Está en la página 1de 12

Universidad Nacional Autnoma de Mxico Escuela Nacional Preparatoria 2 Erasmo Castellanos Quinto

Prctica N 2

INTEGRANTES: y y y y y Fuentes Meja Monserrat Manzanita Loyola Isaac Moreno Serrano Julio Alejandra Prieto Herrera Antonio Vzquez Cerda Alejandra

GRUPO: 600C

MATERIA: Temas Selectos de Biologa

Antibiogramas: Accin de la Ampicilina (penicilina) y del Aloe vera (sbila) en cultivo de bacterias. INTRODUCCIN: Antecedente: El escocs Alexander Fleming descubri la penicilina, un antibitico que revolucion la medicina moderna, de un modo bastante accidental. Hasta Fleming el nico tratamiento posible contra las infecciones bacterianas era la quimioterapia, usando sustancias sintetizadas en el laboratorio que, si bien

solucionaban parcialmente ciertos efectos de la enfermedad, generaban efectos secundarios importantes. Gracias a la penicilina, en el siglo XX, algunas

enfermedades hasta entonces consideradas incurables empiezan a tener solucin. En 1921, Fleming haba observado la accin anti bactericida de una sustancia presente en las secreciones nasales, llamada lisozima. En 1928, cuando estudiaba el virus de la gripe encontr que en la placa en la que estaba cultivando unas bacterias haba crecido moho y que alrededor de este se haba formado un rea libre de estafilococos. Esta capa contena alguna sustancia que inhiba el crecimiento de la bacteria. A este principio activo lo llamo Penicilina, ya que proceda del hongo Penicillium notatum. Sin embargo, problemas tcnicos no le permitieron purificar ni producir la penicilina por lo que no lleg a usarla clnicamente. En 1938, los britnicos Ernst Boris Chain y Howard Walter Florey iniciaron una investigacin detallada y sistemtica de este antibitico y lograron, en 1940, tras su traslado a EEUU, la fabricacin industrial y el empleo mdico de la penicilina, lo que supuso la salvacin de incontables vidas durante la Segunda Guerra Mundial. (Camacho J. 2001) Ampicilina sdica (Penicilina): Antibitico sinttico de espectro amplio, til para bacterias gramnegativas. Resistente al cido y se destruye con la penicilinasa. Se absorbe ms lentamente que otras penicilinas. Usado en infecciones respiratorias, gastrointestinales causadas por Shigella, salmonella, E. Coli, H. influenza, etc. (Loebl, S., Spratto G. y Heckheimer E. 1994)

Sbila (Aloe Vera): Varios estudios demuestran que el jugo de la hoja de A. vera en aplicaciones externas, acelera el proceso de cicatrizacin de heridas y quemaduras inducidas experimentalmente en ratn, rata, cuyo y conejo. Extractos acuosos de la hoja ejercieron un efecto antiinflamatorio en el ratn y la rata cuando se administraron por va externa, subcutnea y oral, en animales a los que se indujo edema de pie o inflamacin de odo mediante la aplicacin de diferentes productos irritantes. Se ha comprobado que el homogenado, el jugo y el extracto de la hoja presentan una accin benfica en casos de lcera en la rata por vas oral e intragstrica a la dosis de 500mg/kg el homogenado, y 2ml/animal, el jugo. Los extractos acuosos y etanlicos de las hojas presentaron un efecto analgsico en el ratn por va intragstrica y subcutnea. Otros efectos probados incluyen la accin hipoglicmica en el ratn ejercida por una fraccin de polisacridos obtenida de las parte areas por va intraperitoneal e intragstrica en animales diabticos inducidos con aloxana; la accin estimulante de msculo liso probada en leon de rata; la accin depresora del sistema nervioso central cuando se administr el extracto acuoso de la hoja por va intraperitoneal; una accin antibitica contra Bacillus subtilis y Satphylococcus aureus, antiviral contra el Virus Herpes simplex I y II debido al extracto acuoso y metanlico respectivamente. (Biblioteca digital de la medicina tradicional mexicana, 2009) Antibiograma: Son mtodos in Vitro que determinan la susceptibilidad de los microorganismos a una variedad de agentes microbianos, bajo condiciones de laboratorio especfica y estandarizada. (Alexander H., 2010) JUSTIFICACIN: En este trabajo se busca determinar la sensibilidad de los microorganismos, (que se cultivaron anteriormente) a los antibiticos, usando un antibitico natural (aloe vera encontrado en la sbila) y un antibitico sinttico (ampicilina, una clase de penicilina). Adems de un lote testigo que ser agua. Con esto podremos conocer y comparar los efectos de stos sobre los microorganismos (principalmente bacterias).

