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OFICINA ESPAOLA DE PATENTES Y MARCAS

11 Nmero de publicacin: 51 Int. Cl.:

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ESPAA

A61K 33/10 (2006.01) A61K 33/22 (2006.01) A61K 33/38 (2006.01) A61K 31/7016 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) A61P 37/04 (2006.01) A61P 31/04 (2006.01) A61P 31/12 (2006.01) TRADUCCIN DE PATENTE EUROPEA T3

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86 Nmero de solicitud europea: 01901569 .2 86 Fecha de presentacin : 03.01.2001 87 Nmero de publicacin de la solicitud: 1339415 87 Fecha de publicacin de la solicitud: 03.09.2003

54 Ttulo: Composicin de solucin alcalina multiuso, de alta funcionalidad, su preparacin y utilizacin como

inmunoestimulador no especco.

30 Prioridad: 23.11.2000 KR 10-2000-0070054

73 Titular/es: Barodon-S.F. Corp.

808-9 Duksan-ri, Samjuk-Myun Ansung-city Kyunggi-do 456-880, KR

45 Fecha de publicacin de la mencin BOPI:

72 Inventor/es: Choi, Soo-Il;

16.08.2007

Choi, Hyun-Suk; Jeon, Kyung-Soo; Yoo, Byung-Woo y Park, Yong-Ho

45 Fecha de la publicacin del folleto de la patente:

74 Agente: Durn Moya, Carlos

16.08.2007

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Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicacin en el Boletn europeo de patentes, de
la mencin de concesin de la patente europea, cualquier persona podr oponerse ante la Ocina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposicin deber formularse por escrito y estar motivada; slo se considerar como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposicin (art. 99.1 del Convenio sobre concesin de Patentes Europeas).
Venta de fascculos: Ocina Espaola de Patentes y Marcas. P de la Castellana, 75 28071 Madrid

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DESCRIPCIN Composicin de solucin alcalina multiuso, de alta funcionalidad, su preparacin y utilizacin como inmunoestimulador no especco.
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Antecedentes de la invencin 1. Sector al que pertenece la invencin


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La presente invencin se reere a una composicin de solucin alcalina de aplicaciones mltiples, altamente funcional, a un mtodo de preparacin de la misma, y a la utilizacin de la misma como un inmunoestimulador no especco. Ms particularmente, la presente invencin se reere a una composicin de solucin alcalina que comprende mayoritariamente metasilicato sdico (pentahidratado) y muestra actividades de inmunoestimulacin no especcas, entre las que se incluyen la produccin de anticuerpos y la aumento de capacidad inmune, mediante la activacin de clulas inmunes, maximizando de esta manera los efectos de la vacunacin frente a las enfermedades de virus malignos, se reere asimismo a una preparacin de la misma, y a la utilizacin de la misma como un inmunoestimulador. 2. Descripcin de los antecedentes de la tcnica

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La funcionalidad de la masa alcalina en el cuerpo ha sido de gran inters desde los inicios del siglo veinte. Una extensa investigacin ha revelado recientemente que la masa alcalina en el cuerpo aumenta las proporciones de ionizacin de potasio elevando la capacidad de puricacin de la sangre, dando como resultado la limpieza de la sangre, reduccin de la fatiga, y retardo del envejecimiento.
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Se da a conocer una composicin de solucin alcalina en la Patente coreana No. 128.110, concedida a los presentes inventores, que comprende 10-18 partes en peso de silicato sdico, 0,1-0,5 partes en peso de hiperxido sdico, 5-10 partes en peso de carbonato potsico, 1 parte en peso de carbonato sdico, 10-18 partes en peso de azcar renado y 0,1-3,0 partes en peso de tiosulfato de plata en agua. Dicha composicin se utiliza en la actualidad en el tratamiento posterior de productos de bras y en la fermentacin de piensos, en la industria agrcola, en virtud de su elevada eciencia de radiacin de infrarrojo lejano, actividad antibacteriana y actividad desodorizante. Sin embargo, la composicin es desventajosa porque su preparacin es complicada y su almacenamiento durante un periodo de tiempo largo es difcil. Mientras tanto, la cantidad de antibiticos utilizados cada ao en el mundo sigue aumentando. Sin embargo, cuanto ms se utilizan los antibiticos, mayores son los efectos secundarios. Por ejemplo, son necesarias dosis de antibiticos ms elevadas para tratar pacientes que han sobreutilizado antibiticos de prescripcin, debido a que stos se han vuelo resistentes a los antibiticos. Adicionalmente, la mala utilizacin y el abuso de antibiticos han dado como resultado la aparicin de super-bacterias, que son completamente inmunes a los antibiticos existentes. En un esfuerzo para reducir la utilizacin de antibiticos, se ha tomado en consideracin el aumento de la capacidad general del sistema inmune en el cuerpo, que conduce a una mejora en los efectos de la vacunacin. Por ejemplo, inmunoestimuladores no especcos (a continuacin, referidos como NIS), que inducen al cuerpo a aumentar su respuesta inmune frente a patgenos externos, son de un gran inters en la actualidad para el personal mdico, y una investigacin extensiva y intensiva en todo el mundo se ha enfocado hacia el desarrollo de NIS. En Japn, se ha descrito que un ingrediente extrado de una seta comestible (Lentinus edoddes) muestra un efecto anticancergeno. Adicionalmente, se han observado NIS en bacterias desde hace cien aos. Recientemente, junto con los efectos de formacin de anticuerpos e induccin de citoquinas, el aumento de la capacidad inmune de los NIS has sido estudiada de forma activa. Por ejemplo, se ha descrito que un extracto de pared celular de Norcardia opaca induce la activacin de los macrfagos derivados de las cavidades peritoneales de murina (Barot-Ciobaru y otros, 1987). Se ha encontrado que RU41740, un derivado de Klebsiella pneumoniae, KP-40, un derivado de Propionibacterium avidum, y QH-B, un derivado de Quillaja saponaria, tienen funciones tiles en asociacin con la induccin de citoquinas y la estimulacin de clulas inmunes (Bessler y otros, 1997; Nimier y otros, 1999; Ronnberg y otros, 1997; Siwiki y otros, 19988; Tewari y otros, 1996). Recientemente, se ha descubierto que el ADN bacteriano derivado de estructuras CPG, llamadas estructuras inmunoestimulatorias, induce de forma efectiva la expresin de IL-6, IL-12, IL-18 y IFN- en clulas inmunes (Bohle y otros, 1999; Klinman y otros, 1999; Krieg, 1999). Estos y otros NIS desarrollados hasta el momento tienen el problema de que se producen en procesos complicados, tienen inconvenientes para el almacenamiento a largo plazo y son onerosos. Caractersticas de la invencin

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Teniendo en cuenta los problemas encontrados en las tcnicas anteriores, la presente invencin tiene un objetivo de dar a conocer una composicin de solucin alcalina, que sea fcil de producir y de almacenar durante un periodo de tiempo largo, que tenga actividad inhibitoria frente a la proliferacin de bacterias y virus, y que pueda servir como un inmunoestimulador no especco.
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Es otro objeto de la presente invencin dar a conocer un mtodo para la preparacin de una composicin de solucin alcalina de este tipo. Es un objeto adicional de la presente invencin dar a conocer utilizaciones de la composicin de solucin alcalina.
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Es todava un objeto adicional de la presente invencin dar a conocer mtodos para la mejora en la proporcin de ganancia de peso del ganado y en el rendimiento de las cosechas.
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Es todava otro objeto de la presente invencin dar a conocer un mtodo para el mantenimiento de productos agrcolas, pescados o carnes frescos durante un periodo de tiempo largo. Es an todava otro objeto de la presente invencin dar a conocer un inmunoestimulador no txico, no especco, con un efecto anticancergeno.

