PRODUCCIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR POR MICROORGANISMOS A PARTIR DE SUSTRATOS ORGÁNICOS

TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA

SENA CBI (CENTRO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL) MATERIALES Y HERRAMIENTAS BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL PALMIRA – VALLE 2011

PRODUCCIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR POR MICROORGANISMOS A PARTIR DE SUSTRATOS ORGÁNICOS

TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA

INFORME TÉCNICO FINAL

FLOR MARÍA MIDEROS, INSTRUCTORA DE COMUNICACIONES, PEDRO DE JESÚS MIRANDA VILLAMIZAR, GESTOR DE PROYECTO, ERNESTO JOSÚE MENDOZA PEREZ, INGENIERO QUÍMICO, OSCAR ALEXANDER BERNAL, INGENIERO QUÍMICO, YURIA DISNEY MARTINEZ BECERRA, INGENIERA DE PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA Y DINA MARCELA OSPINA PARRA, INGENIERA EN PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA

SENA CBI (CENTRO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL) MATERIALES Y HERRAMIENTAS BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL PALMIRA – VALLE 2011

INTRODUCCIÓN En el proceso de formación se logró dominar las herramientas necesarias que permitieron avanzar en el desarrollo de actividades sobre valorar y controlar el sistema de producción de Proteína Unicelular (PUC) desde la inoculación hasta la obtención del producto de dicha fermentación.

Con estas actividades, se adquirieron habilidades y destrezas en el uso de técnicas de análisis fisicoquímico y microbiológico para el control de los procesos biotecnológicos y obtener productos de alta calidad para alimentación animal.

Comprende los métodos de muestreo, normas de bioseguridad e higiene industrial y dominio de las normas técnicas colombianas en el análisis de productos industriales e implica la adquisición de cualidades físicas y motoras, y la adopción de procedimientos para el trabajo seguro, según el Sistema General de Riesgos Profesionales en las industrias nacionales e internacionales.

El desarrollo de las actividades en el primer proyecto de formación para la Producción biotecnológica de Proteína Unicelular (PUC) generó el desarrollo de un segundo proyecto denominado, Sistema de Tratamiento Biológico de los vertimientos producidos en las fermentaciones industriales, al asumir la disposición de los residuos sólidos y líquidos de planta y laboratorio, para darles un tratamiento o aprovechamiento final. En este nuevo proyecto se desarrollan competencias específicas que obedecen al área técnica y a las competencias de política institucional, tales como, diseño y ejecución de planta piloto para disposición de residuo sólido en el proceso de compostaje (Bioinsumos), y planta piloto para tratamiento primario de aguas residuales (PTAR Lodos Activos) Se requirió integrar saberes relacionados con una bioética de mínimos universales, en consideración con el ambiente y el entorno, convocando además aprendices de diferentes especialidades para la ejecución de estos proyectos de forma interdisciplinar. Adoptar un lenguaje acorde con el conocimiento técnico claro y profundo, permitió la transferencia tecnológica entre los aprendices del TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA, y los demás aprendices del CENTRO DE BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL. Ambos proyectos se divulgaron con el ánimo de orientar, dirigir y estimular ideas de negocio , en la obtención de proteína unicelular a partir de sustratos orgánicos como suplemento alimenticio para animales, aumentando la masa muscular en caso de bovinos, equinos, ovinos y demás, ó estableciendo la producción de Bioinsumos como abono orgánico o enmienda agraria que permita el mejor rendimiento del suelo u obtener certificación en el tratamiento de aguas residuales según normatividad ambiental para mitigar mayores afectaciones e impactos.

la producción excesiva de biomasa celular y la falta de desarrollo a nivel nacional de productos o suplementos nutricionales sin afectar la seguridad alimentaria.1. generando alternativas de desarrollo económico sustentable y ambiental sostenible la producción biotecnológica de proteína unicelular a partir de cultivos microbianos. . PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA La presencia de subproductos orgánicos tanto agrícolas como industriales.

2. en el caso del micelio fúngico. Los microorganismos crecen rápidamente. principalmente por su alto contenido proteico. ambiental y productiva. JUSTIFICACIÓN La producción biotecnológica de proteína unicelular (PUC) empleando cultivos microbianos de bacterias. por ejemplo en bovinos. lo cual es una de las razones más importantes para su interés en la producción industrial. son empleados para la alimentación animal y humana. caprinos y ovinos. levaduras. equinos. alternativa económica de generación de empleo y sostenibilidad social. En algunos casos los sustratos requirieron un pre tratamiento físico-químico previo a la fermentación como la hidrólisis ácida. en lo referente a los que tienen alta producción de biomasa celular. . como alternativa a nivel industrial. la atención se volcó hacia la utilización de recursos renovables como residuos agrícolas y subproductos industriales. En cuanto al sustrato. algas y hongos filamentosos. sin desestimular el interés hacia la producción de suplementos proteicos en la alimentación animal al proveer un nutriente generador de energía y masa muscular. mejorando las condiciones del sector pecuario disminuyendo los costos de compuestos químicos aplicados a los semovientes y. bagazo y bagacillo.

tratamiento y disposición final en la producción biotecnológica de proteína unicelular.  Operar los Biorreactores para la producción biotecnológica según plan de trabajo. OBJETIVOS ESPECÍFICOS  Manejar las técnicas analíticas para controlar el proceso de producción.  Caracterizar las materias primas a utilizar en la Producción biotecnológica de proteína unicelular.  Realizar una curva de fermentación en las condiciones planteadas por la Empresa y establecer el tiempo de fermentación.3.  Realizar la fermentación teniendo en cuenta los parámetros establecidos del proceso en la producción biotecnológica de proteína unicelular.  Realizar la evaluación de las materias primas a utilizar a escala de laboratorio en la Producción biotecnológica de proteína unicelular.  Valorar el producto esperado .  Realizar la fermentación teniendo en cuenta los parámetros establecidos del proceso. tanto el líquido como el sólido.  Analizar fisicoquímicamente el medio de cultivo que se va utilizar en la fermentación.  Determinar las condiciones operativas del proceso de fermentación en Planta Piloto del sustrato y microorganismo seleccionado.  Caracterizar el producto y subproductos del proceso para su correcta disposición final.  Determinar las condiciones operativas del proceso de fermentación en los Biorreactores.  Validar los ensayos y técnicas analíticas químicas y físicas del Control de Procesos Biotecnológicos aplicados. equipos de laboratorio a utilizar en la producción biotecnológica de proteína unicelular. OBJETIVO GENERAL Producir mediante procesos biotecnológicos Proteína Unicelular por sistemas de cultivos microbianos a partir de subproductos orgánicos agrícolas e industriales. materiales.  Realizar la cinética de fermentación en las condiciones planteadas por la Empresa.  Cualificar los ensayos químicos analíticos en alimentos la concentración de Nitrógeno y Proteínas.  Analizar fisicoquímicamente el medio de cultivo que se va utilizar en la fermentación en la producción biotecnológica de proteína unicelular. 4.  Seleccionar las materias primas.  Operar los Biorreactores para la producción biotecnológica según plan de trabajo. asumiendo los resultantes o co-productos de la fermentación en planta piloto.  Caracterizar por análisis bromatológico el producto y subproductos del proceso para su manejo.  Realizar la evaluación de la fermentación estipulada en la investigación aplicada.

La atención se vuelca hacia la utilización de recursos renovables como residuos agrícolas y subproductos industriales. algo que es muy determinante en la producción de estos. Dentro del proceso de formación la materias primas utilizadas fueron estudiadas y analizadas para tener conocimiento de su composición y las variables de estos que pueden aportar a nuestro proceso. La ganadería y agricultura convencional es muy probable que no sean capaces de cumplir con la demanda proteica de esta población. Grupo 03 Obtención de Proteína Unicelular a partir de micelio fúngico. El alimento de los animales puede presentar una escasez en el futuro debido a que se necesitará más ganado para cumplir con la exigente demanda. se cree que el planeta necesitara producir una cantidad enorme de productos agrícolas. En la Producción Biotecnológica usamos como microorganismos las levaduras Saccharomyces cerevisiae y Candida utilis para probar su rendimiento y comportamiento ante las variables del proceso.5. Químico y enzimático para mejorar su rendimiento. . A continuación se muestran las materias primas y su composición por literatura. en el tecnólogo usamos cuatro diferentes sustratos: Grupo 01 Obtención de Proteína Unicelular a partir de bagazo y bagacillo. La adecuada alimentación de los animales es de muy elevado costo. sino en especial a sus animales. Actualmente Rusia es una de las productoras más importantes de proteína unicelular y esto se debe a la escasez de carne y algunas otras fuentes de proteínas. Este problema no involucra solo a seres humanos. MARCO TEÓRICO La primera conferencia sobre proteína unicelular se llevo a cabo en 1967 en el instituto tecnológico de Massachusetts. El constante crecimiento de la población. Grupo 02 Obtención de Proteína Unicelular a partir de porcinaza. La solución al problema de la alimentación humana en primer lugar implica la solución de las fuentes de proteínas en la alimentación animal. Grupo 04 Obtención de Proteína Unicelular a partir de residuos de la Maltería. la cual empieza a ser escasa. Lo primero es conocer la caracterización de las materias primas como sustratos. contando con que estos son totalmente orgánicos. Nos encontramos ante una demanda en constante incremento de fuentes de proteínas de un alto valor nutritivo. Los sustratos para producción biotecnológica varía dependiendo de los ensayos. En muchos casos las materias primas deben ser sometidas a un pre tratamiento físico. en especialmente las naciones en vías de desarrollo es increíble se espera que para a primera década del siglo XXI la población mundial llegue de 5 a 6 millones de personas.

durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro. . Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.CARACTERIZACION DE MATERIAS PRIMAS MELAZA DE CAÑA Figura 3. Miel B. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira COMPOSICIÓN Foto 1.

Imagen 3. CEPA O BIOCATALIZADOR UTILIZADO EN EL PROYECTO Saccharomyces cerevisiae .BAGACILLO Figura 5 Bagacillo de caña.Representacion grafica de la composición del bagacillo de caña de azúcar. Carbohidratos contenidos en el bagacillo de caña. Tomada en el laboratorio de biotecnología industrial Imagen 2.

los azúcares son usados para producir energía y nuevas células. ‘Anaeróbico’: No requiere de oxígeno. . Metabolismo Aeróbico o Respiratorio: Cuando el oxígeno es suficiente y el sustrato se mantiene bajo. METODOLOGIA ANALISIS Y PLANEACION FASE DE PROYECTO 1 . Figura 8. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial. generándose muy poco alcohol y más biomasa. vino y etanol donada por la Universidad Francisco de Paula Santander subcultivado por repiques en agar PDA. Saccharomyces cerevisiae. Medio de cultivo de micelio y vinaza. incubado a temperatura optima y refrigerado a +/-4°C .Hongo de tipo levadura utilizado industrialmente en la fabricación de pan. Esta levadura es un microorganismo ‘Anaerobio Facultativo’ ya que es esencialmente Aerobio pero puede prosperar en un ambiente Anaeróbico. ‘Aeróbico’: Requiere de oxígeno. . cerveza.

Figura 2. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira FASE DE PROYECTO 2 PRODUCCION IN VITRO PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO . Caracterización de melaza.

Foto 1. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira, en la preparación de medios de cultivo para propagación y producción de biomasa. Los medios de cultivo deben tener componentes necesarios para el optimo crecimiento de las levaduras.  Macro nutrientes Micronutrientes Elementos traza Clasificación según la composición •Sencillos: Monosacáridos, Disacáridos, Aminoácidos, Péptidos, Ácidos grasos •Complejos: Polímeros, Almidón, Quitina, Celulosa, Proteínas o complejos proteicos, Subproductos agroindustriales. PRODUCCION IN VITRO Medio de cultivo Composición Melaza Bagacillo Nitrógeno Fosforo % 25 p/v 10 v/v 2 p/v Cantidad necesaria para amortiguar el pH Características pH G.E °Brix Picnómetro ATR’S 4,50 1,050 gr/ml 20 gr/ml 1.010 gr/ ml 3-5%

PRETRATAMIENTOS El bagacillo como se sabe es un polisacárido, por eso es necesario hidrolizarlo para liberar los monosacáridos o azucares sencillos contenidos en él, al micelio fúngico se le realizan una hidrólisis básica con hidróxido de sodio (soda caustica) al 40% esto con el fin de extraer la quitina contenida en el, por cada 6,25 gr de micelio se añaden 100 ml de de NaOH al 40% y se autoclavan 2 veces.

La hidrolisis es el desdoblamiento de las moléculas de ciertos compuestos orgánicos por la acción del agua, en este caso por la reacción de ácidos y bases en concentraciones bajas. En el pretratamiento el bagacillo de caña es sometido a un proceso de hidrolisis acida y básica evaluando el rendimiento para cada uno. La concentración del ácido sulfúrico, la relación liquido/sólido, el tiempo de reacción usadas y la temperatura a la que fue sometido; fueron 10 gr de bagacillo aforado a 100 ml con ácido sulfúrico al 40% v/v, 4 horas, 65 - 70°C para cada litro de medio de cultivo. La concentración de hidróxido de sodio, la relación liquido/solido, el tiempo de reacción usadas y la temperatura a la que fue sometida; fueron 10 gr de bagacillo aforado a 100 ml con hidróxido de sodio al 17.5 % v/v, 4 horas, 60 - 65°C para cada litro de medio de cultivo. Los hidrolizados se dejan enfriar a temperatura ambiente y se vierten al medio de cultivo.

Foto 1. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira, durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro.

PRETRATAMIENTOS

CRECIMIENTO, PROPAGACION Y MADURACION PREPARACION DE LA LEVADURA, CRECIMIENTO EN 100 ml Para la preparación de la levadura se realizaron varios ensayos que se encuentran plasmados en la siguiente tabla. Nota: Los tiempos de activación se tomaron sin contar con el tiempo que tarda la levadura en crecer en medio semisólido (agar).

Imagen 15. Propagación inoculo 100 ml. Tomada en el Laboratorio de Biotecnología Industrial

1.0x108 neubauer inicial y final. *28 a 30 °C en incubadora. *Tinción de Gram.8x107 . *Recuento en cámara de neubauer inicial y 1. *15 ml de cepa activada en 85ml de medio de cultivo. *Baja población.3x106 final. *Recuento en cámara de neubauer inicial y 3. *Frecuentes contaminaciones por Bacillos. *Recuento en cámara de 1. (24hr).( 10 minutos). *45°C en baño maría. *Medios estériles Cepa fresca. 5 minutos. * Se cambio el volumen del solvente a 5ml de agua estéril por tubo. * 10 minutos de activación. *28 a 30 °C en incubadora. 1ml de caldo papa activado en 9 ml de medio de cultivo (24hr). *48 hrs de activación.9x107 – 1. *Trabajo en cabina. *Mejor y más población celular. (1tubo). . (1 tubo).METODO CONDICIONES MONITOREO RESULTADOS OBSERAVACIONES *Fermentación por ausencia de oxigeno. *Tinción de Gram. *Trabajo en cabina. *Medios estériles Cepa fresca.0x108 final. *Producción excesiva de CO2.5x106 – 2. Re suspensión celular: Se agregan 3 ml de de agua destilada estéril a 1 tubo con siembra inclinada. *Trabajo en cabina *Tinción de Gram. *Agua destilada autoclavada. Pre adaptación 2: Asada de cepa en 10ml de medio de cultivo. * 10ml de cepa activada en 90 ml de medio de cultivo. * 10ml de cepa activada en 90 ml de medio de cultivo. *24 hrs de activación. Pre adaptación 1: Asada en 10ml de caldo papa (24hr).

 Pasadas las 12 hr se toma muestra final con una pipeta de 1 ml en viales de vidrio ámbar de 10 ml estéril.  Se realiza re suspensión celular a 3 tubos con siembra. Al inoculo se le toma muestra inicial con una pipeta estéril de 1 ml y se almacena en viales de vidrio ámbar de 10 ml estéril. que luego son activados en baño maría a 35-37°C. 3 días y se refrigeran a 4°C en la nevera. 15 minutos. para realizar recuento en cámara de neubauer. agregando 5 ml de agua destilada estéril a cada tubo para un total de 15 ml.  Se inoculan los 15 ml de cepa re suspendida en 85 ml de medio de cultivo auto clavado a 121°C. Se deja en agitación constante 12 hr en el shaker (50 rpm). enfriado a temperatura ambiente. evaluando con el recuento de cámara de neubauer el crecimiento celular. 15 libras de presión. La levadura se siembra en agar PDA inclinado utilizando tubos de ensayo y tapones de gasa estéril. . Nota:  El anterior proceso se realizó en la cabina de flujo laminar previamente esterilizada para evitar contaminaciones en el inoculo por exposición al ambiente. se incuban a 28°C.  Los frascos utilizados para la preparación del inoculo son de vidrio y de color ámbar para evitar el contacto de las levaduras con la luz.

PROPAGACION EN 1000 ml  Teniendo en cuenta los recuentos en cámara de neubauer realizados al inoculo de 100 ml este es agregado o inoculado en 900 ml de medio de cultivo fresco estéril. salida de CO2 y toma de muestras regulado por un venoclip. para un total de 1000 ml contenidos en un Biorreactor con capacidad de 3500 ml. Foto 1.  La propagación es monitoreada así: Cada 2 horas 10 ml de muestra + Recuento en cámara de neubauer + Picnómetria + pH + T° ambiente + T° muestra + °Brix Cada 6 horas 150 ml de muestra + Acidez volátil + % A.R . Se toma muestra inicial del medio inoculado con una pipeta de 1 ml estéril y se contiene en un vial de vidrio ámbar de 10 ml estéril. para hacer recuento en cámara de neubauer. y adaptaciones para aireación con filtro de aire. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.

se toma muestra inicial con una pipeta de 1 ml estéril y se conserva en un vial de vidrio ámbar de 10 ml para hacer el recuento en cámara de neubauer inicial. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro.Foto 1.R . PROPAGACION EN 3000 ml  Teniendo en cuenta los datos de los monitoreos y de la tinción de gram. se alimenta la propagación con 2.150 ml de medio de cultivo fresco estéril.  La propagación es monitoreada así: Cada 2 horas 10 ml de muestra con dos mecheros al lado + Recuento en cámara de neubauer + Picnómetro + pH + T° ambiente + T° muestra + °Brix Cada 6 horas 150 ml de muestra + Acidez volátil + % A.

EVALUACION FASE DE PROYECTO 3 TABLAS DE RESULTADO . Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro.Foto 1.

RESULTADOS .

Medio 1 (10°Brizx) .

C C.C C.7x10e8 hrs 10:45 am 2.C C.5x10e8 hrs 15:00 2.C 2 4.C 3 4.3x10e8 hrs 02:15 am 2.2x10e8 hrs 01:45 am 9x10e7 hrs 06:45 am 2.C C.C C.8x10e8 hrs 19:00 .C C.7x10e8 hrs 18:45 1 2 3 4 5 1.3x10e8 hrs 14:45 2.1x10e8 hrs 11:00 am 1.7. RESULTADOS MEDIO # 01 ENSAYO pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.5 24 1 2 3 4 5 1.C C.9x10e8 hrs 07:00 am 3.C C.5 24 ENSAYO pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.

C C.C C.8x10e8 hrs 22:04 1.C C.C C.2x10e8 hrs 23:00 6x10e8 hrs 04:28 am 1.5x10e8 hrs 08:30am 1.2x10e8 5.C C.7x10e8 hrs 05:46 4.C 1 2 3 4 5 se monto hrs 22:04 4.45 33 ENSAYO 3 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.1x10e8 hrs 1 21:40 2 2.6x108 hrs 12:30pm 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 t (h) lnx MEDIO # 03 ENSAYO 1 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C C.5x10e8 hrs 23:45 hrs 04:25 am 08:26 am 12:25 pm C.9x10e8 hrs 13:46 1.C C.3x10e8 hrs 02:04 ~ 23 ~ .7x10e8 5.C C.0x10e8 hrs 09:46 1.C C.8x10e8 hrs 06:04 3.9x10e8 7.3x10e8 hrs 01:46 3.C C.45 33 se monto hrs 21:40 4.5x10e8 hrs 02:04 2.1x10e8 hrs 22:04 2.C C.9x10e8 hrs 13:40 3x10e8 hrs 09:46 3.C C.C C.7x10e8 hrs 3 05:40 4.C 6 7 8 9 3.C C.C C.45 33 1.C.C C.C ENSAYO 2 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C C.3x10e8 hrs 4 09:40 5 2.C C.210e8 hrs 01:40 3.C 6 7 8 9 7.C 1 2 3 4 5 se monto hrs 21:46 4.

C 6 7x10e8 hrs 17:40 7 8 9 C.  De acuerdo a los estudios realizados este proyecto es viable y rentable. ~ 24 ~ .C C. permitiendo un rápido crecimiento de nuestro microorganismo Cándida Utilis utilizando como sustrato alternativo de este medio. los cuales son: El Micelio fúngico debido a su tiempo de duplicación máxima 2.  Por medio de la reutilización de los desechos industriales ayudamos a preservar el medio ambiente y bajar el índice de contaminación.C C.C C.C C.  Gracias a los residuos industriales.78 h y la velocidad máxima de de crecimiento 1.135 cell/h.8x10e8 hrs 6 17:48 7 8 9 C. OBSERVACIONES  Al realizar los estudios hablados anteriormente nos hemos dado cuenta de que se puede producir un producto novedoso y necesario que pueda cubrir una gran demanda industrial y ganadera a partir de residuos industriales.C C.3x10e8 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 t (h) c.c (g/l) 8.C C.C C. al buen uso de los microorganismos y sus características se puede crear una nueva fuente de proteínas para consumo animal.C.C C.C C.C 1.  La producción biotecnológica de proteína unicelular para consumo animal presenta mayor factibilidad utilizando subproductos agroindustriales como medios alternativos.C 6 7 8 9 1.

 Las características como densidades de estos medios son factores que afectan éstas. esa consciencia que tanto requeríamos fue llegando y con esta los resultados que todos anhelaban.38 h y la Porcinaza presenta un tiempo de duplicación 5. procedimientos patrones de operación. Ya lo que respecta al área técnica todo fue cambiando. que parámetros tendríamos en cuenta y como sería su óptimo crecimiento. Martha. todo con el fin de garantizar el correcto uso tanto de materiales y reactivos de nuestro laboratorio como también un casi perfecto desarrollo de nuestro proceso. hago referencia a las charlas y/o clases dictadas por los diferentes instructores del área de biotecnología encabezadas por el Ingeniero Biotecnológico Pedro de Jesús Miranda Villamizar. en la medida de lo posible claro está. poco a poco. las medidas que se deben tomar en caso de contaminación. los agentes contaminantes que la llegasen a afectar en un proceso de producción. colegios aledaños y demás… Santa En el desarrollo de esta parte de nuestro proyecto de formación primero recibimos gran cantidad de material educativo. se realizaban foros donde poníamos a prueba los conocimientos adquiridos y dando nuestros primeros pasos en este nuevo mundo para nosotros. Realizamos listas de chequeo. cual utilizaríamos. desde el reconocimiento de una levadura. tales como. participaron activamente en los eventos de promoción del programa. el día de la ciencia. Dirección Nacional. desde crear esa sensibilidad que algunos necesitaban para hacerles entender que nuestro proyecto de formación era y es diferente a muchos de los cuales el SENA venía manejando.. El Bagacillo presenta su tiempo de duplicación máxima 3. Iniciamos empleando los conocimientos adquiridos. ~ 25 ~ .71 h. muchos mas lentos con la Saccharomyce cerevisiae. posteriormente enfatizábamos sobre problemas existentes. DIVULGACIÓN En el proceso de divulgación los aprendices del TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLOGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA. hasta conocer las condiciones óptimas para su crecimiento. Inicialmente debimos realizar una caracterización de nuestra levadura.comparando los medios alternativos. etc. Pasto. 9. Bogotá. convocatoria de divulgación de proyectos y campaña masiva de materia orgánica (Se adjuntan los videos de sustentación como anexo) Se recibieron también visitas de otros centros de formación SENA de Cartagena. Cali. posteriormente se logró lo que se quería. siendo estos tiempos de duplicación muy elevados para los ensayos productivos de biomasa celular. los niveles de estrés que esta podría tolerar.

luego de esto se llevan a un horno de esterilización donde estarán 3 horas a 120ºC. Una vez se lleva a cabo la purificación de la cepa y se ha sembrado en la caja de petri por agotamiento. desde cajas de petri. el medio con mayor crecimiento celular. donde esta luz promueve la desaparición de las bacterias que puedan estar presentes en dicha zona. hidrólisis acida o básica.. con esto se busca mejorar la materia prima para que en nuestro proceso de fermentación los resultados sean mucho mas óptimos. micelio fúngico. Posteriormente se preparan los medios de cultivo y/o trabajo implementando dichas materias primas a diferentes concentraciones. debimos aprender a distinguir cada uno de los materiales existentes en el laboratorio. esto nos asegura que su contenido este aislado del ambiente). entre las cuales encontramos. teniendo claro los conceptos adquiridos sobre aislamiento y purificación de cepas dictados por los instructores en su debido momento sin olvidar los balances de materia que se debían emplear para la correcta formulación del medio de cultivo. Se realizan diferentes análisis fisicoquímicos como acidez. bagazo. tubos de ensayo hasta azas microbiológicas. todo esto se realiza con los mecheros correspondientes. se dejan secar y posteriormente se envuelven con papel kraft. con el fin de purificarla y de esta manera garantizar unos niveles de asepsia bastante altos en nuestro proceso de fermentación. nos basamos en una serie de análisis que se realizan en el laboratorio. previamente se realizaron montajes a escala 3000ml para determinar cuál sería el medio con mayor rendimiento es decir. etc. brix.En lo que respecta a la cepa. ya que se debe controlar el proceso de fermentación de principio a fin pues siempre ~ 26 ~ . hicimos aislamiento de la cepa. Se debe previamente enjuagar con agua destilada todos los materiales a utilizar (en este caso de purificación. donde existen unas lámparas de rayos ultravioleta. alcohol al 70% y demás cuidados que se deben tener para un correcto desenvolvimiento. utilizamos la levadura Saccharomyces cerevisiae. bagacillo. pipetas. Para determinar ello. etc. Previamente se ha realizado una caracterización de dicha materia prima. donde utilizamos las diferentes materias primas que hemos escogido para de esta manera determinar con cuál de estos subproductos iniciaremos la fermentación. tubos de ensayo. Una vez tenemos nuestra cepa podemos iniciar con nuestro proyecto como tal. ya sea PDA. Para lograr este proceso de purificación. probetas y Erlenmeyer). cajas de petri. como siempre promoviendo la asepsia del lugar de trabajo. miel b. Después de pasadas las 48 horas se extraen las cajas de petri de la incubadora y se pasa a realizar un conteo de colonias y posteriormente realizar una tinción de gram donde nos aseguraremos que nuestra cepa esté libre de contaminantes. beaker. vinaza. porcinaza. ésta a su vez se lleva hacia un horno de incubación donde la dejaremos de 24 a 48 horas dependiendo de su crecimiento (la caja de petri debe estar sellada con emboplast. ATR. Previamente se ha realizado una esterilización en la zona estéril que es donde se realizará la purificación de la cepa. Erlenmeyer. Plate count o el que se requiriera en su momento. ésta varia en los diferentes equipos de trabajos que existen en el laboratorio de biotecnología industrial.

para mitigar dichos impactos. minimizar y/o mitigar el impacto ambiental que se pueda generar. de esta forma también podemos dar una solución viable a los problemas que hoy por hoy están dando las industrias. conteo celular. Cabe denotar que durante nuestro proceso de fermentación se generan tanto residuos líquidos y sólidos que son perjudiciales para el medio ambiente y estaríamos en vez de minimizar dicha problemática.buscamos que la asepsia durante nuestro proceso sea total. entre otros. por medio de estos procesos se quiere regular. Dichos parámetros se controlan cada 2 horas con el ánimo de obtener los suficientes datos para al final tener un resultado más aproximado a la realidad. ATR. en el Centro De Biotecnología Industrial. acidez volátil. donde se realizan pruebas al ambiente como pruebas en superficie para tener una idea de la contaminación existente en dicho ambiente de aprendizaje y de esta manera determinar si se debe ya sea mejorar la limpieza del laboratorio o recurrir a otros métodos de limpieza y desinfección de ambiente y superficie. pH. re circular esas aguas ya utilizadas para los oficios varios y de esta manera contribuir el ahorro de dineros que bien pudieren ser invertidos en otras obras que nos beneficien. de no serlo estaríamos expuestos a sanciones por parte de las entidades pertinentes. y donde los residuos sólidos si van directamente a compost. es por esto que estamos nosotros. ~ 27 ~ . Los análisis que se realizan durante el proceso de fermentación son. gran parte de los residuos líquidos han sido enviados a la PTAR de lodos activados y otra pequeña para compostaje. se realizaron dos jornadas de saneamiento básico con el fin de determinar si el centro estaba cumpliendo o no con las exigencias de la norma que dictamina un límite permisible de descargas hacia el alcantarillado. estaríamos haciendo lo contrario que sería aumentar el impacto para las descargas que se realizan. para esto tenemos un plan de contingencia y este plan es: BIORREMEDIACIÓN (SISTEMA DE TRATAMIENTO BIOLÓGICO DE LOS VERTIMIENTOS EN LAS FERMENTACIONES INDUSTRIALES) Este es nuestro segundo proyecto de aprendizaje. que por querer ser más productivos se están convirtiendo en un gran problema para el medio ambiente. es por esto que también se montó una PTAR a escala piloto de lodos activados donde se quería encontrar un optimo desempeño de la misma. donde buscamos dar una solución viable a los residuos que por lo pronto generamos durante nuestro proceso de fermentación. Los controles de contaminación que se hacen en el laboratorio de biotecnología industrial son periódicos. no se debe dejar nada a la deriva pues esto implicaría una contaminación que más adelante desencadenaría una pérdida total o parcial en nuestro y proceso y esto conllevaría a perdida de dinero por los reactivos utilizados en el acondicionamiento del medio como también del tiempo dispensado en dicha labor. brix. queriendo de esta manera llevarla a una escala mayor para de esta forma tratar las aguas del centro y por qué no. AR.

DBO5. equipos e insumos para la producción. control de pH. Supervisores de Plantas de Fermentación. donde se busco la realización de la misma y dejarla a punto para que todo el grupo de alumnos pudieran tener una idea más cercana a la realidad de lo que es una planta como estas y realizar obviamente los análisis pertinentes en dicha labor. ~ 28 ~ ..En la PTAR el diseño estuvo a cargo del instructor Pedro Miranda y de algunos aprendices del área. sólidos totales. se debieron tener en cuenta parámetros para dicho proceso. entre los cuales se encuentran. como la relación carbono nitrógeno. etc. pero no son imposibles de realizar si se tienen en cuenta todas las normas de bioseguridad pertinentes y manejando un ambiente en la medida de lo posible estéril o lo más aséptico posible para de esta manera no alterar los resultados de los análisis que se realicen en un proceso determinado. sector pecuario. Previamente en laboratorio se realizaron pruebas de siembra del hongo trichoderma buscando la aceleración en el proceso de compostaje y optimizar obviamente su rendimiento como tal. sector industrial. Dichos parámetros fueron controlados constantemente con la finalidad de minimizar el impacto a la comunidad circundante como también evitar la aparición de vectores que son indeseables en nuestro proceso. ECONÓMICO: Optimización de las materias primas. dureza. se realizaron campañas de recolección de materia orgánica con el fin de obtener la suficiente cantidad para poder dar inicio a nuestro proceso de compostaje. IMPACTO SOCIAL: Mejorar la calidad de vida. Por otra parte. en el área de compostaje se llevo a cabo el tratamiento de residuos sólidos producidos en el laboratorio de biotecnología industrial como también los desechos producidos por la cafetería del centro como de las casas de algunos aprendices. aprendices y comunidad SENA. una vez obtenido ese conocimiento se buscó tener un plan de manejo óptimo en cuanto a la producción de proteína unicelular como la Biorremediación de los residuos producidos. de temperatura y de humedad. Sector agrícola. alcalinidad. ALCANCE Beneficiarios del proyecto Ingenieros. acidez. la cepa a inocular y las variables de proceso previamente establecidas. Para finalizar podemos inferir que estos proyectos ya que son nuevos para nosotros tienen algo de dificultad. sólidos Sedimentables.

AMBIENTAL: Disminución de las emisiones contaminantes. manejo sostenible de los subproductos. tratamientos biológicos para el tratamiento de los residuos sólidos y líquidos. ANEXOS ~ 29 ~ . BIBLIOGRAFÍA 11. TECNOLÓGICO: Transferencia tecnológica de los procesos y Bioprocesos en la producción biotecnológica para las empresas. 10.

MARCO TEORICA PARA OBTENCIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR A PARTIR DE PORCINAZA Y MIEL Introducción a la producción biotecnológica de proteína unicelular 1) Caracterización de materias primas 2) Cepa o biocatalizador usado en el proyecto 2.1) caracterización de la levadura cándida utilis 3) Esquema de la producción biotecnológica de proteína unicelular 4) Formulación de mosto 5) Resultados de producción de proteína unicelular a partir de porcinaza y miel b ~ 30 ~ .

