Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Guia de Practica Microbiología y Parasitología 2023-2
Guia de Practica Microbiología y Parasitología 2023-2
GUÍA DE PRÁCTICA
EXPERIENCIA CURRICULAR
MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
2023-2
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRESENTACIÓN
● Los estudiantes deberán cumplir en todo momento las normas de bioseguridad establecidas
en los protocolos.
● Lavarse las manos con agua y jabón antes y después del uso de guantes, luego de retirarse
el mandil, al término de cada sesión de práctica, antes de retirarse del laboratorio.
● Dejar sus mochilas y libros en el lugar destinado para este fin, a las mesas solo portará su
guía de prácticas y una libreta para tomar apuntes.
● Los estudiantes tienen la obligación de cuidar todos los equipos y materiales del laboratorio,
si por descuido o manejo negligente deterioran los mismos deberán reponerlos.
● Está prohibido retirarse las mascarillas durante la práctica del curso en el laboratorio.
● Limpiar y desinfectar su área de trabajo dejando en orden todos los materiales utilizados,
luego de la práctica y antes de retirarse del laboratorio.
● Eliminar los materiales de desechos en el recipiente para tal fin, teniendo en cuenta la
eliminación de desechos por bioseguridad.
● Si durante el trabajo ocurre algún accidente, rotura de tubos o placas con cultivo, avisar al
profesor tan pronto ocurra el hecho para que indique la desinfección por el personal
encargado del laboratorio.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
DATOS GENERALES
SUMILLA:
COMPETENCIA:
COMPETENCIA GENÉRICA
Desarrolla competencias en la indagación científica, generando conocimientos que propician en el
estudiante procesos de formación permanente.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 1
BIOSEGURIDAD: LAVADO DE MANOS, USO DE BARRERAS FÍSICAS, USOS DE EQUIPOS DE
PROTECCIÓN PERSONAL. MICROSCOPÍA. MÉTODOS Y TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO:
COLORACIONES SIMPLE, COMPUESTA Y COLORACIÓN GRAM
I. OBJETIVOS
1. Ejecutar las medidas de bioseguridad desde el correcto lavado de manos clínico y quirúrgico,
el uso de los equipos de protección personal (EPP).
2. Reconocer las partes de microscopio, su utilidad, el enfoque de una muestra.
3. Promover el uso correcto, el cuidado y conservación del microscopio.
4. Realizar los métodos básicos del diagnóstico microbiológico: coloraciones simple y Gram,
observación de muestras en fresco y coloreadas.
II. MATERIALES
1. Agua, jabón, papel toalla, guantes, mascarillas, mandilones.
2. 6 microscopios, láminas y laminillas
3. Set de coloración Simple y set de coloración Gram
4. Suspensión de mezcla de bacterias, agua estancada y hematíes
5. Suero fisiológico o Solución Salina (NaCl 0.9 %)
6. 3 asas bacteriológicas, 3 pipetas y 3 mecheros
I. EXAMEN EN FRESCO
II. MATERIALES:
1. Suspensión de mezcla de bacterias, sangre, agua estancada.
2. Láminas portaobjetos y laminillas cubreobjetos
3. Suero fisiológico o Solución Salina (NaCl 0.9 %)
4. 3 asas bacteriológicas, 3 pipetas y 3 mecheros
1. PROCEDIMIENTO:
Realizar la asepsia del pulpejo de un dedo y pinchar con la lanceta, colocar una gota de sangre y
una gota de solución salina, colocar en la lámina y cubrir con laminilla.
Tomar con el asa bacteriológica la suspensión bacteriana y los otros preparados en fresco y
colocar una gota de la mezcla y depositarla en un portaobjetos. Colocar la gota con el
cubreobjetos y observar al microscopio utilizando los objetivos de 10 y 40 X.
Registrar los resultados en su cuaderno de práctica. Observar las formas móviles de los
microorganismos.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
COLORACIÓN SIMPLE
II. MATERIAL:
1. Cultivo de gérmenes o muestras de cavidad oral, secreción faríngea.
2. Láminas portaobjetos, 3 asas bacteriológicas, 3 mecheros
3. Colorante azul de metileno, aceite de inmersión
4. 6 microscopios compuestos
III. PROCEDIMIENTO:
1. Coloque la muestra sobre la lámina y realice un frotis. Fijar la muestra al calor suave.
2. Cubra la preparación con azul de metileno, dejando que el colorante actué por tres
minutos.
3. Lave la preparación con agua corriente.
4. Deje secar la preparación o secar al mechero.
5. Observe al microscopio utilizando el lente de inmersión y aceite de cedro.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
COLORACIÓN COMPUESTA: COLORACIÓN GRAM
1. MATERIAL:
1. Cultivo de gérmenes o muestras da cavidad oral, secreción faríngea.
2. Láminas portaobjetos, 3 asas bacteriológica, 3 mecheros
3. 6 hisopos estériles
4. Set de coloración Gram, aceite de inmersión
5. 6 microscopios compuestos
2. PROCEDIMIENTO:
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice las observaciones al microscopio, coloque nombres y señale sus partes. Señale los
aumentos y use colores para representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Los medios de cultivo pueden ser sólidos o líquidos. La composición de estos medios puede ser
definida (medio sintético) o no definida (medio complejo). No todos los medios de cultivo son
iguales, ni todos los microorganismos pueden crecer en todos los medios de cultivo. Un medio rico
es aquel medio con todos los tipos de requerimientos nutritivos (fuente de carbono, nitrógeno,
fósforo, azufre, sales minerales y factores de crecimiento) que permiten el crecimiento de la mayoría
de los microorganismos heterótrofos. Aun así, no hay un medio universal que sirva para aislar los
diferentes tipos de microorganismos que existen. Un medio general es aquel que permite el
desarrollo de una gran variedad de microorganismos.
