NEURORECEPTORES Y LA ADICCION A LA NICOTINA Silvia Martines1, Edgar V. Crdenas T.

2 1: Docente, 2: Estudiante 1) OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL El objetivo de este trabajo es hacer una revisin actualizada de los nuevos conceptos concernientes al tabaquismo y la adiccin a la nicotina. OBJETIVOS ESPECIFICOS Exponer los principales cambios moleculares que ocurren en el sistema nervioso central, relacionados con el consumo de nicotina, que hacen del tabaquismo una drogodependencia. Realizar un estudio del efecto de la nicotina sobre los niveles de dopamina. Determinar los niveles de dopamina antes y despus de la exposicin a la nicotina experimento. Determinar los niveles de cotinina (orina, sangre) antes y despus de la exposicin a la nicotina experimento.

2) ANTECEDENTES Las consecuencias negativas para la salud del consumo de tabaco son de sobra conocidas para los profesionales de la salud y el pblico en general. De hecho actualmente se nota una disminucin global del consumo de cigarrillos per cpita a nivel mundial, probablemente como resultado de la ardua campaa de concientizacin al respecto. TABACO Tabaco nombre comn de dos plantas de la familia de las Solanceas cultivadas por sus hijas que, una vez curadas, se fuman, se mascan o se aspiran en forma de rape, la especie ms cultivada la Nicotiana Tabacum alcanza entre 1 y 3 metros de altura y produce de 10 a 20 hojas anchas alternas que brotan de un tallo central. Contiene un alcaloide, la nicotina. En ocasiones, se ha utilizado como insecticida.

Desde Paraguay hasta Quebec, los indgenas americanos han consumido el tabaco por siglos. Ya fuera con fines rituales, mgicos o medicinales, su uso era bien conocido: en forma de puro, como cigarrillo, en pipa, combinado con jarabe para ser ingerido, e incluso en forma de enema. Los Marinos de Cristbal Coln fueron los primeros que vieron fumar tabaco. En Europa se populariza el tabaco a partir de la "cura" que logro Nicot de las migraas de Catalina de Mdicis, esposa del Rey Enrique II de Francia. Se le llamaba entonces hierba santa o hierba para todos los males por su empleo casi indiscriminado: se receta para el dolor, la cefalea, la flatulencia, e incluso para la tos. Nicols Monardes, en su descripcin de las plantas del nuevo mundo (1574) recomienda el tabaco como cura infalible para 36 enfermedades, pero no es sino hasta el ao 1828 que dos qumicos franceses, Posselt y Reisman, aislaron el ingrediente activo de la planta y como buenos nacionalistas, lo denominaron nicotina.

La composicin qumica del tabaco es muy variada, se han encontrado casi 4000 sustancias producidas por la quema de la planta. Estas se agrupan en gases y sustancias particulares, pero la proporcin de cada una de ellas en el aire que inspira el fumador est sujeta a variables como: variedad de tabaco, la mezcla de saborizantes, colorantes, conservadores, agentes que aumentan la combustin, grado de compactacin de la mezcla, tamao del cigarrillo, fuerza con la que se aspira, la temperatura que se alcanza al aspirar, con un filtro, con el tipo de papel, etctera. La fase gaseosa contiene varios compuestos indeseables: monxido de carbono, bixido de carbono, amoniaco, nitrosaminas voltiles, xidos de nitrgeno, cianuro de hidrogeno, derivados de azufre y de los nitritos, hidrocarburos voltiles, alcoholes, aldehidos y cetonas. La fase particulada contiene nicotina, agua y el alquitrn, mezcla de hidrocarburos aromticos policclicos, algunos de los cuales son probados carcingenos. El humo del tabaco posee una composicin compleja; sus constituyentes pueden ser divididos en cuatro categoras principales: Alquitrn Nicotina Monxido de carbono. Irritantes De estos componentes, se acepta generalmente que el alquitrn y los irritantes son los agentes responsables del cncer del pulmn, la bronquitis crnica y enfisema. Aunque se cree que la Nicotina no participa en el desarrollo de cnceres, puede desempear un papel en la enfermedad cardiovascular. Lo que colorea de pardo el filtro de los cigarrillos, macha la piel de los dedos y los dientes de quienes fuman no es la nicotina, ya que esta es incolora, sino los componentes del alquitrn del tabaco, que slo han sufrido una combustin parcial y que se depositan como residuos a manera de holln en una chimenea. Quien fuma una cajetilla diaria inhala unos 840 centmetros cbicos de alquitrn de tabaco por ao, lo que significa rociar las vas respiratorias superiores y los pulmones con algo mas de tres cuartos de litro de alquitrn que adems contiene, benzopireno, El benzopireno es una sustancia que lesiona el material gentico de las clulas y produce cncer en los rganos con los que se pone en contacto. La nicotina sobre todo cuando se fuma, ejerce varios efectos farmacolgicos sobre el sistema cardiovascular (SCV), la mayora de los cuales estn relacionados con la estimulacin del sistema nervioso simptico. Estos incluyen: Un aumento en la frecuencia cardiaca y la presin arterial, volumen sistlico y gasto cardaco, as como el flujo sanguneo coronario. Vasoconstriccin cutnea con una disminucin asociada a la temperatura cutnea. Venoconstriccin sistmica y un aumento del flujo sanguneo muscular. Un aumento de las concentraciones circulantes de adrenalina y noradrenalina. Un aumento de los niveles circulantes de cidos grasos, glicerol y lactato. Los fumadores presentan niveles altos de lipoprotenas de baja densidad (LDL) y niveles reducidos de lipoprotenas de alta densidad (HDL), fenmeno asociado a la arteriosclerosis. Adems, la concentracin mxima de Nicotina alcanzada en el tabaquismo esta implicada en la hiperactividad y funcin de las plaquetas, ya que la sangre de los fumadores tiende a coagularse ms fcilmente. La nicotina ejerce efectos significativos sobre el sistema nervioso central como por ejemplo: Placer, disminucin de la clera y la tensin. Activacin cortical, especialmente con los primeros cigarrillos del da. Relajacin, en particular en situaciones de estrs. La nicotina tambin posee efectos endocrinos y metablicos. En general, se dice que el tabaquismo aumenta los niveles circulantes de los compuestos endgenos siguientes:

Endorfinas. ACTH Hormonas de crecimiento Prolactina Catecolaminas Cortisol Vasopresinas. NICOTINA La nicotina es un alcaloide contenido en forma natural en las hojas de la Lobelia Nicotinae, la cual es una planta solancea cultivada por su valor comercial. La nicotina es tambin uno de las 4,000 sustancias contenidas en el humo de cigarrillos. Y es la responsable de la adiccin al tabaco. Es una droga psicoactiva y un potente reforzador conductual, capaz de producir severa dependencia qumica en el consumidor. La nicotina se absorbe rpidamente de la mucosa nasal, oral y respiratoria llegando al cerebro al cabo de unos 7 a 10 segundos. Es all donde ejerce su accin sobre el SNC as como en el sistema nervioso autnomo. La nicotina produce efectos somticos tales como elevacin de la frecuencia cardaca y la presin arterial. El efecto en el cerebro es paradjico, causando una estimulacin inicial y luego depresin. Estos efectos son mediados por receptores nicotnicos y son dependientes de la dosis. La nicotina produce estados de nimo similares a los producidos por estimulantes psicomotores como las anfetaminas y la cocana. Las personas que consumen nicotina lo hacen buscando el efecto placentero proveniente de la estimulacin del SNC, o su efecto relajante proveniente de la depresin subsecuente. Los fumadores crnicos activos, realizan mejor ciertas tareas cuando estn fumando que cuando estn en abstinencia. Pueden sentir que manejan mejor el stress y las emociones. La tolerancia se desarrolla hacia los efectos subjetivos de la nicotina y al sentimiento de euforia del consumidor, tal como ocurre con los estimulantes y opiceos. La nicotina se metaboliza en el hgado por medio del grupo de enzimas del citocromo P450 (CYP)(enzimas que tienen la funcin de eliminar sustancias que no son sintetizadas por el propio organismo), y se convierte en cotinina para eliminarse por la orina. En el hombre el 70-80 % de la nicotina es metabolizada por CYP2A6, del que se han identificado tres variantes: la normal CYP2A6*1, y otras dos asociadas con una actividad reducida de la enzima. La presencia de las variantes anormales entre los individuos fumadores es menos frecuente que entre los no fumadores, los que las portan fuman menos cigarrillos al da y tienen ms xito en la deshabituacin. Existen por lo menos otros 3 metabolitos de la nicotina adems de la cotinina, nornicotina y aminocetonas. Sobre estas se han hecho algunos estudios de las concentraciones en sangre y en sistema nervioso central, lo que se ha visto es que la nicotina per se acumula, mientras que la nornicotina tambin. Esto podra tener relacin con enfermedades como

