Péptido C
Ya
Péptido C (CLIA)
Información para pedidos
N.º de catálogo Presentación
Péptido C 111 2 × 50 ensayos
Péptido C112 2 × 100 ensayos
Uso previsto
El ensayo de péptido C serie CL es un inmunoensayo de
quimioluminiscencia (CLIA) para la determinación
cuantitativa de péptido C (péptido C) en el suero humano,
plasma u orina.
Resumen
El péptido C, también conocido como el péptido de enlace,
es un polipéptido compuesto por 31 aminoácidos con un
peso molecular de 3021 Da. El péptido C cumple una función
importante para la conservación de la estructura de dos
cadenas y la formación de dos enlaces de disulfuro en la
molécula de la proinsulina, que se almacena en los gránulos
de segregación de las células β pancreáticas. El péptido C y
la insulina se segregan en cantidades equimolares y se
liberan en la circulación a través de la vena porta.
Inicialmente, se creía que el péptido C estaba
biológicamente inactivo, solo servía para juzgar la función
de las células β del islote en combinación con la insulina1-4.
El péptido C no sufre una extracción hepática importante,
pero se elimina a través del sistema renal, por lo que
permanece más tiempo en la circulación periférica. Esto se
traduce en una semivida mayor (> 30 minutos) y una menor
fluctuación del péptido C comparado con la insulina
(semivida de 5 minutos). Por tanto, al medir la
concentración de péptido C, puede calcularse el índice de
secreción de insulina pancreática con mayor precisión que
con la insulina. No se produjo reacción inmunogénica
cruzada entre la insulina y el péptido C por sus diferentes
estructuras. Por tanto, la concentración de péptido C no está
sujeta a las interferencias de anticuerpos de insulina
inducidos por el tratamiento con insulina. En la evaluación
de las hormonas endógenas, el péptido C es más importante
que la insulina en relevancia clínica5, 6.
El péptido C se usa como un indicador de la función de las
células β en el ser humano con diversas patologías, como
diabetes tipo 1, por lo que sirve de ayuda para el diagnóstico
diferencial de hipoglucemia, y para la autoadministración de
la insulina. Se espera un nivel bajo de péptido C si la
segregación de insulina disminuye, como en la diabetes
insulinodependiente (diabetes de tipo 1, diabetes
autoinmunitaria latente de adultos (LADA))7. Se pueden
observar niveles altos de péptido C cuando la actividad de
las células β aumenta por patologías como hiperinsulinia e
insulinomas. La proporción molar de insulina/péptido C se
considera como una estimación de la depuración hepática,
si hay insuficiencia hepática, el metabolismo de la insulina
se verá afectado, lo que provocará una proporción
inusualmente alta de insulina en la circulación periférica8.
La determinación de la eliminación del péptido C en la orina
obtenida durante 24 horas es otra opción para controlar la
segregación media de insulina de las células β. La
concentración en orina del péptido C es un indicador muy
importante para evaluar la segregación de insulina
endógena. El péptido C en la sangre solo refleja niveles
momentáneos de péptido C, mientras que el péptido C en
orina podría reflejar la concentración media de péptido C en
sangre en un plazo de tiempo, por lo que resulta más
P/N: 046-006255-00 (2.0)
indicado extraer una muestra de orina y no de sangre.
que apenas hay efectos negativos de la proinsulina en orina,
el péptido C no provocó interferencia entre las diabetes de
tipo 1 y tipo 2, por tanto, el péptido C en orina puede reflejar
mejor la función segregadora de las células β4, 5.
Principio del ensayo
El ensayo de péptido C serie CL es un ensayo
inmunoenzimático de dos lugares para determinar la
concentración de péptido C.
En el primer paso, las micropartículas paramagnéticas de
muestra recubiertas con anticuerpo monoclonal anti-péptido C
(ratón) y anticuerpo monoclonal anti-péptido C conjugado a la
fosfatasa alcalina (ratón) se añaden a una cubeta de reacción.
Tras la incubación, el péptido C de la muestra se une a las
micropartículas recubiertas de anticuerpo anti-péptido C y al
anticuerpo anti-péptido C conjugado a la fosfatasa alcalina para
formar un complejo de sándwich. Las micropartículas se
capturan magnéticamente y las sustancias sin unir se eliminan
por lavado.