INTRODUCCIÓN A LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR Durante el programa de formación tecnológica en proceso biotecnológicos aplicados a la industria Sena Palmira se desarrollo un proyecto de producción biotecnológica y fermentativa de los subproductos agrícolas e industriales de la región Es así que el grupo dos de los tecnólogos en procesos biotecnológicos aplicados a la industria utilizamos inicialmente como sustratos de producción biotecnológica la crema de levadura como materia prima para la PUC y como biocatalizador la levadura Candida utilis durante el proceso fermentativo Este subproductos es obtenido en la empresa productoras de cerveza del valle del cauca la cual contiene una alto contenido proteico y de especie microbianas pero al final de cabo no fue utilizada como materia prima porque dicha subproducto fue muy difícil su adquisición para la producción proteína unicelular por lo cual se propuso finalmente utilizar como materia prima porcinaza y miel b para producción de proteína unicelular las cuales esta caracterizada de la siguiente forma para la producción biotecnológica ~ 31 ~ .

2) CARACTERIZACIÓN DE MATERIAS PRIMAS Y BIOCATALIZADOR Porcinaza La porcinaza es subproducto de la empresa porcicola del corregimiento de barrancas Palmira valle de cauca la cual se utilizada como materia prima subproductos nos proporcionas la siguientes característica física y química MIEL B La melaza o "miel B" de caña se obtiene de la caña de azúcar mediante su molienda utilizando unos rodillos o mazas que la comprimen fuertemente obteniendo un jugo que luego se cocina a fuego directo para evaporar el agua y lograr que se concentre. Información Nutricional de la miel B  Tiene cantidades importantes de vitaminas y minerales. Hay que tener en cuenta que. su sabor es intenso y hay que poner poquita para que no predomine más su sabor que el del jugo o infusión. ~ 32 ~ . infusiones o jugos Y nuestro cas la miel B se utilizando como fuente de carbono y de energía para la producción de proteína unicelular. al igual que la miel. La melaza también se utiliza como endulzante de tés. El producto final tiene una textura parecida a la miel de abeja y de sabor muy agradable.

Candida utilis resulta ser un organismo productor de biomasa más favorable que Saccharomyces Cerevisiae por las siguientes características: No necesita el suplemento de ningún aminoácido en los medios de producción. ~ 33 ~ . Así. Desde la Segunda Guerra Mundial esta levadura se ha utilizado como fuente y complemento de proteínas en la alimentación humana y animal (Boze y col. Además resulta ser más afín por hexosas que Saccharomyces cerevisiae (Postma y col.. es capaz de asimilar pentosas. cobre y magnesio ha sido siempre muy recomendada para las personas anémicas. licor residual de sulfito de la industria papelera y residuos de fruto como granos de café. Es un alimento muy rico en las vitaminas del grupo B (a excepción de B1)  Al contener hierro. Wilson en 1966 (en Lichfield. 1979). Los cuales son descriptos en la siguiente grafica. melaza. L. con pequeñas cantidades de otros nutrientes y factores de crecimiento (Lichfield. término acuñado por C. 1989a). y puede crecer en medios con una fuente de carbono y amonio como fuente de nitrógeno. vinaza.. 1979). manzanas etc. los requerimientos respecto las vitaminas del grupo B son escasos. y si se irradia aporta también vitamina D. 2) CEPA O BIOCATALIZADOR USADO EN EL PROYECTO Cándida utilis Hongo de tipo levadura que crece rápidamente y puede cultivarse sobre una gran diversidad de materiales o sustratos como licor de prensa. como la xilosa. Contiene abundantes minerales. ha sido una de las especies más utilizadas en la producción de SCP (Single Ceil Protein). obtenido de la fabricación de la pulpa de citrus desecada. tras el parto o cualquier convalecencia. vitaminas B. asténicas. 1992).

incubado a temperatura optima y refrigerado a 4°C. Metabolismo Aeróbico o Respiratorio: Cuando el oxígeno es suficiente y el sustrato se mantiene bajo. generándose muy poco alcohol y más biomasa. Foto 1.Fue donada por la Universidad Francisco de Paula Santander subcultivado por repiques en agar PDA. . Esta levadura es un microorganismo ‘Anaerobio Facultativo’ ya que es esencialmente Aerobio pero puede prosperar en un ambiente Anaeróbico. ‘Anaeróbico’: No requiere de oxígeno. ‘Aeróbico’: Requiere de oxígeno. . Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. los azúcares son usados para producir energía y nuevas células. ~ 34 ~ . durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro.

0 95.0 78. 8.0 90.60 7.0 EM 3.5 Cen.0 PB 50.6 EE 6.00 73.5 ELN 34.80 2.30 Levadura tórula Levadura tórula ANIMALES BOVINOS OVINOS DIGESTIBILIDAD (%) PB FB EE 90.40 P 1.30 1.03 ~ 35 ~ .21 2.0 99.00 3.0 89.2.00 0.1) Característica de la levadura Cándida utilis Composición nutricional unidad Cantidad Material seca NDT Energía digestible Energía metabolizable Proteína (TCO) Calcio (TCO) Grasa (TCO) Ceniza (TCO) Fibra (TCO) Fósforo total (TCO) Mcal/kg Mcal/kg % % % % % % % % 93.82 49.0 ELN 90.50 1.0 80.60 COMO % DE MATERIA SECA Levadura tórula MS 93.49 4.0 FB 0.4 Ca 0.

500 ml. 3000 ml ( propagación) Medio en planta 14000 ml ( producción) 4) FORMULACION DE MOSTO El medio de propagación: 20 Grados Brix 30 % de miel B 0.3) ESQUEMA DE PRODUCION BIOTECNOLOGICA DE PROTEINA UNICELULAR A PARTIR DE PORCINAZA Y MIEL MEDIO 20 ml en resuspencion Medios de propagación a 100 ml.05 p/v de (NH4)2SO4 2% de porcinaza hidrolizada al 40 % H2SO4 El medio de producción contiene: ~ 36 ~ .

343 cm3 y.343 d=1.10% de Porcinaza 2% de melaza El porcentaje restante viene dado por el agua.1416) (1.05 gr/cm3 Teniendo la densidad deseada.05 gr/cm3 Agua 190 ml El ensayo se efectuó de la siguiente manera: Se agregó una cantidad de la mezcla de Porcinaza. Porcinaza y agua. La fórmula aplicada para la obtención de la densidad del medio a partir de éste método es: d= m/v d= (M2 (muestra)-(M (beaker vacío))/v (beaker) Para calcular el volumen del beaker: V= π * r2 *h V= (3.98-29. miel B y agua a un beaker de 25 ml hasta reboce y se pesó en la balanza no sin antes tener el peso del recipiente vacío. Nota: el medio de cultivo se debe manejar una densidad de 1 gr/cm3 Se desarrollaron varios ensayos en pro de la obtención de un medio de producción con una densidad similar a la expresada anteriormente compuesto por melaza. entonces: d= 58. el radio es la mitad del diámetro.81/35. se procede a la preparación del medio de producción de 14 litros con las siguientes concentraciones de sustrato: 12% de Porcinaza 2% de Melaza ~ 37 ~ .5)2(5) V= 35. Se obtuvieron los siguientes datos: Porcinaza 22 gr Miel B 2 gr Densidad = 1.

2 gr/cm3 Grados Brix: 21 pH : 4. se efectuaron los siguientes cálculos basados en los datos arrojados por el ensayo en el que se buscaba una densidad próxima a 1 cm3.14 litros de agua Para saber la cantidad de cada sustrato que compone al medio de producción. Acidez volátil Conteo celular inicial y final RESULTADOS DE PRODUCION DE PROTEINA UNICELLULAR A PARTIR DE PORCINAZA Y MIEL B Producción de proteína unicelular del Septiembre 29 de 2011 Inoculación Escalado de 1000 a 4000 ml Hora 1:00 pm Análisis Iniciales: Densidad por picnometría : 1.3 gr de melaza Se toma una muestra de 100 ml del medio de producción antes de ser llevado al biorreactor # 1 de la planta piloto de fermentaciones industriales./ml Densidad por picnometría d = peso del picnómetro con muestra-peso del picnómetro vacío/volumen ~ 38 ~ .05 (12%) (2%) 14000 ml (2 gr/190 ml) = 147.38 Conteo Inicial: 6. A los 100 ml de muestra se le toman los análisis mencionados a continuación Grados Brix pH Densidad ATR Amino nitrógeno libre sólo cuando el medio esté en el biorreactor. 14000 ml (22 gr/190 ml) =1621. antes no.57*10E7 cel.

00 g/l Grados Brix: 3 pH: 5.71-17.11 conteo celular: 1.0 gr/cm3 Grados Brix:3 pH:5.189 d = 1./ml ~ 39 ~ ./ml Análisis (planta piloto de fermentaciones-reactor #1) Hora 8:30 am Densidad: 1016.8*10E8 cel.25 Grados Brix: 1 Densidad del medio: 1.19 Conteo celular : 1.2*10E8 cel.54/10.2 gr/cm3 Conteo inicial : 8*10E6 cel.15 Conteo celular: 2./ml Hora 10:30 am Densidad: 1.2 gr/cm3 Análisis final de los 4000 ml de medio Hora: 9:00 pm pH : 4./ml Inoculación del Biorreactor de 4000 ml al reactor #1 de la planta piloto de fermentaciones Hora 9:20 pm pH : 5.017 gr/cm3 Grados Brix:3 pH: 5.38 Grados Brix: 18 Conteo final: 1.95*10E6 cel.7*10E8 cel./ml Hora 12:30 pm Densidad: 1.d = 29.

00E+08 6.5 5 7.00E+08 4.00E+08 5.5 TIEMPO 10 12.5 15 Resultado de Producción proteína unicelular a partir de porcinaza y miel B a escala de100 ml ~ 40 ~ .00E+08 2.00E+08 1.00E+00 0 2.65*10E8 CRECIMIENTO EXPONENCIAL DE LA PRODUCION DE PROTEINA UNICELULAR A PARTIR DE SUSTRACTOS ORGANICOS POR MICROORGANISMO CRECIMIENTO EXPONENCIAL 7.Hora 3:00 pm Grados Brix: 4 pH: 5 Conteo celular: 1.00E+08 0.00E+08 3.

Resultados de la producción de proteína unicelular a partir de porcinaza y miel B a 1000 ml ~ 41 ~ .

~ 42 ~ .

MICELIO FUNGICO Foto 1. S. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.A CEPA O BIOCATALIZADOR UTILIZADO EN EL PROYECTO Cándida utilis Hongo de tipo levadura que crece rápidamente y puede cultivarse sobre una gran diversidad de materiales o sustratos como licor de prensa. micelio fúngico húmedo resultante de la producción de acido cítrico por la empresa Sucromiles. obtenido de la fabricación de la pulpa de citrus ~ 43 ~ .

melaza. 1992). vinaza. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. manzanas etc. 1979).. término acuñado por C. 1989a). los requerimientos respecto las vitaminas del grupo B son escasos. Foto 1. como la xilosa. Wilson en 1966 (en Lichfield. durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro. los azúcares son usados para producir energía y nuevas células. Candida utilis resulta ser un organismo productor de biomasa más favorable que Saccharomyces Cerevisiae por las siguientes características: No necesita el suplemento de ningún aminoácido en los medios de producción. Además resulta ser más afín por hexosas que Saccharomyces cerevisiae (Postma y col. vitaminas B. licor residual de sulfito de la industria papelera y residuos de fruto como granos de café. Así. y puede crecer en medios con una fuente de carbono y amonio como fuente de nitrógeno. generándose muy poco alcohol y más biomasa. . Metabolismo Aeróbico o Respiratorio: Cuando el oxígeno es suficiente y el sustrato se mantiene bajo. L.. Desde la Segunda Guerra Mundial esta levadura se ha utilizado como fuente y complemento de proteínas en la alimentación humana y animal (Boze y col. ha sido una de las especies más utilizadas en la producción de SCP (Single Ceil Protein). y si se irradia aporta también vitamina D. 1979). incubado a temperatura optima y refrigerado a 4°C. es capaz de asimilar pentosas. ‘Aeróbico’: Requiere de oxígeno. . CARACTERIZACION DE LA LEVADURA TORULA (CANDIDA UTILIS) ~ 44 ~ .desecada. ‘Anaeróbico’: No requiere de oxígeno. con pequeñas cantidades de otros nutrientes y factores de crecimiento (Lichfield. Contiene abundantes minerales. Fue donada por la Universidad Francisco de Paula Santander subcultivado por repiques en agar PDA. Esta levadura es un microorganismo ‘Anaerobio Facultativo’ ya que es esencialmente Aerobio pero puede prosperar en un ambiente Anaeróbico.

azufre y fósforo.30 DIGESTIBILIDAD (%) Animal Levadura tórula Levadura tórula Bovinos Ovinos PB 90.0 ELN 90.50 1.0 99.60 1. 8. Entre los compuestos orgánicos más importantes.6 EE 6. en general. poseen nutrientes.00 3. También contienen una gran cantidad de potasio.00 0.Composición nutricional Materia seca NDT Energía digestible Energía metabolizable Proteína (TCO) Calcio (TCO) Fósforo total (TCO) Grasa (TCO) Ceniza (TCO) Fibra (TCO) Unidad % % Mcal/kg Mcal/kg % % % % % % COMO % DE MATERIA SECA Cantidad 93.5 Cen. ácidos orgánicos y aldehídos.4 Ca 0.49 4.0 89.40 P 1. también contiene compuestos fenólicos recalcitrantes.21 2.0 FB 90. además de una lto contenido de materia orgánica.60 7.03 VINAZA Composición Las vinazas.0 FB 0.00 73.0 EE 80.0 95.0 EM 3.82 49. Además. Son ácidas (pH entre 3 y 4).0 PB 50.30 MS Levadura tórula 93. ~ 45 ~ . están los alcoholes.5 ELN 34. como nitrógeno. como las melanoidinas.0 78.80 2.

04 Potasio (como K2O) Kg/m3 62.5 % m/m 0.32 Fósforo (como P2O5) Kg/m3 0.5 1300 COMO ALIMENTO PARA ANIMALES UNIDADES VALOR ~ 46 ~ .67 Kg/m3 35 % m/m 2. ESPECIFICACIONES: Como fertilizante: ANÁLISIS Sólidos totales Materia orgánica Nitrógeno (como N) UNIDADES % m/m Kg/m3 Kg/m3 VALOR 55 621 4.59 pH Densidad Adim Kg/m3 4.CARACTERÍSTICAS: Liquido café oscuro. denso y viscoso PRESENTACIÓN: Líquido a granel en carrotanques.4 % m/m 4.3 UNIDADES % m/m % m/m % m/m VALOR 55 45 0.51 Magnesio (como MgO) Sulfatos (como SO4=) Kg/m3 9 % m/m 0.3 ~ 4. con olor a miel.8 Calcio (como CaO) Kg/m3 7 % m/m 0.

fósforo y micronutrientes  .Sirve de vehículo para la aplicación de nitrógeno. potasio.Proporciona un sustrato para el desarrollo de la micro flora del suelo  .Sus componentes son totalmente solubles en agua  Como corrector de suelos salinos y salino-sódicos intercambia Sodio y Magnesio por Calcio en la matriz del suelo ~ 47 ~ .21 11.078 1300 USOS Uso Agrícola: Como fertilizante potásico líquido para suelos:  .Fuente de potasio para fertilización de cultivos  .9 0 Fibra Calcio (como Ca) % m/m bs % m/m bs 0 0. azufre y calcio para acondicionamiento de los suelos  .25 Fosforo (como P) Densidad a granel % m/m bs Kg/m3 0.Humedad Proteína Cenizas Grasas % m/m % m/m bs % m/m bs % m/m bs 45 5.Aporta materia orgánica.

5) y su contacto con la piel no es peligroso. En caso de contacto directo con la mucosa de los ojos debe lavarse con ~ 48 ~ .  Instrucciones de Seguridad Industrial  El pH del material es ligeramente ácido (4 a 4. Materia prima para Compostaje  Aporta potasio a las formulaciones de compostacion y sirve simultáneamente de humectante Uso como Alimento para Animales:  -Es una fuente económica de energía para los rumiantes  -Contiene aminoácidos provenientes de la levadura  Como tenso activó  Reduce la viscosidad de pastas de piedra caliza en la industria cementera  Ayuda a la humectación en el fraguado de cemento  Como fuente de energía  El poder calorífico del material permite quemarlo y generar energía térmica dejando una ceniza rica en potasio Licencias  ICA 4053  Ecocert 1877CO 040 n1e Origen  Producto resultante de la destilación de la melaza fermentada durante la producción de etanol. Se concentra hasta obtener un líquido denso.

resultante de la destilación de la melaza fermentada durante la producción de etanol.abundante agua estéril. Su DQO puede estar entre 150 000 y 250 000 mgDQO/litro.  En caso de un reguero menor puede absorberse el material en tierra.  Las dosis que se utilicen como alimento para animales deberán seguir las recomendaciones de un Zootecnista o un Médico Veterinario. bagazo o aserrín y disponerlo en un terreno donde pueda incorporarse al suelo. ESPECIFICACIONES TÉCNICAS Origen Fertilizante potásico líquido para suelos. Es por esto que debe evitarse su derrame sobre corrientes de agua a las cuales puede causar contaminación muy seria.  En todos los casos en que se manipule se recomienda el uso de guantes y gafas de protección de ojos contra las salpicaduras.  En todos los casos en que se maneje se deberán tomar las precauciones de tener tanques de contención secundaria (diques) que eviten un derrame accidental del producto a cuerpos de agua superficiales o subterráneos. Como fertilizante líquido Análisis Químico Sólidos Totales Materia orgánica Nitrógeno (como N) Fósforo (como P2O5) Potasio (como K2O) Calcio (como CaO) Unidades % m/m Kg/m3 Kg/m3 Kg/m3 Kg/m3 Kg/m3 Valor 60 621 4.5 41 7 ~ 49 ~ .  Instrucciones de Manejo  La Vinaza60 es un material rico en materia orgánica.3 0.  Las dosis que se apliquen en el terreno a los cultivos deben ser manejadas según las recomendaciones de un Ingeniero Agrónomo.

