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Seminario 1.

TCNICA HISTOLGICA
Incluye todo el proceso desde que obtenemos una muestra hasta que podemos observarla al microscopio obtencin de muestras procesado de muestras: fijacin, inclusin en parafina o congelacin, corte, tincin y montaje

OBTENCIN DE MUESTRAS
es la recogida rganos, fragmentos de rganos, tejidos o clulas para su estudio histolgico o histopatolgico puede ser de diferentes tipos: pieza quirrgica, biopsia, citologa, autopsia

PIEZA QUIRRGICA QUIR

se obtiene a partir de individuos vivos en el transcurso de la ciruga suelen ser piezas grandes (incluso rganos completos) incluyen zonas sanas y zonas enfermas hay que seleccionar las zonas a estudiar finalmente obtenemos cortes o secciones histolgicas

BIOPSIA

Prof. Dr. Ignacio M Jimena Medina Syllabus Citologa e Histologa

finalmente obtenemos cortes o secciones histolgicas

a partir de individuos vivos de manera reglada o durante la ciruga suelen ser piezas ms pequeas biopsia intraoperatoria:

se obtiene una muestra en el acto quirrgico se enva inmediatamente al laboratorio para que el patlogo la diagnostique el cirujano actuar en funcin del diagnstico que haya recibido suele tardar entre 10-15 minutos

AUTOPSIA

necropsia obtencin de muestras a partir de un cadver podemos obtener diferentes tipos de muestras finalmente obtenemos cortes o secciones histolgicas existen 2 tipos: - clnica:
la realiza el patlogo sirve como control de calidad en el hospital autorizada por los familiares

- mdico-legal

la realiza el forense ordenada por un juez muerte en circunstancias extraas

conjunto de clulas aisladas que se extienden en un portaobjetos podemos obtenerlas a patir de improntas o extensiones citolgicas

CITOLOGA CITOLOG

IMPRONTA

se obtiene por contacto directo de un rgano con un portaobjetos el rgano en fresco ha sido previamente seccionado se utiliza en rganos linfoides y en algunas biopsias intraoperatorias finalmente obtenemos una citologa

EXTENSIN CITOLGICA

conjunto de clulas aisladas procedentes de un rgano, lquido o secrecin orgnica se extienden sobre un portaobjetos y obtenemos una citologa existen diferentes procedimientos: - citologa exfoliativa (p.e cervico-vaginal)
- frotis sanguneo - puncin aspiracin con aguja fina (PAAF) - lquidos y secreciones: lquido asctico, lquido pleural, lquido cefalorraqudeo, orina, esputo

Citologa cervico-vaginal Citolog cervico-

es un tipo de citologa exfoliativa se denomina tambin tcnica de Papanicolau (Pap) obtenemos muestras del cuello uterino con una esptula importante en el diagnstico precoz del cncer de cuello obtenemos una triple toma del cuello se extienden sobre un portaobjetos y obtenemos una citologa

Frotis sanguneo sangu


es un mtodo sencillo y rpido para estudiar las caractersticas de las clulas sanguneas extendemos una gota de sangre sobre un portaobjetos el resultado es una citologa

PAAF (Puncin Aspiracin con Aguja Fina) (Punci Aspiraci

obtenemos material mediante una puncin con aguja puede ser de lesiones palpables o no palpables (control de imagen) el material obtenido: el resultado es una citologa
- se extiende directamente sobre el portaobjetos - si es lquido se centrifuga y extendemos el pellet

Lquidos y secreciones

lquido cefalorraqudeo esputo, orina lquido pleural, lquido asctico el material obtenido: - se extiende directamente sobre el portaobjetos - si es lquido se centrifuga y extendemos el sedimento (pellet) el resultado es una citologa

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Diferencias entre corte histolgico y citologa histol citolog


Corte histolgico

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fragmento de un rgano colocado en un portaobjetos para su observacin microscpica se mantiene la cohesin celular el procesado es laborioso y suele ser largo se obtienen a partir de: biopsias, autopsias, piezas quirrgicas

Citologa

conjunto de clulas independientes que se colocan en un portaobjetos para su observacin microscpica no hay cohesin celular cohesin celular el procesado es corto y sencillo se obtienen a partir de: improntas, extensiones citolgicas

PROCESADO DE MUESTRAS PARA CITOLOGA


extensin de la muestra sobre un portaobjetos ( el resultado es una capa unicelular)
fijacin de la muestra: - para evitar procesos de autolisis y crecimiento bacteriano - puede ser por mtodos fsicos (al aire, calor) o qumicos (alcohol, formol, fijadores especiales) transporte: es fundamental que sea correcto tincin: se utilizan diversos colorantes para podes observarla al microscopio observacin microscpica

Extensin de la muestra

Transporte Tincin de la muestra Observacin microscpica Fijacin

PROCESADO DE MUESTRAS PARA CORTES HISTOLGICOS


para detener el proceso de autolisis de los tejidos para darle dureza al tejido y poder obtener secciones muy finas para darle color y poder observarlo al microscopio existen dos opciones: - procesado de muestras en parafina - procesado de muestras en congelacin obtenemos cortes histolgicos

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Procesado de muestras en congelacin


es mucho ms rpida (10-15 minutos) se utiliza en biopsias intraoperatorias no destruye enzimas como el formol la congelacin se realiza en nitrgeno lquido (-160 C) los cortes se obtienen en un criostato (4-6 m) la tincin ms utiliada es lahematoxilina-eosina (H-E)

Procesado de muestras en parafina


es el ms utilizado incluye varias etapas: fijacin, tallado, inclusin, corte y tincin puede tardar 2-3 das

Fijacin

ha de ser rpida evita procesos de autolisis y crecimiento de microorganismos el fijador ms utilizado es el formol un defecto de fijacin no puede corregirse
Tallado
seleccionamos las reas para estudio microscpico se introducen en cassettes deben estar perfectamente identificados

Fijacin

Congelacin en nitrgeno lquido

Ciostato

Ciostato

Tincin
para colorear clulas y tejidos la tincin ms utilizada es la hematoxilina-eosina (H-E)
Tallado Portaobjetos teidos

Obtencin de cortes Inclusin en parafina


para darle dureza al tejido y poder obtener secciones muy finas sustituimos el agua de las clulas por parafina (para ello se requiere el paso por lquidos intermedios) utilizamos un procesador de tejidos confeccionamos bloques para cortarlos
Procesador de tejidos

se realizan en un microtomo son muy finos (4-6 m) para facilitar el paso del colorante para facilitar la observacin microscpica

Confeccin de bloques Microtomo