En el segundo paso, la solución de substrato se añade a la
cubeta de reacción. El anticuerpo anti-péptido C conjugado
a la fosfatasa alcalina (ratón) cataliza la solución en el
inmunocomplejo que queda en las micropartículas. La
reacción quimioluminiscente resultante se mide como
unidades de luz relativas (RLU) con el fotomultiplicador
integrado en el sistema. La cantidad de péptido C presente
en la muestra es proporcional a las unidades de luz relativas
(RLU) generadas durante la reacción. La concentración de
péptido C puede calcularse con la curva de calibración.
Componentes reactivos
Micropartículas paramagnéticas recubiertas
Ra con anticuerpo monoclonal anti-péptido C
(ratón) en el búfer HEPES con conservante.
Anticuerpo monoclonal anti-péptido C
Rb conjugado a la fosfatasa alcalina (ratón) en el
búfer MES con conservante.
La posición de cada componente reactivo se muestra en la
siguiente figura (vista delantera por la izquierda y vista
superior por la derecha):
Almacenamiento y estabilidad
El kit de reactivos péptido C (CLIA) es estable sin abrir hasta
la fecha de caducidad indicada si se almacena a 2-8 °C.
El kit de reactivos de péptido C (CLIA) puede almacenarse
en el analizador y usarse hasta 56 días después de abierto si
se mantiene a 2-8 °C.
Preparación del reactivo
Ra: Listo para usar
Rb: Listo para usar
Materiales necesarios pero no
suministrados
Analizador para inmunoensayo de quimioluminiscencia
serie CL de Mindray.
Cat.No.Péptido C211: Calibradores de péptido C, 1×2,0 ml
de cada calibrador C0, C1 y C2.
Cat.No.IML311: Multicontrol de inmunoensayo (L), 3×2.0 ml.
Cat.No.IMH311: Multicontrol de inmunoensayo (H), 3×2,0 ml.
Cat.No.IML312: Multicontrol de inmunoensayo (L), 6×2,0 ml.
1/2
Cat.No.IMH312: Multicontrol de inmunoensayo (H), 6×2,0 ml.
Cat.No.WB411: Búfer de lavado, 1 ×10 l.
Cat.No.CS511: Solución de substrato, 4 ×115 ml.
Cubeta de reacción.
Instrumento aplicable
Analizador para inmunoensayo de quimioluminiscencia
serie CL de Mindray
Preparación y obtención de muestras
Para este ensayo, se recomiendan muestras de plasma
(EDTA, heparina sódica y heparina de litio), suero humano y
orina.
Suero y plasma
Obtenga las muestras de sangre siguiendo las precauciones
rutinarias para la venopunción. Siga las recomendaciones del
fabricante del tubo de extracción sanguínea para la
centrifugación. Centrifugue las muestras cuando finalice la
formación del coágulo. Algunas muestras, en particular las de
los pacientes que reciben terapia anticoagulante, podrían tener
un tiempo de coagulación mayor. Antes del análisis, compruebe
que la materia celular y fibrina residual se han eliminado.
Para lograr unos resultados óptimos, inspeccione si hay burbujas
en todas las muestras. Elimine las burbujas con una pipeta antes
del análisis. Las muestras se deben mezclar bien después de
descongelarse. Las muestras descongeladas deben centrifugarse
antes de usarse. Si la muestra se cubrió con una capa lipídica tras
la centrifugación, debe transferirse a un tubo limpio antes del
ensayo. No transfiera la capa lipídica. Manipule con cuidado para
evitar la contaminación cruzada. No use las muestras muy
hemolizadas. No use las muestras inactivadas con calor.
Las muestras de suero y plasma se deben analizar a la mayor
brevedad después de su obtención. Si el análisis no se realiza
antes de las 8 horas, las muestras se deben almacenar a una
temperatura máxima de 2-8 °C. Las muestras de suero y
plasma deben estar estables durante 5 horas a 2-8 °C, 3 meses
a -20 °C. Evite más de cinco ciclos de congelación.