) % m/m (b. Como alimento animal Análisis Químico Humedad Proteína Cenizas Grasas Fibra Unidades % m/m % m/m (b.) Valor 40 5.68 12. Origen Alimento para ganado. resultante de la destilación de la melaza fermentada durante la producción de etanol.Magnesio (como MgO) Sulfatos (como SO4=) pH Densidad Características Kg/m3 Kg/m3 adim Kg/m3 9 35 4.9 0 0 ~ 50 ~ .h.h.5 1300 Fuente de potasio para fertilización de cultivos Aporta materia orgánica para acondicionamiento de los suelos Proporciona un sustrato para el desarrollo de la microflora del suelo Sirve de vehículo para la aplicación de micronutrientes Sus componentes son totalmente solubles en agua Presentación Líquido en tambores de 60 litros o a granel en carro tanque.h.) % m/m (b.) % m/m (b.3 ~ 4.h.

27 0.88 1300 Sustituye parte de la Melaza en dietas de rumiantes En mezclas con Melaza reduce la viscosidad de esta Actúa como aglomerante en la fabricación de bloques multinutricionales Aporta vitaminas del complejo B Presentación Liquido en tambores de 60 litros o a granel en carro tanque.085 0. Por tratarse de un producto de transformación biológica natural. aumentar la palatabilidad y digestibilidad de la materia seca y las proteínas.Calcio (como Ca) Fosforo (como P) Energía Neta Densidad a granel Características % m/m (b. la torta de micelio presenta características que hacen de ella un material útil en la nutrición animal. En la tabla se presenta la caracterización química del producto.) % m/m (b.) Mcal/kg Kg/m3 0. Los componentes del micelio tienen efectos benéficos sobre los rumiantes al bajar el pH el incrementar el número de microorganismos del rumen. en especial de bovinos.01 44.h. Por último.12 33-20 330 260 760 ~ 51 ~ . el consumo de micelio mejora la calificación organoléptica y la calidad de la carne y no deja residuos tóxicos. CARACTERÍSTICA Humedad Proteína Ceniza Grasas Fibra Estrato libre de nitrógeno Sodio Potasio Calcio UNIDAD %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m Mg/kg Mg/kg Mg/kg CANTIDAD 10 12.h. incrementar la retención del nitrógeno suministrado en las dietas e incrementar la utilización de elementos traza.28 0.95 1. MICELIO FUNGICO Es la biomasa resultante del desarrollo vegetativo del hongo aspergillus Níger utilizado para la fermentación del azúcar en el proceso de fabricación de acido cítrico anhidro. Se obtiene durante la etapa de purificación.

S.1 1.S.8 4.8 1. (in vitro) 98.9 7.3 95.4-2.4 12 5 2.3 FICHA TECNICA MICELIO SECO ANALISIS QUIMICO GARANTIZADO Proximal Y Cornell efectuados por Corpoica-febrero 2006 NUTRIENTES PORCENTAJES EN BASE SECA Materia Seca 89 Digestibilidad M.5 10. (in situ) Digestibilidad M.5 4.1 5.8 ~ 52 ~ .6 6.4 5.Magnesio Hierro Fosforo total Boro Nitrógeno Alanina Arginina Leucina Metionina Fenilalanina Acido aspartico Acido glutámico Glicina Histidina Isoleucina Lisina Prolina Serina Treonina Triptófano Valina Mg/kg Mg/kg Mg/kg Mg/kg %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m 50 50 200 30 2.1 4.6 4.7 6.8 9.

6 % de PC 14.6 71.7 % de P Soluble 12.2 % PC 47. no digestible) Fibra Bruta Fibra Detergente Neutro FDN Fibra Detergente Acido FDA Hemicelulosa 13.Energia Bruta EB (Mcal/kg) Energía Digestible ED (Mcal/kg) NDT Energía Metabol EM (Mcal/kg) Energía Neta Lactancia ENL (Mcal/kg) calculada por fórmulas NRC Energía Neta de Lactancia ENL (Mcal/kg) calculada por gases Proteína Cruda Proteina soluble en buffer PB1 (verdadera.26 4.1 ~ 53 ~ .34 2.4 20.7 % PC 27.08 90.1 4.3 % de P Soluble 30.06 1.92 45. soluble) PB2(medianamente soluble) PB3( insoluble) PC(insoluble.5 % de PC 69.5 52.9 3. soluble) PA (NNP.

04 0.46 0.11 ~ 54 ~ .Lignina Celulosa Crabohidratos No Estructurales Contenido Celular Grasa Cenizas Extracto No Nitrogenado MINERALES Calcio Fósforo Sodio Magnesio Potasio Hierro Boro AMINOACIDOS Alanina Arginina Cisteina Fenil Alanina Glicina Histidina 8.5 43.3 42.95 28.10 0.003 0.72 0.28 0.37 0.04 0.03 0.6 0.11 0.43 0.3 28.005 0.17 0.5 0.

El mayor potencial de uso es como parte de raciones para la alimentación de ganado.70 2.30 0. Su uso como a uno solo se recomienda en caso de extremos puesto que su proceso de descomposición es lento.30 0.23 0.2 Las dosis de micelio varían entre 10 y 15 kg por cabeza como complemento de una reacción. Podría complementarse con otros productos como la melaza.30 0.Isoleucina Leucina Lisina Metionina Prolina Serina Tirosina Treonina Triptófano Valina Ac Aspártico Ac Glutámico Inmunoestimulante (ácido cítrico) Enzimas Presentes 0. los lodos de levadura previo tratamiento y otras fuentes externas de nutrientes como la urea.15 0.65 0.52 0.0 Fitasa-Fosfatasa –Proteinasas-LipasasCelulasas pH 4.10 0.49 0.47 0. ~ 55 ~ .38 0. En sucromiles el micelio producto se ha utilizado principalmente en la alimentación de bovinos en estado fresco.

Se realizan los siguientes análisis:      pH Brix Azucares fermentables Ceniza Húmedad ALMACENAMIENTO El almacenamiento de las materias primas se realizara en un refrigerador a 5 °c en donde la levadura se almacenara por medio de crecimiento lento en tubos en el refrigerador. luego de esto también se gestiona con el coordinador académico para que le facilite el trasporte a uno SUCROMILES de nuestros integrantes del grupo de trabajo para que valla por la materia prima al sitio acordado con la empresa. INOCULACION La inoculación comienza con el aislamiento y purificación del microorganismo del medio de conservación.DIAGRAMA DE PRODUCCION El trasporte de la materia prima se realizara en 2 pasos que son: El Primer paso es la gestión. PROPAGACION CELULAR. CLAYUCA MATERIA PRIMAS: Micelio fúngico. en crecimiento en tubo y dilución del microorganismo. vinaza. levadura torula (cándida utilis). Todo esto se realiza en la cabina de flujo laminar. PREPARACION MEDIO DE CULTIVO La preparación del MEDIO DE CULTIVO se inicia con la molienda del micelio fúngico. El segundo paso es ya la ejecución en donde uno de nuestros integrantes se dirige al lugar designado por la empresa en la gestión para recibir la materia prima y traerlo al laboratorio para su almacenamiento. luego de tener la aprobación de las materias primas. luego se prepara en agua la vinaza con el micelio se mescla y luego se suplementa con fuentes de carbono y nitrógeno. de la materia prima con las empresas. ~ 56 ~ .

Aumento de la concentración celular o medios líquidos. Luego se analiza tanto el sobrenadante y la biomasa para saber con qué porcentaje de proteínas salió y si cumple con los parámetros establecidos para su debido uso o vertimiento en el caso del sobrenadante. Brix BIORREACTOR Son los mismos procesos anteriores solo que a escala en el biorreactor. TABLA DE PROCESO 1 TRANSPORTE 1 ALMACENAMIENTO 7 OPERACIÓN / INSPECCION PLAN DE TRABAJO ~ 57 ~ . En este proceso se utiliza la centrifuga y los tubos de ensayo para realizar la separación. PROCESO DE SEPARACION. esto se realiza en el mini. pH Azucares reductores.     Concentración celular. se hace tomando el 10% del inoculo y se agrega al MEDIO ALTERNATIVO que es el micelio con la vinaza y los sustratos. Se le miden los siguientes parámetros.birreactor.

BRIX.ACTIVIDADES SIEMBRA MASIVA PREPARACIÓN DEL MEDIO AGOTAMIENTO ACTIVACIÓN DE CEPA PREADAPTACIÓN VARIABLES DE PROCESO FEB FEB FEB FEB FEB FEB FEB FEB FEB EN (17 (18 (19 (20 (21 (22 (23 (24 (25 E ) ) ) ) ) ) ) ) ) X X X X X X X X OBSERVACIONES SE RESERVA CANDIDA EN A. X ESCALADO A 100ml TOMA DE MUESTRA CINÉTICA DE CRECIMIENTO VARIABLES DE PROCESO ESCALADO A 1000ml TOMA DE MUESTRA CINÉTICA DE CRECIMIENTO VARIABLES DE PROCESO ESCALADO A 3000ml TOMA DE MUESTRA CINÉTICA DE CRECIMIENTO X X X X X X X X X X X X X X X X X X ~ 58 ~ . LOS 1000ml ADICIONARLOS A 3000ml DE 1/2 DESDE h0 cada 4h POR TURNOS DE TRABAJO GRAFICA LOGARITMICA DE CRECIMIENTO. IDENTIFICACIÓN. T. Ph. LOS 10ml ADICIONARLOS A 90ml DE 1/2. Ph. CONTEO. Ph. IDENTIFICACIÓN. T.S CAJA PQ Ingtes: MELAZA. IDENTIFICACIÓN. T. VINAZA Y MICELIO SIEMBRA MÉTODO FRANCÉS LEVADURA EN CALDO PAPA 01ml de CALDO en 09ml de MEDIO. LOS 100ml ADICIONARLOS A 900ml DE 1/2 DESDE h0 cada 4h POR TURNOS DE TRABAJO REALIZAR CURVA SEGÚN DATOS OBTENIDOS CONTEO. BRIX. BRIX. TOMAR DATOS INICIAL (h0) Y FINAL (24h) REALIZAR CURVA SEGÚN DATOS OBTENIDOS CONTEO.

inicial y final luego cada 4 hrs realizar recuento celular PREPARACION DE MEDIOS PROBLEMAS 3000ml 20% p/v 10% p/v pH BRIX 4.FORMULACIÓN DEL MEDIO MATERIAS PRIMAS MICELI FUNGICO. ~ 59 ~ . pH.61 MEDIO N°3 BRIX ° 21 PH 3.74 MEDIO N° 2 BRIX ° 19 PH 3.91 NOTA: El pH de los medios se encontraba en 12 y se bajo con ayuda de acido ortofosfórico. MEDIO N° 1 MEDIO N° 2 MICELIO 10 % MICELIO 10 % MIEL B 10 % MIEL B 20 % VINAZA 80 % VINAZA 70 % MEDIO N°3 MICELIO 10 % MIEL B 30 % VINAZA 60 % MEDIO N° 1 BRIX° 21 PH 3.5 24 3000ml 30% p/v 10% p/v MEDIO 2 Nuestros medios problemas se trabajan con la levadura candida utilis. MIEL B Y VINAZA MEDIO 1 BASE DE CÁLCULO VINAZA MIEL B MICELIO H2SO4 1ml Buffer pH Planeación Preparar 2 medios y de cada medio hacer 3 ensayos tomar Brix.

25*10e7 9.61*10e9 1.27 4. se prepara 1000ml del medio y se inocula con el medio que tenemos en conservación y se realiza conteo cada 3 horas para evaluar el crecimiento. ~ 60 ~ . luego se filtra y se utiliza el residuo filtrado.66*10e9 2. hora conteo 21:13 00:13 03:13 06:13 09:13 12:13 conteo medio 1000ml 1. CONTEO 12 HORAS DE MEDIOS: Los medios problemas se hacen por duplicado.Al micelio se le realiza una hidrólisis con NaOH. Procedimiento Después de haber hecho esto se le agrega el 5 % del medio en aceite mineral para conservar.57*10e10 Final 1.15*10e8 1.24 4.62*10e9 1.24 4.92*10e9 pH 4.4° Curvas de crecimiento.27 4.62*10e7 2.17 Brix° 23° 23° 23° 23° 23. Los medios problemas tienen un volumen de 50 ml.1*10e8 1.2° 25.21*10e8 Tomamos el medio problema con mayor crecimiento en este caso medio n°3 para pasar a 1000 ml. MEDIO N° 1 MEDIO N° 2 MEDIO N°3 6.21 4.15*10e8 4.5*10e7 1. se lleva por 10 min a la autoclave dos veces.

5 23 22.2 Brix vs t ~ 61 ~ .5E+10 c.c vs t 3E+10 2.4 24 23.5 0 1 2 3 4 5 6 7 23 23 23 23 23.5 25 24.5 25.5E+10 2E+10 1.c vs t 1E+10 5E+09 0 -5E+09 0 1 110000000 1610000000 1920000000 1660000000 4 5 6 7 25700000000 162000000 2 3 Brix vs t 26 25.c.

21 pH vs t 4.18 4.pH vs t 4.24 4.27 4.17 4.24 4.2 4.16 0 1 2 3 4 5 6 7 ~ 62 ~ .27 4.24 4.28 4.22 4.26 4.

19950002 21.5E+10 2E+10 1.c 3E+10 2.16 1920000000 4.PH vs c.2 4.22 4.23008344 18.28 Ln biomasa 30 25 20 15 10 5 0 -1E+10 1E+10 3E+10 21. de éste realizamos nuestras producciones finales.5E+10 PH vs c.90310689 Ln biomasa NOTA: La muestra se tomo cada 3 horas Se comprueba que el Medio con mayor rendimiento y producción es el Medio tres.51599092 23. ~ 63 ~ .96975683 18.c 1E+10 5E+09 0 -5E+09 4.18 4. Medio de cultivo Características.24 1660000000 1610000000 4.37559102 21.26 25700000000 162000000 110000000 4.

pero d a la hora de realizar la caracterización de la materia prima y las gestión adecuada nos dimos cuenta de que esta empresa no nos facilitaría este producto porque ellos tenían unos proveedores que se los compraban.Composición Micelio Vinaza Miel B Fosforo % 10p/v 60v/v 30p/v Cantidad necesaria para amortiguar el pH pH °Brix Picnómetro ATR’S 3. al tiempo que abarata los costes de alimentación.256 gr/ ml 0. así como su valor nutritivo.91 21 gr/ml 0.233% Al inicio de nuestro programa de formación nuestro proyecto se enfoco en trabajar con el subproducto obtenido durante el proceso de la cerveza que es los residuos de la malteria. aporte de microfibras y el ahorro ~ 64 ~ . En la primera etapa de este proyecto estudiará la introducción del pienso fermentado a partir de datos obtenidos de los animales. MATERIA PRIMA RESIDUOS DE LA MALTERIA (CERVEZA) ESTUDIAN ALIMENTAR GANADO CON RESIDUOS DE HARINA Y CERVEZA El departamento autonómico señaló hoy en un comunicado que esta iniciativa pretende dar salida a subproductos agroindustriales y su traslado a vertederos.

