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LIMNOLOGIA 2005

D E P A R T A M E N T O D E E C O L O G I A , G E N E T I C A Y E V O L U C I O N F A C U L T A D D E C I E N C I A S E X A C T A S Y N A T U R A L E S U N I V E R S I D A D D E B U E N O S A I R E S

Limnologa

LIMNOLOGIA
Gua de Trabajos Prcticos 2005

Ctedra de Limnologa Departamento de Ecologa, Gentica y Evolucin Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Universidad de Buenos Aires http://biolo.bg.fcen.uba.ar/limn.htm

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Contenido
Programa ........................................................................................................................ 3 Reglamento interno del curso......................................................................................... 6 De los seminarios ........................................................................................................... 7 De los informes............................................................................................................... 7 Bibliografa general del curso ....................................................................................... 14 Trabajos prcticos ........................................................................................................ 16 Trabajos ms usuales para la tipificacin general de un cuerpo lntico.................. 17 Morfometra.............................................................................................................. 19 Determinacin de pigmentos fotosintticos ............................................................. 34 Produccin primaria fitoplanctnica en un estanque eutrfico urbano .................... 38 Limnologa regional.................................................................................................. 41 Calor y temperatura en cuerpos lnticos ................................................................ 50 Efecto de la contaminacin sobre la comunidad bacteriana de un cuerpo de agua ltico bonaerense ...................................................................... 57 Determinacin y mapeo de la calidad del agua en cursos lticos ........................... 63 Determinacin de la edad y el crecimiento en peces .............................................. 71 Tasas de filtracin en organismos bentnicos......................................................... 75 Equilibrios alternativos en lagunas vegetadas ......................................................... 83 Mtodos ........................................................................................................................ 90 Comunidades dulceacucolas .................................................................................. 91 Plancton ................................................................................................................... 92 Peces ..................................................................................................................... 113 Neuston.................................................................................................................. 127 Pleuston, bafon, plocon, etc................................................................................... 128 Perifiton.................................................................................................................. 129 Bentos .................................................................................................................... 130 Granulometra de sedimentos................................................................................ 135 Algunas determinaciones qumicas en limnologa ................................................. 140 Oxgeno disuelto ............................................................................................... 141 Produccin primaria, mtodo del oxgeno disuelto. .......................................... 146 Carbono inorgnico .......................................................................................... 149 Alcalinidad ......................................................................................................... 151 Demanda qumica de oxgeno (DQO) ............................................................... 153 Fosfatos............................................................................................................. 154 Determinacin de la concentracin de slidos disueltos y en suspensin........ 156 Compuestos de nitrgeno ................................................................................. 157 Valoracin cualitativa de la materia orgnica.................................................... 158 Algunas reglas bsicas de higiene y seguridad en laboratorios................................. 160

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Programa
IMPORTANTE. El temario del examen final de la materia incluye TODOS los tpicos listados en este programa. Algunos de ellos estn adecuadamente desarrollados en la gua de TP, motivo por el cual no se exponen detalladamente en las clases tericas. Los temas que no se traten en tericas ni en la gua de TP deben ser preparados para el final sobre la base de los textos generales de limnologa que se listan en la pgina 12 de la gua.

Introduccin a la limnologa. La limnologa en las ciencias ecolgicas. Concepto de estructura (ejemplos: poblaciones, comunidades). Relaciones con otras ciencias y ramas de la limnologa. El agua como hbitat. Propiedades fsicas de la molcula de agua. Compuestos disueltos: gases, elementos mayores y menores, materia orgnica. Bacterias: importancia, distribucin, abundancia. Mtodos de determinacin de su numerosidad (cultivos en medio slido y en medio lquido, clculo del NMP - mtodo de Wilson). Vegetales dulceacucolas. Diversidad biolgica. Forma y funcin, adaptaciones al medio acutico, hbitat, relaciones trficas, importancia ecolgica, distribucin espacial y temporal. Grandes grupos taxonmicos. Animales dulceacucolas. Comparacin con la fauna marina, factores ambientales, adaptaciones, anabiosis, caracteres generales. Orgenes de la fauna dulceacucola, abolengos, vas de colonizacin, faunas relictuales. Revisin general de los taxones dulceacucolas: clasificacin, diversidad, importancia, ecologa, cosmopolitismo. Las comunidades de vida en los ambientes acuticos continentales: definiciones, caracterizacin y estructura. Plancton, perifiton, bentos, pleuston, neuston. Otras clasificaciones. La zona litoral. Las macrfitas, adaptaciones morfolgicas, estratificacin. Fitoplancton: componentes esenciales, adaptaciones. Estructura y dinmica. Mtodos de estudio. Fluctuaciones estacionales: factores determinantes. Bioensayos para la evaluacin de los nutrientes limitantes. El cloroplasto: estructura y funcin. Tipos de plstidos y adaptaciones al medio. Pigmentos: clorofilas, carotenos, xantofilas. El espectro de absorcin. Relacin entre pigmentos: importancia ecolgica. Metabolismo de las poblaciones fitoplanctnicas. Mtodos de determinacin, correcciones. Clculo de la produccin primaria por el mtodo de las botellas clara y oscura, correcciones, errores. Otros mtodos para estimar la produccin primaria. Distribucin vertical del zooplancton. Migraciones diarias, ontogenticas y estacionales. Ventajas adaptativas de las migraciones verticales. Distribucin vertical de la biomasa. Adaptaciones a la profundidad. Aspectos metodolgicos. Diseo de muestreos: generalidades, propsitos. Relaciones entre el diseo y las finalidades del estudio, el anlisis de las muestras, el tratamiento de los datos. Precisin y confiabilidad. Tipos de diseo: regulares, al azar, estratificados. Muestreos regresivos. La relacin entre la equitabilidad y el tamao muestral. Variabilidad real y aleatoria. Gradientes. Mtodos de estudio del zooplancton: aparatos de muestreo. Redes: esquema, componentes, modelos, redes especiales. Eficiencia de filtracin, tipos de malla, evasin,

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estimacin de la cantidad de agua filtrada, profundidad de muestreo. Bombas de succin: tipos, operacin, ventajas y desventajas. Botellas: tipos, operacin, ventajas y desventajas. Mtodos miscelneos. Anlisis comparativo de los diferentes muestreadores de plancton. Submuestreo. Aparatos, operacin, recomendaciones. Fraccionamiento selectivo. Trampas de sedimento. Diseo, modelos, aplicaciones. Ventajas y limitaciones. Mtodos de estudio del bentos: recoleccin (dragas, extractores de testigos), tratamiento ulterior del material. Granulometra: importancia, mtodos de determinacin. Mtodos especiales para otros hbitats (litoral, pleuston, neuston, aguas corrientes, etc.). Peces. Artes y maniobras de pesca, artes pasivas y activas, otros mtodos. Dinmica poblacional: determinacin de la edad, crecimineto, cohortes, fecundidad, mortalidad. Recuentos de organismos: procedimientos, aparatos. Recuentos automticos. Clculo del error de recuento. Tratamiento de los datos. Estimaciones y transformaciones. Clases de abundancia. Biomasa. Expresiones, determinacin - mtodos. Biovolmenes. Biomasa de la vegetacin palustre. Tablas de equivalencias. Anlisis de los datos en estudios ecolgicos de ambientes acuticos. Mtodos univariados y multivariados. Ordenamiento multivariado: ndices, tratamientos. Anlisis de cluster, PCA, funciones discriminantes. Ejemplos en distribucin, taxonoma numrica. Recomendaciones generales para el armado de manuscritos. Divisin y ordenamiento del material, estilo, bibliografa, tablas y figuras, tipografas. Evaluacin de manuscritos. Factores ambientales: balance hdrico, luz, calor, movimientos del agua, hielos. Mtodo de determinacin del oxgeno disuelto, del carbono inorgnico, alcalinidad, DQO, fosfatos, slidos disueltos y en suspensin, compuestos del nitrgeno. Clculo de la cantidad de calor de un cuerpo lntico, balance trmico. Morfometra de cuerpos lnticos (longitud y ancho mximo total y mximo efectiva, permetro, rea, desarrollo de lnea de costa, profundidad): mtodos de medicin y relevancia para el metabolismo general de los cuerpos de agua. Caracterizacin y clasificacin de cuerpos lticos (ros, manantiales, arroyos). Factores ecolgicos, sucesin espacial. Teora del contnuo, del espiralado de nutrientes y de los pulsos de inundacin. Nmero de orden de un ro. Cuerpos de agua lnticos: generalidades, distribucin y dimensiones. Gnesis: tectnicos, volcnicos, deslizamientos, glaciales, de disolucin, por accin de ros, por erosin elica, por procesos costeros, por procesos orgnicos, meteorticos. Embalses y represas: comparacin con cuerpos lagos, distribucin, longevidad, impactos negativos y posotovos. Caracterizacin y clasificacin de cuerpos lnticos. Lagos y lagunas. Las lagunas pampsicas. Pantanos, esteros, baados, aguas epifticas, embalses, estanques. Ambientes mixohalinos: albuferas, estuarios, manglares. Aguas subterrneas, aguas termales, ambientes contaminados. Produccin animal. Generalidades, definiciones. Alimentacin y eficiencias de conversin. Mtodos de estimacin de la produccin animal, cohortes.

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Ontogenia de los sistemas acuticos. Oligotrofia y eutrofia. Eutroficacin. Caractersticas, mecanismos, diagnstico. Sistemas distrficos. Saprobiosis. Algunas aplicaciones de la limnologa biolgica. Problemas en el manejo de las aguas. Lagos artificiales y represas. Las especies introducidas e invasoras en sistemas de agua dulce. Vas del introduccin, mecanismos, causas, evolucin histrica. El problema a nivel mundial y en la Argentina. Ejemplos y casos emblemticos. Aspectos negativos y positivos. Limnologa regional: clasificacin de ambientes acuticos. Mtodos de clasificacin. Factores climticos, geolgicos y morfomtricos. Aplicaciones. Contaminacin del agua: carcter de los contaminantes, impurezas. DBO y DQO. Microorganismos. Desechos industriales, detergentes. Mtodo de estudio de un gradiente de contaminacin en cuerpos lticos. Purificacin del agua. Organizacin y utilidad de las bases de datos bibliogrficos (catalogacin, palabras/cdigos clave, bsquedas). Proveedores de abstracts. Internet.

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Reglamento interno del curso


Los trabajos prcticos se llevarn a cabo dos veces por semana, siendo cada uno de 4 hs. Se conceder una tolerancia de 10 minutos para la iniciacin de los mismos, pasados los cuales el alumno ser considerado ausente. Para la realizacin de los trabajos prcticos los alumnos formarn grupos de 2 a 4 personas. Estos grupos debern formarse el primer da de clase y mantenerse hasta el final del curso. Un trabajo prctico podr durar una o varias clases. Para algunos de estos TP se debern elaborar informes completos (ver "De los informes"), mientras que otros debern ser sumariamente reseados en la carpeta de TP individual del alumno. Las fechas lmite los informes detallados se indican en el calendario de actividades correspondiente. Los informes debern ser aprobados en su totalidad, de manera tal que un informe rechazado deber rehacerse. Cada grupo tendr hasta tres oportunidades para rehacer sus informes (ver detalles acerca de estos informes ms adelante). En cualquier clase prctica los alumnos podrn ser interrogados en forma verbal y/o escrita sobre el tema que se est desarrollando. En caso de no conocerlo, el alumno ser considerado ausente, quedando a criterio del docente la permanencia en clase del mismo. Se tomarn dos exmenes parciales escritos. Para estar en condicin de alumno regular ser necesario haber aprobado los dos. Podr volver a rendirse, por una nica vez, slo uno de los exmenes reprobados. Los viajes de campaa, a determinar al comienzo del curso, sern obligatorios y la inasistencia a los mismos podr condicionar la prdida de la condicin de alumno regular.

Para estar en condiciones de aprobar los trabajos prcticos, los alumnos debern reunir los siguientes requisitos: a) Haber asistido al 80 % de las clases prcticas. b) Haber aprobado todos los informes (trabajos prcticos y seminario). c) Haber obtenido como mnimo 60 puntos en ambos parciales. d) Realizar los trabajos de campaa programados.

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De los seminarios
Durante el curso de desarrollarn varios seminarios sobre temas de inters general en limnologa. Estos seminarios consistirn en el anlisis y discusin de los tpicos seleccionados, preparados por ls alumnos organizados en grupos de 2-4 personas. Los detalles del funcionamiento de estas clases, as como los temas y bibliografa correspondiente, sern distribudos al comienzo del curso.

De los informes
As como los trabajos prcticos de las diferentes materias tienen por finalidad entrenar al estudiante en las tareas a las que se dedicar una vez recibido, los informes de limnologa son ensayos de los manuscritos que los alumnos presentarn en revistas cientficas en el futuro prximo. Contener buena informacin es el requisito ms importante de un trabajo de investigacin que se pretende publicar, pero de ninguna manera es el nico. El lenguaje, la hilvanacin de los razonamientos expuestos, la claridad, la presentacin, la calidad de las ilustraciones, etc., etc., son aspectos de gran importancia que decidirn si el trabajo es aceptado o no. Estas facetas no son banales ni secundarias. No solamente determinan el potencial de publicacin, sino tambin condicionan la accesibilidad de la informacin expuesta a los futuros lectores. Un trabajo tedioso, reiterativo, mal compuesto y mal escrito, con figuras confusas y de mala calidad, an cuando se publique puede no ser ledo y/o comprendido jams ms que por su propio autor. Los norteamericanos, expertos en publicar o perecer, han acuado la expresin reader friendly, es decir "amistoso con el lector". Los editores de las revistas exigen que, adems de contener informacin suficiente en calidad y cantidad, el manuscrito sea reader friendly. Esto significa que el lector, an aqul que no est estrechamente familiarizado con el tema, pueda comprender rpidamente de qu habla el trabajo, qu material estudi y cmo, y qu pretende demostrar. Para ello, entre otras cosas, no tendr que haber repeticin de la misma informacin en diferentes lugares del texto ni de las ilustraciones o tablas. Los razonamientos expuestos debern estar fluidamente encadenados entre s. Las figuras sern ilustrativas, claras y suficientemente sencillas como para ser interpretadas de un vistazo. Las conclusiones estarn efectivamente basadas sobre las evidencias presentadas. La bibliografa no tendr omisiones, inconsistencias ni errores. En fin, todos los aspectos estticos, lingsticos y dems no directamente vinculados con lo cientfico en sentido estricto estarn cuidadosamente pulidos. Esto que podra parecer una serie de requisitos superfluos y banales, es suficientemente importante como para que la mayora de las revistas cientficas del mundo rechacen sin siquiera leer aqullos manuscritos que no se adecan en forma a las normas establecidas por el editor. La habilidad para armar un buen informe (y ms adelante un buen trabajo cientfico) es menos comn de lo que muchos creen. En realidad, cualquiera aprende rpidamente cmo se utiliza un espectrofotmetro, la clasificacin de un grupo de animales o plantas, el mtodo

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de Winkler, o los algoritmos del anlisis de componentes principales. Todo eso es sencillo y, en rigor, son tareas tcnicas que una vez aprendidas no exceden en complejidad a una receta de cocina. Pero el paso que separa una planilla de datos de un trabajo listo para presentar es un escollo fundamental para la mayora de los investigadores bisoos, y frecuentemente tambin para los no tan bisoos. Esto se ve reflejado en el mal que aqueja a una gran parte de los investigadores de nuestro medio: la profusin en sus curricula de informes internos y de trabajillos en revistas de cuarta categora. Esto es especialmente penoso cuando la informacin sobre la que estn basados esos informes y trabajillos es buena, y adecuadamente armada podra merecer una buena publicacin con difusin internacional. Esto no es lo ms comn, pero sucede con cierta frecuencia. No en vano hace unos aos atrs, con apoyo del CONICET, se organiz un curso especial para, precisamente, ensear a los investigadores jvenes a armar manuscritos cientficos. Para el investigador principiante existen varios manuales con consejos tiles de cmo se debe encarar el armado de un trabajo cientfico (e.g., M. O'Connor y F.P. Woodford, 1975, Writing scientific papers in English. An Else-Ciba guide for authors. Pitman, London; W. Cochran, P. Fenner y M. Hill, 1974, Geowriting. A guide to writing, editing and printing in earth science. Amer. Geol. Inst., Falls Church). Sin embargo, uno de los caminos ms seguros y efectivos es leyendo las publicaciones de otros autores (claro, tratando de elegir las buenas...). Detngase a estudiar no solamente el contenido y los datos, sino la manera de presentar la informacin, la hilacin entre argumentos, el tipo de datos incluidos en las diferentes secciones (introduccin, resultados, discusin), la puntuacin, las figuras. Cuantos ms trabajos buenos lea - ms se ir acostumbrando a hilvanar sus propios resultados de manera lgica y fcil de comprender para el lector. A continuacin se detallan algunos consejos, tanto referentes a aspectos estilsticos y gramaticales, como a los estrictamente formales. Lalos con atencin antes de armar su primer informe. Una vez que lo haya completado, lalo nuevamente con ojos crticos y vea si puede mejorarlo en funcin de estas recomendaciones. Tenga en cuenta que detrs de un buen manuscrito enviado a una revista, y detrs de un buen informe, hay al menos 5 o 10 borradores que se fueron depurando y corrigiendo hasta llegar a la versin definitiva. No espere a que los errores los encuentre el docente o el rbitro; seguramente muchos de los que quedan despus del primer par de intentos son suficientemente gruesos como para que usted mismo los detecte antes de presentar el trabajo. Este tipo de normas se pueden consultar en las "Instrucciones para los autores" de cualquier publicacin cientfica peridica; consiga algunas y revselas. Al final se da un ejemplo de cuestionario que recibe el rbitro del manuscrito para evaluarlo; analice su propio informe con este cuestionario en mano.

GENERALIDADES Se acostumbra dividir los trabajos de investigacin en las siguientes secciones: Resumen. El resumen debe reflejar el contenido del trabajo de una manera intelegible para el lector que no ha ledo el texto del artculo. Especifique concisamente qu se realiz, qu se encontr y qu se concluy. Evite expresiones vagas del tipo "Se discuten las relaciones entre la temperatura y la abundancia...", pero mencione qu tipo de relacin se encontr. Debe ser breve, sin referencias bibliogrficas ni referencias al cuerpo principal del trabajo mismo. Introduccin: Generalmente cubre antecedentes sobre el tema del estudio, informacin pertinente previa. Ubica al lector en el objeto del trabajo.

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Materiales y mtodos. Es una descripcin detallada del rea y las fechas del muestreo, las herramientas empleadas, las metodologas de campo y de laboratorio seguidas, etc. Estos datos deberan ser suficientes como para que cualquier interesado pueda repetir las experiencias descriptas (si es que son repetibles, obviamente). Tambin debera permitir al lector evaluar el nivel de precisin y confiabilidad de los resultados presentados. Por ejemplo, si se trata de un trabajo con recuentos de fitoplncteres, indicar las cantidades de individuos contados por muestra, los tamaos de las submuestras, etc. No debe omitir nada importante, pero tampoco detenerse en irrelevancias como, por ejemplo, el modelo y la marca del microscopio utilizado, o la marca del motor fuera de borda con que estaba equipada la embarcacin. Resultados. Se restringe a los resultados del trabajo realizado estrictamente. Si stos estn presentados en tablas y/o figuras, no repita la misma informacin en el texto; solamente destaque los aspectos que considera salientes y dignos de especial atencin. No incluya discusiones ni comparaciones con resultados ajenos bajo este acpite. Discusin (o Discusin y Conclusiones). Es el anlisis pormenorizado del significado de los resultados. Incluye las implicancias de los datos obtenidos para el proceso estudiado y otros relacionados con l, comparaciones con otras experiencia propias o ajenas, etc. A veces es conveniente que las secciones de resultados y discusiones sean tratadas conjuntamente, aunque esta modalidad suele conllevar ms problemas de interpretacin por parte del lector. Agradecimientos. Omita a la madre que ceb mate mientras preparaba el informe (no solamente porque no corresponde, sino tambin porque es la misma gracia que vienen haciendo los alumnos del curso desde hace 10 aos: muy poco original). Bibliografa. Por regla general, en los trabajos de investigacin la seccin bibliogrfica solamente incluye las referencias citadas en el texto, y toda cita en el texto debe estar detallada en la lista bibliogrfica. (Vea ms abajo indicaciones acerca de este punto). Epgrafes de las tablas y figuras. Todas las revistas exigen que estas referencias se agreguen al trabajo en hojas separadas e independientes del texto. Tablas y figuras. Agrguelas al final del trabajo, una por pgina, con indicacin del ttulo del trabajo y nmero de tabla o figura. Todo el texto debe ser dactilografiado a doble espacio, en una sola cara del papel, y todas las pginas deben estar correlativamente numeradas.

EL TEXTO Trate de escribir con idioma claro, sencillo y preciso. Sobre todo sencillo. Las frases floridas no agregan valor al contenido, pero dificultan la lectura. Por ejemplo, "A nivel de la estructura poblacional de los artrpodos acuticos analizados se observ una clara tendencia a la dominancia de los estadios avanzados de desarrollo ontogentico" es lo mismo que "La mayora de los coppodos eran adultos". En la medida de lo posible, en todas las secciones se debe seguir algn tipo de secuencia lgica: de lo ms general a lo ms particular, o en orden de complejidad creciente. Por ejemplo, en la introduccin del trabajo sobre la laguna El Burro, primero defina brevemente las caractersticas de las lagunas pampsicas en general, y luego hable de las de El Burro en particular. Cuidado: aqu todava no irn los resultados de su propio trabajo, sino aqullo de la bibliografa que se considere de relevancia (por ejemplo, sus rasgos morfomtricos, su conexin con lagunas vecinas, etc.). Cuando describa los anlisis realizados, agrupe los abiticos por un lado y los biolgicos por otro, Dentro de los primeros comience por los ms sencillos (temperatura, transparencia), y siga con los ms complejos (nutrientes, sedimentos). En los resultados biolgicos es razonable describir primero lo referente a las

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plantas (produccin primaria), y luego los animales. Para los listados de organismos observados, identificados o cuantificados adopte un ordenamiento natural y resptelo en todos aqullos lugares (texto, tablas, figuras) donde se refiera al tema. A veces es conveniente dividir el tratamiento de un tpico en subttulos breves. Por ejemplo, en la descripcin de las mediciones realizadas en El Burro: Temperatura: con termmetro de mercurio; Transparencia: con disco de Secchi... Pero cuando trate los antecedentes del estudio de lagunas pampsicas el mismo estilo es totalmente inadecuado. En vez de: Dangaus (1976): morfometra; Tell (1973): perifiton; Ringuelet et al. (1967): zooplancton... deber armar la seccin de manera ms coloquial: Desde los aos '60 se realizaron numerosos estudios en las lagunas pampsicas, incluyendo aspectos de su morfologa (Dangaus, 1976), qumica (Ringuelet et al., 1967)... Trate de que las frases sean breves, pero sin caer en un estilo telegrfico. Existen reglas para el uso de los signos de puntuacin: aprndalas y resptelas. No abuse de los puntos y aparte. Los espacios tienen tanta importancia como los signos y letras; por regla general, los signos de puntuacin deben ir seguidos de un espacio (coma, punto, punto y coma). Hay algunas excepciones, como por ejemplo en las listas bibliogrficas (ver ms abajo). No va espacio entre los parntesis y su contenido.

BIBLIOGRAFIA No existen normas generales, aceptadas por todas las revistas, de cmo armar las listas bibliogrficas. Hay, sin embargo, una serie de coincidencias y pautas generales que siguen la mayora de las publicaciones peridicas cientficas. En el texto Las citas son por autor-ao, por ejemplo, "Martnez (1974)" (el ao entre parntesis); o "En 1974, Martnez...". No se incluyen iniciales de los nombres, a menos que haya dos o ms Martnez diferentes citados en el trabajo, en cuyo caso ser "A. Martnez (1974)" o "B. Martnez (1978)". Dos autores van in extenso: "Martnez y Valle (1974)", pero para ms de dos se cita al primero seguido de "et al." ("al." significa aliae en latn; es una abreviatura, y por ende seguida de punto): "Martnez et al. (1974)". Si hubiera varias citas sucesivas en el texto estas se ordenan cronolgicamente, y alfabticamente dentro del mismo ao. Trabajos del mismo autor, mismo ao se identifican con letras ("Martnez, 1974a"). En el captulo "Bibliografa" El orden es alfabtico por apellidos del primer autor, por apellido del segundo autor en caso de igual primer autor, etc.; y cronolgico para apellidos y nombres idnticos. La forma de citar los trabajos y la utilizacin de bastardillas, negritas, VERSALITAS, etc. vara mucho de una revista a otra. Sin embargo, prcticamente siempre se incluye la siguiente informacin: _ Autor(es),

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_ Iniciales, _ Ao de publicacin, _ Ttulo del trabajo, _ Lugar donde se public (nombre de la revista, o nombre del libro -si es un captulo en una obra colegiada- con su editor y ciudad de la editorial), _ Volumen o tomo (para revistas peridicas; el nmero suele omitirse porque la paginacin es correlativa desde el primero al ltimo nmeros del mismo ao), _ Pginas inicial y final, o nmero de pginas totales para los libros. Algunos ejemplos. Un trabajo en una revista peridica: Haury, L.R., Kenyon, D.E. y Brooks, J.R. 1980. Experimental evaluation of the avoidance reaction in Calanus finmarchcus. J. Plankton Res., 2:187-202. Ntese que no se han dejado espacios entre las iniciales de los autores, ni entre el volumen de la revista y las pginas. El ttulo del trabajo jams se abrevia, y debe transcribirse exactamente como fue publicado. El nombre de la revista se suele abreviar cuando consta de varias palabras ("J. Plankton Res." es "Journal of Plankton Research"), y existen normas ms o menos generales para estas abreviaturas (ver "World List of Scientific Periodicals", "ISO4 International Code for Abbreviation of Titles of Periodicals", "ISO833 International List of Periodical Title Word Abbreviations"). No se abrevian los nombres de las revistas cuando constan de una sola palabra (e.g., Physis, Micropaleontology, Sarsia, Hydrobiologia). Un captulo de un libro: Steedman, H.F. 1976. General and applied data on formaldehyde fixation and preservation of marine zooplankton. En: Zooplankton fixation and preservation (H.F. Steedamn, ed.), UNESCO Press, Paris, pp. 103-154. Un libro: Lewis, W.M., Jr. 1979. Zooplankton community analysis. Springer, New York, 163 pp. Nuevamente, no hay normas universales para la presentacin de listas bibliogrficas. Es importante, sin embargo, que las citas sean consistentes a lo largo de toda la lista.

TABLAS Y FIGURAS Un manuscrito est integrado por el cuerpo principal de texto, las tablas y las figuras. Nada ms. No existen los "cuadros", "lminas", "diagramas", etc. Las tablas son listados de valores numricos o alfanumricos, y las figuras son ilustraciones lineales y/o fotografas. Ambos se numeran correlativamente de acuerdo a su orden de aparicin en el texto, con numeraciones independientes. Prcticamente ninguna revista del mundo acepta un manuscrito, ni siquiera para una evaluacin preliminar, si no va acompaado de figuras preparadas profesionalmente, correctamente rotuladas y entintadas. Mire sus grficos: estn los ejes debidamente rotulados? Estn las unidades indicadas? Normalmente, la figura y su epgrafe deben ser suficientes para entender lo que se ilustra, sin necesidad de recurrir al texto. Tiene epgrafe su figura? Es conciso, claro e informativo el epgrafe?

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Las figuras deben ser sencillas, claras e informativas. No agregue adornos, etiquetas superfluas, datos innecesarios; todo eso distrae la atencin y no contribuye a que el lector entienda lo que se pretende mostrar. Por ejemplo, la tridimensionalidad en los diagramas corrientes de barras no agrega nada a la informacin, ms an - la enmascara; evtelos. En los valores numricos en el texto, las tablas y las figuras limite la cantidad de decimales a lo significativo (y no a lo que da la computadora). En los ndices de correlacin, por ejemplo, no especifique ms de 3 decimales.

VARIOS Bastardillas o itlicas Todos los nombres latinos desde gnero hasta subespecie van en este tipo de letra o subrayados con lnea simple (que, para la imprenta, significa bastardillas). Las palabras en idiomas diferentes al del texto, inclusive el latn, tambin suelen ir en bastardillas. Las abreviaturas de las locuciones latinas ms comnmente utilizadas en trabajos cientficos, sin embargo, frecuentemente no se escriben en bastardillas sino en letra comn (redonda), por ejemplo "etc." (por et cetera); "et al." (por et aliae); "in litt." (por in litteris). Signos especiales Los caracteres especiales (, , _, y otros) se agregarn a mano si la impresora o mquina de escribir no los poseyera. No los reemplace por la palabra correspondiente ("microm", "suma", "delta"). Unidades Existe una convencin internacional para las abreviaturas de las unidades de medida (distancia, peso, volumen): ninguna de estas abreviaturas va seguida de punto (por ejemplo, "m", pero no "m." ni "M"; "m", y no "um" o "uM."). Kilmetros es "km" (no "Km"). Consulte en caso de duda.

MODELO DE PLANILLA QUE ENVIAN LOS EDITORES A LOS ARBITROS PARA LA EVALUACION DE LOS MANUSCRITOS RECIBIDOS Con algunas variantes, este es el modelo bsico de formulario que utilizan la mayora de las revistas cientficas al solicitar evaluacin de los manuscritos que reciben. Sin bien los tems referentes a la originalidad y cantidad de informacin no son relevantes en el caso de los informes del curso, la mayora de los otros puntos s lo son. Critique su propio informe sobre la base de estas preguntas y trate de mejorarlo.
Constituye el trabajo un aporte serio y original al conocimiento del tema? Demuestran los autores buen conocimiento del tema y de la bibliografa pertinente? La calidad y cantidad de informacin presentada justifica su publicacin? Existe repeticin superflua de informacin (en el texto, tablas y figuras)? Es adecuada la organizacin general del trabajo? Puede ser mejorada? Es el ttulo breve y conciso? Refleja adecuadamente el contenido del trabajo? Es el resumen conciso e informativo? Son todas las ilustraciones adecuadas y necesarias? Y las tablas?

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Puede ser mejorado el manuscrito? Cmo? En su opinin, este trabajo: Puede ser publicado sin modificaciones; Puede ser publicado con pequeos cambios; Requiere cambios sustanciales y una nueva evaluacin; Debe ser rechazado.

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Bibliografa general del curso


El curso de Limnologa no sigue un libro de texto determinado. La lista bibliogrfica que se reproduce a continuacin constituye un listado no exhaustivo de libros que tocan algunos de los tpicos que se tratan en las clases tericas y/o prcticas de la materia.

ABEL, P.D., 1996. Water pollution Biology. Taylor & Francis, London, 286 pp. ALLAN, J.D., 1995. Strean ecology. Structure and function of running waters. Chapman & Hall, London, 388 pp. BOLTOVSKOY, D. (ed.), 1981. Atlas del zooplancton del Atlntico Sudoccidental y mtodos de trabajo con el zooplancton marino. Publ. especial INIDEP, Mar del Plata, 936 pp. BRANCO, S.M, 1984. Limnologa Sanitaria, estudio de la polucin de aguas continentales. Monografa Cientfica, 28. Organizacin de los Estados Americanos, Washington, 120 pp. BROOKES, A., y F. D. SHIELDS, Jr (Eds.)., 1996. River channel restoration. Guiding principles for sustainable projects. John Wiley & Sons, 433 pp. CALOW, P. y G.E. PETERS (eds.), 1992. The rivers handbook. Vol. 1. Blackwell, Oxford, 526 pp. CALOW, P. y G.E. PETERS (eds.), 1994. The rivers handbook. Vol. 2. Blackwell, Oxford, 523 pp. CANEVARI, P, D.E. BLANCO, E. BUCHER, G. CASTRO y I. DAVIDSON (Eds.), 1998. Los humedales de la Argentina. Wetlands International. Secretaria de Recursos Naturales y Desarrollo Sustentable. 208 pp. COLE, G.A., 1975. Textbook of Limnology. Mosby, St. Louis, 283 pp. EDMONDSON, W. T. (ed.), 1959. Freshwater Biology. Wiley, New york. EDMONDSON, W. T. y G. G. WINBERG (eds.), 1971. A manual on methods on the assessment of secondary productivity in freshwaters. Blackwell, Oxford, 358 pp. FINLAYSON, M., y M. MOSER (Eds.), 1991. Wetlands. IWRB. Facts on File, Oxford, 224 pp. GASTON, K. J. y J. I. SPICER, 1998. Biodiversity. An introduction. Blackwell Science, 113 pp. GOLTERMAN, H.L., 1975. Physiological Limnology. Elsevier, Amsterdam-Oxford-N. york, 489 pp. GOPAL, B., y R. WETZEL (Eds.), 1995. Limnology in Developing Countries, Vol. 1. Int. Assoc. for Limnology, New Delhi, 230 pp. HASLAM, S. M., 1990. River Pollution: An Ecological Perspective. Belhaven Press, London, 253 pp. HUTCHINSON, G. E., 1957- 1967. A treatise on Limnology. (Vol 1, 2). Wiley, New york. HYNES, H. B. N. , 1970. The ecology of Running Waters. Univ. Toronto Press, Canad, 555 pp. KESKITALO, J. y P. ELORANTA, 1999. Limnology of Humic Waters. Backhuys Publishers, Leiden, 284 pp. LAMOTTE, M. Y F. BOURLIERE, 1983. Problmes d'Ecologie: structure et fonctionnement des cosystmes limniques. Masson, Pars, 254 pp. LOPRETTO, E.C. y G. TELL (eds.), 1995. Ecosistemas de aguas continentales. Metodologas para su estudio. Ediciones Sur, La PLata, (3 tomos), 1401 pp. MALVAREZ, A. I, (Ed.)1999. Tpicos sobre humedales subtropicales y templados de Sudamrica. MAB, UNESCO, 224 pp. MARGALEF, R., 1983. Limnologa. Omega, Barcelona, 1010 pp. MENNI, C.R. 2004. Peces y ambientes en la Argentina continental. Monogr. Mus. Arg. Cs. Nat. B. Rivadavia, 5, 316 pp. MORRIS, I. (ed.), 1980. The Physiological Ecology of Phytoplankton. Studies in Ecology, 7. Blackwell Scientific Publications, 625 pp.

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TRABAJOS PRCTICOS

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Trabajos mas usuales para la tipificacin general de un cuerpo lntico


INTRODUCCION Prcticamente cualquier trabajo limnolgico integrativo debe comenzar por la descripcin del ambiente a estudiar, incluyendo la mayor cantidad de parmetros (tanto biolgicos como no biolgicos) representativos posible. En este sentido, existe una serie de "comunidades" y biotopos que deben ser muestreados y/o descriptos de diferentes maneras, y un conjunto de valores fsicos y qumicos que deben ser estimados y medidos. A continuacin se detallan algunos de estos trabajos en ambientes lnticos (lagos, lagunas, embalses, etc.), as como los mtodos ms usuales para su realizacin.

TRABAJO DE CAMPO Dado que, normalmente, en los cuerpos de agua lnticos existen condiciones de vida y, consecuentemente, asociaciones de organismos diferentes en las zonas litoral y pelagial, es conveniente establecer dos estaciones de muestreo como mnimo: una en la orilla (o varias, si el tipo de costa vara de un lugar a otro), y otra en aguas abiertas. En ambos casos, dependiendo de las finalidades del estudio, las mediciones y muestreos relacionados con el seno del agua, podrn restringirse a un solo nivel (generalmente el superficial), o repetirse a varias profundidades (en este ltimo caso conviene considerar el nivel superficial, la vecindad del fondo, y el nivel equivalente a la profundidad mxima de visibilidad del disco de Secchi multiplicada por 3, que corresponde aproximadamente al lmite inferior de la zona euftica). Los dems muestreos se distribuirn de modo tal que las distancias entre ellos disminuyan hacia la superficie. Estos muestreos y determinaciones a realizar son: 1. Profundidad (con sonda) 2. Turbidez (con disco de Secchi) 3. Temperatura 4. pH 5. Alcalinidad debida a carbonatos y bicarbonatos 6. Fosfatos 7. Silicatos 8. Material oxidable por permanganato 9. Produccin primaria 10. Obtencin de muestras de plancton para anlisis cuali y cuantitativos. 11. Obtencin de muestras de sedimentos para: a) Estudios granulomtricos b) Anlisis del contenido de materia orgnica c) Anlisis de los organismos presentes 12. Herborizacin de por lo menos uno o dos ejemplares completos de cada especie vegetal presente, anotndose en la etiqueta correspondiente a cul de las categoras (sumergida, flotante o palustre) pertenece, y aproximadamente a qu distancia de la costa fueron encontrados. 13. Obtencin de peces 14. Esquematizacin general del ambiente, sealando lugares de muestreo, accidentes,

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vegetacin (ubicacin y tipo), etc. (slo para zona litoral). 15. Obtencin de muestras de perifiton (sobre sustrato vivo o muerto e inanimado) 16. Lavado de la vegetacin sumergida para la obtencin de los organismos asociados a ella. Tambin puede utilizarse embudos de Berlese, los que poseen unos 30 cm de altura y un enrejado de malla abierta cerca del extremo menor para impedir el descenso de la vegetacin; se llenan con el material de donde se desea aislar la fauna y se dispone una fuente luminosa por encima creando as un gradiente de luz y de humedad que obliga a los organismos mviles a descender, cayendo finalmente en un frasco ubicado debajo del embudo, donde son recogidos para su estudio. 17. Obtencin de muestras para trabajos bacteriolgicos. 18. Estudio del gradiente y biomasa de la vegetacin litoral palustre a lo largo de una transecta ubicada entre la orilla y el espejo de agua.

TRABAJO DE LABORATORIO I) Procesamiento y determinacin de parmetros generales sobre las muestras tomadas para las determinaciones 5), 6), 8), 9) 11a), 11b) y 17). II) Identificacin de taxones en las muestras tomadas para 10), 11c), 12, 13), 15) y 16). III) Recuentos de las muestras tomadas para 10), 11c), 15) y 16). IV) Clculo de la biomasa de la vegetacin palustre (tem 18).

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Morfometra
Gran parte de esta seccin fue reproducida de: DANGAUS, N.V., 1976. Descripcin sistemtica de los parmetros morfomtricos considerados en las lagunas pampsicas. Limnobios, 1(2):35-49.

INTRODUCCION En limnologa, es el estudio y descripcin de los rasgos morfolgicos de los ambientes acuticos, tanto lenticos como lticos (lagos, lagunas, ros). Para el estudio de un cuerpo de agua son importantes sus medidas, y para compararlo con otros cuerpos las dimensiones deben ser expresadas en forma cuantitativa mediante el uso de parmetros morfomtricos. Estos se obtienen a partir de material cartogrfico o de levantamientos topogrficos, planialtimtricos y batimtricos especiales. La informacin se complementa con fotografas areas. Para calcular los parmetros morfomtricos se consideran las caractersticas ms notorias: longitud y ancho mximos, ancho medio, permetro o longitud de lnea de costa, volumen retenido y la profundidad mxima y media. La relacin de magnitudes de estos parmetros determina muchas caractersticas de los cuerpos de agua. Por ejemplo, cuanto mayor es la profundidad media de una laguna, menor ser la proporcin de su volumen que puede albergar poblaciones fitoplanctnicas fotosintticamente activas (volumen productivo), y menor su extensin colonizable por hidrfitas. Por otro lado, una baja profundidad media condiciona la cercana de las zonas productiva (euftica) y desintegradora (fondo), facilitando el acceso de nutrientes a las capas donde son asimilados. El intercambio gaseoso y la circulacin general del agua son ms activos en lagunas con escasa profundidad media. Los lagos proporcionalmente ms profundos son menos influenciados por los fenmenos de evaporacin, de tal manera que, en lneas generales, sus condiciones de vida son ms estables. De esta manera, muchas de los condicionantes de la bioproductividad estn directamente relacionados con la estructura de los cuerpos de agua interiores.

LONGITUD MXIMA TOTAL Es la longitud de la lnea que conecta los dos puntos ms extremos de un cuerpo de agua. Debe representar lo ms fielmente la longitud de las aguas abiertas y no deber cruzar ninguna porcin de terreno, a menos que sta sea una isla. Esta lnea es recta en la mayora de los casos, debido a la forma regular, ms o menos ovoide de la mayora de las lagunas. A veces es curva, tal como en las lagunas en forma de S U. Algunos cuerpos tienen forma tal que es difcil seleccionar una posicin para determinar la longitud mxima, por ejemplo, en laguna El Potrerillo y de Las Chilcas de Gral. Conesa. En otros casos, tales como en los de lagunas en forma de estrella o dendrtica, no es posible determinar un solo eje de longitud mxima, p.e. en el Complejo lagunar El Rosario de Gral. Madariaga. En todos los casos se deber indicar la direccin del eje de medicin y expresarlo segn la Rosa de los Vientos. En el caso de cursos de agua, se mide la longitud directamente en el terreno o sobre planos de escala adecuada. Si el trabajo se realiza sobre un mapa, lo ms conveniente es aplicar alguno de los mtodos de medicin de la longitud de las lneas de costa.