HIPTESIS: Se espera encontrar que ambos, tanto el antibitico natural como el sinttico pueden inhibir los microorganismos antes cosechados en las cajas petri, de la cual se derivan otras dos hiptesis: 1a hiptesis: Esperamos demostrar que la penicilina es ms efectiva, cmo antibitico que la sbila. 2a hiptesis: Esperamos demostrar que la sbila es ms efectiva, como antibitico que la penicilina. OBJETIVO: y Determinar la sensibilidad de los microorganismos cultivados (bacterias) ante antibiticos, uno de tipo natural y el otro sintetizado, mediante el uso de antibiogramas, tomando como lote testigo el agua.

METODOLOGA: Preparacin de medios de cultivo 1. Se toman 300 mL de caldo de pollo concentrado en el vaso de precipitado de 500 mL. 2. Se calienta el caldo de pollo en la parrilla, hasta que quede completamente liquido (recurdese que el caldo de pollo estando frio se solidifica). 3. Como se requiere una disolucin al 3% de carragenina, se pesan 9 gr en la balanza, vacindolos en el caldo, se agita hasta que quede completamente disuelta la carragenina en el caldo. Se calienta evitando la formacin de grumos. Se debe cuidar que no llegue al punto de ebullicin porque podra derramarse. 4. Vaciar la solucin en el matraz Erlen Meyer.

Figura 1. La solucin de carragenina y caldo de pollo en el matraz Erlen Meyer (Paula A. 2010) 5. Se introducir el matraz en la autoclave, que estar aproximadamente a 121C aproximadamente vigilando la presin, durante aproximadamente una hora. 6. Dentro de la campana de flujo laminar desinfectada, los alumnos portando bata y cubre bocas, se abren las 10 cajas de petri y se vaca dentro de ellas un poco del contenido del matraz, (caldo de pollo y carragenina), procurando tomar el matraz con un guante, ya que estar caliente. Se cierran y sellan las tapas despus de llenadas.

Figura 2. Vaciado de solucin en cajas petri (Pineda, J. 2008)


5

7. Al terminar se llevan las 10 cajas dentro del refrigerador y se dejan 3 das dentro, para que se solidifique el medio de cultivo. Elaboracin de Antibiograma 1. Se sacan 4 de las 10 cajas petri del refrigerador, se colocan abiertas 24 horas en diferentes superficies con el fin de que se contamine. 2. Al da siguiente se meten en la estufa de cultivo a 30 centgrados, dejndolas dentro de esta por tres das.

Cajas petri

Figura 3. Cajas petri dentro de estufa de cultivo microbiano (Andrea P. 2008) 3. Trascurridos los 3 das se sacan las cajas petri de la estufa y se observa el crecimiento de microorganismos en los medios 4. Con ayuda de un microscopio estereoscpico y posteriormente para un mejor enfoque con un microscopio ptico, se seleccionar una colonia de bacterias de una caja petri. Figura 4. Este es un ejemplo de cmo se vern las colonias de bacterias para diferenciarse de los hongos. (Extrada de http://fresno.pntic.mec.es/ msap0005/1eso/tema_10.htm)

5. Dentro de la campana de flujo laminar con uso de pinzas, se toman un par de discos de papel filtro, cortados con la perforadora, dos de ellos humedecidos con antibitico natural, un par ms con antibitico sinttico y el ltimo par con agua, . 6. Se colocarn en la superficie de siembra, procurando que queden equidistantes uno del otro. formando un hexgono como se muestra en la figura 1, procurando que la superficie no sea tocada por las pinzas y los discos solo toquen la zona del medio donde sern sembrados. 7. Se repiten los pasos 5 y 6 en las 4 cajas