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Breve descripcin de los dibujos Los objetos anteriores y otros, caractersticas y otras ventajas de la presente invencin se entendern ms claramente a partir de la siguiente descripcin detallada, tomada en conjunto con los dibujos adjuntos, en los que:

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la gura 1 es un grco en el que se representan los cambios en las proporciones de linfocitos T CD4+ porcinos en los grupos alimentados con BARODON y en el grupo de control con respecto al tiempo; la gura 2 es un grco en el que se representan los cambios en las proporciones de clulas porcinas que presentan MHC de clase II en los grupos alimentados con BARODON y en el grupo control con respecto al tiempo;

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la gura 3 es un grco en el que se representan los cambios en las proporciones de linfocitos No T/ linfocitos No B porcinos (linfocitos N) con respecto al tiempo;
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la gura 4 es un grco en el que se representan los cambios en las proporciones de linfocitos porcinos T CD8+ en los grupos alimentados con BARODON y en el grupo de control con respecto al tiempo; la gura 5 es un histograma que muestra las actividades de linfoproliferacin de linfocitos porcinos aislados de la sangre perifrica de los grupos alimentados con BARODON y de los grupos de control en respuesta a la estimulacin con Con A, PHA, PWM y LPS;

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la gura 6 es un histograma que muestra las actividades de linfoproliferacin de linfocitos porcinos aislados de los nodos de la linfa mesentrica de los grupos alimentados con BARODON y del grupo de control en respuesta a la estimulacin con Con A, PHA, PWM y LPS;
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la gura 7 es un grco que muestra las productividades de anticuerpos anti-clera de los grupos alimentados con BARODON y del grupo de control; la gura 8 es un grco en el que se representan los cambios en la actividad de la Ca-ATPasa muscular de bacalaos de los grupos tratados con BARODON y del grupo de control con respecto al tiempo de almacenamiento;

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la gura 9 es un espectro de RMN que muestra una longitud de onda de absorcin para 17 O de agua corriente; y las guras 10 y 11 son espectros de RMN que muestran longitudes de onda de absorcin para 17 O de molculas de agua en una solucin acuosa que contiene la composicin de la presente invencin.
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Descripcin detallada de la invencin La presente invencin plantea un NIS basado en una composicin de solucin alcalina. Esta composicin comprende metasilicato sdico, brax, tiosulfato sdico, carbonato potsico, azcar renado, y agua, y opcionalmente cloruro sdico, tiosulfato de plata y/o molibdato sdico. El metasilicato sdico, til en la presente invencin, tiene cinco molculas de agua de cristalizacin y comprende dixido de silicio (SiO2 ) en una cantidad del 27,5-29,0% y xido sdico (Na2 O) en una cantidad del 28,5-30,0% con un margen de error en el contenido de menos del 2%. Este compuesto es bastante estable en comparacin con el silicato sdico lquido disponible comercialmente. Existente como polvo o granos blancos, el metasilicato sdico es fcil de pesar de forma precisa y es conveniente para almacenamiento y transporte a largo plazo. Cuando se disuelve en agua, el metasilicato sdico es de fuerte alcalinidad. El silicio, como los otros constituyentes del metasilicato sdico, es un elemento esencial para el crecimiento de animales y plantas. El brax, que tiene diez molculas de agua de cristalizacin, tiene una densidad especca de 1,715. Como un constituyente del brax, el boro (B) es un elemento traza en el que los animales y plantas van a ser decientes con facilidad. Los rboles frutales, cuando los suelos son insucientes en boro, no soportan bien los frutos y, en caso de que stos se produzcan, muchos de ellos son defectuosos. Generalmente, el brax se utiliza como un repelente
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bacteriano, un repelente de insectos, un estptico, y un material para vidrios. Cuando se funde junto con metales, el brax tiene la propiedad de disolver los metales. Una solucin de brax disuelta en agua es alcalina con un pH de 9,5, aproximadamente. En la composicin de la presente invencin, la cantidad de brax se ajusta preferentemente dentro del intervalo de 1-15 partes en peso, basadas en 100 partes en peso de metasilicato sdico. Por ejemplo, en caso de que el brax se utilice en una cantidad menor de 1 parte en peso, no se exhiben los efectos de la misma. Por otra parte, si el contenido de brax excede las 15 partes en peso, se puede generar toxicidad. Con cinco molculas de agua de cristalizacin, el tiosulfato sdico no se disuelve en alcohol, pero se disuelve en agua, dando un sabor salino caracterstico. Su solucin acuosa es neutra con un pH en el intervalo de 6,5-8,0. Con la propiedad qumica de disolver el haluro de plata u otras sales de plata, el tiosulfato sdico se utiliza generalmente para extraer plata de menas minerales. Adicionalmente, el tiosulfato sdico encuentra aplicaciones en la eliminacin de cloro y metales pesados. En la presente invencin, el tiosulfato sdico se utiliza en una cantidad de 105 -104 partes en peso, aproximadamente, basadas en 100 partes en peso de metasilicato sdico. Por ejemplo, no se pueden obtener efectos adicionales cuando la cantidad de tiosulfato sdico es menor que el lmite inferior. Por otra parte, una cantidad que exceda el lmite superior de tiosulfato sdico, cuando sea aplicado a animales, acta sedimentando el Ca tisular, provocando la excitacin de los animales y la descomposicin intestinal. El carbonato potsico se disuelve bien en agua y su solucin es de fuerte alcalinidad con un pH de 11,6. Como el sodio, el potasio es un elemento esencial para el cuerpo, desempeando un rol importante en el metabolismo y en la circulacin de la sangre. Por ejemplo, es necesario un balance apropiado entre potasio y sodio in vivo para impedir la hipertensin y la diabetes mellitus. En la presente invencin, una cantidad preferente de carbonato potsico se encuentra dentro del intervalo de 30-150 partes en peso, basadas en 100 partes en peso de metasilicato sdico. Cuando se aplica a animales o plantas, por ejemplo, una cantidad de carbonato potsico fuera de este intervalo puede alterar el balance in vivo de sodio/potasio. En la composicin de la presente invencin, el azcar renado impide que los materiales inorgnicos ionizados se recombinen para que se estabilice la composicin. Adems, el azcar renado convierte materiales inorgnicos en materiales de tipo orgnico, en formas asociadas a azcar, as como acta en la mejora de la adhesividad o adsorcin de la composicin. Dentro del intervalo de cantidades de 30-200 partes en peso, basadas en 100 partes en peso de metasilicato sdico, el azcar renado puede desempear estas funciones. El cloruro sdico, un compuesto opcional en la composicin de la presente invencin, se utiliza como una fuente de sodio para controlar la proporcin de sodio/potasio. En cuanto al tiosulfato de plata, ste se utiliza habitualmente para suprimir la sntesis de etileno de plantas o para facilitar la diferenciacin de plantas. En una solucin acuosa, el tiosulfato de plata forma [Ag(S2 O3 2 )2 ]3 a una concentracin baja de S2 O3 2 , mientras que forma [Ag2 (S2 O3 2 )6 ]10 a una concentracin elevada de S2 O3 2 . En la presente invencin, el tiosulfato de plata, que existe en una forma aninica polivalente como el tiosulfato sdico, acta para facilitar la diferenciacin celular. En la presente invencin, el molibdato sdico sirve como una fuente de molibdeno, que es un elemento del que animales y plantas carecen con facilidad. Cada uno de los compuestos opcionales se utiliza en una cantidad de 101 partes en peso o menos, basadas en 100 partes en peso de metasilicato sdico. Despus de la disolucin completa de los constituyentes, la composicin de la presente invencin se tie con marl. La composicin es inodora y no txica, adems de ser estable con una viscosidad especca de 1,43-1,50, que mantiene un pH de 13 y con un intervalo de viscosidad de 61,0-239,0. Particularmente, incluso cuando se trata con HCl, la composicin de la presente invencin difcilmente experimenta solidicacin o cambios de pH. Varios resultados experimentales obtenidos durante un perodo de tiempo largo demuestran que la composicin de la presente invencin aumenta la proporcin de ganancia de peso en el ganado y el rendimiento de las cosechas, as como que tambin sirve como un excelente NIS tanto en plantas como en animales.
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El ganado puede ser alimentado con la composicin de la presente invencin, junto con piensos, por ejemplo, en una mezcla con piensos o despus de fermentarse en piensos, o como una disolucin con agua. Despus de la alimentacin, la composicin provoca un aumento de capacidad inmune excelente en el ganado. Por ejemplo, la composicin de la presente invencin previene de forma efectiva la diarrea epidmica porcina (PED) y la clera porcina, que provoca serios problemas a la industria de cra porcina. Adems, se ha descubierto que la composicin es efectiva en la prolaxis y tratamiento de las ebres tifoideas de las aves de corral, que provocan una mortalidad elevada, causando enormes prdidas en la industria aviar. En el caso de vacas lecheras alimentadas con la composicin, disminuy el contaje de clulas somticas por volumen de leche, que es un ndice que determina la calidad de la leche. Entre otros efectos de la composicin de la presente invencin en el ganado se incluyen la facilitacin del crecimiento y la mejora en la calidad de la carne. Se observ que los establos en los que viva el ganado, mientras se alimentaba con la composicin de la presente invencin, tenan menos olores ofensivos que aquellos en los que viva el ganado mientras se alimentaba con piensos ordinarios. Para plantas, la composicin de la presente invencin, que se aplica en mezclas de fertilizantes o como disoluciones en agua, exhibe efectos tiles, entre los que se incluyen la facilitacin de la germinacin y el crecimiento, mejora en la resistencia a enfermedades, rendimientos de cosecha aumentados, mejora en la calidad la cosecha, y similares.

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Se puede obtener una mejor comprensin de la presente invencin a la luz de los siguientes ejemplos, que se establecen para ilustrar la presente invencin, pero que no constituyen limitacin de la misma. Ejemplo de preparacin 1
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Se aadieron secuencialmente en agua puricada (500 Kg) mantenida a 60-80 C, metasilicato sdico (pentahidratado, 300 Kg), brax (decahidratado, 35 Kg), tiosulfato sdico (0,01 Kg), cloruro sdico (1 Kg), y carbonato potsico (150 Kg), y se agit durante 3 horas para su disolucin. A la solucin homognea se aadi azcar renado (450 Kg), seguido de agitacin durante 4 horas para dar una solucin alcalina con pH 13 (denominada a continuacin como BARODON-1). Ejemplo de preparacin 2

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Se aadi gota a gota una solucin de tiosulfato de plata (0,02 Kg) en agua (1 l) a BARODON-1 (1.436 Kg), preparada en el Ejemplo de Preparacin 1, se agit y se mantuvo a 50 C aproximadamente, durante 4 horas en un incubador. La solucin resultante se design como BARODON-2. Ejemplo de preparacin 3

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Se aadi molibdato sdico (Na2 MoO4 2H2 O, 0,3 Kg) a agua puricada (5 l) mantenida a 100 C, con agitacin para dar una solucin incolora e inodora que, a continuacin, se aadi gota a gota a BARODON-1, se agit y se mantuvo a 50 C durante 4 horas en un incubador. La solucin resultante se design como BARODON-3. Ejemplo de preparacin 4

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Utilizando 6 Kg de brax y 300 Kg de carbonato potsico, se obtuvo una solucin alcalina de forma similar a la del Ejemplo de Preparacin 1. Se aadi gota a gota, una solucin de tiosulfato de plata (0,02 Kg) en agua (1 l) a la solucin alcalina (1.557 Kg), seguida de agitacin y reposo en un incubador a 50 C durante 4 horas. La solucin alcalina resultante se design como BARODON-4.
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Ejemplo de preparacin 5 Utilizando 150 Kg de azcar renado, se repiti el procedimiento del Ejemplo de Preparacin 4 para dar una solucin alcalina con una viscosidad relativamente baja (a continuacin designada como BARODON-5).
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Ejemplo 1 Efecto en el Cultivo de Arroz


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Se examinaron los BARODON-1 a BARODON-5 en los efectos de aumento de la actividad inmune y la facilitacin del crecimiento en el cultivo de plantas de arroz en arrozales. Cada uno de los BARODON-1 a BARODON-5 fue diluido en 10 volmenes de agua y diluido de nuevo 500 veces con agua. Justo despus de estar sumergidas durante 24 horas en la solucin diluida, las semillas de arroz se plantaron en los semilleros. Unos cuantos das antes del trasplante de las plantas de arroz de los semilleros a los arrozales, las soluciones diluidas se pulverizaron sobre las plantas de arroz en el vivero de una forma normal. La pulverizacin de la solucin diluida se llev a cabo de nuevo un par de semanas antes de la aparicin del arroz (espigamiento del arroz). En los semilleros, las plantas de arroz del vivero tratadas con la composicin de la presente invencin crecieron de forma ms uniforme y fuerte, y casi no sufrieron daos debido al clima fro, en comparacin con un grupo de control que no fue tratado con la composicin. Adems, se observ que las plantas de arroz del vivero tratadas con la composicin se enraizaron completamente solamente tres das despus del transplante. Las enfermedades, entre las que se incluyen la cada o pudricin de plntulas (damping off), marchitamiento de las hojas (leaf blast), y de las vainas (sheath blight) no afectaron a las plantas de arroz tratadas durante su crecimiento en el campo. Adicionalmente, las plantas de arroz tratadas mejoraron en resistencia al arrancamiento en la tierra y se encontr que no sufran arrancamiento despus de un tifn, mientras que el 25% del control fue arrancado.