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LONGITUD MXIMA EFECTIVA Es la longitud de la lnea recta que conecta los puntos ms remotos de un cuerpo de agua, a lo largo de la cual la accin del viento y de las olas se produce sin interferencias de ningn tipo. Los parmetros, longitud mxima total (LMT) y mxima efectiva (LME) coinciden en el caso de cuerpos limnticos de forma regular, con la salvedad de que no tengan islas situadas de tal modo que efectivamente interrumpan la accin del oleaje; si esto sucede, la cubeta queda virtualmente dividida en dos o ms partes. En cuerpos de agua de contorno muy irregular, se dan las mximas diferencias entre ambos trminos, sobre todo si stos tienen islas. Por ejemplo, la laguna de Gmez de Junn se caracteriza por su forma irregular, semejando una horqueta invertida y, tiene una LMT de 22000 m, en el sentido SO-NE-SE, mientras que su LME es de solo 11870 m, en direccin NO-SE. Otros ejemplos: Laguna La Tablilla (Chascoms): LMT: 15000 m, LME: 7.230 m; Laguna Alsina (Guamin): LMT=22100 m, LME=10250 m.

ANCHO MXIMO (AM) Es la longitud de la lnea transversal que conecta los puntos ms extremos del cuerpo de agua y que no cruza otros terrenos adems de islas. Se puede decir que es la medida de la lnea recta tomada aproximadamente perpendicular al eje de longitud mxima.

ANCHO MXIMO EFECTIVO (AME) Es la longitud de la lnea transversal a la LME que conecta los puntos ms extremos del cuerpo de agua, a lo largo de la cual la accin del viento y el oleaje se realiza sin ninguna clase de impedimentos de terrenos.

ANCHO MEDIO (AMD) Es la medida que se obtiene al dividir la superficie del cuerpo de agua por la longitud mxima total. Se puede establecer tambin en base al promedio de las medidas del ancho de los diferentes sectores, tomados en forma equidistante y perpendicularmente a la lnea de mxima longitud.

PERMETRO O LONGITUD DE LNEA DE COSTA (P) A veces este parmetro morfomtrico se puede determinar directamente por las mediciones de campo; sin embargo, la mayora de las veces se mide sobre un mapa de escala adecuada, segn los siguientes mtodos: el del curvmetro, el del hilo y el del comps. MTODO DEL CURVMETRO Cuando se trabaja sobre mapas, la forma ms directa de medicin es mediante el curvmetro o cartmetro. Este instrumento est construdo de tal manera que permite medir la longitud de lneas irregulares (distancias) por medio de una rueda trazadora cuyas revoluciones son transmitidas a una manecilla que porta sobre una escala graduada, semejante a la esfera de un reloj. Las graduaciones de la esfera representan unidades de longitud recorridas por la rueda trazadora Procedimiento: 1) Se sita la aguja ndice en cero y se marca con un lpiz un origen para las mediciones. 2) Se coloca cuidadosamente el eje de la rueda trazadora sobre el origen elegido y se desplaza a lo largo de la lnea de costa en forma tal que la aguja se mueva contnuamente en sentido directo, manteniendo el aparato verticalmente en toda la operacin. 3) Si la distancia a recorrer en el plano es grande, es importante anotar las veces que la

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aguja pasa por el cero, o sea las vueltas completas que se realizan. 4) Para obtener la longitud buscada, se lee directamente en la escala o mltiplo de escala correspondiente. Si la escala o sus nmeros no estn marcados en la escala del curvmetro, tal como en el caso de las escalas exticas, que frecuentemente se producen en los planos realizados en base a fotografas areas (por ejemplo, escala 1:36800, 1:21400, etc.), entonces se lee directamente la escala de 1:100 000, que es la equivalente a la escala natural, es decir, cada unidad de ella equivale a 1 cm y se resuelve por regla de tres simple; i.e., escala de plano: 1:21400, lectura en la escala de 1:100.000 del curvmetro: 97; longitud hallada: 20758 m. Si la escala extica fuera numrica, se deber medir con el curvmetro una unidad dada del mapa y obtendremos el nmero de divisiones correspondientes para esa unidad en escala de 1:100 000, y luego dividir la longitud de la lnea de costa hallada leyendo la escala de 1:100 000 por el nmero de divisiones de la unidad a escala, siendo el cociente la longitud de esa lnea, expresada en km. Ejemplo: 1 km en el mapa=6,5 divisiones del curvmetro; lectura del curvmetro para la lnea de costa: 147 div.; permetro hallado: 147/6.5=22.615 Km. Los resultados de las operaciones dependern principalmente del cuidado puesto en la manipulacin del instrumento, por ello es recomendable la ejercitacin previa con l. Asimismo, para tener resultados comparables entre s es necesario recorrer al menor tres veces el permetro de la figura a medir. MTODO DEL HILO Si no se dispone de un curvmetro y si el mapa usado no es demasiado pequeo, se pueden obtener bastante buenos resultados mediante el uso de un hilo, que se sita sobre el contorno de la figura a medir. Posteriormente, la longitud del hilo es convertida en unidades de longitud de costa, pasando a la escala del mapa. Procedimiento: Se requiere un mapa de tamao conveniente, alfileres largos, un hilo no deformable y una tabla de madera blanda o similar. 1) Se sitan los alfileres sobre el contorno, e forma de empalizada. El nmero de alfileres depender de lo irregular de la lnea de la costa. A lo largo de las porciones convexas de la lnea de la costa, se sitan los alfileres en el borde externo; a lo largo de las cncavas, se sitan en el interno de la lnea. Se ponen suficientes alfileres como para que el dibujo del hilo represente fielmente el contorno de la figura. 2) Se marca a lpiz un punto de origen. Se le hace un nudo al hilo y se lo pasa por un alfiler, que se clava en el origen. Se va colocando el hilo externamente a las hileras de alfileres situados en forma cncava y por adentro en las hileras convexas, siguiendo as hasta llegar al origen, donde se marcar sobre el hilo una seal. 3) Se retira el hilo y se mide su longitud entre ambas marcas. Se mide la longitud de una unidad de escala del mapa y de divide la longitud del hilo por la unidad de escala, siendo el cociente el dato buscado, expresado en la unidad elegida. Se realizan tres intentos para comparar los resultados. MTODO DEL COMPS Bajo ciertas condiciones, tales como la regularidad de la costa, la longitud de la lnea de costa puede ser medida mediante pequeos intervalos iguales, obtenidos con un comps de puntas secas. El nmero total de dichos intervalos a escala nos dar directamente la longitud deseada.

CLCULO DE REAS Solamente en ocasiones especiales se puede medir la superficie de los cuerpos de agua en

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forma directa en el campo o mediante el clculo directo con frmulas. Se debe a que stos no presentan, por lo general, formas geomtricas regulares, motivo por el cual se utilizan distintos mtodos de clculo sobre planos exactamente dibujados, y en lo posible de escala grande. En este trabajo se describirn seis mtodos distintos para calcular reas sobre planos, a saber: grfico, del planmetro, de la ordenada promedio, de las ordenadas, segn la regla de Simpson, del pesaje y del papel cuadriculado. De todos estos mtodos, el del planmetro y el de Simpson son los que dan mejores resultados. Con el planmetro se obtienen soluciones casi instantneas, y si el mismo es manejado por una mano experta, se logra gran precisin en las medidas. Con las ordenadas de Simpson se logran muy buenos resultados cuando se utiliza un gran nmero de divisiones para el intervalo a medir MTODO GRFICO Se trata de determinar la superficie de una figura tal como un lago, laguna, etc., a partir de una hoja de plancheta u otro plano cualquiera dibujado a escala. Para ello se toman la medidas necesarias grficamente y se descompone la superficie a medir en diversas figuras geomtricas regulares, tales como tringulos, rectngulos, trapecios, crculos, etc., obtenindose las medidas correspondientes a las diagonales y alturas, con ayuda de escuadras, escalas y comps. Procedimiento: 1) Dentro del permetro del plano, se dibuja la mxima figura geomtrica que puede contener y se calcula su rea. 2) Se dividen las porciones restantes no incluidas en tringulos y pequeos rectngulos y se computan estas reas. Se contina as hasta cubrir todo el mapa. 3) Se suman las reas de todas las figuras. Si el clculo no se realiz a escala, hay que transformar las unidades del plano en unidades del campo. Se divide el rea total por el rea unidad, donde el cociente ser el rea buscada, expresada en trminos de la unidad de escala. Ejemplo: La suma de las reas parciales del mapa es 1000 cm2; si el plano esta realizado en escala 1:5000, tenemos: 1 cm2 = 5000 cm x 5000 cm = 25 000 000 cm2 = 2500 m2 1000 cm2 = 25 000 000.000 cm2 = 2 500 000 m2 = 2.5 km2 = 250 Ha Es importante destacar que el mtodo es solamente aplicable en cuerpos de agua de contorno muy regular o en planos de escalas muy grandes, que contengan figuras de superficies muy amplias. Las frmulas a aplicar en funcin de los elementos conocidos en cada caso, son las siguientes: Area cuadrado = lado x lado Area rectngulo = base x altura Area tringulo = base x altura / 2 A = [p(p-a)(p-b)(p-c)] donde p es la mitad del permetro del tringulo (frmula de Hern) p = (a+b+c) Area trapecio de lados paralelos = (a+b) h MTODO DEL PLANMETRO El planmetro es un instrumento basado en un mtodo de integracin grfica, que permite determinar la superficie de una figura dibujada a escala con el solo recurso de recorrer su contorno con un ndice unido al aparato. El uso de este instrumento es el medio ms rpido

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para la obtencin de reas. Adems, si es cuidadosamente operado por una mano experta, es el mtodo ms exacto para la determinacin de superficies, no solo en los estudios limnolgicos, sino tambin en otros campos de la tcnica. Existen diversos tipos de planmetros, tales como el polar, el radial y el lineal. De ellos el ms usado, debido a fcil manejo y a su bajo costo es el planmetro polar, de ah que nos ocuparemos de describir exclusivamente ese modelo. Entre los planmetros polares, uno de los ms cmodos es el de compensacin o planmetro polar de Amsler, dado que permite recorrer la figura con polo a la izquierda y con polo a la derecha, con lo que se eliminan los errores experimentales. El planmetro polar de Amsler esta compuesto por las siguientes partes (ver figura): un polo (P), que se fija en algn punto del plano, alrededor del cual puede girar un brazo o palanca, llamado brazo polar (a); por medio de una articulacin (A) el brazo se une a otro llamado brazo trazador (b), que consiste en una varilla que lleva la punta o punzn ndice (I), con la que se puede recorrer el permetro de la superficie a medir. El brazo trazador traspone la articulacin, prolongndose en su extremo (c), donde se sita una roldana (R) que rueda sobre el papel y que gira alrededor de un eje paralelo a dicho brazo.

Para contar el nmero de vueltas de la roldana, lleva sta un limbo contador con engranaje a tornillo sin fin, que indica las vueltas en la relacin de 10:1 y un tambor dividido en 100 partes iguales, provisto de un nonius, que permite apreciar las milsimas partes de vuelta. Si la figura a medir es de poca extensin, se sita el polo fuera de la figura. Si la superficie a medir es de mucha extensin y no puede ser recorrida de una vez con el polo afuera, es conveniente dividirla en otras ms pequeas. Pero si se trata de medir superficies an ms grandes, o no se desea realizar subdivisiones en el plano, se gana tiempo colocando en polo dentro de la figura.

MEDICIN DE REAS CON POLO EXTERIOR El rea A de la figura a medir es directamente proporcional al nmero de vueltas de la roldana, o sea que: A = C.n; donde C es la constante del planmetro y es igual al rea correspondiente a una vuelta de la roldana. Tambin se puede expresar como el producto de la longitud del brazo trazador por la circunferencia del limbo contador. La forma prctica de hallar la constante instrumental es la siguiente: se recorre el permetro de una figura de rea concida. Conviene hacer varias pruebas y tomar la media. Si el brazo trazador es regulable, se ajusta de modo que se tenga una relacin conveniente entre superficie y vueltas del tambor. Ejemplo: se ajusta la longitud del brazo trazador de un planmetro polar de Amsler, tipo 612, de modo tal que la roldana da 0,1 vuelta al recorrer el permetro de un rectngulo de 2 x 5 cm (la especificacin del ajuste del brazo, suele venir en la caja del planmetro). A=Cn 10 cm2 = C 0,1 luego C = A / n = 100 cm2 Muchos planmetros disponen de un accesorio que permite comprobarlo con gran rapidez. Consiste en una lmina metlica que lleva en su extremo una aguja y en el otro un

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alojamiento cnico para el punzn. Se clava la aguja sobre el papel y con el punzn inserto en el alojamiento cnico, se recorre la circunferencia cuyo centro es la aguja y cuyo radio es la distancia entre sta y el punzn. El rea de la circunferencia que se describe con este accesorio est grabada en l. MEDICIN DE REAS CON POLO INTERIOR Cuando el brazo trazador esta en tal posicin respecto al brazo polar que el plano del borde circular de la roldana pasa por el polo, se puede recorrer con el punzn ndice una circunferencia completa, sin que la roldana gire. A este crculo se le llama "crculo fundamental". Es sencillo demostrar que cuando se recorre el permetro de la figura con el polo dentro de la misma, el rea dada por el planmetro A = C.n' es igual a la diferencia entre el rea A de la figura y el rea Z del crculo fundamental. El planmetro esta construido de tal modo que, recorriendo el permetro de la figura en el sentido de las agujas del reloj, con polo interno, la rotacin de la roldana ser siempre hacia adelante si el rea de la figura es mayor que la del crculo fundamental; luego la lectura final ser mayor que la inicial y n' ser positivo. Si el rea de la figura es menor que la del crculo fundamental, la rotacin de la roldana ser hacia atrs y por lo tanto la lectura final ser menor que la inicial y el nmero n' ser negativo. De aqu se deduce que el rea de la figura ser: A = C n' + Z teniendo en cuenta el signo de n'. Ejemplo: Con el polo interior se recorre el permetro de una figura en sentido directo y con una longitud tal del brazo trazador que la constante instrumental es 100, y el rea del crculo fundamental es 1673,8 cm (especificado en la caja). La lectura inicial es 1.2 y la final 7.455, girando siempre la rueda hacia adelante. Luego n' = 7.455 - 1.200 = +6.255 y segn la frmula ser: A = (100 6.255) + 1673.8 = 2299.3 cm2. Ejemplo: Supongamos el planmetro en las mismas condiciones que el anterior y con iguales lecturas, pero el limbo contador ha girado hacia atrs y el cero ha pasado dos veces por el ndice: n' = 7.455 - (20 + 1.2) = -13.745 y segn la frmula es: A = (100 -13.745) + 1673.8 = 299.3 cm2 El rea del crculo fundamental se puede determinar aproximadamente tomando medidas en el instrumento y calculando segn la siguiente frmula: Z = (a2 + b2 + 2ac) siendo los trminos a, b, c los correspondientes a la figura. La forma ms precisa de operar es recorriendo el permetro de la figura una vez con el polo afuera y otra con l adentro. La primera operacin nos da el rea de la figura (A=C.n), y la segunda un rea (C.n') que representa la diferencia entre el rea de la figura y la del crculo fundamental: A = C n y A = C n' + Z luego C n = C n' + Z

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Z = C n - C n'; o Z = C (n - n') donde n' ser positivo si el rea de la figura es mayor que la del crculo fundamental y segn sea el sentido en que gire el tambor, n' ser negativo si el rea de la figura es menor que la del crculo fundamental. Procedimiento: 1) Para medir el rea de una figura, se extiende el plano sobre un tablero horizontal y se lo mantiene inmvil. 2) Se fija el polo de tal manera que el punzn ndice pueda recorrer todo el permetro de la figura. Adems, es conveniente realizar un recorrido previo a las lecturas, para cerciorarse que la roldana en su desplazamiento no se saldr del panel o que presente cualquier otro impedimento para desplazarse libremente; si ello sucediese, lo ms conveniente es cambiar la posicin del polo. 3) Se sita el punzn en un origen arbitrario, previamente marcado sobre el permetro de la figura y se toma una lectura inicial (Li). 4) Luego se recorre todo el permetro hasta volver al punto de partida y se toma la lectura final (Lf). La diferencia entre ambas lecturas nos da el nmero de vueltas (n) dadas por la roldana, o sea: n = Lf - Li; n ser positivo si la rueda gira en sentido de agujas de reloj, y negativo si gira al revs. Se anota el nmero de veces que el cero pasa por el ndice del limbo contador. Si el permetro se recorre en sentido opuesto, tambin la roldana girar en sentido contrario al anterior. El recorrido de la figura conviene realizarlo siempre en la misma direccin, es decir en sentido directo. 5) Se halla la constante instrumental C y el rea del crculo fundamental Z, segn los mtodos descriptos. 6) Se aplica la frmula requerida para cada caso. Con polo externo A = C.n. Con polo interno A = Cn' + Z. 7) Se repiten tres veces las operaciones, para tener resultados comparables entre s. Es preferible realizar los tres recorridos continuos sobre el permetro de la figura y dividir la lectura total del instrumento por el nmero de circunvalaciones. 8) Si el tamao del plano lo requiere, este puede ser medido en partes de divisin arbitraria. Se repiten sobre cada trozo las operaciones ya descriptas y luego se suman. 9) Para pasar la escala del mapa, hay que convertir la constante instrumental C. Para ello se toma una unidad a escala, e.g.: 2 x 5 cm (en escala de 1:5000 sera 100 m x 250 m = 25 000 m2 y C sera igual a 250 000). Se determina cuidadosamente este rectngulo y se comprueba el nmero de unidades del planmetro que representa una unidad del rea del cuerpo de agua medido. Ms sencillo an es la conversin por regla de tres simple. Para el ejemplo anterior: 1 cm2 del plano = 5000 cm 5000 cm = = 25 000 000 cm2 en el terreno o 1 cm2 = 50 m 50 m = 2500 m2 X cm2 = ? MTODO DE LA ORDENADA PROMEDIO Este mtodo es slo una aproximacin basada en el criterio de que independientemente de la forma del cuerpo de agua, puede ser asimilada una figura geomtrica que responda a la sencilla frmula de base por altura. Es decir, consideramos un eje longitudinal (si lo posee, sera el de mxima longitud), y tal como en la medicin del ancho medio, el promedio de las medidas tomadas en forma equidistante y perpendicularmente al eje longitudinal. Procedimiento: 1) Por debajo o sobre la figura cuya superficie se quiere medir, se traza una lnea que corresponde al eje longitudinal y a medir en sentido horizontal. Luego se traza la vertical perpendicular al eje longitudinal, tangente al extremo izquierdo de la figura; en el otro

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extremo se traza otra tangente paralela a la anterior y se divide el eje longitudinal en un nmero cualquiera de partes iguales. 2) Las divisiones del eje longitudinal a su vez se bisectan y en cada biseccin se levanta una ordenada. 3) Se mide la longitud de cada ordenada dentro del permetro de la figura y luego se suman; se divide por el nmero de ordenadas, excluyendo los extremos, y se determina la longitud promedio de las mismas; se multiplica por la longitud del eje horizontal, siendo el resultado el rea aproximada de la figura. 4) Se transforma el rea de la figura, expresada en la unidad adoptada en el clculo, a la escala del mapa. MTODO DE LAS ORDENADAS, SEGUN LA REGLA DE SIMPSON Este mtodo puede ser empleado cualquiera sea la superficie de la figura. Sobre reas mayores se logran mejores resultados; si la superficie a medir es muy extensa, se divide el plano en varias parcelas, lo cual allana las dificultades de la tarea. La regla de Simpson consiste en el clculo bastante aproximado de una integral definida a partir de la ecuacin de una parbola de eje vertical (y = ax + bx + c), que se integra entre x=0 y x=2h y resulta:

Para aplicar la regla de Simpson se necesita expresar el rea en funcin de las ordenadas extremas y0 e y1 , y la ordenada media ym, tal que x = h, luego es: para y0, h = 0, por tanto y0 = c para ym, h = x, por tanto y = ah2 + bh + c para y1, h = 2h, por tanto y1 = 4ah2 + 2bh + c en consecuencia: y0 + 4ym + y1 = 8ah2 + 6bh + 6c, y reemplazando en la frmula anterior: A = h/3 (y0 + 4Ym + Y1)

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Se divide ahora el intervalo de integracin en un nmero par de partes iguales de longitud h, que intersectan la curva en los puntos P0, P1, P2....Pn. El arco P0P1P2 es un arco de parbola de eje vertical y el rea bajo ella vale h/3(y + 4y1 + y2). Igualmente se aproximan los otros arcos a los dems pares de intervalos, quedando: A = h/3(y0+4y1+2y2+4y3+2y4+ ... +4yn-1+yn) Si llamamos E a la sumatoria de los extremos y0 e yn, entonces: E = y0 + yn

y a los trminos pares: P = y2 + y4 + ....... + yn-2 y a los impares: I = y1 + y3 + ....... + yn-1 entonces:

La frmula de Simpson es tanto ms exacta cuanto mayor es el nmero de partes en que se divide el intervalo x0-xn, siendo siempre n un nmero par. Procedimiento: 1) Se traza un eje o abscisa (x0-x10) y se hace coincidir con el eje mayor del cuerpo de agua o sector a calcular. No es necesario que se site por debajo de la figura. En el origen de las coordenadas se levanta la ordenada tangente a la figura (y0). En el otro extremo de la misma se levanta otra ordenada tangente y paralela a la anterior (yn=y10).

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2) Se divide el eje horizontal en un nmero par de intervalos de longitud (h) y a partir de los puntos de las divisiones se levantan ordenadas que cubren toda el rea del plano. El eje vertical tangente al extremo izquierdo se denomina y0, los siguientes y1, y2, ... yn, siendo yn en el caso de la figura igual a y10. 3) Luego se mide la longitud de todas las ordenadas dentro de la periferia de la figura, tales como AB, CD, etc., y se sustituyen en la frmula, o sea: A = h/3 (E + 4I + 2P) Si la cantidad de medidas tomadas en el plano es grande, es conveniente tabular los resultados. 4) Se convierten las unidades usadas en la medicin del plano (por ejemplo, cm) a la escala del mapa, sin olvidar que la relacin que guardan ambas es cuadrtica (o sea que 1 cm2 del plano a escala 1:2000 representara 2000 cm x 2000 cm2 = 4 000 000 cm2 o 400 m2 en el terreno). MTODO DEL PESAJE: Se basa el siguiente mtodo en el hecho de que si recortamos el modelo en papel de un plano y lo pesamos en una balanza analtica, obtendremos el rea de la figura dividiendo por el peso de una unidad dada. Procedimiento: 1) Se obtiene una copia del plano en papel transparente, acetato u otro material de espesor y peso uniformes. 2) Se recorta el modelo cuidando de limpiar y recortar todas las irregularidades dejadas por el corte. Luego se lo pesa. 3) En forma similar se corta un pedazo de papel equivalente a una unidad areal a escala (por ejemplo, 1 km o 1 ha) y se lo pesa. 4) Se divide el peso del modelo por el peso de la unidad, siendo el cociente la superficie, expresada en las unidades del rea unidad. MTODO DE PAPEL CUADRICULADO Cuando se superpone el contorno de un cuerpo de agua sobre papel cuadriculado, su superficie puede ser determinada dividiendo el nmero total de cuadrculas incluidas por el

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nmero de cuadrculas semejantes contenidas en un rea unidad tomada a escala del mapa. Procedimiento: 1) Se transfiere (con pantgrafo, papel carbnico, etc.) el contorno de la figura al papel cuadriculado. 2) Se cuentan todas las cuadrculas que se encuentran completamente dentro del permetro de la figura. Luego se cuentan como enteras aquellas cuadrculas alrededor de la periferia de la figura cuyas reas estn mitad o ms dentro del permetro, pero se omiten aqullas que no alcanzan a tener la mitad dentro del contorno; luego se juntan ambos resultados. 3) Se dibuja sobre la cuadrcula una figura geomtrica que represente una unidad del rea a escala, expresada en la forma ms conveniente. Si la figura dada es un crculo, se cuentan los cuadros que caen dentro de l, tal como se indic en el prrafo anterior, expresando el total en funcin del rea del crculo. Si la figura es un cuadrado, se cuentan los cuadrados enteros y se estiman todos los cuadros incompletos. 4) Se divide el total de las cuadrculas del mapa por el total de las cuadrculas de la figura, expresadas en la unidad a escala, donde el cociente representa el rea buscada por la unidad dada.

CALCULO DE VOLUMEN El volumen que ocupa una masa de agua puede ser determinado computando el volumen de cada estrato horizontal de agua tal como aparece limitado por las diversas curvas de nivel sumergidas (isobatas), obtenidas sobre el mapa batimtrico y haciendo la suma de todos los volmenes de dichos estratos. Se pueden utilizar diversas frmulas para calcular el volumen de dichos estratos, sin embargo la experiencia seala que se llega esencialmente con la mayora de ellas a los mismos resultados. En este trabajo se recomienda el uso de la frmula de Penck, es decir la frmula del cono truncado aplicada a la limnologa: V = h/3 [S1 + S2 + (S1S2)] donde V es el volumen y h representa el espesor vertical de cada estrato de agua, dado por la diferencia entre dos isobatas contiguas; S1 es el rea de la cara superior del estrato y S2 el rea de la cara inferior del estrato de agua.

Procedimiento:

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1) Se determina el rea total que ocupa la masa de agua (S1). 2) Se calculan por el mtodo ms conveniente (planmetro, Simpson, etc.) las reas circunscriptas por cada una de las curvas de nivel sumergidas (isobatas). A continuacin se determina S2, restando de S1 la superficie del anillo delimitado entre la isobata 0 y la contigua. Otra forma de determinar S2 es calculando directamente el rea total que delimita la isobata considerada. 3) Se calcula el volumen del primer estrato de agua, limitado por el plano de la superficie = espejo de agua = isobata 0 = S1 y el plano determinado por la segunda isobata (S2); se aplica la frmula de Penck. 4) Se computan de igual manera los volmenes de los dems estratos de agua, teniendo en cuenta que la superficie de la cara inferior del primer estrato (S2) pasa a ser la superficie de la cara superior del segundo estrato (S1 del segundo estrato) y as sucesivamente hasta llegar a la ltima isobata. Como esta ltima siempre queda impar, no se le puede aplicar la frmula, por tanto su volumen deber calcularse como promedio entre la profundidad dada por la ltima curva y el punto de mxima profundidad contenido en la isobata. Por ejemplo, tomemos la isobata de -2.20 m de una laguna cualquiera. El punto de mxima profundidad es - 2.26 m y el promedio de -2.23 m. El volumen ser 0.03 m x superficie contenida en la isobata - 2.20 m. Luego se suman los volmenes parciales, obtenindose al volumen total del cuerpo de agua.

NOTA: Es importante que la isobata 0 del levantamiento batimtrico quede referida a algn punto fijo, tal como una escala hidromtrica y/o un punto trigonomtrico, con lo cual rpidamente se lograr conocer el cambio de altura y volumen experimentado en el seno de esa masa de agua.

CALCULO DEL VOLUMEN MEDIANTE EL USO DEL PROGRAMA SURFER Algunos programas de computadora permiten calcular las reas y volmenes de cuerpos digitalizados. Uno de stos es el llamado Surfer, principalmente utilizado para el trazado de isolneas y diagramas de superficie. En este trabajo prctico se utilizar el mdulo de este programa orientado al clculo de superficies y volmenes. Para esto se proceder de la siguiente manera: Se obtiene una imagen digital del mapa batimtrico de la laguna cuyo volumen se debe calcular scaneando la imagen con las isobatas. Una vez scaneada, la imagen se recorta digitalmente de manera que sus cuatro lados coincidan exactamente con el contorno ms saliente correspondiente. Supongamos que la imagen obtenida es BURRO.JPG. En el programa activar FILE / NEW / PLOT DOCUMENT - aceptar

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Luego MAP / BASE MAP / definir BURRO.JPG aceptar. Sobre el mapa de El Burro accionar el botn derecho del mouse: PROPERTIES Definir los lmites mximo y mnimo de las coordenadas a usar. En este ejemplo el ancho de la laguna es de 2120 metros, y su altura es 1545 metros.

Manipular la imagen hasta aumentarla lo ms que sea posible sin que deje de entrar ntegramente en la pantalla (seleccionando VIEW / ZOOM / SELECTED) Con la imagen seleccionada, accionar MAP / DIGITIZE Con la cruz del cursor ir marcando el contorno de la isobata 0; cada accionar del mouse (botn izq.) agrega un par de datos (x, y) en la ventana que se abre y registra los puntos marcados. Una vez que se complet la isobata 0 entrar en la ventana de la planilla y agregar un rengln vaco luego del ltimo par de coordenadas. Continuar con la siguiente isobata (por ejemplo, la de 1.5 m), y as sucesivamente hasta completar todas las isobatas disponibles.

Activar la ventana con los datos registrados (cliqueando dentro de ella). En el men de esta ventana activar FILE / SAVE AS / Data Files (*.dat) / BURRO.DAT En el men principal del programa abrir la planilla con los datos generados:

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FILE / OPEN / BURRO.DAT En la tercera columna (columna C) a cada grupo de datos agregarle la profundidad correspondiente (por ejemplo, 0 al primer grupo, -1.5 al segundo, -2 al tercero, etc.) Volver a grabar los datos en el mismo archivo: FILE / SAVE En el men principal activar GRID / DATA / open BURRO.DAT En la solapa GENERAL definir el GRIDDING METHOD como KRIGING, en la solapa SEARCH marcar la opcin NO SEARCH (USE ALL OF THE DATA) Aceptar (OK) El programa genera una gilla de datos cuyo nombre por defecto ser BURRO.GRD La ventana del DATA FILTER REPORT que aparece al terminar los cmputos se cierra sin grabar Para calcular el volumen y el rea se activa la opcin GRID / VOLUME / BURRO.GRD En las opciones UPPER SURFACE seleccionar Constant Z = 0, y en LOWER SURFACE la opcin GRID FILE El resultado es una pantalla de datos donde se define el volumen estimado
CUT & FILL VOLUMES Positive Volume [Cut]:

y el rea
AREAS Positive Planar Area (Upper above Lower):

Este archivo puede ser almacenado en formato TXT o RTF. Para generar mediante el programa una nueva imagen batimtrica de la laguna con eleccin de la cantidad y espaciamiento entre isobatas, cdigos de colores para profundidades, etc. en el men principal activar MAP / CONTOUR MAP / NEW CONTOUR MAP / BURRO.GRD aceptar Elegir colores y dems opciones en las dos solapas que aparecen OPTIONS y LEVELS

PROFUNDIDAD MAXIMA Es la mxima profundidad conocida y referida a un punto fijo patrn, tal como la cota del espejo de agua, o la altura del agua sobre una escala hidromtrica dada.

PROFUNDIDAD MEDIA (PM) Expresada como el volumen de la masa de agua, dividido por la superficie total de la misma.

RELACION PROFUNDIDAD MAXIMA-PROFUNDIDAD MEDIA Se expresa dividiendo la profundidad media por la profundidad mxima; este valor indica groseramente la aproximacin de la cubeta a la forma cnica.

DESARROLLO DE LINEA DE COSTA Es una medida de la regularidad del contorno de la laguna, es decir, su mayor o menor semejanza al crculo. En lneas generales, a igualdad de las dems condiciones, a mayor desarrollo de lnea de costa, mayor productividad biolgica manifiestan los cuerpos de agua.

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Este parmetro define: 1. El grado de contacto con tierra firme (importante desde el punto de vista de la diversificacin habitacional). 2. La magnitud del terreno colonizable con hidrfitas arraigadas, sumergidas o no. 3. La diversificacin de los ambientes bnticos. 4. La existencia de reas con estrecho contacto entre las capas productora y desintegradora. Por otro lado, las costas altamente irregulares favorecen el intercambio trmico agua-tierra, incrementan las posibilidades de aporte de material exgeno a la laguna y brindan mayores posibilidades de existencia de ambientes protegidos del viento y oleaje.

Desarrollo de lnea de costa: I = Valor alto; II = Valor mediano; III = Valor muy bajo. La frmula que se utiliza para calcular este parmetro es: DLC = P / [2(S)] donde P es el permetro o longitud de la lnea de costa y S el rea del cuerpo de agua.

SONDAJE DE PROFUNDIDADES Normalmente se efecta con sondas manuales (un cabo graduado con un peso o sondaleza en el extremo), o ecoicas (ver seccin "Peces" en el captulo "Comunidades dulceacucolas"). En lagunas de escasa profundidad tambin puede utilizarse una vara graduada en cm, mtodo que se utilizar en los trabajos de campaa programados. La operacin se repetir en unos 20 a 30 lugares; tanto en el centro como costeros. Los datos correspondientes se utilizarn para calcular la profundidad media de la laguna y su volumen total de agua.

CLCULO DEL ERROR El error en las estimaciones realizadas puede ser calculado de acuerdo a la siguiente frmula: Error (%) = [(valor observado valor esperado) / valor esperado] * 100

BIBLIOGRAFIA
DAVIS, R. y F. FOOTE. 1967. Tratado de topografa. Aguilar, Madrid. JORDAN, W. 1961. Tratado general de topografa. Gustavo Gili, Barcelona.

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Determinacin de pigmentos fotosintticos


La evaluacin de la concentracin de clorofila en un volumen determinado de agua puede utilizarse como indicador de la biomasa algal en el mismo. La clorofila es soluble en solventes orgnicos tales como ter, acetona, metanol, cloroformo y piridina. Suelen utilizarse acetona o metanol para su extraccin, ya que rompen los puentes entre el pigmento y las protenas y solubilizan las clorofilas. La determinacin puede hacerse por colorimetra, espectrofotometra, fluorimetra, estimacin de magnesio, etc. Se realizar la determinacin espectrofotomtrica de las clorofilas a, b y total. Esta determinacin depende de la ley de Lambert-Beer. Se miden las absorbancias (o densidades pticas) a diferentes longitudes de onda. Deben conocerse los coeficientes de absorcin especfica de los pigmentos puros a cada longitud de onda. Coeficiente de absorcin especfica = D / (d C) siendo: D = densidad ptica; d = longitud en cm del recorrido de la luz en la celda; C = concentracin de pigmentos (g/l).

MARCHA DE EXTRACCION La extraccin de la clorofila debe realizarse en oscuridad y a baja temperatura para reducir al mnimo la fotooxidacin. Se procede de la siguiente manera: 1. Se filtra un volumen conocido de muestra a travs de un filtro de fibra de vidrio (Whatman GF/C o similar). 2. Se colocan los filtros en sobrecitos de papel de aluminio y se conservan en freezer a -20C para facilitar la ruptura de las paredes celulares y la liberacin del pigmento (en el TP se dejarn en el freezer hasta la prxima clase). 3. Se colocan los filtros cortados en pedazos en pequeos frascos forrados con papel de aluminio y se agregan 8 ml del solvente de extraccin. Se recomienda el uso de metanol o etanol para fitoplancton de agua dulce; en el TP se utilizar etanol caliente (60-70C). 4. Se deja en reposo en oscuridad durante 2 horas como mnimo para favorecer la extraccin de pigmentos. 5. Se procede a leer en el espectrofotmetro la absorbancia a 750 y 665 nm. 6. En la misma cubeta se agrega 1 gota de HCl 1N y luego de 1 minuto se vuelve a leer la absorbancia a ambas longitudes de onda.

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COMPROBACION DE LA EFECTIVIDAD DE LA EXTRACCION Puede verificarse la eficacia de la marcha de extraccin observando al microscopio una submuestra del precipitado descartado en el punto 8 y contando la proporcin de clulas que permanecen intactas luego del tratamiento.

CALCULO DE LA CONCENTRACION DE CLOROFILA En realidad, cuando se obtiene un registro de absorbancias a diferentes longitudes de onda se est determinando una sumatoria de todos los pigmentos que absorben a esas longitudes de onda. Para la separacin fsica de los distintos tipos de pigmentos sera necesario recurrir a una cromatografa. De los distintos tipos de clorofila, la clorofila a se encuentra en todas las algas, ya que es esencial para la fotosntesis; la b est presente en Chlorophyta y Euglenophyta; la c se encuentra en Bacillariophyta, Cryptophyta, Dinoflagellata y Phaeophyta; la d solamente est presente en las Rhodophyta. Por ello, para la determinacin de la concentracin de clorofila a por el mtodo dicromtico se usan las siguientes frmulas especficas para cada solvente (Marker et al., 1980) [Clorofila a sin feopigmentos] = F . [(Absa665 - Absa 750) - (Absb 665 - Absb 750)] . k . v donde: Clorofila a sin feopigmentos se expresa en g por litro; Absa = Absorbancia antes de acifificar; Absb = Absorbancia despus de acifificar; F = 2.43 para el etanol y 2.72 para el metanol; k = coeficiente de absorcin especfica , que es de 11.2 para el etanol y 11.62 para el metanol; V = volumen del extracto en ml/ litros de agua filtrada. Existen otros coeficientes tambin usados comnmente, siendo uno de los ms conocidos el de SCOR-UNESCO (1966) (Cabrera Silva, 1984). [Clorofila a] = (16.5 Abs665 - 8.3 Abs750) . Vol. extr./ Vol. muestra

CORRECCIONES En las ecuaciones propuestas por Marker et al. (1980) se contempla la correccin de las lecturas por turbidez. Cuando la absorbancia a 750 nm es superior a 0.002, es importante realizar la siguiente correccin: C = F (A750 - 0.002) siendo C: correccin a restarse de las lecturas de absorbancia; F: factor que depende de las distintas longitudes de onda, de acuerdo con el siguiente cuadro:

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Longitud de onda (nm) 430 480 570 630, 645, 665

F 3 2 1.5 1

Puede sobreestimarse la cantidad de clorofila a presente en la muestra debido a que los productos de degradacin de la misma absorben la luz en el mismo sector espectral que ella. La descomposicin de los pigmentos libera sustancias amarillas de fuerte absorcin en las longitudes de onda parecidas a las de la clorofila a. Por ejemplo, la clorofilida a tiene el mismo espectro de absorcin que la clorofila a.

ESTIMACION DE LA PRODUCCION PRIMARIA A PARTIR DE LA CONCENTRACION DE CLOROFILA Se filtran X ml de agua madre y se recogen en un recipiente Y ml. Del filtrado se toma una alcuota de A ml y se la procesa de acuerdo con los pasos ya mencionados, obtenindose un volumen final de B ml del solvente de extraccin con clorofila. Se determina la concentracin de clorofila en mg/l por medio de las frmulas correspondientes. As, puede conocerse la cantidad de clorofila a presente en el volumen B, y mediante clculos de proporcionalidad puede calcularse la concentracin en mg/l en el volumen X original. Generalmente suele expresarse ese valor en mg/m3. Los valores normales de clorofila a para distintos ambientes se indican en la tabla siguiente: AMBIENTE lagos oligotrficos: lagos mesotrficos lagos eutrficos hielos polares ocano abierto Clorof. a, en mg/m3 0.01 - 3 2-25 10-500 10-150 1-15

Para transformar la cantidad de clorofila por m3 en cantidad de biomasa (mg C / m3) se usa la siguiente expresin: mg C = F . mg clorofila a donde F es un factor de conversin hallado empricamente y cuyo valor oscila entre 10 y 100. En poblaciones jvenes, que se hallan en crecimiento activo, normalmente se encuentra entre 30 y 50. Para transformar los valores de clorofila a en valores de produccin, expresados en mg C / h para condiciones de luminosidad ptima, se usa el coeficiente QMAX : Produccin (mg C / h) = QMAX . mg clorofila a QMAX vara de 1 a 10, tomndose generalmente valores de 3 a 4. Cultivos puros en condiciones ptimas pueden dar hasta 10; en cambio, poblaciones marinas mixtas en incubadora dan valores de 1 2, mientras que en algunos lagos oligotrficos es 2 3. Es alto en aguas tropicales y bajo en aguas polares.

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A veces suele usarse la siguiente ecuacin: N de asimilacin=(mg C/h) / mg clorofila a Si la luminosidad no es la ptima para la fotosntesis, el QMAX deber corregirse mediante un factor que introduzca la relacin existente entre la intensidad real de luz en el punto considerado (I) y la intensidad de saturacin (Is), ambas en cal./cm3minuto: Produccin = (I/Is) QMAX mg clorofila a Esta correccin se efecta para determinaciones a profundidad. Se calcula sobre la base del valor de irradiacin en superficie y del ndice de extincin (transparencia) del agua.

DESARROLLO DEL TRABAJO PRACTICO En un cuerpo de agua conocido, se tomarn muestras de agua de distintas profundidades utilizando una bomba de succin. En cada nivel se extraer 1 litro de agua. Las muestras se rotularn y transportarn al laboratorio en fro y en oscuridad para su anlisis. All se determinar la concentracin de Clorofila a para las distintas profundidades de acuerdo a la marcha de extraccin indicada ms arriba. El fitoplancton puede clasificarse de acuerdo a su tamao en las distintas fracciones: microplancton o plancton de red: > 20 m nanoplancton: 2 - 20 m picoplancton: < 2 m A fin de analizar la contribucin de la fraccin nanoplanctnica a la concentracin de Clorofila a del fitoplancton (Rai, 1982), se realizar adems un filtrado de un volumen de 15 a 30 l por barrido superficial con red de 15 m de poro. La muestra obtenida se procesar de la misma forma que las anteriores.

