Microscopia

Cristian Camilo Diaz Tovar1

1,*
Escuela de Fı́sica, Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia

21 de septiembre de 2023

1. Introducción
La microscopı́a, un pilar fundamental en la investigación cientı́fica y tecnológica, nos permite explorar el mun-
do invisible a simple vista. En este informe, nos adentraremos en el intrigante funcionamiento de los lentes en los
microscopios, una pieza clave que permite revelar los detalles más minúsculos de la materia. El corazón de esta
exploración se encuentra en la comprensión de cómo los lentes objetivos y oculares se combinan ingeniosamente
para generar aumentos sustanciales, desvelando un universo diminuto que de otro modo permanecerı́a oculto a
nuestros ojos.

Los microscopios, a lo largo de su historia, han evolucionado de manera sorprendente, pero su esencia ra-
dica en la capacidad de los lentes para capturar y ampliar la luz proveniente de objetos que, por su tamaño
microscópico, desafı́an nuestra visión natural. A través de esta investigación, desentrañaremos el enigma de cómo
los lentes trabajan en conjunto para formar imágenes detalladas, y cómo esta interacción es esencial para la
magnificación final que nos permite observar estructuras microscópicas con una claridad asombrosa. A medida
que profundicemos en el funcionamiento de los lentes, descubriremos cómo su diseño y disposición estratégica
hacen posible que la microscopı́a siga siendo un pilar fundamental en una amplia gama de campos cientı́ficos y
tecnológicos.

2. Teorı́a
2.1. Historia de la microscopia
La historia de la microscopı́a se remonta a la antigüedad, cuando se descubrió que los espejos curvos y las
esferas de cristal llenas de agua podı́an aumentar el tamaño de las imágenes. Sin embargo, fue en las primeras
décadas del siglo XVII cuando se comenzaron a realizar experimentos con lentes, llamadas ası́ debido a su forma
de lentejas, con el objetivo de lograr el máximo aumento posible. Estos avances se basaron en el éxito del teles-
copio, utilizado por primera vez con fines astronómicos por Galileo en 1609.

Antes de esta época, se creı́a que los seres vivos más pequeños eran los diminutos insectos, y se asumı́a que no
existı́a ningún organismo más pequeño que estos. Sin embargo, el desarrollo de instrumentos para aumentar la
visión de los objetos, conocidos como microscopios (del griego, ”para ver lo pequeño”), cambió este panorama. La
biologı́a se expandió gracias a estos dispositivos, que permitieron a los naturalistas describir en detalle pequeños
organismos y a los anatomistas descubrir estructuras previamente invisibles.[1]
En esta época temprana de la microscopı́a, se distinguı́an dos tipos de microscopios: el sencillo, que consistı́a en
una lente montada, y el compuesto, que estaba formado por una combinación de lentes. El microscopio compuesto,
inventado por Zacharias Jansen en Holanda, marcó un hito importante en esta historia. Aunque los detalles sobre
el primer microscopio no son completamente claros, la figura 1 muestra un ejemplo de un microscopio hallado en
Middleburg, Holanda, correspondiente a Jansen, que contenı́a dos lentes. Este avance sentó las bases para futuros
desarrollos en la microscopı́a y permitió explorar el mundo microscópico con un nivel de detalle sin precedentes.

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 Figura 1: Primer microscopio atribuido a Jansen

En este contexto, un comerciante holandés llamado Anton van Leeuwenhoek adoptó un enfoque diferente. En
lugar de utilizar sistemas de lentes complicados, prefirió lentes simples que podı́a obtener a partir de pequeños
trozos de cristal de alta calidad. Leeuwenhoek dedicó un esfuerzo meticuloso a pulir cuidadosamente estos frag-
mentos de cristal, logrando ası́ aumentar objetos hasta 270 veces sin sacrificar la nitidez de la imagen. Su colección
personal incluı́a 419 lentes, algunas de las cuales estaban hechas de cristal de roca y, en ocasiones, incluso de
diamante. Sorprendentemente, estas lentes eran tan pequeñas que algunas no superaban el tamaño de un alfiler.
Como resultado, los microscopios diseñados por Leeuwenhoek eran notablemente diminutos en comparación con
otros de la misma época.

Este enfoque innovador y su dedicación a la calidad de las lentes permitieron a Leeuwenhoek realizar obser-
vaciones microscópicas excepcionales y revolucionarias para su tiempo, allanando el camino para importantes
avances en la microbiologı́a y la ciencia en general. Su contribución marcó un hito en la historia de la microsco-
pı́a al demostrar que la calidad de las lentes era esencial para obtener imágenes claras y detalladas de objetos
microscópicos.

