S| ESCOLA TECNICA HEMATOLOGIA Il LOGIN: SENHA: ALUNO(A STURMHEMATOLOGIA 2 AULA 1 Teese Série Branca Oestudo da série branca é de fundamental importéncia no Hemograma Completo, além do estudo das alteracées, é importantissimo também o estudo da morfologia normal dos leucécitos. A série branca compreende os glébulos brancos que sao divididos em: linfécitos, neutrofilos, eosinéfilos, bas6filos e monécitos. Vale ressaltar que o valor de referéncia para leucécitos totais ¢ de 4,000 - 10.000 uL. E importante conhecer as funcées da série branca, que sao células de defesa. Que se apresentam aumentadas em diferentes situacées fisiolégicas e patolégicas. Essas células possuem diversas funcées de acio entre elas, podem fazer fagocitose, produzem anticorpos e produzem substancias sinalizadoras. A maioria dos hemogramas, cerca de 70%, realizados na rotina laboratorial é normal, por isso além de saber sobrea as alteracdes 0 técnico deve saber a morfologia normal, neste momento vamos nos atentar muito mais para a morfologia do que propriamente para a funcao de cada um: + Neutréfilo segmentado S40 conhecidos como polimorfonucleares e compreendem cerca de 50 a 70% das células circulantes. Os neutréfilos sao capazes de deixar os vasos sanguineos e entrar nas células, onde fagocitam bactérias e substancias estranhas ao organismo. As células precursoras dos neutréfilos segmentados sao os bastonetes. ‘A leucocitose de neutréfilos pode indicar uma infeccao bacteriana, visto que estes leucécitos participam da fagocitose de bactérias e sao altamente estimulados numa infeccao deste tipo. Os neutréfilos sao células que dao o aspecto purulento nas inflamacées, aquele “liquido leitoso” do pus. pus é formado por substancias bacterianas, bactérias mortas, sangue, mas principalmente por neutrofilos que morreram em combate. Leucécito mais numeroso (50%). Ao observar o citoplasma desta célula, observamos numerosas granulacées finas e acinzentadas ou lids, nticleo que apresenta 3-5 segmentos de cor roxa. Referéncia: (2.000 - 7.000 uL). e+ Neutréfilo bastonete Forma jovem do Neutréofilo, observada acima da normalidade em casos de infec¢ao aguda. Os granulos neutréfilos sao finos e de coloragao acinzentada facilmente observado em citoplasma. O Nucleo de cor roxa, s. © nticleo, em forma de bastao em "C” ou “S” sem segmentos. Referénci: 840 uL te 9.) Quando hd o aumento de células jovens, neste caso, o bastao, é relatado como desvio a esquerda DESVIO A ESQUERDA OMOECO So encontrados fazendo parte de aproximadamente 3% dos leucécitos do sangue. Possuem granulos em seu citoplasma e seu nucleo geralmente possuem dois lobos conectados por um filamento. Sua principal fungao nao é a fagocitose, mas sim a liberacao da PBM (proteina basica maior). Esta proteina é toxica para parasitas de humanos e causam a sua morte. Se o sangue do individuo estiver com a taxa de eosinéfilos alta (leucocitose eosinofilica) é um grande indicador de INFECCAO PARASITARIA OU DE REACAO ALERGICA. Citoplasma com numerosas granulacdes grosseiras e arredondadas de cor alaranjada que confere a cor & célula. Possui o nticleo de coloracao roxo onde observamos 2 ou mais segmentacées. Valor de referéncia: 20 - 500 uL * Basot Possuem granulos grandes, liberam histamina que contribui para as respostas alérgicas dilatando os vasos sanguineos e so encontrados em pouca quantidade no sangue. Nao realizam fagocitose. Sao a terceira célula que possui granulos e estes séo 0 que nos leva a identificar esta célula, pois sao granulagées grosseiras a ponto de