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Se midieron las cantidades de arroz producido y los resultados se dan en la Tabla 1, a continuacin. TABLA 1
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Ejemplo 2 Efecto en el Cultivo de Perales

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Se mezcl BARODON-3 con 9 volmenes de agua y, a continuacin, se rediluy 500 veces. Despus de la aplicacin de estircol y fertilizantes orgnicos en un campo de perales, la dilucin se pulveriz sobre ste. Posteriormente, se instal un cercado alrededor de la circunferencia del campo para impedir la interferencia de los animales. Aproximadamente un par de semanas antes de la oracin de las ores del peral, se pulveriz BARODON-2 en la tierra. Los perales fertilizados con las composiciones de la presente invencin orecieron aproximadamente 4-5 das antes y produjeron frutos recolectables aproximadamente 15 das antes de lo que lo hizo un control que no fue fertilizado con las composiciones. Las peras recolectadas de los rboles tratados tuvieron una calicacin ms elevada en tamao, apariencia y grado de brix. Las peras recolectadas de los rboles fertilizados con las composiciones redujeron en un 60% la aparicin de manchas negras y fueron ms lisas en apariencia, en comparacin con el control. No se encontraron peras podridas en los rboles tratados. Los perales tratados con las composiciones de la presente invencin mostraron una proporcin de cada de frutos debido a tifones el 20% menor que la del control. Las peras de los rboles tratados fueron aproximadamente el 15% mayores en tamao, en comparacin con las del control. El grado de brix de la peras de los rboles tratados se midi en un intervalo del 13,0 al 15,0, que fue, aproximadamente, el 12% mayor que el del control. Se mejor tambin el tiempo de almacenamiento. Ejemplo 3

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Efecto en el crecimiento de plantas Una disolucin diluida 16 veces en agua de BARODON-3 fue diluida adicionalmente por los factores de dilucin dados en la Tabla 2, a continuacin, y posteriormente se pulveriz sobre hojas de especmenes de plantas. Se encontr que las hojas eran mayores el 15,6% en longitud, el 8,7% en anchura, y el 7,47% en peso de follaje fresco, en comparacin con un grupo de control que no fue tratado con la solucin.

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TABLA 2

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Ejemplo de preparacin 6
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BARODON-2, preparada en el Ejemplo de Preparacin 2, se diluy un factor de 10, y se pulverizaron 500 g de la disolucin resultante sobre 1 tonelada de piensos combinados para dar piensos altamente funcionales (a continuacin designados como BARODON-6). Ejemplo de preparacin 7

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Se aadi una disolucin de BARODON-2, preparada en el Ejemplo de Preparacin 2, diluida 10 veces en agua (10 l), junto con azcar renado (3 Kg), cloruro sdico (1 Kg) y agua (75 l), a piensos combinados (1 tonelada), despus de lo cual la formulacin resultante se ferment durante 24 horas con agitacin para dar piensos altamente funcionales (a continuacin designados como BARODON-7). Ejemplo 4 La serie de preparaciones BARODON se examin en la ganancia de peso y los efectos de aumento de capacidad inmune en animales, tal como se describe a continuacin.

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(1) Efecto de Ganancia de Peso en Cerdos Se seleccionaron 30 cerdos engordados hbridos cruzados de tres razas (Yorkshire x Landrace x Durroc), cada uno de los cuales tena 15 semanas (1044 das). stos se colocaron en 3 corrales, cada uno con un tamao de 4 m x 4,2 m, en una poblacin de 10 cabezas por corral de cerdos y adaptado a las nuevas circunstancias durante una semana antes del examen. Se aliment a un grupo de 10 cerdos (designado como grupo Tx-1) con BARODON-6, preparada en el Ejemplo de Preparacin 6, en un corral de cerdos durante 9 semanas, mientras se dieron los piensos que contienen BARODON-7 al 3%, preparada en el Ejemplo de Preparacin 7, a un grupo de 10 cerdos (designado como grupo Tx-2) en otro corral de cerdos. Como un grupo de control, se suministraron los mismos piensos, pero que carecan de BARODON. A continuacin, todos los cerdos se alimentaron con piensos comunes. Durante el periodo de examen, se permiti a todos los cerdos el acceso libre a los piensos. Se hizo una medicin de la ganancia de peso y toma de piensos durante 6 semanas para cada grupo y, de los valores medidos, se calcul la eciencia de alimentacin (toma de piensos/ganancia de peso). El promedio diario de ganancia de peso se midi en 842,86 g para el grupo de control, 890,48 g para el grupo Tx-1 y 880,95 g para el grupo Tx7

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2, siendo la mejora de los dos ltimos grupos del 5,65% y 4,52%, respectivamente, en comparacin con el grupo de control. Como promedio diario de la toma de piensos, se consumieron 2,71 Kg de piensos por el grupo de control, 2,77 Kg de piensos por el grupo Tx-1 y 2,65 Kg de piensos por el grupo Tx-2. Por lo tanto, el grupo de control mostr una proporcin de conversin de alimentacin de 3,22, mientras que en el grupo Tx-1 se calcul en 3,11 en proporcin de conversin de alimentacin, con una mejora del 3,54% y el grupo Tx-2 creci en una proporcin de conversin de alimentacin de 3,01, que fue una mejora del 6,98%. (2) Percepcin de la Carne de Cerdo
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La carne de cerdo de cada uno de los grupos de examen se prob por hombres y mujeres sanos y se entrevist a stos sobre el sabor y la calidad de la carne. TABLA 3

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(3) Distribucin de Clulas Inmunes en Sangre Perifrica de Cerdo


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Utilizando anticuerpos de cerdo monoclonales de leucocitos especcos de supercie y una citometra de ujo, tal como la fabricada por Dickinson Immunocytommetry System, San Jos, California, Estados Unidos, identicada como FACSCalibur, se examinaron las proporciones de complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) que expresan las clulas y las subpoblaciones de linfocitos, en la sangre perifrica del grupo Tx-1 y el Tx-2, as como la del grupo de control. (3-1) Aislamiento de Leucocitos de Sangre Perifrica La sangre extrada de la vena cava delantera de los cerdos se mezcl bien con dextrosa citrato cido (ACD)cido etilendiamino tetraactico (EDTA) y se deposit sobre una capa de Hypaque Ficoll (Histopaque, Sigma, San Luis, MO., Estados Unidos). Despus de la centrifugacin a 1.500 rpm durante 30 min, se extrajeron los leucocitos, se lavaron tres veces con tampn de fosfato salino (PBS, pH 7,2), y se suspendieron en un medio RPMI-1640 (GibcoBRL, Grand Island, Nueva York, Estados Unidos). Para el examen, el contaje de clulas de leucocito se ajustaron a 1x107 clulas/ml mientras que las clulas viables se contaron segn la tcnica de exclusin de azul de tryphan. (3-2) Anticuerpos Monoclonales para el Examen de Subpoblacin de Leucocitos Los efectos en las propiedades inmunolgicas porcinas, entre las que se incluyen las poblaciones de clulas inmunes, se determinaron utilizando anticuerpos monoclonales especcamente reactivos a molculas de la supercie celular de leucocitos porcinos, es decir, antgenos MHC clase I, antgenos MHC clase II, Po(porcino)CD2, PoCD4, PoCD8, IgM supercial (sIgM), No T/No B (gdTCR), y granulocitos y monocitos (G + M), como se muestra en Tabla 4, a continuacin.