Parkinson y Alzheimer en las que se ha demostrado que la tasa de pacientes con estas patologias es menor en la poblacin de fumadores. Cunta nicotina hay en el aire del pub Se han difundido distintos estudios que analizan los niveles de nicotina en el aire en los locales de ocio. En un amplio trabajo realizado por el doctor Manel Nebot se midieron a lo largo de una semana las concentraciones de nicotina en fase vapor en una muestra de locales de ocio de nueve comunidades autnomas. Los resultados de este trabajo muestran que en los locales donde la prohibicin de fumar es total, los niveles de nicotina en el aire son, por trmino medio, de 0,39 microgramos por metro cbico. Los locales con zonas de fumadores separadas registraron entre 1,3 y 5,9 g/m. En los locales donde se permite fumar sin restricciones, los niveles de nicotina en el aire se situaban entre 8,6 y 10 g/m. Existe una correlacin matemtica entre niveles de nicotina en fase vapor y el cancergeno n-nitrosodietilamina. Segn esta tcnica, el doctor Nebot y colaboradores han calculado el riesgo al que estn expuestos los camareros y camareras de esos locales y afirman que con los niveles de contaminacin observados en los locales y los niveles de cancergenos que suele haber en ellos, ocasionaran el fallecimiento de 1.000 trabajadores de la hostelera cada ao. Concretando un poco ms los riesgos a los que estn expuestos estos trabajadores, el estudio seala que por encima de 2,4 g/m, los empleados que permanecen en ese espacio toda su jornada laboral presentan un riesgo de cncer de pulmn de 0,3/1.000. Si los niveles estn por encima de 7,5 g/m (tpico en bares, pubs y discotecas donde se permite fumar), el riesgo de cncer de pulmn es de 1/1.000, pero adems existen otros riesgos importantes: los empleados expuestos a ese nivel de humos presentan riesgo de sufrir un infarto cerebral (1/1.000) y un infarto de miocardio (1/100) a lo largo de su vida laboral. Un 20% ms de cotinina en saliva Otro grupo de investigadores dirigido por el doctor Esteve Fernndez ha comparado los niveles de cotinina (el metabolito que origina en sangre la nicotina) en poblacin general y en trabajadores de la restauracin de cinco comunidades: Galicia, Baleares, Valencia, Catalua y Cantabria. Su trabajo seala que, actualmente, los camareros que trabajan en locales en los que se fuma presentan un 20% ms de cotinina en saliva que antes de la aplicacin de la normativa, porque en los bares y restaurantes donde an se puede fumar se concentra ms humo que antes. Estudios ms recientes que analizaron el impacto de la ley del tabaco en otros pases muestran claros beneficios, sobre todo para la salud de los fumadores pasivos. Segn un estudio publicado en British Medical Journal, en Escocia, donde en 2006 se aplic la total prohibicin del consumo de tabaco en lugares pblicos, en tan slo un ao las concentraciones de cotinina en no fumadores disminuyeron un 39% y baj casi a la mitad en personas que vivan en casas en las que no se fuma. El beneficio para los fumadores pasivos ha sido similar en otros pases donde se han aplicado las mismas medidas. Para realizar la medicin se utiliza un muestreador pasivo, que contiene un filtro, el cual, luego de la exposicin (generalmente de 7 dias) se determina la concentracin de nicotina mediante cromatografa de gases y espectroscopia de masas.

3) CARACTERISTICAS

Aislada por Poselt y Reimann en 1928, la nicotina es el alcaloide ms importante y exclusivo del tabaco ya que no se encuentra en ninguna otra planta silvestre cultivada. Es una beta-piridil-alfa-N-metil-pirrolidina, cuya frmula emprica es (C10H14N2). Sustancia incolora, oleaginosa y voltil que en contacto con el aire adquiere un color marrn. Es la sustancia ms representativa del tabaco capaz de definir por s sola las propiedades del mismo y muchas de sus acciones especficas, as como su caracterstico sabor. A pesar de no ser la nica responsable del sabor del tabaco su participacin debe ser muy importante lo que se desprende del hecho de que los cigarrillos