esconder o nucleo, tem coloragao roxo e suas granulagées so bem escuras. Valor de referéncia: 20 - 100 uloe Nao possuem granulos (agranulécitos), possuem um Unico nuicleo e sao células grandes. Sdo capazes de entrar no tecido conjuntivo, onde se desenvolvem em grandes células denominadas MACROFAGOS. A presenta nticleo usualmente com forma bastante (irregular), raramente arredondado ou ovalado. Citoplasma levemente baséfilo e abundante. Pode apresentar vactiolos citoplasmaticos. Valor de Referéncia: 200 - 1.000 ul + Linfécito Segunda célula mais numerosa apés os neutréfilos. Compreende cerca de 30% dos glébulos brancos em circulagao, s40 pequenos, sendo apenas um pouco maiores que as hemacias. Sao células importantes nas respostas imunes especificas, incluindo a produgao de anticorpos. E facilmente identificado pois seu nucleo é bem compactado de coloracao roxo escuro, é uma célula ‘comumente menor que as demais, com pouca quantidade de citoplasma. Hd uma variacao do linfécito que pode ser observada, chamada linfécito reativo, este é um pouco maior com mais citoplasma e 0 nticleo mais frouxo de coloracao lilas. Valor de Referéncia: 1.000 - 3.000 uLAcontagem diferencial de leucécitos pode determinar infecao ou inflamacao, determinar a necessidade de testes adicionais, como, por exemplo, o diferencial de leucdcitos ou a bidpsia de medula dssea e monitorar a resposta & quimioterapia, radioterapia ou outros tipos de terapia. Uma contagem elevada de leucécitos (leucocitose) com frequéncia assinala uma infec¢ao, como, por ‘exemplo, um abscesso, meningite, apendicite ou amigdalite. Uma contagem alta de leucécitos pode também resultar de leucemia e necrose tecidual devido a queimaduras, infarto do miocardio ou gangrena. Jauma contagem baixa de leucdcitos (leucopenia) - contagem menor que 2000mm? indica depressao da medula éssea, que pode resultar de infeccées virais ou de reagées toxicas, ingestao de merctirio ou outros metais pesados, ou exposi¢o ao benzeno ou arsénicos. A leucopenia caracteristicamente acompanha influenza, febre tifeide, sarampo, hepatite infecciosa, mononucleose e rubéola. Origem dos leucécitos: Os leucécitos se originam de uma célula-tronco hematopoiética que tem o potencial de gerar as células+tronco primitivas das linhas de células vermelhas, das plaquetas e dos leucécitos (linhagem mieldide). Conforme a coloracao dos granulos citoplasmaticos, os promielécitos podem ser neutréfilos (granulacao violeta), eosinéfilos (granulacao azul) e bas6filos (granulagao vermelha). Os promielécitos a seguir originam as células chamadas mieldcitos que sofrem grandes transformacoes, especialmente no nlicleo, para originar os tipos celulares que serao liberados no sangue: NEUTROFILOS, EOSINOFILOS e BASOFILOS. MIELOBLASTO. ——PROMIELOCITO -—MIELOCITO.-—-METAMIELOCITO. —_—BASTONETE SEGMENTADOS MIELOCITO ——METAMIELOCITO.-—BASTONETE SEGMENTADOS EOSINOFILOS EOSINOFILO EOSINOFILO EOSINOFILO ‘MIELOCITO METAMIELOCITO BASTONETE ‘SEGMENTADO BASOFILO BASOFILO BASOFILO BASOFILO O tecido linfoide que constitui a estrutura basica do baco, do timo e dos ganglios linfaticos é encarregado da produgao dos leucécitos agranulécitos. As células reticulares primitivas sofrem algumas transformacées que dao origem a aos linfoblastos. Os linfoblastos se diferencia para formar 05 linfécitos.S@eceo UNFOBLASTO —PROLINFOCITO. —LUINFOCITO.»—LINFOCITO MEDIO PEQUENO Os monécitos sao de origem mieloide, porém sao células agranulécita. Os monoblastos passam por diversos processos de maturacao até se diferenciarem em monécitos. @#. MONOBLASTO PROMONOCITO ‘MonociTo Exerc 5 4. Qual a importancia da contagem diferencial dos leucécitos? 