Orina
Para las muestras de orina, obtenga una muestra de orina
durante 24 horas en un contenedor y registre el volumen
total de orina. Tome una alícuota de 10 ml de la muestra
bien mezclada para el procedimiento de ensayo. Si la
muestra de orina está turbia o tiene precipitados,
centrifugue la muestra a 700×g durante 5 minutos y use los
sobrenadantes en el ensayo.
Todas las muestras de orina deben prediluirse con una
proporción de 1:10 con el diluyente de muestra (Catálogo N.°
SD612) antes de la medición. Tras diluir con los analizadores, el
software considera automáticamente la dilución para el cálculo
de la concentración de la muestra. Las muestras de orina con
concentraciones de péptido C superiores al intervalo de
medición se pueden volver a analizar diluyendo manualmente
con una proporción de 1:20 o superior con el diluyente de la
muestra. La concentración de la muestra diluida debe ser > 1
ng/ml. Tras la dilución manual, multiplique el resultado por el
factor de dilución.
Las muestras de orina se deben analizar a la mayor
brevedad después de su obtención. Si el análisis no se
realiza antes de las 8 horas, las muestras se deben
almacenar a una temperatura máxima de 2-8 °C. Las
muestras de orina deben estar estables durante 24 horas a
2-8 °C, 1 mes a -20 °C. Evite ciclos repetidos de
congelación y descongelación.
Procedimiento de ensayo
Para obtener resultados óptimos con este ensayo, los
operadores deben leer detenidamente el manual de
funcionamiento del sistema para informarse bien sobre las
instrucciones de funcionamiento, el control y la
conservación de las muestras, las precauciones de
seguridad y el mantenimiento. Prepare también todos los
materiales necesarios para el ensayo.
Antes de introducir el kit de péptido C (CLI) en el analizador
por primera vez, el frasco de reactivo sin abrir debe volcarse
suavemente al menos 30 veces para volver a suspender las
micropartículas que se han asentado durante el envío o
almacenamiento. Inspeccione visualmente el frasco para
confirmar que las micropartículas están suspendidas. Si las
micropartículas permanecen adheridas al frasco, continúe
volcándolo hasta que se vuelvan a suspender por completo.
Si las micropartículas no se suspenden, se recomienda no
usar ese frasco de reactivo. Póngase en contacto con el
servicio de atención al cliente de Mindray. No vuelque los
frascos de reactivo abiertos.
Para este ensayo, se necesitan 10 μl de muestra para un
único análisis. Este volumen no incluye el volumen muerto
del contenedor de la muestra. Si se realizan más análisis de
la misma muestra, se necesita un volumen adicional. Los
operadores deben consultar el manual de funcionamiento
del sistema y el requisito específico del ensayo para
determinar el volumen mínimo de muestra.
Las muestras de orina de veinticuatro horas deben diluirse
con el protocolo de dilución automático "URINE 1:10".
Calibración
El péptido C serie CL (CLIA) se ha estandarizado de acuerdo
con el estándar internacional para péptido C 84/510 de la
OMS.
La información específica de la curva de calibración principal del
kit de reactivos de péptido C (CLIA) se registra en el código de
barras bidimensional adherido al paquete de reactivos. Se usa
junto con calibradores de péptido C para la calibración del lote
de reactivos específico. Cuando se realiza la calibración, en
primer lugar escanee la información de la curva de calibración
principal del código de barras en el sistema y, a continuación,
use los tres niveles de calibradores de péptido C. Antes de
realizar ningún ensayo de péptido C, es necesario obtener la
curva de calibración válida. Se recomienda repetir la calibración
cada 4 semanas, cuando se use un nuevo lote de reactivos o
cuando los controles de calidad no se ajusten al intervalo de
valores especificado. Para obtener instrucciones detalladas de
la calibración, consulte el manual de funcionamiento del
sistema.
Control de calidad
Se recomienda que los controles de calidad se ejecuten
cada 24 horas si las pruebas están en uso o después de cada
calibración. La frecuencia del control de calidad se debe
adaptar a los requisitos individuales de cada laboratorio. Los
dos niveles de controles de calidad recomendados para este
ensayo son: multicontrol de inmunoensayo (L) y
multicontrol de inmunoensayo (H).
