NORMA VENEZOLANA ALIMENTOS. METODO PARA RECUENTO DE ESPORAS TERMOFILAS RESPONSABLES DE ACIDEZ PLANA "FLAT SOUR" COVENIN 2948-92 oY) ey ialCONITE TECNECO DE HORMALIZACEON CTI PRESIDENTE VICEPRESIDENTE SECRET9RID SUBCOME7E TECNICD SC3 cooRDIWADORA PRODUCTOS ALINENTICIIS DAA. FANNY CARRILLO DE PADILLA DR. DOUGLAS YANEZ DR. J05E FELIX ChAVED (iC, ORLANDO TORTOLERO NICRORTOLOGTA DE ALINENTOS MSc. YADIRA® GUEVARA PARTICIPANTES WINISTERIO DE SANIDAD Y ASISTENCIA SOCIAL (M.8.8-5.) INDUSTRIAS LACTEAS (1NDULAC) INDUSTRIAS LACTENS DE PERTZA (7LAPECAI PRODUCTOS EFE Lap. BROLAB CERVECERIA POLAR, C.A, INSTITUTO NACIONAL DE NUTRICION (2.N.N.d INSTITUTO NACIONAL DE KIBIENE ({.N.H.? UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA {UeC.¥e) FAC. FARHACTA UNIVERSIDAD SIMQN BOLIVAR |U.5.B FRICA FECHA DE ENVIO: 17-04~ BURACION: 30 DIAS VICKAR V:LACHA MIROSLAV! MORLES ALICIA PERA HELEN RIVERO OLGAMAR FRANCESCHT NATILDE TE GAREIA MARTELA CALOERON MARUELA SEL BRAD MARIA L, NOVOA PILAR HERNANDEZ SILVIA MENDOZA CRISTINA CALBERDNNORMA VENEZOLANA covENeN ALIMENTOS 2988-92 METBBO FARA RECUENTO DE ESPORAB TERMDFILAS RESPONSABLES DE ACIDEZ PLANA "FLAT SOUR" COVENIN 1126-77 Alimentoe. Cocificecién y preparacién de muestras pera endlisis microbiolégicos. Este nétedo contenpla li deteccifn y reruento de colonias de esporas terméfiles responsables de acigez plana "flat sour", €1 nétodo consists en someter las muzstras o diluciones de las Wismas oun procese de calentamiento con el fin de pernitir ol paso da espora a célula vegetative, Sonbrar un volusen dado se le muestra o diluciones sucesives de 12 aisma en vn medio d2 enriqueciniento sélido, selective, repartide en Placas do Petri. Sommter 4 condiciones de incubacién preestablecidzs y contar las colonias utilizando un contador de colonias 4 EQUIPOS Y MATERTALES 4.1 Bak de Aue con reguledor de temperature 49~45°C. 4.2 Contader de colonies. 4.3. Crongnetre. 4,4 Incubacera con reeuiadar de temperatura de 56 ~ 55°C. 4,5 Frascos de diluciés de 280 a1, esteriles. 6 Pipetes graduadus de ly S nl, estérites stéri 4.7 Placas ce Petri 100 ad 4.8 Erlenneyer de 280 nl, estari 4.9 hous destileca estert!5 BEDIOS DE CULTIVO glucoss triptona Feraul Triptone o Tripticese ‘ + 10,09 Davtrosa abaeny shawnasis 5,0 9 Purpura de Bromocreso! (solucion 24 en etanol) e...ee- 2,0 a2 Agar diaetentaa es Ran bas wieder ay + ASA g Agua destilad: estéril c.s.p vine 1000 al Preparacién: Meacle los ingredientes en agua, destilads, caliente a ebullicién hasta disoluciéa completa. Esterilice en autoclave a 121°C por 15 ainutos. £1 pH final debe ser 67,4, 0,2 & SREPARACION Y CONSEAVACION DE Lag NUESTRAS E) material a ensayar consists en una muestra representative del alinente, 9u identificacidn y proparacién co hard segdn Io astabletide on Ja Norma Venezolana COVENIN 1124. 7 CONDICIONES DE ENSAYO Frevio al anélisis, 12s muzstras deben pantenerse en condiciones apropiaves. Tada el andlieis debe realizarse en condiciones de asapsia. Gf Se colecan 20 g de Ie auestra en un Erienmeyer de 250 al, se le agrega agua Gestilada estdril bacts completer 100 m) y se agita haets disolucisn completa. E.2 Se lleva la auestra rapidanente s ebulliciin durante cinco |§) ainutos. Se enfria la solucion, 8.3 Ss coleca 2 a) de 1a susstrs tratzoa a cada una de las 5 places de Petri ahade egar glucose triptone, previgmente funcido y tenperado 2 40-45°C, se sezcls con el inéculo y se deja selidificar.8.4 Las colonias de espores responsables de acidez plans “flat sour’ sun el redondas, da 2 - 5 am de dijnetro, can el tipico punto cestrsl opaco, rogeadas de un halo amarillo, debido 3 la produccién de aciso, £2 hale amarillo puede ser insignificante o estar ausente cuando Jes colonies Pertenecen a cierto tipo da cepas poco productoras de écids, cuando ha ocurrido reversion altaling, o cuando }a placa esta auy poblada, de tel modo gue el color del aedio vira completamente al amarillo. Este helo puede desaparecer al sacar las placas de incubacidn, por lo que es preferibie hacer el centaje innediatamente. ze colonies en profundidad son ceapactas, bitonveras y se asenejan 2 puntes de alfiler. Cuando la produccién ée acide es cuestionable después de 48 horas, se reincube otras 24 horas adicionales. Si 1a identided de las colonias en profundidac es dudosa, se reconienda cesislar en superficie, s fin de observar le aorfolagia tipica de 1a coloniey ya descrita. NOTA 1: En el caso de productos como caceo y leche, en los cusles e2 taneho da la particula puede interferi¢ en el contaje de colonias, se puede pesar 10 gy de producto y senbrar {mi de dilucioa en lugar de 2 el, cose se describe arriba, 9 El total de colonias en las cinco plarac, nultiplicade por cineca representa el ndmero totel de espores en 10 9 de muestra. Los resultados se expresan: recuento de esporas termétiles responsables de acidez plena ‘flat sour" ufc/10 q de auestra, 10 INFORME inforne del ensayo deters indicar cone ainiao 1a siguiente inforasciént Ensayo reelizado segin 1a Norma COVENIN 2948 Feche en le cual se regiizd ef ensayo. Hdentificacton ae muestra. Resultados del ensaye. Noabre del aneli Dbservaciones.= Compendium of Methods for the Microbiclo Anerican Public Health Agscciation, NM Washinghten, D.C. of Food, 1988, = 250.COVENIN CATEGORIA 2948-92 B COMISION VENEZOLANA DE NORMAS SNDUSTRIALES MINISTERIO DE FOMENTO Av. Andrés Bello Edif. Torre Fondo Comin Pisos 11 y 12 Telf. 578. 41. 11 Fax: 874. 13. 12 CARACAS Ka publicacién de + FONDONORMA DU: 579.2.24 - RESERVADOS TODOS LOS DFRECHOS ISBN 980-06-0986-5 Prohibida la reproduccidn total 0 parcial, por cualquler medio, Descriptores: Microorganismo, anzlisis microbiologico, espora, acidez.