2. Uma eosinofilia pode indicar qual quadro clinico? 3. Explique o desvio a esquerda. 4. Descreva caracteristicas morfolégicas do monécito. 5. Identifique as células baixo: 9 68%o0. 9 Om? 28% . 0.9Roteiro de aula pratica: ‘Tema: Observacao de laminas normais com foco na série branca. Objetivo: Identificar os Leucécitos. Procedimento: 4- Focalizar as laminas propostas pelo professor (a) na objetiva de 40x de aumento; 2+ Focalizar as laminas propostas pelo professor (a) na objetiva de 100x de aumento; 3- Anotar as observacées e se atentar em descrever as caracteristicas das células observadas para auxiliar na identificagao.AULA 2: LEUCEMIAS € uma doenga maligna (cdncer de sangue) dos glébulos brancos (leucécitos) de origem, na maioria das vezes, ndo conhecida. Ela tem como principal caracteristica o acumulo de células jovens (blasticas) anormais na medula dssea, que substituem as células sanguineas normais. ‘Amedula éssea 6 0 local de formacao das células sanguineas, ocupa a cavidade dos ossos e é conhecida popularmente por tutano. Nela séo encontradas as células maes ou precursoras, que originam os elementos do sangue: gldbulos brancos, glbulos vermelhos (hemAcias ou eritrécitos) e plaquetas. Fatores de risco: Radiacao Benzeno Anomalias cromossémicas (Down) Quimioterapia Otratamento para leucemia pode ser complexo, dependendo do tipo de leucemia e outros fatores. No entanto, existem estratégias e recursos que podem ajudar a tornar o seu tratamento bem-sucedido. No Brasil, atualmente a leucemia é 0 9° cancer mais comum entre os homens e o 11° entre as mulheres. Hé uma tendéncia ao aumento da leucemia em decorréncia do uso de agrotéxicos, conservantes e corantes. Os hematologistas classificam a leucemia com base na velocidade de progressao e no tipo de células envolvidas. O primeiro tipo de classificacao 6 a rapidez com que a leucemia progride: Leucemia aguda: Células sanguineas imaturas (blastos), multiplicagao rpida e deficiéncia em seu funcionamento. Tratamento agressivo. Eles ndo podem realizar suas funcdes normais, entao a doenca piora rapidamente. Possuem Hiato Leucémico, ou seja, nao ha presenca de células intermedidrias. Leucemia Crénica: Progressao lenta, menor presenga de blastos e maior presenca de células maduras. Podem nao produzir sintomas e passar anos despercebidas. Existem muitos tipos de leucemias crénicas. Alguns produzem muitas células e outros tém um déficit na producao de células. Estas células do sangue replicam ou acumulam mais lentamente e podem funcionar normalmente por um longo perfodo. O segundo tipo de classificacao € qual glébulo branco é afetado: Leucemia linfocitica (Leucemia linfoide): Este tipo de leucemia afeta as células linfoides (linfécitos), que formam tecido linfatico. Afetam células como linfécito T e B, pode ser determinada por IMUNOFENOTIPAGEM. Leucemia mielégena (Leucemia mieloide): Este tipo de leucemia afeta as células mieloides, que geram glébulos vermelhos, glébulo brancos e células produtoras de plaquetas. TIPOS DE LEUCEMIA Leucemia loide AgudaAtaca células da linhagem mieloide: hemacias, plaquetas, granulécitos (neutréfilos, baséfilos, eosinéfilos) e mondcito. Eles NAO PODEM REALIZAR SUAS FUNCOES NORMAIS e se MULTIPLICAM RAPIDAMENTE, entao a doenca piora rapidamente. Aleucemia aguda requer tratamento rapido e agressivo. Células sanguineas anormais: Células sanguineas imaturas encontradas em sangue periférico (BLASTOS) ~ 20% para diagnéstico de leucemia aguda. * Sintomatologia: Febre, palidez, HEMORRAGIA INTENSA, perda de peso severa, dores nos ossos, sangramento e inchaco gengival e hematomas. Ocorre em adultos e criancas, mas acomete principalmente homens brancos acima dos 50 anos. * Diagnéstico: Padrao ouro: Mielograma (biopsia de medula éssea) Hemograma: Devemos observar lamina no microscépio para estipular numero de blastos, pois nem sempre havera uma leucocitose. Observar a presenca de bastdo de Auer (Lisossomos fundidos) presente apenas nesta leucemia. Presenga de plaquetopenia: 30.000 / 40.000 Plaquetas (Referéncia: 150 - 400 uL) Presenga de Hiato Leucémico e anemia normocitica/Normocrémica. Leucemia Mieloide Crénic: Neste leucemia ocorre a translocacao entre o cromossomo 9 e 22, o que chamamos de anomalia genética. Os cromossomos das células humanas compreendem 22 pares (numerados de 1 a 22 e dois cromossomos sexuais), num total de 46 cromossomos. Nos pacientes com a doenca, estudos mostraram que existe uma translocacao (fusdo de uma parte de um cromossomo em outro cromossomo) em dois cromossomos, os de ntimero 9 22, fazendo 0 22 ficar curto e 0 9 mais longo. x ss est 9 eee Ne U Philadelphia er 9 Chromosome 22 Mais comum na faixa etéria: 45 a 50 anos (Existe 0 quadro juvenil). Tem fases diferentes: Crénica: Dura de 3 a5 anos, com maior chance de cura Acelerada: Alta producao de blastos e grande presenca de basofilos Blastica: Fatal, aqui torna-se LMA. ER}Perda de forca fisica (astenia), emagrecimento, esplenomegalia (aumento do baco) Paciente na maioria dos casos é assintomatico por meses ou anos até entrar na fase em que as células de leucemia crescem mais rapidamente (aguda). * Diagnéstico: PCR quantitativo para gene BCR ABL Citogenética para pesquisa do cromossomo Ph Hemograma: Trombocitose (aumento de plaquetas): 1.500.000 ul (Referéncia: 150 - 400 uL) Basofila: MUITOS basofilos na lamina Aumento de Leucécitos: 20. 000 4 500.000 uL (Referéncia: 4.000 - 10.000 uL) Reacio Leucem ide: Aumento dos leucécitos totais em processos infecciosos. Ndo ha presenca de blastos. LMC: Presenga de blastos, ainda que poucos, em sangue periférico e muitos baséfi Leucemia Lifocitica Aguda Este é 0 tipo mais comum de leucemia em criancas pequenas, também podem ocorrer em adultos. A LLA é o tipo de cancer mais comum durante a infancia, ndo é uma doenca hereditaria e suas causas ainda nao séo conhecidas. Atualmente, 90% das criancas em tratamento chegam a cura. Maior mortalidade em idosos. ‘Adoenga ocorre quando as células da linhagem linfoide sofrem alteracao. NAO é uma doenga genética. Mutacdes genicas que favorecem 0 aparecimento da patologia. + Sintomatologia: Febre, sangramento, anemia + Diagnéstico: Leucocitose, plaquetopenia, anemia + Monotonia celular: Muitos blastos semelhantes ao observar lamina.Leucemia Linfocitica Crénica: Aleucemia linfoide crénica é um subtipo de leucemia conhecido desde 1903. Ocorre em virtude de uma lesao adquirida, ou seja, nao hereditaria, no material genético de um linfécito na medula-dssea. Esta célula passa a proliferar sem controle e a invadir diferentes tecidos e o sistema sanguineo. Com LLC, a leucemia crénica mais comum, vocé pode se sentir bem durante anos sem precisar de tratamento. Tem progressao extremamente lenta. + Diagnéstico: 5000 ul linfécitos no sangue periférico com uma duracao de no minimo 3 meses (Referéncia 1.000 - 3.000 uL) Presenga de manchas de Gumprecht (restos celulares) encontradas nesta leucemia, 7 oe. Ge OS mwa oa a Outros tipos de