Los resultados de los controles de calidad deben ajustarse a
los intervalos admisibles. Si un control no se ajusta a su
intervalo especificado, los resultados del ensayo
correspondiente no serán válidos y las muestras deberán
volver a analizarse. Podría ser necesario repetir la
calibración. Inspeccione el sistema de ensayo consultando
el manual de funcionamiento del sistema. Si los resultados
de los controles de calidad siguen sin ajustarse al intervalo
especificado, póngase en contacto con el servicio de
atención al cliente de Mindray.
Cálculo
Español-4
El analizador calcula automáticamente la concentración de Características de rendimiento independientes por día, durante un total de 20 días, usando

analitos de cada muestra a partir de la lectura del código de un único lote de reactivo y una curva de calibración. Los Authorized
Sensibilidad analítica / límite de detección In vitro diagnostic
Batch code
European
Conformity
representative in the Use by
barras con la curva de calibración principal, y según el datos de precisión se resumen en la siguiente tabla. medical device European Community
El kit de reactivos de péptido C (CLIA) tiene una sensibilidad Temperature
ajuste de la curva obtenida por la función logística de 4 Valor
analítica de ≤0,01 ng/ml. La sensibilidad analítica se define Conforme al Conforme al
parámetros (4PLC) con las unidades de luz relativas (RLU) como la concentración más baja de analitos que puede medio de CV Consult
Muestra CV de la CV del
generadas desde los calibradores de péptido C de los diferenciarse de una muestra que no contiene analitos. Se Péptido C interserial instructions for use
Caution
limit
Manufacturer Catalogue number
serie dispositivo
valores de concentración definidos. Los resultados se (ng/ml)
define como la concentración de péptido C con las dos Referencias
muestran en unidades de ng/ml. El intervalo de medición 1 2,12 3,34% 1,88% 3,39%
desviaciones estándares superiores al valor de RLU medio 1. D Vezzosi, A Bennet, J Fauvel1 and P Caron. Insulin,
para el ensayo de péptido C es de 0,01 ng/ml a 40,00 ng/ml 2 10,38 3,32% 2,34% 3,45%
calculado con 20 mediciones de una muestra sin analitos. C-peptide and proinsulin for the biochemical diagnosis
para suero/plasma y de 0,10 ng/ml a 400,00 ng/ml para
Linealidad of hypoglycaemia related to endogenous
Orina Intervalo posible
Una muestra de péptido C de alta concentración hyperinsulinism. European Journal of Endocrinology
El intervalo de notificación se define por la sensibilidad
Dilución analítica y el límite superior de la curva de calibración (aproximadamente 40 ng/ml) se mezcló con una muestra 2007; 157: 75-83.
Las muestras con concentraciones péptido C que de baja concentración (<0,01 ng/ml) con diferentes 2. Oyer PE, Cho S, Peterson JD, Steiner DF. Studies on
principal.El índice de notificación del kit de reactivos de
sobrepasan el límite superior se pueden diluir con el proporciones, generando una serie de diluciones. El péptido human proinsulin.Isolation and amino acid sequence
péptido C (CLIA) es 0,01-40 ng/ml para suero y plasma,
diluyente de muestra Mindray. El diluyente recomendado es C de cada dilución se calculó usando el ensayo de péptido C of the human pancreatic C-peptide.J Biol Chem 1971;
0,1~400ng/ml para orina.
1:10 (ya sea manualmente o de forma automática mediante serie CL de Mindray. Se demostró que la linealidad se 246(5):1375-86.
el analizador). La concentración de la muestra diluida debe Especificidad 3. Rudolf Kaaks, Paolo Toniolo, Arslan Akhmedkhanov.
ajustaba al intervalo de 0,01 ng/ml a 40 ng/ml, y el
ser >2 ng/ml. Después de la dilución manual, multiplique el Concentraciones máximas de hemoglobina de 500 mg/dl, Serum C-Peptide, Insulin-Like Growth Factor (IGF)-
coeficiente de correlación r es ≥0,990. Los datos de
resultado por el factor de dilución. Después de que los bilirrubina de 20 mg/dl, triglicéridos de 3000 mg/dl y I,IGF-Binding Proteins, and Colorectal Cancer Risk in
linealidad se resumen en la siguiente tabla.
analizadores realizan la dilución automática, el sistema proteína total de 10 g/dl no interfieren con el ensayo de Women. Journal of the National Cancer Institute
Concentración
automáticamente multiplica el resultado por el factor de péptido C serie CL. Estas sustancias muestran interferencias 1 2 3 4 5 6 2000;92:1592-1600.
