UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTN

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y FORMALES

DE QUIMICA CURSO INSTRUMENTAL

ESCUELA PROFESIONAL

ALUMNOS: ALVARADO ORDOO EDGAR MAURO

PROFESORA: CORINA VERA

TEMA :
CROMATOGRAFIA DE GAS DETERM1NACION DE ETANOL EN UNA SOLUCION ACUOSA

AREQUIPA-PER

2011

CROMATOGRAFIA DE GAS DETERM1NACION DE ETANOL EN UNA SOLUCION ACUOSA I.OBJETIVO Determinar El contenido de etanol en una solucin acuosa usando n-propanol como estndar interno II.INTRODUCCIN El anlisis de soluciones alcohlicas ha llegado a ser importante debido a las implicaciones de de accidentes de trafico, lo cual requiere la estimacin de pequeas cantidades de etanol en sangre y en orina. Este experimento demuestra el mtodo mas frecuentemente usado GLC usando un estndar interno. Antes del advenimiento de CG el mtodo mas frecuentemente usado implicaba la oxidacin del cromato por el etanol. El mtodo mas satisfactorio de anlisis cuantitativo en GC implica la calibracin de la respuesta del detector para el compuesto de inters analtico contra un compuesto de referencia. Esta tcnica de estandarizacin interna implica la adicin de una cantidad conocida de un compuesto de referencia a las soluciones estndar y de l muestra. El factor de respuesta del detector (Drf) de un componente analito en relacin al estndar interno (IS) puede ser evaluado corriendo una muestra que ontiene el estndar interno y cada uno de los componentes de la muestra todo en concentraciones conocidas El factor de respuesta para un compuesto A puede ser calculado como sigue Drf de A= rea de pico de Al rea de pico de IS x Cantidad de lS/cantidad de A Similarmente el factor de respuesta de otros componentes en la mezcla de calibracin en relacin al estndar interno puede tambin ser calculado. Una cantidad medida exactamente de un estandar interno es adicionada a la muestra de anlisis y la mezcla es corrida a travs del cromatgrafo. La cantidad de A pede ser expresado como: Cantidad de A=Area de pico A/rea de pico de 15 x cantidad de IS/Drf de A Asi por sustitucin en esta ecuacin para las reas de pico a partir del cromatograma los factores de respuesta relativos, derivados a partir del anlisis de calibracin y la concentracin del estndar interno adicionado a la muestra, la concentracin de los componentes de la muestra puede ser calculada. Ya que este mtodo implica relaciones de reas de pico mas que valores absolutos se notara que la precisin del anlisis no es dependiente de la inyeccin de una cantidad de muestra conocida exactamente . Sin embargo la precisin depende de la medicin exacta del rea de pico .El ensayo y cuantificacin por el estndar interno es a menudo el mtodo preferido como el que lleva un recuento de la respuesta del componente variable y elimina errores potenciales debido a la variacin en la inyeccin de la muestra. Las soluciones estndar de 80 y 200mg% son usados para confirmar la linealidad de respuesta por encima de este rango de concentracin

IIIMATERIALES Y EQUIPO - Soluciones estndar: 80 y 200mg% de solucin acuosa de etanol; 25mg% de npropanol (estndar interno) - Muestra de orina - Columna: PEG400 - Cromatgrafo de gas con FID - Integrador Computacional MTODO Para el cromatgrafo de gas GC94 Cambridge las instrucciones del instrumento son como siguen - Gas carrier o gas transportador nitrgeno: l0psi (lpsi=6.9kPa)(20-3Oml/min.) - Hidrogeno:l5psi - Aire:20psi - Temperatura De Columna:90C - Temperatura Del Puerto De Inyeccin: 175 oc - Temperatura Del Detector:200 C - Rango! Atenuacin: 100 En un pequeo frasco pipetear cuidadosamente 2m1 de etanol a 8Omg y 5 mililitros de upropanol. Tapar el frasco y luego mezclar vigorosamente. Inyectar 1 ul. El cromatograma consistir de 3 picos debido a el etanol (1), n-propanol (2) y agua (3). La ultima muestra tendr la mas baja intensidad de seal. Repetir la anterior secuencia usando 200mg% de etanol. Para cada anlisis calcular los factores de respuesta para el etanol en respuesta a soluciones estndar del n-propanol y obtener un valor promedio. Repetir el anterior procedimiento usando 2m1 de orina simulada o de sangre y 5ml de solucin de n-propanol. Las sustitucin de los valores apropiados dentro de la ecuacin anterior dar el contenido de etanol en la muestra de orina o sangre. En la practica cada solucin (8Omg%, 200 mg%, ser analizada en triplicado para establecer la precisin y exactitud del anlisis.

USO DEL EQUIPO CROMATGRAFO DE GASES PERKINELMER AUTO SYSTEM. Partes - Detector de Ionizacin a la Llama ( E ID). - Gas portador: N2 - Columna empacada. Especificaciones de la columna empacada: (variablej Fase estacionaria: Pelcula lquIda: 5% Carbowax 20M. Soporte_slido: Chromosorb G, AW DMCS 80/100 ALLTECH #801 1/2 La materia prima para la mayora de los soportes de cromatografa de gases es la diatomita, tambin denominada tierra de diatomceas. Chromosorb G: para separar compuestos pcares. Por su baja rea superficial y sus caractersticas de dureza y resistencia a la manipulacin es un posible y adecuado sustituto del Chromosorb W. Debido a su menor superficie y densidad elevada, El Chromosorb G se utiliza con una impregnacin ms baja de la fase lquida. Una carga de 5% de fase lquida sobre el Chromosorb G corresponde al 12% en el Chromosorb W. Instrucciones para el manejo del Cromatgrafo. 1. Abrir las bombonas de gases de nitrgeno ,hidrogeno ,aire. 2. Encender el aparato en el interruptor N. 3. temperatura del detector, 200 C, para ello presionar la tecla (DETEC CONTROL),asignar la temperatura y (ENTER). 4. Asignar la temperatura de trabajo del puerto de inyeccin, tambin 200 C, para elIo,presionar la tecla (INYECT PROGRAM), asignar la temperatura y (ENTER). 5. Asignar la temperatura de la columna a 60C (temperatura inicial) para ello presionar la tecla (OVEN PROGRAM), asignar la temperatura y (ENTER).

6. Despus de asignar las temperaturas, encender el detector. Para ello las vlvulas de H2 y aire deben estar cerrada luego abrir la vlvula de H2 en el sentido contrario a las agujas del reloj.. Encender el detector para ello se observa el voltaje del detector presionando la tecla (AUTOZERO), (1) y (ENTER). Seguidamente rota en el sentido contrario a las aquiadeloj la vlvula de aire poco a poco hasta que escuches una pequea explosin la cual indica que el detector esta encendido. Para verificar que el detector esta encendido debes observar si existe voltaje en el detector y colocando una pipeta en la salida del mismo (si el vidrio esta empaado de vapor de agua, el detector est encendido). Si no, vuelve a intentar el procedimiento para encenderlo. 7. Si se requiere programacin de temperatura para obtener una mejor resolucin de lasbandas cromatogrficas: Asignar la temperatura 1 con la tecla (OVEN TEM1) y luego (ENTER). Asignar el tiempo 1 con la tecla (TIME) y luego (ENTER). Asignar la rarnpa de calentamiento con la tecla (RATE) a un valor de 42C/mm y (ENTER). Asignar la temperatura 2 con la tecla (OVEN program) y luego (ENTER). Asignar el tiempo 2 con la tecla (TIME) y luego (ENTER). 8. Para que la programacin de temperatura se ejecute despus de a inyeccin debes presionar la tecla (RUN). 9. Al terminar la jornada de trabajo: Apagar el detector para ello presionar las teclas (AUTOZERO), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura del detector para ello presionar las teclas (DETECT CONTROL), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura del puerto de inyeccin para ello presionar las teclas (INYECT PROGRAM), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura de la columna para ello presionar las teclas (OVEN PROGRAM), (0) Y (ENTER). Esperar 15 mm hasta que la temperatura del horno( columna) halla disminuido hasta 35C. Cerrar las bombonas de aire, H2, y N2,. Cerrar las perillas P y S de los flujos de gases H2 y aire que entran al detector. Apaga el instrumental en el suiche N.(on-OFF)