A veces antes de hacer el aislamiento sobre un medio determinado, cuando la población del
microorganismo que queremos aislar es mucho más baja que la del resto de microorganismos,
previamente se hace crecer la muestra en un medio de enriquecimiento líquido. Este medio
favorece el crecimiento de un determinado tipo de microorganismos (sin llegar a inhibir totalmente
el crecimiento del resto) de forma que al final de la incubación la población del microorganismo que
queremos aislar es mucho más grande que la de los otros.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Técnica de siembra:
Es el procedimiento por el cual se pone en contacto el microorganismo con el medio de
cultivo, para que en condiciones óptimas de nutrición, temperatura y tiempo pueda
desarrollarse la bacteria in vitro. El dispositivo empleado se denomina “asa bacteriológica”,
“asa de siembra”, “asa de platino” o “asa de Kolle” y se usan diversos métodos de siembra:
Por inoculación, puntura, estría, en superficie, dispersión-agotamiento.
1. MATERIAL:
1. Medios de cultivo preparados: 3 tubos de caldo Nutritivo, 3 placas de agar Mueller -
Hinton, 3 placas de agar MacConkey y 3 placas de agar Sabouraud.
2. Cultivo de bacterias. (muestra externa)
3. Muestras biológicas de secreciones de piel, de ambiente. (muestra externa)
4. 3 mecheros.
5. 3 asas bacteriológicas
6. Set de coloración Gram.
7. Cinta Parafilm.
2. PROCEDIMIENTO:
1. Cultivar los microorganismos en los medios de cultivo proporcionados, de muestras
biológicas y de ambiente, utilizando las diferentes técnicas de siembra y aislamiento.
2. Colocar en la estufa a 37°C por 24 h.
3. En placas previamente cultivadas observar los microorganismos que hubieran crecido
en los medios de cultivo y discutir las características de las colonias en los diferentes
medios, los medios de cultivo y su composición, sus aplicaciones.
4. Colorear con Gram y observar al microscopio con aceite de inmersión.
5. Esquematizar los resultados
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 2
ACCIÓN DE LOS AGENTES FÍSICOS, QUÍMICOS Y ANTIBIÓTICOS SOBRE LOS
MICROORGANISMOS
I. OBJETIVOS
1. Reconocer el efecto de los agentes físicos: acción de la temperatura (calor húmedo, calor
seco) para el control de los microorganismos.
2. Reconocer el efecto de agentes químicos: pH, alcoholes, fenoles, aldehídos, halógenos.
3. Explicar el fundamento del antibiograma por el Método Kirby y Bauer, realizar la lectura y
su interpretación.
II. MATERIALES
- 6 tubos con caldo peptonado
- Un cultivo de E. coli (forma vegetativa) (material externo)
- Un cultivo de Bacillus subtilis (forma esporulada) (material externo)
- Tubos de ensayo con medios de cultivo y cepas microbianas de Gram positivos
(Staphylococcus aureus) y Gram Negativos (Escherichia coli). (material externo)
- Placas Petri con medios de cultivo: 6 Agar Müeller Hinton y 6 agar Soyabean
- 3 mecheros
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
- 3 pinzas
- 3 asas microbiológicas
Equipos:
- 6 microscopios
- Baño María a 100°C
- Estufa
- Refrigeradora
Esquematice los resultados que se obtienen después de la exposición de los cultivos a las
temperaturas y tiempos indicados. Use colores para representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
1. MATERIAL:
1. Dos cultivos con Escherichia coli (Gram negativo) y Staphylococcus aureus (Gram positivo)
2. Discos de papel filtro embebidos en los agentes: alcohol de 70%, alcohol yodado, violeta de
genciana 1%, fenol 2%, jabón, formol al 2%. Colocar los discos luego de cultivar las placas
con cada microrganismo. Incubar a 37°C por 24 horas. Lectura e interpretación de los halos
que se forman con una regla.
3. Cultivos de microorganismos a pH 2, 7 y 10. Observar que ocurre respecto al crecimiento
bacteriano según el pH, discutir los resultados y esquematizar.
2. PROCEDIMIENTO:
1. Se utilizarán placas con agar Mueller Hinton y cepas de Escherichia coli y Staphylococcus
aureus.
2. Extender en la superficie de la placa con un asa estéril las bacterias a partir de un cultivo joven
en caldo Peptonado. Con una pinza estéril tomar los discos de papel filtro que están
embebidos en el antiséptico o desinfectante y colóquelos en diferentes zonas de la placa.
3. Incube las placas a 37ºC hasta el día siguiente.
4. Observe cada placa y anote las zonas de inhibición del crecimiento, si existen, alrededor del
disco de papel. Mida el diámetro del círculo (halo de inhibición) en el que no haya crecimiento
bacteriano y anote sus resultados para discutirlos.
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice las observaciones, coloque nombres y señale sus partes. Discuta los resultados. Use
colores para representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
2. PROCEDIMIENTO:
1. Usando el espectrofotómetro verificar la densidad estándar de turbidez del tubo 0.5 del
nefelómetro. La absorbancia debe calibrarse a 625 nm y como resultado debemos
obtener de 0,08 a 0,13 para la escala 0.5 de McFarland.
2. Preparar el inóculo con 4 a 5 colonias de idéntica morfología, o de un cultivo puro
reciente. La suspensión debe efectuarse en caldo peptonado o en solución salina hasta
alcanzar una turbidez equivalente a la mitad del tubo 1 de la escala de McFarland (tubo
½ del nefelómetro).
3. Sembrar el inóculo bacteriano en la superficie de placas con agar Müeller Hinton de pH
7.2 a 7.4.