0-20 8. determinando la evolución de la cantidad y calidad de la leche y su incidencia en los quesos que se elaboren. En una última fase del estudio se examinará la producción lechera.5 6. El grano sobrante.5-10 7. rendimiento y precio de venta y como el costo del sustrato representa una gran proporción del costo de fabricación de la mayoría de los ~ 65 ~ . tanto en el ámbito nutricional como en el coste de producción.0-8 LEVADURAS 7. después de elaborar la cerveza deberá utilizarse antes de 10-15 días ya que pasado este tiempo se estropea.5-8.5-50 1.0-6.0-9.0 RENTABILIDAD DE LA PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS UNICELULARES Los principales factores económicos son productividad. PORCENTAJE PROMEDIO DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA PROXIMAL DE LA PROTEÍNA UNICELULAR EN BASE A SU PESO SECO.0 5. COMPUESTOS ORGÁNICOS (%) Proteína Lípidos Cenizas Ácidos nucleicos HONGOS FILAMENTOSOS 5-8 2-8 9-14 7 ALGAS 7.0 8. El grano también es rico en proteínas. tiene cerca de un 26%.0-10 3.0-7. Por eso las grandes fábricas tienen prensas que extraen la humedad de la mezcla que hace que el sobrante se pueda conservar más tiempo y se pueda transportar con más facilidad.5 2.0 3.0-16.0-12 BACTERIAS 11.5-3.de forraje.

la velocidad de crecimiento. productividad y rendimiento del sustrato.U. es esencial que el rendimiento celular ( peso de células producido por unidad de peso de sustrato ) sea elevado y la formación de subproductos sea mínima. morfología del crecimiento en el fermentador. ausencia de productos tóxicos. ELECCIÓN DEL MICROORGANISMO. la aireación. Se deben tener en cuenta criterios como el sustrato necesario y los posibles suplementos del mismo. Tipo de levadura a utilizar en el P.productos de proteínas de organismos unicelulares. facilidad de recuperación de las proteínas de organismos unicelulares. ~ 66 ~ .C para el alimento a la ganadería a partir de residuos de la malteria:  levadura cándida utilis. el PH y la temperatura. seguridad y no patogenicidad.

almacén bavaria Entrega de residuos Inspección de la materia a trabajar Almacenamiento Inspección de la materia Transporte almacén bavaria.Sena Palmira Propagación-in vitro Inoculación Fermentación Filtración o secado Venta y distribución Envase Análisis del producto ~ 67 ~ .FLUJO DE PRODUCCION Puc residuos de la malteria Transporte camioneta Sena Palmira.

utilizando como microorganismo Candida utilis.5 Cámara de neubauer: 1. 0.0X10E8 pH: 4. MIEL B con (CANDIDA UTILIS) Medio de cultivo seleccionado: 5ml de miel B. 40ml de H2OD. 5ml de vinaza.0x10e8 Se escogió entre 3 medios caracterizados por su mayor crecimiento y adaptación de la cepa. BITACORA DE CONTROL FECHA DE INICIO:20 DE SEPTIEMBRE DE 2011 PREINOCULO CONCETRACION CELULAR:1.5 BRIX:17 ~ 68 ~ . PROTEINA UNICELULAR APARTIR DE BAGACILLO.Debido al proyecto planteado anteriormente y teniendo en cuenta las dificultades que se nos presentaron decidimos junto con el equipo de trabajo y gestor del proyecto cambiar nuestra materia prima residuos de la malteria por bagacillo y miel B. 0.1ml de acido fosfórico. pues solo fue aplicada para conservación). Brix: 17. pH: 4. Para su conservación agregamos 12ml de glicerina en 50ml de medio. Luego procedimos a preparar el medio de 1000ml teniendo en cuenta las cantidades de sustancias agregadas al medio de 50ml (sin contar la glicerina.01gr de cloruro de amonio. 1ml de acido clorhídrico. 5gr de gelatina.

5X10E7 1.8 20.1X10E8 3.2X10E8 7.5 BRIX:19 ~ 69 ~ .87X10E7 pH:4.CONTEO: Nº 1 VOLUMEN 1000 ml HORA 02:00 04:00 06:00 08:00 10:00 12:00 14:00 CONCENTRACION CELULAR 8X10E7 4.6 18.1X10E8 4.5X10E7 6.7X10E6 DENSIDAD 1.2 3.3 3 GRUPO 4 4 4 4 4 4 4 ln Vs T 25 20 15 ln Vs T 10 5 0 00:00 02:24 04:48 07:12 09:36 12:00 14:24 16:48 BITACORA DE CONTROL FECHA DE INICIO: PREINOCULO CONTEO: Nº2 VOLUMEN HORA CONCENTRACION CELULAR GRAVEDAD LN PH GRUPO CONCETRACION CELULAR: 2.1 g/l LN 18.3 15.7 PH 4 4.2 4.5 3 3.3 17.5 19.1 17.

1000 ml

02:00 04:00 06.00 08:00 10:00 12:00 14:00

2,87X10E7 7,6X10E7 7,9X10E7 5,7X10E7 5,9X10E7 5,0X10E7 1,3X10E8

1,090 g/l

17,1 18,1 18,1 17,8 17,8 17,7 18,6 4,3 4,4 4,1 3,8 4 4,2

4 4 4 4 4 4 4

18,8 18,6 18,4 18,2 18 ln Vs T 17,8 17,6 17,4 17,2 17 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Series2

BITACORA DE CONTROL

~ 70 ~

FECHA DE INICIO:8 DE NOVIEMBRE DE 2010 HORA: 10:00 A.M PREINOCULO CONTEO: N° 3 VOLUMEN 1000 ml HORA 02:00 04:00 06:00 08:00 10:00 12:00 VELOCIDAD DE CRECIMIENTO MAXIMA MINIMA 0,81 0,15 CONCENTRACION CELULAR 3,6X10E7 2,4X10E7 2,3X10E7 3,2X10E7 2,0X10E7 7,4X10E7 GRAVEDAD 1,090 g/ l LN 17,3 16,9 16,9 17,2 16,8 18,1 PH 4,4 4,1 3,9 3,6 4 4,2 GRUPO 4 4 4 4 4 4 CONCETRACION CELULAR:6X10E6 PH:4,5 BRIX:19

ln Vs T
18,2 18 17,8 17,6 17,4 ln Vs T 17,2 17 16,8 16,6 00:00 02:24 04:48 07:12 09:36 12:00 14:24

~ 71 ~

FACTORES QUE AFECTAN LA EFICIENCIA DEL PROCESO Factores que afectan la velocidad de formación de Biomasa Tipos de sustrato Tipos de cepa Ambiente Sencillos Procariota Temperatura Complejos Eucariotas pH Viscosidad Arqueo bacterias Aireación Efecto positivo Efecto negativo Efecto No significativo Mayor velocidad: Mayor Biomasa Menor velocidad: Menor Biomasa No velocidad: No hay crecimiento

o

o

o

PERDIDAS DE AZUCAR: Hidrolisis térmica (termólisis) de la sacarosa (Reacción de Millard). Generación de azucares infermentables durante el proceso, aumento en azucares residuales INFECCIONES BACTERIANAS: Por microorganismos como Leuconostoc, Mesenteroides (dextranas), Bacterias acido lácticas (acidez láctica) y acido acéticas principalmente, que compiten por los nutrientes y los productos que liberan inhiben el crecimiento y la actividad de la levadura, además la estresan. La formación total de ácidos de estas bacterias se determina mediante acidez volátil. ACIDOS ORGANICOS: Vía ciclo de Krebs: málico, fumarico, oxálico, cítrico o por bacterias / levadura salvaje: láctico, acético y butírico.

Factores de estrés para Saccharomyces cerevisiae y Cándida utilis La relación de los factores ambientales en el desarrollo de la levadura está ligada a una buena producción de biomasa:

~ 72 ~

Foto 1. Tomada en el laboratorio. Las bacterias se duplican 8 – 9 veces más rápido que la levadura Imagen 26. ~ 73 ~ . Tinción de Gram Candida Utilis tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.

00E+06 2. oleo fusel. aumenta la turbiedad y espuma (CO2). acido láctico.00E+00 0 2 4 6 8 Poblacion Celular Tiempo Tabla 16. producen glicerol. 1.00E+06 6. metanol.00E+06 0. acido Succínico.40E+07 1. Tomada en el Laboratorio de Biotecnología Industrial Imagen 24. durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro. levadura Salvaje contaminación en montaje 1000ml. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.00E+06 4.20E+07 1. acido acético. Tomada en el Laboratorio de Biotecnología Industrial ~ 74 ~ .“El rapido crecimiento de las bacterias afecta la salud de las levaduras” Foto 1. Curva de crecimiento contaminación por levadura Salvaje montaje 1000ml.00E+07 8. FACTORES QUE AFECTAN LA EFICIENCIA DEL PROCESO LEVADURA SALVAJE: La mayoría compite tanto aeróbica como anaeróbicamente por el azúcar y los nutrientes del medio de cultivo.

Permitir visitas técnicas para desarrollar por observación las competencias. Incluir Materias Primas y cepas Industriales en el marco de la evaluación de los Bioprocesos. pero su uso excesivo es de preocupación mundial porque puede crear cepas resistentes a los antibióticos Esterilización del Medio de Cultivo: Se recomienda autoclavar 30 minutos a 121° C. Transferencia y acompañamiento hacia el proyecto objeto de la Investigación Aplicada. desde el sector productivo. 15 libras de presión • • • 12. controlan la contaminación. Evaluación de las conclusiones y aporte de recomendaciones hacia el Programa de Formación. FASES DEL PROYECTO Y SUS ACTIVIDADES ~ 75 ~ . 4. DISEÑO METODOLÓGICO 1. 2.FORMAS DE CONTROL PARA MINIMIZAR O EVITAR LA INFECCION • Diseño y Limpieza: Lavado y esterilización adecuado del material de vidrio a utilizar en el proceso Adición de Acido Sulfúrico: El anhidro Sulfuroso moléculas (SO2) es el principal microbicida utilizado en las industrias que anula la levadura salvaje Adición de Biocida o Antibióticos: Costos elevados en el proceso de producción . 3.

ANALIZAR LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÒN FÌSICA. EQUIPOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL Y SEGUIMIENTO DE PARÁMETROS DE FERMENTACIÓN SEGÚN INSTRUCCIONES A NIVEL DE LABORATORIO EN LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR. INSUMOS.FASES DEL PROYECTO Análisis y Planeaciòn ACTIVIDADES DEL PROYECTO: Cronograma ( En Meses) IDENTIFICAR NECESIDADES DE ALTERNATIVAS NUTRICIONALES PARA LA ALIMENTACIÒN ANIMAL POR PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS Y ACCIÓN MICROBIANA. 9.5 Evaluación VALIDAR LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÌNA UNICELULAR DE ACUERDO A LAS MATERIAS PRIMAS SELECCIONADAS Y CONDICIONES OPERATIVAS DE FERMENTACIÓN REPORTADAS POR EL LABORATORIO Y LA PLANTA PILOTO. A este proyecto se le realizaron los siguientes análisis: Determinación de azúcares reductores totales y libres (Método de Fehling) A. QUÌMICA Y MICROBIOLÒGICA VALORANDO LA PRODUCCIÒN BIOTECNOLÒGICA DE PROTEÌNA UNICELULAR Y SUS VERTIMIENTOS Y SUBPRODUCTOS SÒLIDOS .Lodos Activados 200 L Planta Piloto de Compostaje. ~ 76 ~ .PROPOSITO/ PRINCIPIO Determinar los azúcares reductores totales y libres usando el método Fehling. VALORAR LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR COMO SUPLEMENTO ALIMENTICIO ANIMAL Y REMEDIAR POR PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS LOS VERTIMIENTOS Y SUBPRODUCTOS SÓLIDOS PROVENIENTES DEL BIOPROCESO. 2.5 Ejecución EJECUTAR LA OPERACIÓN. TANTO A NIVEL DE LABORATORIO Y PLANTA PILOTO. QUÍMICA Y MICROBIOLÓGICA VALORANDO LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR A PARTIR DE DIFERENTES SUSTRATOS A ESCALA DE LABORATORIO SELECCIONAR LAS MATERIAS PRIMAS. CUMPLIENDO CON EL ESCALADO DE LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA. 2 AMBIENTES DE FORMACIÓN REQUERIDOS o o o o Laboratorio de Biotecnología Industrial Planta Piloto de Fermentaciones 20 L Planta Piloto de Tratamiento de Agua Residual. ANALIZAR LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÓN FÍSICA.

Compruebe que las pilas y la carga de corriente sean óptimas para un mejor desarrollo de su actividad de pesaje. E.EQUIPAMIENTO Baño María Balanza de Precisión Pilas y adaptador de corriente MODELO (YCW-010E) GEMMY INDUSTRIA CORP (CQT-5000) A A ADAM F. Inspeccione el área de trabajo para así determinar que no exista exceso de humedad ya que esto puede interferir en el desarrollo de su actividad.B. C.APLICABLE A: Procedimientos en el laboratorio de C.B.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Utilice bata de laboratorio de tela anti fluidos para evitar posibles derrames perjudiciales para su integridad personal. Use el gorro para evitar la contaminación del medio donde se encuentra trabajando.RESPONSABILIDAD El responsable de ejecutar esta actividad es el aprendiz de laboratorio El responsable de supervisar esta actividad es el instructor del laboratorio D.I.MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES Un balón aforado de 250 ml ~ 77 ~ . Utilice el tapabocas para evitar el posible inhalamiento de vapores y/o gases tóxicos. En el momento de manipular los reactivos y materiales de laboratorio es pertinente que utilice guantes quirúrgicos para evitar la contaminación de estos y proteger su integridad.

639 g en 500 ml de agua) NaOH Tartrato de sodio y de potasio ( sal de Rochela) ( 173 g de la sal de rochela y 50g de NaOH en un volumen de 500ml) ~ 78 ~ .Un balón aforado de 100 ml Un vaso de precipitados de 500ml Un vaso de precipitados de 250ml Un erlenmeyer de 500ml Una placa de calentamiento Cinco tubos de ensayo Dos pipetas graduadas de 5ml Un embudo de vidrio Un agitador de vidrio Una probeta de 100ml Una probeta de 50ml Una pipeta aforada de 25ml Una pipeta aforada de 10ml Un vidrio de reloj Una pro pipeta Dos aros con nuez (uno pequeño) Una gradilla REACTIVOS . 5H2O ( 34.Reactivo de Fehling – Soxhlet: CuSO4.

mezclando volúmenes iguales de la solución de sulfato de cobre y de la solución alcalina del tartrato de sodio y de potasio. Preparación del reactivo de Fheling-Sohelt: Prepare la cantidad adecuada de este reactivo. 3. 6. Finalmente con dos porciones de 20ml cada una de eter etílico.G. Ensayo Previo: En cinco tubos de ensayo agregue sucesivamente a. debe volver a preparar la solución No 1. y se coloca en un matraz aforado de 100ml y se completa a volumen con agua destilada (preparación de solución No 2) 5. Caliente en un baño con agua hirviendo por unos tres minutos. Luego con tres porciones de 10 ml cada una de alcohol al 70% 12. Calculo de ATRs Método ICUMSA: % de Azucares Totales = 100 T*FF*FD T= Volumen de la Titulación FF= Factor Fehling FD= Factor de Dilución= peso de la muestra *25*100 ~ 79 ~ . 2.0 g de la muestra y disuélvala en un matraz aforado de 250ml con agua destilada. H-PREPARACIÓN DE SOLUCIÓN 1. de mide 20 veces el volumen de la solución No 1 con la que se obtuvo el color azul más ligero. Luego filtre sobre un papel de filtro previamente pesado 10. añada a cada tubo 5 ml de la solución de FehlingSoxhelt. Coloque en la estufa a 120 ºC por 15 minutos 14. Análisis gravimétrico: En un vaso de precipitados de 250ml adicione 50ml del reactivo de Fehling-Soxhlet y 50ml de la solución No 2 azucarada. 8. 3. Deje enfriar en el desecador y pese. Retire de la llama y agregar inmediatamente 100cm de agua destilada fría.PREPARACIÓN DE REACTIVO FEHLING 1. 9. 4. 2. 13. utilizando la mitad del peso de la muestra anterior. Lave el precipitado con una tres porciones de 20ml cada una de agua caliente 11. Preparación de la muestra. Cubra el vaso con un vidrio de reloj 7. Para continuar con el análisis. 4 y 5 ml de la muestra azucarada antes preparada.Solución No 1: Pese 20. Deje sedimentar el óxido cuproso y observe el color del líquido en cada tubo y note cual tiene el tinte de color azul más ligero. Si no se observa en ninguno de los tubos una coloración azul. si observa partículas sólidas déjelas decantar. Caliente hasta el punto de ebullición por unos 4 a 5 minutos.