（ng/ml）
dilución cuando calcula la concentración de la muestra. inferiores al 10 % en las concentraciones indicadas. 4. Steiner, DF. The Proinsulin C-peptide — A Multirole
Valor previsto
No se observaron interferencias obvias por factor Model. Exp Diabesity Res, 2004; 5(1):7-14.
Valores previstos reumatoideo (hasta 1500 IU/ml) ni anticuerpo antinuclear.
de 0,004 8,19 16,38 24,57 32,76 40,94
5. Dodson G, Steiner D. The role of assembly in insulin’s
Un estudio en una cohorte de 256 individuos aparentemente Péptido C
El calibrador de péptido C C0 de Mindray se enriqueció con biosynthesis. Curr Opin Struct Biol 1998; 8(2):189-
sanos en ayuno (128 suero y 128 orina de 24 horas) ha Valor medido
proinsulina, insulina humana, glucagón, secretina y factor de 94.
determinado el intervalo de referencia del ensayo de de 0,004 7,90 15,12 26,05 34,54 40,94
crecimiento insulínico tipo I en los niveles específicos indicados 6. Rubenstein, A. H., J. L. Clark, F. Melani, and D. F.
péptido C serie CL. Péptido C
en la siguiente tabla. No se observó reactividad cruzada obvia. Steiner. Secretion of proinsulin C-peptide by
Número de
Categoría Percentil 5 -95 º º
Mediana Los resultados se resumen en la siguiente tabla. Comparación de métodos pancreatic beta cells and its circulation in blood.
muestras
Concentración El ensayo de péptido C serie CL de Mindray se comparó con Nature 1969; 224:697-699.
2,06 Reactividad Criterios de
Suero 128 1,0~4,8 ng/ml Sustancia de reactante un kit de diagnóstico disponible comercialmente en un 7. Atkinson MA, Maclaren NK. The pathogenesis of
ng/ml cruzada (%) aceptación
cruzado estudio de correlación con unas 402 muestras de suero y insulin-dependent diabetes mellitus. N Engl J Med
Orina de 18,5~192,9 µg/24 50 µg/
128 Proinsulina 50ng/ml 23,93 ≤ 50% 413 muestras de orina. Los datos estadísticos obtenidos por 1994; 331:1853-1858.
24 horas horas 24 horas
Insulina el modo de cálculo Deming se resumen en la siguiente tabla. 8. Scarlett JA, Mako ME, Rubenstein AH, Blix PM,
Por las diferencias de parámetros geográficos, raza, sexo y 8660ng/ml 0,00 ≤ 0,01%
humana Intervalo de Coeficiente Goldman J, Horwitz DL, Tager H, Jaspan JB,
edad, es muy recomendable que cada laboratorio Categoríaconcentración Pendiente Origen de Stjernholm MR, Olefsky JM. Factitious hypoglycemia.
Glucagón 10000 g/ml 0,00 ≤ 0,01%
establezca su propio intervalo de referencia. correlación
Secretina 10ug/ml 0,00 ≤ 0,01% （ng/ml） Diagnosis by measurement of serum C-peptide
Limitación Factor de Suero; 0,01~40 1,0555 -0,8141 0,9815 immunoreactivity and insulin-binding antibodies. Engl
crecimiento Orina 0,1~400 0,990 1,237 0,985 J Med 1977;10;297(19):1029-32.
Suero y plasma 1000 ng/l 0,00 ≤ 0,01%
insulínico 9. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a
El límite superior de este ensayo es 40 ng. Una muestra con Advertencias y precauciones
tipo I problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;
una concentración de péptido C inferior al límite superior 1. Exclusivo para uso diagnóstico in vitro.