BIBLIOGRAFIA
CABRERA SILVA, S. 1984. Estimacin de la concentracin de clorofila a y feopigmentos. Una revisin metodolgica. En: Bahamonde, N.y S. Cabrera, eds. Embalses, fotosntesis y productividad primaria. Programa sobre el hombre y la bisfera, UNESCO. Universidad de Chile, 236 pp. GOLTERMAN, H.L., 1975. Physiological limnology. Elsevier, Amsterdam- Oxford-New York. GOODWIN, T.W., 1965. Chemistry and biochemistry of plant pigments. Acad. Press, London-New York. LORENZEN, C.J., 1967. Determination of chlorophyll and pheopigments by spectrophotometric equations. Limnol. Oceanog., 12:343-346. RAI, H., 1982. Primary production of various size fractions of natural phytoplankton communities in a North German lake. Arch. Hydrobiol. 95: 395-412. REPORT OF SCOR-UNESCO WORKING GROUP 17, 1966. Determination of photosynthetic pigments in seawater. Monographs on Oceanographic Methodology, 1. UNESCO, Paris. STRICKLAND, J.D.H. y T.R. PARSONS, 1968. A practical handbook of seawater analysis. Bull. Fish. Res. Bd. Canada 167. VERNON, L. y G. SEELY, 1966. The chlorophylls. Ac. Press, New York- London.

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Produccin primaria fitoplanctnica en un estanque eutrfico urbano


Para evaluar la produccin primaria de la comunidad fitoplanctnica se puede recurrir a la medicin del oxgeno liberado o del CO2 consumido en el proceso de fotosntesis. En el segundo caso se utiliza el radioistopo 14C , midindose la cantidad incorporada mediante tcnicas de centelleo lquido. Para evaluar la cantidad de O2 liberada por en la fotosntesis por el fitoplancton se puede recurrir al mtodo de las botellas claras y oscuras que se describe en la seccin de determinaciones qumicas de esta gua de trabajos prcticos.

Perfil tpico de produccin primaria y respiracin en un cuerpo de agua

Objetivos del trabajo prctico 1. Familiarizacin con el manejo de la tcnica de medicin de la produccin primaria fitoplanctnica por medio del mtodo de las botellas claras y oscuras. 2. Estimacin de la produccin primaria fitoplanctnica de un cuerpo de agua eutrfico urbano. 3. Estudio de la variacin de la produccin primaria en el perfil de la columna de agua y anlisis de los factores que intervienen en esta distribucin vertical. 4. Anlisis de la relacin entre la concentracin de clorofila a y la produccin primaria a distintos niveles de profundidad. 5. Estudio de la variacin en la intensidad de luz con la profundidad.

Desarrollo de trabajo El trabajo prctico se llevar a cabo en un estanque eutrfico de la ciudad de Buenos Aires (lagos de Palermo). Se establecer una estacin de muestreo en la zona ms profunda del

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lago (aprox. 2 m). En este punto se fijarn cuatro niveles de profundidad desde la superficie hasta el fondo, establecindose una de ellas en la profundidad de compensacin (aproximadamente Secchi x 2.6), que es la profundidad en la cual la fotosntesis y la respiracin se igualan (Produccin neta = 0). Cabe aclarar que la fotosntesis se circumscribe a la zona denominada euftica, que es la zona hasta donde llega el 1% de la luz incidente en superficie y este punto coincide aproximadamente con el punto de compensacin. Con una bomba de succin se recolectarn muestras de agua de cada una de las profundidades para efectuar determinaciones de clorofila a (ver trabajo prctico Determinacin de pigmentos fotosintticos). Estas muestras se conservarn en fro y en oscuridad para su inmediata filtracin en el laboratorio, y se continuar con la marcha de extraccin de pigmentos tal como se detalla en el captulo ad hoc. Paralelamente se dispondrn dos juegos (rplicas) de botellas claras y oscuras a cada una de las profundidades para evaluar la produccin primaria del fitoplancton en cada uno de estos niveles. La concentracin de oxgeno disuelto inicial de cada profundidad se determinar con una tercera botella testigo, fijndose el oxgeno por el mtodo de Winkler. Los detalles del mtodo de produccin primaria se encuentran descriptos en la seccin de determinaciones qumicas de esta gua. Se incubarn las botellas durante 5 horas. Al cabo de este tiempo se fijar inmediatamente el oxgeno de cada botella de acuerdo al mtodo del Winkler. La concentracin de oxgeno de todas las botellas (testigos, claras y oscuras) se determinar en el laboratorio por medio de la titulacin con tiosulfato de sodio. Adems, se medir la intensidad de luz incidente a intervalos de tiempo regulares (cada media hora) durante el perodo de incubacin con un fotmetro. La interpretacin de los resultados debe tomar en cuenta lo siguiente: Botella testigo: oxgeno inicial; Botella clara: oxgeno inicial + oxgeno liberado por los productores primarios en la fotosntesis - oxgeno respirado por toda la comunidad (productores, consumidores y bacterias); Botella oscura: oxgeno inicial - oxgeno respirado por la toda la comunidad. Teniendo en cuenta que la produccin bruta es la cantidad de hidratos de carbono que sintetizan los productores primarios en el proceso de fotosntesis a travs de la asimilacin del CO2, y asumiendo que las prdidas son slo debidas al proceso de respiracin: Produccin Bruta (PB): Botella clara - Botella oscura = (O2i + O2f - O2r - [O2i - O2r]) Produccin Neta (PN): Botella clara - Botella testigo = (O2i + O2f -O2r - [O2i]) Respiracin (R): Botella testigo - Botella oscura = (O2i - [ O2i - O2r]) Conociendo el tiempo de incubacin (5 horas), se expresan las unidades de PB, PN y R en mg O2 m-3 h-1 . Por otro lado, teniendo la concentracin de clorofila a para cada nivel de profundidad se pueden calcular las tasas de fotosntesis bruta y neta de la siguiente manera: tasa fotosntesis bruta: PB (clorofila a)-1 h-1 tasa fotosntesis neta: PN (clorofila a)-1 h-1 Nota: A fin de que las unidades sean comparables, la PB y PN se expresan en g O2/l, y la concentracin de clorofila en g/l.

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Variacin de la intensidad de luz en la columna de agua A partir de las mediciones de luz incidente en superficie cada media hora, se calcular la intensidad de luz promedio para el perodo de la incubacin. Una de las unidades de intensidad de luz ms usada es el E (=micro Einstein) m-2 seg-1. Se calcularn las intensidades de luz para cada una de las profundidades. Para ello se recurrir a la ecuacin de atenuacin exponencial de la luz con la profundidad (ver figura con valores tpicos de referencia): Iz = Io e -EZ donde: Iz: Intensidad de luz a una determinada profundidad Io: Intensidad de luz incidente Z: profundidad E: coeficiente de extincin Asumiendo que a la profundidad a la que deja de verse el disco de Secchi llega aproximadamente el 20 % de la luz incidente en superficie (Golterman, 1975), se calcular el coeficiente de extincin: E = 1/z (ln Io - lnIz) A partir de este clculo y asumiendo un coeficiente de extincin constante, se calcular la intensidad de luz para cada profundidad. Se confeccionar el grfico correspondiente.

Bibliografa
Dokulil, M. , 1984. Metodologa de medicin de fotosntesis en fitoplancton. En: Embalses, Fotosntesis y Productividad Primaria. Programa sobre el hombre y la bisfera, UNESCO, Universidad de Chile:73-84. Dokulil, M. , 1984. La influencia de la luz en la fotosntesis. En: Embalses, Fotosntesis y Productividad Primaria. Programa sobre el hombre y la bisfera, UNESCO, Universidad de Chile: 111-121. Golterman, H.L., 1975. Physiological Limnology. An approach to physiology of lake ecosystems. Developments in Water Science, Elsevier, Sci. Publ. Co.,489 pp. Lopretto, E. y G. Tell (Eds.), 1995. Ecosistemas de aguas continentales. Metodologas para su estudio. Ediciones Sur, La Plata, Tomo I , 377 pp. Strickland, J. D.H. y T.R. Parsons, 1960. A manual of sea water analysis. Bull. Fish. Res. Board Canada, 125, 185 pp.

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Limnologa regional
Clasificacin de ambientes lnticos mediante la utilizacin de la tcnica de anlisis de cluster
Los objetivos de este trabajo prctico son: Introducir a los alumnos en el manejo de las tcnicas de agrupamiento, en particular el anlisis de cluster, y una de sus aplicaciones en ecologa: la clasificacin de ambientes sobre la base de sus semejanzas. Inferir la influencia de factores ambientales (climticos, geolgicos y morfomtricos) sobre las propiedades fsico-qumicas de los ecosistermas acuticos y sobre la estructura de sus comunidades. Analizar cmo influye el ndice aplicado como medida de similitud sobre el agrupamiento obtenido.

Introduccin Cuando se estudian ambientes naturales a escala regional a menudo pueden distinguirse diferencias entre zonas o regiones. Una regin es cualquier unidad espacial determinada en base a la existencia de caractersticas o patrones comunes entre los puntos que se encuentran en el interior de los lmites establecidos para identificarla. Generalmente no existe una sola regionalizacin nica y objetiva, sino que pueden proponerse regionalizaciones diferentes dependiendo de las caractersticas que se utilicen para clasificar a los ambientes, del peso relativo que se otorgue a las variables utilizadas, as como de las tcnicas de agrupamiento aplicadas. De esta manera, regionalizar es anlogo a clasificar ambientes. Esta clasificacin tiene utilidad en el manejo de ecosistemas dado que la subdivisin de un rea mayor en unidades ms pequeas con atributos ms o menos uniformes contribuye a la implementacin de programas adecuados de evaluacin de recursos y planificacin de uso. En el caso de los ambientes acuticos, las caractersticas o atributos a considerar pueden ser las propiedades fsico-qumicas y la estructura de las comunidades que viven en ellos. Muchos de stos dependen, a su vez, de factores ambientales como clima, suelo circundante, sedimentos de la cubeta y morfometra, adems de los efectos antrpicos, cuando los hubiera. La clasificacin de un conjunto de elementos sobre la base de un nico atributo no presenta mayores problemas; en realidad, lo nico que se requiere es ordenar esos elementos de mayor a menor (o viceversa). Por ejemplo, si se quisiera clasificar una serie de lagos de acuerdo a su tamao exclusivamente, simplemente se los ordenara en funcin de rea (o volumen) creciente en una serie lineal.

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Representacin grfica del ordenamiento de 15 lagos en funcin de su superficie.

Representacin grfica del ordenamiento de 15 lagos en funcin de su superficie y su temperatura anual media.

Si adems del volumen se necesitara incorporar algn otro atributo, como por ejemplo la temperatura anual media de las aguas superficiales, el problema ya se vuelve algo ms complejo porque es muy probable que el orden de una serie de valores (por ejemplo, el rea) no coincida con el orden de la otra serie (en este caso, la temperatura). Sin embargo, utilizando dos ejes, en vez de uno solo, las semejanzas entre los objetos comparados an pueden ponerse en evidencia y ser interpretadas con cierta facilidad. Si adems del rea y la temperatura pretendieran usarse otros atributos de los lagos en cuestin para evaluar cuan similares o distintos son (e.g., la produccin primaria media, la profundidad mxima, la cantidad de perodos de mezcla en el ao, etc.), el problema se complica mucho ms porque el sistema se vuelve irrepresentable grficamente. En estos casos debe recurrirse a alguna tcnica especial de ordenamiento que aplica manipulaciones numricas especiales cuya finalidad es sintetizar las relaciones de similitud entre esos lagos contemplando todos los atributos utilizados. Estas tcnicas se denominan multivariadas, en referencia a la multiplicidad de factores que se contemplan para producir la clasificacin. Existe una gran variedad de anlisis multivariados que permiten abordar el problema de la clasificacin de una serie de elementos sobre la base de varios atributos o caractersticas. El propsito ltimo de todos ellos es sintetizar las relaciones de similitud entre esos elementos de manera tal que el operador pueda definir grupos o conjuntos de elementos que se

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parecen ms entre s que a los otros grupos. En realidad, el problema de la similitud entre elementos caracterizados por varios atributos puede verse como un conjunto de puntos en el espacio, siendo las distancias entre esos puntos (en este caso cada punto representara un lago) proporcionales a las diferencias entre los atributos considerados. Por ejemplo, considerando el atributo rea solamente, se vi que los puntos (i.e., lagos) pueden disponerse a lo largo de un nico eje de variacin de manera tal que los ms pequeos estn sobre el extremo izquierdo, los ms grandes sobre el derecho, y las distancias entre los puntos son proporcionales a las diferencias de tamao entre los lagos considerados (sistema univariado). Si adems del rea se incorpora en el anlisis la temperatura, debe recurrirse a un segundo eje (por ejemplo, un eje vertical), de manera tal que la posicin de cada punto en este sistema de coordenadas es definida por dos valores: rea y temperatura (sistema bivariado). Con cierto esfuerzo podra llegar a representarse un tercer eje, pero aqu se agota la posibilidad se lograr una representacin grfica inteligible, y tambin la posibilidad de intepretar las relaciones de similitud sin recurrir a manipulaciones especiales. De aqu surge que cada nuevo atributo agrega un nuevo eje de variacin al sistema de puntos en el espacio, de manera tal que la representacin grfica de una serie de lagos caracterizados cada uno de ellos por 10 atributos es un sistema de puntos en un espacio de 10 dimensiones, donde cada dimensin corresponde a un atributo (=una fuente de variacin). Es claro que semejante sistema no es representable de manera sencilla, y aunque lo fuera la representacin no ofrece una interpretacin fcil de cules lagos son ms semejantes entre s. Los anlisis multivariados, por lo tanto, permiten reducir la cantidad de fuentes de variacin, y en algunos casos las relaciones de semejanza entre cada par de lagos posible, que en la realidad son tantas como variables se consideren, se reducen a un solo valor que sintetiza las similitudes sobre la base de todos los parmetros utilizados. Entre los mtodos de anlisis y agrupamiento multivariados ms usuales estn el Anlisis de Componentes Principales (Principal Component Analysis o PCA), el Anlisis Factorial (Factor Analysis), el Anlisis de Cluster, y algunos otros. El PCA (o anlisis factorial, muy semejante al primero) es un mtodo poderoso y, con respecto al anlisis de cluster, cuenta con dos importantes ventajas. En primer lugar, para los ordenamientos obtenidos se puede estimar la significancia estadstica; en otras palabras, permite evaluar cuan significativa es la similitud o disimilitud entre los objetos que se comparan. En segundo lugar, una vez obtenido el agrupamiento, ofrece la posibilidad de evaluar en qu medida influenci cada uno de los atributos utilizados la clasificacin resultante. Esto puede verse claramente con un ejemplo hipottico. Si los 10 lagos bajo anlisis tuvieran idntica rea pero diferentes temperaturas, el atributo rea tendra un peso nulo sobre el agrupamiento, mientras que la temperatura pesara en un 100%. En lneas generales, pesan ms los atributos que ms varan entre la serie de objetos comparados, y viceversa. El PCA, sin embargo, es un mtodo algo ms trabajoso que el anlisis de cluster, y sus resultados suelen ser ms difciles de interpretar sin un conocimiento adecuado de la metodologa involucrada. El anlisis de cluster, en cambio, es de clculo relativamente ms sencillo, y sobre todo su interpretacin es mucho ms simple y obvia, an para el principiante. Se sacrifica, sin embargo, la informacin acerca de qu factores pesan sobre el agrupamiento obtenido, as como la posibilidad de evaluar la significancia estadstica de los grupos generados. En rigor de verdad, ambos aspectos pueden ser evaluados a posteriori, mediante varias tcnicas diferentes, incluyendo el anlisis nodal y tests de aleatoriedad diversos (Boesch, 1977; Strauss, 1982).

Trabajo Prctico Para este trabajo se utilizar la tcnica del anlisis de cluster. Mediante este mtodo se pueden observar las relaciones de similitud entre un conjunto dado de elementos (unidades

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operacionales) cuya clasificacin se requiere. El mtodo incluye dos etapas principales: (1) clculo de la similitud (o disimilitud) entre cada par posible de unidades operacionales, que se realiza mediante alguno de los innumerables ndices propuestos (ver Lombardo, 1995). (2) Agrupamiento de las unidaes operacionales mediante alguna de las varias tcnicas descriptas (ver Romesburg, 1984). En este trabajo prctico se utilizar una tcnica de tipo exclusivo, jerrquico, aglomerativo y secuencial.

Metodologa La ctedra suministrar un listado de 15 lagos incgnita con sus principales caractersticas fsicas, qumicas y biolgicas. Estos datos fueron seleccionados de la bibliografa disponible. Los ambientes se ubican en distintas regiones de la Repblica Argentina.
Variable Lago 3 Clorofila (mg/m ) 3 Fsforo total (mg/m ) Mixis Prof. media (m) Temp. media amb. (C) Prof. Secchi (m) pH Alcalinidad (m) Salmnidos Aternidos Siluriformes Abund. fitopl. (miles de ind./l) Macrofitas Floraciones algales Origen A
0.41 3.8 Mono 157.0 5.0 12.5 6.5 0.22 Si Si No 182 No No Glaci al

B
0.23 2.5 Mon o 104. 0 5.0 11.5 6.5 0.35 Si No No 39 No No Glaci al

C
0.5 1.0 Mon o 101. 1 5.0 14.0 6.5 0.38 Si No No 27 No No Glaci al

D
0.23 2.5 Mon o 111. 4 5.0 7.0 6.5 0.30 Si Si No 1 No No Glaci al

E
4.95 34.5 Poli 20.0 10.9 1.2 8.5 3.57 Si Si No 99.2 2 No Si Tect nico

F
4.62 68.0 Poli 2.1 8.0 2.8 8.7 1.79 Si No No 5.05 Si No Elic o

G
1.76 15.3 Mon o 24.9 8.0 5.0 7.8 1.11 Si Si No 6.52 No No Tect nico

H
20.2 774.0 Poli 2.0 10.9 0.8 8.9 9.42 No Si No 30 No Soi Elico

Variable Lago 3 Clorofila (mg/m ) 3 Fsforo total (mg/m ) Mixis Prof. media (m) Temp. media amb. (C) Prof. Secchi (m) pH Alcalinidad (m) Salmnidos Aternidos Siluriformes Abund. fitopl. (miles de ind./l) Macrofitas Floraciones algales Origen

I
40.6 245 Poli 1.4 16 0.3 8.3 5.25 No Si Si 30 000 Si Si Elicofluvial

J
66.2 285 Poli 1.2 16 0.25 8.9 7.21 No Si Si 30 000 Si Si Elicofluvial

K
57.3 230 Poli 1.5 16.5 0.15 8.7 5.05 No Si Si 20 000 Si Si Elicofluvial

L
2.03 23 Poli 1.1 16 2.1 9.5 6.07 No Si Si 1000 Si No Elicofluvial

M
10 360 Poli 1.0 21 0.35 6.8 9.39 No No Si 9235 Si Si Fluvial

N
0.4 270 Poli 9.0 21 0.5 6.7 9.0 No No Si 1500 Si No Disoluc in

O
15 70 Poli 1.1 21 1.0 8.3 8.0 No No Si 2000 Si No Fluvi al

Anlisis de cluster El anlisis de cluster se realizar siguiendo dos procedimientos distintos: a) Con los datos cuantitativos originales y codificando aquellas variables categricas o binarias (como el origen de los lagos, la presencia o no de floraciones algales, etc.). En este caso se emplear el coeficiente de correlacin como medida de similitud entre lagos y se trabajar con la matriz estandarizada. b) Transformando los valores contnuos de la matriz bsica de datos originales en valores binarios (presencia = 1, ausencia = 0), para lo cual se debern definir los rangos correspondientes.

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A fin de familiarizarse con la tcnica de anlisis de cluster, a continuacin se detalla un ejemplo simple en el que se trabaja con variables de doble estado usando el ndice de Jaccard como coeficiente de asociacin. PASO 1: Confeccin de la matriz bsica de datos PASO 2: Confeccin de la matriz de semejanza PASO 3: Ejecucin del mtodo de agrupamiento PASO 1: La tcnica comienza con la confeccin de la Matriz Bsica de Datos (M.B.D.)

A 1 2 3

Las columnas corresponden a los objetos cuyas similitudes entre s vamos a determinar (lagos, lagunas), mientras que las filas son los atributos, caractersticas o propiedades de los objetos (pH, temperatura media, etc.). PASO 2: Se utilizar un coeficiente de semejanza que medir el parecido total (grado de similitud) entre cada par posible de objetos. Los coeficientes pueden ser de distancia, correlacin o asociacin. Por las caractersticas de los atributos a considerar y de la forma en que fueron codificados, se utilizar el ndice de asociacin de Jaccard que mide las coincidencias y diferencias en los estados de cada carcter entre cada par de objetos a agrupar. J=a/a+b+c Donde J es el ndice de Jaccard, a es la cantidad de veces que un atributo dado es positivo en ambas unidades operacionales u objetos (por ejemplo, ambos lagos SI poseen salmnidos), b es la cantidad de veces que un atributo es positivo en el segundo objeto comparado y negativo en el primero, y c la cantidad de veces que es negativo en el segundo y positivo en el primero.

lago B

+ -

lago A + a c

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Esquema de los pasos a seguir para calcular un dendrograma mediante el mtodo del ligamiento promedio no ponderado.

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PASO 3: A partir de la matriz de similitud entre todos los pares de objetos, se producir un dendrograma o rbol (resultado final de la tcnica), que representa en un grfico de dos dimensiones (en realidad, una sola de stas identifica la semejanza entre los objetos) la ubicacin relativa de los objetos utilizados. El mtodo de agrupamiento involucra tcnicas que, siguiendo diferentes reglas, forman grupos de elementos que se asocian por su grado de similitud. En nuestro estudio se utilizar la llamada par de grupos, que es una combinacin de las siguientes: exclusivas: originan grupos donde los elementos o unidades operativas son exclusivos del grupo del cual forman parte y no pueden pertenecer a otro grupo que se halle en un mismo rango o nivel. jerrquicas: originan conjuntos que presentan rangos, en los cuales los elementos o grupos subsidiarios forman parte de un grupo mayor o inclusivo. aglomerativas: son las que partiendo de n elementos separados, los agrupan en sucesivos conjuntos (siempre en nmero menor que n) para llegar finalmente a un slo conjunto que contiene a las n unidades. secuenciales: cada grupo es formado uno por vez hasta que se agota el conjunto total de elementos a clasificar.

Ejemplo: 1. Se examina la M.B.D. y se busca el mximo valor de similitud existente en ella, (obviamente descartando la diagonal principal). Si existen varios mximos valores de similitud, se construyen varios ncleos. 2. Se busca el prximo valor. En este paso puede ocurrir lo siguiente: a) formacin de nuevos ncleos b) incorporacin de un elemento a un ncleo ya existente para formar un grupo c) fusin de ncleos existentes. 3. Se repite el paso 2 hasta que se hayan incorporado todos los objetos. El paso 1 es comn a todos, el 2 se lo puede realizar de varias maneras, con distintos tipos de ligamiento. Utilizaremos el llamado ligamiento promedio ponderado: la similitud entre el elemento (o grupo) a incorporarse y la del grupo o elemento al que se incorpora es el promedio resultante de sus respectivos ndices de similitud. Luego de un primer ejercicio breve que se completar manualmente con el fin de familiarizrse con los procedimientos explicados, se utilizar la matriz de datos includa en este captulo para efectuar los agrupamientos mediante el uso del programa de computacin NTSYS. Interpretacin de los resultados A partir de los agrupamientos obtenidos, se efectuarn consideraciones acerca de porqu se agruparon los lagos de tal o cual manera, as como anlisis del significado limnolgico de los grupos generados. Estas discusiones permitirn ensayar hiptesis acerca de qu zonas del pas son las que albergan cada uno de los lagos utilizados. Se tratarn de explicar las relaciones entre los factores fsico-qumicos y biolgicos de los cuerpos de agua y las variables climticas, geogrficas y morfomtricas involucradas. En la discusin se tendr en cuenta tambin la influencia de ambos mtodos empleados en el resultado final del trabajo. Bibliografia
ARVOLA, L., 1986. Spring phytoplankton of 54 small lakes in southern Finland. Hydrobiologa, 137:125-134. BOESCH, D.F., 1977. Application of numerical classifications in ecological investigations of water pollution.

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Virginia Inst. of Marine Science, Special Scientific Report 77, 114 pp. CRISCI, J.V. y M.F. LOPEZ ARMENGOL, 1983. Introduccin a la teora y prctica de la taxonoma numrica. Secret. Gral. Org. Est. Amer. (OEA), Progr. Reg. Des. Cientf. Tecnol., Monogr. 26, 132 pp. EARLE, J.C., H.C. DUTHIE y D.A. SCRUTON, 1987.Factors influencing the distribution of phytoplankton in 97 headwater lakes in insular Newfoundland. Can. J. Fish. Aquat. Sci., 44 (3): 639-649. ELORANTA, P., 1986. Phytoplankton structure in different lake types in central Finland. Holartic ecology, 9:214224. LOMBARDO, R., 1995. Indices de asociacin y similitud. En: Ecosistemas de aguas continentales, metodologas para su estudio, I, Ediciones Sur, La Plata, pp. 365-376. MARGALEF, R. y M. MIR, 1979. Phytoplankton of Spanish reservoirs as dependent from environmental factors and potential indicator of water properties. Collana del programma finalizzato Promozione della qualit dell' ambiente, Pallanza, 1979, 191-205. ROMESBURG, H., 1984. Cluster analysis for researchers. Lifetime Pub., London, Singapore, Sydney, Tokyo, Toronto, Mxico City, 334 pp. STRAUSS, R.E., 1982. Statistical significance of species clusters in association analysis. Ecology, 6:634-639.

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Calor y temperatura en cuerpos lnticos


OBJETO DE LA PRACTICA Reproducir en el laboratorio la estratificacin trmica estival (directa) e invernal (inversa) de un lago dimctico. En lo posible, se analizarn los diferentes factores, tales como irradiacin solar, vientos, fugas de calor, etc., que pueden contribuir en el establecimiento de dicha estratificacin. Adems, se calcularn las cantidades de calor en cada caso, para estimar cunto calor puede ceder o captar un cuerpo de agua.

MATERIALES NECESARIOS 1) Recipientes o peceras de vidrio que estn aislados trmicamente por una cubierta de telgopor. Para la estratificacin inversa basta con uno de 20 x 15 x 35 cm; para la estratificacin directa debe usarse uno ms profundo, aproximadamente de 30 x 30 x 50 cm. La cubierta externa de material aislante puede ser de 1-2 cm de espesor. 2) Una lmpara de rayos infrarrojos de 150 250 W, o, en su defecto, varias lmparas incandescentes. Cuanto mayor sea el aporte de calor, ms rpidamente se obtendrn los resultados. 3) Un termmetro 0-50C. 4) Una fuente de viento. Lo ms adecuado es un tubo de goma unido a una caera por la que circule aire a presin, ya que permite regular la intensidad y la direccin del chorro de aire. 5) Hielo molido.

INSTRUCCIONES PARA EL ARMADO DE LOS MODELOS Y PROCEDIMIENTO A SEGUIR

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Los recipientes a utilizar se llenan con agua limpia hasta aproximadamente 5 cm del borde superior. Para la estratificacin inversa, se agrega hielo en la superficie hasta formar una capa continua de unos 7 cm de espesor. Se toman los valores de temperatura cada hora,

Distribucin de la temperatura en funcin del tiempo, en un acuario con viento moderado, constante, y una fuente de calor (lmparas infrarrojas) sobre la superficie. Las lneas contnuas corresponden a las fases iniciales de calentamiento, y las cortadas al perodo posterior, 40 min luego de apagar las lmparas (Segn Vallentyne, 1967).

preferentemente a intervalos de 1 cm de profundidad. Para la estratificacin directa, se enfra el agua hasta obtener una temperatura homognea inferior a los 4C en todo el recipiente. Se coloca la lmpara de rayos infrarrojos a 10 cm de la superficie del agua, y se dirige el chorro de aire hacia el centro geomtrico del recipiente. Resulta conveniente acoplar un tubo corto (10 cm) de vidrio al extremo libre del tubo de goma conectado a la salida de aire, de modo de poder controlar ms eficazmente la direccin del mismo. Se orienta el chorro de aire en un ngulo de 45 con respecto a la horizontal. La intensidad puede variarse; es conveniente comenzar con una intensidad baja, que ser suficiente para producir la homogeneizacin de la capa superficial. Se efectan mediciones a intervalos de 1 cm de profundidad a cada hora, pudiendo observarse al cabo de un tiempo el establecimiento de la termoclina y la formacin del epilimnion por accin combinada de la irradiacin calrica y del viento. Posteriormente, y conforme el agua vaya alcanzando mayores temperaturas en virtud del constante aporte de calor, puede observarse el desplazamiento hacia la derecha del epilimnion en el grfico de temperatura versus profundidad, as como una disminucin de la pendiente de la termoclina. Una vez que se ha establecido la termoclina, agregando un colorante como la tinta china puede visualizarse directamente la estratificacin debida a las diferencias de densidad del agua a diferentes temperaturas. El colorante se ubicar preferentemente dentro de la capa de salto trmico, donde desciende muy lentamente hasta un nivel determinado, que coincide bastante bien con aquel en el cual empieza el hipolimnion. Por ello, este ltimo se presenta libre de colorante. Agregando el colorante desde arriba, la mezcla activa del agua en el epilimnion gracias a la accin del viento hace que ste quede tenue y uniformemente coloreado. En la termoclina, donde el colorante no se mezcla completamente con el agua, se observan "hilos" del mismo fcilmente visibles.

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La accin del viento en el proceso de mezcla de las aguas superficiales puede evidenciarse instalando, adems del anterior, otro similar a ste pero sin una fuente de aire a presin. En ese caso se observa que el gradiente trmico (por lo menos en un cierto rango de temperaturas) comienza ya desde la superficie, sin que se encuentre una capa superior de profundidad apreciable que sea uniforme trmicamente. El agregado de colorante resulta en este caso en el descenso de ste de una manera irregular hasta el nivel en el que se

Distribucin de la temperatura en un modelo de lago holomctico, luego de enfriar el agua a 4 C, y calentarla posteriormente. a) Sin viento; b) Luego de una oscilacin forzada por un seiche interno; c) Luego de una mezcla completa con viento fuerte. Las barras representan la profundidad de penetracin del colorante. El grfico inferior representa las fluctuaciones temporales de la temperatura al nivel de la termoclina durante las oscilaciones de un seiche interno (medidas con un termistor). (Segn Vallentyne, 1967).

interrumpe el decremento trmico, sin presentar una capa superior homognea. La accin del viento puede estudiarse ms fcilmente en el modelo que en la realidad, ya que ste permita analizar por separado cul es el papel de la intensidad y del ngulo de incidencia (con respecto a la horizontal) del viento sobre el mezclado de las aguas. Por ejemplo, un aumento del ngulo de incidencia puede hacer que las corrientes y turbulencias que se producen alcancen mayor profundidad, aumentando el espesor del epilimnion y, en ocasiones, destruyendo la estratificacin trmica. Cuando se usan colorantes, puede observarse cmo las ondas y circunvoluciones producidas por el viento se amplan, tornndose ms profundas.

MODELO DE LAGO MEROMCTICO Los lagos, independientemente del nmero de mezclas que experimenten a lo largo del ao, y de la poca en que esto suceda, pueden clasificarse en dos grandes categoras bsicas (Lewis Jr., 1983): holomcticos y meromcticos.

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Los lagos holomcticos son aquellos en los que la columna de agua alcanza a mezclarse completamente durante el perodo de circulacin. Por el contrario, en los meromcticos la mezcla slo involucra a una parte del volumen total del lago, (la parte superior o mixolimnion), quedando una parte del mismo sin mezclarse (parte inferior o monimolimnion). Las causas de la meromixis pueden deberse a varios factores. Una de las ms comunes es la existencia de una mayor concentracin de sales en las capas de agua ms profundas. Debido a su mayor densidad estas capas no alcanzan a homogenizarse con el resto de la columna durante el perodo de mezcla. Esta situacin puede darse, por ejemplo, por el ingreso de algn afluente subterrneo con mayor salinidad. Otra causa de la meromixis puede ser de ndole puramente morfomtrica, ya que algunos lagos sumamente profundos suelen experimentar mezclas incompletas. En el caso que la meromixis sea debida a una mayor concentracin de sales en las capas profundas del lago, existe una zona de gradiente qumico entre el mixolimnion y el monimolimnion que se denomina quimioclima. En el trabajo prctico se simular un lago meromctico y se comprobar su funcionamiento comparndolo con un control holomctico. Para ello se llenarn dos peceras iguales con agua a una temperatura uniforme cercana a los 4 C. Se considerar que experimento se inicia al final de un perodo de mezcla u homogenizacin, en el que toda la columna se halla a igual temperatura. A una de las peceras se les incorporar cuidadosamente sal gruesa con una manguera directamente en el fondo (esta servir como modelo de lago meromctico), mientras que la otra se dejar como control. En ambas peceras se simular una estratificacin trmica directa mediante la colocacin de sendas lmparas, del mismo modo que el descrito para los modelos de verano anteriores. Se verificar la formacin de la estratificacin trmica, midiendo la temperatura en el perfil cada un centmetro de profundidad. Luego se someter a ambos recipientes a una fuente de viento con el objeto de forzar una mezcla, y se agregar colorante al agua para visualizar el alcance de la misma.

CALCULO DE LA CANTIDAD DE CALOR DE UN CUERPO LENTICO Para calcular la cantidad de calor de una sustancia cualquiera, se utiliza la siguiente frmula: Q = Cp m t donde, Q: cantidad de calor intercambiada, Cp: constante llamada capacidad calorfica; depende de la sustancia y del rango de temperatura considerado, m: masa de sustancia, t: temperatura final menos temperatura inicial de la sustancia. Como el Cp del agua entre 0 y 100 C es aproximadamente 1 cal/gC, y considerando que la densidad del agua es 1 g/ml (o sea, 1 g de agua ocupa 1 ml), tenemos: Q = 1 cal/gC V t siendo V: volumen de agua.

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Generalmente las temperaturas consideradas no suelen ser superiores a los 80C (aguas termales), ni menores a 0C. Adems, en la prctica se suele usar una temperatura final de 0C, de modo que, para estimar la cantidad de calor de un cuerpo de agua, la frmula queda reducida a: Q=Vt donde t: temperatura media del cuerpo de agua. De este modo, basta calcular el volumen de un cuerpo de agua y multiplicar dicho valor por la temperatura media del mismo para obtener una estimacin aproximada de la cantidad de calor que posee. Sin embargo, como en la prctica se suele determinar la temperatura media como el promedio de todas las temperaturas tomadas a distintas profundidades, dicha determinacin sobrestima la influencia de los estratos ms profundos, los cuales poseen menor volumen debido a la forma de las cuencas. Puede efectuarse una correccin adecuada a partir de la siguiente frmula: tC corregida por volumen = cant. total de calor / vol. total Esto podr apreciarse con claridad en el siguiente ejemplo:

En este caso, la temperatura media obtenida por promedio directo de todas las mediciones efectuadas a diferentes profundidades resulta ser 20,76 C. Si efectuamos la correccin por volumen, obtendremos: tC corregida por volumen = 1501150 m3 C / 62000 m3 = 24,21C Si expresamos el volumen en cm3, la cantidad de calor resultante estar expresada en caloras: 1 m3 = 106 cm3. As, en el ejemplo anterior se obtendran 1501150 106 cal. Por medio de la expresin siguiente: Q=cal/cm2=cant. de calor/superficie del lago (en cm) Puede expresarse como cal/cm2, considerando la cantidad de calor de una columna de 1 cm2 de superficie y de altura igual a la profundidad media del limntopo.

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La estimacin ms sencilla de la cantidad de calor de un lago, an cuando sea solamente aproximada, es la siguiente: Q = D tC Donde Q es la profundidad media multiplicada por la temperatura media, quedando expresado el resultado para una columna de 1 cm2 de base y de altura igual a la profundidad media. En algunos casos puede interesar calcular la cantidad total de calor que puede ceder o captar un cuerpo de agua. En la naturaleza, las temperaturas extremas entre las que puede oscilar el aire atmosfrico son -80C y 40C, aproximadamente. Si consideramos que un cuerpo de agua se congela completamente llegando a una temperatura de -50C, la cantidad de calor que ha cedido depender de la temperatura inicial de la que se parta. Para efectuar el clculo correspondiente, ya no son vlidas algunas de las suposiciones que hemos hecho anteriormente, donde nos mantenamos en el rango 0-100C de temperatura. Si aplicramos la frmula: Q = V tC para una capa de hielo superficial a 0C, el contenido calrico calculado de ese modo sera igual a cero. Sin embargo, ese hielo puede disminuir an ms su temperatura, lo que significa que es capaz de ceder ms calor an, y, por ende, posee un contenido calrico diferente de cero. Adems, la constante C para el agua en estado slido es diferente de la del agua lquida. Dicha constante vara segn la expresin: Cp = a + bt + ct2 + ...... donde t es la temperatura y a, b, c, etc. son constantes que se encuentran tabuladas. Segn el grado de precisin que se desee, pueden considerarse solamente los primeros trminos de esta sucesin. La tabla siguiente muestra algunos valores de la constante Cp. tC 0 -2.2 -100 -260 Reemplazando en la frmula correspondiente: dQ = m Cp dt dQ = m (a + bt + ct2 + ....) dt dQ = m (adt + btdt + ct2 dt + ...) Cp del hielo 1.00738 0.5018 0.329 0.1

dQ = m (adt + btdt + ct

dt + ...)

En nuestro caso, usaremos solamente una aproximacin, considerando el C como si fuera constante dentro del rango 0 a -50C, y tomndolo aproximadamente igual a 0,4 cal/gC. Adems, debe considerarse el calor latente de fusin del agua, que es aproximadamente 80 cal/g. Se suma entonces el calor latente de toda la masa de agua que no est en estado slido, el cual se calcula como: Q = C1 V

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Aunque se introduce un error al considerar que la densidad del hielo es igual a la densidad del agua en estado lquido, podemos despreciarlo. Si se requiere mayor exactitud, puede utilizarse la densidad del hielo y efectuarse la correccin adecuada. Para estos clculos utilizaremos siempre la convencin segn la cual las prdidas de energa del sistema se consideran con signo negativo, y las ganancias con signo positivo.

BALANCE TERMICO Se define balance trmico anual como la cantidad de calor necesaria para elevar la temperatura de un cuerpo de agua desde la media invernal hasta la media estival, o bien, desde la mnima invernal hasta la mxima estival. Tambin suele expresrselo como la cantidad de calor necesaria para elevar la temperatura media de invierno hasta la media de verano de una columna de agua de 1 cm de superficie, y de profundidad igual a la profundidad media del cuerpo de agua. Para su clculo, se utiliza la siguiente expresin: B = D ( Tv - Ti) siendo: B = balance trmico anual D = profundidad media Tv = temperatura media (o mxima) estival Ti = temperatura media (o mnima) invernal

BIBLIOGRAFIA
LEWIS, JR., 1983. A revised classification of lakes based on mixing. Can. J. Fish. Aquat. Sci., 40:1779-1787. VALLENTYNE, J.R., 1967. A simplified model of a lake for instructional use. J. Fish. Res. Bd. Canada, 24(11):2473-2479. VALLENTYNE, J.R., 1978. Introduccin a la limnologa. Omega, Barcelona.

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Efecto de la contaminacin sobre la comunidad bacteriana en un cuerpo de agua ltico bonaerense


Introduccin Para caracterizar un ambiente de agua dulce en cuanto a su funcionamiento, es indispensable considerar a los organismos degradadores. Entre stos, las bacterias son los ms abundantes y tambin los ms activos. En efecto, su biomasa suele ser mayor que la biomasa de consumidores, variando entre 0.2 y 15 g C. m-3 (Margalef, 1983). Asimismo, el pequeo tamao de las bacterias implica una alta relacin superficie/volumen, que les permite tener una alta tasa metablica: 1g de bacterias tiene una capacidad metablica 100 veces mayor que 1 g de tejido de mamfero. Desde el punto de vista fisiolgico, las bacterias pueden clasificarse en: Auttrofas: Son aquellas que sintetizan compuestos orgnicos fijando la energa solar (fotoauttrofas), o bien obtienen energa a travs de la oxidacin de compuestos reducidos (quimioauttrofas). Ambos grupos requieren de condiciones ambientales muy especiales, y no son, por lo tanto, numricamente importantes en un cuerpo de agua. Hetertrofas: Este grupo, que incluye a la gran mayora de las bacterias, comprende a las que obtienen energa a travs de la respiracin de compuestos orgnicos. Entre stas, las aerobias utilizan al oxgeno como ltimo aceptor de electrones produciendo CO2 y H2O. Las anaerobias, en cambio, utilizan para esto compuestos oxidados, (NO3-, SO42-, CO2), produciendo gases como N2, SH2 y CH4. Esto se logra a partir de una larga serie de reacciones de xido-reduccin. Distintas especies de bacterias se especializan en realizar cada una de estas reacciones, dando origen a una alta diversidad dentro de esta comunidad. Debido a su hbito mayormente heterotrfico, el nmero de bacterias presentes en un cuerpo de agua depende de la cantidad de materia orgnica disponible para consumo, y se relaciona por lo tanto con el estado trfico de ese cuerpo de agua. Segn Margalef (1983), stos seran los rangos tpicos de densidad de bacterias heterotrficas en diversos ambientes lnticos: lagos oligotrficos: 100 - 10 x 103 lagos mesotrficos: 10 x103 - 100 x 103 lagos eutrficos: 500 x103 - 1000 x103 lagos hipereutrficos: 1000 x 103 - 10000 x 103 En Alemania se ha establecido la siguiente tabla de valores para recuentos de bacterias heterotrficas viables, en relacin al grado de contaminacin de un ambiente acutico de acuerdo al sistema de saprobios (Marielarena y Mariazzi, 1995a).

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Categora I oligosaprbico, muy poco contaminado II -mesosaprbico, moderadamente contaminado III -mesosaprbico, fuertemente contaminado IV olisaprbico, excesivamente contaminado

UFC (unidades formadoras de colonias) por ml < 500 1-10 x 103 50-100 x 103 750 - 500.000 x 103

La capacidad de autodepuracin de un ro permite que, ante una descarga puntual de materia orgnica, sta sea degradada y finalmente reciclada, aguas abajo, en forma de nutrientes para los productores (Branco, 1984). As, pueden identificarse distintas zonas: Zona de degradacin: Inmediatamente despus del punto de vertido. Aqu comienzan a proliferar las bacterias heterotrficas aerobias, cuyo activo metabolismo provoca la disminucin del nivel de oxgeno, y a veces condiciones de anoxia. Zona de descomposicin activa: Se produce entonces un marcado aumento de las bacterias anaerobias, primero las facultativas y luego las obligatorias. Hay depsito de lodos blandos, que producen burbujeo y malos olores, debido a la actividad anaerbica bntica. Zona de recuperacin: Una vez agotada la mayor demanda de oxgeno, ste reaparece, aumentando progresivamente su concentracin aguas abajo. El nmero de bacterias se reduce, y la mayor transparencia del agua y la abundancia de nutrientes degradados en las etapas anteriores, permiten el crecimiento del fitoplancton.

Area del Estudio Este trabajo prctico se realizar en el ro Lujn, Provincia de Buenos Aires, junto con el Trabajo Prctico de evaluacin de la calidad ambiental. Se establecern 5 estaciones de muestreo a lo largo del curso, que resulten representativas de diferentes condiciones de sanidad del ro. Ellas son: a) Cabecera del ro (estacin 1 del TP) b) Ruta 9 (estacin 6 del TP) c) Aguas abajo del Canal Gdor. Arias (estacin 10 del TP) d) Canal aliviador del R. Reconquista (estacin 13 del TP) e) Aguas abajo de la desembocadura del Canal Aliviador (estacin 14 del TP)

Hiptesis de Trabajo La capacidad de autodepuracin del ro Lujn ante la contaminacin por materia orgnica se manifestar a travs del aumento de bacterias heterotrficas y la disminucin de la concentracin de oxgeno, los que, en ausencia de disturbios posteriores, tendern a volver a sus valores normales aguas abajo. La influencia de los afluentes sobre el ro Lujn se manifestar, entre otros parmetros, en cambios en la concentracin de bacterias heterotrficas, la que tender a disminuir aguas abajo de un afluente limpio (Canal Gdor. Arias), y a aumentar aguas abajo de un afluente contaminado (Aliviador del Reconquista).

Tareas de Campo En cada estacin de muestreo se tomar una muestra de agua para su anlisis

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bacteriolgico, de la siguiente manera: 1. Se usa un frasco estril, el que se abre una vez bajo el agua para evitar la contaminacin con bacterias del aire. 2. La boca del frasco se coloca apuntando aguas abajo de la corriente, para evitar turbulencias por el llenado brusco. 3. Se cierra el frasco tambin bajo el agua. Se coloca inmediatamente en una conservadora con hielo para su traslado al laboratorio, para disminuir la actividad metablica de la muestra.

RECUERDE QUE EST TRABAJANDO EN UN AMBIENTE CONTAMINADO, Y QUE ALGUNAS DE ESTAS BACTERIAS PUEDEN SER PATGENAS. ES IMPRESCINDIBLE USAR GUANTES Y LAVARSE LAS MANOS DESPUS DE QUITRSELOS.

El mtodo del Nmero Ms Probable (NMP) Existen diversos mtodos para calcular la densidad de bacterias en un cuerpo de agua. Entre stos, los mtodos de recuento directo al microscopio son mucho ms exactos, pero requieren de una tecnologa muy cara y un observador entrenado. El otro grupo de mtodos se basa en el recuento o estimacin del nmero de bacterias viables, por lo que las muestras deben ser cultivadas. Dado que no existe un medio de cultivo universal que permita el crecimiento de todas las bacterias heterotrficas, estos mtodos suelen subestimar sistemticamente los valores reales. Sin embargo, esta subestimacin es notablemente menor cuando realizan recuentos de grupos especficos mediante el uso de medios de cultivos selectivos, y estos mtodos tienen la gran ventaja de ser sencillos y de bajo costo, por lo que son los ms frecuentemente utilizados en el anlisis de calidad de aguas (Marielarena & Mariazzi, 1995b). Entre ellos, el ms popular es el mtodo del Nmero Ms Probable (NMP). Este mtodo se basa en la consideracin de que una o ms bacterias, inoculadas en un medio de cultivo adecuado, producirn un crecimiento que se evidenciar dando un resultado positivo (turbidez) (Marielarena & Mariazzi, 1995c). As, en muestras con una gran concentracin de bacterias, una serie de cinco rplicas dar resultados positivos en los cinco tubos. Si la concentracin es muy baja, se obtendrn resultados negativos (transparencia) en los cinco tubos. Existe, sin embargo, una dilucin crtica, para la cual agunos resultados son positivos y otros negativos, y que determina el valor numrico de la estimacin de la densidad bacteriana, en base a una serie de frmulas de probabilidades (APHA-AWWA-WPCF, 1975). En el mtodo del NMP se siembran, entonces, series de cinco tubos de sucesivas diluciones decimales de la muestra. Para la lectura de los resultados se eligen tres diluciones consecutivas tales que en la muestra ms concentrada, todos los tubos den positivo, y las dos diluciones subsiguientes. Cuando haya un resultado positivo a la dilucin siguiente a las tres elegidas, ste se incorporar a los resultados de la dilucin anterior, como en el ejemplo "c" de la tabla, cuya lectura se transforma en "d".

Ejemplo:

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Dilucione s a b c d

1 (muestra) 5/5 5/5 5/5 5/5

10-1 10-2 10-3 Combinacin positivos 5/5 2/5 0/5 5-2-0 4/5 3/5 3/5 2/5 1/5 2/5 0/5 1/5 0/5 5-4-2 5-3-2 5-3-2

de

En cada una de las fracciones, el numerador representa el nmero de positivos, y el denominador el nmero de tubos sembrados. Con la combinacin de tubos positivos para las tres diluciones se entra en la Tabla 1, obtenindose el NPM de bacterias en 100 mL de muestra, junto con los lmites de confianza al 95%. Segn la Tabla 1, el ndice de NMP correspondiente al ejemplo a es 49 (17- 130) bacterias. Este nmero debe multiplicarse por la inversa de la dilucin intermedia (en este caso, 102) para obtener el NMP por 100 mL. Para este ejemplo, el resultado es 4.900 (1.700 - 13.000) bacterias por 100 mL, o, lo que es ms cmodo, 4.9 (1.7-130) bacterias viables por mL.

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Tabla 1
Combinacin Indice NMP de positivos 4-0-0 4-0-1 4-1-0 4-1-1 4-1-2 4-2-0 4-2-1 4-3-0 4-3-1 4-4-0 5-0-0 5-0-1 5-0-2 5-1-0 5-1-1 5-1-2 5-2-0 5-2-1 5-2-2 5-3-0 5-3-1 5-3-2 5-3-3 5-4-0 5-4-1 5-4-2 5-4-3 5-4-4 5-5-0 5-5-1 5-5-2 5-5-3 5-5-4 5-5-5 (en 100 mL) 13 17 17 21 26 22 26 27 33 34 23 31 43 33 46 63 49 70 94 79 110 140 180 130 170 220 280 350 240 350 540 920 1.600 >2.400 Lmites de inferior 3 5 5 7 9 7 9 9 11 12 7 11 15 11 16 21 17 23 28 25 31 37 44 35 43 57 90 120 68 120 180 300 640 confianza superior 31 46 46 63 78 67 78 80 93 93 70 89 110 93 120 150 130 170 220 190 250 340 500 300 490 700 850 1.000 750 1.000 1.400 3.200 5.800

Trabajo de Laboratorio Materiales necesarios mechero Bunsen gradilla tubos de ensayo con 9 mL de solucin fisiolgica estril tubos de ensayo con 5 mL de medio de cultivo peptona pipetas automticas con tips de 1 mL estriles desinfectante y algodn

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Diluciones Dado que se desconoce a priori la densidad bacteriana, se necesita trabajar con una serie de diluciones sucesivas de las muestra. Estas se obtienen de la siguiente forma: - Se traslada 1 mL de la muestra original a un tubo de ensayo con 9 mL de solucin fisiolgica, obtenindose 10 mL de concentracin 10-1. Se homogeniza y extrae con un nuevo tip 1 mL, que se colocar en otro tubo similar, obtenindose la concentracin 10-2, y as sucesivamente, hasta la concentracin 10-7 Siembra Cada una de las concentraciones entre 10-3 y 10-7 se usar para sembrar un juego de cinco rplicas, cada una de ellas agregando 1 mL de la dilucin correspondiente a un tubo con medio nutritivo peptona.

PRECAUCIONES La exactitud de los resultados de todo experimento bacteriolgico depende del trabajo en condiciones de mxima esterilidad. Despeje y limpie con desinfectante las mesadas en las que va a trabajar. La llama del mechero crea un rea estril alrededor. Procure trabajar siempre dentro de sta. Evite los movimientos bruscos e innecesarios: pueden ocasionar contaminaciones por bacterias aerfilas. Recuerde que, an en el laboratorio, SIGUE trabajando con bacterias potencialmente patgenas. Utilice guantes y conserve la higiene.

Anlisis de los resultados Luego de 5-7 das de incubacin en lugar oscuro y cerrado, con una temperatura estable de alrededor de 20 C, se proceder a calcular las densidades de bacterias en las tres muestras por el mtodo del NMP. Los resultados se expresarn en forma grfica, y se discutirn en clase en relacin a la calidad del agua en las distintas estaciones de muestreo y en funcin de las hiptesis de trabajo.

Bibliografa
APHA-AWWA-WPCF, 1975: Standard Methods for the examination of water and wastewater. American Public Health Association, Washington D.C. 1993 pp. Branco, S.M., 1984: Limnologa Sanitaria, Estudio de la polucin de aguas continentales. Monografi No. 28. Secretara de la OEA, Washington, D.C.. 120 pp. Margalef, R., 1983: Limnologa. Ed. Omega, Barcelona, 1010 pp. Marielarena, A.J. & A.A. Mariazzi, 1995 a: Cuantificacin de bacterias heterotrficas viables. En: Lopretto, E. C. & G. Tell, eds: Ecosistemas de aguas continentales. Metodologas para su estudio. Ed. Sur. pp 85-92. Marielarena, A.J. & A.A. Mariazzi, 1995 b: Bacteriologa acutica. En: Lopretto, E. C. & G. Tell, eds: Ecosistemas de aguas continentales. Metodologas para su estudio. Ed. Sur. pp 79-84. Marielarena, A.J. & A.A. Mariazzi, 1995 c: Cuantificacin de bacterias indicadoras de contaminacin fecal. En: Lopretto, E. C. & G. Tell, eds: Ecosistemas de aguas continentales. Metodologas para su estudio. Ed. Sur. pp 95-104.

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Determinacin y mapeo de la calidad del agua en cursos lticos


Introduccin Si bien existen innumerables definiciones de contaminacin (e.g., Holdgate, 1971; Collocott y Dobson, 1974; Hellawell, 1986), prcticamente todas involucran la nocin de un cambio o desviacin en los parmetros fsicos, qumicos o biolgicos con respecto a un estado supuestamente prstino y original. Esta generalizacin es til desde el punto de vista prctico ya que generalmente apunta a identificar los procesos que alteran el ambiente acutico hacindolo ms desfavorable para muchos procesos biolgicos y, sobre todo, dificultando su aprovechamiento por parte del hombre en un sinnmero de actividades tanto recreativas como productivas. Sin embargo, no debe olvidarse que en los ambientes de agua dulce ese estado original no siempre es el ms puro o prstino. Las lagunas contaminadas naturalmente con afloramientos de hidrocarburos, las aguas termales, las hipersalinas, etc. son solamente algunos ejemplos donde el estado original no es el ms favorable para la mayora de los procesos biolgicos y para el aprovechamiento por parte del hombre. Adems de estos cuerpos contaminados naturalmente o con propiedades extraordinarias de manera permanente, existen tambin eventos de contaminacin natural transitorios. Por ejemplo, las floraciones de algas, pricipalmente de cianofceas, y su ulterior muerte masiva por un cambio brusco en las condiciones climticas suelen generar eventos reversibles de contaminacin por sustancias orgnicas y metabolitos. Sin embargo, mucho ms importante que esta contaminacin natural es la provocada por el hombre, a veces denominada artificial. Los efectos de la contaminacin debida a la actividad humana pueden generar cambios profundos tanto en las propiedades fsicoqumicas del agua, como en las comunidades vegetales y animales. El impacto suele ser ms importante en los cuerpos lnticos que en los lticos; los ros automticamente exportan al menos parte de las sustancias contaminadas recibidas. Esta capacidad de autodepuracin, sin embargo, es muy limitada. Los tipos de contamnacin y sustancias contaminantes se ilustran en el listado que se incluye a continuacin:
Contaminacin fsica Contaminacin trmica Contaminacin qumica (incluyendo la orgnica) Slidos suspendidos y disueltos Materia orgnica Nutrientes (Fosfatos, Nitratos) Sulfatos Cloruros Metales (Hierro, Manganeso) Metales pesados (Mercurio, Cadmio, Plomo, Cobre) Radionucleidos Compuestos orgnicos txicos Solventes Pesticidas Alometanos Bifenilos policlorados (PCB) Hidrocarburos poliaromticos Hidrocarburos clorinados Fluoruros

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Sales Contaminacin biolgica Coliformes fecales Otros organismos patgenos

La materia orgnica deriva principalmente de los efluentes domiciliarios. Los compuestos qumicos, incluyendo fenoles, sales metlicas, sulfatos, cidos, hidrxidos, etc. provienen de las actividades industriales. El aporte de hidrocarburos es debido a la navegacin y a los desechos. Los metales pesados (Cu, Pb, Zn, Cd y otros) son derivados de la industria. Los biocidas, organoclorados, fosforados y otros, derivan de las actividades agrcolas y ganaderas. Los programas de monitoreo de la calidad del agua involucran el seguimiento de las caractersticas limnolgicas del sistema, incluyendo las variables fsico-qumicas y/o biolgicas, a fin de identificar propiedades anormales en algunos parmetros en relacin a los valores caractersticos de sistemas que conservan su pureza original. Los mtodos biolgicos ms difundidos para detectar la contaminacin acutica son: Demanda biolgica (o bioqumica) de oxgeno (DBO). Es el oxgeno que se consumira si toda la materia orgnica en un litro de agua fuera oxidada por bacterias y protozoos. La magnitud del valor de la DBO es proporcional a la cantidad de material orgnico en el agua, y por ende se suele utilizar para evaluar la contaminacin por efluentes domiciliarios y de algunas industrias alimenticias. Bacterias (ver TP Efecto de la contaminacin sobre la comunidad bacteriana de un cuerpo de agua ltico bonaerense). Bioensayos. Exposicin de organismos de baja o mediana tolerancia a la contaminacin a las aguas investigadas en diferentes diluciones; los porcentajes de mortalidad al cabo de un tiempo determinado dan una medida del grado de contaminacin del lquido ensayado. Altenativamente, pueden utilizarse algas y medir su crecimiento (mediante recuentos celulares o medicin de pigmentos). Organismos indicadores. Interpretando la presencia/ausencia o la abundancia de especies cuya tolerancia o intolerancia a la contaminacin es conocida; los organismos ms tiles para este fin son los invertebrados y las diatomeas bentnicos o del perifiton. Ambos principios de evaluacin de la contaminacin, i.e., mediante la medicin de los parmetros fsicos y qumicos modificados por efectos de la contaminacin (por ejemplo, el oxgeno disuelto, la conductividad, el pH), as como de las sustancias contaminantes mismas (hidrocarburos, metales, fenoles, biocidas, etc.), por un lado, y mediante alguna de las tcnicas que utilizan a los organismos, por el otro, tienen sus ventajas y desventajas. Los primeros permiten identificar la o las sustancias contaminantes involucradas y sus niveles de concentracin, informacin de gran utilidad sobre todo cuando se trata de fuentes de contaminacin puntuales. Sin embargo, estos anlisis no siempre logran definir cual es el efecto real de los contaminantes medidos sobre la biota, y generalmente tampoco contemplan la importancia de los efectos sinrgicos o antagnicos de los cotaminantes, que es en definitiva el aspecto de mayor inters. Los resultados de la deteccin biolgica de la contaminacin, por otro lado, incorporan una medida de los efectos sinrgicos y antagnicos entre contaminantes, la historia de la contaminacin en el lugar, la toxicidad variable de los contaminantes en funcin de las caractersticas del sitio (temperatura, tipo de sedimentos, etc.), pero, por s solos, raramente permiten identificar cual es el contaminante que est afectando a los organismos.

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Utilizacin de ndices para evaluar la calidad del agua Tanto los datos biolgicos, como los fsico-qumicos pueden utilizarse de manera independiente, o pueden ser combinados mediante alguno de los numerosos ndices propuestos para medir la contaminacin (e.g., Pesson, 1979; Haslan, 1990; Calow y Petts, 1996). El uso de los ndices para expresar la calidad del agua se generaliz hace ya ms de 20 aos atrs, y se han desarrollado una gran variedad de ellos. Algunos de stos solo toman en cuenta los parmetros fsico-qumicos. Entre ellos se pueden mencionar los ndices de Carlson (1977), que permiten valorar el nivel de eutrofizacin de un cuerpo de agua a travs de mediciones de la concentracin de fsforo total o la lectura del disco de Secchi; el ndice de calidad del agua propuesto por la EPA (Environmental Protection Agency, de los EEUU) (Lambou et al., 1983), que utiliza numerosas variables, tales como fsforo total, nitrgeno inorgnico, concentracin de cloruros, oxgeno disuelto y lectura del disco de Secchi; y el ndice propuesto por Bern (1984), para cuerpos de agua de Argentina, que se utilizar en este trabajo prctico, y que tambin combina una serie de parmetros fsicos y qumicos (ver ms abajo). En algunos ndices los valores individuales de los parmetros asociados a la contaminacin son ponderados de acuerdo a su importancia en el sistema bajo estudio. Por ejemplo, la temperatura es importante en los casos de contaminacin trmica (vertido en el medio de aguas calentadas debido a su utilizacin en plantas industriales o de generacin de energa), pero difcilmente podra asociarse a impurezas en otras situaciones. Otros ndices se basan en la composicin de las comunidades acuticas, y se denominan ndices biolgicos. La utilizacin de estos ndices tiene ventajas y desventajas. Una de las principales desventajas es que requieren de especialistas en los grupos taxonmicos que se utilizarn como guas. Sin embargo, el uso de los ndices biticos a menudo permite una caracterizacin ms integradora y fiel de las condiciones ambientales imperantes en el cuerpo de agua a lo largo del tiempo. Los organismos bentnicos suelen ser los ms adecuados para la elaboracin de ndices biticos debido a su permanencia en el lugar, y entre ellos, los ms utilizados son las comunidades de invertebrados y de diatomeas. Asimismo, la combinacin de diferentes ndices biticos resulta recomendable, ya que suministra informacin complementaria (Licursi y Gmez, 2003). Existe un enorme nmero de ndices biticos que se basan en la mayor o menor tolerancia de los organismos a la contaminacin. A modo de ejemplo pueden mencionarse el ndice de especies de Koth (Schwoerbel, 1975), en el cual el grado de cotaminacin es inversamente proporcional a la cantidad total de especies presentes; el ndice de diatomeas pampeano (Gmez y Licursi, 2001), que toma en cuenta la tolerancia de las distintas especies de diatomeas a la contaminacin; los ndices de diatomeas desarrollados por Descy & Coste (1990), que se basan en el mismo principio que el anterior; el de Wilson y Mc Gill (1977), que utiliza las exuvias pupales de los quironmidos; el de macroinvertebrados para ros pampeanos, desarrollado por Gmez & Rodrguez Captulo (2001); etc. La diferencia entre utilizar un ndice nico y referir los valores individuales de los parmetros evaluados es que el ndice simplifica la expresin permitiendo sintetizar la informacin con el fin de facilitar su representacin grfica y la transmisin de los resultados, sobre todo en auditorios no especializados. Tambin puede ser til para la comparacin global de resultados con estudios anteriores y para la elaboracin de una escala comn nica como medida de intercalibracin. Sin embargo, dada la profusin de ndices propuestos y la relativa flexibilidad de uso de muchos de ellos, en este sentido su utilidad es ms restringida. De todas maneras, obviamente ningn ndice aumenta la precisin ni la calidad de la evaluacin realizada, y a la hora de hilar fino e interpretar los detalles las mediciones

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originales resultan de mucha ms utilidad que el ndice derivado de ellas.

Trabajo Prctico En este trabajo prctico se evaluarn los parmetros (fsicos y qumicos) medidos en el campo (ro Lujn), y se ensayar el uso de algunos de de los ndices propuestos para la interpretacin de los patrones de contaminacin. Por otro lado, a fin de resumir la informacin sobre los parmetros analizados, y para contar con una representacin grfica de fcil utilizacin, se confeccionarn mapas ad hoc donde se ilustrar la calidad del agua en diferentes puntos de la cuenca hidrogrfica. Resumiendo, los objetivos del trabajo prctico son: 1. Analizar la calidad del agua en distintos puntos de la cuenca del ro Lujn a travs del estudio de los principales factores fsicos y qumicos. 2. Realizar un mapeo de los distintos puntos de muestreo en relacin al grado de contaminacin de las aguas mediante distintas metodologas de uso internacional. 3. Calcular algunos ndices de contaminacin para cada punto de muestreo a fin de obtener una valoracin de la calidad del agua a travs de un conjunto de propiedades fsico-qumicas.

Metodologa Trabajo de campo Se realizar una salida de un da a la cuenca del ro Lujn, fijndose distintas estaciones de muestreo a lo largo del mismo. Para la seleccin de los sitios se tendrn en cuenta lugares que presenten distinto grado de perturbacin antrpica. En cada punto de muestreo se medirn in situ los siguientes parmetros fsico-qumicos: pH, conductividad y temperatura (con sensores de campo); transparencia (con disco de Secchi); oxgeno disuelto (mtodo de Winkler). Adems, se colectarn muestras de agua para realizar los anlisis qumicos que se detallan ms abajo. Estas muestras se preservarn en fro y en oscuridad hasta su procesamiento en el laboratorio. Trabajo de laboratorio Se realizarn los siguientes anlisis qumicos siguindose las tcnicas usuales que figuran en esta Gua de Trabajos Prcticos: Oxgeno disuelto (mtodo de Winkler); Alcalinidad (mediante titulacin con HCl 0.1 N); P-PO4 (fosfato reactivo soluble) (por el mtodo del cloruro stagnoso y molibdato de amonio midiendo la absorbancia por espectrofotometra); Fsforo total (por el mismo mtodo pero digiriendo previamente la muestra en autoclave en medio cido); N-NO3 (nitratos) (por colorimetra con reactivos Hach); N-NH4 (amonio) (por espectrofotometra, utilizando reactivos Wiener); Materia orgnica (cualitativamente con permanganato de potasio); Slidos en suspensin (gravimtricamente mediante pesado del material retenido en filtros Whatman GF/F secados en estufa hasta peso constante); Concentracin de cloruros (por colorimetra con reactivos Hach). Es muy importante destacar que esta lista de parmetros qumicos de ninguna manera agota el espectro de caractersticas que debera evaluarse en un ambiente del tipo del ro Lujn, fuertemete contaminado por mltiples fuentes domiciliarias, industriales y

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agropecuarias (ver, por ejemplo, Boltovskoy et al., 1993, 1997; Cataldo et al., 2001a, b; Colombo et al., 1995; Comit Regional de Cuenca, Ms; De Cabo et al., 2000; De Tezanos Pinto, 2000; Del Giorgio et al., 1991; Ferrari et al. 1998; Guerriero, 2000; Loez y Salibian, 1990; Maccor, 1997; O'Farrell et al., 2002; Olgun et al., 2004; Topalian et al., 1990). Con el fin de uniformar los criterios de trabajo, se tomarn en cuenta los rangos de calidad de agua propuestos por la Swedish Environmental Protection Agency (1991) que se detallan ms abajo. Debe tenerse en cuenta, sin embargo, que algunos de estos parmetros no implican automticamente la presencia de contaminacin, sino que deben ser evaluados en el contexto del ambiente que se estudia. Por ejemplo, la transparencia normal de las aguas totalmente limpias del ro Paran raramente excede de unos 10-20 cm (profundidad de disco de Secchi), pero el mismo valor sera totalmente anormal para un lago andino oligotrfico como el Nahuel Huapi, donde la visibilidad puede llegar a ms de 20 m.

P total (g/l) 7.5 7.5 - 15 15 - 25 25 - 50 > 50 N total (mg/l) 0.30 0.30 - 0.45 0.45 - 0.75 0.75 - 1.50 > 1.50

clase 1 2 3 4 5

Descripcin muy pobre en nutrientes pobre en nutrientes moderadamente rico en nutrientes rico en nutrientes muy rico en nutrientes

cdigo de color azul oscuro azul claro amarillo naranja rojo cdigo de color azul oscuro azul claro amarillo naranja rojo

clase Descripcin 1 2 3 4 5 muy bajas concentraciones de nitrgeno bajas concentraciones de nitrgeno moderadamente altas conc. de nitrgeno altas concentraciones de nitrgeno muy altas concentraciones de nitrgeno Descripcin rico en oxgeno moderadamente rico en oxgeno dbil estado de oxgeno pobre en oxgeno anxico o casi anxico

Oxgeno disuelto (mg/l) >7 5-7 3-5 1-3 <1

clase 1 2 3 4 5

cdigo de color azul oscuro azul claro amarillo naranja rojo

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Prof. Secchi (m) >8 5-8 2.5 - 5 1 - 2.5 <1 slidos suspendidos (mg/l) = 1.5 1.5 - 3 3-6 6 - 12 > 12

clase 1 2 3 4 5 clase 1 2 3 4 5

Descripcin muy alta prof. del Secchi alta prof. de Secchi moderadamente alta prof. del Secchi baja prof. de Secchi muy baja prof. de Secchi Descripcin muy baja concentracin de slidos baja concentracin de slidos moderadamente alta conc. slidos alta concentracin de slidos muy alta concentracin de slidos

cdigo de color azul oscuro azul claro amarillo naranja rojo cdigo de color azul oscuro azul claro amarillo naranja rojo

Alcalinidad (meq/l) > 0.5 0.1 - 0.5 0.05 - 0.1 0.01 - 0.05 = 0.01

pH > 7.1 6.8 -7.1 6.3 6.8 5.7 6.3 = 5.7

clase 1 2 3 4 5

Descripcin muy buena capacidad buffer buena capacidad buffer dbil capacidad buffer muy dbil capacidad buffer nula o insignificante capac. buffer

cdigo de color azul oscuro azul claro amarillo naranja rojo

Confeccin del mapa de calidad del agua 1. Se confeccionar en papel de calco un mapa por cada parmetro analizado 2. Se marcarn todas las estaciones de muestreo sobre los mapas con un crculo de 5 mm 3. Los crculos se colorearn de acuerdo a la clasificacin obtenida para cada uno de los parmetros analizados. 4. Se realizar tambin una presentacin grfica conjunta de los parmetros, indicando con un diagrama sectorial para cada estacin, los colores correspondientes a las categoras obtenidas.

Valoracin de la calidad de agua en cada punto de muestreo a travs del ndice ICA Para cada punto de muestreo se calcular el ndice ICA propuesto por Bern (1984) y de acuerdo al valor obtenido en cada caso, se confeccionar otro mapa que resumir la informacin de un conjunto de parmetros fsico-qumicos diferentes. Clculo del ndice De la siguiente tabla se obtendrn los valores qi de clasificacin para cada variable:

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Cl- (mg/l) 0 - 50 50 -150 150 - 300 300 - 620 > 620

qi 10 8 5 3 0

N amoniacal N-NH4 (mg/l) 0 - 0.2 0.2 - 0.5 0.5 -1.0 1.0 - 2.0 2.0 - 5.0 5.0 - 10.0 > 10.0

qi 30 24 18 12 6 3 0

O2 disuelto (mg/l) >9 8-9 6-8 4-6 1-4 0-1

qi 10 8 6 4 2 0

DQO mg/l <5 5-10 10-15 15-20 20-30 >30

qi 10 9 7 3 1

Wi (peso relativo): N- NH4 = 3 O2 disuelto = 1 Cl- = 1 ICA = qi / Wi Interpretacin de los valores 10: pureza original 8: polucin leve 6: polucin intermedia 3: polucin elevada 0: polucin muy elevada con calidad equivalente a un cloacal crudo y sptico

Bibliografa
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Determinacin de la edad y el crecimiento en peces


Nota: la bibliografa correspondiente a este trabajo est detallada en el captulo "Comunidades dulceacucolas", de la seccin metodolgica. TRABAJO DE CAMPO El muestreo de los peces se realizar con una red de arrastre de playa, que consiste en un copo central y dos alas laterales que orientan a los peces hacia el copo donde quedan retenidos; el tipo de red y la tcnica de muestreo se describen en le captulo metodolgico correspondientes de esta gua ("Comunidades dulceacucolas"). Se realizarn dos lances en diferentes zonas de la laguna. A cada individuo pescado se le tomar la longitud total y longitud standard mediante la utilizacin de un ictimetro, volcando luego estos datos a una planilla. Tambin se proceder a la extraccin de escamas que sern guardadas en seco en un sobre rotulado con el nmero de individuo y el nmero de lance. TRABAJO DE LABORATORIO Para la determinacin de la edad de los peces se utilizar el mtodo de Petersen, que se basa en el anlisis de datos de frecuencia por clases de longitud, y asume que los sucesivos valores modales de la distribucin representan distintos grupos de edades (Fig. 3). A partir de los datos de las longitudes totales se calcular una distribucin de frecuencias de las tallas, utilizando un tamao de intervalo de 10 mm. A continuacin se detalla un ejemplo para facilitar la comprensin de los mtodos a utilizar. Supngase que los datos obtenidos en el campo son los reproducidos en la Fig. 1. Con el fin de separar las distintas componentes modales se utilizar el mtodo de Cassie, modificado para ser utilizado en computadoras personales, que consiste en la representacin de las frecuencias acumuladas en escala probabilstica. Una vez ingresados los datos de nmero de intervalos, longitud del intervalo, lmite inferior del primer intervalo, y frecuencia de cada intervalo, se crea un grfico donde las ordenadas corresponden a los intervalos de clase y las abscisas a las frecuencias acumuladas relativas en escala probabilstica. En este grfico cada curva modal que compone la distribucin polimodal es representada por una recta (Fig. 2). Para establecer la moda se debe determinar sobre dicho grfico el nmero de puntos (intervalos de clase), que se alinean en una recta; a partir de stos el programa calcula para cada moda la media, el desvio standard, el nmero de individuos y el coeficiente de correlacin para ponderar el ajuste de los puntos considerados a uns recta. Este procedimiento se debe repetir para determinar cada una de las modas. De esta manera se obtiene la descomposicin en componentes unimodales de la distribucin de frecuenciag (Fig. 3), y los valores de la media, desvio standard y el nmero de individuos de cada moda.

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Fig. 1 Distribucin de frecuencias absolutas de tallas utilizadas para este ejemplo.

Fig. 2. Representacin grfica de los valores de las frecuencias relativas acumuladas en escala probabilstica (eje y), respecto de los intervalos de clase (eje x)

DETERMINACIN DEL CRECIMIENTO Se utiliza la ecuacin de crecimiento de von Bertalanffy, la cual define que el tamao de un pez (Lt) para cada edad (t) esta dado por: Lt = L (1-e
-K(t-t 0))

Donde L es el largo asinttico o el tamao mximo de un pez a la edad infinita, K es la constante de crecimiento, y t es la edad (hipottica) a la cual comienza el crecimiento si el ejemplar creciera durante toda su vida segn esta ecuacin. Para estimar el valor de los parmetros de crecimiento a partir de los los datos largo edad se utilizar el "Ploteo de Ford-Walford" (ver "Comunidades dulceacucolas"), que fue adaptado para ser utilizado en computadoras. Este mtodo requiere como datos de entrada los valores de la longitud del pez en cada edad. El programa calcula el valor de los parmetros y representa grficamente la curva de crecimiento de von Bertalanffy (Fig. 4).

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Fig. 3. Descomposicin de la distribucin de frecuencias polimodales utilizando el mtodo de Cassie.

Fig. 4. Curva de vcrecimiento de von Bertalanffy, a partir de los valores de los parmetros calculados por el ploteo de Ford-Walford.

ANLILIS LEPIDOLGICO Con el fin de verificar la coincidencia entre la edad de cada pez determinada por el mtodo de Petersen y el nmero de marcas de crecimiento, se proceder limpiar cada escama con una solucin de hidrxido de potasio al 2%; posteriormente bajo lupa se seleccionarn de 4 a 5 escamas de mayor tamao y forma tpica que no presenten signos de regeneracin. Las escamas se montarn en seco entre dos portaobjetos y, bajo lupa, se determinar el nmero de marcas; se seguir el criterio de considerar la marca como una banda de circuli apretados en el campo anterior de la escama, mientras que en el campo lateral la direccin de uno o dos circuli parecen cortar la trayectoria de muchos otros (Fig. 5).

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Fig. 5. Escama de Tilapia galilaea.

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Tasas de filtracin en organismos bentnicos


INTRODUCCIN Uno de los mecanismos de alimentacin ms difundidos entre los animales acuticos es la filtracin del agua circundante y retencin-ingestin de las partculas suspendidas en ella. Este tipo de alimentacin es comn en la mayora de los organismos zooplanctnicos, como los coppodos, cladceros y rotferos, as como en muchos bentnicos. Los mecanismos de filtracin pueden estar representados por las setas densamente entrelazadas de algunos apndices especializados, formando peines o redes que retienen el material particulado (por ejemplo, en los crustceos), o por estructuras ciliadas y mucosas que aglutinan a las partculas. En este caso, el mucus es ingerido conjuntamente con el material retenido. La estimacin de la cantidad de material en suspensin que ingiere una especie dada por unidad de tiempo es una variable de gran inters ecolgico. Este dato, conjuntamente con el de la densidad de los organismos filtradores, brinda una buena aproximaxin al conocimiento del impacto de estas especies sobre los recursos alimentarios del lugar. Adems, ofrece evidencias acerca de la intensidad de los procesos de reciclado y mineralizacin del material orgnico, capacidad de clarificacin o limpieza del agua, requerimientos energticos de las especies filtradoras, disponibilidad, palatabilidad y digestibilidad de los diferentes tipos de material orgnico particulado, etc. Algunos de los conceptos bsicos que deben ser considerados en los estudios de filtracin son: Tasa de filtracin (fitration rate): es el volumen de lquido filtrado por el animal por unidad de tiempo. En aqullos casos cuando los animales experimentales varan sustancialmente en tamao a lo largo de su desarrollo ontogentico, frecuentemente esta medicin toma en cuenta tambin la talla del filtrador, usualmente expresada en unidades de tamao o de peso seco. Es importante destacar que la tasa de filtracin as definida no implica que todas las partculas contenidas en el volumen filtrado efectivamente son retenidas. Cada filtrador tiene un rango de tamaos de partculas que puede retener y digerir eficientemente; los materiales ms grandes son rechazados, mientras que los ms pequeos pasan a travs de sus filtros. Un concepto ntimamente ligado al de la tasa de filtracin es el de la tasa de eliminacin (clearance rate). En trminos estrictos, la tasa de eliminacin es la cantidad de agua (por unidad de tiempo) de la cual por filtracin se eliminan todas las partculas presentes. En consecuencia, esta tasa coincide con la de filtracin slo cuando se retiene el 100% del material suspendido. Sin embargo, en la prctica ambos conceptos se suelen utilizar de manera indiferente. Tasa de pastoreo (grazing rate): generalmente se utiliza para designar a la cantidad de partculas (por ejemplo, clulas algales) consumidas por animal por unidad de tiempo. A veces se habla tambin de la tasa de predacin (predation rate), aunque este trmino es preferible reservarlo para animales carnvoros. Tasa de ingestin (ingestion rate): Generalmente utilizado para designar la biomasa total (en peso, o contenido calrico, o carbono) del material ingerido por unidad de tiempo. Suele homologarse al consumo efectivo del animal, aunque, en rigor de verdad, no todas las partculas retenidas e ingeridas son efectivamente digeridas por los filtradores. Existen tres mtodos principales para medir las tasas de filtracin de organismos acuticos. Uno de los ms comunes (que se utilizar en el presente trabajo prctico) es el del balance

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entre el alimento ofrecido al principio de un perodo de incubacin y el alimento remanente en la cmara experimental al final del mismo (ver ms abajo). El mtodo de los marcadores implica la utilizacin de partculas no naturales de tamao adecuado; su ventaja sobre el anterior consiste en que evita las complicaciones derivadas de la reproduccin de las partculas vivas (generalmente algas unicelulares) durante la experiencia, y suele facilitar la cuantificacin exacta de partculas en el medio experimental. Obviamente, slo es aplicable en aqullos casos en que el filtrador no selecciona ni discrimina el alimento natural de las partculas artificiales alternativas. Finalmente, el tercer mtodo de uso corriente consiste en el uso de partculas marcadas con istopos radioactivos (e.g., 14C o 32P). La marcacin se obtiene incubando a las partculas (algas) con el istopo y ofrecindolas luego como alimento a los animales experimentales. Las tasas de filtracin se estiman midiendo la radioactividad de los filtradores al final de la experiencia. La Tabla 1 ilustra algunos valores de tasas de filtracin calculados para varios animales planctnicos y bentnicos de agua dulce.

Organismo Brachionus sp. (Rotifera) Daphnia sp. (Cladocera) Limnocalanus sp. (Copepoda) Corbicula fluminea (Bivalvia)

Tasa de filtracin -1 -1 (ml animal da ) 0.02-2.3 5-80 1-3 700-20000

Tabla 1. Algunas estimaciones de las tasas de filtracin de organismos de agua dulce.

Las tasas de filtracin de una especie dada no son constantes, sino que dependen de numerosos factores. Como se mencionara ms arriba, la talla del animal es un factor determinante. Obviamente, en trminos absolutos los ejemplares ms grandes filtran ms agua por unidad de tiempo que los ms chicos, pero si la filtracin se calcula en funcin de la talla, los valores para los juveniles suelen ser ms altos que los de los adultos. En trminos muy generales, la relacin ml de agua filtrada por hora vs. mg de peso seco de filtrador oscila entre 0.1 y 2, aunque tambin se han registrado valores mucho ms altos. Otros factores de importancia incluyen la temperatura del medio (dentro de ciertos lmites, a temperaturas ms altas los organismos suelen ser ms activos), el estado fisiolgico de los animales, el sexo, la edad, el tipo de medio y de alimento ofrecido, etc. La concentracin de partculas alimenticias tambin desempea un rol fundamental. Generalmente, las tasas de filtracin aumentan a medida que aumenta la oferta de alimento hasta llegar a un umbral de saturacin a partir del cual la actividad de filtracin se mantiene constante o decrece marcadamente (Fig. 1B). Debe destacarse que, en condiciones de densidad de alimento variable, la tasa de filtracin no es un indicador adecuado de la tasa de ingestin. En muchos casos, an cuando el ritmo de filtracin disminuye a medida que aumenta la oferta, el ritmo de ingestin puede seguir aumentando (Fig. 1B, D) o mantenerse constante (Fig. 1C).

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Fig. 1. Diferentes tipos de respuesta en las tasas de filtracin y de ingestin ante densidades crecientes de alimento en el medio.

TRABAJO PRCTICO Organismos experimentales Para este trabajo prctico se trabajar con una o dos especies de moluscos bivalvos muy comunes en el delta del Paran y en las costas de Ro de La Plata: Corbicula fluminea y/o Limnoperna fortunei. Ambos organismos son originarios del sudeste de Asia y, presumiblemente, fueron trados a la Argentina de manera involuntaria, con el agua de lastre de los barcos transocenicos. C. fluminea invadi la Cuenca del Plata a principios de los 70, y actualmente se encuentra en todo el sistema, desde Paraguay y Brasil hasta ms al sur de Magdalena (Prov. Buenos Aires). Es un organismo tpicamente ltico que requiere aguas bien oxigenadas; vive enterrado en los fondos arenosos y fangosos con los sifones (por donde inhala y exhala el agua para la respiracin y alimentacin) expuestos y distendidos. Sus densidades el el delta inferior del Ro Paran pueden ser muy altas, hasta ms de 5000 animales por m2, y tambin es comn relativamente cerca de la costa frente a la Ciudad Universitaria. Las valvas adultas miden hasta 30-35 mm (Fig. 2).