4. Los sólidos remanentes después del secado son los sólidos disueltos. I. glucosa.PROPOSITO/ PRINCIPIO Las partículas suspendidas presentes en el agua. de color rojo-anaranjado. 2.APLICABLE A: Este método es aplicable para el agua de proceso en el CBI. a óxido de cobre. almidón. Si la reacción adquiere un color azul verdoso nuestra reacción será negativa. se oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre. B. Si la reacción se muestra de un color rojo ladrillo la reacción será positiva.200*250 Nota: La titulación debe completarse en 3min contados a partir del momento en que empiece la ebullición. de color azul. La diferencia da el resultado de los sólidos suspendidos totales. Si el glúcido que se investiga es reductor.PROCEDIMIENTO 1. son removidas por filtración y el agua filtrada es secada en un horno. 3. El reactivo Fehling se basa en el carácter reductor de los monosacáridos. maltosa. ~ 80 ~ . Agite vigorosamente para posteriormente llevarlo al baño maría. Coloque en 5 tubos de ensayo los siguientes glúcidos: Lactosa. Estos son determinados y restados de los sólidos totales. Proceda a adicionar de dos a tres gotas de fehling A y B a cada tubo de ensayo. sacarosa. 5. SOLIDOS TOTALES DISUELTOS Y SOLIDOS SUSPENDIDOS A.

seca y sin etiquetas. en el proyecto de biorremediacion. Filtre la muestra de agua (150-200ml) a través de un papel de filtro whatman numero 1 o equivalente. Cuando utilice los equipos o materiales asegúrese que: La cristalería que se va a utilizar debe estar limpia. E.1mg de precisión Horno de baño caliente/baño de vapor F-MATERIALES Papel de filtro whatman G. Chequear que las máquinas o materiales se encuentren limpios y en buen estado. D.EQUIPAMIENTO EQUIPOS Material de vidrio: Caja petri Pipeta de 50ml o disponible Desecador Instrumentos: Balanza con al menos 0. ~ 81 ~ .C.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Usar bata.RESPONSABILIDAD El responsable de ejecutar esta actividad es el tecnólogo en procesos biotecnológicos aplicados ala industria. El responsable de supervisar esta actividad es en instructor Ernesto Mendoza.PROCEDIMIENTO 1.

mg/litros de sólidos totales suspedidos. Pese una caja o plato de evaporación vacio y seco (A) 3.ºc) Calcule los sólidos suspendidos totales así: Sólidos suspendidos totales = sólidos totales – sólidos totales disueltos Reporte el resultado como: El agua contiene ---.PROPOSITO/ PRINCIPIO Determinar la concentración de nitrógeno en una sustancia. Cuando el agua se haya evaporado completamente seque el residuo remanente a 100ºc o 105ºc hasta peso constante. Reporte el resultado como: el agua contiene ----mg/litro de sólidos totales (secados a ----. en miligramos. Evapore la muestra de agua en el horno a aproximadamente 90ªc 5.2. Refiérase a las notas de sólidos totales en agua CÁLCULOS Calcule los sólidos totales disueltos así: Sólidos totales disueltos. ~ 82 ~ . Determinación de Nitrógeno por Método kjeldahl A. Coloque en el plato de evaporación una cantidad adecuada y determinada de agua filtrada. Enfríelo en el desecador y péselo inmediatamente (B) 6. mg/litro =(B-A)X1000 / volumen de muestra tomada Donde : A: peso del plato vacio en miligramos B: peso del palto + el residuo seco. 4.

Hornilla eléctrica.APLICABLE A: Sustancias nitrogenadas C. E.RESPONSABILIDAD El responsable de ejecutar esta actividad es el aprendiz del área.MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES Bureta de 10ml Frascos goteros Pipetas de 1. 10 y 15 ml Papel de pesada de desprovisto de nitrógeno Micro balones de kjeldahl de 100ml MODELO CQT-5000 Reactivos Hidróxido de sodio Acido Bórico Acido clorhídrico ~ 83 ~ .5.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Usar uniforme verde Utilizar careta.EQUIPAMIENTO EQUIPOS Balanza analítica. Aparato de destilación. guantes.B. El responsable de supervisar esta actividad es el instructor del programa D. gafas. Campana de extracción de gases F.

A. mezcle dos partes de solución alcohólica de rojo de metilo al 0. 4.Disuelva 250gr de NaOH en agua lentamente.2% y una parte de solución alcohólica de azul de metileno al 0. Indicador rojo de metilo. 3.02N de HCl (1. Solución de HCl: Prepare y estandarice una solución de 0. B. Solución de acido Bórico. H. 5.8ml HCl concentrada para 1L de solución). Solución patrón de referencia de (NH4)2SO4: Pese con exactitud una determinada cantidad de (NH4)2SO4 100 a 200 mg y dilúyalo en forma tal que resulte una solución que contiene 2000 +ó. 2.PROCEDIMIENTO Para la destilación se toma 10ml de la muestra digerida Determinación de materia seca gravimétrica.APLICABLE A: Muestras de sustancias sometidas a desecación para obtener el análisis de materia seca.3mg/cc exactamente al objeto de chequear y controlar el método.2%. ~ 84 ~ . azul de metileno. IPREPARACION DE SOLUCIONES 1. Solución de hidróxido de sodio al 50%.Acido sulfúrico Sulfato de sodio anhidro Sulfato de amonio químicamente puro Selenio metálico oxicloruro de selenio Rojo de metilo Azul de metileno. enfriando posteriormente diluya hasta obtener un volumen total de 500ml.PROPOSITO/ PRINCIPIO Establecer el procedimiento para determinación de materia seca en los procesos fermentativos efectuados en el laboratorio de CBI. Disuelva 20gr de H3BO3 en agua y diluya hasta 500ml.

Espátula.EQUIPAMIENTO EQUIPOS Centrifuga Mufla eléctrica Balanza analítica. Siga adecuadamente todas las instrucciones de seguridad del laboratorio.PROCEDIMIENTO Se toma 10ml muestra del reactor en un Breaker de 100ml y con la ayuda de una bomba de aire y la pipeta de 10ml se extrae 10ml exacto la muestra y se lleva a los tubos de ensayo plástico. Mantener los equipos de retirado de fuentes de alta temperatura o vapor. Considerar todas las situaciones que favorezcan el funcionamiento de los equipos. radiadores.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Usar uniforme verde Revisar que el desecador se encuentre en óptimas condiciones para iniciar el proceso. El responsable de supervisar esta actividad es el instructor del programa D. MODELO Gemmy Lesco CQT-5000 F.C. autoclaves. E. ~ 85 ~ . H.RESPONSABILIDAD El responsable de ejecutar esta actividad es el aprendiz del área. Pipeta de 10 ml Bomba de aire Tubo de ensayo. Desecador con silica gel. pinza. o expuesta directamente a rayos de sol.MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES Crisol de porcelana. IIPREPARACION DE SOLUCIONES No procede.

pesar rápidamente los crisoles y anotar el peso. este para se realiza dos veces. Colocarlos en un desecador durante 10 minutos. En el periodo que se está centrifugando la muestra. Pesar el crisol. (T+MS= Tara + Materia Seca) Calcular el porcentaje de Materia Seca. Sacar los crisoles con una pinza de la estufa colocarlos en un desecador y esperar 10 minutos. Después de la centrifugación se elimina el sobrenadante. Abrir el desecador. Ejemplo: % peso húmedo o fresco muestra (gr)= [(Peso crisol vacio +MF)-peso crisol vacio] %peso seco muestra (gr)= [(peso crisol vacio + MS)-Peso crisol vacio] ~ 86 ~ . anotar su número y su peso (T= Tara) Colocar rápidamente más o menos 3 a 5 gramos de materia húmeda en el crisol con una espátula y anotar el peso (T+MF= Tara + Materia Fresca) Colocar los crisoles a 105°C durante 24 Hrs.Después se monta los tubos de ensayo a la centrifuga y le da un tiempo de 600rpm durante 10min. se toma 3 crisoles y se introduce en una estufa con una temperatura de 105°C durante 30 minutos. Se centrifuga hasta obtener la separación de la materia húmeda y la vinaza. a la biomasa precipitada se le añade 10ml de agua y se vuelve a centrifugar el mismo tiempo y rpm.

infecciosa o contaminante. Usar elementos de protección personal como dotación o bata verde para visitante.%Húmedo de la muestra = (Peso húmedo muestra – peso seco muestra) x 100 Peso húmedo muestra TRABAJO EN PLANTA DIDÁCTICA DE FERMENTACIONES Y LABORATORIO NORMAS GENERALES DE BIOSEGURIDAD Bioseguridad es el conjunto de normas o actitudes que tienen como objetivo prevenir los accidentes en el área de trabajo. Adoptar las normas de bioseguridad. Incurrir en el incumplimiento de estas normas conlleva a la aparición de enfermedades. Estas Serán las normas que adoptará de forma responsable todo el personal que tenga acceso al laboratorio de BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL. Normas Preliminares para entrar al Laboratorio: Contar con autorización y la mejor disposición al ingresar al Laboratorio. el estudiante o personal que labora en el laboratorio. accidentes e incidentes. microorganismo o sustancia que pueda ser nociva para la salud de los presentes en el laboratorio de Biotecnología Industrial del CBI. Contar con reglamento de bioseguridad y designar un responsable para velar por su cumplimiento. es decir. Entender que toda muestra que va a ser manipulada en el laboratorio del CBI debe ser considerada altamente tóxica. por esta razón se hace indispensable tenerlas en cuenta en cada procedimiento para ayudar a prevenir dichas enfermedades o en su defecto cualquier accidente dentro del laboratorio ocasionado por falta de información. trabajando bajo estos parámetros. ya que. ~ 87 ~ . reconocerá que su salud y la de las personas que trabajan con él son lo más importante. constituyen reglas básicas de comportamiento que debe adoptar el personal que está en contacto o manipula algún tipo de reactivo. orientación o desconocimiento de las normas. a disminuir el potencial riesgo ocupacional.

para evitar cualquier tipo de accidente. Usar guantes de látex de buena calidad y de la talla adecuada para todo manejo de material biológico y/o químico. ~ 88 ~ . Asegurarse de no presentar laceraciones. deberá de forma obligatoria utilizar GAFAS de protección en los ojos. Es preferible el uso de uso de pantalones largos ya que pueden impedir que sufra lesiones con materiales corto punzantes y con sustancias químicas o contaminación con materiales biológicos. por derramamiento o salpicadura. corrosivo. Usar tapabocas y gorro para los procedimientos realizados en el laboratorio.Garantizar los medios de protección necesarios para preservar tanto el personal de laboratorio y a los usuarios como a las muestras biológicas y se controlará el uso adecuado de los mismos. Emplee delantales impermeables cuando haya posibilidad de salpicaduras o contacto con fluidos de precaución universal. Cuando el personal del laboratorio manipule sustancias de tipo. Disponer de los procedimientos y recursos necesarios para garantizar la adecuada descontaminación y eliminación del material desechable y de todos los residuales líquidos y sólidos potencialmente infecciosos o contaminantes DOTACIÓN DEL PERSONAL QUE ACCEDE AL LABORATORIO Usar bata de manga larga dentro de laboratorio. Las manos se deben lavar antes de ponerse los guantes y una vez se quiten. tóxico. Deberán usarse zapatos cerrados dentro del laboratorio para evitar el contacto de la piel con material contaminado o cualquier producto químico peligroso. la cual debe estar completamente cerrada y se pondrá antes de entrar y deberá ser quitada inmediatamente al salir del laboratorio. heridas abiertas u otras lesiones en la piel y en caso de que así sea cubrir la herida de manera conveniente.

No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los guantes puestos

NORMAS DE TRABAJO Al ingresar al Laboratorio se debe apagar todo tipo de alarmas, celulares, beepers u otros equipos que puedan interrumpir la práctica. Realice limpieza y desinfección a las superficies, elementos y equipos de trabajo al final de cada procedimiento y al finalizar la jornada de trabajo. Bajo ninguna circunstancia se permitirá comer, beber, fumar y/o almacenar comida, así como cualquier otro ítem personal (maquillaje, cigarrillos, etc.) dentro del área de trabajo. Mantenga el cabello corto o recogido. Evitar tapar, enfundar, doblar o quebrar agujas, láminas de bisturí u otros elementos corto punzante, una vez utilizados. Estos elementos deben ser directamente colocados en el guardián. No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas. Bajo ninguna circunstancia se pipeteará sustancia alguna con la boca, paralelo se utilizaran peras plásticas o pro pipetas automáticas. Los tubos que se introduzcan en la centrífuga deben ir tapados, además no se debe detener manualmente la centrifuga, ni destaparla antes de que empiece a girar. Evite el contacto con agujas y elementos corto punzantes.

~ 89 ~

No devolver reactivos a los frascos originales, así no hayan sido usados. No permitir la entrada de personas ajenas al laboratorio y/o que no tengan sus implementos de bioseguridad adecuados. Al finalizar la práctica o procedimiento, el laboratorio debe quedar ordenado, el material ubicado de forma ordenada y los desechos generados correctamente clasificados. Cualquier accidente por pequeño que sea, debe comunicarse al instructor responsable de la práctica de laboratorio o en su defecto a la persona que esté a cargo del mismo. Todos los desechos biológicos, ya sean líquidos o sólidos, tienen que ser descontaminados antes de su eliminación. Emplear en todo momento las medidas de bioseguridad aquí expuestas.

MANTENIMIENTO DE LABORATORIO En el laboratorio no debe haber ninguna clase de plagas como cucarachas, roedores, hormigas entre otros. El laboratorio debe ser fumigado mínimo cada seis meses para evitar cualquier tipo de plagas. Se deben inspeccionar todos los equipos antes de su utilización y una vez finalizada la práctica. El suelo del laboratorio debe estar siempre seco, limpiando inmediatamente cualquier salpicadura de sustancia sea química o agua. Los pisos del laboratorio no deben barrerse ni encerarse solo se trapean con solución de hipoclorito de Sodio (0.5 al 1.0%). Descontaminar la superficie de los mesones con hipoclorito de Sodio (0.51%). Material de vidrio reutilizable debe ser lavado en el laboratorio. Los reactivos deben quedar bien cerrados y almacenados. El laboratorio debe quedar en perfectas condiciones: o Llaves de agua y gas cerradas. o Luces apagadas. Equipos desconectados, vertederos libres de muestras o manchas de reactivos o con material por lavar, mesones limpios y descontaminados.

~ 90 ~

Pisos libres de basura.

ASEPCIA Y DESINFECCION DEL LABORATORIO PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA Y DESINFECCION A) PROPÓSITO / PRINCIPIO Este procedimiento tiene como objetivo establecer la metodología para la limpieza de las áreas del laboratorio del Centro de Biotecnología Industrial. B) APLICABLE A: Áreas generales del Laboratorio de Biotecnología Industrial, como: mesones, equipos, pisos y otros. C) RESPONSABILIDAD Es responsabilidad del monitor de limpieza cumplir con lo especificado en el procedimiento, Jefe de los aprendices del área y Responsable de Calidad, que supervisará la correcta realización del mismo. D) CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Realice la limpieza utilizando la bata sanitaria, guantes, gorro y tapabocas. Tener cuidado de no humedecer equipos o partes de ellos que tengan alimentación eléctrica (computadoras, lámparas, toma corrientes y equipos de laboratorio). E) EQUIPAMIENTO No procede F) MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES Guantes de goma Paño de tela Esponja Escoba Recogedor Trapeador Frazada Bolsas de nylon Botas de gomas Brillador

~ 91 ~

571 ml de hipoclorito de sodio al 5. procedemos a aplicarle alcohol al 70% hasta evaporar.ALCOHOL INDUSTRIAL Mida en un balón aforado de1L 707 ml de alcohol industrial y afore a 1L con agua destilada. estos son: Se comenzará la limpieza por los mesones de transición adicionándole extran para la limpieza para dejar lisa la membrana de las bacterias dejándolo durante 5 minutos. ya que hay bacterias acido resistentes que podrían sobrevivir a éste primer procedimiento. separar y preparar la cantidad de residuos que se generen en el laboratorio para su recolección de acuerdo con los procedimientos especificados por el laboratorio. V2 2. ~ 92 ~ . Frecuencia de limpieza: Mesones y equipos: diario 2 veces al día Pisos: tres veces por semana. Foto. descrito en tres procedimientos básicos para el control de agentes biológicos. lo dejamos actuar durante 3 minutos.HIPOCLORITO DE SODIO Mida en un balón aforado de 1L.G) PREPARACIÓN DE SOLUCIONES 1.V1 = C2. C1. la limpieza y desinfección de locales y equipos. V2 H) PROCEDIMIENTO El laboratorio cuenta con un programa de higiene que describe los procedimientos para el mantenimiento del orden.25% y afore a 1L con agua destilada Agítelo suavemente de forma manual. V1 = C2. Agítelo suavemente de forma manual. Tomada En El Laboratorio De Biotecnología Industrial Sena Palmira DESCARTE Se debe minimizar. C1. luego procedemos aplicarle el hipoclorito de sodio al 3% para poder hacer lisis a los microorganismos presentes.

caneca verde y caneca gris. químicos Rojo agentes infecciosos o cualquier cito tóxicos. hongos o levaduras. vidrio contaminar. residuo contaminado por estos. Riesgo Biológico Rotular con: Riesgo Químico PLANTA DE FERMENTACIONES La Planta Piloto de Fermentación tiene como finalidad principal el desarrollo a escala semiindustrial de productos obtenidos a partir del cultivo de células y microorganismos. bolsas de No peligrosos reciclable plástico.El laboratorio debe tener al menos tres canecas de basura. Foto. embases de plástico sin Gris Plástico . Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. mezclas de Peligrosos infecciosos microorganismos. Clase de residuo contenido básico color etiqueta Rotular con: Toda clase de vidrio. ya sean bacterias. Verde No peligrosos ordinario o inertes. Planta piloto de fermentaciones. ~ 93 ~ . tela papel plastificado. Biosanitarios. en las cuales se clasificaran de forma correcta los desechos generados por el mismo. Caneca roja. Reciclable Rotular con: No peligrosos ordinario Empaques de e inerte barrido. Peligrosos Químicos infecciosos Restos de sustancias químicas y sus empaques o cualquier otro residuo Rojo contaminado con estos. Rotular con: Compuestos de cultivos. medios de cultivo.

utilizar dispositivos propios para la colecta de ese material. Conocer los antídotos para los agentes químicos venenosos. etc. manteniéndose a mano en caso de requerirse. explosividad. entre otros). Vestirse apropiadamente (guantes. Seguridad en el laboratorio y manejo de productos químicos Seguridad en el laboratorio El manejo de las aguas residuales y de productos químicos crea un potencial de peligro para la salud y la seguridad del personal de laboratorio. En el laboratorio siempre existe la posibilidad de derrame de productos químicos lo cual requiere de una acción inmediata para corregir o minimizar el efecto de este peligro potencial. Tener seguridad que el recipiente que contiene estos productos esté debidamente tapado y rotulado con la fecha de preparación y que contenga las notificaciones sobre peligro. flamabilidad. no leen los rótulos y no siguen las reglas y procedimientos de laboratorio.. Almacenar los químicos de acuerdo con la peligrosidad.1 SEGURIDAD GENERAL DE LA PLANTA Todas las personas que trabajan en la planta deben tener la responsabilidad de mantener el área libre de derramamiento de líquidos y aceites. Usar las ventilaciones existentes. El peligro se origina en el momento en que los aprendices no tienen la precaución de manejo adecuado con estos materiales. en áreas adecuadas para esto. Cuando se recojan las muestras. conociendo sus propiedades y saber como usarlos. - Seguridad con la salud Prevención contra caídas. Algunas reglas de seguridad son las siguientes: Usar agentes químicos siempre conociendo los principios básicos. Leer las especificaciones cuidadosamente. bata y gafas.Cuando tenga puesto los elementos de bioseguridad tenga en cuenta las siguientes CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD: 5. ~ 94 ~ . entre otros. entre otros.