4. Colocar en la superficie de éste de 6 a 9 discos de papel impregnados en el antibiótico,
éste se difunde a partir del disco de manera que inhibe el crecimiento bacteriano.
5. Dejar en reposo la placa durante 20 minutos para obtener una buena absorción del
inóculo y un secado moderado de la misma.
6. Incubar las placas a 37ºC durante 18 a 24 horas, no incubar en ambiente de CO2.
7. La lectura se hace cuidadosamente, interpretando los resultados en función de los halos
de inhibición del crecimiento en torno a los discos colocados en la placa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Los estándares de McFarland son patrones de turbidez basados en suspensiones de sulfato de bario.
La escala de McFarland consta de 11 patrones (desde 0,5 a 10) cada uno de los cuales tiene una
turbidez comparable a la de una suspensión bacteriana con una densidad determinada. Para estimar
la densidad bacteriana de una suspensión se compara visualmente su turbidez con la de los patrones
realizados en la escala de McFarland, utilizando un fondo de contraste.
● https://microbiologia671.wordpress.com/2018/02/21/practica-escala-de-mcfarland/
● https://es.scribd.com/document/431792973/TURBIDIMETRIA-RESUMEN
VII. CONCLUSIONES
VIII. EVALUACIÓN
IX. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 3
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE AGENTES DE PIEL: Staphylococcus, Streptococcus pyogenes,
dermatofitos: Microsporum canis, Trichophyton mentagrophytes
I. OBJETIVOS
1. Reconocer las características morfológicas y de cultivo de los agentes microbianos que
causan infecciones de piel: Staphylococcus, Streptococcus pyogenes y hongos
dermatofitos: Trichophyton mentagrophytes, Microsporum canis.
2. Ejecutar e interpretar las pruebas que se utilizan en la identificación de los agentes
microbianos que causan infecciones de piel.
II. MATERIALES
Staphylococcus aureus
● https://www.clinicord.com/producto/placas-de-agar-sangre/
● https://es.wikipedia.org/wiki/Archivo:Staphylococcus_aureus_agar_sangre,_acercamiento
.jpg
Prueba de catalasa
● La catalasa es una enzima que cataliza la descomposición el peróxido de hidrógeno en agua y
oxígeno. Se encuentra presente en la mayoría de los microorganismos aeróbicos y
anaeróbicos facultativos, excluyendo los estreptococos.
● La prueba se considera positiva cuando se produce una efervescencia rápida con
desprendimiento de burbujas: la enzima catalasa convierte el peróxido de hidrógeno en agua
y oxígeno molecular. Esta prueba se emplea para diferenciar los géneros Micrococcus y
Staphylococcus (catalasa positiva) del género Streptococcus (catalasa negativa).
Catalasa ( - )
Catalasa ( + )
Manitol ( - ) Manitol ( + )
Prueba de la Coagulasa:
Loeb en 1903 fue el primero en describir a esta enzima. Esta prueba se utiliza para diferenciar
microorganismos del género Staphylococcus, por ejemplo S. aureus es coagulasa positivo.
La enzima coagulasa tiene la capacidad de transformar el fibrinógeno en fibrina y de coagular
el plasma, esta enzima simula la actividad de la trombina de la cascada de la coagulación.
Staphylococcus aureus produce dos tipos de coagulasa, una que permanece unida a la pared
celular, también llamada factor de aglutinación o factor reactivo de la coagulasa (FRC), y una
extracelular que se libera en cultivos líquidos. Es por ello que reciben el nombre de coagulasa
unida y coagulasa libre respectivamente.
● Staphylococcus aureus produce la coagulasa, capaz de aglutinar el plasma tratado con oxalato,
citrato o heparina en presencia de un factor contenido en el suero.
● Este factor sérico reacciona con la coagulasa, activando el fibrinógeno y produciendo un
coagulo o trombo de fibrina.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
● Toma de muestra: pelo, piel y uñas: por raspado de piel y uñas. Toma de muestras de pelo con
una pinza. Las muestras se depositan en placas Petri, para luego realizar el examen en fresco
con KOH 20% y realizar los cultivos en agar Sabouraud.
● Colocar una porción de la muestra en una lámina portaobjetos para el Examen Directo con KOH
20% al 40%. Esperar de 15 a 30 minutos y luego observar al microscopio.
● Sembrar en tubos con agar Sabouraud e incubar a temperatura ambiente por 7 a 10 días.
Realizar las lecturas y observaciones de los tipos de colonias, colores, características
microscópicas de Trichophyton mentagrophytes y Microsporum canis. Esquematizar las
observaciones.
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 4
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE NEUMONIA BACTERIANA, TUBERCULOSIS Y SARS-CoV-2
I. OBJETIVOS
1. Identificar, fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para neumonía
bacteriana
2. Identificar, fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para tuberculosis
3. Identificar a Streptococcus pneumoniae y Mycobacterium tuberculosis
II. MATERIALES
● Esputo fresco recién emitido
● Set de coloración Ziehl Neelsen
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
● Set de coloración Gram
● 3 asas bacteriológicas, 3 mecheros
● Láminas portaobjeto
● Mascarilla, guantes
campos.
microscópicos
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
1. Identificar, los métodos de diagnóstico para SARS-CoV-2
2. Fundamentar los métodos de diagnóstico para SARS-CoV-2
3. Interpretar los métodos de diagnóstico para SARS-CoV-2
II. MATERIALES
● 6 lancetas
● Algodón
● Alcohol
● Kit de reactivos para Pruebas Rápidas Inmunocromatográficas para SARS CoV-2 (6
cassettes)
● Mascarilla, guantes
III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
1. Colocar 10 uL de muestra sangre total, suero o plasma en el pocillo de muestra del
dispositivo.
2. Añadir 2 gotas del buffer
3. Esperar 10 minutos el resultado
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
4. Realizar la lectura e interpretar los resultados
Diagnóstico de laboratorio:
A: las técnicas de análisis directo detectan componentes del virus en la muestra del enfermo
(secreciones respiratorias). La RT-PCR permite detectar secuencias específicas del genoma viral; los
inmunoensayos identifican antígenos del virus, para lo que se usan anticuerpos monoclonales
específicos.
B: las técnicas de análisis indirectos buscan los anticuerpos específicos que el sistema inmune del
enfermo produce en respuesta a los antígenos virales
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 5
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL (S.N.C.)
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para infecciones del sistema
nervioso central.
2. Interpretar las alteraciones del líquido cefalorraquídeo según los agentes
infecciosos que afectan: bacterias, hongos, virus, parásitos
II. MATERIALES
● Muestra: líquido cefalorraquídeo (LCR) (muestra externa)
● Set de coloración Ziehl Neelsen
● Set de coloración Gram
● 3 asas bacteriológicas, 3 mecheros
● Láminas portaobjeto y laminillas cubreobjeto
● Cultivos de Neisseria sp (muestra externa)
● Láminas coloreadas de Diplococos Gramnegativos (muestra externa)
● Láminas con Cryptococcus neoformans en tinta china (muestra externa)
● Larvas de Taenia solium (Cisticercus cellulosae) en láminas montadas (3 láminas).
● Mascarilla, guantes.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
1. Observar si el LCR está turbio se puede colocar directamente en lámina, pero si no lo está
mucho, centrifugarlo en tubo estéril por 5 a 10 minutos a altas revoluciones de 3 500 -
5 000 rpm.
2. Transferir el sobrenadante a otro tubo para las pruebas bioquímicas y serológicas.
3. Con el sedimento haber las pruebas microbiológicas: coloración Gram, coloración Ziehl
Neelsen, observación del sedimento
4. La coloración Gram permitirá observar bacterias Gramnegativas y Grampositivas. Por
ejemplo Neisseria meningitidis se observa como diplococos Gramnegativos
intracelulares, dentro de polimorfonucleares; a las enterobacterias o Haemophylus, se
verán como bacilos gramnegativos y en la coloración Ziehl Neelsen a los bacilos ácido
alcohol resistentes, que rara vez se pueden visualizar, siendo el cultivo el más
recomendable en este último caso.
5. También se realiza la observación en fresco para determinar amebas, leucocitos,
hematíes, bacterias, levaduras.
6. Si se sospecha de la presencia de Cryptococcus neoformans, hongo semejante a una
levadura realizar la coloración con tinta china.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
CULTIVOS DE LCR:
El LCR se cultiva tan pronto se recibe, a fin de evitar que las bacterias pierdan viabilidad. Se
utiliza agar sangre o cualquier otro medio de cultivo dependiendo del tipo de microorganismo
que se desea aislar, incubados a 37ºC con CO2 si es necesario, por 24 a 48 horas. El desarrollo
de Neisseria meningitidis se confirma por las pruebas en carbohidratos.
Si se sospecha de una meningitis tuberculosa sembrar en medio Löwenstein Jensen e
incubarlo por más de 15 días a 37ºC, con el tapón flojo de la rosca y examinando cada semana,
dado el crecimiento lento de Mycobacterium tuberculosis.
Si se sospecha de C. neoformans inocular dos tubos con agar Sabouraud incubados a 37ºC por
un mes como mínimo.
Si se sospecha de enterobacterias incluir en los medios una placa de Mac Conkey y confirmar
luego por los métodos para enterobacterias.
Las pruebas de laboratorio que se realizan puede ser con suero o con LCR. El análisis del LCR
suele estar alterado cuando la enfermedad está activa. Puede aparecer pleocitosis
mononuclear, aumento de proteínas y glucosa normal o disminuida si los cisticercos se localizan
cerca o en los ventrículos cerebrales.
Por otra parte, mediante el método ELISA pueden encontrarse anticuerpos para cisticercosis
en sangre y LCR. Es el método más empleado, aunque su sensibilidad es menor que el Western
Blot y existen reacciones cruzadas con antígenos de otros helmintos. La posibilidad de
serologías negativas suele ser mayor cuanto menor número de lesiones aparecen en las
pruebas de imagen.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 6
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
ENTEROBACTERIAS, Helicobacter pylori, Vibrio cholerae
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para enterobacterias,
Helicobacter pylori y Vibrio cholerae.
2. Interpretar la técnica del coprocultivo y los métodos de diagnóstico de Helicobacter
pylori y Vibrio cholerae.
II. MATERIALES
● Muestra de heces recién emitidas u obtenidas por hisopado rectal, recolectadas en
recipientes limpios y secos, sin mezclarse con orina.
● Cepas de Vibrio cholerae.
● Medios de cultivo para el coprocultivo: 3 placas de agar Mc Conkey, 3 placas de agar
Salmonella- Shigella.
● 6 microscopios.
● 6 hisopos estériles.
● 3 asas en punta.
● 3 tubos de Agar TSI, LIA y citrato.
● 3 placas de agar TCBS.
● Mascarilla, guantes, mandil.
III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
1. Transportar al laboratorio para proceder a la siembra inmediatamente, no debe
permanecer más de una hora en el ambiente. De no poder transportar la muestra
rápidamente se coloca en un medio de transporte (Cary Blair o Stuart) que mantienen
la viabilidad de las bacterias, para su posterior procesamiento
2. Realizar el examen macroscópico de la muestra: la consistencia, calor, grado de fetidez,
presencia de pus, moco, sangre, etc.
3. Realizar el examen microscópico directo de la muestra, nos permitirá realizar la
búsqueda de parásitos u hongos. Con este examen se informará sobre la presencia de
piocitos, hematíes, blastosporas e hifas de Candida.
4. La siembra de las heces se hace, lo más pronto y directamente en las placas que
contienen los medios de aislamiento o en los tubos con medio de enriquecimiento.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
5. Se mezcla la muestra con el medio de enriquecimiento elegido, se lleva a la incubadora
a 37ºC, pudiendo hacerse el plaqueado a las 48 horas y a los 5 días.
6. Para Vibrio cholerae, se usa Agua Peptonada Alcalina con pH 8,5, incubándose por 6 a 8
horas, luego se siembra en el medio T.C.B.S. (Tiosulfato, citrato, bilis, sacarosa).
8. La muestra de heces obtenida se siembra en los medios selectivos e indicadores Mac
Conkey, S.S.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 7
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
PROTOZOARIOS INTESTINALES
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para enteroparásitos: método
Directo, método de concentración de Telemann, coloración Kinyoun.
2. Identificar los protozoarios intestinales: Giardia lamblia, Entamoeba histolytica,
Cryptosporidium.
II. MATERIALES
1. Muestras de heces frescas (traen los estudiantes, 3 por grupo)
2. Guantes
3. Recipientes estériles descartables
4. 6 palitos de madera
5. Solución salina y Lugol
6. Láminas portaobjeto y Laminillas cubreobjeto
7. 8 microscopios
8. 3 copas fondo cónico
9. 6 tubos de fondo cónico
10. Reactivos para Telemann
11. Reactivos para Kinyoun
a. La muestra de heces debe recogerse libre de orina, en caso de estreñimiento usar laxante
salino. Si las muestras no se recogen y manipulan adecuadamente antes de examinarlas, su
valor para un diagnóstico exacto será escaso o nulo, sobre todo en el caso de los protozoos.
Los trofozoítos comienzan a degenerar al cabo de 1-2 horas de la defecación no pudiendo
diferenciarlos.
b. Recolectar la muestra antes del uso de antiparasitarios, o hasta 5 días después.
c. Colóquese la muestra en un frasco de vidrio o de plástico de boca ancha.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
d. Transportar al laboratorio y proceder a su examen de inmediato. Si las muestras no pueden
examinarse en cuanto llegan, colóquese en el refrigerador (4-5°C) o en la zona más fresca y
sombreada del laboratorio.
e. De no ser posible su observación preservarla en líquidos conservadores o en refrigeración
de 4 a 5°C.
EXAMEN MICROSCÓPICO
POR FLOTACION: las soluciones utilizadas tienen mayor densidad que los huevos, quistes,
larvas, por lo que estos flotan en la superficie de la solución, tomándose la muestra con una
laminilla o pipeta.
POR SEDIMENTACIÓN:
a) Baermann modificado en copa: se utiliza para recuperar formas móviles de los parásitos:
larvas y trofozoitos, por que usa solución salina, también se recuperan quistes y huevos.
Colocar la muestra de heces en un colador con gasa y dejar que se humedezca la muestra,
dejar reposar por 45 a 60 minutos, las formas móviles descienden y se toman con una pipeta
del fondo de la copa, observar entre lámina y laminilla
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 8
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
HELMINTOS INTESTINALES
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para enteroparásitos: técnica de
sedimentación rápida, método de concentración de Baermann, prueba del Parche o Test
de Graham.
2. Identificar los helmintos intestinales: Enterobius vermicularis, Ascaris lumbricoides,
Fasciola hepatica.
II. MATERIALES
1. Muestras de heces (traen los estudiantes, 3 por grupo)
2. Guantes
3. Recipientes descartables
4. Palitos de madera
5. Solución salina y Lugol
6. Láminas portaobjeto y cubreobjeto
7. 8 microscopios
8. 3 copas fondo cónico
9. 6 tubos de fondo cónico
10. Reactivos para método de Baermann.
11. Láminas con cinta scotch para test de Graham (traen los estudiantes, individual)
12. Gasa y colador
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 9
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para infecciones del tracto
urinario.
2. Interpretar el urocultivo e identificar los agentes infecciosos que causan ITU: Escherichia
coli, Proteus, Staphylococcus.
II. MATERIALES
1. Orina aséptica (estudiantes recolectan de pacientes, 5 por grupo)
2. 6 tiras reactivas para orina
3. Medios de cultivo: 3 placas con agar Sangre, 3 placas con agar Mc Conkey
4. Set de coloración Gram
5. Láminas, laminillas
6. 9 tubos de ensayo
7. 3 asas bacteriológica
8. 3 mecheros
9. Láminas coloreadas con gérmenes causantes de ITU (muestra externa)
10. 1 centrífuga
11. 1 estufa
12. 8 microscopios
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 11
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DE TRANSMISIÓN SEXUAL
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para infecciones de transmisión
sexual: gonorrea, sífilis, candidiasis.
2. Interpretar los resultados de las pruebas de diagnóstico para Neisseria gonorrhoeae,
Treponema pallidum, Candida albicans.
II. MATERIALES
1. Muestras de secreciones genitales (traen los estudiantes 5 por grupo)
2. Set de coloración Gram
3. 3 asas bacteriológicas
4. Láminas, laminillas
5. 6 hisopos estériles
6. Láminas coloreadas de secreción vaginal y uretral
7. Medios de cultivo con Neisseria, Candida
8. Reactivo de VDRL
9. Reactivo de RPR
10. Solución salina fisiológica (SSF)
11. 6 agujas hipodérmicas
12. Algodón, alcohol
13. 8 microscopios
III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
URETRITIS EN EL VARON:
RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS:
1. Introducir en la uretra un fino escobillón o un asa bacteriológica estéril haciéndolo girar
antes de extraerlo, para N. gonorrhoeae las torundas de algodón deben estar tratadas con
carbón o ser de alginato de calcio o de dacrón. Al usar los escobillones usar los ordinarios
de algodón.
2. La muestra debe ser inoculada inmediatamente en los medios agar sangre. De no poder
incubarse inmediatamente conservar la muestra en medio de transporte de Amies o Stuart
sólo por 12 horas como máximo y a 30ºC.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
3. Colocar las placas en una atmósfera húmeda y con CO2 de 5 al 10%. Incubarse a 37ºC por
24 a 48 hr.
4. Con las secreciones obtenidas se realizan extensiones en lámina portaobjeto para la
coloración Gram o con azul de metileno.
Los frotis con presencia de diplococos gramnegativos intracelulares son muy sugestivos de
blenorragia, la sensibilidad y especificidad del Gram en blenorragia del varón pasan del 98%
Los cultivos luego de 24 o 48 horas muestran colonias de 0,5 a 1 mm de diámetro, opacas, elevadas,
con coloración entre gris y blanca (plomiza).
La identificación presuntiva de N.gonorrhoeae se basa en la prueba de oxidasa y en la observación
de diplococos en el Gram. Se confirma con pruebas con hidratos de carbono o con la incubación en
medios no enriquecidos como agar común e incubados a temperatura ambiente, si no hay
crecimiento de las colonias sospechosas se trata de N. gonorrhoeae, pero si crecen en las
condiciones señaladas se trata de otras especies de Neisserias.
Examen en fresco:
La solución salina fisiológica que usa esta técnica permite observar a Trichomonas vaginalis en
movimiento, células de levaduras, presencia de leucocitos y células epiteliales.
Coloración Gram:
Permite diferenciar los gérmenes grampositivos y gramnegativos, la flora predominante en la
vagina, la presencia o no de los lactobacilos. Las neisserias se observan como diplococos
gramnegativos intracelulares dentro de los polimorfonucleares, en casos agudos. Se observan
también levaduras tanto blastoconidias como pseudohifas y células “clave” que corresponde a
Gardnerella vaginalis.
La sífilis es una enfermedad infecciosa con afectación sistémica causada por el microorganismo
Treponema pallidum , muchas espiroquetas no pueden ser cultivadas in vitro, necesitando medios
altamente enriquecidos y en un tiempo determinado. Los conejos son los animales de laboratorio
más utilizados para mantener organismos virulentos.
En la Etapa Primaria:
1. Detección directa de T. pallidum: en examen en fresco con microscopía de campo oscuro. Es el
método de diagnóstico más rápido y directo en las fases primaria, secundaria y congénita precoz. La
muestra ideal es el exudado de las lesiones, como el chancro, condiloma plano y lesiones mucosas,
ya que contienen gran cantidad de treponemas; también pueden observarse a partir del material
aspirado de los ganglios linfáticos. La muestra debe ser lavada con suero salino sin aditivos
bactericidas. La treponema aparecerá moviéndose en espiral con una ondulación característica
sobre su punto medio. Es importante señalar que, en las lesiones bucales o anales es difícil
diferenciar T. pallidum de otras treponemas no patógenas, por lo que la técnica de campo oscuro
no es aplicable. Para excluir el diagnóstico se requieren tres exámenes negativos.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Técnicas de biología molecular: Los métodos de amplificación de ácidos nucleicos aumentan la
sensibilidad de los métodos de detección de T. pallidum, siendo útiles en los casos en que el resto
de pruebas muestran una baja sensibilidad, como es el caso del diagnóstico de la sífilis congénita,
neurosífilis, en la sífilis primaria temprana y cuando existe la necesidad de distinguir entre una
reinfección y una infección antigua.
En la Etapa Secundaria:
Detección indirecta de T. pallidum: por pruebas serológicas, se utiliza en la sífilis secundaria y
neurosífilis.
Se detectan dos tipos de anticuerpos: los llamados reagínicos, no específicos o no treponémicos, y
los treponémicos o específicos (IgG e IgM).
Pruebas reagínicas o no treponémicas. Los anticuerpos reagínicos son de tipo IgG e IgM dirigidos
frente a un antígeno lipoideo que es el resultado de la interacción de T. pallidum con los tejidos del
huésped (cardiolipina-colesterol-lecitina). Aunque los resultados falsos positivos son bastante
frecuentes, son los mejores métodos de diagnóstico serológico en la sífilis latente temprana y en la
tardía. Las pruebas reagínicas se dividen en:
En cuanto a otras pruebas treponémicas, el TPHA es una técnica más económica y fácil de realizar
que el FTA-Abs. Consiste en una hemaglutinación pasiva con hematíes de cordero sensibilizados con
un extracto antigénico de T. pallidum. Utiliza un absorbente para aumentar la especificidad, pero es
menos sensible en la enfermedad temprana. Se encuentran comercializados varios equipos de ELISA
indirecto que utilizan como antígeno extractos de T. pallidum sonicados, incluso ha aparecido alguno
con antígeno recombinante. La mayor ventaja de estos métodos radica en su capacidad de procesar
grandes cantidades de muestras y en que la lectura es objetiva, ya que esta automatizada.La prueba
western-blot se utiliza para aquellos casos en los que el FTA-Abs es indeterminado y se
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
necesita aclarar la duda. Sólo la llevan cabo escasos laboratorios y normalmente se trata de centros
de referencia. El TPI es una prueba de inmovilización de T. pallidum vivos, observables por
microscopía de campo oscuro, que determina la capacidad de los anticuerpos y el complemento del
paciente para inmovilizar células de T. pallidum. Es una prueba bactericida, y muy costosa, al exigir
el mantenimiento de T. pallidum en cultivo en conejos, razón por la que sólo está al alcance de
algunos laboratorios. La búsqueda de anticuerpos de tipo IgM queda relegada a la sífilis congénita,
y no se utiliza para el diagnóstico de la sífilis de transmisión sexual. Se puede realizar con las pruebas
de inmunofluorescencia, ELISA y western-blot.
