Universidad de los Llanos

Facultad de Ciencias e Ingeniería

Programa de Biología

Extracción de ADN

M. Duran Ortiz, S. Ladino Bastidas, J. Mendez Bautista

1. Código: 164005011
2. Código: 164005015
3. Código: 164005017

Autor para correspondencia: jj.mbautista@unillanos.edu.co

Programa de Biología, facultad de ciencias e Ingeniería

Resumen
Mariana trate de leer todo el informe cuando samuel anexe lo demás.

Palabras clave: desoxirribosa, genoma, membrana, lípidos, proteínas.

INTRODUCCIÓN proteger el ADN de enzimas que

En el presente informe se
evidencian las actividades realizadas
en el laboratorio de estructura
celular, las cuales corresponde a la
extracción de ADN y la identificación
de los ácidos nucleicos, esta
actividad tiene el objetivo de
responder:
¿Qué es la extracción o aislamiento
del ADN? Según lo investigado
previamente La extracción de ADN
requiere una serie de etapas
básicas, en primer lugar, tiene que
romperse la membrana plasmática
para poder acceder al núcleo de la
célula, y posteriormente romperse
también la membrana nuclear para
dejar libre el ADN. Además de
puedan degradarlo.
La lisis de las células se consigue
mediante la adición de tampones
con concentraciones elevadas de
iones que ayudan a romper la
estructura tridimensional de
macromoléculas como las proteínas
y que forman parte de su estructura
celular. La adición de un detergente
como el SDS (Dodecil Sultato
Sódico) es necesaria a menudo para
eliminar las membranas.
Generalmente, el ADN se encuentra
asociado a proteínas, por lo que se
suele añadir proteasas al tampón de
extracción, a la vez que usamos el
acetato (amónico o sódico) para
precipitar dichas proteínas. (J.
Cairns, et al. Phage and the Origins
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of Molecular Biology, Cold. Spring enfrenta a una T y una C se

Harbor Laboratory, 1966.) enfrenta a una G en la doble
cadena. Las bases enfrentadas se
Ya sabiendo esto, también surge la
dice que son complementarias. El
siguiente pregunta; ¿Qué son los
ADN adopta una forma de doble
ácidos nucleicos? Los Ácidos
hélice, como una escalera caracol
Nucleicos son las biomoléculas
donde los lados son cadenas de
portadoras de la información
azúcares y fosfatos conectadas por
genética. Son biopolímeros, de
“escalones”, que son las bases
elevado peso molecular, formados
nitrogenadas. La molécula de ADN
por otras subunidades estructurales
se asocia a proteínas, llamadas
o monómeros, denominados
histonas, y se encuentra muy
Nucleótidos, de acuerdo con la
enrollada y compactada para formar
composición química, los ácidos
el cromosoma.
nucleicos se clasifican en Ácidos
Desoxirribonucleicos (ADN) que se El ADN tiene la función de “guardar
encuentran residiendo en el núcleo información”. Es decir, contiene las
celular y algunos organelos, y en instrucciones que determinan la
Ácidos Ribonucleicos (ARN) que forma y características de un
actúan en el citoplasma. (Watson organismo y sus funciones. Además,
J.D. (1968, 1981) The Double Helix: a través del ADN se transmiten esas
A Personal Account of the Discovery características a los descendientes
of the Structure of DNA.) durante la reproducción, tanto
sexual como asexual. Todas las
En base a la información anterior se
células, procariotas y eucariotas,
pondrá en práctica la extracción de
contienen ADN en sus células. En
ADN, con la siguiente metodología.
las células eucariotas el ADN está
contenido dentro del núcleo celular,
mientras que, en las células
MATERIALES Y MÉTODOS procariotas, que no tienen un núcleo
1. Estructura y función del ADN definido, el material genético está
disperso en el citoplasma celular.
El ADN se compone de dos cadenas,
cada una formada por nucleótidos.
Cada nucleótido, a su vez, está 1.1 Procedimiento
compuesto por un azúcar
(desoxirribosa), un grupo fosfato y
una base nitrogenada. Las bases
Samuel acá coloque el
nitrogenadas son cuatro: adenina
procedimiento para que hiso,
(A), timina (T), citosina (C), y
guanina (G), y siempre una A se
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paso a paso que utilizo para
llenar las tablas.
2. Extracción de ADN
Para esta práctica, se realizará la
extracción de ADN de la pulpa de
fruta del kiwi, En este experimento,
las paredes celulares del kiwi se
rompen por la acción mecánica de
aplastamiento del tejido y luego por
medio del calentamiento; el
detergente disuelve los lípidos
presentes y la membrana del núcleo
(de forma equivalente a cómo actúa
con la grasa de los platos sucios). Al
ya no estar confinado en el núcleo,
el ADN cargado negativamente —y
muy soluble en agua debido a los
grupos fosfato (PO4 3-) de cada
nucleótido— pasa a la disolución.
Sin embargo, los iones sodio
cargados positivamente (Na+) que
provienen del cloruro de sodio de la
mezcla extractora se unen a las
cargas negativas del ADN y lo
neutralizan, formando la sal sódica.
Esta neutralización de carga
eléctrica permite que las moléculas
de ADN se junten unas con otras,
formando un agregado que, con la
adición del alcohol frío, precipita en
la interfase, ya que el ADN no es
soluble en el alcohol. Cada
agregado macroscópico en el
precipitado contiene millones de
cadenas de ADN pegadas unas a
otras, junto con parte de las
proteínas asociadas al ADN dentro
del núcleo.
2.1 Materiales
 Material vegetal (kiwi)
 Mortero
 Cuchillo (para cortar la fruta en
trozos).
 pipeteador
 pipeta aforada 20ml
 vaso precipitado
 Agua destilada.
 Detergente lavaplatos.
 Sal de cocina (mejor sal fina
porque se disuelve mejor).
 Papel de filtro.
 Embudo
 Etanol (alcohol para desinfectar
heridas si está frío mejor)
2.2 Procedimiento
Para este procedimiento Se debe
preparar una solución que contenga
kiwi, agua destilada, sal y shampoo.
La sal permite que el ADN precipite
en una solución fría de alcohol. El
detergente disuelve los lípidos y
proteínas de la membrana celular, y
además rompe enlaces que
mantienen la membrana integra,
provocando su ruptura. El
detergente forma un complejo con
los lípidos y las proteínas haciendo
que precipiten en la solución.
Paso 1. En un vaso o beaker
plástico de 5 oz, prepare una
solución que consiste en una
cucharadita de Shampoo/jabón
líquido comercial claro y dos
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cucharaditas de sal. Añada agua con la solución de kiwi y vacíela en