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TABLA 4

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(3-3) Citometra de Flujo


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Utilizando un programa de citometra de ujo CellQuest, se analizaron proporciones de subpoblaciones de leucocitos segn el mtodo de Davis y otros (1990). A efectos de aprovechar una citometra de ujo utilizando un haz de lser, las clulas se marcaron con uno o dos colorantes uorescentes, tales como uorescena isotiocianato (FITC) y coeritrina (PE) de forma indirecta. En cada pocillo de una microplaca de 96 pocillos de fondo en forma de V, se aadieron 100 l de los leucocitos aislados de sangre (densidad celular 1x107 clulas/ml), junto con 50 l de un anticuerpo monoclonal (concentracin 15 g/ml) y sensibilizado durante 30 min a 4 C, seguido de lavado tres veces con una primera solucin tampn de lavado [450 ml de PBS, 50 ml de ACD, 5 ml de NaN3 al 20%, 10 ml de suero de caballo libre de gamma globulina (GibcoBRL), 20 ml de EDTA 250 mM, 1 ml de rojo fenol al 0,5%] mediante centrifugacin. Despus de decantar el sobrenadante, la pastilla de clulas en el fondo se suspendi utilizando un mezclador de placas o un mezclador de vrtice (Scientic Industries, Bohemia, Nueva York, Estados Unidos). En un examen de tincin simple, un anticuerpo IgG+IgM de cabra contra ratn conjugado con FITC (Caltag Lab, Estados Unidos), que se utiliza como un anticuerpo secundario, se diluy en un factor de 200 y se aadi en una cantidad de 100 l a cada pocillo en el que estaban contenidos los leucocitos suspendidos. Despus de sensibilizacin durante 30 min a 4 C, se llev a cabo el lavado tres veces con una segunda solucin tampn de lavado, que fue la misma que la primera solucin tampn de lavado, pero que estaba libre de suero de caballo, mediante centrifugacin. Se aadi una solucin de PBS al 2% de formalina (20 ml de formalina 38%, PBS 980 ml) en una cantidad de 200 l a cada pocillo para jar las clulas. En un examen de tincin doble, PoCD4 (FITC) se acopl con PoCD8 (PE), PoCD4 (FITC) con MHC clase II (PE), y PoCD8 (FITC) con MHC clase II (PE) para teir las clulas. De forma ms detallada, se mezclaron las clulas de leucocito en un pocillo con un par de anticuerpos monoclonales y se sensibilizaron en primer lugar segn el resultado del examen de tincin simple, seguido de lavado tres veces con la primera solucin tampn de lavado a 4 C. Posteriormente, se utiliz un anticuerpo de cabra especco para cada isotipo de anticuerpo monoclonal en una concentracin de 1,0 g por pocillo para los conjugados de FITC, y en una concentracin de 0,1 g por pocillo para
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el conjugado PE, seguido de una sensibilizacin secundaria durante 30 min a 4 C. Los procedimientos de lavado y jacin se llevaron a cabo de la misma forma que en el examen de tincin simple.
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Despus de completar la tincin, las clulas se almacenaron a 4 C en un lugar oscuro y fro hasta el examen. Utilizando una citometra de ujo, se determin un contaje de 2.000 o ms clulas teidas que dieron respuesta positiva. Respecto a la medicin y al anlisis de los datos, se utilizaron FACScalibur y el programa CellQuest (Becton Dickinson). Los resultados mostraron que la proporcin de linfocitos T CD4+ en sangre perifrica porcina comenz a aumentar despus de tres semanas de la alimentacin con piensos que contienen BARODON, tal como se muestra en la gura 1 y, en la 8 semana despus de la alimentacin, se mantuvieron niveles considerablemente ms elevados de linfocitos T CD4+ por los grupos Tx-1 y Tx-2 en comparacin al grupo de control (p<0,05). Particularmente, el grupo Tx1 mantuvo linfocitos T CD4+ a niveles elevados durante un periodo de la 8 semana a la 13 semana posterior a la aplicacin (p<0,05). En el caso de los linfocitos T CD8+ , se detect un nivel elevado en el grupo Tx-2 en la tercera semana despus de la alimentacin (p<0,01), pero no se encontraron diferencias apreciables desde la 8 semana despus de la alimentacin, en comparacin con el grupo de control (p<0,05), tal como se muestra en la gura 4. Se contaron las clulas que expresan antgenos MHC clase II, mayoritariamente macrfagos, a un nivel considerablemente elevado para el grupo Tx-1 en la 11 semana despus de la alimentacin (p<0,05) y para el grupo Tx-2 en la 8 semana despus de la alimentacin, en comparacin con el grupo de control, tal como se muestra en la gura 2. El contaje de linfocitos No T/No B (linfocitos N) en el grupo Tx-2 se mantuvo ms elevado que en el grupo de control (p<0,01) desde la 3 semana despus de la alimentacin, tal como se muestra en la gura 3, mostrando la posibilidad de aumentar las respuestas de defensa inmune tanto no especcas como especcas. Durante un periodo desde la 11 semana hasta la 13 semana despus de la alimentacin, los linfocitos No T/No B se mantuvieron en niveles considerablemente ms elevados en el grupo Tx-2 que en el grupo de control (p<0,01). Comparando los dos grupos alimentados con BARODON, de forma distintiva el grupo Tx-2 permaneci predominante sobre el grupo Tx-1 en el nivel de clulas que expresan antgenos MHC clase II durante un periodo desde la 3 semana hasta la 8 semana despus de la alimentacin (p<0,05), tal como se muestra en la gura 2. El contaje dio unas pocas clulas ms que expresan CD4 y CD8 en el grupo Tx-2 que en el grupo Tx-1 en la 3 semana despus de la alimentacin (p<0,1), tal como se muestra en las guras 1 y 4. Sobre el grupo Tx-1, el grupo Tx-2 consigui una superioridad apreciable en linfocitos No T/No B en la 13 semana despus de la alimentacin, tal como se muestra en la gura 3. (4) Efecto en la Actividad de Linfocitos Sanguneos y de Nodos Linfticos

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A efectos de examinar las actividades de los linfocitos sanguneos y de los nodos linfticos, sus respuestas proliferativas se determinaron mediante la medicin de la incorporacin de [3 H]-timidina de linfocitos porcinos obtenidos de la sangre perifrica y de los nodos de la linfa mesentrica despus de estimulacin con Concanavalina A (Con A), Fitohemaglutinina (PHA), mitgeno Pokeweed (PWM) y Lipopolisacrido (LPS). Cuando se estimulaban con PWM, se observ que los linfocitos obtenidos de la sangre perifrica del grupo Tx-2, despus de 8 semanas de alimentacin con piensos que contiene la preparacin BARODON eran altamente proliferativos, como se demuestra por un ndice de estimulacin signicativamente mayor para el grupo Tx que para el grupo de control (p<0,05). En la 11 semana posterior a la alimentacin, los linfocitos aislados de la sangre perifrica tanto del grupo Tx-1 como del grupo Tx-2 dieron respuestas proliferativas mayores a la estimulacin con cada uno de los PHA, PWM y LPS, que los aislados del grupo de control, lo que muestra valores de SI ms elevados (p<0,01), como se describe en la gura 5. En el caso de los linfocitos aislados de los nodos de la linfa mesentrica, se observaron valores de SI signicativamente ms elevados, tanto en el grupo Tx-1 como en el grupo Tx-2 en respuesta a la estimulacin con PHA (p<0,05) y PWM (p<0,01) en la 8 semana despus de la alimentacin, que en el grupo de control. En la semana 11 posterior a la aplicacin, el grupo Tx-l mostr respuestas linfoproliferativas estimuladas con Con A y PHA ms elevadas que el grupo de control (p<0,01), mientras que se midi que el grupo Tx-2 tena valores de SI signicativamente elevados en respuesta a la estimulacin con Con A, PHA y PWM (p<0,05), como se describe en la gura 6. (5) Efecto en las Proporciones de Subpoblaciones de Linfocitos T CD4+ y CD8+ Esplnicos y de Nodos Linfticos Se utiliz la inmunohistoqumica para analizar las proporciones de linfocitos T. Despus de ser teidos inmunolgicamente mediante la utilizacin del mtodo ABC, se midieron los contajes de clulas linfocito T CD4+ , CD8+ , y dpp CD4+ CD8+ en los nodos de la linfa mesentrica y en el bazo, con la ayuda de un analizador de imagen (Olympus, Estados Unidos). Los resultados del anlisis inmunohistoqumico se dan en las Tablas 5 y 6, a continuacin. En los bazos, tal como se observa claramente en la Tabla 5, se observ un aumento en la proporcin de linfocitos T CD4+ para el grupo Tx-2 mientras que solamente aumentaron signicativamente los contajes de linfocitos T CD8+ y CD4+ CD8+ para el grupo Tx-1, y para el grupo Tx-2, ambos (p<0,001). En los nodos de la linfa mesentrica, por otra parte,
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todas las proporciones de linfocitos T CD4+ , CD8+ y CD4+ CD8+ dpp (p<0,01) aumentaron signicativamente en ambos grupos Tx-1 y Tx2, tal como se especica en la Tabla 6, a continuacin. Particularmente, tales distribuciones de subpoblaciones ms elevadas de linfocitos T fueron ms evidentes en el grupo Tx-2 (p<0,01).
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(6) Efecto en la Produccin de Anticuerpos despus de la Vacunacin con la Vacuna del Clera Porcino
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Se determinaron las valoraciones de IFA anti virus del clera porcino despus de la vacunacin con una vacuna del clera porcino en los grupos alimentados con BARODON y un grupo no alimentado con BARODON. Se midieron valoraciones de anticuerpos signicativamente ms elevadas despus de tres semanas de la alimentacin con BARODON, en los grupos alimentados con BARODON (Tx-1 y Tx-2) que, en el grupo de control, y estas valoraciones se mantuvieron hasta la 11 semana despus de la alimentacin (p<0,01), tal como se muestra en la gura 7. (7) Efecto en Aves de Corral con Fiebre Tifoidea no Tratados con Antibiticos Se alimentaron 10.000 pollos infectados con ebre tifoidea durante 10 semanas con los piensos que contienen 5% en peso de BARODON- 7, preparada en el Ejemplo de Preparacin 7. Se midieron sus mortalidades por semana y los resultados se dan en Tabla 7, a continuacin. Durante la duracin del examen, no se administraron antibiticos a los pollos infectados con la ebre tifoidea. Tal como se especica en la Tabla 7, el grupo alimentado con BARODON mostr una mortalidad tan baja como del 0,3% en promedio hasta la 15 semana despus del examen, mientras que 10.000 cabezas adicionales infectadas con ebre tifoidea en el grupo de control, que no se haban alimentado con BARODON, murieron en su mayor parte solamente 4 das despus del examen.

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(8) Efecto en el Contaje de Clulas Somticas en Leche de Vacas que Sufren de Mastitis A efectos de examinar el efecto de las preparaciones de BARODON en los contajes de clulas somticas en leche de vacas que sufren de una forma de mastitis, stas se alimentaron con los piensos que contienen el 5% en peso de BARODON-7, preparados en el Ejemplo 7, durante un par de meses. Se realiz la medicin de los contajes de clulas somticas. Los resultados se dan en la Tabla 8, a continuacin, en la que el trmino medicina lquida signica que se frot las ubres de las vacas con toallas empapadas con una disolucin de BARODON-2 diluida 100 veces, el trmino diluido en agua signica que se permiti a la vacas beber una disolucin de BARODON-2 diluida 200 veces, y el carcter q establece el nmero de ubres.

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Adems, se hizo un contaje de los patgenos principales que causan la mastitis, y los resultados se dan en Tabla 9, a continuacin.
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Ejemplo 5 Se investig adems la aumento de capacidad inmune del BARODON en el cuerpo humano. A este respecto, se fabricaron textos para nios con hojas de papel, sobre las cuales se haba pulverizado una disolucin de BARODON5 diluida 100 veces, preparada en el Ejemplo de preparacin 5, se midieron las ondas QRS en el Instituto Japons de Aplicaciones de los Rayos de Infrarrojo Lejano, situado en Osaka, Japn. Los resultados se dan en la Tabla 10, a continuacin. Como referencia, los nmeros de onda QRS pueden dar efectos fsicos beneciosos en el cuerpo cuando estn dentro del intervalo de 1.000 a 2.000. TABLA 10

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Ejemplo 6
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Examen de Toxicidad La toxicidad de BARODON se determin a travs de exmenes de toxicidad aguda utilizando ratas, en el Centro de Monitorizacin y Toxicologa del Instituto de Investigacin de Tecnologa Qumica de Corea (Examen No. S-700). Los exmenes toxicidad aguda se llevaron a cabo con una solucin de BARODON-4 diluida 10 veces, segn la Noticacin del Instituto Nacional de Salud No. 94-3 Prctica del Examen de Toxicidad para Medicamentos (14 de abril, 1994) y segn la Regulacin No. 87-80 Buenas Prcticas de Laboratorio Coreanas (29 de octubre, 1987) del Ministerio de Salud y Bienestar Social.