Figura 5. Aqu se explica la forma en cmo se colocarn los discos 8. Continuando en la campana de flujo laminar con el asa de siembra, se toma una pequea muestra de la colonia seleccionada y se transfiere frotando levemente el asa de siembra con el medio de cultivo estril, procurando sea un mismo tipo de microorganismo, en el rea donde se encuentran los discos humedecidos. Es importante que la siembra sea superficial, sin profundizar en el medio de cultivo y que los alumnos usen guantes, bata y cubre bocas. 9. Se llevan las placas a incubar a 30C en la estufa de cultivo durante 24 horas. 10. Pasadas 24 horas, se observa el crecimiento sin abrir las cajas, y se hacen
7

las anotaciones de los resultados y conclusiones correspondientes.

RESULTADOS: A continuacin se muestran los resultados de la prctica:

Figura 6. Esta es la primera caja despus del antibiograma, se observa crecimiento de esporas.

Figura 7. En esta segunda caja de puede apreciar como los discos nmero 2 evitaron el desarrollo de esporas

Figura 8. En esta tercera caja el crecimiento de esporas es mayor pero no ms que el de hongos.

Figura 9. En esta ltima caja se muestra crecimiento de esporas, pero est libre de hongos.

Tabla 1. En esta tabla se resumen los datos obtenidos despus de la prctica, debajo de la tabla se encentra la nomenclatura de stas letras Agua Antibitico Natural. (Aloe Vera) Caja 1 Caja 2 Caja 3 Caja 4 TOTAL C NC C C NC=1 LC=1 C=6 C LC C C C LC NC C NC=1 LC=2 C=5 NC= No contaminado LC= Ligeramente contaminado C= Contaminado ANLISIS DE RESULTADOS: Podemos observar tanto en las imgenes como en la tabala aqu arriba representada que hubo algn error durante la elaboracin, posible una variable independiente que no se control lo suficiente para que no alterara los resultados como esta vez ocurri, ya que creemos que pudo haber presencia de hongos productores de esporas o de otros organismos en el agua de ambos lotes y adems que no fueron sembrados los microorganismos de manera correcta, por lo que hubo crecimiento general de hongos, aunque en dos de las muestras, caja 1 y caja 2 en la penicilina no hubo contaminacin bacteriana, lo que nos arroja una mayor eficacia. Y esto claramente se denota en la tabla en el total de contaminaciones. C LC C C Antibitico sinttico (Ampicilina) NC NC C NC NC=5 LC=1 C=2 NC NC C LC

DISCUSIONES: Hay muchos puntos que discutir, por ejemplo, para comenzar podemos comentar que los microorganismos estn en el aire y que no pueden ser visibles a simple vista, por lo que nos dificultan la tarea de esterilizacin de cien por ciento, por lo que creemos puede ser un factor que determine una falla en el experimento. Continuando con lo que sucedi con el experimento, tambin podemos mencionar que ambos antibiticos, el natural y el sinttico fueron disueltos en agua, adems del agua utilizada en el lote testigo, por lo que se tiene la hiptesis de que en el agua tambin puede contener diversos microorganismos que hicieron fallar el experimento. Pasando a un punto de vista ms terico, hablemos del antibitico natural: el aloe vera. Esta sustancia como se menciona en la Biblioteca digital de la medicina tradicional mexicana, (2009) es una sustancia considerada antibitica, y ayuda adems en la desinflamacin y la irritacin, adems acelera el proceso de recuperacin y cicatrizacin, impidiendo el paso de agentes patgenos a la herida. Adems de esto tiene una accin antibitica contra Bacillus

