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UNIVERSIDAD ANDRES BELLO

BIOLOGIA CELULAR

MICROSCOPIA I
MICROSCOPIA

INTRODUCCION

El término célula fue usado por primera vez cuando Robert Hooke observó un
trozo de corcho en un microscopio de luz en 1665. Luego, Antony van
Leeuwenhoek observó en 1670 varios tipos de células y finalmente, fue en 1838
cuando Matthias Scleiden y Theodro Schwan propusieron a partir de sus
observaciones microscópicas de diversos tejidos la teoría celular “Todos los
organismos están compuestos de células, y todas las células provienen de la
división de otras células preexistentes”. Estos descubrimientos dieron así origen al
nacimiento de la biología celular contemporánea.

Las células son muy pequeñas y además son traslúcidas lo que hace imposible su
observación por ojo humano desnudo. Es por eso que el microscopio ha sido, y es
una de las herramientas más utilizadas en biología. El progreso en la construcción
de nuevos microscopios, así como el desarrollo y uso de nuevos métodos de
fijación, corte y tinción han permitido una serie de descubrimientos en los campos
de la histología, citología y bacteriología, permitiéndonos entender cada vez con
más claridad la estructura de la célula y su organización, lo que es una importante
ayuda para la comprensión de su funcionamiento.

EL MICROSCOPIO OPTICOY SUS PARTES

En términos generales, el microscopio es un sistema de lentes montados en un


tubo. La distancia desde el tubo al objeto que se quiere observar puede regularse
por medio de dos botones de ajuste, y todo el conjunto está dispuesto sobre un
robusto soporte en el que también se apoya la platina sobre la cual se coloca la
preparación a observar, y una fuentes de luz que se dirige a través del objeto en
estudio.

Las diferentes partes de un microscopio pueden agruparse en 3 sistemas


fundamentales:

El sistema mecánico se compone del pie en el cual se sustenta el instrumento, y


la columna, que se encuentra fijada al pie y sostiene las otras partes del
microscopio; el tubo que sostiene los oculares, el revolver portaobjetivos, la platina
y el sistema de enfoque, tanto macrométrico (aproximado) como micrométrico
(preciso).

El sistema óptico se compone de 2 sistemas diferentes de lentes. Los oculares


son 2 lentes separados por un diafragma fijo, tienen la función de aumentar la
imagen proyectada por los objetivos. Los objetivos son 3 ó 4 lentes ubicados en el
revólver, son los que aumentan la imagen y pueden ser secos (entre ellos y la
muestra hay una capa de aire) o de inmersión (entre ellos y la muestra se coloca
una sustancia especial que permite lograr un aumento mayor).

Finalmente, el sistema de iluminación se compone de una fuente luminosa, que


es generalmente una lámpara ubicada en el pie o en la base de la columna del
microscopio. Si la fuente luminosa es independiente del microscopio, además se
necesita de un espejo que refleje la luz y la desvíe hacia el condensador y de un
condensador, que a través de un sistema de lentes concentra la luz que llega al
condensador se regula por medio de un diafragma ubicado en su parte inferior.
Adicionalmente se puede colocar un filtro, generalmente azul, para obtener una luz
homogénea y parecida a la luz natural.
FIGURA 1. LAS PARTES DEL MICROSCOPIO

FORMACION DE LA IMAGEN

La luz posee una naturaleza dual, y puede ser entendida al mismo tiempo como
una partícula y como una onda. La comprensión de este comportamiento, así
como de algunas características de la luz, es importante para entender el proceso
de formación de la imagen en un microscopio, y cómo manejando ciertos
parámetros físicos podemos obtener imágenes más nítidas y de mayores
aumentos.

La luz posee una determinada longitud de onda y viaja en el espacio con una
determinada velocidad. Cuando la luz llega a una superficie que separa dos
medios transparentes una parte de ella se refleja volviendo por el mismo medio en
que se propagaba, y otra parte en cambio es refractada, penetra en el segundo
medio y cambia su dirección y velocidad. Esto ocurre cuando la luz llega por
ejemplo a una lente. Si ésta es convergente, los rayos se juntan en un punto, el
que corresponde al foco, la distancia entre ese punto y el centro de la lente es la
llamada distancia focal.

Como ya vimos, la velocidad de la luz es diferente en el vacío que en otros


medios. Esta diferencia de velocidad puede compararse mediante el índice de
refracción, que corresponde al cuociente entre la velocidad de la luz en el vacío y
la velocidad de la luz en un medio determinado en el que ésta incide.