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Como un resultado del examen, no se observaron sntomas txicos, entre los que se incluyen la muerte, cambio eight, y otros efectos secundarios, en hombres y mujeres inyectados con el material de examen, mientras que se determin que el valor LD50 era de 5.000 mg/Kg tanto para hombres como mujeres. Esto signica que la composicin de la presente invencin no es txica para el cuerpo humano.
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Ejemplo 7 Examen de Mutacin


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Para determinar si BARODON acta como un mutgeno, se llev a cabo un examen de reaparicin de mutacin en el Centro de Monitorizacin y Toxicologa del Instituto de Investigacin de Tecnologa Qumica de Corea (Examen No. S-694) segn la Noticacin del Instituto Nacional de Salud No. 94-3 Prctica del Examen de Toxicidad para Medicamentos (14 de abril, 1994) y segn la Regulacin No. 87-80 Buenas Prcticas de Laboratorio Coreanas (29 de octubre, 1987) del Ministerio de Salud y Bienestar Social, tratando cuatro cepas de salmonella (mutantes sin His de Salmonella typhimurium TA100/TA1535 (tipo substitucin de par de bases) y TA98/TA1537 (tipo desplazamiento de estructura) con una disolucin de BARODON-4 diluida 10 veces. De la totalidad de las cuatro cepas bacterianas, se observaron registros negativos, que indican que el material de examen no provoca la reaparicin de la mutacin de las cepas His- en las His+. Este resultado demuestra que la composicin de la presente invencin es segura para el cuerpo humano. Ejemplo 8

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Efecto en la Proliferacin Celular de Oospermas vulos inmaduros obtenidos de ovarios de vacas fueron sometidos a maduracin in vitro durante 24 horas y, a continuacin, a fertilizacin in vitro durante 20 horas. Los oospermas resultantes se desarrollaron durante 9 das en medios en los que una disolucin de BARODON-4 diluida 10 veces se haba diluido adicionalmente por los factores de 500, 200, 100 y 50, de forma respectiva, y en medios de control. Se realizaron cultivos de espermiductos de toro, obtenidos de un matadero local, clulas epiteliales de oviducto bovino (BOEC) y clulas granulosas (GC), ambas extradas de ovarios de vaca, hasta la tercera generacin en los mismos medios. Se realiz un contaje de las clulas viables utilizando un hemocitmetro. Despus del desarrollo, los oospermas fertilizados externamente experimentaron segmentacin en una proporcin del 60,0% en los medios de control, en una proporcin del 62,4% en los medios diluidos 500 veces, en una proporcin del 66,3% en los medios diluidos 200 veces, y en una proporcin del 73,7% en los medios diluidos 50 veces. Se midi que las proporciones de desarrollo de los blastocistos embrionarios fueron del 13,3% en los medios de control, del 20,0% en los medios diluidos 500 veces, 21,3% en los medios diluidos 200 veces, 18,4% en los medios diluidos 100 veces, y 11,0% en la solucin diluida 50 veces. Despus del cultivo, se contaron 2,0x105 clulas viables de BOEC y 3,2x105 clulas de GC en los medios de control, 2,4x105 clulas de BOEC y 3,9x105 clulas de GC en los medios diluidos 500 veces, 2,5x105 clulas de BOEC y 3,7x105 clulas de GC en los medios diluidos 200 veces, 2,6x105 clulas de BOEC y 2,7x105 clulas de GC en los medios diluidos 100 veces, y 2,5x105 clulas de BOEC y 2,8x105 clulas de GC en los medios diluidos 50 veces. Tal como se demuestra de los datos anteriores, la composicin de la presente invencin tiene una inuencia positiva tanto en la proliferacin celular de BOEC y GC como en la proliferacin y el desarrollo de oospermas y blastocistos embrionarios. Particularmente, se mejor la proporcin de proliferacin de los blastocistos embrionarios en un 50,460,2% cuando se realiz el cultivo en los medios diluidos 500 veces y 200 veces, en comparacin con los cultivos en los medios de control. Ejemplo 9
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Actividad Anticancergena Despus de diluirse en los factores de 600-900, se examin la actividad inhibitoria del BARODON-4, frente a clulas tumorales humanas (cancergenas) de cuatro tipos.
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Se obtuvieron clulas leucmicas humanas (Jurkat), clulas de carcinoma heptico humano (NCl-H69), clulas de estroma humano (SW579) y clulas de sarcoma osteognico humano (U-2 OS) de la Coleccin de Cultivos Tipo Americano, Rockville, MD, Estados Unidos Se realiz un cultivo de cada uno de estos tipos de clulas en medios en los que se diluy BARODON-4 en factores de 600, 700, 800 y 900. Se examinaron y midieron las velocidades de proliferacin de las clulas en cada subcultivo, mientras que se hizo un contaje de las clulas viables utilizando un mtodo de azul de tryphan.

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Previamente al examen de actividad anticancergena, se hizo un cultivo de clulas normales en los mismos medios diluidos para determinar si la serie de preparaciones de BARODON tiene citotoxicidad. El resultado se da en la Tabla 11, a continuacin, que demuestra que los medios diluidos no inhibieron la proporcin de crecimiento de clulas de broblasto humanas ni impidieron la proliferacin de clulas de rin de hmster.
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Los resultados de los cultivos de las clulas cancergenas de los cuatro tipos se dan en la Tabla 12, a continuacin. TABLA 12
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Tal como se observa en las Tablas 11 y 12, las composiciones de la presente invencin tienen actividad inhibitoria frente clulas tumorales humanas, mientras que no provocan daos a las clulas normales. Por lo tanto, la presente invencin se puede utilizar para el tratamiento efectivo de tumores humanos de algunos tipos, aunque la ecacia puede ser diferente dependiendo del tipo de tumor.
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Ejemplo 10 Efecto en la Retencin de la Frescura


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Se congelaron instantneamente bacalaos frescos con hielo seco antes de ser transportados a un laboratorio. Despus de sumergirse en una solucin libre de BARODON, una solucin de BARODON-2 al 0,05%, al 0,1% o al 0,5% durante 10 min, stos se almacenaron a 0 C durante 7 das, durante los cuales se examin su frescor. Como un ndice de frescor para pescados, se midi en los sujetos la actividad de la Ca-ATPasa muscular, que est en relacin con la desnaturalizacin de las protenas. Los mejores resultados se observaron en los bacalaos sumergidos en la solucin de BARODON-2 al 0,5%, que indican la retencin del frescor original durante 5 das, tal como se muestra en la gura 8. Ejemplo 11