Fig. 2. limnoperna fortunei

Limnoperna fortunei lleg a nuestras aguas a principios de los 90. Actualmente habita ambas mrgenes del Ro de La Plata y el Delta del Paran, en densidades que pueden exceder las decenas de miles de ejemplares por m2. A diferencia del anterior, Limnoperna posee un biso con el cual se adhiere a prcticamente cualquier superficie dura, incluyendo troncos, cascos de barcos, muelles, tablestacados, rocas, etc. Sus efectos sobre las plantas energticas e industriales que utilizan agua de ro (para refrigeracin) en el curso inferior del Ro Paran y ribera del Ro de La Plata son ya muy sensibles, ya que tapona las caeras y filtros colonizando masivamente las paredes de los conductos. Este animal llega a unos 2-3

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cm de largo, y es muy comn a lo largo de las costas del Ro de La Plata, incluyendo las rocas y escombros semisumergidos frente a la Ciudad Universitaria. Obtencin y acondicionamiento preliminar Los animales que se utilizarn en el TP fueron obtenidos en el campo transportados al laboratorio inmediatamente disponindose en peceras con el fondo limpio (sin sedimento), con agua corriente previamente declorada por oxigenacin durante 24 horas. Los ejemplares de Corbicula simplemente se depositarn en el fondo de la pecera (unos 2-3 animales por litro de agua). Los de Limnoperna vienen en manojos aglutinados de muchas conchas; estos manojos son separados cuidadosamente aislando a los organismos experimentales y depositndolos en recipientes cuyo fondo fue previamente cubierto con palillos de material plstico a los cuales muchos de los bivalvos terminarn adhirindose con sus bisos al cabo de algunas horas. En lo sucesivo slo se utilizarn estos organismos, descartndose a los que no se hubieran adherido. Todos los moluscos son mantenidos en las peceras con buena aireacin y alimento, cambiando el agua cada 2 3 das antes de las experiencias de filtracin. Preparacin de las experiencias Las experiencias de alimentacin se llevarn a cabo en vasos de precipitado o recipientes similares. Con el fin de evitar la sedimentacin de las algas mantenindolas en suspensin, en los recipientes se dispondr un buzo activado por medio de un agitador magntico. Como medio se utilizar agua corriente previamente declorada y bien oxigenada. Como fuente de alimento se utilizar un cultivo monoalgal (por ejemplo, de Chlorella sp. o Scenedesmus sp.), cuya concentracin en el mismo se ajustar a aproximadamente 10 000 clulas por ml de lquido. Para lograr esta dilucin en las cmaras se procede de la siguiente manera: Se estima de manera aproximada, mediante un recuento en cmara de Neubauer, la concentracin de algas en el cultivo madre. A continuacin, se agrega de este cultivo a una botella de 2 litros una cantidad de cultivo (bien homogeneizado!) tal que la concentracin definitiva en la botella llena de lquido (agua declorada y oxigenada) sea la deseada (en este caso, unas 10 000 clulas por ml). Se homogeneiza el contenido de la botella muy exhaustivamente y se toman de ella 3 muestras de 11 ml (fijadas con solucind e lugol o con formaldehdo) para proceder al recuento de algas y estimacin de la densidad obtenida (dato de densidad del tiempo cero). A continuacin, los recipientes experimentales (vasos de precipitado) se llenan con la solucin algal bien homogeneizada de la botella y se diponen sobre los agitadores magnticos. Finalmente, se ubican los animales experimentales en los vasos. En el caso de Limnoperna, los palillos plsticos a los cuales estn fijados los moluscos se suspenden en el seno del vaso sin tocar el fondo. Se procurar disponer individuos de tamao homogneo en cada una de las cmaras. Para cada experiencia se dispondr de una cmara adicional en condiciones idnticas pero sin organismos (control). Desde este momento y hasta el final de la experiencia debe verificarse de manera visual CONTINUAMENTE la actividad de los animales. Si cualquiera de ellos se cerrara o retrajera los sifones debe anotarse el tiempo que dur este estado ya que el perodo de inactividad filtrante debe ser descontado del tiempo total para el clculo de los resultados. Se permitir a los animales que se alimenten durante un tiempo predefinido (por ejemplo, 30 minutos).

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Fig. 3. Diseo general de las experiencias de filtracin.

Al cabo de este tiempo se extraern los moluscos y se volvern a muestrear inmediatamente todas las cmaras estimndose nuevamente las densidades algales finales en cada una de ellas por medio de recuentos. Los animales experimentales extrados de las cmaras sern medidos (desde el umbo hasta el borde opuesto de la concha). Posteriormente se calcular el peso seco de los tejidos blandos, estimando la diferencia entre el peso seco total y el peso seco de las valvas solamente. Para ello el material ser secado a aproximadamente 60C hasta peso constante (en trozos de papel de aluminio previamente tarados), y pesado. Una vez calculado el peso seco total se eliminarn los tejidos blandos disolvindolos con una solucin de Na(OH) al 0.7 % y se volver a secar para calcular el peso seco de las valvas. Por otro lado, se medirn unas 30-50 clulas algales (seleccionadas al azar) de las utilizadas con el fin de estimar su biovolumen.

Introduccin de variables experimentales Dependiendo de la cantidad de experiencias a realizar, se ensayarn varias otras fuentes de variabilidad para comparar los resultados obtenidos y analizar la alimentacin de estos moluscos en condiciones ambientales diversas. Por ejemplo, pueden ensayarse 2 o ms temperaturas diferentes, una de verano (alrededor de 27-28C), y otra de invierno (10-12C), con el fin de estimar la actividad alimentaria en dos pocas del ao diferentes; o tallas

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dismiles de filtradores. Por otro lado, tambin es de inters comparar los resultados con concentraciones algales diferentes, con el fin de verificar qu tipo de respuesta presentan los animales frente a concentraciones de saturacin.

Clculo de los resultados Las tasas de filtracin se calculan sobre la base de dos estimaciones de las densidades algales, asumiendo que las tasas de alimentacin son proporcionales a las concentraciones de alimento y, en consecuencia, que las concentraciones de clulas decrecen exponencialemnte con el tiempo. Sobre la base de estas premisas, la tasa de filtracin (F) puede ser calculada de acuerdo a la siguiente expresin: F = v/N [(log Cie - log Cfe)/0.434 t] donde: Cie = concentracin inicial de algas en la cmara experimental (cl. ml-1); Cic = concentracin inicial de algas en el control (cl. ml-1); Cfe =Concentracin final de algas en la cmara experimental (cl. ml-1); Cfc = concentracin final de algas en el control (cl. ml-1); v = volumen de medio utilizado (ml); N = Cantidad de animales experimentales utilizados; t = tiempo total de incubacin (horas). Si la concentracin de algas en el control tambin se hubiese modificado al cabo del tiempo t, y asumiendo que esta concentracin aument o disminuy exponencialmente, F se calcula reemplazando en la frmula anterior Cie por Cfc: F = v/N [(log Cfc - log Cfe)/0.434 t] La concentracin media de algas en el recipiente experimental durante la incubacin se calcula como: (Cfe - Cie) / (ln Cfe - ln Cie) Cuando los valores de clulas inicial y final en el control son diferentes, la tasa de pastoreo de los animales (G), en clulas por individuo por hora, es: G = (v f / N) {(Cfe-Cie)/[(k-f)t]} Donde k, la tasa de crecimiento de las algas, se estima como: k = [ln (Cfc/Cic)] / t y f, el coeficiente de alimentacin: f = (F N)/v Si Cic=Cfc, entonces G se mide como: G = [v (Cie - Cfe)] / N t Todos los clculos anteriores estn basados sobre la presuncin de que las concentraciones iniciales de algas en el experimento y en el control fueron idnticas. Sin embargo, si los recuentos iniciales arrojaran valores diferentes para ambos, en aqullos

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casos en que se verifica crecimiento algal en el control, el valor inicial experimental (Cie) debe ser corregido utilizando el dato del control. Por ejemplo, suponendo que: Cie = 10 000; Cic = 13 000; Cfc = 18 000. Ello significa que en el control hubo un crecimiento algal del 38% (de 13 000 a 18 000 algas por ml). En consecuencia, el valor de Cie debe ser incrementado en este porcentaje (i.e., Cie = 13 800) antes de proceder a efectuar los clculos, ya que presumiblemente tambin aqu hubo crecimiento (no detectado debido al consumo por parte de los animales). Tanto las tasas de filtracin (F), como las de pastoreo (G) sern expresadas por animal experimental, indicando las tallas utilizadas. Adems, con los datos de peso seco de los moluscos obtenidos, se calcularn los mismos valores por mg de peso seco. Las mediciones de las algas sern usadas para estimar el biovolumen promedio de las clulas y, mediante los factores de conversin necesarios, su contenido en carbono orgnico. Esta informacin se utilizar para estimar el consumo de los animales en volumen celular y en carbono orgnico por animal (o por mg de peso seco del mismo) por unidad de tiempo. Ejemplo. Suponiendo que: Cie = 10 000 cl. ml-1; Cic = 10 000 cl. ml-1; Cfe = 1 000 cl. ml-1; Cfc = 10 000 cl. ml-1; v = 3 000 ml; N = 2; t = 1 hora. F = v/N [(log Cfc - log Cfe)/0.434 t] F = 3000/2 [(log 10 000 - log 1 000)/0.434 1] = 3456 ml por animal por hora. k = [ln (Cfc/Cic)] / t k = [ln (10 000/10 000)] / 1 = 0 f = (F N)/v f = (3456 2)/3000 = 2.304 G = [v (Cie - Cfe)] / N t G = [3 000 (10 000 - 1 000)] / 2 1 = 13 500 000 clulas por animal por hora.

Ventajas y desventajas del mtodo Este mtodo es relativamente sencillo, no requiere de equipos sofisticados especiales, y es fcilmente implementable. Adems, permite experiencias de varias horas de duracin, frecuentemente necesarias en los casos de animales que tienen ritmos peridicos de actividad, fluctuaciones diarias, etc. Por otro lado, una de sus desventajas ms importantes es que los clculos utilizados slo son vlidos si las tasas de filtracin son independientes de la concentracin de alimento, situacin que raramente se da en la naturaleza (ver Fig. 1). El error en realidad no es muy importante, pero aumenta a medida que crece la diferencia entre Cie y Cfe. Otro problema lo presentan las clulas algales ingeridas pero no digeridas y vueltas a egestar en el intervalo de la incubacin, en cuyo caso vuelven a aparecer en los valores de Cfe, an cuando

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hubieran sido filtradas. Finalmente, la premisa de que el control es un buen indicador del crecimiento algal en las cmaras experimentales suponiendo alimentacin nula, no siempre es correcta. Por ejemplo, las excretas de los animales pueden enriquecer el medio experimental activando de esta manera la reproduccin de las algas.

Bibliografa
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Equilibrios alternativos en lagunas vegetadas


INTRODUCCION Estudios realizados en la ultima dcada en cuerpos de agua someros vegetados, evidenciaron que estos ecosistemas pueden presentar dos estados de equilibrio, uno de aguas claras y otro de aguas turbias (Scheffer et al., 1993). Existiran varios mecanismos ecolgicos involucrados, y los mismos parecen girar en torno a la interaccin entre la vegetacin arraigada y la turbidez (Fig.1). La vegetacin tiende a incrementar la transparencia del agua, mientras que una alta turbidez inhibe el crecimiento de macrfitas sumergidas.

Fig. 1. Mecanismos de retroalimentacin que pueden causar un estado dominado por la vegetacin y un estado de turbidez como equilibrios alternativos. El efecto cualitativo de cada una de las vas en el diagrama puede ser calculado considerando los signos a lo largo del recorrido. Esto indica que tanto el estado vegetado como el turbio se refuerzan a s mismos.

Efectos de la vegetacin La presencia de la vegetacin acutica altera el funcionamiento de los lagos someros. Las plantas acuticas, o macrfitas, pueden diferir mucho en sus formas, y estas diferencias son importantes con respecto al rol que ocupan en los ecosistemas lacustres. Entre todos efectos, el de disminuir la resuspensin de los sedimentos ha sido ampliamente estudiado, y hay muchas evidencias de la tendencia del agua a ser menos turbia en presencia de vegetacin acutica (Scheffer, 1998). En lo que respecta a los nutrientes en s, el rol de las macrfitas acta en forma compleja en distintos sentidos. Por un lado, producen detritos que son mineralizados provocando la liberacin de fsforo, adems de generar condiciones de anoxia que inducen la liberacin de fsforo que se encontraba ligado al hierro, incrementando la concentracin de las formas biodisponibles. Pero por otra parte, las macrfitas reducen la turbulencia, lo que previene la

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resuspensin y limita la difusn de este nutriente fuera de los sedimentos; adems las macrfitas pueden obtener gran parte de sus nutrientes de los sedimentos y no de la columna de agua. De tal manera, en el balance final, las macrfitas actuaran como trampa de fsforo, disminuyendo la concentracin del mismo en la columna de agua. En lo que respecta a su influencia sobre otras comunidades, las plantas acuticas pueden influir negativamente sobre la abundancia de fitoplancton, ya sea por competencia por luz o nutrientes, o por la liberacin de sustancias alelopticas que inhiben el crecimiento algal (Izaguirre y Vinocur, 1994). Tambin sirven de sustrato natural para el establecimiento de abundantes algas perifticas, las que tambin compiten con el fitoplancton por los nutrientes (Hansson, 1988). Por otro lado, aquellos lagos vegetados poseen comunidades animales ms ricas que los lagos no vegetados. Varios estudios indican que la densidad de zooplancton que se alberga en las zonas vegetadas, sera capaz de controlar las poblaciones de fitoplancton presentes.

Fig. 2. Representacin equemtica del porcentaje del rea del lago cubierta por vegetacin acutica en funcin de cambios en la profundidad del disco de Secchi (transparencia del agua) o turbidez en lagos hipotticos de fondo chato vs. lagos con fondo en V (esquemas a la izquierda), tal como se predice sobre la base de efectos empricos derivados de la transparencia y la turbidez sobre la profundidad mxima habitada por plantas (Zmax, representada en los dos diagramas superiores).

TRABAJO PRCTICO En este trabajo prctico se tendr en cuenta el efecto global de la vegetacin sobre la turbidez, sin tener en cuenta cada factor individualmente. Por un lado se analizar el modelo grfico propuesto por Scheffer et al. (1993), y por otro lado se aplicar un modelo de simulacin matemtico para analizar las interacciones entre vegetacin y turbidez. Para ello hay que tener en cuenta que la turbidez ejerce un efecto negativo sobre la

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vegetacin acutica sumergida. Varios estudios confirman que la mxima profundidad habitada por las macrfitas (Zmx) se encuentra positivamente relacionada con la transparencia del agua. En la prctica, el efecto de la turbidez sobre la abundancia de la vegetacin depende de la forma del lago. Este concepto puede entenderse fcilmente si se tiene en cuenta que la mxima profundidad habitada aumenta linealmente con la transparencia y es inversamente proporcional a la turbidez (Fig. 2). De este modo, se tendr en cuenta que todas partes del lago con profundidades mayores a (Zmx) no se encontrarn vegetadas, mientras que las reas del lago con profundidades menores se encontrarn completamente cubiertas por macrfitas. En la Fig. 2 se puede ver el efecto de la turbidez particularmente para un lago somero. Por otro lado, hay que tener en cuenta que en las regiones templadas hay variaciones importantes de la vegetacin acutica a lo largo del ao. Varios estudios muestran una correlacin inversa entre el ciclo de la vegetacin y la dinmica estacional del fitoplancton (Engel, 1988), mostrando que en los lagos someros pueden alternarse perodos de aguas claras y de aguas turbias con altas densidades de fitoplancton. Este comportamiento podra explicarse por el hecho de que ambas situaciones representaran estados estables alternativos entre los cuales oscilara el sistema. Cabe sealar que en los lagos someros la existencia de estados estables alternativos se ve limitada a un rango de nutrientes intermedio, ya que los lagos oligotrficos son raramente turbios y una carga elevada de nutrientes excluye casi siempre la dominancia de la vegetacin. El modelo grfico Un modelo grfico alcanza para explicar someramente cmo la concentracin de nutrientes y el nivel de agua de un lago pueden afectar las propiedades de estabilidad del ecosistema. El modelo se basa en tres supuestos: 1. la turbidez aumenta con el nivel de nutrientes 2. la vegetacin reduce la turbidez por los mecanismos ya sealados 3. la vegetacin desaparece completamente cuando se supera un valor crtico de turbidez. Teniendo en cuenta los dos primeros supuestos, los estados de turbidez pueden obtenerse en funcin de la concentracin de nutrientes (Fig. 3). Aqu se observa claramente que un estado se corresponde con la situacin de dominancia de macrfitas y otro con la condicin no vegetada. Por encima de un valor crtico de turbidez, las macrfitas estaran ausentes y la lnea de equilibrio relevante sera la superior. Por debajo de esta turbidez, la curva que valdra es la inferior. En el rango de valores de nutrientes intermedios existen dos estados estables alternativos, uno con macrfitas y otro ms turbio no vegetado. A bajos valores de nutrientes slo existe el estado dominado por macrfitas, mientras que en la situacin inversa slo existe un estado carente de vegetacin.

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Fig. 3. Equilibrios de turbidez alternativos causados por la desaparicin de la vegetacin acutica sumergida cuando un valor crtico de turbidez es excedido. Las flecha indican la direccin del cambio cuando el sistema no se encuentra en uno de los dos estados alternativos estables

El modelo matemtico de simulacin Este modelo tiene en cuenta nicamente cuatro parmetros: E0: turbidez del lago en ausencia de la vegetacin. Depende de la biomasa fitoplanctnica y de la concentracin de slidos suspendidos. Al depender de la biomasa algal depende indirectamente del nivel de nutrientes. Hv: abundancia de vegetacin necesaria para reducir en un 50% la turbidez del lago. Un valor pequeo de este parmetro indica un alto impacto de la vegetacin sobre la turbidez. p: intensidad de respuesta de la abundancia de vegetacin a la turbidez. Debera ser mayor si el perfil de profundidad del lago es playo. He: turbidez a la cual la mitad del rea del lago se encuentra vegetada. El valor de este parmetro debera decrecer con la profundidad media del lago. La disminucin de la vegetacin con la turbidez sigue una curva sigmoidea que presenta la siguiente forma: V = He p/ Ep + He p Tanto p como He afectan la isoclina de vegetacin. Por otro lado, una funcin inversa de Monod puede ser usada para describir el efecto de la vegetacin sobre la turbidez (E) E = E0 Hv/ Hv +V Siendo V la fraccin del lago cubierta por vegetacin. En este caso puede observarse que tanto E0 como Hv afectan la isoclina de turbidez.

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INTERPRETACIN DE LAS ISOCLINAS EN EL MODELO Isoclinas de vegetacin (dV/dt = 0) En el siguiente grfico vemos como a medida que se incrementa la turbidez, la vegetacin decrece en forma sigmoidea con el aumento de la turbidez. Para los valores mnimos de turbidez la mayor parte del lago est cubierto por macrfitas. Por el contrario, a valores mximos de turbidez el lago no se halla vegetado. Se puede apreciar en la figura que la forma de la curva depende del valor de la turbidez a la cual la mitad del lago est vegetado (He). Este parmetro aumenta a medida que disminuye la profundidad del lago. De tal manera, de esto se desprende que cuanto ms somero es el cuerpo de agua se incrementa el rango de valores de turbidez para el cual el lago est totalmente vegetado y disminuye la intensidad de la respuesta de la vegetacin frente a cambios en la transparencia.

Fig. 4. Isoclinas de vegetacin (dV/dt=0) resultantes de cambios en el valor del parmetro He en el modelo matemtico de interaccin vegetacin-turbidez, asumiendo E0=6.

Isoclinas de turbidez (dE/dt = 0) En el grfico se aprecia una curva cncava decreciente, cuyo valor mximo representa la turbidez correspondiente a la ausencia total de macrfitas. La forma de esta curva depende por un lado de la abundancia de vegetacin necesaria para reducir la turbidez al 50 % (Hv). Este parmetro depende de la profundidad del lago y del tipo de vegetacin. Bajos valores Hv implican un alto impacto de la vegetacin sobre la turbidez. En cuerpos de agua ms someros el impacto de la vegetacin en la transparencia es mayor. Adems, la forma de la curva depende de la turbidez del lago en ausencia de vegetacin (E0) y la misma depende bsicamente de la concentracin de nutrientes. En la figura se puede apreciar que a elevadas concentraciones de nutrientes la turbidez es mayor a igual cobertura vegetal.

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Fig. 5. Izquierda: Isoclinas de turbidez (dV/dt=0) resultantes de cambios en el valor del parmetro E0 en el modelo matemtico de interaccin vegetacin-turbidez, asumiendo Hv=0.2. Derecha: Isoclinas de turbidez (dV/dt=0) resultantes de cambios en el valor del parmetro Hv en el modelo matemtico de interaccin vegetacin-turbidez, asumiendo E0=0.

Isoclinas de vegetacin y turbidez combinadas Los puntos de interseccin entre ambas isoclinas representan estados de equilibrio estacionario, es decir de cambio cero para ambas variables en cuestin (cobertura vegetal y turbidez). Estos estados pueden ser estables (EEE) o inestables (EEI). Son estables cuando funcionan como centro atractor del sistema, de modo tal que ante pequeas perturbaciones que alejan al sistema de este punto, el sistema tiende a volver a la situacin original. Por el contrario, son inestables cuando funcionan como repulsor del sistema, es decir que pequeas perturbaciones son suficientes para llevar al sistema a un estado diferente al inicial.

Fig. 6. Isoclinas de turbidez (dE/dt=0) y de vegetacin (dV/dt=0) combinadas asumiendo E0=6, Hv=0.2, He=2, V=1 y E=5. Los puntos de interseccin representan estados de equilibrio..

Practicando con el modelo En el TP se analizarn las respuestas del sistema antes distintas condiciones iniciales. Se plantearn como condiciones iniciales una cobertura vegetal del 10 % y otra del 100 %, y en cada caso se analizarn situaciones de turbidez creciente. Ejercicios: 1) Se identificarn los puntos de equilibrio estables e inestables. 2) Qu pasa con estos estados de equilibrio si la isoclina de turbidez se desplaza hacia la

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derecha (gran aumento de la carga de nutrientes en el lago)? Y si la isoclina de turbidez se desplaza hacia la izquierda (concentraciones muy bajas de nutrientes)? 3) De acuerdo a lo observado, en que situaciones es posible identificar estados de equilibrio alternativos? Evidencia con datos obtenidos en el campo El siguiente grfico evidencia la variacin de la transparencia medida por medio del disco de Secchi en funcin de la biomasa de Scirpus sp. en la laguna El Burro (Pcia. de Buenos Aires). Se graficaron los datos obtenidos a lo largo de varios aos durante el curso de Limnologa desde 1984. Discutir las posibles causas de los cambios observados. Por otro lado, a partir de datos obtenidos de la bibliografa (Izaguirre y Vinocur, 1994) se grafic la relacin entre la transparencia (medida por el disco de Secchi) y la concentracin de fosfatos. Se observa una relacin inversa entre ambos parmetros.

Bibliografa
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Comunidades dulceacucolas
Indicaciones y comentarios generales acerca de su muestreo y ulterior procesamiento del material. En el desarrollo del curso de limnologa se estudiarn varios ambientes lnticos y lticos; cada una de las "comunidades" o fracciones de las biocenosis de estos ambientes se obtiene y procesa por medio de mtodos particulares, especializados y adaptados a los requerimientos y caractersticas de la "comunidad" dada. En las pginas que siguen se exponen lineamientos generales de utilidad para estos trabajos.

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Plancton
Es el conjunto de organismos que se hallan en suspensin en el seno del agua a cualquier profundidad. Clsicamente este trmino rene a aquellos animales y plantas cuyos movimientos son nulos o muy dbiles como para contrarrestar el efecto de las corrientes. De acuerdo al tamao puede clasificarse como sigue: Picoplancton: menos de 2 m Nanoplancton: 2 a 20 m Microplancton: 20 a 200 m Mesoplancton: 200 m a 2 mm Macroplancton: ms de 2 mm

COLECCION DE PLANCTON INTRODUCCION La gran mayora de los estudios biolgicos se basa sobre muestras. En el caso del plancton, se trabaja sobre muestras del ambiente correspondiente - es decir el agua -, que a su vez contiene a los organismos objeto del anlisis. Para que estas muestras sean un reflejo adecuado del ambiente que se estudia y, en consecuencia, para que permitan inferir conclusiones razonablemente correctas, deben satisfacer una serie de condiciones. Algunas de las ms importantes son que la densidad de organismos en la muestra sea representativa de la densidad original in situ (o que permita estimarla correctamente), que las proporciones entre los diferentes plncteres en la muestra coincidan con aqullas en el ambiente, y que los organismos recogidos se encuentren en un estado razonable de preservacin. El que estos requisitos sean satisfechos depende, en primer lugar, de los aparatos de muestreo que se utilicen y de su operacin. Gran parte de los problemas relacionados con la coleccin de muestras de plancton estn relacionados con la obtencin de adecuadas cantidades de organismos de un medio en el cual muchos de stos no estn suficientemente concentrados. Para algunos de los plncteres de menor tamao, en especial los fitoplncteres, la densidad en el medio natural es usualmente alta de manera que no es necesario recurrir a su extraccin selectiva (es decir, extraer proporcionalmente ms partculas que agua), o concentracin. Sin embargo, la densidad natural de muchos otros es baja, y frecuentemente no es suficiente con simplemente tomar una porcin de agua + organismos, sino que hay que concentrar a estos ltimos antes, durante o despus de su obtencin. Estos organismos menos abundantes son frecuentemente los de mayor tamao, de sentidos ms desarrollados y ms mviles, lo que a su vez genera el problema de que reaccionan activamente frente a los aparatos muestreadores huyendo de ellos. Los microplncteres poco frecuentes, a su vez, presentan otro problema diferente: las cantidades que se obtienen sin concentrarlos previamente son insuficientes para el estudio, mientras que la concentracin durante el muestreo requiere redes o tamices de poro tan chico que se colmatan inmediatamente. La importancia de las tcnicas de muestreo del plancton es tal que el tema ha sido objeto de varios cientos de publicaciones desde fines del siglo pasado hasta la actualidad. Las revisiones de UNESCO (1968), Kiselov (1969), Jossi (1970); Schwoerbel (1970), Lamotte y Bourliere (eds., 1971), Edmondson y Winberg (eds., 1971), Mordukhai-Boltovskoy (ed., 1975), Bottrell et al. (1976), Sournia (ed., 1976), Edler (ed., 1979); Boltovskoy (ed., 1981),

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Vinogradov (ed., 1983); Omori e Ikeda (1984), dan una buena idea de la complejidad de este asunto. Empero, los cientos de sistemas de muestreo de plancton propuestos pueden ser sintetizados en tres variantes bsicas: coleccin por medio de redes, por medio de bombas de succin, y por medio de botellas. Existen tambin aparatos que combinan caractersticas de ms de uno de los nombrados, as como otros que detectan y cuentan partculas in situ, sin extraerlas del medio (ver San Feliu y Margalef, 1968; Denman y Mackas, 1977; Herman y Dauphinee, 1980; Boltovskoy, ed., 1981; Herman y Mitchell, 1981; Vanderploeg, 1981; Hopkins et al., 1982). Sin embargo, con la excepcin de las tcnicas acsticas que han tenido cierto desarrollo para la evaluacin de existencias de peces (adultos y larvales), y de algunos sistemas automatizados para el recuento de partculas sestnicas, estos mtodos especiales tienen escasa difusin en las aguas interiores. La breve resea que sigue solamente tiene por objeto introducir al lector a los aspectos ms generales acerca de este tema; para un tratamiento ms detallado deben consultarse las publicaciones mencionadas a lo largo del texto. En las referencias bibliogrficas anteriores a 1980 se ha dado preferencia a los manuales y trabajos recopilativos de ndole general, mientras que para citas ms modernas se han incluido trabajos ms puntuales.

REDES Se trata de conos de tela de nylon (tambin suelen utilizarse otros materiales como el perlon, seda, polipropileno, polister, pero son menos recomendables que el nylon), de porosidad uniforme y estable que, al ser pasados por el seno del agua retienen las partculas y escurren el lquido. La figura 1 ilustra los componentes principales de una red de plancton con cono reductor.

Fig. 1. Esquema generalizado de los componentes de una red de plancton con cono reductor. 1) Cable de remolque; 2) Grillete giratorio; 3) Bridas; 4) Aro de metal (boca de la red); 5) Cuerpo de la red (rea filtrante); 6) Recipiente colector o copo; 7) Cono reductor (tela no filtrante); 8) Cable de seguridad (une el cable de remolque con el colector).

Las redes suelen utilizarse con la finalidad de llevar a cabo estudios cualitativos exclusivamente, en cuyo caso no es de fundamental importancia conocer el volumen de agua que se ha filtrado para obtener la muestra en cuestin. Para este tipo de estudios las redes normalmente son de tamao reducido - para facilitar su manipulacin -, y pueden construirse de acuerdo al esquema y relaciones morfomtricas indicados en la figura 2. El aro metlico que define la boca puede llevar un asa o manija lateral, o tres bridas y un cabo de arrastre. El copo o recipiente colector puede ser ciego (sin ventanas para el drenaje del agua; Fig. 3A, B), y fcilmente desmontable para su vaciado. Alternativamente, en calidad de copo pueden utilizarse los frascos de almacenamiento de las muestras directamente, fijados al extremo de la red por medio de una abrazadera que ajusta sobre una tapa (roscada) desfondada (Fig. 3A); en este caso no es necesario trasvasar las muestras para

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su almacenamiento y se utiliza un nuevo frasco con cada lance.

Fig. 2. Esquema del molde para la confeccin de redes planctnicas para colectas no cuantitativas. r1: radio de la boca; r2: radio del extremo posterior; h2: largo del lado del cono (costura); h3: largo del extremo que se elimina para acoplar el copo; z: ngulo apical del cono desarrollado. (De Boltovskoy, ed., 1981).

Tanto para estas redes, como para aqullas que permiten estimar la cantidad de agua filtrada durante el lance (ver ms adelante), el tamao de los poros de la malla debe ser alrededor de un 25% menor que la dimensin mnima (largo, ancho o espesor) de los organismos ms pequeos que se pretende colectar para asegurar una retencin cercana al 100%. De todas formas, las redes no sirven para el trabajo con los organismos pequeos y muy lbiles, como por ejemplo los ciliados, ya que estas clulas se deforman y pasan a travs de poros mucho ms chicos que el organismo, o son totalmente destruidas por la presin del agua sobre la tela. En estudios limnolgicos suelen utilizarse mallas de 20-25 m para fitoplancton (obviamente, estas redes no capturan las fracciones nano y picoplanctnica, normalmente de gran importancia energtica en los ecosistemas dulceacucolas), y de alrededor de 40 a 65 m para zooplancton. El tipo de tejido ms conveniente es el simple (sin hilos dobles ni retorcidos), monofilamento (cada hilo formado por una nica hebra, y no por varias hebras paralelas). Para estudios que requieran la cuantificacin del material planctnico (clculo de la cantidad de individuos por unidad de volumen de agua filtrada) deben tenerse en cuenta una serie de precauciones adicionales: El volumen del agua que pas a travs de una red planctnica al cabo de un lance depende de varios factores: distancia recorrida, velocidad del remolque, tamao (longitud y boca) y forma de la red y tamao de sus poros, porosidad de la malla utilizada, densidad y tamao de las partculas en suspensin en el medio, etc. Estimar el volumen filtrado sobre la base del volumen del cilindro que define la boca de la red en su pasaje por el agua es totalmente incorrecto, ya que usualmente entra en la misma solamente una fraccin (a veces menos del 50%) del lquido ubicado frente al muestreador (ver ms adelante). Las redes que sern utilizadas en arrastres para muestreos cuantitativos deben ser especialmente diseadas y construdas teniendo en cuenta una serie de consideraciones, para cuyo anlisis es conveniente definir una serie de conceptos y variables:

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Fig. 3. Diferentes tipos de recipientes colectores (copos) para redes de plancton. 1) Extremo de la red; 2) Abrazadera; 3) Collar de lona inferior; 4) Tapa rgida de frasco a rosca, desfondada; 5) Frasco de plstico; 6) Pioln o elstico; 7) Embudo de vidrio; 8) Tubo de goma; 9) Pinza de Mohr; 10) Recipiente de metal o plstico; 11) Fondo de malla de plancton; 12) Ojales para el cable de seguridad; 13) Recipiente de PVC; 14) Ventana de drenaje lateral fija; 15) Ventana de drenaje lateral con malla intercambiable; 16) Acanaladura para alojar la abrazadera; 17) Grifo; 18) Cilindro de material rgido; 19) Copo blando (bolsa de malla de plancton); 20) Anillo de metal o plstico; 21) Cilindro de metal o plstico; 22) Agarraderas para destornillar el fondo del recipiente colector; 23) Fondo desmontable. (De Boltovskoy, ed., 1981).

A: rea de la boca (normalmente circular) de la red; a: superficie total de tela en la red; a1: superficie de tela en la seccin cilndrica anterior de las redes cilindro-cnicas; a2: superficie de tela en la seccin cnica posterior de las redes cilindro-cnicas; F: eficiencia de filtracin de una red, que equivale al cociente entre el volumen del cilindro que define la boca circular de la red en su paso por el agua, y el volumen de agua que fue efectivamente filtrado por la red (es decir que entr por la boca y sali por los poros); h1: altura de la seccin cilndrica anterior de las redes cilindro-cnicas; h2: altura de la seccin cnica posterior de las redes cilindro-cnicas; He: volumen de agua que entra en la red en el transcurso de un lance y es filtrado; Ho: volumen del cilindro que define la boca circular de la red en su paso por el agua; M: rea filtrante total de la red; n: cantidad total de poros en la tela de una red; R: relacin de superficie filtrante; r1: radio de la boca de la red; r2: radio del extremo posterior de la red, equivalente al radio del recipiente colector o copo; : porosidad de la tela de la red; w: longitud del lado (cuadrado) del poro de la tela de la red. La porosidad de la tela () se deduce:

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= w2 n / a, donde w=longitud del lado del poro (cuadrado); n=cantidad total de poros en la red; y a=superficie total de tela en la red. En consecuencia, el rea filtrante total (M) estar definida por: M=a La relacin de superficie filtrante (R) es: R = M / A = a / A, donde A = superficie de la boca de la red. La eficiencia de filtracin (F) es: F = He / Ho, donde He=volumen de agua que entra en la red y es filtrado, y Ho=volumen de agua que es ofrecido a la boca de la red (equivalente al cilindro que define el aro de la boca en su recorrido por el seno del lquido).

Fig. 4. Representacin esquemtica del flujo de agua frente a redes de diferente diseo. A) Red cnica corta, la desviacin angular del agua frente a la boca es considerable, F<<1; B) Red cnica larga, desviacin angular de la corriente menor, F<1; C) Red cilindro-cnica, no hay desviacin angular de la corriente, F=1; D) Red con cono reductor (cnico-cnica), se produce desviacin angular de la corriente hacia el interior de la boca, F>1. (Modificado de Tranter y Smith, 1968).

Uno de los problemas ms comunes en los muestreos es la colmatacin de la malla (oclusin de los poros con partculas) antes de finalizar el lance. Obviamente, cuanto mayor sea A y menores , a, M y R, mayor ser el efecto de la colmatacin. El inconveniente tambin es lgicamente ms pronunciado con redes de malla ms cerrada que con mallas abiertas. La colmatacin no solamente reduce sensiblemente el volumen muestral: pasado cierto lmite torna inestables y errticas las respuestas de los flujmetros (ver ms adelante) por la reduccin del caudal.

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Las caractersticas hidrodinmicas de las redes de diferente diseo varan con la forma general del aparato. En las cnicas simples la eficiencia inicial es menor que 1, ya que parte del agua es rechazada (Fig. 4A, B); en las cnicas con cono reductor anterior la eficiencia es mayor que 1 (Fig. 4D); y en las cilindro-cnicas es aproximadamente igual a 1 (Fig. 4C). Estas ltimas son las ms recomendables ya que, tericamente, al comenzar el lance aceptan toda el agua ofrecida frente a la boca (F=1). Adems, sus caractersticas hidrodinmicas contribuyen al autolimpiado de la tela (sobre todo en la parte cilndrica anterior) de tal manera que las partculas retenidas tienden a concentrarse en el copo, y no sobre las paredes de la red. Al disear una red el valor R tratar de mantenerse lo ms alto posible (el lmite est dado por la longitud prcticamente aceptable del muestreador ya que, a dems valores constantes, la longitud total aumenta proporcionalmente con el aumento de R), y la relacin de superficies entre la parte cilndrica y la cnica debe oscilar en alrededor de 1 a 2 1 a 3, respectivamente. Los clculos requeridos para confeccionar una red con las caractersticas mencionadas sern ilustradas con un ejemplo: Supnganse las siguientes parmetros: (porosidad) = 0,30; r1 (radio de la boca) = 0,15 m; r2 (radio del copo) = 0,03 m; R = 6; a1 (superficie de tela en el cono anterior) = 1/3 de a (superficie filtrante total); a2 (superficie de tela en el cilindro) = 2/3 de a. Dado que: R = a / A, entonces a = R A / , donde: A = r12 Y reemplazando por los valores propuestos: a = (6 3,1416 0,0225) / 0,3 = 1,4 m2 que es la superficie de tela que deber tener la red. Un tercio de este valor corresponde al cilindro anterior (a1): a1 = 0,333 1,4 = 0,46 m2 y su altura (h1) se deduce: a1 = 2 r1 h1; h1 = a1 / (2 r1) = 0,46 / (2 3,1416 0,15) = 0,49 m La superficie del cono posterior (a2) es 2/3 de a: a2 = 0,666 1,4 = 0,93 m

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y su altura (h2) se deduce mediante la frmula del rea lateral del cono truncado: a2 = (r1 + r2) [h2 + (r1-r2)] entonces: h2 = {[a2 / ( (r1 + r2))] - [r1 - r2]} y reemplazando por los valores elegidos: h2 = {[0,93/(3,1416 (0,15+0,03))]-[0,15-0,03]} = 1,23 m En conclusin, la red cilindro-cnica con R=6, boca de 30 cm de dimetro, copo de 6 cm de dimetro y malla de porosidad de 0,30 debe tener una longitud total de alrededor de 170 cm, 50 cm para el cilindro anterior y 120 cm para el cono posterior. Si las aguas a muestrear tuvieran una gran cantidad de seston, R debe ser aumentado (alargando la red y/o disminuyendo el dimetro de su boca).

Fig. 5. Flujmetro digital para redes de plancton.

Estas redes cuantitativas deben estar provistas de copo con ventanas de drenaje del agua cubiertas con tela (preferiblemente metlica) de igual tamao de poro que la red misma (Fig. 3D, E, F, H). La estimacin del volumen de agua que filtra la red en cada lance debe efectuarse por medio de flujmetros - aparatos munidos de labes que giran impulsados por el agua. Esta rotacin es cuantificada digitalmente o por otros medios (Fig. 5). Antes de ser utilizados, as como entre campaas, los flujmetros deben ser calibrados. Esto se hace fijando el aparato a algn objeto flotante y remolcndolo en aguas totalmente quietas a diferentes velocidades. Se confecciona una tabla con los datos obtenidos (Tabla 1). Con estos datos se construye la curva de calibracin correspondiente.

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Tabla 1. Datos correspondientes a la calibracin de un flujmetro. (De Boltovskoy, ed., 1981).

Fig. 6. Curva de calibracin de un flujmetro, basada sobre los datos de la Tabla 1.