leucemia: Existem outros tipos mais raros de leucemia, incluindo leucemia de células pilosas, sindromes mielodisplasicas e distUrbios mieloproliferativos. Causas: As leucemias se originam de uma alteracao genética adquirida, ou seja, nao hereditéria. A divisao e morte celular séo controladas por informacées contidas nos genes, dentro dos cromossomos. Erros que acontecem no processo de divisao da célula podem causar uma alteracao genética que ativa os chamados oncogenes, que promovem a divisao celular, ou que desativam os genes supressores de tumor, responsaveis pela morte celular (apoptose). Em ambos os casos ha, entao, multiplicagao. exagerada de uma mesma célula, levando ao surgimento do clone (cancer). EXERCICIOS DE FIXACAO 4. Diferencie Leucemia Aguda de Cronica. 2. Porque nas Leucemias Agudas ocorre uma plaquetopenia e anemia? 3. Quais so os achados laboratoriais da LLC? 4. Quais os 4 tipos de leucemias classificadas de acordo com a linhagem de células afetadas? Descreva as principais caracteristicas de cada uma delas.Roteiro de aula pratica: ‘Tema: Observacao de laminas de sangue periférico. Objetivo: Conhecer e reconhecer leucécitos apresentados e observacao das leucemias. Procedimento: 4. Coloque a lamina de forma que esteja bem-posicionada na pinca localizada na platina do microscépio. 2. Para melhor visualizacao das estruturas morfoldgicas das células, foque na objetiva de 100x utilizando dleo de imersao. 3. Observe a lamina em zigue-zague (como na imagem) dando preferencia as periferias da lamina (onde ha maior concentragao de celularidade, principalmente blastos, caso haja). Conclusao: Aprender a observar laminas e a realizar leitura de maneira adequada.AULA 3: Camara de Neubauer: Utilizada para contagens de uma maneira geral Esperma LCR (Liquido Cefalorraquiano) Leucdcitos Hemiacias Liquido Pleural Resultado dado em mm? CONTAGEM GLOBAL DE LEUCOCITOS EM CAMARA DE NEUBAUER O objetivo desta técnica aplicada aos leucdcitos, tem a mesma funcao, avaliar o quantitativo de células, apesar do resultado gerar com interpretacao diferentes, visto que no caso das hemacias as alteragées geram indicativos de anemia ou policitemia. Porém ao avaliar 0 quantitativo de leucécitos lentificamos se ha indicios de leucopenia (redugao no numero total de leucécitos) ou leucocitose (aumento no ntimero total de leucdcitos), lembrando que o valor de referéncia para os leucécitos é de 4,000 - 10.000 uL. Para a contagem dos leucécitos utilizamos os 4 quadrantes maiores da ponta, contamos 0 total de leucécitos em cada um procedemos ao somatdrio. Apés esse somatério (£) utilizamos a seguinte formula: ia adame t t Leuc. Totai (= ‘T° x 10x 20)+4 oct Dinan Exemplo: ‘Na amostra de sangue de um determinado paciente, a contagem dos 4 quadrantes mais externos foi de 50 leucécitos, logo E=50. (50x10x20) / 4 = 2.500/mm* Sabendo que o valor de referéncia para um adulto normal é de 4.000 — 11.000, logo esta pessoa estd com um quadro de LEUCOPENIA. Ey)Diluigdo para contagem de Leucécitos Diluimos em 20x: 400pL de Turk para 20p1L de sangue total. Contagem diferencial dos Leucécitos Acontagem diferencial no mostra a quantidade relativa (porcentagem) e absoluta (valor real) de cada tipo de leucécito. No esfregaco sanguineo, podemos realizar a contagem manual dessas células. Neste caso, devemos analisar a lamina até encontrarmos 100 leucécitos. Cada leucdcito equivale a 1%, portanto, 100 leucécitos equivalem a 100%. Para entender este processo, precisamos pensar que nao podemos contar todas as células sanguineas