Use guantes cuando esté recolectando muestras. Recoja todos los objetos perdidos (herramientas. Lave bien las manos. Usar los equipos apropiados. entre otros) Limpie cualquier derrame de aceite y de grasas.Mantenga todas las áreas bien iluminadas y limpias. Luego de vaporizada la soda se pasa para otro reactor. Use el tapabocas y las gafas. No corra. El biorreactor queda listo y esterilizado. Se sube la temperatura a 190 a 200. ~ 95 ~ . El biorreactor queda listo para preparar los medios de cultivo. escaleras y mangueras. Prevención contra infecciones en general. Tome un baño y cámbiese de ropa antes de ir a casa. Adicionarle 30% de soda. Subir la temperatura de 190 a 200. Abrir la válvula de vapor en la chaqueta. Se le adiciona el bactericida según lo convenido. Esta temperatura se deja por 50 minutos y se activa el contador. Otras Recomendaciones Usar la lógica cuando se requiera mover o levantar objetos pesados. LIMPIEZA CON SODA DE LOS BIORREACTORES PARA INICIAR UNA PROPAGACIÓN        Enjuagar el propagador con agua. LIMPIEZA CON BACTERICIDA PARA LOS BIORREACTORES         Enjuagar el propagador con agua. Luego de vaporizada el bactericida se pasa para otro reactor. Luego se enjuaga con agua y el enjuagué se baja a la canal. Esta temperatura se deja por 30 minutos y se activa el contador. Se abre la válvula de vapor de la chaqueta.

 Verter agua por la parte superior para enjuagarlo por la tubería y el intercambiador de calor. Es nuestro único líquido común y el sólido pura mas ampliamente distribuido.LIMPIEZA EN LOS FERMENTADORES  Liquidar todo el fermentador. y comunicaciones. SISTEMA DE TRATAMIENTO BIOLÓGICO EN LOS VERTIMIENTOS DE LAS FERMENTACIONES INDUSTRIALES PLANTA DIDÁCTICA PTAR DE LODOS ACTIVOS ANÁLISIS FÍSICO QUÍMICO DEL AGUA En nuestro planeta.  Pasar la soda nueva mente al tanque de soda para recupérala.  Verter agua a presión por la parte superior del tanque para realizar el lavado por todas las paredes y el fondo.  Luego con el tanque de soda que está en un 5% de concentración se le mete soda por la parte superior del tanque.  Hacerlo por una hora hasta que el fermentador tenga nivel con soda para recircularlo por el intercambiador de calor y la tubería.  Luego se le abre la válvula de agua que está pegada la tubería para realizar lavado al intercambiador de calor y tubería de recirculación.  Verter agua al fermentador hasta que tape las paredes y aplicarle el bactericida y recircular por 30 minutos con vapor. SOLIDOS TOTALES ~ 96 ~ .  Bajar el bactericida a la canal y se avisa a la PTAR y queda listo. estando siempre presente en todas partes de la atmósfera suspendido en forma de partículas de hielo o sobre la superficie terrestre en diversos tipos de nieve y hielo.  Lavar las partes muertas del fermentador que son el agitador. el agua (H2O) es la única sustancia que coexiste abundantemente en los tres estados físicos posibles.  Medir con el equipo de gases que no tenga CO2.  La soda que no pasa que queda en el fondo se abre a la canal para neutralizarla y enviar a la PTAR. los mostradores.  Cuando el agua salga limpia se procede a mirar que el tanque este limpio esto demora más o menos una hora.  Abrir la válvula del drenaje hacia la canal para liquidarlo lo del fondo y se lleva a la PTAR.

PRINCIPIO: Las partículas suspendidas presentes en el agua. Estos son determinados y restados de los sólidos totales. pero éstos son.PRINCIPIO Los sólidos totales en el agua incluyen los sólidos suspendidos y los sólidos disueltos. Se ha demostrado que un equivalente de un ácido (H+) es igual al equivalente de una base (OH-). Los iones de Calcio y Magnesio o sus sales principalmente precipitan el jabón. Para determinarlos se toma una cantidad conocida de muestra de agua y se seca completamente en un horno a 100 ° C. DUREZA DEL AGUA Este método puede ser aplicado para todo tipo de agua de proceso. son removidas por filtración y el agua filtrada es secada en un horno. Acidez Ph La acidez de un agua es una medida de la cantidad total de substancias ácidas (H+) presentes en esa agua. También se hace así porque puede desconocerse cuáles son los álcalis presentes. expresados como partes por millón de carbonato de calcio equivalente. Los sólidos remanentes son pesados y determinados como sólidos totales en el agua. aguas de río etc. PRINCIPIO: Originalmente la dureza del agua fue definida como la capacidad del agua para precipitar el jabón. ALCALINIDAD Es una medida de la cantidad total de sustancias alcalinas (OH-) presentes en el agua y se expresan como partes por millón de CaCO3 equivalente. SOLIDOS TOTALES DISUELTOS Y SOLIDOS SUSPENDIDOS Este método es aplicable para el agua de proceso y para el agua de enfriamiento. equivalentes al CaCO3 que se reporte. al menos. Los sólidos remanentes después del secado son los sólidos disueltos. ~ 97 ~ . aguas subterráneas. La diferencia da los sólidos suspendidos totales. Este método es aplicado para el agua de proceso usada en la destilería.

sulfatos y ocasionalmente nitratos de calcio y magnesio . provocando que se consuma más jabón. PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES DE LODOS ACTIVOS POLITICAS DE ANALISIS DEL LABORATORIO La política de los análisis implementados. al producirse sales insolubles. la dureza es indeseable en algunos procesos. en la PTAR va sujeta a la normatividad internacional sobre el manejo de laboratorio y buenas prácticas de manipulación con la ayuda de equipos de última tecnología y capacitación de sus analistas garantizando la confiabilidad de los mismos. cloruros.DUREZA La DUREZA es una característica química del agua que esta determinada por el contenido de carbonatos.2% Estufa para calentar muestras PH metro Oximetro buretas AGV (NAOH) 0. tales como el lavado doméstico e industrial. A continuación se procede a nombrar los equipos y reactivos que se trabajan: EQUIPOS SOLUCIONES Y REACTIVOS Plancha de agitación Soluciones para análisis de alcalinidad (HCL) 0.05% ~ 98 ~ . bicarbonatos.

1 Algunos equipos del laboratorio de la PTAR ~ 99 ~ .Pipetas probetas Conos himmoff peras Balones volumétricos Agitador de madera Fig .

~ 100 ~ .

con los dispositivos de seguridad que se deberán usar. El operador de la planta debe estar bien familiarizado con los problemas de esta área. RUTA DE EVACUACIÓN Y RED CONTRA INCENDIO. rico en gas metano. También se tiene el rombo de seguridad extintores tipo ABC. que es fácilmente combustible. debido principalmente a la producción de biogás. con las debidas precauciones y con algunas reglas generales de seguridad industrial. y SOFKLAN. DUCHA DE EMERGENCIA.ASPECTOS DE SEGURIDAD Cuidados básicos La planta de tratamiento anaerobia es potencialmente el área de mayor peligrosidad en el tratamiento de aguas residuales. Fig 2. Extintores y ducha de emergencia ~ 101 ~ .

audiometría. úrea.Elementos básicos de protección personal de los operarios Los operadores deben usar gafas de protección y máscaras para no inhalar los vapores de los componentes químicos Guantes de látex para manipulación de reactivos Guantes antiácidos Botas antideslizantes Traje de dos piezas antiácidos Jabón desinfectante y alcohol Además se cuentan con extintores de tipo ABC y sofkaflan También los operarios cuentan con un control anual de exámenes generales que les realiza la empresa como: aspirometria. ácido fosfórico. hipoclorito de Na. RIESGOS QUIMICOS Manipulación de soda caustica. reactivos. y chequeos medico generales. optometría. Riesgos fisicoquímicos y biológicos a los que están expuestos los operarios de la PTAR.homgos DISEÑO DE PLANTA ~ 102 ~ . RIESGOS FISICOS Manipulación de herramientas. Calor ambiental Motores en movimiento RIESGOS BILOGICOS Manipulación de lodos aerobios y anaerobios y vapores.

80 metros Tanques de alimentación: la planta consta de dos tanques de éste tipo y tienen la función de acumular las aguas residuales provenientes del centro de Biotecnología Industrial. tanque de sedimentación: tiene como función principal sedimentar las sustancias que tienen una densidad mayor que la del agua. tanque de lodos activados: posee una bomba de aire que satura el agua residual de oxígeno y de ésta forma. tanque de recibo: éste tanque es el receptor del agua tratada. se llevan a cabo análisis continuos del proceso que permiten llevar un control del funcionamiento y trabajo tanto de la planta como de los agentes biológicos que participan en el tratamiento aplicado al agua residual originada en el SENA.   Altura: 2 metros Ancho:1. De acuerdo a los tipos de microorganismos que tienen lugar en el tratamiento del agua residual así mismo se establecen y se identifican varias clases de plantas con reactores que mantienen las condiciones que permiten la propagación de los mismos (reactores aerobios y anaerobios).      ~ 103 ~ . Para lograr la adecuada aplicación de las técnicas de Biorremediación. de lugar a un filtro microbiano de descontaminación biológica y como resultado final del tratamiento se obtiene lodos activados sedimentados. El rendimiento o la capacidad de la planta para descontaminar el agua están estimados en un 85-95%.

T.R del centro de Biotecnología Industrial como componente innovador de de nuevos procesos sistematizados a escalas pilotos de los tratamientos biológicos y biotecnológicos. Sistema de tratamientos biológicos para residuos sólidos COMPOSTAJE Es un proceso controlado y acelerado de descomposición de las partes orgánicas de los residuos totalmente aerobio. ~ 104 ~ .A. por tal motivo muestra uno de sus nuevos proyectos la planta de tratamientos de aguas residuales automatizada con una capacidad de 200 Lts de trabajo. dando lugar a un producto estable llamado “compost”.La P. Prototipo de planta piloto automatizada 200 Lts.

Permitir visitas técnicas para desarrollar por observación las competencias.Imagen de apoyo de procesos de compostaje 6. desde el sector productivo. FASES DEL PROYECTO Y SUS ACTIVIDADES ~ 105 ~ . 7. 8. 6. Incluir Materias Primas y cepas Industriales en el marco de la evaluación de los Bioprocesos. Transferencia y acompañamiento hacia el proyecto objeto de la Investigación Aplicada. Evaluación de las conclusiones y aporte de recomendaciones hacia el Programa de Formación. DISEÑO METODOLÓGICO 5.

C 3 4.5 24 1 2 3 4 1.C C.3x10e8 hrs 02:15 am 2. RESULTADOS MEDIO # 01 ENSAYO pH inicil BRIX inicial pH final Brix final C.C C.FASES DEL PROYECTO Análisis y Planeaciòn ACTIVIDADES DEL PROYECTO: Cronograma ( En Meses) IDENTIFICAR NECESIDADES DE ALTERNATIVAS NUTRICIONALES PARA LA ALIMENTACIÒN ANIMAL POR PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS Y ACCIÓN MICROBIANA.C C. QUÍMICA Y MICROBIOLÓGICA VALORANDO LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR A PARTIR DE DIFERENTES SUSTRATOS A ESCALA DE LABORATORIO SELECCIONAR LAS MATERIAS PRIMAS. 2.C C. ANALIZAR LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÒN FÌSICA.5 Ejecución EJECUTAR LA OPERACIÓN.Lodos Activados 200 L Planta Piloto de Compostaje.1x10e8 hrs 11:00 am 1.C C. INSUMOS. EQUIPOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL Y SEGUIMIENTO DE PARÁMETROS DE FERMENTACIÓN SEGÚN INSTRUCCIONES A NIVEL DE LABORATORIO EN LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR.5 Evaluación VALIDAR LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÌNA UNICELULAR DE ACUERDO A LAS MATERIAS PRIMAS SELECCIONADAS Y CONDICIONES OPERATIVAS DE FERMENTACIÓN REPORTADAS POR EL LABORATORIO Y LA PLANTA PILOTO.C 2 4. 2 AMBIENTES DE FORMACIÓN REQUERIDOS o o o o Laboratorio de Biotecnología Industrial Planta Piloto de Fermentaciones 20 L Planta Piloto de Tratamiento de Agua Residual. QUÌMICA Y MICROBIOLÒGICA VALORANDO LA PRODUCCIÒN BIOTECNOLÒGICA DE PROTEÌNA UNICELULAR Y SUS VERTIMIENTOS Y SUBPRODUCTOS SÒLIDOS . 9. 7.9x10e8 hrs 07:00 am 3.5x10e8 hrs 15:00 ~ 106 ~ .C C.3x10e8 hrs 14:45 1 2 3 4 1. TANTO A NIVEL DE LABORATORIO Y PLANTA PILOTO. VALORAR LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR COMO SUPLEMENTO ALIMENTICIO ANIMAL Y REMEDIAR POR PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS LOS VERTIMIENTOS Y SUBPRODUCTOS SÓLIDOS PROVENIENTES DEL BIOPROCESO. ANALIZAR LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÓN FÍSICA.5 24 ENSAYO pH inicil BRIX inicial pH final Brix final C.2x10e8 hrs 01:45 am 9x10e7 hrs 06:45 am 2.7x10e8 hrs 10:45 am 2. CUMPLIENDO CON EL ESCALADO DE LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA.