lights exentos de nicotina pierden el sabor caracterstico del tabaco segn apreciacin de los propios fumadores. La nicotina es adems la causante de la dependencia y de los efectos fisiolgicos del tabaco. La sntesis de la nicotina se realiza casi exclusivamente en la raz de la planta, asciende por la savia y se deposita, merced a un gradiente de concentracin, en las hojas en forma de sales de cidos orgnicos. Algunas prcticas de cultivo influyen en el contenido en nicotina de la planta. As, cuanto ms tardo es el despunte, menos abono nitrogenado se aplique y mayor sea la densidad de la plantacin, la cantidad de nicotina en la planta ser menor. Otros aspectos del suelo y del riego tambin influyen aumentando el peso de las races en relacin a los rganos areos de la planta, y aumentando de esta forma la cantidad de nicotina. Esto se consigue en cultivos en suelos arenosos en los que las races se desarrollan con ms facilidad al igual que en condiciones de sequa o falta de riego. Por otro lado, el aumento de las horas de exposicin al sol o el aumento de la humedad relativa del aire aumentan el contenido del almidn y alcaloide de las hojas. El perxido de hidrgeno, utilizado para mejorar la calidad del producto acta sobre las hojas produciendo reacciones de oxidacin-degradacin de algunas sustancias, entre ellas la nicotina. Despus del cosechado y sobre todo durante el curado, fermentacin, almacenaje y procesado industrial, la nicotina se va degradando y transformando, siendo su proporcin en la hoja recin cortada del 3% en peso de materia seca. La cantidad final de nicotina presente en la hoja de tabaco despus de los procesos de transformacin sufridos es de 1.5% , siendo ste el porcentaje que ofrece mayor sensacin placentera al fumador ya que si es superior presenta sensaciones desagradables de irritacin y malestar en la garganta y cantidades inferiores no producen la satisfaccin esperada. La presencia de nicotina en el humo del tabaco es variable y depende de la especie, de la altura de las hojas, del despunte, y otros factores relacionados con el cultivo. La forma qumica en que se presenta la nicotina es tambin importante para la fuerza fisiolgica del tabaco. As, en los tabacos con humo de reaccin cida en los que la nicotina se encuentra en forma de sales (como los tabacos orientales), sta se deposita ms difcilmente en las vas respiratorias del fumador produciendo una reaccin fisiolgica ms dbil. Por el contrario, en los tabacos que presentan un humo alcalino una parte de la nicotina se encuentra en forma libre absorbindose mejor por el organismo presentando de esa forma una mayor accin fisiolgica. Otros factores propios de la fabricacin influyen en la cantidad de nicotina y alquitranes en el humo de tabaco: la longitud del cigarrillo, su circunferencia, su volumen y la densidad del papel que lo envuelve. La absorcin de nicotina depende de la labor comercial. As, cuando se encuentra en forma de sales cidas como es el caso del humo del cigarrillo, no se disuelve en la saliva, absorbindose slo a nivel del epitelio alveolar. Por el contrario la nicotina presente en el humo de los cigarros puros en forma de sales bsicas se disuelve en la saliva y se puede absorber en la cavidad bucal. Esto podra explicar la mayor peligrosidad del cigarrillo frente al cigarro puro. La mayor parte del humo producido queda en el ambiente, convirtiendo a los no fumadores en fumadores pasivos, los cuales inhalan gran cantidad del humo presente en el ambiente. Se puede decir en trminos generales que si no se inhala el humo la nicotina absorbida es inferior al 5% de la contenida en el humo. Con una inhalacin intensa se absorbe hasta el 70% y si se acompaa de retencin pulmonar pueden llegar a pasar al interior del organismo el 95% de la nicotina contenida. El metabolismo de la nicotina ocurre principalmente en el hgado y en menor grado en el rin y pulmn, (pero no en el cerebro) como resultado del cual se producen una serie de sustancias de efecto farmacolgico dudoso o casi nulo. El principal metabolito de la nicotina, la cotinina aparece en la sangre del fumador a los pocos minutos en cantidades suficientes para ser medida, pudiendo ser detectada en todos los fluidos corporales: suero, sangre, orina, saliva, leche y lquido amnitico. Su vida media es de 15-40 horas en los adultos y de 37-160 horas en nios despus de haber inhalado de forma pasiva el humo del tabaco. La cotinina es capaz de formarse tambin in vitro a partir de la ingesta de nicotina, lo cual ha sido comprobado en algunos mamferos y en el hombre. Tambin en la orina de no fumadores tras la ingestin oral de nicotina se ha observado la presencia de cotinina. La nicotina y sus metabolitos pueden ser medidas por diferentes mtodos (2022), cromatografa de gases/espectometra de masas, cromatografa con lquidos de alta presin, mtodos radioqumicos, y radioinmunoensayo, siendo el ms utilizado la cromatografa de gases. A pesar de las diferencias individuales, los valores de cotinina srica en fumadores activos de unos 20-30 cigarrillos al da es aproximadamente de unos 300 ng/ml, pudiendo tambin ser detectada en fumadores pasivos. La eliminacin de la nicotina es bastante rpida siendo su vida media de unos 20 minutos y casi nunca supera los 40 minutos. El ph cido de la orina favorece la eliminacin tanto de la nicotina como de la cotinina, y por el contrario una orina alcalina favorece la permanencia de aquellas en el torrente sanguneo. Es interesante el hecho de que la situacin de stress parece ser que aumenta la acidez de la orina favoreciendo la eliminacin de los alcaloides y creando unos niveles sanguneos ms bajos que condicionan la necesidad de reponerlos. Existen diferencias en el metabolismo de la nicotina en funcin del sexo, observndose tambin diferencias entre individuos fumadores y no fumadores. Por otro lado, se ha observado que la nicotina es capaz de desarrollar un fenmeno de inhibicin/induccin enzimtica de forma que altas dosis de nicotina producen inhibicin en su metabolismo,

mientras que dosis bajas y mantenidas favorecen la induccin enzimtica. Para la nicotina se ha descrito el fenmeno de tolerancia, definida como la respuesta inferior ante la misma dosis de sustancia farmacolgicamente activa o lo que es lo mismo, la necesidad de aumentar progresivamente la dosis para conseguir al menos una misma respuesta. El fumador persistente y adicto parece ser que es capaz de metabolizar la nicotina con mayor rapidez que el fumador debutante. De forma que se ha descrito para esta sustancia un fenmeno de induccin-toleranciadependencia con el paso del tiempo. Puede ser que tanto la nicotina como la cotinina acten como agentes reforzantes en la habituacin hacia el tabaco, actuando sobre todo en el estado de nimo del sujeto, lo que se ha relacionado con el estado de abstinencia nicotnica.

4) CLASIFICACION La nicotina es un compuesto orgnico, un alcaloide encontrado en la planta del tabaco (Nicotiana tabacum), con alta concentracin en sus hojas. Constituye cerca del 5% del peso de la planta. La nicotina debe su nombre a Jean Nicot, quien introdujo el tabaco en Francia en 1560. Se sintetiza en las zonas de mayor actividad de las races de las plantas del tabaco, trasportada por la savia a las hojas verdes. El depsito se realiza en forma de sales de cidos orgnicos.

Nicotina Nombre qumico Frmula qumica Masa molecular Densidad Punto de fusin Punto de ebullicin Nmero CAS Cdigo ATC (S)-3-(1-metilpirrolidin-2-il) piridina C10H14N2 162.23 g/mol 1.01 g/ml -7.9 C 247 C 54-555-5 N07B A01

5) FUNCIONES

NICOTINA EN EL ORGANISMO Una vez absorbida, la nicotina va a actuar sobre diferentes rganos y sistemas corporales. Sobre el sistema cardiovascular ejerce una actividad simpaticomimtica, produciendo entre otros efectos un aumento de la frecuencia cardiaca y la tensin arterial, aumento de la vasoconstriccin cutnea y disminucin de la temperatura corporal. En el sistema gastrointestinal y debido a su actividad parasimpaticomimtica, es capaz de producir: naseas, vmitos, diarreas e hipersalivacin. Tambin tiene efectos sobre ciertas hormonas aumentando la liberacin de GH, cortisol, ACTH, y ADH. Por otro lado, aumenta el metabolismo graso y el gasto energtico. En el SNC, acta sobre el crtex cerebral promoviendo la liberacin de epinefrina y nor-epinefrina, vasopresina y de beta-endorfinas. Su accin ms interesante a nivel del SNC es la que realiza sobre el sistema dopaminrgico mesolmbico que es el sistema encargado de regular las sensaciones placenteras de nuestro organismo. La administracin de una sustancia que estimule este sistema es capaz de producir placer y condicionar en el individuo el deseo de ingerir de nuevo esa sustancia. Este es el mecanismo fisiolgico descrito para la dependencia. La transmisin nerviosa entre neuronas se realiza por medio de la sinapsis. As, los impulsos que llegan a la terminacin de una fibra nerviosa provocan la liberacin de un transmisor qumico que atraviesa el espacio virtual sinptico. Como consecuencia de este mecanismo se produce una respuesta biolgica caracterstica en la clula postsinptica. Las sustancias que transmiten esta informacin qumica entre neuronas prximas, se denominan neurotransmisores. La nicotina acta compitiendo con los neurotransmisores sobre todo en la transmisin colinrgica en la cual la sustancia clave es la acetilcolina. Los receptores colinrgicos son de dos tipos: 1.- Nicotnicos. Presentes en las neuronas de los ganglios parasimpticos y simpticos, en las glndulas suprarenales y en algunas neuronas y fibras del SNC. 2.- Muscarnicos. Localizados en los rganos efectores que reciben terminaciones nerviosas postganglionares colinrgicas. La accin farmacolgica de la nicotina ocurre por su competitividad con alguno de los receptores colinrgicos nicotnicos a nivel cerebral y sistmico. Su accin es predominantemente a nivel presinptico estimulando la descarga de neurotransmisores como acetilcolina, noradrenalina, dopamina y serotonina. El efecto de la nicotina sobre los neurotransmisores en animales depende de: la dosis administrada, el ambiente donde se realiza la prueba, motivacin, estado de salud anterior y constitucin del animal. En humanos, adems de lo anterior depende del estado cognoscitivo del individuo, su poder de concentracin mental y de alerta y la concurrencia de smbolos que rodean el experimento, as como la aceptacin adecuada del mismo. Finalmente, la respuesta del sistema nervioso vegetativo a la accin de la nicotina es siempre imprevisible. Parece ser que primero estimula y luego bloquea los receptores colinrgicos de tipo nicotnico, lo cual depende fundamentalmente de la dosis. La nicotina atraviesa sin dificultad la barrera hematoenceflica, estimulando y bloqueando tambin los receptores nicotnicos en el SNC. Son estos efectos de carcter contrapuestos los que caracterizan las respuestas de accin farmacolgica de la nicotina. La accin de fumar en el fumador obedece a la necesidad de obtener una cantidad de nicotina suficiente para vencer el sndrome de abstinencia. Sin embargo los efectos producidos en los primeros contactos con el tabaco, incluyen sensaciones desagradables de tipo vegetativo: nuseas,vmitos, visin borrosa y vrtigos producidos generalmente por una intoxicacin nicotnica menor. A pesar de que los primeros cigarrillos suelen representar una experiencia desagradable, la presin social y otros factores del entorno hace que se repita el ensayo, y se llegue a la habituacin. Los complicados mecanismos de mantenimiento del hbito de fumar los analizaremos ms adelante. La nicotina se une selectivamente a los receptores de acetilcolina en los ganglios autonmicos, la corteza adrenal y el cerebro. Provoca en el sistema nervioso central un efecto estimulante sobre la vigilancia, alerta y rendimiento cognitivo (dosis bajas), y un efecto reforzador o de recompensa sobre el sistema lmbico, mediado por la va neuronal del placer (dosis elevadas). La administracin intravenosa activa los sistemas neurohormonales, con liberacin de acetilcolina, noradrenalina, dopamina, serotonina, vasopresina, beta endorfina, hormona de

crecimiento y ACTH. Los efectos cardiovasculares de la nicotina incluyen vasoconstriccin perifrica, taquicardia e hipertensin.

6) FUNCION ELEGIDA Se cree que la naturaleza adictiva de la nicotina, se debe a su efecto sobre los niveles cerebrales de dopamina que estn asociados con sensaciones positivas. MECANISMO FISIOLOGICO DE LA FARMCO DEPENDENCIA Cuando se inhala el humo de los cigarrillos viaja por las vas respiratorias hasta los pulmones, desde aqu la nicotina pasa directamente a travs epitelio alveolar al torrente circulatorio, aunque la nicotina puede interactuar con una variedad de receptores en numerosos tejidos, su interaccion con receptores especficos del cerebro es lo que crea la dependencia asociada con fumar. En unos segundos, la nicotina llega a millones de neuronas en el SNC, aqu en el mesoencefalo la nicotina interactua con los receptores acetilcolinicos nicotnicos alfa-4, beta-2; La acetilcolina es el ligando natural para estos receptores, sin embargo la nicotina que, tambin es un agonista de los receptores acetilcolinicos tiene una mayor afinidad por los receptores alfa-4, beta-2; estos receptores ubicados en las neuronas postsinapticas consisten en dos subunidades alfa-4 y tres subunidades beta-2, que forman un canal para transportar iones a travs de la membrana, cuando dos molculas de nicotina u otro ligando se unen a los sitios de fijacion del receptor, se activa el canal ionico, dando paso a los iones de Calcio, sodio y potasio. Esto inicia unos impulsos elctricos, generando un potencial de accin, esta seal es transmitida rpidamente por el axn, hasta el centro cerebral del placer, aqu los impulsos estimulan la liberacin de neurotransmisores, incluyendo dopamina, la dopamina produce eventos de sealizacin adicionales que estimulan el circuito del placer, generando sensaciones efmeras de bienestar, mejora del estado de nimo y aumento de la atencin, cada vez que se consume tabaco, los niveles de dopamina aumentan bruscamente, sin embargo la nicotina es eliminada con bastante rapidez, causando un descenso de los niveles de dopamina, el resultado es un deseo de mas nicotina, con el consumo continuo de tabaco, los receptores nicotnicos alfa-4, beta-2 experimentan complejos cambios adaptativos, incluyendo regulacin al alza y desensibizacion, con el tiempo estos y otros cambios posteriores contribuyen a una necesidad ms fuerte de estimulacin nicotnica para lograr la sensacin del placer de fumar. En resumen el consumo frecuente de productos de tabaco, crea una mayor necesidad de ms dopamina, continuando el devastador ciclo de la dependencia del tabaco.

7) METODOS DE ANALISIS La cotinina es el principal metabolito de la nicotina (Fig. 1) y es corrientemente considerada el mejor biomarcador de consumo de tabaco en fumadores activos y de exposicin ambiental al tabaco en los no fumadores (2) porque tiene una vida media de 18 a 20 horas, mientras que la nicotina tiene una vida media de 1 a 2 horas. Por otro lado, la cotinina puede ser detectada en distintos fluidos biolgicos.