que compdem o corpo do individuo, mas podemos utilizar a contagem diferencial para representar todos os leucécitos que constituem esse individuo. Esses 100% correspondem a contagem global. O valor relativo de cada um vai nos mostrar qual leucécito esta predominando. Acontagem é realizada do meio para o fim da lamina percorrendo 0 esfregaco em forma de zigue-zague até completar 100 células. Exemplo: Individuo A apresentou seguinte resultado: Neutréfilo segmentado: 68% Neutréfilo bastao: 5% Eosinéfilo: 4% Baséfilo:1% Monédcito: 5% Linfécito: 17% Esse ¢ 0 valor relativo apresentado depois da contagem diferencial feita em lamina. Agora, precisamos aprender a calcular 0 valor absoluto de cada leucécito. Hoje, boa a automacao realiza esse cAlculo para o profissional, mas devemos estar sempre preparados para adversidades da rotina de trabalho. Através da regra de trés, facilmente encontramos os valores absolutos de cada leucécito. Total de leucécitos: 9.500 uL (contagem global) 9.500 ~ 100% 68% (neutréfilo seg.) 646.000 646.000/100 6.460 uL Deve-se repetir 0 procedimento com todas as células analisadas. Vale ressaltar que o valor da contagem global vai variar para cada paciente. Fo utilizado apenas um exemplo. E importante realizar a conversao de valor relativo para absoluto pois é através do valor absoluto que conseguimos definir se teve o aumento ou diminuicao dos leucécitos de maneira individual, ou seja, 0 valor absoluto tem o maior significa clinico. Na rotina, utilizamos termos especificos para indicar aumento ou diminuigao de determinadas células sanguineas:Bcc erect) Proc ed Neutréfilo Segmentado Dry Dee) Cory Eosinofilia oo eer erry reat) eu rrecieed) errata Monocitopenia EXERCICIOS DE FIXAGAO 4. Descreva como procedemos para realizar a contagem diferencial de leucécitos. 2. Por que é importante realizar a conversao do valor relativo para 0 absoluto? 3. Descreva como procedemos para realizar a contagem global de leucécitos. 4. Realize a conversao dos valores relatives apresentados abaixo: Leucécitos totais: 8.500 uL Neutrofilo segmentado: 55% Neutrofilo basta 1% Eosinofilo: 49 Basofilo:1% Monécito: 3% Linfécito: 25%Roteiro de aula pratica: ‘Tema: Observacao de laminas de sangue periférico e contagem diferencial de leucécitos. Objetivo: Conhecer e reconhecer leucécitos apresentados e observacao das leucemias. Procedimento: 4. Coloque a lamina de forma que esteja bem-posicionada na pinca localizada na platina do microscépio. 2. Para melhor visualizacao das estruturas morfoldgicas das células, foque na objetiva de 100x utilizando dleo de imersao. 3. Observe a lamina em zigue-zague (como na imagem) dando preferencia as periferias da lamina (onde ha maior concentragao de celularidade, principalmente blastos, caso haja). 4. Realize a contagem até que atinja um total de 100 leucécitos contados. 5. Faca a redacao do resultado percentual e absoluto do paciente de acordo com o valor absoluto dado pelo (a) professor (a). Conclusao: Aprender a observar laminas e a realizar a contagem diferencial de leucécitos.AULA 4 Plaquetas As plaquetas ndo so células, mas sim elementos celulares (fragmentos de células), formados a partir de uma célula gigante chamada megacariécito. S40 corpuisculos ligeiramente arredondados, liberados no sangue pela fragmentacao dos megacariécitos da medula éssea. Plaqueta MEGACARIOCITO Os valores de referéncia para plaquetas é entre 150.000 - 400.000 por cada mililitro das quais cerca de 30.000 formam-se a cada dia. A sobrevida média das plaquetas na circulacao