Cuando se requieren muestras de estratos de agua profundos pueden utilizarse redes con mecanismos de cierre o de apertura y cierre. Una de las que ms difusin ha tenido en estudios hidrobiolgicos es la red de Clarke-Bumpus (Fig. 7), que sirve para arrastres horizontales, oblicuos o verticales, y est provista con una tapa que permite ser abierta y cerrada a las profundidades deseadas por medio de mensajeros (pesos de metal que se envan desde la superficie deslizndolos sobre el cable o cabo de remolque). Las redes de tipo Nansen y similares con su mecanismo correspondiente (Fig. 8) permiten arriar el muestreador verticalmente (con el copo lastrado, dirigido hacia abajo) hasta la base del nivel a barrer, izarla hasta el techo del mismo (abierta, filtrando agua), cerrarla por estrangulamiento de la parte anterior por medio de un mensajero y continuar izando hasta la superficie sin contaminar el material obtenido en profundidad con organismos ms superficiales. Existen tambin varios otros dispositivos que permiten abrir y cerrar las redes en profundidad (ver Boltovskoy, ed., 1981; Weikert y John, 1981; Heron, 1982; Tuel y Knauer, 1982; etc.). Al realizar un lance de red deben registrarse las lecturas inicial y final del flujmetro, y el tiempo total que dur el arrastre. Suponiendo que la red fuera la del ejemplo anterior (30 cm de dimetro de boca), que el arrastre hubiera durado 120 segundos, y que el total de vueltas del flujmetro ascendiera a 480, se calcula el valor de revoluciones por segundo (en este caso, 480/120=4), y con este dato se obtiene, en la curva, la medida metros por revolucin

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correspondiente (aproximadamente 0,1175, ver Fig. 6). Ello significa que, a la velocidad utilizada, por cada revolucin del flujmetro "se recorrieron" 0,1175 m; entonces, multiplicando las revoluciones totales acumuladas por 0,1175 se obtiene la "distancia recorrida" en funcin del agua que efectivamente ha entrado en la red durante el lance (56,4 m; la distancia real recorrida por la red ser mayor que sta). Este dato de distancia es la altura del cilindro de 0,3 m de dimetro que defini la boca de la red en su recorrido por el agua: Vol. cilindro = r h que para los valores dados es: 3,1416 0,15 56,4 = 3,99 m3 que es la cantidad de agua que filtr la red. Dado que entre las velocidades que normalmente se utilizan para el arrastre la curva de calibracin generalmente se aproxima a una recta paralela al eje de las abcisas, en la prctica suele prescindirse de su uso, en cuyo caso tampoco es necesario tomar el tiempo de duracin de cada arrastre. Los flujmetros se montan en la boca de la red por medio de tres cabos tensos fijos al aro metlico, excntricamente, a mitad de distancia entre el centro y el borde (ya que all el flujo del agua es ms representativo del flujo promedio total que en el centro).

Fig. 7. Red de Clarke-Bumpus con las modificaciones introducidas por Paquette y Frolander. 1) Cable de remolque; 2) Contador del flujmetro; 3) Barra de soporte del recipiente colector; 4) Recipiente colector; 5) Alerones de estabilizacin del recorrido en el agua; 6) Tapa giratoria para la apertura y el cierre de la boca de la red; 7) Retn giratorio para la apertura y cierre de la tapa; 8) Mecanismo de liberacin de los mensajeros secundarios; 9 y 11) Cables de suspensin de los mensajeros secundarios; 10 y 12) Mensajeros secundarios; 13) Mordaza de retencin de la red sobre el cable; 14) Disparador que, al ser golpeado por el mensajero, acciona el mecanismo pivotante de la tapa de la red. (De Paquette y Frolander, 1957).

Antes de comenzar un programa de muestreos en un lugar y momento dados, es conveniente verificar la distancia mxima que puede recorrer la red utilizada sin colmatarse. Para ello se realizan varios lances de extensin creciente hasta que las revoluciones del flujmetro comiencen a indicar valores desproporcionales con respecto a la distancia

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recorrida. Se elige entonces una extensin menor a aqulla en la cual comenz a haber evidencias de colmatacin. Obviamente, este ensayo debe ser repetido cuando cambian las condiciones del medio y/o la red utilizada.

Fig. 8. Red para barridos verticales munida de un sistema de cierre a profundidad de tipo Nansen. A) Cable de remolque; B) Mensajero; C) Mecanismo de cierre de la red; D) Bridas; E) Cabo de cierre por estrangulamiento; F) Aro metlico de la boca de la red; G) Cable de seguridad; H) Copo. (De catlogo de instrumental oceanogrfico de Hydro-Bios).

La velocidad de remolque no debe exceder de, aproximadamente, unos 30 a 50 cm por segundo. El exceso de velocidad aumenta la presin de filtracin deteriorando el material, macerndolo, y extruyendo parte del mismo a travs de las mallas. Velocidades muy altas terminan por rasgar la red. Las velocidades demasiado bajas, por otro lado, facilitan la evasin activa de los organismos (ver ms adelante), y adems inciden desfavorablemente sobre el trabajo de los flujmetros. Para lances verticales someros la estimacin de la profundidad a que est ubicado el muestreador se deduce simplemente de la longitud del cable o cabo de remolque filado. A profundidades mayores, y sobre todo cuando el cable forma un ngulo pronunciado con respecto a la vertical (por deriva de la embarcacin, corrientes, etc.), esta profundidad equivale al coseno del ngulo que forma el cable con la vertical multiplicado por la longitud de cable en el agua. Los muestreadores de plancton continuos y/o automticos (ver Sameoto et al., 1980;

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Boltovskoy, ed., 1981) permiten obtener series de muestras a lo largo de la derrota de la embarcacin sin atencin de operadores, o con atencin mnima. Estas muestras, sin embargo, son generalment de volumen reducido y los aparatos en cuestin tienen escasa aplicacin en trabajos limnolgicos. Para biotopos especiales se utilizan redes con modificaciones particulares. Los organismos neustnicos, por ejemplo, se colectan con redes cuya boca est montada sobre flotadores de manera que parte de la misma se mantiene fuera del agua (Fig. 9; ver John, 1976; Brown y Cheng, 1981; Schram et al., 1981). La interfase agua-fondo, o capa hiperbntica, se muestrea mediante redes montadas sobre trineos, esques u otro tipo de deslizadores que se apoyan sobre el fondo (ver Boltovskoy, ed., 1981). En ros y arroyos suelen emplearse redes fijas, con la boca abierta hacia la corriente.

Fig. 9. Red neustnica de boca rectangular, con flotadores.

Las redes deben ser cuidadosamente enjuagadas entre lances, restregando vigorosamente la tela con las manos (para eliminar o destruir restos de material adherido a las mallas). Luego de cada campaa es conveniente lavarlas con agua tibia y detergente neutro para limpiar los poros. Las roturas en la tela deben ser remendadas mediante parches (Webb y Potthoff, 1979), o taponando los agujeros con algn adhesivo sinttico ("Fastix" o similares).

BOMBAS DE SUCCION Estos muestreadores tienen varias ventajas, pero tambin desventajas, sobre las redes, a saber: 1. Colectan muestras ms discretas, especialmente adecuadas para estudios de la distribucin del plancton a pequea escala (microdistribucin o patchiness); 2. Permiten obtener, simultneamente con el plancton, muestras de agua para anlisis fsicos y qumicos; 3. La estimacin de la cantidad de agua filtrada es ms sencilla y precisa que con las redes; 4. Permiten controlar y evitar la colmatacin; 5. Permiten la coleccin de plancton en lugares inaccesibles para las redes. Pero, por otro lado: 1. Deterioran a los organismos, sobre todo a los de mayor tamao, mucho ms que las redes;

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Fig. 10. Obtencin de muestras de plancton mediante una bomba centrfuga sumergible. A) Esquema del muestreo; B) Vista externa del aparato. 1) Red de plancton; 2) Recipiente para medir el caudal; 3) Manguera; 4) Batera elctrica (12 V); 5) Cables; 6) Motor de la bomba; 7) Entrada de agua.

2. El tamao muestral es normalmente mucho ms bajo que con redes de plancton, por lo cual suelen ser inadecuadas en ambientes oligotrficos y/o para colectar organismos que se encuentran en bajas concentraciones; 3. Los problemas de evasin son mucho ms pronunciados que con las redes (ver ms abajo); 4. La coleccin de material a profundidades mayores a unos 50 metros requiere equipos especiales de alta potencia.

Fig. 11. Sifn de baja velocidad para obtener muestras de plancton hasta profundidades moderadas. (Modificado de Harvey, 1966).

Los tres tipos ms comunes de bombas de succin son la alternativa, rotatoria y centrfuga (ver Beers, 1981). Las alternativas generalmente deterioran menos el material colectado, pero son ms voluminosas y pesadas que las centrfugas de capacidad equivalente. Un sistema compuesto por una pequea bomba centrfuga sumergible accionada por una batera de 12 V puede proveer un flujo de ms de 50 litros por minuto y permite la obtencin de material microplanctnico (especialmente de fitoplancton) hasta profundidades de unos 40-50 m (desarrollado por A. Boltovskoy y colaboradores, ver figura 10; Boltovskoy y Mazzoni, 1988). El lquido succionado hasta la superficie se filtra a travs de mallas de plancton del poro adecuado (Fig. 10), o se recoge ntegramente para ser procesado en el laboratorio.

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La obtencin de agua desde profundidades moderadas puede llevarse a cabo con una manguera utilizada a modo de sifn (Fig. 11). Adems de los tratados generales listados ms arriba que incluyen descripciones de sistemas de bombeo para plancton, informacin ms reciente acerca del uso de las bombas de succin puede ser consultada en Coughlan y Fleming, 1978; Miller y Judkins, 1981; Mackas y Owen, 1982; Berman y Kimor, 1983; etc.

BOTELLAS Se trata de recipientes de volumen variable (usualmente no ms de 5-10 l) que se arran abiertos por ambos extremos a la profundidad deseada, se cierran all por medio de un mensajero, y vuelven a izarse a la superficie. Existen varios modelos de fabricacin comercial, pero tambin pueden ser confeccionados por el usuario (Figs. 12, 13; Cassie y Freeman, 1980; Boltovskoy, ed., 1981; Fletcher y Polson, 1982).

Fig. 12. Dispositivo sencillo para la coleccin de muestras de pequeo volumen a profundidades moderadas. La botella se arra cerrada y un vigoroso tirn del cabo la abre a la profundidad deseada.

Para muestreos de una columna de agua integrada de baja profundidad suele utilizarse un tubo elstico tal como se ilustra en la figura 15 (ver tambin George, 1976; George y Owen, 1978; A. Boltovskoy, 1990). La simplicidad de operacin, bajo costo, precisin volumtrica y posibilidad de coleccin de seston y agua de prcticamente cualquier profundidad hacen de las botellas el muestreador ideal para organismos pequeos, numerosos y sin motilidad propia, como la mayora de los fitoplncteres. El zooplancton, sin embargo, generalmente no est lo suficientemente concentrado como para dar capturas adecuadas en muestras de 5 10 litros. Adems, los crustceos tienen reacciones de evasin que hacen que las botellas puedan subestimar sus cantidades considerablemente (ver ms abajo). El lquido obtenido mediante botellas puede ser filtrado a travs de tamices o mallas para concentrar a los plncteres objeto del estudio. Alternativamente y cuando la fraccin a investigar es demasiado pequea, se recurre a la sedimentacin del material en cilindros ad hoc, o al centrifugado para concentrar las partculas y eliminar el exceso de agua (Sournia, ed., 1976; Boltovskoy, ed., 1981).

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Fig. 13. Conjunto de botellas para la obtencin de muestras de agua a profundidades moderadas, operado manualmente. A) Botella; B) Vista general de la ubicacin de las botellas sobre el cabo; C) Nudo deslizante ("falso nudo") utilizado para mantener las botellas abiertas durante el arriado; al llegar a la profundidad deseada se jala del extremo de la lnea que va a la superficie (9), los nudos se abren y liberan las argollas (3), cerrando las botellas; esta lnea es continua desde la superficie hasta la ltima botella. 1) Tubo de material plstico de unos 25 cm de largo por 5 cm de dimetro interno; 2) Tubo de goma o elstico; este tubo atraviesa la botella por dentro, pasa por el centro de las esferas de goma (5) y, en estado distendido, se ata a las argollas de bronce (3); 3) Argollas de bronce, las ubicadas en los extremos de la botella, al lado de las esferas de goma (5), se atan de a pares tal como se ilustra en C para mantener el aparato abierto durante el arriado; 4) Cabo de nylon; 5) Esferas de goma de dimetro levemente superior al del tubo (1); 6) Driza de nylon sobre la cual se fijan las botellas; 7) Lastre de unos 20 kg; 8) Extremo del cabo de cierre que va hacia la botella siguiente; 9) Extremo hacia la superficie. (De Boltovskoy, ed., 1981; modificado de Goodwin y Goddard, 1974).

Fig. 14. Botella para muestreos de plancton del tipo Van Dorn.

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Fig. 15. Obtencin de una muestra integrada de una columna de agua superficial. a) El tubo se sumerge con el extremo libre hacia abajo reteniendo el cabo en superficie; b) El extremo libre se extrae del agua mientras el cerrado queda fijo; c) El extremo cerrado se deja caer libremente; d) El tubo se recupera hasta la superficie. Una vez izado, se desprende la malla del extremo y se lavan los organismos retenidos en ella en un frasco con lquido. 1) Cabo de izado; 2) Unin del cabo al extremo del tubo; 3) Tubo de material no colapsable; 4) Filtro de tela de red de plancton ocluyendo el extremo del tubo. (De Boltovskoy, ed., 1981, modificado de Pennak, 1962).

PROBLEMAS VINCULADOS CON LA EVASION DEL ZOOPLANCTON Probablemente sea el origen etimolgico del trmino "plancton", asociado al reducido tamao de sus integrantes, lo que ha generado una impresin errnea acerca de la sensibilidad y capacidad de reaccin de los plncteres. Es cada vez ms obvio que pretender una captura cuantitativa y cualitativamente representativa simplemente pasando una red por el agua, sin mayores recaudos, es tan absurdo como pretender cazar ariposas corriendo con la red entomolgica en alto con los ojos vendados. Los zooplncteres ven y/o sienten los aparatos de muestreo y los evaden eficientemente; los crustceos, especialmente los coppodos, tienen excelente coordinacin neuromuscular y velocidades de natacin que pueden exceder los 100 cm por segundo (UNESCO, 1968). En consecuencia, en muchos lances slo se obtiene una fraccin de los individuos pequeos, dbiles y enfermos, mientras que la mayor parte de la poblacin no es capturada en absoluto (Isaacs, 1965).

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Fig. 16. Efectos de la perturbacin superficial del agua sobre lances de red consecutivos a lo largo de la misma transecta de 100 m de largo, en un cuerpo lentico (embalse Cassafouths, provincia de Crdoba). En todos los casos se grafican datos comparativos sobre la base del resultado del primero (100%) de tres barridos sucesivos (ida-vuelta-ida). El tiempo transcurrido entre cada par de barridos fue de alrededor de 5-10 min. Los nmeros identifican cada uno de los grupos de zooplncteres contados: 1) Nauplii de coppodos (talla promedio: 0,19 mm); 2) Acanthocyclops robustus, copepoditos pequeos (0,40 mm); 3) A. robustus, copepoditos grandes (0,67 mm); 4) A. robustus, adultos (1,02 mm); 5) Notodiaptomus incompositus, copepoditos (0,68 mm); 6) N. incompositus, adultos (1,2 mm); 7) Diaphanosoma brachyurum, individuos pequeos (0,42 mm); 8) D. brachyurum, grandes (0,94 mm); 9) Daphnia spinulata, pequeos (0,81 mm); 10) D. spinulata, grandes (1,42 mm); 11) Bosmina huaronensis y Bosmina longirostris, pequeos (0,32 mm); 12) B. huaronensis y B. longirostris, grandes (0,45 mm); 13) Ceriodaphnia dubia, pequeos (0,38 mm); 14) C. dubia, grandes (0,62 mm); 15) Keratella cochlearis (0,18 mm). Cada uno de los datos representa el promedio de varios tros de lances. Ntese que durante el da se observa una clara disminucin desde el primer barrido (en aguas no perturbadas), hasta el tercero (en aguas perturbadas por los dos pasajes anteriores), mientras que durante la noche las oscilaciones alrededor del 100% (primer barrido) son azarosas. (De Boltovskoy y Mazzoni, 1988).

Varios investigadores realizaron anlisis detallados acerca de la eficiencia comparativa de los tres sistemas de muestreo descriptos, as como estudios del comportamiento del zooplancton y de sus efectos sobre las capturas (Barkley, 1964, 1972; Fleminger y Clutter, 1965; Smyly, 1968; UNESCO, 1968; Wiebe y Holland, 1968; Herke, 1969; Langeland y Rognerud, 1974; Singarajah, 1975; Strickler, 1975; Hodgkiss, 1977; Ruttner Kolisko, 1977; Gale y Mohr, 1978; Leithiser et al., 1979; Haury et al., 1980; Kriete y Loesch, 1980; Beers, 1981; Orr, 1981; Cada y Loar, 1982; Kovalev y Egorov, 1982; Omori y Hamner, 1982; Wiebe et al., 1982; Gallagher y Conner, 1983; Taggart y Leggett, 1984; Boltovskoy et al., 1984, 1985; Hillmann-Kitalong y Birkeland, 1987; Boltovskoy y Alder, 1988; Boltovskoy y Mazzoni, 1988; etc.). Los resultados correspondientes no son coincidentes, pero la mayora apuntan a la existencia de errores muy significativos en las estimaciones de abundancia con diferentes artes de muestreo y en diferentes condiciones. Boltovskoy et al. (1985) y Boltovskoy y Mazzoni (1988) presentaron los resultados de un detallado estudio de la eficiencia comparativa de redes de plancton empujadas delante de la embarcacin (es decir, muestreando aguas no perturbadas por el paso del bote) y remolcadas detrs de ella, una bomba de succin centrfuga, y una botella. Los grupos analizados fueron dos coppodos, tres cladceros (todos divididos en clases de tamao) y un rotfero, en un total de alrededor de 100 muestras. Los resultados ms importantes de este estudio fueron:

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Fig. 17. Representacin diagramtica de la interpretacin de las diferencias entre las capturas de una red empujada frente a la embarcacin y una red remolcada detrs de ella, en diferentes condiciones ambientales. Los sombreados representan concentraciones de plancton diferentes; las flechas indican reacciones de evasin a la perturbacin superficial; las colectas comparativamente ms ricas estn representadas con redes ms llenas. Ver el texto para la explicacin detallada. (De Boltovskoy y Mazzoni, 1988).

1. El tamao de la boca de las redes utilizadas (20 y 50 cm de dimetro), y la presencia/ausencia de bridas delante de las redes no inciden sobre las capturas; 2. Durante el da, y especialmente con cielo despejado, las capturas con red son significativamente menores en aguas recientemente perturbadas (Fig. 16); 3. Todos los zooplncteres analizados tienden a nadar activamente en contra de las corrientes evitando, en consecuencia, ser aspirados por la bomba de succin; 4. La evasin de reas perturbadas y las reacciones reotcticas son responsables de que la botella y la bomba subestimen muy significativamente (en hasta decenas de veces) las densidades in situ; estas subestimaciones son ms pronunciadas para las especies y estadios con mejor locomocin. El producto de las colectas est influenciado por una combinacin de tipo de colector, tcnica de muestreo, condiciones ambientales, hora del da, etc. El ejemplo ilustrado en la figura 17 da una idea de la complejidad del tema y de las variables involucradas. En este caso, durante das despejados el zooplancton tenda a mantenerse a cierta distancia de la superficie; la red empujada delante de la embarcacin barra un estrato relativamente despoblado, mientras que la red posterior colectaba material del mismo estrato mezclado (por efecto de la accin del motor fuera de borda) con aguas subsuperficiales ms ricas en plancton; a pesar de las reacciones evasivas del plancton (flechas), la mezcla vertical haca que las aguas detrs del bote fueran momentneamente ms ricas en plancton que las aguas delante del mismo. Por otro lado, en das nublados la distribucin de los plncteres en la capa superficial no era estratificada; la red de atrs barra el mismo estrato que la de adelante, aunque empobrecido por la evasin que provocaba el pasaje del bote. Es de destacar que estas diferencias en la cantidad de material colectado por las dos redes fueron muy consistentes entre grupos y alcanzaron valores de hasta ms de diez veces. No se conoce hasta el momento un remedio infalible y general para este tipo de problemas. Sus efectos pueden ser disminudos minimizando la perturbacin del ambiente a investigar inmediatamente antes y durante el muestreo, haciendo los barridos a velocidad constante y evitando la colmatacin con lances excesivamente largos.

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ALMACENAMIENTO, ROTULACION, RECUENTOS, BIOMASA, ETC. En todos los casos conviene tomar dos muestras idnticas del mismo lugar, fijando una de ellas (para anlisis cuantitativos, principalmente), y llevando la otra al laboratorio sin fijarla (para anlisis cualitativos). Para fijar las muestras se le agrega una cantidad tal de formaldehdo (concentrado, al 40%) como para que su proporcin constituya del 3 al 5% del volumen total del lquido en el frasco. Todos los frascos con las muestras deben etiquetarse, escribiendo con lpiz de grafito duro en un trozo de papel vegetal, que se coloca DENTRO del frasco. Adems, para los fines prcticos, conviene tambin agregar una identificacin externa abreviada. En la etiqueta deber figurar el nombre del cuerpo de agua, fecha, hora, estacin, tipo de muestra, forma de muestreo, cantidad de agua filtrada (estimativo o exacto), fijacin, nombre del operador, tipo de red (abertura de los poros en m, boca, etc.). A stos se agregar cualquier otro dato que se considere de inters o importancia. Entre un muestreo y el siguiente la red y el recipiente colector deben ser cuidadosamente lavados con agua limpia o filtrada. Los anlisis del material biolgico obtenido abarcarn inventarios de la flora y fauna de las muestras, as como estimaciones cuantitativas, principalmente de las formas dominantes.

RECUENTOS Para los fines cualitativos debe utilizarse material fijado, as como muestras sin fijar, vivas, ya que muchos organismos delicados (euglenas, ciliados, etc.) prcticamente desaparecen en las muestras fijadas o, en el mejor de los casos, se conservan en estado tan deficiente que no permiten identificacin alguna. Los recuentos se realizan con el material fijado, en cpsulas de Petri con fondo cuadriculado (para los organismos de mayor tamao, tales como coppodos), o entre porta y cubreobjetos, para el microplancton, utilizando alcuotas de volumen conocido (por ejemplo, 0,1 ml). Para el micro y el nanoplancton se utilizan cmaras de sedimentacin y el microscopio invertido o de Utermhl. En todos los casos la concentracin de material en la fraccin que se utiliza para el recuento debe ser tal que permita una cmoda observacin de los individuos. Frecuentemente la concentracin original, en la muestra trada del campo, es demasiado densa; en estos casos debe procederse a su dilucin tomando nota del volumen original y del lquido agregado para poder despus estimar las abundancias absolutas in situ. En las tablas de resumen de los resultados deben figurar: el taxn correspondiente, el volumen sobre el cual se ha basado la estimacin cuantitativa (volumen contado), y la densidad por unidad de volumen en la naturaleza (individuos por litro o por ml de agua). Ejemplo: Volumen total filtrado a travs de la red = 12 baldes de 10 l c/u = 120 l; Volumen de la muestra en el vaso colector = 0,075 l (75 ml); Volumen de las alcuotas contadas y cantidad de ejemplares en cada una de ellas: 1a...... 0,15 ml ......14 2a...... 0,20 ml ......28 3a...... 0,10 ml ......27 4a...... 0,09 ml ...... 8

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5a...... 0,10 ml ......16 Cantidad de ejemplares en 1 ml: (14 + 28 + 27 + 8 + 16) / (0,15 + 0,2 + 0,1 + 0,09 + 0,1)= 93 ejs. / 0,64 ml = 145,3 ejs./ml Consecuentemente, en el recipiente colector hay: 145,3 x 75 = 10897,5 ejemplares, que es la cantidad recogida de 120 litros de agua in situ; luego, en 1 litro hay 91 ejemplares (90,8125). Estos clculos son algo ms complicados cuando el material debe ser diluido antes de proceder a su recuento; por ejemplo, si a la muestra del ejemplo anterior se agregaron 75 ml de agua para diluirla, el resultado final ser la mitad del calculado. En el caso de los anlisis CUALITATIVOS suele tomarse la alcuota a observar de la zona de mayor concentracin de material (generalmente, el fondo del frasco); pero para las estimaciones CUANTITATIVAS es sumamente importante que el material en suspensin est bien homogeneizado antes de extraer la alcuota; de lo contrario los resultados pueden ser seriamente sub o sobrestimativos. Estos sistemas de recuento son variantes simplificadas de mtodos de estimacin cuantitativa ms precisos, que utilizan cmaras de sedimentacin, cmaras de recuento, tratamientos estadsticos de los resultados, estimaciones del error, etc., los que se vern con mayor detalle en el curso de las clases tericas.

Biomasa La estimacin de la biomasa del plancton es un proceso ms complicado que en el caso del bentos; aqu usualmente no se puede calcinar el material (ver ms abajo), porque las concentraciones de plancton en el agua son moderadas y estn por debajo del umbral de deteccin por medio del peso seco y peso calcinado. Adems, en el peso seco o peso calcinado se incluiran todos los componentes sestnicos de origen biolgico, tales como restos de vegetacin fanerogmica superior de origen alctono, que pueden ser muy abundantes en el caso de las lagunas chicas y someras. Para el fitoplancton suele utilizarse la clorofila como indicador de la biomasa general de este componente. Los procedimientos en cuestin estn detallados en la seccin correspondiente de esta gua; la tcnica es sencilla y rpida, y tiene un alto grado de precisin. Para el zooplancton, sin embargo, no existe un mtodo qumico fcil, y debe recurrirse al recuento y estimacin del volumen de los organismos, para luego transformar estos datos en gramos de carbono orgnico, o gramos de peso seco de sustancia orgnica, por unidad de volumen o de superficie. El mismo mtodo se utiliza cuando se quiere estimar la biomasa de fracciones restringidas del fitoplancton (por ejemplo, solamente las diatomeas, o solamente una especie determinada). El volumen del o los organismos se estima adaptando la forma de aqullos a figuras geomtricas regulares. Un dinoflagelado tecado como Peridinium o una clula de Trachelomonas, por ejemplo, seran el caso ms sencillo ya que responden adecuadamente a una esfera [cuyo volumen es (dim.3)/6]. Para organismos de formas ms complejas se utilizan otros cuerpos geomtricos (cilindros, conos, elipsoides, paraleleppedos, etc.), o

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combinaciones de aqullos. Por ejemplo, para un Ceratium puede ser necesario sumar los volmenes de dos conos, un paraleleppedo, un trapezoide y un cilindro; cada una de estas figuras representa una parte de la clula. Para un coppodo adulto el clculo puede ser an ms complejo (cf. Hernroth, 1985): V=[(LcBH)/6+(LabDab2)/4+(LanDan2)/6+(LpDp2N/12] Donde: B=ancho del prosoma Dab=dimetro del abdomen Dan=dimetro de la antena Dp=dimetro medio de las patas H=altura del prosoma Lab=longitud del abdomen Lan=longitud de la antena Lc=longitud del prosoma Lp=longitud media de las patas N=nmero de patas V=volumen Los volmenes as calculados se suelen denominar biovolmenes. Conociendo el peso especfico de los organismos medidos (que generalmente oscila muy cerca de 1) puede expresarse directamente el biovolumen estimado en gramos de peso hmedo de sustancia orgnica. Esta medida, sin embargo, es menos til que el peso seco o, mejor an, el peso del carbono orgnico, ya que el peso hmedo vara con la proporcin de agua en las clulas y con el porcentaje de constituyentes no orgnicos (frstulos de slice en las diatomeas, depsitos calcreos en los caparazones de crustceos). Para estimar el peso seco o la biomasa en trminos de carbono orgnico debe conocerse la relacin entre el volumen del organismo y el peso seco o el contenido de carbono. Dado que la estimacin del volumen de acuerdo a mediciones y frmulas como la indicada ms arriba para el coppodo es tan trabajosa que en s misma constituye un extenso proyecto de investigacin, en la prctica, para estudios de corte ecolgico, se suelen utilizar las relaciones, regresiones o tablas de conversin propuestas por otros investigadores en estudios ad hoc (e.g., Heusden, 1972; Dumont, 1975; Edler, 1979; Bird, 1985; Hernroth, 1985; etc.). Para ello se busca una medida sencilla de tomar que est altamente correlacionada con el volumen, y ste a su vez con el peso, como por ejemplo el largo total. Por ejemplo, Dumont (1975) estim la siguiente regresin para el cladcero Moina micrura: W = 6.61 L2.57 Donde W es el peso (en g) y L es el largo total (en m). Para dinoflagelados tecados, por ejemplo, se propone una relacin de 0.13 picogramos de carbono orgnico por cada m3 de volumen celular, mientras que para otros fitoplncteres es de 0.11 (Edler, 1979). Caractersticas estructurales particulares pueden requerir la introduccin de correcciones y modificaciones en las relaciones. Las diatomeas poseen una gran vacuola con alto contenido en agua; por este motivo se aconseja sustraer el 90% del volumen de esta vacuola del biovolumen total calculado antes de convertir los valores en carbono orgnico (Edler, 1979). En resumen, para calcular, por ejemplo, la biomasa de los crustceos planctnicos de una laguna debern contarse sus coppodos y cladceros divididos en clases de tamao. Para

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cada clase se medirn una cantidad determinada (300, 500 o ms, dependiendo de la variabilidad de tallas dentro de cada grupo) de organismos y se buscar la expresin ms adecuada que relacione talla con peso seco. Con esos datos se estima el peso seco promedio de cada clase de tamao, que multiplicado por la cantidad de organismos por litro para esa clase dar la biomasa de la clase. La sumatoria de todas las clases para todas las especies ser el valor de biomasa de crustceos buscado.

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Peces
Seccin preparada por O.H. Padn y N. R. Iriart. El necton es la "comunidad" errante formada por organismos que se desplazan activamente en el agua por sus propios medios. Sus principales componentes son los peces. ARTES Y MANIOBRAS DE PESCA Se define como arte de pesca a todo equipo y elementos accesorios utilizados en la captura de peces. Segn sus caractersticas operativas las artes de pesca pueden ser agrupadas en pasivas y activas. El material ms antiguo utilizado por el hombre para la confeccin de artes de pesca es probablemente el lino, de excelentes caractersticas para prestaciones marineras. Tambin se han utilizado el camo y el algodn, pero en la actualidad los materiales ms difundidos son las fibras sintticas, especialmente poliamida y nylon en pioln de mono y polifilamento.

ARTES PASIVAS Son aqullas que se calan en un punto determinado y es el pez con su actividad y desplazamientos el que determina la captura. Espinel De uso comn en el ro Paran y el estuario del Ro de la Plata, principalmente para peces de fondo. Suele utilizarse en lagunas para la pesca de bagres. Consiste en un cabo principal (madre), de longitud considerable. A intervalos regulares se desprenden brazoladas, en cuyos extremos van anudados los anzuelos. Puede llevar 100 o ms y ser calado a distintas profundidades (Fig. 1a, b). Para su operacin la madre es adujada en un canasto desde donde salen las brazoladas cuyos anzuelos quedan asegurados a un rodete de corcho, para ser encarnados a medida que se va filando el espinel (Fig. 1c), Este queda fondeado por medio de muertos de cemento o de hierro de 2 a 10 kg en sus extremos. La presencia del espinel queda sealada mediante una o ms boyas con banderines.

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Fig.1. Espinel. a: calado a fondo; b: calado en superficie; c: maniobra de calado.

Red de enmalle o agallera Consiste en un pao de red sostenido por una relinga superior donde se fijan los flotadores de plstico o corcho y una relinga inferior con pequeos lastres de plomo. Queda suspendida como una barrera que intercepta el desplazamiento de los peces, que son atrapados principalmente por detrs de los oprculos (Fig. 2a). Este arte puede utilizarse individualmente o formando trenes de redes de distinta medida de malla para cubrir todo el espectro de tallas de peces presentes. Generalmente se calan en superficie mediante un muerto o ancla y una boya grande en cada extremo (Fig. 2b), o a fondo. Los cabos que unen la relinga inferior con los muertos terminales deben tener una longitud dos o tres veces mayor que la profundidad del lugar. Se utilizan, variando los tamaos de malla, en todos los ambientes bonaerenses para la pesca de bagres, tarariras, lisas y, muy especialmente, para la captura del pejerrey. Para operar este arte debe procederse como sigue: sobre la cubierta de popa de una embarcacin libre de herrajes que puedan enganchar las mallas se extiende un lienzo sobre el que se carga la red. Se comienza con la boya, muerto y cabos de uno de los extremos, sobre ellos se pliega el pao en zig-zag, y sobre todo el conjunto se colocan la boya, muerto y cabos del extremo opuesto, que sern arrojados al agua al comenzar la maniobra de calado (Fig. 2c). La posicin de la red depender de la actividad de las especies presentes y de las caractersticas del ambiente. En general, las redes de enmalle se calan paralelas a la lnea de costa, con la relinga inferior casi sobre el fondo en costas de pendiente suave de lagunas y embalses, y perpendiculares a la lnea de costa cuando se trata de lagos profundos.

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Fig. 2. Red de enmalle. a: pao calado y formas frecuentes de enmalle; b: red calada en superficie; c: red cargada en la embarcacin.

Una variante de este arte llamada malln es utilizada para la pesca de grandes peces de ro. Se opera desde una canoa, a la que permanece sujeta por un extremo. Se cala perpendicular a la lnea del cauce dejndola derivar con la corriente, de manera que se desliza sobre el fondo en sectores de poca profundidad, llamados canchas de pesca. En el extremo libre prximo a la costa lleva un fondeo y una boya. El pescador rema lentamente para mantener la red extendida. Es el arte por excelencia para la captura de grandes peces de aguas abiertas en el ro Paran. Trasmallo o tres telas Consiste en tres paos superpuestos; dos exteriores (espejos) de malla muy grande, y uno central de malla ms fina, ms flojo. Se opera de manera similar a la red de enmalle calada o a la deriva, como el malln. Trampas Son dispositivos que atrapan a los peces por medio de un encierro que permite la entrada pero impide o dificulta el escape. Dentro de esta categora se reconocen: Nasas: cilindros de mimbre o malla de red con dos bocas de forma cnica en sus extremos (Fig. 3a). Suelen calarse cebadas. Corrales o pantallas: se utilizan en cursos de agua estrechos y consisten en una empalizada que se erige atravesando el cauce (Fig. 3b), con gran variedad de diseos. En nuestro pas se utilizan para la captura de reproductores de salmnidos. Almadrabas: comunes en Japn, Espaa e Italia, en bahas de aguas poco profundas. Consisten en un pao o red gua de longitud variable, dispuesto en forma perpendicular a la costa, cuya funcin es orientar a los peces hacia una bolsa donde quedan atrapados (Fig. 3c). Este arte permanece calado cierto tiempo, y la bolsa es vaciada peridicamente. Existen diseos sencillos, sin trampa, pero tambin son utilizadas otras ms complejas. Ideal para la captura de peces vivos.

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Fig. 3. Diferentes tipos de trampas para peces. a: nasa; b: corral; c: almadraba.

ARTES ACTIVAS Son aqullas que al ser desplazadas filtran un volumen de agua que vara en funcin de la distancia recorrida. Capturan los peces presentes en el rea barrida, independientemente de su nivel de actividad. Copo de mano Aro metlico con un mango de longitud variable donde va cosida una bolsa cnica de malla fina (Fig. 4a). Ideal para operar en reas muy vegetadas; generalmente se utiliza para la captura de peces pequeos. Esparavel o atarraya Red circular con pequeos lastres de plomo en sus bordes. Interiormente tiene varios cabos finos unidos a un cabo ms grueso de varios metros de longitud que pasa por un anillo central. El pescador retiene este cabo en su mano, carga la red sobre el hombro y la arroja desplegada sobre la superficie del agua. Al cobrar el cabo central la red se cierra hacia adentro por debajo, atrapando a los peces (Fig. 4b). Requiere gran pericia para su operacin y es muy til para ambientes reducidos o de poca profundidad. Red de arrastre de playa Consiste en un copo central y dos alas laterales que orientan a los peces hacia la bolsa, donde quedan retenidos. Hay una relinga superior, que lleva los flotadores, y una inferior lastrada con plomos. En el extremo de cada ala se coloca una vara rgida (caln) que mantiene separadas las relingas. Una boya mayor (maesa) o varias menores marcan, en la relinga superior, el centro de la bolsa y sirven de gua durante el arrastre (Fig. 4c). Esta red, cuando es pequea, puede ser operada por dos personas a pie desde los calones, o desde

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la costa, por medio de cabos, una vez que ha sido calada con ayuda de una embarcacin. Una vez cargada la red en un bote de remos con un procedimiento similar al de la red de enmalle, se deja el extremo de uno de los cabos fijo en la costa, y se procede a calar la red, describiendo con la embarcacin una trayectoria en U cuyas ramas quedan determinadas por la longitud de los cabos. Para extraer la red del agua se procede a cobrar los cabos en forma lenta y sostenida, sin perder de vista la maesa para que la bolsa de la red se mantenga armada. Unos metros antes de llegar los calones a la costa los operadores deben desplazarse hacia el centro, juntndose. Al llegar la red a la costa es conveniente que uno o dos operadores, rodilla en tierra, tomen las dos relingas inferiores juntas, bien pegadas al piso mientras las cobran. Simultneamente, los otros dos operadores cobran la relinga superior por ambos lados (Fig. 5). Existen modelos de hasta cerca de 1 km de longitud, que deben ser arrastradas por caballos o tractores (sabaleras).

Fig: 4. Artes activas. a: copo de mano; b: atarraya; c: red de arrastre de playa.

Chuza o fija Consiste en una especie de arpn operado manualmente que se utiliza en aguas someras. Robador Anzuelo mltiple que se arroja mediante una lnea sobre el cardumen, recogindose rpidamente. Generalmente para peces migradores en los ros Paran y Salado. Red de arrastre de media agua Es similar a la red de costa, pero con las alas muy reducidas, o sin ellas. Se opera desde una embarcacin con la ayuda de tangones laterales (Fig. 6a), o con dos botes (Fig. 6b). Una variedad de este arte, con su relinga inferior y copo reforzados, puede utilizarse para arrastres de fondo con portones.

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Fig. 5. Maniobras con la red de arrastre de playa.

Fig. 6. Redes de arrastre de media agua. a: operada con tangones; b: arrastrada con dos embarcaciones.

Red de vara o ranio Consiste en un copo o bolsa profunda, con o sin nasa, cuyo pao superior (cielo) est sujeto a un travesao (vara) de madera o metal, en cuyos extremos se fijan dos patines de madera de forma subtriangular. La relinga inferior es ms larga y lleva por delante una cadena como proteccin para los objetos sumergidos que podran daarla (Fig. 7a). Los

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patines llevan, en la parte que se desliza sobre el fondo, una planchuela de hierro y herrajes donde se sujetan la red y los cabos de arrastre. Para la operacin con este arte es necesario contar con un motor de potencia no menor a 80 HP, preferiblemente interno, para mantener la cubierta de popa libre. Es recomendable, adems, una pequea pluma para el izado del aparejo. Tiene un excelente rendimiento para peces de hbitos bentnicos.

Fig. 7. a: ranio; b: monitoreo con ecosonda.

OTROS METODOS Ictiotxicos Son sustancias qumicas que disueltas en el agua envenenan a los peces. La ms conocida es "polvo de chimb" (leguminosa del gnero Lonchocarpus), utilizada por los aborgenes de Brasil y Paraguay. Este compuesto fue ensayado en el litoral de Corrientes para el control de la piraa. La droga activa es la rotenona, que en la actualidad se sintetiza en laboratorio y se expende con diversos nombres comerciales. Acta sobre la superficie branquial impidiendo el intercambio gaseoso, debido a lo cual los peces suelen ascender a la superficie facilitando su captura con un copo de mano. El alto costo y baja selectividad de esta droga (mata tambin a los insectos acuticos) la hacen poco recomendable para uso masivo, sin embargo es muy til en ambientes reducidos, vegetados o con corrientes dbiles, para fines de relevamiento ictiolgico. Pesca elctrica Es un sistema que utiliza campos elctricos sumergidos, auxiliado por algn arte de pesca convencional. El pez es inducido a nadar hacia el nodo (galvanotaxia) en cuya proximidad sufre una inmovilizacin (electronarcosis) que permite su captura con un copo de mano. Resulta muy til por la gran diversidad de ambientes en que puede aplicarse. Tcnicas acsticas En su versin ms sencilla, el equipo consiste en una ecosonda pequea, del tipo de las usadas en embarcaciones deportivas, formada por un transmisor que, a travs de un transductor emite un pulso ultrasnico. Este rebota en el fondo y vuelve a ser recibido por el transductor, que lo enva al mecanismo registrador, previa amplificacin. Los peces que se

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encuentran en la zona insonificada son registrados en el papel como pequeas trazas individuales, que pueden ser contadas y relacionadas con el volumen barrido por el haz de ultrasonido (Fig. 7b). Los factores a considerar son: la velocidad del movimiento del papel del registrador, escalas de profundidad, frecuencias utilizadas, longitud del pulso y ngulo del haz de ultrasonido. La identificacin de las especies registradas y la estimacin del nmero y biomasa relativos deben hacerse mediante pesca de control con una red de media agua o una red de arrastre de playa. Esta tcnica es til para evaluar rpidamente la abundancia de peces.