2. Siga las reglas para manipular los reactivos de 34:27-33.
puede determinarse en términos cuantitativos, mientras Efecto prozona laboratorio y tome todas las precauciones de 10. Kricka L. Interferences in immunoassays - still a
que la muestra con una concentración mayor al límite Para el ensayo de péptido C serie CL, no se observó efecto seguridad necesarias. threat. Clin Chem 2000; 46: 1037-1038.
superior se registra como >40 ng/ml. prozona con las muestras analizadas que contenían 3. Debido a las diferencias de metodología y la
especificidad de los anticuerpos, los resultados de los 11. Bjerner J, et al. Immunometric assay interference:
Orina aproximadamente 180 ng/ml péptido C. ensayos de la misma muestra pueden ser diferentes si incidence and prevention. Clin Chem 2002; 48: 613-
se usan kits de reactivos de otros fabricantes en el
Por la proporción de dilución 10, el límite superior de la orina Exactitud sistema Mindray o si se usan kits de reactivos Mindray
621.
de veinticuatro horas es 400ng/ml. Las muestras con una Se usaron dos controles con valores trazables y predefinidos en otros sistemas. 12. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of Precision
concentración de péptido C mayor al límite superior se para verificar la exactitud de este ensayo. Los resultados 4. No use kits de reactivos con la fecha de caducidad Performance of Quantitative Measurement Method;
señalarán como > 400,00 ng/ml y podrán diluirse con el vencida. Approved Guideline - Second Edition.
demostraron que las desviaciones relativas eran inferiores a
5. No use reactivos mezclados de distintos lotes.
procedimiento de dilución manual. ±10%. Los resultados se resumen en la siguiente tabla. © 2015 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd.
6. Mantenga el paquete de reactivos siempre en posición
La concentración de péptido C en una muestra concreta, Valor de vertical para garantizar que no se pierdan Todos los derechos reservados
Valor de péptido micropartículas antes de su uso.
determinada con ensayos de distintos fabricantes, puede péptido C Desviación Fabricante: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co.,
Muestra C medido 7. No se recomienda usar paquetes de reactivos abiertos
variar debido a las diferencias en los métodos de ensayo, la predefinido relativa Ltd.
más de 56 días.
(ng/ml)
calibración y la especificidad de los reactivos. Los resultados (ng/ml) 8. La fiabilidad de los resultados del ensayo no se puede Dirección: Mindray Building, Keji 12th Road South, Hi-tech
de los ensayos se usarán junto con otros datos para tomar garantizar si no se siguen las instrucciones de este Industrial Park, Nanshan, Shenzhen, 518057 P.R.China
Nivel 1 2,02 2,04 -1,14%
prospecto.
decisiones clínicas, como síntomas, resultados de otras Nivel 2 8,47 8,46 0,12% Dirección de correo electrónico: service@mindray.com
9. Los residuos de las reacciones y las muestras deben
pruebas, historia clínica. tratarse como riesgos biológicos potenciales. Las muestras Sitio web: www.mindray.com
La muestra de los individuos expuestos a anticuerpos Precisión y los residuos de las reacciones se manipularán conforme a Tel.: +86-755-26582888
El ensayo de péptido C serie CL está diseñado para una las normativas y directrices locales.
monoclonales de ratón podría contener anticuerpos Fax: +86-755-26582680
10. La hoja de datos de seguridad de los materiales
humanos antiratón (HAMA)9. Estas muestras podrían dar precisión de ≤10% (conforme al CV del dispositivo). La (MSDS) está disponible previa solicitud. Representante en CE: Shanghai International Holding
valores erróneamente elevados o bajos con los kits de precisión se determinó siguiendo los estándares del Corp. GmbH (Europa)
Símbolos gráficos
ensayo que usan anticuerpos monoclonales de ratón10, 11
. protocolo EP5-A212 del National Committee for Clinical Dirección: Eiffestraβe 80, Hamburgo 20537, Alemania
Sin embargo, en este ensayo no se han observado Laboratory Standards (NCCLS). Se probaron dos niveles de Tel.: 0049-40-2513175
interferencias obvias de HAMA. controles de calidad en duplicado en dos series Fax: 0049-40-255726

P/N: 046-006255-00 (2.0) 2/2 Español-4