nº 22

Uso de semen Desde antes de la década de los 80 se realizaron diversos inten-

XIII Congreso
tos para encontrar una técnica que permitiera preseleccionar con
seguridad el sexo de la progenie de diversos animales. Sin embargo,

sexado en
no fue hasta los años 90 cuando el Dr. Lawrence Johnson, que había
comenzado a trabajar en este proyecto en 1982, desarrolló un método

Internacional
exitoso utilizando la Citometría de Flujo. Este método fue patentado
por el Departamento de Agricultura de los EE.UU. en el año 1992.

inseminación La Citometría de Flujo se utiliza desde finales del decenio de 1970

ANEMBE de
para el análisis y la clasificación de una variedad de tipos de células en

artificial bovina
suspensión de líquidos. Estas células pueden ser distinguidas y selec-
cionadas sobre la base del tamaño y la forma, así como por la presencia
de diferentes moléculas dentro y en la superficie de las mismas.

Medicina Bovina
Redacción
La tecnología de Citometría
de Flujo usada para En los cerdos el espermatozoide X contiene un 3.6 % más de ADN, en la
separar espermatozoides X e
Y ha sido perfeccionada a lo
largo de los últimos 10 años.
Aproximadamente 10 millones
de espermatozoides de cada
sexo pueden clasificarse en una
hora con una precisión de un 90 %,
aunque depende de toros y de
eyaculados.
En el caso de la preselección de sexo, ésta se basa en la iden-
tificación de las diferencias que existen entre los cromosomas X e Y
del esperma. El contenido de ADN es la única diferencia real cono-
cida entre el espermatozoide X y el Y; en el caso de los mamíferos el
espermatozoide X contiene más ADN que el espermatozoide Y, pero la
diferencia varía según la especie. En el ganado bovino y en los caballos
el espermatozoide X tiene un 3.8 % más ADN que el espermatozoide Y.
chinchilla un 7.5 % y en el humano es tan solo un 2.8 % más. Mientras
mayor es la diferencia en contenido de ADN más fácil es la separación
de los espermatozoides con un mayor grado de pureza.
Cómo se hace el sexado del semen
Los eyaculados aprobados para ser sexados (motilidad progresiva
mayor o igual al 60% y concentración mayor a 1 x 109 espermatozoi-
des/ml) son teñidos con un colorante fluorescente que tiñe las bases
de ADN. Luego los espermatozoides se hacen pasar, en forma de una
corriente o flujo muy delgado, a través de la máquina separadora, la
cuál utiliza un rayo láser que al estimular los espermatozoides les hace
brillar más o menos en función de su contenido en ADN. Los esper-
matozoides X contienen un poco más de ADN, atrapan más colorante
y esto hace que se vean más fluorescentes. Posteriormente, mediante
un software se clasifican los espermatozoides en tres grupos: 1) los
que portan cromosoma X; 2) los que portan el Y, y 3) una población
mixta de portadores de X y de Y (que no han podido ser clasificados
con absoluta certeza).

El flujo de espermatozoides se divide o fracciona entonces en

gotitas pequeñísimas, conteniendo un espermatozoide cada una de
ellas, que pasan por un dispositivo que les dota de una carga eléctrica
positiva o negativa según la clasificación previa y se les hace pasar
luego por un campo magnético que separa las dos poblaciones. Los
espermatozoides seleccionados son así desviados del flujo original y
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recolectados en un tubo para su posterior
uso. El semen fresco deberá utilizarse en
las siguientes 24 horas, aunque también es
posible su congelación para utilizarlo poste-
riormente. Las dosis de semen sexado no con-
tienen espermatozoides muertos o anómalos
ya que estos espermatozoides no se tiñen y
por lo tanto no se separan.
Recomendaciones
para su uso
El método de congelación de estos
espermatozoides es diferente al utilizado
normalmente; no utiliza glicerol por lo que es
menos agresivo para las células espermáticas
y permite obtener un 80% de motilidad tras
la descongelación, de esta forma se necesita
congelar menos espermatozoides en cada
dosis para inseminar las vacas. En el caso del
semen sexado el protocolo de descongelación
y tratamiento de la dosis hasta la correcta
inoculación en el útero de la vaca debe ser
seguido con mucho cuidado paso a paso para
la obtención de buenos resultados.
El uso del semen sexado requerirá de
una cateter de inseminación y sus respectivas
vainas diseñadas para acomodar pajuelas de
0,25 CC. Estas pajuelas deben manejarse y
descongelarse igual que una pajuela de 0,50
CC, pero el diámetro menor las hará más sen-
sibles a cambios de temperatura y a errores
en el manejo.
En general, para maximizar las probabi-
lidades de éxito se debe:
• Descongelar las pajuelas en agua a 35
grados Celsius durante 45 segundos.
• El lugar donde se descongela y mane-
ja el semen no debe ser frío ni tener ráfagas
de viento.
• Precalentar todo equipo que vaya
a tocar las pajuelas, como los catéteres, las
vainas y las toallas de papel.
100%
75%
% de novillas
50%
25% 48 %
0%
Semen convencional
75%
Indice de Concepción
50%
25%
42 %
0%
Semen sexado
• Este semen sólo debe ser usado por
técnicos inseminadores con amplia expe-
riencia.
• Sólo debe usarse en rebaños bien
manejados, donde las novillas alcanzen más
del 60 % de su peso adulto a los 14 meses de
edad, y estén en buenas condiciones físicas.
• Las novillas deben ser inseminadas
8 a 14 horas después de haberlas detectado
en celo.
• Se recomienda el uso de celos sin-
cronizados, pero en ese caso no debemos
inseminar los animales que no tengan un celo
bien definido.
Las investigaciones indican que explo-
taciones con buenos manejos que tienen 60
a 65 % de concepción en sus novillas con
semen normal, pueden esperar 45 a 50 %
con semen sexado. El semen sexado NO es
recomendado para ser usado en vacas en
producción o en novillas superovuladas.
Ventajas y desventajas
asociadas
Las desventajas ligadas a esta técnica son:
• Lenta velocidad de clasificación.
• Menor viabilidad del esperma (lo que
89 %
Semen sexado
50 %
Semen convencional
incide en los porcentajes de preñez).
• Mayor coste del semen.
• No disponibilidad del semen de deter-
minados toros.
• Podemos tener un máximo de 10
nacimientos del sexo no deseado. Cada dosis
de semen sexado contiene al menos un 90%
de espermatozoides del sexo elegido, es decir,
de cada 100 partos al menos 90 serán del
sexo elegido pero hay que tener en cuenta el
porcentaje restante.
No obstante, existen ventajas que tam-
bién hemos de valorar:
• De las vacas de las que se quie-
re recriar se obtendrán prácticamente sólo
novillas, y no un 50% de machos y hembras,
con lo que se acelera el progreso genético.
• Se puede programar la época de
nacimiento de las novillas o de los terneros
para cebar.
• Tendremos una menor dificultad de
partos al poder utilizar semen “hembra”, en
general con menores pesos al nacimiento
en aquellos animales predispuestos a tener
partos difíciles y en las novillas.
• Diversos trabajos de campo han
demostrado que cuando se utiliza semen
sexado no hay diferencias en la gestación,
porcentaje de muertes neonatales, facilidad
de parto, peso del ternero al nacimiento o
índice de supervivencia al destete.
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