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Efecto en la Activacin de Agua Se midieron los 17 O-NMR de soluciones acuosas en las que se haba diluido BARODON-5 en proporciones de dilucin de 1:2.800 y 1: 5.600 con agua corriente. El examen espectroscpico se llev a cabo a 20 C con la ayuda de un espectrofotmetro JNM EX270 en la Reunin de Investigacin de la Ciencia del Agua Japonesa, Japn, utilizando como un control agua corriente. Las bandas de longitud de onda de absorcin del 17 O se midieron a 149,6 Hz (anchura total a media altura) para el control (gura 9), 53,6 Hz para la solucin diluida 2.800 veces (gura 10), y a 54,7 Hz para la solucin diluida 5.600 veces (gura 11). Estos resultados de los anlisis espectroscpicos indican que el agua corriente tiene una fase heterloga, resultante de la agregacin de varias combinaciones de molculas de agua que dieren unas de las otras en el nmero de molculas de agua enlazadas, mientras que las soluciones que contienen BARODON estn cerca de las fases cristalinas en las que las combinaciones de molculas de agua estn compuestas de un nmero mnimo y constante de molculas de agua enlazadas. Con nmeros reducidos de molculas de agua enlazadas, el agua est en un estado ms activo, que muestra una mejor uidez y biopermeabilidad. Debido a que el agua activada puede ser til para el crecimiento de animales y plantas, la composicin de la presente invencin puede utilizarse como un aditivo de bebidas o un agente de tratamiento de aguas residuales. Ejemplo 12
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Comportamiento de BARODON tras la Neutralizacin BARODON-4, preparada en el Ejemplo de Preparacin 4, tena una fuerte alcalinidad con un de pH 13,20. Cuando se neutraliz BARODON-4 con HCl 0,1 N, se form un precipitado en el rea de contacto. Adicionalmente, la composicin no mostr un cambio de pH detectable incluso despus de la adicin de una cantidad considerable de HCl. Este comportamiento indica que la composicin de la presente invencin es altamente reactiva, debido a estar sucientemente ionizada. Sin embargo, una disolucin diluida 1.000 veces de la composicin se neutraliz con 0,1 N HCl, y no se observaron ni cogulos ni burbujas bajo un microscopio. En este case, tuvo lugar un cambio en el pH. A partir de este comportamiento del BARODON tras la neutralizacin, se puede reconocer que, en los casos en los que se utiliza en una cantidad apropiada, la composicin de la presente invencin no produce cogulos despus de la reaccin con el HCl dentro del estmago humano y animal. Adems, no se produce gas por la introduccin de la presente invencin en el estmago, por lo que la composicin est libre de los problemas asociados con la produccin de gas. La composicin de la presente invencin, cuando se aplica a animales y plantas, tal como se ha descrito anteriormente, puede producir una mejora en la resistencia a enfermedades, la proporcin de ganancia de peso, el rendimiento de las cosechas, la calidad de las cosechas, el tiempo de recoleccin. Adems, la composicin de la presente invencin muestra actividades de inmunoestimulacin no especcas, entre las que se incluyen la produccin anticuerpos y el aumento de la capacidad inmune, mediante la activacin de clulas inmune, maximizando de esta manera los efectos de vacunacin frente a enfermedades de virus malignos. Con una actividad inhibitoria remarcable frente a algunos tipos de tumores humanos, la composicin de la presente invencin se puede utilizar como un agente teraputico o preventivo.

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Adems, cuando se alimentaba al ganado con la composicin de la presente invencin mezclada con piensos, se encontr que las cuadras en las que viva el ganado tenan menos olores desagradables y que los piensos estaban menos infestados de insectos nocivos. Adicionalmente, la composicin de la presente invencin es elevadamente til como un conservante para mantener los alimentos frescos.
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La presente invencin ha sido descrita de una forma ilustrativa, y debe entenderse que se pretende que la terminologa utilizada sea de naturaleza descriptiva y no limitativa. Son posibles muchas modicaciones y variaciones de la presente invencin, a la luz de los descubrimientos anteriores. Por lo tanto, debe entenderse que, dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas, la invencin se puede poner en prctica de otras maneras que las descritas especcamente.

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REIVINDICACIONES 1. Composicin de solucin alcalina que tiene una actividad de inmunoestimulacin no especca mejorada, que comprende 100 partes en peso de metasilicato sdico (Na2 SiO3 5H2 O), 1-15 partes en peso de brax (Na2 B4 O7 10 H2 O), 105 -105 partes en peso de tiosulfato sdico (Na2 S2 O3 5H2 O), 30-150 partes en peso de carbonato potsico, 30-200 partes en peso de azcar renado (C12 H22 O11 ), y 100-200 partes en peso de agua y 101 partes en peso o menos de como mnimo, un compuesto que se selecciona de entre cloruro sdico, tiosulfato de plata y molibdato sdico. 2. Composicin de solucin alcalina para el tratamiento de tumores, que comprende 100 partes en leso de metasilicato sdico (Na2 SiO3 5H2 O), 1-15 partes en peso de brax (Na2 B4 O7 10H2 O), 105 -105 partes en peso de tiosulfato sdico (Na2 S2 O3 5H2 O), 30-150 partes en peso de carbonato potsico, 30-200 partes en peso de azcar renado (C12 H22 O11 ), y 100-200 partes en peso de agua, y 101 partes en peso o menos de, como mnimo, un compuesto que se selecciona de entre cloruro sdico, tiosulfato de plata y molibdato sdico. 3. Composicin de solucin alcalina para el aumento de la capacidad de respuesta inmune frente a bacterias, que comprenda 100 partes en peso de metasilicato sdico (Na2 SiO3 5H2 O), 1-15 partes en peso de brax (Na2 B4 O7 10 H2 O), 105 -105 partes en peso de tiosulfato sdico (Na2 S2 O3 5H2 O), 30-150 partes en peso de carbonato potsico, 30-200 partes en peso de azcar renado (C12 H22 O11 ), y 100-200 partes en peso de agua y 101 partes en peso o menos de, como mnimo, un compuesto que se selecciona de entre cloruro sdico, tiosulfato de plata y molibdato sdico. (cancelada). 4. Composicin de solucin alcalina para el aumento de la respuesta inmune frente a virus, que comprende 100 partes en peso de metasilicato sdico (Na2 SiO3 5H2 O), 1-15 partes en peso de brax (Na2 B4 O7 10H2 O), 105 -105 partes en peso de tiosulfato, sdico (Na2 S2 O3 5H2 O), 30-150 partes en peso de carbonato potsico, 30-200 partes en peso de azcar renado (C12 H22 O11 ), y 100-200 partes en peso de agua y 101 partes en peso o menos de, como mnimo, un compuestos que se selecciona de entre cloruro sdico, tiosulfato de plata y molibdato sdico. 5. Composicin de solucin alcalina para promover la diferenciacin de los oospermas, que comprende 100 partes en peso de metasilicato sdico (Na2 SiO3 5H2 O), 1-15 partes en peso de brax (Na2 B4 O7 10H2 O), 105 -105 partes en peso, de tiosulfato sdico (Na2 S2 O3 5H2 O), 30-150 partes en peso de carbonato potsico 30-200 partes en peso de azcar renado (C12 H22 O11 ), y 100-200 partes en peso de agua y 101 partes en peso o menos de, como mnimo, un compuesto que se selecciona de entre cloruro sdico, tiosulfato de plata y molibdato sdico. 6. Inmunoestimulador no especico, que comprende la composicin, segn la reivindicacin 1, como un ingrediente efectivo. 7. Agente teraputico para el tratamiento de tumores, que comprende la composicin, segn la reivindicacin 2, como un ingrediente efectivo.
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8. Agente antibacteriano, que comprende la composicin, segn la reivindicacin 3, como un ingrediente efectivo. 9. Agente antivirico, que comprende la composicin, segn la reivindicacin 4, como un ingrediente efectivo.

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10. Promotor de la diferenciacin de oospermas, que comprende la composicin, segn la reivindicacin 5, como un ingrediente efectivo.

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