Como regla general, una prueba treponémica negativa indica la ausencia de infección, pasada o
presente. La mayoría de la persona tratada adecuadamente permanecen positivas para las pruebas
treponémicas por muchos años, y muchas por el resto de su vida. Al igual que en las pruebas no
treponémicas, en las pruebas específicas pueden presentarse falsos positivos, aunque en mucha
menor medida, como en el lupus eritematoso, usuarios de drogas, edad avanzada, enfermedades
del colágeno, enfermedad de Lyme, etc.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Pruebas para la neurosífilis: el estudio del LCR es esencial en los pacientes con signos y síntomas
neurológicos y se recomienda también en aquéllos con sífilis no tratada de duración desconocida o
mayor de un año. Los parámetros biológicos de actividad son: pleocitosis de >5 células/µl,
proteinorraquia superior a 45 mg/dl y VDRL positivo.
Las pruebas serológicas para la neurosífilis han evolucionado a lo largo del tiempo. El VDRL tiene
alta especificidad, pero es poco sensible. La sensibilidad es elevada en la sífilis meningovascular y en
la parálisis general progresiva, pero baja en la neurosífilis asintomática y en los cuadros de tabes
dorsal. Es la única prueba normalizada para ser utilizada en LCR. Actualmente se está evaluando la
prueba de FTA-Abs en LCR, con buena expectativas. Un resultado negativo de la prueba de FTA-Abs
u otra prueba treponémica en suero descarta una neurosífilis. La PCR y el inmunoblot de IgM son
específicas y sensibles, pero la mayor experiencia ha sido con el índice de anticuerpos intratecales
frente a T. pallidum (ITPA):
Falsos positivos en la sífilis. En una población seleccionada esta situación se produce en menos del
1% de los casos y guardan relación con un estímulo inmunológico continuado. Pueden ser agudas o
transitorias (<6 meses) o crónicas (>6 meses). Rara estos falsos positivos de las pruebas no
treponémicas tienen un título superior a 1/8. Un VDRL o RPR positivo puede ser verificado y la sífilis
excluida mediante una FTA-Abs o TPHA. Cabe incluso la posibilidad de que estas técnicas den
resultados falsos positivos, en cuyo caso se distinguirían por el patrón arrosariado de la
inmunofluorescencia sobre los treponemas y, sobre todo, con una prueba funcional de TPI. Entre
las causas de resultados falsos positivos están las enfermedades infecciosas, como el paludismo, la
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
infección temprana por el VIH, o por Mycoplasma pneumoniae, etc. También pueden producirse en
los usuarios de drogas, conectivopatías, vacunación reciente, entre otros.
PRUEBAS NO TREPONEMICAS
LECTURA RESULTADO
Cualquier enfermedad por treponemas causa un VDRL positivo: sífilis, frambesia, pinta, bejel, fiebre
recurrente, leptospirosis, enfermedad de Lyme y otras borreliosis. Resultados reactivos también
resultan con otras enfermedades infecciosas, como tuberculosis, lepra, neumococo, endocarditis
infecciosa, mononucleosis infecciosa, neumonías virales, sarampión, varicela, paludismo y
tripanosomiasis. Algunas enfermedades no infecciosas que pueden producir un VDRL reactivo
incluyen las anemias hemolíticas autoinmunes, enfermedades del colágeno, síndrome
antifosfolipídico primario, ciertas inmunizaciones y el embarazo.[] Los falsos positivos, por lo general,
no superan los títulos de dilución de 1/8; y pueden ser transitorios o permanentes, según persistan,
o no, más de 6 meses.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
El resultado no reactivo (negativo) tampoco descarta sífilis, porque durante el período de incubación
de la enfermedad y hasta 15 días después de la aparición del chancro sifilítico, aún no se han
producido anticuerpos. Adicionalmente, en pacientes con títulos muy altos de anticuerpos
anticardiolipina (1 ó 2 % de los pacientes con sífilis) se observa una reacción prozónica que causa
falsos negativos.
LECTURA RESULTADO
* Aglutinación visible a los bordes Reactivo
* Sin aglutinación o se forma un botón No reactivo
de partículas de carbón al centro.
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 12
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE VAGINOSIS BACTERIANA
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para vaginosis bacteriana.
2. Interpretar los resultados de las pruebas de diagnóstico para agentes de vaginosis
bacteriana: Gardnderella vaginalis, Chlamydia, Trichomonas vaginalis
II. MATERIALES
- Muestras de secreciones genitales (Traen los estudiantes)
- Set de coloración Gram
- Láminas, laminillas
- 6 hisopos estériles
- 6 tubos con SSF estéril
- Láminas coloreadas de secreción vaginal
- Algodón, alcohol
- 8 microscopios
Tres de los cuatro criterios deben estar presentes; establece el diagnóstico de vaginosis bacteriana
en el 90% de las mujeres afectadas.
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 13
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE VIRUS ASOCIADOS DE TRANSMISIÓN SEXUAL
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para VIH, hepatitis B y C,
Papiloma virus
2. Identificar los métodos para diagnóstico, confirmación y seguimiento de pacientes VIH
positivos
II. MATERIALES
1. Sangre
2. 6 agujas hipodérmicas
3. 6 tubos de ensayo
4. 6 tubos con gel separador
5. 6 pruebas inmunocromatográficas para VIH, hepatitis B y C
6. 3 capuchones
7. 3 ligaduras
8. Guantes y mascarillas
La detección por métodos directos o indirectos del VIH ha permitido no solo reconocer a las
personas infectadas y establecer medidas preventivas adecuadas, sino que además
constituye una ayuda esencial en el seguimiento de los pacientes para conocer el pronóstico
de la enfermedad y la eficacia del tratamiento utilizado.