45 33 ENSAYO 3 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C ENSAYO 2 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C 5 6 7 8 9 2.1x10e8 hrs 22:04 2.5x10e8 hrs 02:04 2.5x10e8 hrs 18:45 hrs 23:45 hrs 04:25 am 08:26 am 12:25 pm C.C C.1x10e8 hrs 1 21:40 2 2.C C.C C.45 33 1.C C.9x10e8 hrs 1.3x10e8 hrs 01:46 3.C C.0x10e8 hrs 09:46 1.210e8 3.C C.2x10e8 5.C C.C C.C C.C C.7x10e8 hrs 05:46 4.7x10e8 3 05:40 4.6x108 hrs 12:30pm 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 t (h) lnx MEDIO # 03 ENSAYO 1 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C hrs hrs 13:40 C.9x10e8 hrs 01:40 hrs 3x10e8 hrs 09:46 3.C C.3x10e8 4 09:40 5 2.C C.3x10e8 ~ 107 ~ .C C.5x10e8 hrs 08:30am 1.C C.7x10e8 3.C 5 6 7 8 9 2.C C.C 1 2 3 4 5 se monto hrs 22:04 4.8x10e8 hrs 19:00 7.8x10e8 hrs 22:04 1.C 4 5 1 2 3 se monto hrs 21:46 4.9x10e8 7.C C.2x10e8 hrs 23:00 6x10e8 hrs 04:28 am 1.8x10e8 hrs 06:04 3.45 33 se monto hrs 21:40 4.C C.C C.C C.7x10e8 5.C.

permitiendo un rápido crecimiento de nuestro ~ 108 ~ . al buen uso de los microorganismos y sus características se puede crear una nueva fuente de proteínas para consumo animal.C C.C C.  Gracias a los residuos industriales.  Por medio de la reutilización de los desechos industriales ayudamos a preservar el medio ambiente y bajar el índice de contaminación.C C.C C.c (g/l) 8.C C.78 h y la velocidad máxima de de crecimiento 1.8x10e8 hrs 6 17:48 7 8 9 hrs 02:04 C.C C.  La producción biotecnológica de proteína unicelular para consumo animal presenta mayor factibilidad utilizando subproductos agroindustriales como medios alternativos.C C.C 6 7x10e8 hrs 17:40 7 8 9 C.3x10e8 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 t (h) c. OBSERVACIONES  Al realizar los estudios hablados anteriormente nos hemos dado cuenta de que se puede producir un producto novedoso y necesario que pueda cubrir una gran demanda industrial y ganadera a partir de residuos industriales.  De acuerdo a los estudios realizados este proyecto es viable y rentable.135 cell/h. los cuales son: El Micelio fúngico debido a su tiempo de duplicación máxima 2.C C.C 6 7 8 9 1.C 13:46 1.C.C C.

las medidas que se deben tomar en caso de contaminación. posteriormente enfatizábamos sobre problemas existentes.38 h y la Porcinaza presenta un tiempo de duplicación 5. los agentes contaminantes que la llegasen a afectar en un proceso de producción.. colegios aledaños y demás… Santa En el desarrollo de esta parte de nuestro proyecto de formación primero recibimos gran cantidad de material educativo. siendo estos tiempos de duplicación muy elevados para los ensayos productivos de biomasa celular. Iniciamos empleando los conocimientos adquiridos. cual utilizaríamos. DIVULGACIÓN En el proceso de divulgación los aprendices del TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLOGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA. Pasto. Martha. convocatoria de divulgación de proyectos y campaña masiva de materia orgánica (Se adjuntan los videos de sustentación como anexo) Se recibieron también visitas de otros centros de formación SENA de Cartagena. muchos mas lentos con la Saccharomyce cerevisiae. desde el reconocimiento de una levadura. Dirección Nacional.microorganismo Cándida Utilis utilizando como sustrato alternito de este medio. 9. posteriormente se logró lo que se quería. ~ 109 ~ . comparando los medios alternativos. hago referencia a las charlas y/o clases dictadas por los diferentes instructores del área de biotecnología encabezadas por el Ingeniero Biotecnológico Pedro de Jesús Miranda Villamizar. Cali.  Las características como densidades de estos medios son factores que afectan éstas. poco a poco. se realizaban foros donde poníamos a prueba los conocimientos adquiridos y dando nuestros primeros pasos en este nuevo mundo para nosotros. esa consciencia que tanto requeríamos fue llegando y con esta los resultados que todos anhelaban. hasta conocer las condiciones óptimas para su crecimiento. participaron activamente en los eventos de promoción del programa. Bogotá. los niveles de estrés que esta podría tolerar.71 h. que parámetros tendríamos en cuenta y como sería su óptimo crecimiento. El Bagacillo presenta su tiempo de duplicación máxima 3. tales como. Inicialmente debimos realizar una caracterización de nuestra levadura. desde crear esa sensibilidad que algunos necesitaban para hacerles entender que nuestro proyecto de formación era y es diferente a muchos de los cuales el SENA venía manejando. Ya lo que respecta al área técnica todo fue cambiando. el día de la ciencia. etc.

entre las cuales encontramos. micelio fúngico.Realizamos listas de chequeo. Una vez se lleva a cabo la purificación de la cepa y se ha sembrado en la caja de petra por agotamiento. donde utilizamos las diferentes materias primas que hemos escogido para de esta manera determinar con cuál de estos subproductos iniciaremos la fermentación. beaker. brix. en la medida de lo posible claro está. tubos de ensayo hasta azas microbiológicas. Plate count o el que se requiriera en su momento. debimos aprender a distinguir cada uno de los materiales existentes en el laboratorio. cajas de petri. todo con el fin de garantizar el correcto uso tanto de materiales y reactivos de nuestro laboratorio como también un casi perfecto desarrollo de nuestro proceso. hidrólisis acida o básica. Se debe previamente enjuagar con agua destilada todos los materiales a utilizar (en este caso de purificación. etc. previamente se realizaron montajes a escala 3000ml para ~ 110 ~ . Previamente se ha realizado una caracterización de dicha materia prima. vinaza. todo esto se realiza con los mecheros correspondientes. Se realizan diferentes análisis fisicoquímicos como acidez. probetas y Erlenmeyer). Una vez tenemos nuestra cepa podemos iniciar con nuestro proyecto como tal. ATR. alcohol al 70% y demás cuidados que se deben tener para un correcto desenvolvimiento. luego de esto se llevan a un horno de esterilización donde estarán 3 horas a 120ºC. Para lograr este proceso de purificación. pipetas. ésta varia en los diferentes equipos de trabajos que existen en el laboratorio de biotecnología industrial. procedimientos patrones de operación. utilizamos la levadura Saccharomyces cerevisiae. teniendo claro los conceptos adquiridos sobre aislamiento y purificación de cepas dictados por los instructores en su debido momento sin olvidar los balances de materia que se debían emplear para la correcta formulación del medio de cultivo. hicimos aislamiento de la cepa. esto nos asegura que su contenido este aislado del ambiente). ya sea PDA. Después de pasadas las 48 horas se extraen las cajas de petriq de la incubadora y se pasa a realizar un conteo de colonias y posteriormente realizar una tinción de gram donde nos aseguraremos que nuestra cepa esté libre de contaminantes. donde existen unas lámparas de rayos ultravioleta. bagazo. etc. miel b. se dejan secar y posteriormente se envuelven con papel kraft. desde cajas de petri. con el fin de purificarla y de esta manera garantizar unos niveles de asepsia bastante altos en nuestro proceso de fermentación. como siempre promoviendo la asepsia del lugar de trabajo. ésta a su vez se lleva hacia un horno de incubación donde la dejaremos de 24 a 48 horas dependiendo de su crecimiento (la caja de petriq debe estar sellada con emboplast. Erlenmeyer. bagacillo. donde esta luz promueve la desaparición de las bacterias que puedan estar presentes en dicha zona. tubos de ensayo. con esto se busca mejorar la materia prima para que en nuestro proceso de fermentación los resultados sean mucho mas óptimos. Posteriormente se preparan los medios de cultivo y/o trabajo implementando dichas materias primas a diferentes concentraciones.. Previamente se ha realizado una esterilización en la zona estéril que es donde se realizará la purificación de la cepa. porcinaza. En lo que respecta a la cepa.

queriendo de esta manera llevarla a una escala mayor para de esta forma tratar las aguas del centro y por qué no. acidez volátil. en el Centro De Biotecnología Industrial. de esta forma también podemos dar una solución viable a los problemas que hoy por hoy están dando las industrias. gran parte de los residuos líquidos han sido enviados a la PTAR de lodos activados y otra pequeña para compostaje. el medio con mayor crecimiento celular. donde se realizan pruebas al ambiente como pruebas en superficie para tener una idea de la contaminación existente en dicho ambiente de aprendizaje y de esta manera determinar si se debe ya sea mejorar la limpieza del laboratorio o recurrir a otros métodos de limpieza y desinfección de ambiente y superficie. entre otros. es por esto que estamos nosotros. Cabe denotar que durante nuestro proceso de fermentación se generan tanto residuos líquidos y sólidos que son perjudiciales para el medio ambiente y estaríamos en vez de minimizar dicha problemática. donde buscamos dar una solución viable a los residuos que por lo pronto generamos durante nuestro proceso de fermentación. minimizar y/o mitigar el impacto ambiental que se pueda generar. conteo celular. nos basamos en una serie de análisis que se realizan en el laboratorio. y donde los residuos sólidos si van directamente a compost. ATR. re circular esas aguas ya utilizadas para los oficios varios y de esta ~ 111 ~ . no se debe dejar nada a la deriva pues esto implicaría una contaminación que más adelante desencadenaría una pérdida total o parcial en nuestro y proceso y esto conllevaría a perdida de dinero por los reactivos utilizados en el acondicionamiento del medio como también del tiempo dispensado en dicha labor.determinar cuál sería el medio con mayor rendimiento es decir. Los análisis que se realizan durante el proceso de fermentación son. es por esto que también se montó una PTAR a escala piloto de lodos activados donde se quería encontrar un optimo desempeño de la misma. Los controles de contaminación que se hacen en el laboratorio de biotecnología industrial son periódicos. brix. estaríamos haciendo lo contrario que sería aumentar el impacto para las descargas que se realizan. Para determinar ello. que por querer ser más productivos se están convirtiendo en un gran problema para el medio ambiente. ya que se debe controlar el proceso de fermentación de principio a fin pues siempre buscamos que la asepsia durante nuestro proceso sea total. para mitigar dichos impactos. Dichos parámetros se controlan cada 2 horas con el ánimo de obtener los suficientes datos para al final tener un resultado más aproximado a la realidad. se realizaron dos jornadas de saneamiento básico con el fin de determinar si el centro estaba cumpliendo o no con las exigencias de la norma que dictamina un límite permisible de descargas hacia el alcantarillado. para esto tenemos un plan de contingencia y este plan es: BIORREMEDIACIÓN (SISTEMA DE TRATAMIENTO BIOLÓGICO DE LOS VERTIMIENTOS EN LAS FERMENTACIONES INDUSTRIALES) Este es nuestro segundo proyecto de aprendizaje. pH. de no serlo estaríamos expuestos a sanciones por parte de las entidades pertinentes. por medio de estos procesos se quiere regular. AR.

Por otra parte. Supervisores de Plantas de Fermentación. etc. Previamente en laboratorio se realizaron pruebas de siembra del hongo trichoderma buscando la aceleración en el proceso de compostaje y optimizar obviamente su rendimiento como tal. en el área de compostaje se llevo a cabo el tratamiento de residuos sólidos producidos en el laboratorio de biotecnología industrial como también los desechos producidos por la cafetería del centro como de las casas de algunos aprendices. sólidos Sedimentables. se debieron tener en cuenta parámetros para dicho proceso. como la relación carbono nitrógeno. pero no son imposibles de realizar si se tienen en cuenta todas las normas de bioseguridad pertinentes y manejando un ambiente en la medida de lo posible estéril o lo más aséptico posible para de esta manera no alterar los resultados de los análisis que se realicen en un proceso determinado. entre los cuales se encuentran. donde se busco la realización de la misma y dejarla a punto para que todo el grupo de alumnos pudieran tener una idea más cercana a la realidad de lo que es una planta como estas y realizar obviamente los análisis pertinentes en dicha labor.. aprendices y comunidad SENA. se realizaron campañas de recolección de materia orgánica con el fin de obtener la suficiente cantidad para poder dar inicio a nuestro proceso de compostaje. de temperatura y de humedad. En la PTAR el diseño estuvo a cargo del instructor Pedro Miranda y de algunos aprendices del área. ~ 112 ~ . acidez. dureza. control de pH. la cepa a inocular y las variables de proceso previamente establecidas. sólidos totales. Sector agrícola. Para finalizar podemos inferir que estos proyectos ya que son nuevos para nosotros tienen algo de dificultad. ALCANCE Beneficiarios del proyecto Ingenieros. sector industrial. una vez obtenido ese conocimiento se buscó tener un plan de manejo óptimo en cuanto a la producción de proteína unicelular como la Biorremediación de los residuos producidos. DBO5. Dichos parámetros fueron controlados constantemente con la finalidad de minimizar el impacto a la comunidad circundante como también evitar la aparición de vectores que son indeseables en nuestro proceso. IMPACTO SOCIAL: Mejorar la calidad de vida.manera contribuir el ahorro de dineros que bien pudieren ser invertidos en otras obras que nos beneficien. sector pecuario. alcalinidad.

ECONÓMICO: Optimización de las materias primas. equipos e insumos para la producción. manejo sostenible de los subproductos. ~ 113 ~ . AMBIENTAL: Disminución de las emisiones contaminantes. tratamientos biológicos para el tratamiento de los residuos sólidos y líquidos. TECNOLÓGICO: Transferencia tecnológica de los procesos y Bioprocesos en la producción biotecnológica para las empresas.

A Candelaria Asunto: Solicitud de materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con numero de ficha de caracterización 87051. solicito comedidamente su colaboración con el aporte de las siguientes materias primas: Vinaza concentrada. Información de contacto: Ingeniero Ernesto Mendoza Instructor Área de biotecnología Teléfono: 3156779455 ~ 114 ~ . febrero 28 del 2011 Ingeniera Mayagüez S.10. Miel B y bagacillo esto con el propósito de complementar los resultados del proyecto de formación: producción de proteína unicelular para el consumo animal. ANEXOS CARTA SOLICITUD DE MATERIA PRIMACARTA SOLICITUD DE MATERIA PRIMA REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira. proyecto que adelanta que hace parte del proceso de formación de estos destacados aprendices.

com.Agradezco la atención prestada. Agosto 2 del 2011 Ingeniera Elizabeth Castillo Ventas División Coproductos ecastillo@sucromiles. Cordialmente.co Sucromiles 4310744 Recta Cali – Palmira Km 18 Asunto: Solicitud de Materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de Formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con Número de ficha de caracterización 87051. ~ 115 ~ . solicito comedidamente su colaboración con el aporte de la siguiente materia prima: 1 kilo de micelio fúngico 5 galones de vinaza Esto con el propósito de complementar los resultados del Proyecto de Formación: Producción de Proteína Unicelular con el objetivo de suplemento proteico el consumo animal por procesos biotecnológicos. Ernesto Josué Mendoza REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira.

Agosto 2 del 2011 Ingeniero Julián Parra Jefe Destilería Providencia japarra@ingprovidencia.Información de contacto: Ing. Asunto: Solicitud de Materia prima Cordial Saludo: ~ 116 ~ . Pedro Miranda Villamizar Instructor Área de Biotecnología Teléfono: 3106796599 pjmiranda@misena.co Agradezco la atención prestada.edu.D.com Ingenio Providencia E.S. REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira.

co Agradezco la atención prestada. febrero 28 del 2011 ~ 117 ~ . solicito comedidamente su colaboración con el aporte de la siguiente materia prima: 5 galones de melaza 5 galones de Miel B 10 Kg de bagacillo 5 Kg de Lodos orgánicos del Decanter Esto con el propósito de complementar los resultados del Proyecto de Formación: Producción de Proteína Unicelular con el objetivo de suplemento proteico el consumo animal por procesos biotecnológicos. Información de contacto: Ing.Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de Formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con Número de ficha de caracterización 87051.edu. REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira. Pedro Miranda Villamizar Instructor Área de Biotecnología Teléfono: 3106796599 pjmiranda@misena.

Cordialmente. proyecto que adelanta que hace parte del proceso de formación de estos destacados aprendices. Ernesto Josué Mendoza REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira. Información de contacto: Ingeniero Ernesto Mendoza Instructor Área de biotecnología Teléfono: 3156779455 Agradezco la atención prestada.A Candelaria Asunto: Solicitud de materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con numero de ficha de caracterización 87051. Agosto 2 del 2011 ~ 118 ~ . Miel B y bagacillo esto con el propósito de complementar los resultados del proyecto de formación: producción de proteína unicelular para el consumo animal.Ingeniera Mayagüez S. solicito comedidamente su colaboración con el aporte de las siguientes materias primas: Vinaza concentrada.

com. solicito comedidamente su colaboración con el aporte de la siguiente materia prima: 1 kilo de micelio fúngico 5 galones de vinaza Esto con el propósito de complementar los resultados del Proyecto de Formación: Producción de Proteína Unicelular con el objetivo de suplemento proteico el consumo animal por procesos biotecnológicos. Información de contacto: Ing.Ingeniera Elizabeth Castillo Ventas División Coproductos ecastillo@sucromiles.co Sucromiles 4310744 Recta Cali – Palmira Km 18 Asunto: Solicitud de Materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de Formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con Número de ficha de caracterización 87051. Pedro Miranda Villamizar Instructor Área de Biotecnología Teléfono: 3106796599 pjmiranda@misena.edu.co Agradezco la atención prestada. REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD ~ 119 ~ .

Agosto 2 del 2011 Ingeniero Julián Parra Jefe Destilería Providencia japarra@ingprovidencia. solicito comedidamente su colaboración con el aporte de la siguiente materia prima: 5 galones de melaza 5 galones de Miel B 10 Kg de bagacillo 5 Kg de Lodos orgánicos del Decanter Esto con el propósito de complementar los resultados del Proyecto de Formación: Producción de Proteína Unicelular con el objetivo de suplemento proteico el consumo animal por procesos biotecnológicos. ~ 120 ~ .D.com Ingenio Providencia E.co Agradezco la atención prestada.Palmira. Información de contacto: Ing.S. Pedro Miranda Villamizar Instructor Área de Biotecnología Teléfono: 3106796599 pjmiranda@misena.edu. Asunto: Solicitud de Materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de Formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con Número de ficha de caracterización 87051.

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