Protocolo de Electroporación

1. Se tomaron 50 µL de células electrocompetentes (E. coli DH5α) y se le adicionaron 5 µL de

plásmido pTWIN1. Se resuspendió la mezcla suavemente.
2. Se colocó la mezcla en la ranura de la cubeta de electroporación (guardada a -20°C).
3. Se colocó la cubeta en el electroporador y se pulsó 2 veces a 1,500 V.
4. Se retiró la cubeta e inmediatamente se adicionó medio LB, se resuspendió suavemente.
5. Se transfirió la suspensión a un microtubo de 2 mL y se incubó a 37 °C con agitación de 200
rpm durante 1.5 horas.
6. Se centrifugó a 8,000 rpm por 4 min y se eliminaron 500 µL de sobrenadante.
7. Se resuspendió el sobrenadante restante con el pellet y se sembró una alícuota de 200 µL
sobre la superficie de una placa de LB agar embebida con ampicilina (100 µg/mL).