MÉTODOS INDIRECTOS
La detección de anticuerpos específicos anti-VIH es la forma habitual de diagnosticar una
infección por VIH. Los métodos se dividen en: a) pruebas de screening, diseñadas con un
máximo de sensibilidad para detectar todas las muestras positivas, y b) pruebas
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
confirmatorias, caracterizadas por su especificidad y que permiten asegurar la positividad
de una muestra previamente reactiva con un test de screening. Ambos ensayos realizados
de forma secuencial obtienen resultados excelentes en cuanto a exactitud y
reproducibilidad y tienen más del 99% y 95% de sensibilidad y especificidad
respectivamente.
Pruebas de screening
Las técnicas inmunoenzimáticas (EIA) son las más empleadas debido a su metodología
relativamente simple, alta sensibilidad, nivel de automatización y diseño para realizar un
gran número de tests de forma simultánea. En principio se basaron en la utilización de
lisados víricos (ensayos de primera generación), y fueron de enorme utilidad para conocer
el alcance de la epidemia de SIDA en los primeros años y establecer las primeras medidas
preventivas. Posteriormente fueron sustituidas por EIA que utilizaban antígenos más
específicos obtenidos por recombinación genética o mediante síntesis (ensayos de segunda
generación) utilizando EIA indirectos o competitivos.
Procedimiento:
1. Adicionar dos gotas de Buffer, una frente a la otra, dentro del dispositivo.
2. Adicionar una gota de suero del paciente, sobre cada gota de buffer, usando una pipeta por
cada muestra.
3. Adicionar una gota de Buffer.
4. Adicionar una gota de solución del lavado.
5. Adicionar una gota de conjugado de oro.
6. Adicionar una gota de solución del lavado.
7. Leer el resultado después de dos minutos.
Interpretación:
Positivo: Si las dos muestras procesadas se observan de color rojo quiere decir que la muestra
contiene anticuerpos del HIV 1 & 2.
Negativo: Si sólo una de las muestras es visible la muestra no contiene anticuerpos detectables
para el HIV 1 & 2.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
DIAGNOSTICO DE SIDA- VIH ( Según MINSA)
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 14
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES METAXÉNICAS
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para enfermedades
metaxénicas: Enfermedad de Carrión, peste, dengue.
2. Identificar los agentes de enfermedades metaxénicas: Bartonella bacilliformis, Yersinia
pestis.
II. MATERIALES
● Aspirado de bubón
● Esputo
● Suero
● 8 lancetas
● Algodón, alcohol
● Láminas
● Colorantes Wright, Giemsa
● 6 tubos tapa morada
● 6 tubos tapa amarilla con gel separador
● Sistema vacutainer
● Agua tamponada
● 8 microscopios
https://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Manual_Bacteriologico.pdf
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRÁCTICA N° 15
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES METAXÉNICAS: Malaria, leishmaniasis,
enfermedad de Chagas
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para enfermedades
metaxénicas: malaria, leishmaniasis, enfermedad de Chagas.
2. Identificar los agentes de enfermedades metaxénicas: Plasmodium, Leishmania,
Trypanosoma.
II. MATERIALES
● 8 lancetas
● Sangre
● Algodón, alcohol
● Láminas
● Colorantes Wright, Giemsa
● Agua tamponada
● 8 microscopios
40X
Examen de sangre al fresco
2. Frotis sanguíneo:
Depositar una gota en un extremo de la lámina y realizar un frotis a lo largo de la misma con
una segunda lámina haciendo un ángulo de 45 grados. El desplazamiento debe ser con
rapidez y uniformidad para obtener un frotis delgado que permita observar las formas
evolutivas de los parásitos. Colorear con Giemsa o Wright y observar
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
100X
Trofozoitos anulares en frotis
3. Método de concentración:
Método de la gota gruesa: este método permite concentrar los hemoparásitos en varias
capas de eritrocitos, se afirma que más o menos se superponen 10 a 12 capas de eritrocitos,
de allí que concentra los parásitos. Permite observar a los hemoparásitos: Trypanosoma y
Plasmodium. Se procede de la siguiente manera:
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
1. MATERIAL
1. Raspado de lesiones de piel, improntas o cortes de tejidos con bordes activos
(traer los estudiantes)
2. Láminas portaobjetos
3. Set de coloración Giemsa o Wright
4. Bisturí
5. 3 asas bacteriológica
6. 3 mecheros
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
2. PROCEDIMIENTO
1. Si las lesiones son sospechosas de leishmaniosis tomar un raspado de los bordes de
la lesión utilizando un palito de madera estéril o un bisturí y colocarlo por extensión
en una lámina portaobjetos.
2. Si se toma biopsia usar infiltración con anestésico local Xilocaina al 10%. La muestra
extendida fijar al calor suave y colorear con Wrigth o Giemsa.
3. Si se usa Wrigth no requiere de fijación previa, si se usa Giemsa fijar previamente
con metanol, el tiempo de coloración es de 15 minutos en ambos casos.
4. Observar las láminas a 100x (con objetivo de inmersión) buscando la forma
amastigota de Leishmania aisladas o dentro de los macrófagos fagocitadas. Se
puede proceder al cultivo en medio NNN (Novy, McNeal y Nicolle) de material
obtenido de los nódulos con ayuda de una jeringa, se observa el cultivo a partir de
15 días de incubación a temperatura ambiente o a 22°C la forma promastigota.
ESQUEMAS DE LA PRÁCTICA
Esquematice los resultados, señalando lo que observa. Interpretar los resultados. Use colores para
representar lo que observa.
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
V. EVALUACIÓN
VI. BIBLIOGRAFÍA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
ANEXOS
A. RÚBRICA DE EVALUACIÓN