Muchos mtodos han sido descritos para medir cotinina en orina. Estos anlisis utilizaron para su cuantificacin en su mayora cromatografa gas-lquido (CGL) con detector de ionizacin de llama (FID), cromatografa gas-lquido con detector de ionizacin de llama nitrgeno selectivo (CG-NPD), tambin CGL acoplada a espectroscopia de masa (CG-MS). Otros mtodos usados son cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) con detector ultravioleta (UV), o radioinmunoensayo (RIA).

Figura 1. PRINCIPALES METABOLITOS DE LA NICOTINA En este trabajo se presenta una determinacin de cotinina en orina humana por CGL accesible a laboratorios de mediana complejidad con sensibilidad suficiente para detectar concentraciones mayores de 3 ng/mL de manera de posibilitar la clasificacin tanto de los fumadores activos como de los fumadores pasivos que resultan de la exposicin al humo. 8) MATERIALES Instrumentacin: Cromatografa gas-liquido (GCL), equipado con un detector de ionizacin de llama (FID). Columna capilar DB-5 (longitud=30 m, dimetro interno=0.25 mm)

9) -

REACTIVOS Cotinina [(-)-cotinina, 98%] NaOH NaCl Cloroformo Metanol Piridina p.a. Gas nitrgeno de alta pureza

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10) PROCEDIMIENTO Soluciones estndares Preparar tres soluciones metanlicas de cotinina (estndar externo) de 4,018 x 10 -4 g/mL, 4,018 x 10-6g/mL y 4,018 x 10-8 g/mL con el fin de obtener el tiempo de retencin en forma experimental mediante inyeccin manual de las muestras. Se us como estndar interno una solucin de piridina 1,638 x 10 -4 g/mL en metanol.

Obtener soluciones testigo negativo a partir de orinas provenientes de individuos no fumadores, que no frecuentaban ambientes de fumadores.

Con estas soluciones testigo negativo se elaborar un pool utilizado para preparar cinco muestras testigo: 2,308 x 10 6 ; 5 x 10-6; 5 x 10-7; 2,308 x 10-8; 5 x 10-8 g/mL de cotinina mediante el agregado artificial de cotinina en diferentes proporciones previo al proceso de extraccin, recibiendo el mismo tratamiento que las muestras. Preparacin de las muestras biolgicas Recolectar de aproximadamente 50 mL de la primera orina de la maana a cada participante, que fue colocada en un envase especial en forma asptica. Las muestras de orina se deben conservar en freezer a 70 C hasta su anlisis. Se procesan colocando 25 mL en un tubo de centrifuga con el agregado de 1 mL NaOH 5M, 8,5 g de NaCl y 5 mL de cloroformo. Los tubos se agitan en un vortex durante 5 min y luego se centrifugan 10 min a 1.000 rpm. Se toman 4 mL de la fase clorofrmica, se colocan en viales y se evaporan a sequedad en ausencia de luz a 37 C en estufa seca. La cotinina ha demostrado ser estable a esta temperatura. Para su inyeccin en el cromatgrafo el extracto se re disuelve con 100 L de la solucin metanlica del estndar interno.

11) RESULTADOS

Utilizando los estndares externos de cotinina se determina el tiempo de retencin, que en estas condiciones de corrida seria entre 11,40 a 11,44 min.

El rango de concentraciones de cotinina en orina, esperable en estudios epidemiolgicos, comprende varios rdenes de magnitud, dado que muchas veces se estudian simultneamente tanto a los fumadores activos como a los fumadores pasivos. Se esperan concentraciones menores de 15 ng/mL en fumadores pasivos mientras que en fumadores activos pueden alcanzarse concentraciones de 1.000 ng /mL o mayores. Se confeccionaran las dos curvas de calibracin utilizando regresin lineal basadas en 20 replicados, una para cubrir el intervalo de 3 a 100 ng/mL y la otra de 100 a 5.000 ng/mL.