subtilis y Satphylococcus aureus, antiviral contra el Virus Herpes simplex I y II. (Biblioteca digital de la medicina tradicional mexicana, 2009) Si vemos en los resultados, en la caja nmero 2 neutraliz el crecimiento de esporas. Por lo que respecta al antibitico sinttico, nos sorprende su poca efectividad, ya que segn Loebl, S., Spratto G. y Heckheimer E. (1994) es un antibitico de espectro amplio, el cul ayuda, incluso en la batalla contra bacterias fuertes como la salmonella o E. Coli, pero lo que s podra ser resaltado es que Loebl, S., Spratto G. y Heckheimer E. (1994) mencionan que es absorbida de manera lenta, esto puede deberse al medio en que est ingirindose o al vehculo cbp en el cul fue sintetizado. Haciendo las comparaciones, entre estos dos y el agua podemos deducir, que el experimento tuvo un margen de error relativo, es decir en el lote testigo hubo una mayor contaminacin, fueron pocos los discos con ligera contaminacin y esto puede deberse al modo en que se fue sembrado en esta zona. Por lo que respecta a los antibiticos, el aloe vera (Biblioteca digital de la medicina tradicional
10

mexicana, 2009)

tuvo una contaminacin en casi todas las cajas, no

desarrollaron halos en los discos, por lo que pensamos, que al igual que en el agua hubo algn otro factor que pudo afectar este lote experimental. A excepcin claro de la neutralizacin de esporas en la caja nmero dos. Por otro lado la penicilina fue la que mayor grado de efectividad tuvo, ya que solo permiti el desarrollo de microorganismos en dos de los ocho discos, siendo esta la ms efectiva de acuerdo a lo que nos menciona Alexander H. (2010) de la interpretacin de los resultados en antibiogramas. CONCLUSIN: En esta prctica pudimos darnos cuenta de la importancia y de la enorme variedad de microorganismos que existen en nuestro mundo, los cuales pueden ser dainos o benignos para nuestro organismo, de los cuales muchos son erradicados gracias a los antibiticos naturales o artificiales. Lo cual fue demostrado y ejemplificado en nuestra prctica, lo cual nos dejo una clara idea de lo mencionado anteriormente. Al mismo tiempo esta prctica se relaciona con lo visto en clase, ya que abarca desde el cultivo de microorganismos, hasta su diferencia por tipo, erradicacin estructura al verlos por el microscopio, etc. Cabe mencionar la importancia de la microbiologa en la sociedad, ya que es fundamental en muchos aspectos y ciencias que dentro de su objeto de estudio utilizan a los seres vivos, como la medicina o la biologa, tambin nos ayudan a comprender nuestro origen, porque muchos poseen formas primitivas de existencia, y es casi seguro que todo haya empezado con bacterias hasta llegar a la gran diversidad actual Pudimos llevar a cabo lo visto en clase en lo que respecta a la elaboracin de los medios de cultivo. Adems de que es un medio muy interesante, en el cual los pequeos organismos sobreviven de formas increbles y en condiciones
11

acerca

impensables para el entendimiento humano., en conclusin sin las bacterias mucho de nuestro conocimiento, avances en tecnologa y medicamentos estaran an muy lejos de nosotros, e incluso la misma supervivencia del mundo sera inconcebible. BIBLIOGRAFA: y Alexander H. 2010, Antibiograma Presentacin PowerPoint recuperado el 14 de noviembre de 2011 desde http://www.slideshare.net/Prymer/ Antibiograma-3625685, y Andrea P. 2008. Extrada el 24 de noviembre 2011 de

http://pumabukis.blogspot.com/2008/08/practica-de-hogos-y-levaduras.html y Biblioteca digital de la medicina tradicional mexicana, 2009 Atlas de las Plantas de la Medicina T radicional Mexicana / Sbila / Aloe Vera Mxico, UNAM, extrado el 14 de noviembre de 2011 desde http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/monografia.php?l=3&t=S %C3%A1bila&id=7465. y Camacho J. 2001. La prodigiosa penicilina: Fleming, Madrid, Nivola, 140 pp. y Loebl, S., Spratto G. y Heckheimer E. 1994. Manual de Farmacologa 1 Mxico, Limusa y Grupo Noriega Editores, pp. 68-85. y Paula A. 2010. Micropropagacion. Extrada el 25 de noviembre 2011 de http://www.blogger.com/profile/02859018439623654183 y Pineda, J. 2008. Microbiologa. Extrada el 24 de noviembre 2011 de http://microbita.blogspot.com/2008/11/medios-de-cultivo.html y Virus, Bacterias, protistas y hongos. Extrada el 23 de noviembre 2011 de http://fresno.pntic.mec.es/msap0005/1eso/tema_10.htm

12