Figura 2: Microscopio Leeuwenhoek

En el campo de la microscopı́a electrónica aplicada a la biologı́a, es notable destacar que muchos de los pio-
neros en esta disciplina siguen vivos en la actualidad. Entre estos distinguidos cientı́ficos se encuentran nombres
como Albert Claude, Don Fawcett, Earnest Fullam, Charles Leblond, John Luft, George Palade, Daniel Pease y
Keith Porter. Dos de ellos, Albert Claude y George Palade, fueron honrados con el Premio Nobel de Medicina en
1974 en reconocimiento a sus destacados logros en el campo de la biologı́a celular, utilizando como herramienta
principal el microscopio electrónico.

El microscopio electrónico, una revolución en la observación de estructuras biológicas a nivel microscópico,

se divide en dos tipos fundamentales, ambos inventados simultáneamente pero con aplicaciones diferentes. El
primero es el Microscopio Electrónico de Transmisión (MET), que dirige un flujo de electrones a través de una
fina capa de tejido o material que se desea observar. Esto resulta en la formación de una imagen bidimensional
en una pantalla fosforescente, donde el brillo en una región especı́fica de la imagen está directamente relacionado
con la cantidad de electrones que logran atravesar el material.

Por otro lado, tenemos el Microscopio Electrónico de Barrido (MEB), que crea una impresión de imágenes
en tres dimensiones. En este caso, el MEB utiliza dos o tres puntos de la muestra para que los electrones incidan

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sobre la superficie del espécimen y, posteriormente, salgan del material como electrones secundarios, que son
detectados por un sensor. La imagen resultante representa al espécimen completo, en contraste con el MET,
donde la imagen se basa únicamente en los electrones que se transmiten a través del material observado.

Ambos tipos de microscopios electrónicos han revolucionado la visualización de estructuras biológicas a nivel
microscópico, permitiendo un mayor entendimiento y avance en la biologı́a celular y otros campos relacionados.

Figura 3: Distintos tipos de células y componentes que pueden ser vistas sólo con el microscopio electrónico y no
con el microscopio óptico.

2.2. Aumento del microscopio

El aumento en un microscopio es una caracterı́stica esencial que determina su capacidad para ampliar y ob-
servar muestras. En el caso de los microscopios ópticos compuestos, el aumento se produce en dos etapas: primero
en las lentes del objetivo y luego en las del ocular. Para calcular el aumento total del microscopio, simplemente
multiplicamos el aumento del objetivo por el aumento del ocular. Por ejemplo, si tenemos un objetivo con un
aumento de 60x y un ocular de 10x, el aumento total serı́a de 600x.

El aumento total del microscopio se puede calcular fácilmente multiplicando el aumento del objetivo por el
aumento del ocular:

Este proceso de aumento se basa en la capacidad de las lentes convergentes para desviar los rayos de luz y
hacer que converjan en un punto llamado foco. Al observar un objeto a través de estas lentes, se genera una
imagen virtual que parece más grande que el objeto original.
Sin embargo, es importante destacar que el aumento no debe aumentarse indefinidamente, ya que la resolución
de la imagen también es crucial. La apertura numérica de las lentes del objetivo determina la resolución, y para
obtener una imagen con buena resolución, el aumento total debe estar dentro del rango de 500 a 1000 veces la
apertura numérica del objetivo. Este rango se conoce como aumento útil. Si el aumento total supera este rango,
la imagen se volverá borrosa y no aportará información adicional, lo que se denomina aumento vacı́o.

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 Figura 4: Tabla de aumento

3. Materiales y Métodos
Microscopio

Figura 5: Microscopio

Hoja de papel milimetrado.

Figura 6: Papepl milimetrado.

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Letras de papel periódico.

Figura 7: Letras de papel periodico

Cabello

Figura 8: Cabello

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4. Resultados y análisis
4.1. Montaje de letras de papel periódico en 4x y 10x
En el montaje se observo que la letra sufrı́a reflexión especular. Cuando se produce un cambio del objetivo
de 4X al objetivo de 10X, el campo visual disminuye. En este proceso, se observa una porción más pequeña de
la muestra, pero con un mayor nivel de detalle, ya que el objetivo de 10X se enfoca en una región más reducida
debido a su mayor capacidad de ampliación.
Posteriormente, al cambiar del objetivo de 10X al objetivo de 40X, nuevamente se experimenta una dismi-
nución en el campo visual. En este caso, la región de la muestra que se puede ver se reduce aún más, ya que el
objetivo de 40X amplı́a la imagen de manera considerable en comparación con el de 10X, pero a expensas de
limitar la cantidad de área visible en el microscopio. También se observa que entra mayor sea el aumento menor
es la entrada de luz visible la imagen tiende a oscurecerse un poco mas y mas con cada aumento.

(a) Letra en 4x (b) Letra en 10x (c) Letra en 40x

Figura 9: Letra en en diferentes aumentos

4.2. Papel milimetrado para saber campo visual

Para medir el diámetro del campo visual utilizando el objetivo de mayor aumento de 100X en el microscopio,
primero se aseguró de que el microscopio estuviera ajustado y enfocado en el objetivo de 100X. Luego, se utilizó
papel milimetrado en el portaobjetos. Este papel tiene mediciones visibles y cada cuadrito es igual a 1 milı́metro
(mm), lo que facilita las mediciones.
Mientras se observaba a través del microscopio, se contó cuántas divisiones del papel cabı́an a lo ancho del
campo visual. Esto proporcionará la medida del ancho del campo.
Finalmente, para calcular el diámetro del campo visual, se multiplicó el número de divisiones que caben a
lo ancho por el valor de la unidad de medida, que en este caso es 1 mm. Este resultado te dará el diámetro del
campo visual con el objetivo de 100X en milı́metros. En 100X, a duras penas se pudo ver menos de un cuadro.

(a) Papel milimetrado en 4x(b) Papel milimetrado en(c) Papel milimetrado en

10x 40x

Figura 10: Papel milimetrado en diferentes aumentos

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4.3. Importancia de la microscopia
Las mediciones en microscopı́a son de suma importancia por varias razones:

Precisión y Reproducibilidad: En muchas aplicaciones cientı́ficas y médicas, es esencial que las mediciones
sean precisas y reproducibles. La microscopı́a se utiliza en una amplia gama de campos, como biologı́a,
medicina, fı́sica, y ciencias de los materiales, donde incluso pequeñas variaciones pueden tener un impacto
significativo.[2]

Caracterización de Muestras: Las mediciones en microscopı́a permiten caracterizar con precisión objetos
microscópicos, como células, microorganismos, estructuras celulares y materiales a nivel nanométrico. Esto
es esencial para comprender la estructura y función de estos elementos en diferentes contextos.

Investigación Cientı́fica: En la investigación cientı́fica, las mediciones microscópicas pueden proporcionar

datos cruciales para formular y probar hipótesis, ası́ como para realizar descubrimientos importantes. Por
ejemplo, en biologı́a, se pueden medir el tamaño de células o estructuras subcelulares para comprender
mejor los procesos biológicos.

Control de Calidad: En aplicaciones industriales y de control de calidad, las mediciones microscópicas

pueden utilizarse para evaluar la calidad de productos y materiales, garantizando que cumplan con los
estándares y especificaciones requeridos.

Avances Tecnológicos: El desarrollo de tecnologı́as avanzadas, como la nanotecnologı́a y la microscopı́a

de súper resolución, depende de mediciones precisas a escala micro y nanométrica. Estas mediciones son
fundamentales para el diseño y la fabricación de dispositivos y materiales a esta escala.

Diagnóstico Médico: En medicina, las mediciones microscópicas pueden utilizarse para el diagnóstico de
enfermedades, como la evaluación de muestras de tejido en patologı́a, el análisis de sangre o el estudio de
microorganismos patógenos.

5. Conclusiones
A medida que aumenta la ampliación del objetivo, se produce una disminución en el campo visual en cada
paso. Esto permite una visualización más detallada pero restringe la cantidad de área que se puede observar
simultáneamente en el microscopio.
La capacidad de medir y comprender el campo visual es fundamental en la investigación y la observación
microscópica, ya que permite a los cientı́ficos evaluar cuánto de una muestra pueden ver a la vez y cómo
se relaciona con la resolución y la precisión de las mediciones.

El enfoque adecuado y la iluminación son factores crı́ticos para lograr mediciones precisas y una visualización
óptima a través del microscopio.

Referencias
[1] M Lanfranconi. Historia de la microscopia. introducción a la biologı́a. Fac. de Ciencias Exactas y Naturales.,
2001.

[2] G Nin. Introducción a la microscopı́a electrónica aplicada a las ciencias biológicas. UNAM, 2000.