é de 10 dias. As plaquetas tém importante papel no processo de HEMOSTASIA, e sao capazes de liberar diversas substancias, das quais, algumas tem propriedades VASOCONSTRITORAS, enquanto outras agem como enzimas e horménios. A atuacao das plaquetas depende das suas propriedades de adesdo e agregacao. Vale lembrar que O termo HEMOSTASIA se refere ao conjunto de mecanismos pelos quais se mantém o sangue fluido dentro do vaso, sem coagular (trombose) nem extravasar (hemorragia). Processo pelo qual preserva as caracteristicas do sangue, bem como sua funcao. O processo de formacao das plaquetas chama-se Trombopoiese. As plaquetas sao da linhagem mieloide, mesma linhagem de outras células sanguineas. Este processo ocorre por estimulo de um horménio chamado TROMBOPOETINA que é secretado pelos rins e pelo figado. O megacaridcito perde sua capacidade de replicacao, mas nao de crescimento, por isso se chama MEGACARIOCITO. Ao final do proceso, com a “destruicao” do megacariécito, ocorre a formacao da plaqueta que sao pequenos fragmentos anucleados. As plaquetas sdo formadas na medula éssea. Mas a trombocitopoiese pode ocorrer também no BAGO e no FIGADO, onde os megacariécitos s40 armazenados. As plaquetas levam de 3 a5 dias para se formaremf Mieloide +. 1 ctrombéeiton) Trombopolese As plaquetas tém como fungao: 1. Hemostasia Primaria 2. Tampao plaquetario 3. Auxiliar nos processos de cicatrizacao As plaquetas sao armazenadas no bago (30%) Esplenomegalia: Trombopenia Esplenocontracao: Trombocitose S40 removidas da corrente sanguinea pelo processo pelo Sistema Monécito-Fagocitico Cascata de coagulagao: Como vimos anteriormente, as plaquetas esto envolvidas no processo de hemostasia e coagulacao do sangue. O objetivo da hemostasia é evitar 0 processo hemorragico formando uma rede de fibrina, que conhecemos como coagulo. quando ha alguma lesao tecidual no qual ocorre sangramento. O processo de formacao de coagulo é um processo complexo que envolve células, fatores de coagulacao, entre outros. Quando ocorre uma lesao tecidual, o subendotélio é exposto ao sangue e rapidamente ocorre vasoconstric¢ao para diminuir o fluxo de sangue e reduzir a hemorragia. Neste momento, inicia-se o proceso de coagulagao e ocorre a adesao plaquetéria (plaquetas aderidas ao local da lesao). O Fator Tecidual (III), mediante a lesdo do tecido, entra na corrente sanguinea e se liga ao fator VII circulante. O fator VII, agora fator Vila (ativado) ativa o fator X. O fator X ativa o fator II (Protrombina) que neste momento se torna o fator Ila (Trombina). 0 fator X é um fator lento para realizar sua ativacao ao fator ll, para isso, precisa de aceleradores, que sao 0 Ca, Vitamina K e fator V. 0 Fator Ila ativa 0 fator | (Fibrinogénio) que neste momento se torna a fibrina (coagulo). Existe uma segunda via de ativacao da cascata de coagulacao, que vai ser ativada por alteracao na membrana das plaquetas. Ap6s a ativacao plaquetéria, a parte interna da plaqueta migra para a parte externa e a parte externa migra para a parte interna. Nesta alteracao de membrana da plaqueta, ocorre a ativagao do fator XII, que ativa o fator XI. O fator XI ativa 0 fator IX, que vai ativar o fator X ea partir daqui o caminho de ativacao sera o mesmo. Mas o fator IX é um fator lento e receberd aceleradores, que sao 0 fator VIII, Ca e Vitamina K. 102Eire Quando hd a diminuigao das plaquetas na circulagao sanguinea, ocorrera a PLAQUETOPENIA. (TROMBOCITOPENIA) e pode indicar a presenga de algumas doengas como: dengue, anemia perniciosa, Itipus, leucemia, infeccao ativa, dentre outras, por outro lado, quando houver o aumento das plaquetas, ocorre a chamada PLAQUETOSE (TROMBOCITOSE) e podem indicar a presenca de algumas doencas como: anemia ferropriva, artrite reumatoide, leucemia, linfoma, tumor sdlido, policitemia vera, ps-esplenectomia (retirada do baco). ANTICOAGULANTES Para as andlises hematolégicas as amostras devem ser de sangue total (tratado com anticoagulante), armazenado por um period maximo de 6 horas a temperatura ambiente ou 24 horas na geladeira (4°C). Estas amostras nunca devem ser congeladas e o anticoagulante mais indicado é o EDTA (tampa roxa) O EDTA (Acido Etileno Diamino Tetracético) remove 0 calcio necessario & coagulagao e é 0 anticoagulante mais indicado para contagens de células sanguineas porque induz uma anticoagulagao completa com minimos efeitos sobre as células, ou seja, sem alterar sua morfologia. Diversos pesquisadores afirmam que o contato prolongado com o EDTA (principalmente & temperatura ambiente) pode induzir a formacao de agregadbos celulares e alterar os resultados das contagens (ex.: Plaquetopenia, devido a formacao de grumos plaquetérios). O esfregaco sanguineo deve ser feito no momento da coleta, ou em até 3 horas, para que se preserve a0 maximo as caracteristicas morfolégicas das células. A proporcao de anticoagulante deve ser mantida (EDTA - 1 gota para 3 a 5 ml de sangue). Homogeneizar cuidadosamente o tubo por INVERSAO de 4a 5 vezes, logo apés a coleta, 103Acao dos Anticoagulantes: 4, EDTA (Acido etilenodiamino tetra-acético): Atua como agente quelante do calcio, impedindo a cascata de coagulacio. £ 0 aditivo de escolha para hematologia porque ¢ o que consegue preservar a morfologia das células por mais tempo. A proporcao de EDTA interfere diretamente na qualidade da amostra. Quando ha pouco sangue para a quantidade de EDTA presente no tubo, as hemacias podem sofrer algumas alteragdes de tamanho e forma. Quando existe muito sangue para pouco EDTA presente no tubo, pode ocorrer formacao de mintisculos coagulos dentro do tubo. 2. Heparina E um anticoagulante natural que impede a conversao da protrombina em trombina, interrompendo 0 processo da cascata de coagulacao. Indicado para testes bioquimicos realizados no plasma, quando ha necessidade, pois nao interfere com os reagentes. Também indicada para gasometria (embora a amostra seja coletada diretamente na seringa heparinizada). Nao é recomendado para andllises leucocitarias, pois pode causar agregacao dos leucécitos, alterando a sua morfologia e dificultando a contagem. Como desvantagem assinala-se seu custo mais elevado que os outros anticoagulantes. ki 3. Citrato de Sédio E um agente quelante que retira 0 calcio, interrompendo a cascata de coagulacao. Vale ressaltar que essa associagao é facilmente reversivel, através da adicao de ions de calcio na amostra. Devido a essa propriedade, ele ¢ 0 anticoagulante mais utilizado em testes de coagulacao como, TP (Tempo de Protrombina) e TTPa (Tempo de Tromboplastina Parcial ativado); 44. Fluoreto de sédio: Similar ao citrato, sendo recomendado especificamente para a dosagem de glicose, pois inibe o processo de glicélise que ocorre nas hemacias, mantendo os niveis in vitro deste metabdlito por mais tempo. Exercicio: 4. "Plaquetas nao sao células', Justifique a afirmativa 2. Qual o melhor anticoagulante para avaliacao do Hemograma? Justifique. 3. Qual a importancia da cascata de coagulacao? 4. Explique o proceso de producao das plaquetas. 5. Quais as funcées das plaquetas no organismo?