GLOSARIO Adujar: acomodar un cabo con el fin de alistarlo para la maniobra. Armadura: Est constituda por un hilo delgado que une las relingas al pao, la separacin de las ligaduras determina la abertura de las mallas, que normalmente es del 50% del pao estirado. Azocar: ajustar, apretar bien un cabo o un nudo. Babor: borda o costado izquierdo de la embarcacin, mirando desde popa hacia proa. Barlovento: la parte de donde viene el viento, con respecto a un lugar determinado. Bichero: asta larga con punta y gancho metlico en uno de sus extremos que sirve para tomar cabos, boyas, peces, etc. Bita: pieza metlica simple o doble slidamente afirmada al muelle, para amarrar embarcaciones. Brazolada: En un pioln de longitud variable al extremo del cual va atado en anzuelo en los espineles. Cabo: Cualquiera de las cuerdas utilizadas en las maniobras. Calabrote: cabo muy grueso. Calar: echar la red al agua para pescar. Se usa indistintamente para todo tipo de redes, pero es ms generalizado para redes fijas; para las mviles suele utilizarse el trmino "lance". Caln: Es la varilla de unos 60-80 cm que llevan las redes de arrastre en los extremos de las alas. Cncamo: pieza metlica que por un extremo tiene un ojo, gancho o argolla, y por el otro rosca con la que se asegura a cubierta, costado o cualquier otro sitio de la embarcacin. Sirve para afirmar motones, cabos o aparejos. Cancha: lugar donde se pesca, especialmente con referencia a las redes de arrastre y otras redes de fondo. Debe ser pareja y limpia para evitar enganches de la red; este factor es especialmente importante en represas y embalses, muchos de los cuales inundan terrenos boscosos imposibilitando, de esta manera, una explotacin efectiva de sus recursos pesqueros. Cargar: Aumentar la cantidad de pesos de plomo en la relinga inferior de la red. Cazar: atraer hacia s un cabo, cobrar, halar. Chicote: extremo de un cabo o cable. Cobrar: recoger un cabo, halar. Comps: instrumento que indica el norte magntico. Cornamusa: pieza de madera o metal afirmada en cubierta para amarrar los cabos. Empabilar: Proteccin que se hace a la brazolada un vez anudado el anzuelo. Se usa especialmente con peces de dentadura filosa que cortan la brazolada. Alternativamente, se utilizan brazoladas de alambre. Empatillar: Anudar el anzuelo al pioln para hacer la brazolada. Enmallarse: cuando un pez queda sujeto por la malla de la red, normalmente luego de entrar en ella hasta la cabeza o hasta la zona abdominal. Escandallo: peso que lleva la sondaleza para que vaya al fondo.

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Eslora: longitud de una embarcacin. Estribor: borda o costado derecho de la embarcacin mirando desde popa hacia proa. Falcacear: fijar el extremo de una cabo para que no se suelten sus hebras. Filar: Soltar cabo, cable o cadena. Fondear: Hundir una red hasta que toque fondo (en el caso de las embarcaciones - anclar). Gaza: Ojo o asa formada en el chicote o seno de un cabo. Grillete: Pieza de metal en forma de U atravesada en sus extremos perforados por un perno. Se utiliza para unir dos gazas u otros elementos. Puede ser giratorio. Herraje: cualquier elemento de metal utilizado en las maniobras. Lance: ver "calar". Madre: es el pioln del espinel al cual van unidas las brazoladas. Maesa: Boya grande que se coloca en medio de la relinga superior en las redes de arrastre. Sirve para localizar la parte central de la boca del copo y as poder guiar la red en el arrastre. Maniobra: evolucin y movimiento de una embarcacin. Conjunto de aparejos y cabos de labor. Motn: aparejo utilizado para cambiar la direccin de un cabo de maniobra (polea). Muerto: ancla de cemento, hierro o cualquier otro material pesado utilizado para fondear una embarcacin, boya o red por medio de un cabo o cadena. Nudo: medida de velocidad que equivale a una milla por hora (1852 m por hora). Pao: trama de la red tejida a mano o a mquina. Pasador: punzn de hierro que sirve para abrir los cordones de los cabos, aflojar nudos, etc. Pasteca: tipo especial de motn. Pnula: comps para tomar marcaciones y tirar rumbos. Pluma: Guinche de diferente diseo para maniobrar cargas. Popa: parte posterior de una embarcacin. Proa: parte anterior de una embarcacin Relinga: cabo que llevan las redes en su parte superior e inferior; en la primera van los corchos o boyas, y en la segunda los plomos. Ambas se unen al pao por las armaduras. Sonda: instrumento para medir la profundidad, compuesto por el escandallo y la sondaleza. Sondaleza: cordel en cuyo extremo se fija el escandallo. Tangn: percha que se articula en un palo o una banda y sirve para separar cabos durante una maniobra. Virar: cambiar el rumbo de una embarcacin.

CONSIDERACIONES FINALES Es importante considerar que los rendimientos por unidad de esfuerzo son variables en el tiempo. En el anlisis de las capturas diarias de una batera de redes durante un ciclo anual se pueden detectar fluctuaciones que responden, bsicamente, a tres patrones de comportamiento. Uno de ellos, de carcter anual, est asociado con la actividad reproductiva. El segundo, bien conocido por los pescadores comerciales, responde al ciclo lunar con las mximas capturas en luna nueva, y ha sido descripto para varias especies. Un tercer ritmo, de carcter diario, est asociado con las migraciones verticales, y es de carcter trfico. De acuerdo con las artes y aparejos elegidos, se necesitar una embarcacin adecuada y algunos implementos auxiliares. Un equipo bsico de pesca requiere un bote de unos cuatro metros de eslora con cubierta de popa y bancadas libres de elementos que puedan enganchar las redes. Para los arrastres se necesitan un par de cabos de 50 a 100 m y lienzos de 1 m de lado de algn material similar a la rafia sinttica para cargar los paos.

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Para algunos estudios se busca que las artes de pesca permitan un relevamiento integral de la poblacin abarcando todas las tallas y especies presentes. Los equipos deben responder a patrones standard con el fin de hacer comparables las capturas durante el perodo del muestreo y con respecto a estudios anteriores de otros especialistas.

DINAMICA POBLACIONAL DE PECES Mediciones y registros Con fines taxonmicos se toma una extensa lista de mediciones y observaciones, pero para fines ecolgicos las mediciones requeridas son ms restringidas (Fig. 8):

Fig. 8. Mediciones ms usuales para trabajos de biologa pesquera (de Cousseau y Perrotta, 1998).

Longitud standard: desde el extremo del hocico (snfisis premaxilar o dentaria) hasta el extremo del hueso hipural (urostilo, que en la prctica se hace coincidir con algn carcter externo fcilmente identificable, como el extremo de la estola, la ltima escama, etc.). Longitud total: Desde el extremo del hocico hasta la proyeccin perpendicular a la lnea sagital que pasa por el extremo de los radios ms largos de la aleta caudal. Longitud cabeza: Distancia entre la vertical que pasa por el borde anterior del hocico y la vertical que pasa por el borde de la membrana opercular. Peso total: Es importante indicar si se trata del peso fresco, o del ejemplar previamente fijado en lquido conservador. Tambin son de mucha utilidad las siguientes: Sexo. Peso de la gnada: idem peso total. Estadio de madurez gonadal: se estima sobre la base del tamao, color y aspecto de la gnada (juvenil, prepuesta, puesta, pospuesta, reposo). Contenido estomacal (grado de replecin y tipo de contenido). Factor de condicin, normalmente designado con la letra K, que equivale a K = Peso (en

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gramos) 100 / Longitud standard3. Este ndice da una buena idea de la variacin que experimenta el peso a lo largo del ao, las diferencias entre sexos, entre estadios de madurez gonadal, en funcin de la alimentacin, etc. Para medir un pez se le cierra la boca y se coloca el ejemplar de plano sobre el ictimetro; se endereza el cuerpo y la cola a lo largo de la lnea media antes de proceder a la lectura en la escala. Dado que los peces se contraen al morir, las mediciones deben tomarse lo ms rpido posible luego de la captura (existen factores de conversin para medidas tomadas sobre ejemplares largamente conservados). En el caso de estudios que requieran la liberacin del pez luego de su medicin (e.g., para estudios de captura y recaptura), puede ser necesario anestesiarlos (la droga de uso ms comn es la solucin Sandoz MS 222). Es conveniente efectuar las medidas en equipos de dos personas: mientras uno mide y dicta los valores el otro efecta las anotaciones. De la muestra general, en la cual se han identificado y pesado todos los ejemplares y tomado sus longitudes standard, se separan submuestras de hasta 10 individuos por clase de tamao (las clases se definen sobre la base del rango de tallas total) para medir longitud de cabeza, peso, determinacin del sexo, de la edad por otolitos, escamas, espinas, observacin del contenido estomacal, etc. El material de estas submuestras se guarda en bolsas o frascos separados, con fijador, cada una detalladamente rotulada con los datos del lance, fecha, tipo de arte, etc. En todos los casos es conveniente realizar una inspeccin visual de los ejemplares capturados; si se detectan anomalas como deformaciones, llagas, ojos blanquecinos, parasitosis, etc., debe practicarse una incisin lateral en el abdomen (sin llegar al orificio anal) y fijar el ejemplar en formol al 10% para posteriores estudios ictiopatolgicos.

Determinacin de la edad Se trata de un parmetro esencial para los estudios de dinmica poblacional, longevidad, tasa de crecimiento, etc. La determinacin de la edad puede realizarse por mtodos directos o indirectos. Entre los primeros generalmente se recurre a la interpretacin de las capas depositadas en las partes calcreas del pez, que registran bandas debidas a la disminucin de la actividad metablica durante el invierno (es decir - anuales). Para ello se utilizan principalmente las escamas, y en orden decreciente otolitos, espinas, vrtebras, piezas dentarias. La precisin del mtodo depende de muchos factores, incluyendo la habilidad del operador, claridad en los anillos, etc. El mtodo indirecto de uso ms corriente es la interpretacin de la frecuencia de tallas o mtodo de Petersen (Fig. 9). Esta estimacin est basada en que la longitud de los peces de una misma edad tiene a formar una curva normal y el trmino medio del tamao de los ejemplares en edades sucesivas se puede determinar identificando los modos de la curva polimodal formada por los registros de toda la muestra. El marcado y recaptura de ejemplares constituye otro mtodo de gran utilidad para estudios del crecimiento.

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Fig. 9. Descomposicin de la distribucin de las frecuencias de tallas en componentes modales.

Curvas de crecimiento El crecimiento absoluto es la media de incremento del tamao de los sobrevivientes de la poblacin en cada edad. Comnmente se establece haciendo la regresin sobre la talla con respecto a la edad, para cada grupo de edad. En general, la curva de crecimiento en talla exhibe un perodo inicial de crecimiento rpido, seguido de un crecimiento ms lento. Hay muchas frmulas para describir este tipo de crecimiento; la de uso ms generalizado es la ecuacin de Von Bertalanffy (1938), segn la cual el tamao de un pez Lt para cada edad t est dado por: Lt = L (1-e
-K(t-t 0))

donde L es el tamao mximo (o ms bien asinttico) que el pez alcanzara si llegase a una edad infinita, K es la constante de crecimiento, y t0 es la edad terica del pez cuando su tamao es cero. Se puede ver que la ecuacin de crecimiento de Von Bertalanffy contiene tres parmetros llamados L_, K y t0, todos los cuales pueden estimarse con los datos de la edad y la talla empleando la transformacin de la ecuacin de Von Bertalanffy y Walford (1946): Lt + 1 = L (1 - e-K) + e-KLt donde Lt y Lt+1 son las tallas del pez en las edades t y t+1, respectivamente. De esta manera se establece la recta de regresin de Lt+1 en funcin de Lt. La pendiente de la recta hallada es igual a e-K, y la ordenada al origen es: L_ (1 - e-K) con la cual L_ puede ser calculada. La longitud asinttica L es tambin la talla en la cual la recta de regresin corta la lnea diagonal de 45 desde el origen. Para estimar t0, la ecuacin de Von Bertalanffy se describe as: log (L_- Lt) = (log L + Kt0) - Kt Haciendo la regresin de loge (L + Lt) en funcin de t se obtiene que el valor de la ordenada al origen es loge(log_ + Kt0), de donde t0 puede ser estimado ya que se conocen los otros parmetros.

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Relacin Longitud - Peso El crecimiento puede ser medido tambin en peso. En los peces es usual medir la longitud, porque permite mayor precisin en el campo y luego relacionar esta con los valores de peso correspondientes. La relacin se expresa como: W = a Lb donde a y b son constantes.

Tasa de mortalidad Para la determinacin de la mortalidad es necesario estimar el nmero de peces para cada cohorte de la poblacin en un momento dado. La mortalidad de una cohorte est determinada por la mortalidad por pesca F (que puede ser 0) y la mortalidad natural M (predacin, enfermedad, vejez).

Fecundidad La fecundidad absoluta o total es el nmero de ovocitos maduros presentes en el ovario del pez, momentos antes del desove. El clculo de fecundidad se realiza generalmente en los peces sobre la base del recuento de ovocitos maduros a partir de una alcuota del ovario total. Algunos autores han adoptado tcnicas fotogrficas de recuento rpido, contadores fotoelctricos u otras tcnicas automticas. Un mtodo muy utilizado es el recuento en una cuadrcula y anlisis computarizado al azar. Una vez cuantificada la alcuota el valor puede referirse al ovario total mediante la expresin: F = (N PG)/PS Donde F es la fecundidad, N es el nmero de huevos contados, PG es el peso de las gnadas y PS es el peso de la submuestra utilizada. La fecundidad total suele ser relacionada con diversos caracteres mersticos como la longitud del pez (o la edad), el peso del pez o el peso de las gnadas, llamndose fecundidad relativa. Un mtodo comnmente utilizado para interpretar las variaciones del desarrollo gonadal (ciclo sexual) a lo largo del ciclo anual e indicar los cambios, es la relacin porcentual entre el peso del pez y el peso de las gnadas, conocido como ndice gonado-somtico (IGS).

Migraciones Son los desplazamientos peridicos realizados por una poblacin de peces o grupos de una poblacin para fines trficos o reproductivos. En general se deben a estas dos razones asociadas y presentan una marcada correlacin con la ciclicidad ambiental, como por ejemplo las variaciones del rgimen hidrolgico de la cuenca. El estudio de las migraciones y el registro de las distancias recorridas puede realizarse mediante marcas de distinto tipo. Las utilizadas en la cuenca del Paran-Plata son las del tipo "Lea" de construccin artesanal. Para conocer las rutas de preferencia dentro del cauce y detalles del comportamiento durante perodos cortos de tiempo se pueden utilizar marcas acsticas.

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Bioenergtica El ingreso de energa en una poblacin se produce a travs de la alimentacin. La modalidad adoptada se corresponde con los tipos ecolgicos y en cada caso se pueden verificar adaptaciones o especializaciones que tienden a optimizar el costo energtico de la captura de alimento. Los procesos fisiolgicos de intercambio de energa en un organismo se pueden medir a travs de la tasa metablica, esto es el metabolismo energtico por unidad de tiempo. En los peces se pueden medir tres niveles de metabolismo que se corresponden con el grado de actividad y procesos biolgicos involucrados: Metabolismo standard. Corresponde a un valor mnimo de consumo de energa, en reposo y sin procesos de digestin o absorcin. Metabolismo de rutina. Se mide en actividad normal, con el pez realizando solamente movimientos espontneos. Es el ms utilizado para trabajos de carcter ecolgico. Metabolismo activo. Se refiere a la energa requerida durante los desplazamientos de carcter defensivo, reproductivo o trfico. Para medir la tasa metablica en los organismos acuticos se utilizan tcnicas respiromtricas. En la oxidacin aerbica, al degradarse un sustrato alimenticio, la cantidad de calor producido a partir de un volumen dado de oxgeno es constante, no importa el tipo de alimento consumido. Para los clculos referidos a peces carnvoros se acepta un valor de 4.8 Kcal por litro de oxgeno consumido. En peces con otros regmenes trficos es importante definir los componentes de la dieta para utilizar ndices adecuados.

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Neuston
Es la "comunidad" errante constituda por organismos vinculados a la pelcula superficial, en la interfase agua-aire. Los organismos posados sobre ella son semiacuticos y, con excepciones, microscpicos o diminutos. No hay razn valedera para reunir al neuston sobre la pelcula superficial con el que cuelga de la misma, pues el primero est formado por animales semiacuticos, sin ninguna vinculacin con los animales acuticos que cuelgan de dicha pelcula. Para la obtencin de muestras se utiliza una placa de vidrio de aproximadamente 200 mm y 4 mm de espesor. Esta se sumerge verticalmente sobre la superficie y se retira levemente inclinada y con suavidad. La pelcula superficial de agua adherida a la placa de vidrio se recoge en una botella ad hoc. Las estimaciones de abundancia se llevan a cabo de manera similar a la indicada para el plancton.

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Pleuston, bafon, plocon, etc.


Se trata de "comunidades" asociadas a la vegetacin macroscpica, sumergida, flotante, arraigada, emergente, etc. El anlisis de estos organismos se realiza de diferentes maneras: 1) Extrayendo la vegetacin sumergida y lavndola vigorosamente en un balde con agua del mismo lugar; a continuacin la vegetacin se separa y el agua del balde, con los organismos desprendidos de la primera, se filtra y concentra en una red de plancton; 2) La cuantificacin de la vegetacin sumergida y organismos asociados a ella puede realizarse encerrando en un tubo metlico de unos 50-60 cm de dimetro, desde la superficie hasta el fondo, una columna de agua y extrayendo de all todo el material presente; 3) Ubicando la vegetacin en embudos de Berlese. El recuento de los organismos se efecta de manera similar a aqullos para el plancton.

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Perifiton
El perifiton, segn Wetzel (1983) es la comunidad compleja de microbiota (algas, bacterias, hongos, animales y detritus orgnico e inorgnico) que est adherida a un sustrato, el que puede ser orgnico o inorgnico, vivo o muerto. Una de las mayores complicaciones en el estudio y comprensin de la composicin y relaciones funcionales en el perifiton es la metodologa, por lo cual se utilizan distintas tcnicas con sustratos naturales y artificiales. Para estudiar perifiton en sustratos naturales, se toman muestras de macrfitas sumergidas, flotantes o palustres. Una parte se fija, para los estudios cuantitativos y otra se la mantiene viva para el posterior anlisis cualitativo. Para esto ltimo, en el laboratorio se raspa con un elemento filoso la superficie del sustrato y se coloca lo obtenido entre porta y cubreobjetos. Por otro lado, es muy difcil uniformar la metodologa cuantitativa cuando habra que implementar una diferente para cada tipo de sustrato. Por ello, se utilizan frecuentemente escalas de abundancia relativa. Uno de los mtodos de estimacin de las frecuencias relativas es el que usaremos en los prcticos. Consiste en el anlisis secuencial de aparicin de taxones en sucesivas alcuotas. Se hace un preparado con raspado o directamente se coloca una parte del sustrato epifitado entre porta y cubreobjetos y se cuenta el nmero de individuos de cada taxn en una transecta o en varias si no hay abundante material. Luego se monta otro preparado y se cuenta nuevamente el nmero de organismos de cada taxa, registrndose aqullas entidades que no aparecieron en el preparado anterior. Se repite el procedimiento hasta que el nmero de taxones nuevos sea muy bajo (1 2) y ms o menos constante. El total de individuos contados en todos los preparados ser el 100 % y a partir de l se estimarn los otros porcentajes.

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Bentos
Es el conjunto de organismos que habitan sobre y dentro del fondo de los ambientes acuticos. Su muestreo puede realizarse por mtodos diversos, dependiendo de las necesidades y propsitos del estudio, caractersticas del rea y de los sedimentos, profundidad, etc. (diversos tipos de dragas, extractores etc., ver Holme, 1964; Vegas Vlez, 1971; Boltovskoy y Wright, 1976). Las herramientas que se utilizarn en el curso para la obtencin del material bentnico son rastras y tubos de Lankford. Rastra La rastra consiste en un marco metlico triangular con su lado inferior en forma de cuchilla y el ngulo superior fijado a un mango de aproximadamente 2 m de largo. Del marco pende una bolsa de tela que retiene el sedimento levantado pero deja pasar el agua. Al utilizar la rastra es importante recoger solamente la capa superficial de sedimento. Las muestras obtenidas por rastra son utilizadas para anlisis cuantitativos y cualitativos relativos de los organismos bentnicos. Debido a que stos habitan en unos pocos cm superficiales del fondo, la extraccin de los sedimentos subyacentes diluye la muestra disminuyendo el grado de probabilidad de hallar a los organismos poco numerosos en submuestras pequeas. En el laboratorio, submuestras del material obtenido se diluyen en la proporcin necesaria con agua corriente y se examinan en una cpsula de Petri bajo lupa, y luego, entre porta y cubre, bajo microscopio. El anlisis cuantitativo consiste en la determinacin de las frecuencias relativas de las formas ms comunes. Lankford El tubo de Lankford es un extractor de sedimentos marinos o dulceacucolas utilizable hasta profundidades de no ms de 6 o 7 m. Consta de un par de tubos metlicos con una vlvula en su interior. Al tubo superior se pueden adicionar la cantidad de mangos prolongadores que hiciera falta para llegar a la profundidad deseada; el inferior se enrosca al tubo de acrlico que recoge la muestra. Una vez armado el extractor, se lo introduce en el sedimento, levantndoselo luego con cuidado. Apenas se ha sacado el tubo del agua se obtura la abertura inferior con un tapn de goma, luego se desenrosca el tubo de acrlico y se obtura su extremo superior. EL TUBO SE ROTULA (en caso necesario se fija su contenido con unos ml de formaldehdo, en una cantidad aproximadamente igual al 5-10% del contenido del tubo) y se guarda en posicin vertical. EN NINGUN MOMENTO EL TUBO DEBE SER INCLINADO NI PUESTO EN POSICION HORIZONTAL. El tubo de Lankford es un extractor de sedimentos estratificados, por ello su inversin o agitacin provocar la mezcla de las capas superiores con las subyacentes. Estas muestras pueden ser utilizadas para el clculo de la biomasa en las capas de sedimentos superiores. Dado que la cantidad de sedimentos extrados con este aparato es fcilmente cuantificable, su utilizacin para el estudio cuantitativo de la fauna y flora bentnicas es muy apropiada. Estimacin de la biomasa del bentos Las muestras de Lankford fijadas en el campo sern utilizadas para el anlisis de la biomasa. Esta se obtiene secando el sedimento obtenido (un volumen conocido proveniente de un estrato determinado), y luego quemndolo en una mufla. El procedimiento a seguir cuando se han trado las muestras al laboratorio es el siguiente: se quita el tapn inferior y se introduce el mbolo en el tubo; luego se quita el tapn superior y, presionando con el mbolo desde abajo hacia arriba, se eleva la columna de barro hasta que la misma sobresalga 1 cm por encima del lmite superior del tubo de acrlico, que corresponde a la submuestra superficial (nivel 0-1 cm). Esta porcin se corta con un cuchillo al ras de los

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bordes del tubo y se pone a estufa a 60-70C, en una cpsula de porcelana previamente pesada. A intervalos regulares de tiempo se verifica el peso de la cpsula con su contenido hasta que tres pesadas sucesivas presenten iguales valores. El mismo proceso se repite con las porciones inferiores (niveles 1-2 cm, 2-4 cm, 4-6 cm y 6-10 cm). Una vez que se ha llegado a peso constante, las cpsulas de porcelana se ponen en una mufla a 600-650C durante aproximadamente 2 horas. Luego las cpsulas se dejan enfriar lentamente y se pesan; la biomasa se calcula de la siguiente manera: Biomasa = [(pms - pmc) x 100] / pms donde pms: peso de material seco; pmc: peso de material calcinado. El resultado ser el porcentaje de material orgnico (quemado) que contiene el sedimento en cuestin.

BIBLIOGRAFIA (Adems de los trabajos citados a lo largo del texto, se incluyen tambin referencias de inters general sobre los tpicos tratados en esta seccin).
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Granulometra de sedimentos
INTRODUCCION Uno de los anlisis de importancia para el estudio de cuerpos de agua interiores es el relacionado con la granulometra y peso especfico de los sedimentos. Estos estudios permiten analizar caractersticas que tipifican y diferencian ambientes dulceacucolas lticos y lnticos, evaluar modalidades adaptativas de los organismos, influencia de un tributario sobre un lago, laguna, embalse, etc. En aguas corrientes los sedimentos presentes estn integrados por aqullos depositados en el lecho, y los transportados en suspensin. El anlisis de los primeros es indispensable ya que de este factor dependen muchas caractersticas de la flora y fauna asociadas, incluyendo su composicin y abundancia (Cummins y Lauff, 1969). En este sentido, es relevante no solamente la composicin qumica, sino tambin el contenido de material orgnico en el fondo, y especialmente la granulometra, es decir la proporcin de partculas de diferente tamao. En el caso de sedimentos en suspensin, es importante estimar la capacidad de transporte de las aguas corrientes y su posterior depsito en cuencas de recepcin (que puede ser otro curso de agua, un ambiente lntico, un estuario, etc.). La importancia de la deposicin de sedimentos en un cuerpo lntico es especialmente relevante cuando ste se utiliza para algn fin especfico (e.g., para generar electricidad, riego, turismo, refrigeracin, icticultura, etc.), ya que de esta tasa de deposicin depende la vida til de la cuenca. En el Embalse de Ro III, por ejemplo, esta acumulacin de sedimentos llega, en algunas zonas, a un espesor de 2,2 cm por ao, calculndose que la vida til del embalse ser de unos 150 aos. En estudios realizados en Estados Unidos se ha demostrado que, de 98 embalses investigados, el 39% prestan menos de 50 aos de servicio y solamente un 15% poseen una vida til superior a los 200 aos (Lpez Cadenas y Blanco Criado, 1968). La composicin de los sedimentos existentes en un cuerpo de agua lntico depende del origen de la cuenca, del aporte, y de los organismos que lo habitan o circundan. Pueden diferenciarse tres tipos de depsitos, de acuerdo a su gnesis: orgnicos, inorgnicos, e inorgnicos pero de origen orgnico (e.g., frstulos de diatomeas). Segn su tamao, las partculas sedimentarias usualmente se clasifican de acuerdo al siguiente cuadro:
bloque guijn guijarro arena limo arcilla > 250 mm 250-64 mm 64-2 mm 2 mm - 0.062 mm 0.062-0.004 mm < 0.004 mm

Esta diferenciacin en tamaos permite distinguir sustratos "duros" e "inmviles" sobre los cuales la fijacin de organismos vegetales o animales ser mayor cuanto ms rugosas sean sus superficies, de sustratos "mviles", en los cuales viven organismos perforantes, cavadores, ilifagos. El tamao de las partculas tambin define el volumen de los espacios intersticiales (conjuntamente con el grado de compactacin), de manera que ejerce una influencia directa

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sobre la difusin de gases, profundidad de los estratos anxicos, relacin entre la sedimentacin orgnica y descomposicin, tamao de los organismos colonizadores, etc. Las fracciones ms gruesas, hasta 64 m (arena), se separan del resto por tamizado, con mallas del poro adecuado. El porcentaje de las fracciones finas (limos y arcillas) se calcula sobre la base de los principios de la Ley de Stokes, segn la cual la velocidad de sedimentacin de una partcula es directamente proporcional a su radio. La ecuacin que describe esta relacin es: V=(2/g) g [(d1-d2)/] r 2 donde: V: velocidad de sedimentacin de una partcula de radio r y de densidad d1. g: aceleracin de la gravedad. d2: densidad del medio dispersante. : viscosidad dinmica del medio dispersante.

Diferentes tipos de extractores de sedimentos (de Boltovskoy y Wright, 1976, y Edmondson y Winberg, 1971)

PROCEDIMIENTO Obtencin de la muestra Las muestras pueden ser obtenidas, segn el ambiente de que se trate y las finalidades del trabajo, con rastra, con el tubo de Lankford, o con cualquier otro muestreador de fondo (ver figura). Tratamiento preliminar del material Antes de proceder a las determinaciones de granulometra, los sedimentos deben ser tratados para prepararlos para los anlisis. Eliminacin de la materia orgnica. Se realiza agregando a la muestra H2O2 y calentando. Si se presume que el sedimento tiene poca materia orgnica, agregar - a la muestra en agua en un recipiente de unos 400 ml - 100 ml de H2O2 al 6% despacio y revolviendo ;, calentar a 40C durante 1 hora, hervir brevemente al cabo de ese tiempo. Si la cantidad de materia orgnica es grande agregar

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H2O2 al 30% lentamente, sin dejar que la espuma rebalse el vaso de precipitado. Calentar a 40 durante 10 minutos. Evaporar el lquido hasta lograr una consistencia pastosa, agregar 10-30 ml de H2O2 al 30%, digerir a 40-60C durante 1 a 12 horas. El proceso se finaliza llevando a hervor durante un par de minutos para eliminar el exceso de H2O2. Esta tcnica no elimina trozos de materia orgnica tales como ramitas o corteza; si la muestra los contuviera deben eliminarse previamente mediante tamizado a travs de malla de 3-4 mm, o calcinando en mufla a unos 600-650C durante un par de horas. Eliminacin de sales y xidos. Los carbonatos se eliminan agregando a la muestra HCl y calentando a 80-90C hasta que cese el burbujeo; para verificar si la muestra an contiene carbonatos puede agregarse algo ms de HCl, el burbujeo se reinicia si an hay carbonatos presentes. Para eliminar los xidos de hierro la muestra se lleva a unos 300 ml con agua destilada, se deposita en ella un trozo de aluminio (por ejemplo, un cilindro de papel de aluminio), se le agregan 15 g de cido oxlico (en polvo o en solucin concentrada), y se hierve suavemente durante 10-20 minutos. Para sedimentos marinos es necesario eliminar las sales con procesos adicionales (Carver, ed., 1971). El material libre de materia orgnica (y de sales y xidos, si los hubiera) se seca en estufa (a NO MAS de 40C) hasta peso constante, y el polvo resultante se desagrega macerndolo entre los dedos o con un mortero con pistilo de goma o madera. Debe tenerse cuidado de desagregar los terrones pero no romper los granos que los componen. Del sedimento as tratado se separan exactamente 50 g, que deben ser dispersados.

Mezclador para sedimentos (de Carver, ed., 1971)

Dispersin 50 g de muestra seca se ponen en un erlenmeyer de 250 ml y se le agregan 100 ml de una solucin de Calgn (20 g en 1 litro de agua), nombre comercial del hexametafosfato de sodio (Na6(PO3)6). Este compuesto es un agente dispersante que se emplea para anular la accin de ciertas sustancias (generalmente coloidales) que puedan estar presentes en el medio y que acten como cementante. La accin del Calgn se da por un intercambio de cationes, sodio por calcio soluble, y una precipitacin del ion fosfato con el calcio de intercambio. Para una buena hidratacin y destruccin de los agregados es conveniente agitar bien y dejarlo actuar de 12 a 24 horas. Si el sedimento en cuestin es de textura gruesa conviene usar 100 g del mismo. Alternativamente, en vez de hexametafosfato de sodio pueden usarse el tripolifosfato de sodio, fosfato tetrasdico, carbonato de sodio,

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oxalato de sodio, silicato de sodio, o amonaco, pero todos son menos recomendables que el primero. El dispersante se deja actuar durante 12-24 horas. Para mejorar la dispersin la muestra puede ser hervida durante unos 15 minutos y agitada con un mezclador ad hoc (ver figura) o agitador magntico. Dado que para calcular las proporciones de las fracciones ms finas a las estimaciones se les debe restar el peso del dispersante, la cantidad de droga utilizada debe conocerse con precisin. DETERMINACION DE LA GRANULOMETRIA A partir de una suspensin que se considera homognea y en reposo, a medida que pasa el tiempo se van depositando las partculas suspendidas, con velocidades diferentes segn su densidad y tamao. De ese modo la densidad promedio para cada punto de la suspensin vara con el tiempo. La profundidad efectiva a la cual el hidrmetro mide la densidad de la suspensin es, aproximadamente, 10 cm. Luego de 40 segundos, todas las partculas de arena han decantado por debajo de aquella profundidad, midindose entonces el conjunto formado por el limo y la arcilla. Luego de transcurridas seis horas y cincuenta y dos minutos, se encuentra en suspensin solamente la fraccin arcilla. 1. Transferir al vaso de dispersin de un mezclador elctrico la solucin preparada anteriormente y agregar agua destilada sin llenar el vaso, de manera que el nivel de la suspensin quede unos 5 cm debajo del borde. 2. Dispersar durante dos minutos con el mezclador elctrico. 3. Transferir a una probeta graduada completando hasta un litro con agua destilada. 4. Homogeneizar la suspensin por agitacin usando una varilla que posea un aro en su extremo, perpendicular al eje de la misma. Retirar el agitador y tomar el tiempo de inmediato. 5. Poner el hidrmetro suavemente dentro de la suspensin y hacer una lectura a los cuarenta segundos luego de haber cesado de agitar. Retirar suavemente el hidrmetro. 6. Introducir el hidrmetro treinta segundos antes de la medicin siguiente, la que se efectuar a las seis horas cincuenta y dos minutos luego de finalizado el punto 4. 7. Repetir los puntos 4 y 5. Las correcciones que deben contemplarse son: 1. Debe restarse a cada lectura el aumento de densidad debido al desfloculante. Este valor se obtiene sumergiendo el hidrmetro en una solucin testigo de desfloculante, a la misma temperatura que la de la suspensin. 2. Por cada grado de temperatura superior a la de calibracin del aparato debe sumrsele 0,36 unidades a la lectura correspondiente. 3. La lectura del hidrmetro debe efectuarse en la superficie libre de la suspensin. Como frecuentemente es interferida por la turbidez, se aade una unidad a la lectura correspondiente (correccin por menisco).

Clculo de los resultados: %ARENA = 100%-(%LIMO + % ARCILLA) =100%-(lect. 40" correg./peso seco)100% %LIMO = (%LIMO + %ARCILLA) - %ARCILLA =(lect. 40" correg./peso seco)100% - %ARCILLA %ARCILLA=(lect. 412" correg./peso muest. sec. en estufa)100% BIBLIOGRAFIA
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Algunas determinaciones qumicas en limnologa


Las muestras de agua destinadas a la determinacin de sustancias disueltas (a excepcin de las usadas para oxgeno) deben ser filtradas inmediatamente despus de la recoleccin, utilizando membranas de tipo Millipore (0.45 m de poro), o filtros de fibra de vidrio tipo Whatman. De esta forma se eliminan los elementos particulados y los organismos que pueden establecer, durante el almacenamiento de la muestra, condiciones de equilibrio distintas a las que tenan en estado natural, o bien interferir de diferentes maneras en las determinaciones (absorcin y/o liberacin de iones durante el tratamiento, error por turbidez en mtodos espectrofotomricos, etc.).

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Oxgeno disuelto
INTRODUCCION El oxgeno se encuentra en abundancia en la atmsfera (casi el 21% a nivel del mar) y se disuelve fcilmente en el agua. Su solubilidad est relacionada no linealmente con la temperatura y se incrementa considerablemente en aguas fras, como se observa en la tabla que sigue: tC 0 5 10 15 20 25 30 35 O2 mg/l 14.63 12.77 11.28 10.07 9.08 8.26 7.57 6.98

Solubilidad del oxgeno en agua pura en relacin a la temperatura, para aire saturado a 760 mm Hg de presin.

La solubilidad del gas es influenciada adems por la presin atmosfrica, por lo que deben considerarse las condiciones meteorolgicas y la altitud del cuerpo de agua. Si el agua est en reposo total, la difusin del oxgeno hacia abajo es muy lenta. En cambio, cuando existe turbulencia el transporte es ms rpido, ya que se acelera la difusin en el sentido del gradiente existente. Otro factor que debe considerarse al estudiar el oxgeno disuelto es la actividad biolgica: la fotosntesis aumenta el contenido de O2, mientras que la respiracin (incluyendo la bacteriana) lo disminuye.

OBTENCION DE LA MUESTRA Para evitar cambios en la cantidad de oxgeno disuelto ocasionados por actividad biolgica o por liberacin a la atmsfera, es indispensable realizar la fijacin del oxgeno tan pronto como la muestra es recolectada. Durante la coleccin debe evitarse agitar la muestra e incluir burbujas de aire en el recipiente; normalmente se utilizan botellas de 100-200 ml de vidrio con tapa esmerilada llenndolas hasta el tope y eliminando el excedente al cerrar la botella.

DETERMINACION El mtodo para calcular el oxgeno disuelto en soluciones acuosas fue introducido por Winkler hace varias dcadas y en el transcurso de los aos se fue perfeccionando con diversas modificaciones. Dada su sencillez y relativa eficiencia, la determinacin del oxgeno es una de las primeras medidas que se realiza al estudiar un cuerpo de agua. Esta determinacin se basa en el hecho de que el NaOH KOH con el sulfato manganoso (SO4Mn) da hidrxido manganoso (Mn(OH)2), precipitado blanco. MnSO4 + 2NaOH --------> Mn(OH) 2 + Na2SO4

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El hidrxido manganoso tiene la propiedad de ser fcilmente oxidado, en presencia de O2, a hidrxido mangnico: 2Mn(OH) 2 + O2 + H2O --------> 2Mn(OH) 4 Las sales mangnicas son inestables en soluciones cidas, y en presencia de una sal de yodo se revierten a sales manganosas y el ioduro (I-) correspondiente, se oxida a yodo (I2), reducindose el Mn+4 del hidrxido al correspondiente catin Mn+2: 2Mn(OH) 4 + 4H2SO4 --------> 2 Mn(SO4) 2 + 8H2O 2Mn(SO4) 2 + 4KI(NaI) --------> 2MnSO4 + 2I2 + K+(Na+) La cantidad de yodo libre que se forma es equivalente a la cantidad de oxgeno que se puede determinar titulando el yodo con tiosulfato de sodio (S2O3Na2), hasta que todo el yodo libre se haya transformado en ioduro de sodio: 4Na2S2O3 + 2I2 --------> 2Na2S4O6 + 4INa El yodo libre otorga a la solucin un color pardo, cuya intensidad es proporcional a la concentracin de oxigeno en la muestra original. La observacin del punto final de la titulacin (desaparicin del color) se realiza con ms exactitud mediante el agregado de almidn como indicador, que da color azul en presencia de yodo (I2), y no lo da con ioduro de sodio (NaI). Preparacin de los reactivos Sulfato manganoso (MnSO44H2O) slido: 480 g (o 364 g de MnSO4H2O, o 400 g de MnSO42H2O). Llevar a un 1 litro de agua. Ioduro alcalino: hidrxido de sodio (NaOH) slido: 500 g. Agregar ioduro de potasio (IK) slido: 150 g. Llevar a 1 litro con agua destilada. Almidn soluble: 2 g en 100 ml de agua. Calentar hasta transparencia. Pueden agregarse 0.5 ml de formol para preservar. Acido sulfrico (H2SO4) concentrado (36N). Tiosulfato de sodio (Na2S2O35H2O) (P.M.= 248.19). Una solucin 1 N de tiosulfato contiene el peso molecular de esa sustancia en g/l; una solucin 0.025 N: 248.19 0.025 = 6.2048 g/l. Llevar 6.2 g de tiosulfato puro a 1 litro con agua destilada. Agregar algunas gotas de cloroformo para preservar. Guardar en oscuridad.

Estandarizacin del tiosulfato de sodio (o de potasio) La solucin de tiosulfato debe ser estandarizada cada vez que se vaya a utilizar. Los reactivos necesarios son: Solucin standard 0.25 N de dicromato de potasio: 0.6129 g de K2Cr2O7 en 500 ml de agua destilada recientemente hervida y enfriada; Solucin de yoduro de potasio al 25%: disolver 25 g de KI en 100 ml de agua destilada recientemente hervida y enfriada; Almidn: 2 g de almidn soluble en 100 ml de agua destilada. Calentar hasta que la solucin se vuelva transparente. Agregar 0.5 ml de formaldehido para preservar. Procedimiento: Colocar en un vaso de precipitado 100 ml de agua destilada hervida y enfriada.

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Agregar 3 ml de la solucin de IK al 25%. Agregar, por medio de una bureta, 50 ml de la solucin de dicromato de potasio. Agregar 10 ml de HCl concentrado. Titular el I2 liberado con la solucin standard 0.025 N de tiosulfato; cuando el color amarillo desaparece casi por completo agregar 2 ml de la solucin de almidn y continuar la titulacin hasta la desaparicin del color (el color final puede ser levemente verdoso debido a sales de cromo). El factor de correccin para el tiosulfato es: ml dicromato/ml tiosulfato = 50/x Por ejemplo, si la titulacin requiri 48.8 ml de tiosulfato 0.025 N, el factor ser: 50/48.8 = 1.024

Procedimiento En el campo se utilizan botellas de 100-300 ml de capacidad y con tapa esmerilada. Luego de llenarlas con el agua a analizar se tapan inmediatamente evitando que queden burbujas de aire. Se anota la temperatura del agua; se abre cuidadosamente la botella, se agregan 1 ml de sulfato manganoso y 1 ml de ioduro alcalino (NaOH + NaI). En ambos casos colocar el extremo de la pipeta en el borde del cuello de la botella, 1 cm debajo de la superficie del lquido y verter la cantidad indicada. Se tapa y se agita vigorosamente. El precipitado pardo que aparece es hidrxido mangnico. Estas etapas deben realizarse en el terreno, y lo antes posible, para evitar el contacto con el aire atmosfrico. La mezcla puede entonces guardarse por dos o tres das. En el laboratorio se agrega 1 ml de cido sulfrico concentrado. Si el precipitado no se disuelve, agregar algo ms. Puede formarse una burbuja gaseosa, pero es de CO2 y no tiene importancia. Se transfieren 100 ml de la muestra a un erlenmeyer de 250 ml. Se titula con tiosulfato de sodio o potasio hasta que el color pardo del I2 desaparezca casi completamente. Entonces se agregan unas gotas de almidn y se contina titulando hasta desaparicin total del color azul. Es posible que ocurra un posterior retorno del color azul, el cual debe ignorarse; esto se debe a la absorcin de O2 adicional del aire y a la liberacin de I2 del HI presente en la solucin cida: 4HI + O2 -------> 2I2 + 2H2O CALCULO DE RESULTADOS

F = Factor de correccin

INTERFERENCIAS

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El indudable valor de este mtodo tan sencillo puede disminuir bajo determinadas condiciones. Si hay mucho plancton, algo de yodo liberado puede ser absorbido por l, principalmente por sus grasas. La presencia de nitritos, sulfuros y materia orgnica reductora es causa de interferencias, las que pueden obviarse modificando ligeramente la tcnica de anlisis (ver ms abajo). Se detallan a continuacin los tratamientos de correccin ms usuales. Anlisis general para determinar la presencia de materiales de interferencia. Reactivos 1. KI al 5%: disuelva 5 g de KI en 100 ml de agua destilada. 2. HCl concentrado. 3. Solucin stock de yodo: disuelva 6 g de KI ms 4 g de I2 en 100 ml de agua destilada. 4. Solucin diluda de yodo: agregue 1 gota de la solucin stock de yodo a 100 ml de agua destilada. 5. Tiocianato de potasio: disuelva 5 g en 100 ml de agua destilada. 6. Ferrocianuro de potasio al 5%: solucin acuosa, 5 g en 100 ml de agua destilada. 7. Solucin de cido sulfmico: 30 ml de cido actico glacial en 100 ml de agua destilada. Agregue 0.5 g de alfa-naftilamina. Agite y filtre a travs de un algodn. Almacene en botella color caramelo, en la oscuridad. 8. Solucin de almidn: 2 g en 100 ml de agua destilada. Procedimiento 1. Colecte 50 ml de muestra en un vaso de precipitado. 2. Filtre, de ser necesario, a travs de papel o algodn (si hubiere mucho material particulado). 3. A 10 ml de la muestra agregue 1 ml de KI al 5% y 1 ml de HCl concentrado. Mezcle. Si el color resultante es marrn a amarillo los resultados de Winkler podrn ser sobrestimativos. 4. A 10 ml de la muestra agregue 2 gotas de solucin de almidn. A continuacin agregue solucin diluida de yodo gota a gota mezclando luego de cada una; registre la cantidad de gotas necesaria para llegar a un color azul permanente. En otro recipiente coloque 10 ml de agua destilada y agrguele 2 gotas de solucin de almidn. Agregue solucin diluida de yodo gota a gota mezclando luego de cada una; registre la cantidad de gotas necesaria para llegar a un color azul permanente. Si las gotas necesarias para la muestra fueran menos que las requeridas para el agua destilada se estara en presencia de materiales que absorben el I y causan resultados demasiado bajos (e.g., compuestos frricos, sulfitos, materia orgnica).

Turbidez Aguas con alto contenido en material en suspensin, sobre todo sedimentos, deben ser tratadas de la siguiente manera: A 1 l de agua de muestra agregar 10 ml de una solucin de sulfato de potasio y aluminio [KAl(SO4)2]; y a continuacin 1 ml de NaOH al 35% (evite el exceso de hidrxido). Tapar y mezclar invirtiendo el recipiente. Dejar sedimentar el precipitado y decantar el sobrenadante para analizar.

Aguas servidas, con alto contenido en materia orgnica Disuelva 16 g de cido sulfmico en 200 ml de agua destilada. Disuelva 25 g de CuSO45H2O en 250 ml de agua destilada. Mezcle ambas soluciones y agregue 12 ml de cido actico glacial. Vierta 10 ml de la solucin obtenida en una botella de 1 l, agregue la muestra escurriendo por la pared. Mezcle invirtiendo el recipiente y deje sedimentar (aprox. 30").

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Utilice el sobrenadante para determinar oxgeno disuelto.

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Produccin primaria Mtodo del oxgeno disuelto


INTRODUCCION Existen varios mtodos para evaluar la produccin primaria, tanto directos (por ejemplo el del carbono catorce, 14C), como indirectos (por medio de la estimacin de la cantidad de oxgeno disuelto generado como resultado de la fotosntesis, ver ms abajo). En los trabajos prcticos se utilizar ste timo, pero es importante dedicar unas lneas al principio de la metodologa del 14C, actualmente ms utilizado que el indirecto. El mtodo del 14C utiliza una marca radiactiva para medir la cantidad de carbono inorgnico que es asimilado (fijado) por el fitoplancton. Mediante el uso de una botella que permite el paso de la luz (clara) y de otra opaca (oscura) es posible determinar la cantidad de este carbono que es fijado a travs de los procesos fotosintticos, es decir la fotosntesis o produccin primaria. En este mtodo se agrega el 14C (en forma de H 14CO3-) a dos muestras de fitoplancton en sendas botellas, una clara y otra oscura, y stas se incuban (ya sea in situ o en condiciones de laboratorio con iluminacin artificial) durante 4-6 h con el fin de permitir la actividad fotosinttica (produccin primaria) en la botella clara. La botella oscura sirve como control para deducir el carbono fijado mediante procesos no fotosintticos. La relacin entre carbono disponible en el medio y carbono incorporado por los vegetales en el proceso de la fotosntesis no es igual para el elemento comn (14C) y el radiactivo (14C):

C asimilado = 12 C disponible

12

14 14

C asimilado 1.05 C disponible

En consecuencia, la correccin que se aplica es la siguinete:


12

C asimilado =

14 14

C asimilado 12 C disponible 1.05 C disponible

Introduciendo la variable tiempo en la ecuacin anterior se obtiene la expresin que permite calcular la cantidad de carbono asimilado mediante procesos fotosintticos:
14 12

C asimilado =

C fijado bc
14

14

C fijado bo

C disponible

12C disponible 1.05

1 t

Donde el 12C asimilado y disponible se expresa en mgl-1h-1, el 14C fijado y disponible en centelleos por minuto (cpm), y el tiempo (t) en horas. 14Cfijado bc y 14Cfijado bo son el 14C fijado en la botella clara y en la botella oscura, respectivamente. El 14C fijado en las dos botellas se mide ponderando la actividad radiactiva. Para ello se ponen las muestras en oscuridad inmediatamente luego de finalizada la incubacin y se filtran para recolectar la fraccin particulada. Los filtros son lavados con agua acidificada (pH 2) para eliminar el 14C no fijado, y la actividad radiactiva es determinada mediante recuentos en contador de centelleo lquido. El 12C puede medirse como C total disponible

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mediante tcnicas estndar como las titulaciones de alcalinidad o la cromatografa de gases. La principal ventaja de este mtodo es que es muy sensible y permite medir valores de fijacin de carbono muy bajos, por lo que su uso es recomendable cuando se esperan tasas fotosintticas inferiores a 15 mg Cm-3h-1. Sin embargo presenta algunas limitaciones: la principal es que, a diferencia del mtodo del oxgeno (ver ms adelante), la botella oscura no representa respiracin, sino fijacin de carbono por procesos no fotosintticos, de manera que este mtodo no permitira estimar la produccin primaria neta. Sin embargo, an est en debate si el mtodo mide produccin primaria bruta o neta; el resultado parece estar ligado al tiempo de incubacin aplicado. Aparentemente, usando tiempos de incubacin de menos de 4 h se obtienen valores prximos a la produccin primaria bruta. De cualquier manera, esta tcnica no es recomendable para tiempos largos (> 6 h) de incubacin, dado que ello incrementa inaceptablemente las cantidades del 14C asimilado que retorna al medio por procesos de respiracin y de difusin. Los tiempos de incubacin necesariamente breves pueden, en ocasiones, constituir una limitacin. Tambin debe considerarse que el filtrado debe hacerse con sumo cuidado y a presiones menores a los 0.5 kg/cm2, ya que de lo contrario se corre el riesgo de romper las algas y perder carbono orgnico asimilado. Finalmente, tambin pueden representar una complicacin los problemas derivados del manejo de sustancias radiactivas y sus residuos.

METODO DEL OXIGENO DISUELTO El mtodo consiste en lo siguiente: con un frasco se obtiene una muestra de agua del lugar y profundidad donde se incubarn las botellas. Una fraccin de este volumen se fija inmediatamente con los reactivos de Winkler (este valor, el testigo, corresponde al oxgeno inicial presente en las botellas clara y oscura), y con el resto se llenan las botellas clara y oscura (la botella oscura debe serlo totalmente; la pintura es insuficiente para opacar el vidrio, se aconseja cubrirla con una lmina de aluminio y una o dos capas de tela adhesiva negra) y se ubican para su incubacin durante 4 a 6 horas. Una vez transcurrido este lapso, se retiran las botellas, se fijan inmediatamente y, una vez en el laboratorio, se determina el oxgeno disuelto en ambas (y en el testigo). Usualmente las botellas se disponen en bateras de varios pares, un par a cada uno de los niveles elegidos. El conjunto puede ir colgado de un cabo con una boya en un extremo y un fondeo de unos 10 kg en el otro. El implemento ilustrado en la figura se utiliza para armar la batera. En la zona costera las botellas se disponen directamente sobre el fondo, en aguas de 10-20 cm de profundidad. En la botella clara se produce el oxgeno por fotosntesis, y se consume por respiracin vegetal, animal y bacteriana. En la botella oscura solamente hay utilizacin del oxgeno y el contenido final de ste, restado del inicial, corresponde al consumido por respiracin. La diferencia entre las botellas clara y oscura indica la medida del oxgeno producido por fotosntesis. Teniendo en cuenta que la produccin de oxgeno es directamente proporcional a la fijacin de la energa luminosa, la diferencia de oxgeno entre las botella clara y la oscura indica tambin la produccin bruta de materia orgnica en un perodo determinado; mientras que la diferencia entre la botella clara y la testigo indica la produccin neta.

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Instalacin de una batera de botellas clara y oscura. A) Antes de colocar el cabo y la banda elstica; B) Detalles del nudo (no se indican las botellas y la banda elstica); C) Posicin en el agua. 1: placa de acrlico; 2: botellas clara-oscura; 3: cabo; 4: banda elstica; 5: perforaciones mayores; 6: perforacin menor; 8: hacia el prximo par de botellas.

FUENTES DE ERROR Uno de los problemas ms graves es la formacin de burbujas de aire; por ello debe tenerse especial cuidado durante el llenado, apertura y vaciado de las botellas. Tambin puede colocarse previamente el agua en un recipiente grande y agitar vigorosamente para eliminar la sobresaturacin. La temperatura de incubacin debe ser igual en ambas botellas, ya que la respiracin y fotosntesis estn ntimamente ligadas con aqulla. La respiracin de las clulas algales puede decrecer ms en las botellas oscuras que en las claras, sobre todo en perodos de incubacin prolongados. La respiracin puede ser mayor en la botella clara por efectos de la mayor oxigenacin debida a la fotosntesis. El crecimiento heterotrfico de algunas especies algales en las botellas oscuras puede ser muy significativo. En la botella clara el crecimiento algal puede ser mayor que en el medio, por el efecto estimulante de las paredes del recipiente. Las algas pueden sedimentar en las botellas, disminuyendo de esta manera su actividad metablica con respecto a las poblaciones en el medio natural. El efecto bacteriosttico de las secreciones algales es menor en las botellas oscuras que en las claras (debido al mayor metabolismo en las ltimas). Este error es especialmente grave en agua muy oligotrficas, donde el crecimiento bacteriano es especialmente alto en ausencia de actividad algal (en cuerpos eutrficos el agua contiene de por s concentraciones altas de agentes bacteriostticos). En la botella oscura el desarrollo bacteriano es estimulado por la presencia de una mayor concentracin de sustancia orgnica en descomposicin, proveniente de la muerte de las algas. El mtodo de Winkler no da resultados satisfactorios en aguas con alta concentracin de materia orgnica disuelta (aporte de aguas servidas, vegetacin en descomposicin), ni en ambientes excesivamente ricos en fitoplancton; un significativo consumo de yodo puede deberse a la retencin de este elemento por parte de los aceites vegetales. La mxima precisin posible con este mtodo es de 0.024 ml O2/l en los casos de determinacin simple, y de 0.017 ml O2/l cuando se titula dos veces cada botella.

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Carbono inorgnico
INTRODUCCION El carbono de los cuerpos de agua continentales se encuentra principalmente en forma de productos de equilibrio con el cido carbnico (CO2, HCO3-, CO3=). El dixido de carbono (CO2) es muy soluble en agua (unas 200 veces ms que el oxgeno) como puede verse en la tabla adjunta: tC 0 10 20 30 mg CO2 /l 1.10 0.76 0.56 0.42

Cantidad de dixido de carbono en agua pura en equilibrio con una atmsfera con 0.033% de CO2 en volmenes a 30C.

El dixido de carbono disuelto en agua se hidrata formando cido carbnico, el cual se disocia en dos etapas. CO2 + H2O <===> H2CO3 <===> HCO3- + H+ <===> CO3= + 2H+ Las proporciones relativas de las distintas especies qumicas varan con el grado de acidez de la solucin; ello permite estimar la cantidad de carbonato presente por medicin de pH.

Los iones bicarbonato en el agua cumplen dos importantes funciones: (1) Proveer un sistema buffer para la regulacin de la concentracin de iones hidrgeno (H+); (2) Proveer dixido de carbono para la fotosntesis. As, este proceso tiene influencia en el pH del agua, provocando la utilizacin de dixido en forma de carbonato en presencia de luz, e interrumpiendo este proceso en la oscuridad.

Sistema carbnico - carbonato Este sistema de equilibrio es un rpido regulador del pH, y acta como el principal buffer en las aguas dulces. La respiracin de los organismos produce dixido de carbono, por lo que

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aumenta la presin parcial de este gas y la cantidad de cido carbnico; parte del carbonato pasa a bicarbonato, amortiguando la produccin de iones hidrgeno.

Por el contrario, si por prdida de gas a la salida de los manantiales o por la actividad de los vegetales se elimina dixido de carbono del agua, parte de los iones de bicarbonato pasan a carbonato, precipitndose carbonato clcico al llegar a cierto punto, con lo que disminuye la reserva alcalina. Esto pasa en los lagos de aguas duras, ocurriendo una prdida importante de carbono inorgnico, y orgnico, ya que este ltimo sedimenta adsorvido al carbonato clcico.

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Alcalinidad
La alcalinidad de las aguas se refiere a la cantidad y clase de compuestos presentes que, en conjunto, llevan el pH a valores mayores que 7. Los trminos alcalinidad, alcalinidad de carbonatos, base de titulacin, reserva alcalina, capacidad de combinacin con cidos, capacidad buffer y exceso de base son sinnimos. El trmino alcalinidad no es el mejor nombre entre los mencionados, aunque sea muy usado, ya que tiene poca relacin con la terminologa del pH; aguas con bajo pH pueden ser de alta alcalinidad. La alcalinidad se determina titulando con un cido fuerte la cantidad total de bases, normalmente en equilibrio con el carbonato y bicarbonato. Dentro de la gama de valores bajos de alcalinidad, sta es atribuble en su mayor parte al calcio; en los casos de valores muy altos, el sodio forma una parte importante del exceso de cationes. La alcalinidad puede considerarse como un ndice de la naturaleza y del grado de lavado de las rocas en un drenaje. Se suele expresar en partes por milln (mg/l) de CaCO3, aunque la expresin ms clara es la de miliequivalentes por litro (1 meq = 50 ppm CaCO3). En lagos de cubierta silcea, con aguas muy puras, es de alrededor de 0.3 meq/l; en lagos alcalinos llega a 4.5 meq/l. Las aguas con mayor reserva alcalina son las ms tamponadas, mientras que las muy puras, de pequea alcalinidad, estn sometidas a oscilaciones violentas de pH. Sin embargo, en aguas muy alcalinas puede producirse una intensa precipitacin de Ca++, que puede llegar a depositarse sobre los mismos organismos.

OBTENCION DE LA MUESTRA An con una cuidadosa tcnica de extraccin es de esperar una cierta prdida de dixido de carbono libre durante la obtencin y almacenamiento de las muestras. Esta situacin ocurre ms frecuentemente cuando el gas est presente en grandes cantidades. Ocasionalmente, las muestras pueden evidenciar un incremento en el contenido de dixido de carbono libre durante su almacenamiento, por lo cual es recomendable la determinacin en el campo en el momento de extraccin de la muestra. En el caso de que una determinacin en el campo sea impracticable, las botellas de recoleccin deben ser llenadas en su totalidad para ser transportadas al laboratorio. Las muestras se deben mantener, hasta el momento de su anlisis, a una temperatura por debajo de aqulla a la que se encontraba el agua en el momento del muestreo. Adems, la determinacin en el laboratorio debe ser realizada lo antes posible para as minimizar los cambios de concentracin de dixido de carbono en la muestra.

DETERMINACION El ensayo de alcalinidad es el mtodo comn para la determinacin del contenido de CO3= en una muestra de agua, y puede hacerse de varios modos. El mtodo de Wattenberg consiste en titular el agua con un cido fuerte (suele emplearse cido clorhdrico) a fin de desplazar los iones carbonato y bicarbonato de sus sales; al bajar drsticamente el pH, estos pasan a dixido de carbono libre; ste se elimina por calentamiento y se valora el exceso de cido con una base fuerte de la misma normalidad. Se usa fenolftalena como indicador del pasaje de carbonato a bicarbonato, y heliantina para la indicacin del punto final en valoracin de bicarbonatos totales. Para la titulacin se emplea cido sulfrico 0.02

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N. El mtodo que se describe a continuacin es el que se emplear en la prctica; valora la alcalinidad total (atribuble a HCO3-, CO3= y OH-). Se toman 100 ml exactos de muestra y se colocan en un erlenmeyer. Se agregan 2 3 gotas de indicador naranja de metilo y se titula con cido clorhdrico (ClH) 0.1 N 0.01 N. El punto final de la titulacin se determina con el viraje del indicador de AMARILLO a NARANJA, que ocurre a pH 4.4.

Expresin de los resultados La capacidad de combinacin con los cidos se expresa como la cantidad de ClH 0.1 N utilizado para 100 ml de muestra. El resultado se expresa en mg/l. Si se desea expresar como dureza debida a carbonatos ser: volumen de ClH 0.1 N usado (en ml) 2.8 = dureza debida a carbonatos. Si se expresa como dixido de carbono combinado ser: volumen de ClH 0.1 N usado (en ml) 22 = CO2 combinado. Ejemplo: Si el dato obtenido de la titulacin fue 3 ml de ClH 0.01 N, antes de llevar a cabo el clculo final, es necesario determinar el volumen correspondiente a ClH 0.1 N. Para ello sabiendo que: V1 N1 = V2 N2 siendo: V1= volumen de ClH 0.01 N; N1= 0.01 N; V2= volumen de ClH 0.1 N; N2= 0.1 N resulta: V2 = V1 N1 / N2 V2= 3 ml 0.01 N / 0.1 N V2= 0.3 ml. Una vez obtenido este valor, se puede calcular la cantidad de carbonatos presentes en base a lo indicado anteriormente.

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Demanda qumica de oxgeno (DQO)


La determinacin del oxgeno consumido es una medida del material oxidable y constituye una aproximacin a la cantidad de materia orgnica y/o reductora presente. El mtodo ms usado es el del dicromato de potasio. Se lleva a cabo realizando una digestin de la muestra en medio cido mediante el agregado de una solucin de cido sulfrico y sulfato de plata, y utilizando como agente oxidante dicromato de potasio. La muestra as preparada se hace hervir durante dos horas. Este proceso debe realizarse en un aparato de reflujo, que consiste de un erlenmeyer sobre el cual se adapta un condensador a fin de evitar la prdida de sustancias voltiles producidas durante la digestin. Tambin puede hacerse en autoclave. Finalmente el dicromato de potasio excedente se titula con sulfato ferroso amoniacal utilizando ferrona como indicador hasta que el color vire de verde azulado a marrn rojizo. Debe realizarse simultneamente un blanco de agua destilada que se someter al tratamiento completo. Los resultados se calculan segn la siguiente frmula: DQO (mg/l) = [(a-b) N 8000] / V donde: a= volumen utilizado en la titulacin del blanco (ml); b= volumen utilizado para la titulacin de la muestra (ml); N= normalidad del sulfato ferroso amoniacal; V= volumen de la muestra (litros). Para evitar la interferencia de los cloruros debe agregarse a la muestra 1 g de sulfato de mercurio por cada 100 mg de cloruros presentes. Tambin los nitritos pueden interferir en las determinaciones; para evitarlo se aaden a la solucin de dicromato de potasio 10 mg de cido sulfmico por cada mg de nitrito presente en la muestra.

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Fosfatos
INTRODUCCION El fsforo (P) es un factor limitante principal del que muchas veces dependen los organismos acuticos. Proviene de la disgregacin y lavado de las rocas que lo contienen, degradacin de los organismos, aportes de origen antrpico (desechos domsticos, agroqumicos, etc.). El ortofosfato es la nica forma mineral significativamente importante. Ms del 90% del fsforo del agua continental est como fosfatos orgnicos y como constituyentes celulares de la materia viva particulada del seston, o asociado de diversas formas con partculas orgnicas muertas y materiales inorgnicos. En los organismos el fsforo se encuentra en forma de steres fosfricos, y la liberacin del fosfato luego de la muerte es rpida y uniforme ya que el enlace de ste con las molculas orgnicas es fcilmente hidrolizable. Parte del fsforo que interviene en el ciclo orgnico queda inmovilizado en los sedimentos como fosfato de calcio o fosfato frrico. Las concentraciones totales de fosfato en las aguas naturales no contaminadas varan entre amplios lmites, desde menos de 1 mg/l hasta niveles extremos en lagos salinos cerrados (>200 mg/l). Si las muestras recolectadas en el campo no se filtran o se preservan para su posterior filtracin, el agua recolectada contendr el fsforo en todas sus formas. En este caso es conveniente analizar el fsforo total, para lo cual debe realizarse previamente una digestin de la muestra en medio cido. Con esta digestin todas las formas pasan a fosfato soluble (fsforo total = fsforo disuelto + fsforo particulado).

METODO Existen varios mtodos para determinar fosfatos pero los ms utilizados son el del cido ascrbico y el del cloruro estaoso. El segundo, que describiremos detalladamente, es ms sensible (mnimo detectable: 3 g/l de PO4-P), y consiste en la reaccin del molibdato de amonio con el fsforo de la muestra dando cido molibdofosfrico, y la reduccin de este compuesto por cloruro estaoso. Se origina un compuesto de color azul (azul de molibdeno), y se determina la concentracin por espectrofotometra.

Preparacin de los reactivos Solucin de fenolftalena: 1 g en 100 ml de etanol. Reactivo de molibdato de amonio: disolver 25 g de molibdato de amonio en 175 ml de agua destilada; en otro recipiente agregar cuidadosamente 280 ml de cido sulfrico concentrado a 400 ml de agua destilada y dejar enfriar. Agregarle la solucin de molibdato de amonio y completar a 1 l con agua destilada. Reactivo reductor: disolver 2.5 g de cloruro estaoso en 100 ml de glicerol y calentar en bao Mara revolviendo con una varilla de vidrio. Solucin patrn de fosfato: disolver 219.5 mg de fosfato de potasio anhidro dihidrogenado en 1 l de agua destilada (1 ml de esta solucin = 50 g de PO4-P). Diluir 10 ml de esta solucin en 90 ml de agua destilada. Solucin S-N fuerte: agregar 300 ml de cido sulfrico concentrado a 600 ml de agua destilada y dejar enfriar. Aadir 4 ml de cido ntrico concentrado y llevar a 1 l con agua destilada (para controlar pH). Solucin de H2SO4 para digestin: agregar cuidadosamente 300 ml de H2SO4 concentrado a

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600 ml de agua destilada y luego llevar a 1 litro con agua destilada. Curva de calibracin Se construye una curva de calibracin segn el siguiente esquema (cantidades en ml):
Patrn fosfato Agua destilada Molibdato de amonio Reactivo reductor g/l de P-PO4 Blanco 0 100 4 0.5 1 0.5 99.5 4 0.5 25 2 1 99 4 0.5 50 3 2 98 4 0.5 100 4 5 95 4 0.5 250 5 10 90 4 0.5 500 6 20 80 4 0.5 1000

Se agitan las soluciones y entre los 10 y los 12 minutos se leen en un espectrofotmetro a 690 nm contra el blanco. Debe trabajarse a temperatura constante entre 20 y 30C, dado que la intensidad del color depende de ella.

Procedimiento Se toman 50 ml de muestra y se le agrega 1 gota (0,05 ml) de fenolftalena. Si toma color rosado agregar una gota de la solucin S-N para que desaparezca el color. Si esto no ocurre repetir la operacin. Luego se agrega 1 ml de solucin cida para digestin y una punta de esptula de persulfato de amonio (tratamiento para digestin cida). Se lleva la muestra a autoclave durante 30 minutos. Enfriar y llevar a 100 ml con agua destilada. Controlar el color con fenolftalena segn se explic ms arriba. Luego se procede de igual manera que con los patrones de fosfato (4 ml de molibdato de amonio, 0,5 ml de reactivo reductor). Por interpolacin entre los puntos de la curva de calibracin se obtiene el contenido de fosfato para cada muestra.

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Determinacin de la concentracin de slidos disueltos y en suspensin


Las partculas slidas en el agua pueden presentarse de dos formas: disueltas o en suspensin. La cantidad de slidos en el agua afecta la transparencia de la misma, lo que a su vez incide de manera directa sobre la productividad primaria. En general los ros suelen presentar elevadas concentraciones de slidos suspendidos (hasta varios gramos por litro). Las partculas ms pequeas (coloidales) son muy importantes para el metabolismo del cuerpo de agua ya que en ellas se adsorben nutrientes.

Preparacin de los filtros Los discos de papel Whatman GF/C o similar se colocan en un embudo Buchner y se lavan con agua destilada con ayuda de una bomba de vaco. Luego se transfieren a una plancha de papel aluminio y se secan en estufa a 103C hasta peso constante. Se dejan enfriar en un desecador y se pesan. Tratamiento de las muestras Se filtran 100 ml de muestra a travs de los discos ya pesados, obtenindose dos fracciones: A) Slidos filtrables o disueltos (quedan en el erlenmeyer) B) Slidos no filtrables, en suspensin o particulados (quedan retenidos en el filtro). A) Se retira el lquido del erlenmeyer y se coloca en una cpsula de porcelana previamente secada en estufa y pesada. Se lleva la cpsula a bao mara y se deja hasta que se evapore por completo el agua. Luego se lleva a estufa hasta peso constante. La cantidad de slidos disueltos en la muestra se obtiene por diferencia. B) Se colocan los filtros con la fraccin particulada en una plancha de aluminio y se llevan a estufa hasta su total desecacin. Luego se pesan indicando la cantidad de slidos en suspensin por diferencia de pesos.

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Compuestos de nitrgeno
El nitrgeno se encuentra en tres formas en el agua: Nitrgeno molecular (N2): gas disuelto, en equilibrio con el atmosfrico. Compuestos inorgnicos: amonaco (NH3) en equilibrio con amonio (NH4+), e hidrxido de amonio (NH4OH); nitrito (NO2-) en pequeas cantidades (excepto en condiciones anaerbicas) ya que generalmente se oxida a nitrato (NO3-), la nica forma estable y la que es mayormente captada por las algas y bacterias. Compuestos orgnicos, ya sea en forma de materia particulada o disueltos. De los mencionados, es interesante el estudio de los de tipo inorgnico como amonio, nitrito y nitrato; las proporciones relativas entre estas tres distintas formas representan el equilibrio de una multitud de procesos biolgicos y expresan la marcha de los mismos. As, los enlaces del amonio se liberan por la degradacin de protenas, y por una mayor o menor degradacin bacteriana pasan a nitrito y luego a nitrato. Por otra parte, las aguas subterrneas y de manantial que no estn contaminadas por el hombre contienen, por lo general, nitrato pero no amonio. Si este ltimo aparece en cantidades fcilmente detectables (ms de 0.1 mg/l) indica procesos de putrefaccin en el agua, ya sea por oxidacin incompleta del amonio, o de origen exgeno.

DETERMINACION DE AMONIO El mtodo se basa en que el ion amonio da una coloracin pardo- amarillenta con el reactivo de Nessler (tetraiodo mercuriato de potasio). esta reaccin permite determinar, en forma semicuantitativa en el campo las cantidades de amonio presentes en el agua, acotando las cantidades segn la intensidad del color.

DETERMINACION DE NITRITO El mtodo consiste en hacer reaccionar el nitrito con sulfanilamida en medio cido, resultando un diazocompuesto que reacciona con la n-(1-naftil)-etilendiamina, dando un compuesto coloreado cuya extincin se mide a 543 nm.

DETERMINACION DE NITRATO su determinacin consiste en el pasaje de los nitratos del agua a nitritos, los que luego se determinan por el mtodo anterior. El nitrato pasa a nitrito casi completamente al atravesar una columna con limaduras de cadmio.

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Valoracin cualitativa de la materia orgnica


A continuacin se describe un mtodo rpido y sencillo que permite estimar en forma cualitativa si el contenido de materia orgnica en una muestra de agua es alto, medio o bajo. Materiales tubos de ensayo (uno por muestra) gradilla pinzas de madera mechero cido sulfrico (H2 SO4 ) diludo (1:3) permanganato de potasio (KMnO4 ) N/100

Mtodo Al agregar cido sulfrico el permanganato de K desprende oxgeno, y ste oxida a la materia orgnica:
2 KMnO4 + 3 H2SO4 [violeta]------------> 2 MnSO4 + K2SO4 + 3 H2O + 5 O [incoloro]

El permanganato de potasio es reducido y el consumo de permanganato necesario para la oxidacin de la materia orgnica se puede estimar por la desaparicin del color violeta. Procedimiento Se colocan en un tubo de ensayo 10 ml de muestra, se agregan 5 gotas de H2 SO4 diludo y 3 gotas de solucin N/100 de KMnO4. Se agita y se deja reposar. Si no se decolora, se procede a calentar, agitando cuidadosamente para evitar que el lquido hirviendo salte del tubo. Resultados Segn el contenido de materia orgnica de la muestra, variar el consumo de KMnO4 y el tipo de reacin observada de la siguiente manera:
nCantidad de M.O Alto Medio Bajo No detectable Consumo de KMnO4 > 30 mg/l 20 - 30 mg/l 12 - 20 mg/l < 12 mg/l Reaccin decolora sin calentar decolora luego de hervir decolora luego de hervir y reposar no decolora

BIBLIOGRAFIA
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Pergamon Press, Oxford, 173 pp. Rainwater, F.H. y L.L. Tatcher. 1960. Methods for collection and analysis of waters samples. Geol. Surv. WaterSupply Pap. 1454, (U.S. Govt. Print. Off, Washington). Ringuelet, R.A., A. Salibin, E. Clavrie y S. Ilhero, 1976. Limnologa qumica de las lagunas pampsicas (Provincia de Buenos Aires). PHYSIS (Buenos Aires), 27 (74):201-221. Schwoerbel, J. 1979. Mtodos de hidrobiologa. Blume, Madrid. Strickland, J.D.H. y T.R. Parsons. 1968. A practical handbook of seawater analysis. Bull. Fish. Res. Bd. Canada 167. Welch, P. 1935. Limnology. McGraw-Hill, New York-London.

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Algunas reglas bsicas de higiene y seguridad en laboratorios


Las medidas de Seguridad en Laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la salud de los que all se desempean frente a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar accidentes y contaminaciones tanto dentro de su mbito de trabajo, como hacia el exterior. Las reglas bsicas aqu indicadas son un conjunto de prcticas de sentido comn realizadas en forma rutinaria. El elemento clave es la actitud proactiva hacia la seguridad y la informacin que permita reconocer y combatir los riesgos presentes en el laboratorio. Ser fundamental la realizacin meticulosa de cada tcnica, pues ninguna medida, ni siquiera un equipo excelente puede sustituir el orden y el cuidado con que se trabaja. 1. Se deber conocer la ubicacin de los elementos de seguridad en el lugar de trabajo, tales como : matafuegos, salidas de emergencia, mantas ignfugas, lavaojos, gabinete para contener derrames, accionamiento de alarmas, etc. 2. No se permitir comer, beber, fumar o maquillarse. 3. No se debern guardar alimentos en el laboratorio, ni en las heladeras que contengan drogas. 4. Se deber utilizar vestimenta apropiada para realizar trabajos de laboratorio y cabello recogido (guardapolvo preferentemente de algodn y de mangas largas, zapatos cerrados, evitando el uso de accesorios colgantes). 5. Es imprescindible mantener el orden y la limpieza. Cada persona es responsable directa de la zona que le ha sido asignada y de todos los lugares comunes. 6. Las manos deben lavarse cuidadosamente despus de cualquier manipulacin de laboratorio y antes de retirarse del mismo. 7. Se debern utilizar guantes apropiados para evitar el contacto con sustancias qumica o material biolgico. Toda persona cuyos guantes se encuentren contaminados no deber tocar objetos, ni superficies, tales como : telfono, lapiceras, manijas de cajones o puertas, cuadernos, etc. 8. No se permitir pipetear con la boca. 9. No se permitir correr en los laboratorios. 10. Siempre que sea necesario proteger los ojos y la cara de salpicaduras o impactos se utilizarn anteojos de seguridad, viseras o pantallas faciales u otros dispositivos de proteccin. Cuando se manipulen productos qumicos que emitan vapores o puedan provocar proyecciones, se evitar el uso de lentes de contacto. 11. No se deben bloquear las rutas de escape o pasillos con equipos, mquinas u otros elementos que entorpezcan la correcta circulacin. 12. Todo material corrosivo, txico, inflamable, oxidante, radiactivo, explosivo o nocivo deber estar adecuadamente etiquetado. 13. No se permitirn instalaciones elctricas precarias o provisorias. Se dar aviso inmediato a la Secretara Tcnica en caso de filtraciones o goteras que puedan afectar las instalaciones o equipos y puedan provocar incendios por cortocircuitos (Interno 355). 14. Se requerir el uso de mascarillas descartables cuando exista riesgo de produccin de aerosoles (mezcla de partculas en medio lquido) o polvos, durante operaciones de pesada de sustancias txicas o biopatgenas, apertura de recipientes con cultivos despus de agitacin, etc. 15. Las prcticas que produzcan gases, vapores, humos o partculas, aquellas que pueden ser riesgosas por inhalacin deben llevarse a cabo bajo campana. 16. Se deber verificar la ausencia de vapores inflamables antes de encender una fuente de ignicin. No se operar con materiales inflamables o solventes sobre llamas directa o cerca de las mismas. Para calentamiento, slo se utilizarn resistencias elctricas o planchas calefactoras blindadas. Se prestar especial atencin al punto de inflamacin y de autoignicin del producto. 17. El material de vidrio roto no se depositar con los residuos comunes. Ser conveniente ubicarlo en cajas resistentes, envuelto en papel y dentro de bolsas plsticas. El que sea necesario reparar se entregar limpio al taller.

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18. Ser necesario que todo recipiente que hubiera contenido material inflamable, y deba ser descartado sea vaciado totalmente, escurrido, enjuagado con un solvente apropiado y luego con agua varias veces. 19. Est prohibido descartar lquidos inflamables o txicos o corrosivos o material biolgico por los desages de las piletas, sanitarios o recientes comunes para residuos. En cada caso se debern seguir los procedimientos establecidos para la gestin de residuos. Consultar al Servicio de Higiene y Seguridad (Interno 275). 20. Cuando sea necesario manipular grandes cantidades de materiales inflamables (ms de 5 litros.) deber tenerse a mano un extintor apropiado para ese material en cuestin. 21. Cuando se trasvase material combustible o inflamable de un tambor a un recipiente ms pequeo, realice una conexin con una cadena del tambor a tierra y con otra entre el tambor y el recipiente de manera de igualar potenciales y eliminar la posible carga esttica. 22. Al almacenar sustancias qumicas considere que hay cierto nmero de ellas que son incompatibles pues almacenadas juntas pueden dar lugar a reacciones peligrosas. Ante dudas consultar al Servicio de Higiene y Seguridad (Interno 275). 23. No almacene en estantes sobre mesadas sustancias corrosivas, hgalo en estantes bajo mesadas y en caso de cidos o lcalis concentrados (mayor de 2N) deben ser mantenidas dentro de lo posible en bandejas de material adecuado. 24. Los cilindros de gases comprimidos y licuados deben asegurarse en posicin vertical con pinzas, grampas y correas o cadenas a la pared en sitios de poca circulacin, protegidos de la humedad y fuentes de calor, de ser posible en el exterior. 25. Los laboratorios contarn con un botiqun de primeros auxilios con los elementos indispensables para atender casos de emergencia. 26. Se informar al Dpto. de Seguridad y Control cuando se necesiten dejar equipos funcionando en ausencia del personal del laboratorio. 27. Se anotar en un lugar visible desde el exterior los telfonos de los responsables de cada laboratorio para que puedan ser consultados en caso de alguna anomala verificada por el personal de Seguridad y Control en su recorrida fuera de los horarios habituales de trabajo. Procedimientos ante emergencias : Emergencias mdicas Si ocurre una emergencia tal como: cortes o abrasiones, quemaduras o ingestin accidental de algn producto qumico, txico o peligroso, se deber proceder : 1. A los accidentados se les proveern los primeros auxilios. 2. Simultneamente se tomar contacto con el Servicio Mdico (Interno 482), o al Servicio Mdico de Deportes (4784-4351 / 3948) 3. Avise al Jefe de Laboratorio o autoridad del Departamento, quienes solicitarn asistencia de la Secretara Tcnica (interno 380) para que enven personal del Dpto.. de Mantenimiento, Seguridad y Control o Servicios Generales segn correspondan. 4. El Jefe de Departamento notificar el accidente al Servicio de Higiene y Seguridad para su evaluacin e informe, donde se determinarn las causas y se elaborarn las propuestas para modificar dichas causas y evitar futuras repeticiones. 5. Centros para requerir ayuda mdica: S.A.M.E. Telfono 107 Hospital Pirovano, Av. Monroe 3555, Tel. 4542-5552 / 9279 INTOXICACIONES: Hospital de Nios. Dr. R. Gutirrez Snchez de Bustamante 1399. Capital Federal. Tel: 4962-6666. Hospital de Nios. Dr. P. de Elizalde, Av. Montes de Oca 40, Tel. 4307-7491, Toxicologa 4300-2115 QUEMADURAS : Hospital de Quemados, Goyena 369, Tel. 4923-4082 / 3022 OFTALMOLOGA Hospital Santa Luca , San Juan 2021, Tel. 4941-7077 Hospital Dr. P. Lagleyze, Av. Juan B. Justo 4151, Tel. 4581-0645 / 2792

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1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

Incendio: Mantenga la calma. Lo mas importante es ponerse a salvo y dar aviso a los dems. Si hay alarma, accinela. Si no grite para alertar al resto. Se dar aviso inmediatamente al Dpto. de Seguridad y Control (Interno 311) informando el lugar y las caractersticas del siniestro. Si el fuego es pequeo y sabe utilizar un extintor, selo. Si el fuego es de consideracin, no se arriesgue y manteniendo la calma ponga en marcha el plan de evacuacin. Si debe evacuar el sector apague los equipos elctricos y cierre las llaves de gas y ventanas. Evace la zona por la ruta asignada. No corra, camine rpido, cerrando a su paso la mayor cantidad de puertas. No utilice ascensores. Descienda siempre que sea posible. No lleve consigo objetos, pueden entorpecer su salida. Si pudo salir por ninguna causa vuelva a entrar. Deje que los equipos especializados se encarguen.

Telfonos tiles BOMBEROS, Telfono 100 DIVISIN CENTRAL DE ALARMA: 4381-2222 / 4383-2222 / 4304-2222 CUARTEL V DE BELGRANO, Obligado 2254 Capital, Tel. 4783-2222 BOMBEROS DE VICENTE LPEZ, Av. Maip 1669 Vicente Lpez, Tel. 4795-2222 BOMBEROS DE SAN ISIDRO, Santa Fe 650 Martnez, Tel. 4747-2222 Derrame de productos qumicos 1. Atender a cualquier persona que pueda haber sido afectada. 2. Notificar a las personas que se encuentren en las reas cercanas acerca del derrame. Coloque la cinta de demarcacin para advertir el peligro. 3. Evacuar a toda persona no esencial del rea del derrame. 4. Si el derrame es de material inflamable, apagar las fuentes de ignicin, y las fuentes de calor. 5. Evite respirar los vapores del material derramado, si es necesario utilizar una mscara respiratoria con filtros apropiados al tipo de derrame. 6. Ventilar la zona. 7. Utilizar los elementos de proteccin personal tales como equipo de ropa resistente a cidos, bases y solventes orgnicos y guantes. 8. Confinar o contener el derrame, evitando que se extienda. Para ello extender los cordones en el contorno del derrame. 9. Luego absorber con los paos sobre el derrame. 10. Deje actuar y luego recoger con pala y colocar el residuo en la bolsa roja y cirrela. 11. Comunquese con el Servicio de Higiene y Seguridad para disponer la bolsa con los residuos. 12. Si el derrame es de algn elemento muy voltil deje dentro de la campana hasta que lo retire para su disposicin. 13. Lave el rea del derrame con agua y jabn. Seque bien. 14. Cuidadosamente retire y limpie todos los elementos que puedan haber sido salpicados por el derrame. 15. Lave los guantes, la mscara y ropa.