Correlacin cotinina detectada y condicin de fumador auto reportada

12) DISCUSIN

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Asi luego de la exposicion a la nicotina, se espera un aumento en los niveles de dopamina en el organismo, lo cual como ya fue mencionado presumiblemente es causante a la adiccin a la nicotina. 13) CONCLUSIONES

14) REFERENCIAS http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000200004 Carrillo Fernndez, Lourdes Mara, Educacion Antitabaco y Adolescentes, Tesis Doctoral, Universidad La Laguna, 2001. http://www.istas.net/pe/articulo.asp?num=49&pag=10&titulo=Cerca-de-un-millon-de-trabajadores-de-hosteleriaobligados-a-exponerse-al-humo-del-tabaco http://www.gulbenkian.pt/media/files/fundacao/programas/programa_ambiente/pdf/gulbenkian%2012%20marzo.pdf http://es.wikipedia.org/wiki/Hormona_adrenocorticotropa

GLOSARIO CYP2A6: Citocromo P450 2A6 (abreviado CYP2A6 ) es un miembro de la citocromo P450 oxidasa de funcin del sistema mixto, que participa en el metabolismo de xenobiticos en el cuerpo. CYP2A6 es la principal enzima responsable de la oxidacin de la nicotina y cotinina . Tambin participa en el metabolismo de varios frmacos, sustancias cancergenas, y un nmero de tipo de alcaloides-cumarina. CYP2A6 es la nica enzima en el cuerpo humano que forma apreciable cataliza la 7-hidroxilacin de la cumarina , de manera que la formacin del producto de esta reaccin, de 7 hidroxicumarina, es utilizado como una sonda para la actividad de CYP2A6. El gen CYP2A6 es parte de un gran grupo de genes del citocromo P450 de la CYP2A, CYP2B y subfamilias CYP2F en el cromosoma 19q. El gen se hace referencia anteriormente como CYP2A3, sin embargo, se ha cambiado el nombre CYP2A6 se localiza en el retculo endoplasmtico y se encuentra predominantemente en el hgado. ACTH: La hormona adrenocorticotropa, corticotropina o corticotrofina (ACTH) es una hormona polipeptdica, producida por la hipfisis y que estimula a las glndulas suprarrenales. La ACTH estimula dos de las tres zonas de la corteza suprarrenal que son la zona fascicular donde se secretan los glucocorticoides (cortisol y corticosterona) y la zona reticular que produce andrgenos como la dehidroepiandrosterona(DHEA) y la androstenediona. La ACTH es permisiva, aunque no necesaria, sobre la sntesis y secrecin de mineralcorticoides. La ACTH es sintetizada por clulas basfilas de la hipfisis anterior o adenohipfisis por estmulo del factor hipotalmico estimulante de la corticotropina (CRH), a partir de un precursor que es la preopiomelanocortina, que tambin da lugar aopiceos endgenos como betaendorfinas y metaencefalinas, lipotropina (LPH) y hormona estimulante de melanocitos (MSH).

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La regulacin de la sntesis de ACTH se produce de la siguiente manera: En situacin de estrs fsico o psicolgico como el dolor, el cansancio, miedo o cambios de la temperatura, es estimulada intensamente la secrecin del factor hipotalmico CRH (del ingls corticotropin releasing hormone), que por medio de la ACTH se va a la liberacin de glucocorticoides. Tambin estimulan la sntesis de ACTH otras hormonas como la arginina-vasopresina (AVP), lascatecolaminas, la angiotensina II, la serotonina, la oxitocina, el pptido natriurtico atrial (ANF), la colecistoquinina, y el pptido vasoactivo intestinal (VIP), entre otros. Inversamente, existe un retrocontrol negativo (feedback negativo) para los glucocorticoides, que se fijan sobre los receptores del hipotlamo e inhiben la secrecin de CRH. Los glucocorticoides actan igualmente sobre la hipfisis bloqueando la liberacin de ACTH a la circulacin sangunea. Cuando se administran cantidades farmacolgicas de cortisol o de un derivado sinttico como la dexametasona, la sntesis de ACTH disminuye. De modo que la sntesis neta de ACTh es el resultado de la potencia relativa de las seales estimuladoras (CRH) e inhibidora (cortisol). La ACTH se fija a los receptores de membrana de la glndula corticosuprarrenal. Esta unin produce un aumento de la concentracin intracelular de AMPc, que activa a la adenilciclasa (una protena quinasa), que a su vez activa lasenzimas (enzima P450scc) responsables de la transformacin del colesterol en pregnenolona, un precursor de los glucocorticoides. La ACTH tambin estimula, entre otras protenas necesarias para la esteroidognesis, los receptores para la lipoprotena LDL, y en la suprarrenal fetal, la hidroximetil glutamil coenzima reductasa (HMGCoA), necesaria para la sntesis de novo del colesterol. La tasa plasmtica de ACTH presenta un ciclo circadiano, con una secrecin mayor durante el da y menor durante la noche. Existe un pico de mxima secrecin de 7 a 9 de la maana. Esto indica que dicha hormona y los glucorticoides son muy importantes para la normal actividad vigil. El desfase del ciclo circadiano de la ACTH con la hora del lugar es la causa del malestar fsico y psquico surgido tras los viajes intercontinentales, sobre todo si son desde el este al oeste. La semivida de la ACTH en la sangre humana es de unos diez minutos.

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