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Reporte P6 Metodos
Reporte P6 Metodos
Departamento de Bioquímica
LABORATORIO DE MÉTODOS DE
ANÁLISIS
5QV2
RESULTADOS:
14
12
Intensidad de fluorescencia (RFU)
10
0
0 10 20 30 40 50 60
Riboflavina (ppm)
14
12
10
Intensidad de flurescencia (RFU)
0
0 10 20 30 40 50 60
Riboflavina (ppm)
R= 2.0945 ppm
PREGUNTA EXTRA:
Un ejemplo en donde se observe o use la fluorescencia (redactar en un solo párrafo) y el motivo
personal para escoger ese ejemplo
En razón del por qué elegí este ejemplo del fenómeno de bioluminiscencia es porque al ser un
fenómeno llamativo, despierta en mi la curiosidad por estudiar este tipo de microorganismos y el
cómo y porqué de su desarrollo.
No encontré datos exactos con un proveedor, porque piden datos extras, soloencontré fichas
técnicas.
https://www.agsanalitica.com/archivos/productos/197/FLS1000-Brochure.pdf
DISCUSIÓN:
EFECTO DE LA CONCENTRCIÓN.
EFECTO DEL pH
Los derivados de la riboflavina que son biológicamente activos son el flavin mononucleótido
(FMN) y el flavín adenina dinucleótido (FAD), que son las forma en la
que actúa como coenzima. Ambos pueden interconvertirse reversiblemente en sus formas
oxidadas o reducidas:
Para este último punto las diferentes soluciones de Riboflavina se expusieron durante 1 hora a
la radiación de luz visible. La Riboflavina es una vitamina fotosensible a la luz visible, luz
ultravioleta y a ciertos tratamientos, como la pasteurización, proceso que hace perder el 20% de
su contenido, por lo que la degradación de esta molécula conduce a la generación de productos
derivados de esta vitamina que pueden emitir o no emitir fluorescencia, sin embargo, a pesar
de la generación de productos derivados, las moléculas de Riboflavina que no fueron
degradadas son las encargadas de emitir fluorescencia en este experimento. Al ser sometidas
las soluciones de Riboflavina a la luz visible se puede observar que la emisión de fluorescencia
se ve disminuida de forma considerable, debido a la degradación de la Riboflavina y está
representado en la figura 3, ya que no presentan una tendencia lineal lo que significa que
presentan desviaciones a la ley general de la fotometría.
CONCLUSIONES:
A niveles relativamente bajos de concentración (1 – 5 ppm) la emisión de fluorescencia
cumple con la ley general de la fotometría, por el contrario a niveles altos de
concentración (10 – 50 ppm) la emisión de fluorescencia se ve comprometida y se
presentan desviaciones a la ley general de la fotometría .
Presencia de disolventes con valores de pH demasiado altos o bajos, producen hidrolisis en
las moléculas de Riboflavina y disminuyen la emisión de fluorescencia, pero la presencia de
disolventes con valores de entre 5 y 7, no producen hidrolisis del analito, por lo que la
emisión de las moléculas de Riboflavina no se ve comprometida.
La exposición a luz visible de las moléculas de Riboflavina, produce la degradación de las
moléculas, dando origen a derivados con escasa emisión de fluorescencia.
Al aumentar la temperatura disminuye la intensidad de la fluorescencia, debido al aumento
en el número de choques moleculares, por lo que la desactivación tiende a efectuarse a
través de procesos no radiactivos y por lo tanto se inhibe la fluorescencia.
REFERENCIAS: