CROMATOGRAFÍA

• Conjunto de técnicas separativas, cuya finalidad

es obtener separadas distintas fracciones
(sustancias) que lleva una mezcla para su
posterior identificación
• El nombre es debido a que la primera
separación por cromatografía se realizó con
pigmentos vegetales (Tswett, botánico ruso, en
1906, separó clorofila con hexano como fase
móvil y carbonato cálcico como fase fija)

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 CROMATOGRAFÍA
• Las separaciones CROMATOGRÁFICAS están
basadas en la adsorción selectiva de los
distintos componentes de una mezcla sobre
varios adsorbentes.
• Es necesario distinguir en la técnica dos fases:
• la fase estacionaria o medio adsorbente (fase
fija o soporte)
• la fase móvil

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 CROMATOGRAFÍA
• FASE ESTACIONARIA:
– “geles” que tienden a retener a las sustancias
disueltas de la muestra debido a su estructura
esponjosa
– Puede ser sólida o líquida
• FASE MÓVIL:
– Se desplaza a través de los huecos o sobre la
superficie de la fase fija arrastrando a su paso a los
distintos componentes de la muestra
– Puede ser líquida o gaseosa
• Las sustancias de la mezcla se separan dependiendo
de la distinta afinidad que tengan por la fase móvil y
su capacidad por moverse en el gel

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 CROMATOGRAFÍA
• La cromatografía nos va a servir para:
– la separación y posterior identificación de sustancias
– para su purificación en mezclas complejas
– para el aislamiento

• Se pueden cuantificar las sustancias separadas

utilizando técnicas como la espectrofotometría o
las técnicas inmunológicas

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 Cromatografía: elución

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 CROMATOGRAFÍA de intercambio
iónico
• La fase estacionaria es una resina catiónica
o aniónica y la fase móvil son sustancias
tampón
• La resina se elige cargada con un ión que
sea capaz de retener la sustancia a separar
en la muestra.
• La elución de la sustancia retenida se
provoca, posteriormente, cambiando el pH
de la resina mediante una disolución
tampón.
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