destilada para obtener un volumen la solución de alcohol frío (el ADN
final de 30ml o aproximadamente no es soluble en alcohol. Cuando el
1/3 del volumen del vaso. Revuelva alcohol es unido con esta mezcla,
la sal y Shampoo suavemente para los componentes de la mezcla
evitar que forme espuma. excepto el ADN se mantendrá en la
solución, mientras el ADN
Paso 2. Use el cuchillo plástico,
precipitará en la capa de alcohol.
pele y corte ½ del kiwi en pequeños
pedazos y añádalos a la solución Deje que la solución de asiente por
preparada en el paso 1. Aplaste el 2 o 3 minutos sin agitar o revolver.
kiwi contra las paredes del Usted podrá observar el ADN blanco
recipiente con la cuchara usando su precipitar en la capa de alcohol.
parte posterior por espacio de 10 Cuando se obtienen buenos
minutos (el detergente disuelve los resultados, será posible sacar el
lípidos de la membrana, lo que hace ADN con la punta de una pipeta de
que se libere el ADN dentro de la Pasteur. El ADN tiene el aspecto de
solución. El detergente causa la un moco pegajoso blanco.
precipitación de los lípidos y las
RESULTADOS
proteínas y deja sólo el ADN en la
solución. La sal se une al ADN). Samuel acá ponga las tablas que
desarrollo.
Paso 3. Mientras un miembro del
grupo aplasta y revuelve el kiwi en
la solución, otro miembro preparará
un cono de papel de filtro en otro Resultados de extracción de
vaso plástico de 5 oz. Coloque el ADN de kiwi:
cono de filtro sin que esto toque el Se observó una interfase nublosa en
fondo del vaso. el tubo Falcon, lo cual indica la
Paso 4. Filtre la solución. Esta se presencia y la extracción exitosa del
filtrará lentamente, destilando gotas material genético sin purificar.
durante unos minutos hasta obtener También se observó una pequeña
aproximadamente 5 ml de solución mancha blanca en el capilar que
filtrada (tape la boca del vaso pretendía atraer un poco del
durante este proceso). 5. Prepare material genético. Se puede notar
un tubo con alcohol frio. Para en las imágenes lo antes
obtener mejores resultados, el mencionado.
alcohol debe estar lo más frio
posible. 6. Llene una pipeta plástica *Ver Dibujos anexos de los
resultados.
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principios básicos de métodos

más complejos de extracción de
ANALISIS DE RESULTADOS
ADN en laboratorios avanzados
Samuel acá escriba las que son en esencia romper los
conclusiones a las que tejidos con métodos físicos,
llego con cada tabla. romper las membranas de las
células con la presencia de una
 En la práctica se extrajo ADN de sal, romper la membrana nuclear
las células vegetales de un kiwi. de las mismas con un detergente
Como resultado se pudo y verter alcohol para que el ADN
observar una tira parecida a hilo se precipite, acorde a la
de color blanco en la parte de literatura.
arriba de la solución.
 El resultado esperado era que se
formara un precipitado blanco en
la interfase con el alcohol, siendo
éste el ADN, apareciendo como
una sustancia resbalosa, como
una especie de mucosa blanca.
 El procedimiento utilizado en
esta actividad tiene los mismos

REFERENCIAS

 Adleman, L. Molecular Computation of Solutions to Combinatorial Problems.

Science, 268 (November 1994), 1021–1024.
 Baranda, A.V.;Castellanos, J.;Arroyo, F.;Gonzalo, R. Towards an electronic
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nondeterministic evolution in transition P systems. Proceedings of the 7th
International Meeting on DNA Based Computers (N. Jonoska, N.C. Seeman,
eds.), Tampa, Florida, USA, 2001, 273–282.
 Catalá, R. 2001. Extracción del ADN del Kiwi. ¿Como ves?, No. 37. UNAM.
 Dassow, J.; Paun, G. ˇ Regulated Rewriting in Formal Language Theory,
SpringerVerlag, Berlin, 1989.
 Madden, Dean. 2011. Descubriendo el ADN [En línea]. Science in School:
The European Journal for Science Teachers. Traducido por Isabel Carrero.
Tomo 1.
 von Neumann, J. A certain zero–sum two–person game equivalent to the
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 Quesada Mora, Silvia. 2007. Manual de Experimentos de Laboratorio para

Bioquímica. Editorial Universidad Estatal a Distancia. Costa Rica. Pp. 3.