internacional, horizontal la transmisin se ha demostrado en las gallinas virgen inseminadas con semen contaminado de salmonela [13]. La transmisin vertical de este patgeno tambin ha sido inform, con cualquiera de las rutas que tienen el potencial de causar infertilidad irreversible [13]. Candida albicans, una levadura, se ha aislado de la papila de infectados por las aves de presa y los gansos (Blanco, observaciones no publicadas). El resultado es un anormal inflamacin del rgano copulador masculino que puede contribuir tanto a una incomodidad para los hombres durante recogida y la contaminacin despus de la recoleccin del semen. Mycoplasma meleagridis se ha encontrado en Turqua

semen y se sabe que es difundida por Amnista Internacional [14]. La Hexamita parsito tambin se ha reportado que causa baja la fertilidad en el pavo [60]. infeccin latente por virus del herpes se ha reportado que producir malformaciones espermatozoides [61]. la enfermedad de Marek virus, virus de la encefalitis equina, virus de la Sierra J, pollo virus de la anemia y el virus de la viruela ahora son reconocidos por ser transmisible entre las aves a travs del esperma por desastres naturales apareamiento [62-64]. La posible transmisin de la gripe aviar virus de la leucosis todava se est debatiendo [66]. Este patgeno est ausente en el eyaculado despus de la inoculacin intratesticular [64], pero otros hallazgos han revelado la presencia en el semen [65] y han sugerido venreas mediada por el varn transmisin [67]. En conjunto, los resultados hasta la fecha mucho hincapi en la necesidad de minimizar la contaminacin de la eyaculacin, centrndose de recogida de esperma sanitarias y tratamiento (incluida la utilizando su caso, sin embargo, las dosis prudente de amplio espectro antibiticos y antifngicos), as como la proteccin de las aves de patgenos. Esto incluye el mantenimiento a fondo protocolos de vigilancia de patgenos e incluso aislamiento estricto / las medidas de cuarentena para las poblaciones reproductoras. Una vez surgen situaciones infecciosas, la mitigacin rpida es oblihistoria, a pesar de que es un reto para aliviar ciertos virus (es decir, el virus del Oeste del Nilo) de las aves infectadas. Los estudios estn en curso en nuestros laboratorios de evaluacin de la "Purificacin" de viabilidad y eficacia de lavado de esperma y. Sin embargo, lo ms sensato y rentable estrategia consiste en implementar y mantener un riguroso programa profilctico [68]. 4. Prctica desafos y prioridades para el futuro

Al resumir los retos y necesidades, es importante empezar con slo alentador que ms la investigacin se dirige a los pjaros. La mayora de las investigaciones en el ciencias de la reproduccin se han centrado en los mamferos, incluso aunque hay casi pjaro de dos veces ms de mamferos especies en el planeta. Debido a la electrocucin, envenenamiento, heridas de arma de fuego, y otras causas relacionadas con el hombre, hay una afluencia constante de las aves silvestres entrar colecciones ex situ. Pocos de estos animales nunca pueden ser devueltos a la naturaleza y incluso una proporcin ms triviales se utiliza en la investigacin. Estos genticamente valiosos fundadores son un recurso increble

para la investigacin bsica y aplicada y para la aplicacin de nuevas o el apoyo a los programas existentes, la ordenacin gentica. Un prioritarios es la construccin de ms instalaciones y la contratacin cientficos que pueden aprender de estos especmenes invaluable y las poblaciones. Ciertamente, la ms alta prioridad para la implementacin de un exitoso programa de AI para cualquier ave est teniendo importantes conocimientos fundamentales sobre las especies objetivo, a partir de informacin sobre la historia natural y bsico comportamiento. En el contexto de los individuos salvajes viven ahora en cautiverio, es esencial que estos animales se colocan en un ambiente apropiado ex situ que minimiza el estrs y proporciona adecuada las necesidades diarias. Aun as, tales fundadores pueden requerir aos de acondicionamiento antes de mostrando inters de comportamiento en la reproduccin o producCing espermatozoides viables o poner huevos. As, una de primer orden prioridad es garantizar que la instalacin en cautividad es mnimamente adecuada y, preferentemente, "enriquecido" con suerte provocar el comportamiento reproductivo. En los primeros estudios han demostrado, no invasiva evaluaciones hormonales metabolito (a travs de la orina o las heces) ofrecen enormes oportunidades para entender el estado reproductivo de corto plazo (por ejemplo, durante la poca de reproduccin) o longitudinal (por ejemplo, circannually) o, curiosamente, a travs de gneros, entre individuos, o dentro de una poblacin. Por otra parte, porque es posible medir las hormonas suprarrenales [49], hay muchas oportunidades para examinar cmo alterar las condiciones de cautividad puede minimizar el estrs (por ejemplo, impacto de enriquecimiento espacial o reducir / eliminar contacto humano). Cabe destacar que la IA es para ser considerado para genticamente aves valiosas que son reproductivamente de sonido, pero no, naturalmente, su compaero en un caso en cautiverio el medio ambiente. A lo largo de este trabajo, hemos identificado los principales desafos relacionados con la capacidad de recoger de alta calidad, no contaminado, las muestras de semen. No es la necesidad de determinar si este problema es de carcter tcnico (es decir, mtodos ideales coleccin quedan por descubrir), es decir, fisiolgico (, la reproduccin en las aves silvestres colocado en cautiverio se ve comprometida por el estrs y / o otros insuficientes los factores ambientales, o ambos). Tambin encontrar las diferencias entre los individuos en un determinado especies interesantes (por ejemplo, las variaciones en la concentracin de espermatozoides y la incidencia de pleiomorphisms). Sospechamos que

la comprensin de esta variacin podra ser mejorado en ms de Los estudios de los fundadores de capturados en la naturaleza, sobre todo comparando las personas que acaban de entrar en cautiverio en comparacin con los viven ex situ para los intervalos prolongados. Adems, sera til examinar la aptitud reproductiva de los hombres en la cara de la cra de alteracin y la gestin de otros tcticas. De todos modos, es evidente que existe un importante especificidad de especie, y sin embargo nos sentimos alentados porque intensificar la investigacin en algunas aves se ha demostrado la capacidad para obtener, de alta calidad para la investigacin y eyacula reproduccin asistida. Slo unos pocos estudios pioneros en el campo se han ocupado con las caractersticas ms detallado de la fisiologa reproductiva de aves. Hay una necesidad de sistemtica estudios sobre las caractersticas seminales, los patrones naturales de copulacin, duracin de la fertilidad y las caractersticas anatmicas ms bsicos como la presencia o ausencia de un glomus seminales. Nosotros estn fascinados con los mecanismos operativos de la SST. En efecto, cmo estas estructuras facilitar espermatozoides viabilidad (estructura y funcin) y, a continuacin distribuir adecuadamente los espermatozoides a travs del tiempo? Hay algo que aprender que tiene relevancia a largo plazo esperma de almacenamiento o de transporte de otras especies, incluyendo los seres humanos? Por ltimo, en el contexto de la realidad, la realizacin de una IA, mucha ms informacin que se necesita en las mejores prcticas para la procesamiento de semen, incluyendo el lavado de los concentrar espermatozoides y reducir al mnimo la contaminacin por patgenos de el tracto genital. Incluso la deposicin del semen requiere examen de fondo. Las prioridades incluyen la determinacin de cmo reducir (o eliminar) el flujo de salida pasiva de semen de la vagina despus de la IA, que se relaciona en parte a comprender mejor la importancia de la profundidad de la inseminacin dentro de la zona. Por supuesto, es evidente que hay una necesidad para ms estudios sobre el tiempo de inseminacin (nmero y duracin entre insemina) y un nmero mnimo de espermatozoides maximizar la fertilidad. Este ltimo tema podra facilitarse mediante el desarrollo en los ensayos de fertilizacin in vitro para las aves, una enfoque que ofrecen interesantes oportunidades para estudio de la interaccin espermatozoide-huevo de este taxn. Por ltimo, aunque el tema de la criopreservacin de semen se ms all del alcance de este trabajo, la capacidad de producir descendientes de rutina de espermatozoides descongelados que signifisignificativamente avanzar en la conservacin de especies en peligro de extincin. No

Ya son ejemplos alentadores pocos (por ejemplo, gras o guilas de oro) [17,42], que puede servir de modelo para del taxn en su conjunto. Dado el nmero de aves raras entrada en cautiverio y que pocos siempre, naturalmente, raza, a continuacin, una de las prioridades es la mejora de la ciencia criopreservacin de espermatozoides por lo que esta diversidad gentica puede ser importante conservados para la IA uso ahora o en el futuro.

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