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DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS (Método de Bradford)


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Reactivos:

- Acido Fosfórico al 85 % 100 ml


- Alcohol Etílico 50 ml
- Azul de Coomasie G-250 100 mg
- Aforar a un litro con agua.

Técnica:

1). Se toman 100 l del homogenado y se lleva a 1,000 l el agua tridestilada.

2). Tomar alícuotas para proteínas y llevarlas a 100 µl con agua (20 µl de la dilución
anterior + 80 µl de agua tridestilada).

3). El blanco se prepara poniendo 100 µl de agua.

4). Añadir 2.4 ml del reactivo.

5). Leer absorbancia a 595 nm.

6). Se prepara una curva de calibración utilizando Albúmina sérica bovina (1mg/ml).
Poniendo 0, 10, 15, 25, 20, 30, 35, 40, 45, 50 µl.

7). Completar con agua a 100 µl.

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