Mientras más se acerca un objeto al ojo, más detalles de él pueden ser


distinguidos, pero hay una distancia límite a la que se pueden acercar los objeto, y
sobre esa distancia, ya no se distinguen los objetos con claridad, y se hace
necesario el uso de lentes o lupas para aumentar el objeto en estudio. El aumento
de una lente está dado por el límite de cercanía a la que pueden llevar los objetos
en el ojo humano y por su distancia focal. Si se quiere aumentar aún más una
imagen, se pueden colocar dos lentes en serie (objetivo y ocular en el caso de
microscopio compuestos), y el aumento final logrado será entonces el producto del
aumento de cada uno de ellos.

Si tiene en un microscopio un objeto a observar, los rayos de luz reflejados o


emitidos por el objeto que se sitúa fuera de la distancia focal de un lente (objetivo)
al pasar por el objeto son refractados y enfocados en un plano que se ubica más
allá de la cara opuesta de la lente obteniéndose una imagen real que es invertida y
de tamaño distinto (mayor) al del objeto original. A medida que el objeto se acerca
al foco la imagen obtenida es más grande.

Lente Objetivo

Plano focal

FIGURA 2. FORMACION DE LA IMAGEN EN UNA LENTE SIMPLE.

La segunda lente (ocular) aumenta la primera imagen obtenida. La imagen final


es una imagen virtual y aumentada.

El poder de resolución de un microscopio depende también de la apertura


numérica, capacidad de una lente para aprovechar la mayor cantidad de rayos
para formar la imagen. Esta puede aumentarse al usar entre el objetivo y el objeto
a observar una sustancia con índice de refracción mayor del aire. Para esto se
usan los llamados aceites de inmersión. Así, al aumentar la apertura numérica se
obtienen mayores aumentos. Este tipo de aceites se usan solamente con objetivos
especiales que se llaman lentes de inmersión.

PODERES DEL MICROSCOPIO

El microscopio posee varias características o poderes que determinan en forma


importante su utilidad como herramienta de estudio. Estos son:

• Poder de aumento: Es la razón entre el tamaño de la imagen que produce el


microscopio y el tamaño original del objeto en observación. Este aumento se
logra a través del ocular y de los objetivos, y ya que cada uno es capaz de
amplificar la imagen, el aumento total logrado se obtiene al multiplicar estos
dos valores de aumento.

• Poder de definición: Es la capacidad del microscopio para formar imágenes


nítidas y de bordes definidos.

• Poder de penetración: Es la capacidad para visualizar los diferentes planos


de una preparación y está dado por el ajuste de precisión que se logra con el
tornillo micrométrico.

• Poder de resolución: Permite distinguir como objetos separados dos puntos


que se encuentran muy cercanos entre sí.
USO DEL MICROSCOPIO

Para un buen uso del microscopio sea cuidadoso y siga atentamente las
siguientes instrucciones:

1. Asegúrese de que el microscopio se encuentre en una posición cómoda para


usted, tomándolo siempre de la columna.
2. Encienda la lamparilla.
3. Coloque el objetivo de menor aumento.
4. Coloque su preparación en la platina asegurándose de que ésta se encuentre
con el cubreobjeto hacia arriba.
5. Abra totalmente el diafragma iris y suba el condensador casi hasta el tope.
6. Si su microscopio tiene espejo, céntrelo para que la preparación reciba el
máximo posible la luz.
7. Enfoque la preparación bajando el tubo o subiendo la platina. Existe un tope
que impide que los objetivos de menor aumento topen la preparación.
8. Mire a través del ocular y usando el tornillo macrométrico aleje lentamente el
objetivo de la preparación, hasta lograr una imagen más o menos nítida.
Termine de enfocar usando el tornillo micrométrico.
9. Una vez enfocada su preparación, regule la cantidad de luz que recibe su
muestra cerrando para ello el diafragma.
10. Si después de realizar todos los pasos anteriores no logra observar su
preparación en forma nítida, verifique que la preparación esté ubicada dentro
del campo visual y que el cubreobjetos se encuentre mirando hacia arriba.
Revise también la limpieza de la preparación, oculares, objetivos,
condensador, espejo, y por último, verifique que la iluminación sea la
adecuada y que el objetivo se encuentre en su posición correcta.
11. Para cambiar de objetivo, gire el revolver hasta el objetivo del aumento que
desea utilizar, y vuelva a enfocar su prepación utilizando para ello el tornillo
micrométrico, y si fuera necesario, el macrométrico.
12. Para usar el objetivo de inmersión coloque sobre su preparación una gota de
aceite de inmersión, y luego enfoque su preparación con el objetivo inmerso
en el aceite. Una vez finalizada la observación, limpie cuidadosamente el
objetivo eliminando el aceite de inmersión. Para ello utilice xilol y una hoja de
papel para lentes, especialmente dispuesto para ello, pues las pelusas del
papel común permanecen en el objetivo y pueden interferir en observaciones
posteriores.
13. Al terminar su trabajo limpie el resto del microscopio con un paño suave,
apague la lamparilla, situé el objetivo de menor aumento en posición de
observación, baje la platina, y cubra el microscopio.

PREPARACION DEL MATERIAL A SER OBSERVADO EN UN MICROSCOPIO

Existen dos tipos de preparaciones microscópicas, éstas corresponden a las


preparaciones permanentes y a las preparaciones temporales. Ambas deben ser
lo más delgadas posible para dejar pasar la luz a través de él y así lograr una
buena observación.

Las preparaciones permanentes son aquellas que se han sometido a un proceso


largo de preparación, el que permite que se mantengan en buenas condiciones
para su observación por periodos prolongados de tiempo. La preparación de
estas muestras incluye etapas de fijación del material, deshidratación, inclusión en
parafina, corte de la muestra en capas muy finas con un micrótomo, colocación de
estas capas que contienen la muestra en un portaobjetos, disolución de la
parafina, tinción de la muestra para contrastar las diferentes estructuras celulares
y colocación de un cubre objetos para proteger la preparación.

Las preparaciones temporales corresponden a cortes frescos del material a


observar, los que se realizan en el momento y tienen una corta duración. Una vez
realizados los cortes, se coloca una gota de agua en un portaobjetos, y en ella se
ubica un trozo del material a observar, el que debe quedar completamente cubierto
por el agua. Sobre esta preparación se coloca cuidadosamente un cubreobjeto,
evitando la formación de burbujas que interfieren en la observación microscópica.
Finalmente, se elimina exceso de agua, y la preparación puede teñirse para ser
observada.

Existen numerosas tinciones que se utilizan en microscopía y permiten una mejor


observación de las estructuras celulares al contrastar en forma selectiva moléculas
determinadas. Generalmente se usan diferentes colorantes, algunos ejemplos de
ellos son el lugol que tiñe los granos de almidón de color azul-morado, la
floroglucina que tiñe de rojo violeta las paredes celulares lignificadas, el azul de
metileno que tiñe el protoplasma y las paredes celulares celulósicas, etc.

OTROS TIPOS DE MICROSCOPIOS

El avance tecnológico ha permitido en los últimos años el desarrollo de una serie


de microscopios que con pequeñas modificaciones de los principios básicos del
microscopio de luz permiten un mejor estudio de la célula. Algunos ejemplos son
los siguientes:

• Microscopio de contraste de fases: El mayor problema de la observación


microscópica de muestras biológicas es el poco contraste que éstas poseen.
Las partes invisibles de una preparación son atravesadas por la luz, sin que
cambie su amplitud, pero produciendo un cambio en su fase. En este tipo de
microscopio los cambios de fase de la luz se traducen en cambios de amplitud,
este microscopio permite examinar objetos vivos, así como el seguimiento en
ellos de procesos celulares como la mitosis.

• Microscopio de fluorescencia: Algunas moléculas emiten parte de la luz que


absorben a longitudes de onda mayores a las que reciben. Este proceso es
llamo fluorescencia y se presenta en forma natural, por ejemplo, en las
clorofilas. Existen numerosos fluorocromos (moléculas capaces de emitir
fluorescencia), los cuales pueden utilizarse para teñir muestras biológicas,
cuyas estructuras se ven después por la fluorescencia de las moléculas unidas
a ellas. En este tipo de microscopios la luz utilizada es de corta longitud de
onda, y se logra por el uso de lámparas de mercurio. Esta luz incide en la
muestra, y lo que se observa es la fluorescencia que proviene de ella. Si la
unión de estos compuestos fluorescentes se hace específica se pueden
observar estructuras celulares definidas, como por ejemplo, proteínas
marcadoras de diferentes organelos.

• Microscopio electrónico: La luz se reemplaza por un haz de electrones que


se obtienen al calentar un filamento en un tubo al vacío. Estos electrones son
desviados en un campo electromagnético que cumple la función de
condensador, y concentrados en el plano donde se coloca el objeto. Al pasar a
través del objeto, los electrones son parcialmente deflectados; el grado de
deflección de ellos depende de la densidad electrónica de la muestra. Debido
a la baja densidad electrónica de las muestras biológicas, para aumentar el
contraste de las muestras se usan metales pesados que aumentan la
interacción de ésta con los electrones incidentes. Después de pasar por la
muestra, los electrones se colectan en un objetivo donde se forma la imagen,
ésta se ve finalmente sobre una pantalla fluorescente, o en una placa
fotográfica. Las imágenes logradas en este tipo de microscopio son siempre
en blanco y negro, y las zonas más oscuras corresponden a zonas de mayor
densidad electrónica en la muestra. Su poder de resolución es del orden de 4
Aº, y permite lograr aumentos de hasta 1.000.000 de veces. Sin embargo, una
desventaja es que se necesitan cortes extremadamente finos, y las muestras
deben someterse a procesos de preparación (deshidratación) antes de ser
colocadas al vacío para ser observadas.
OBJETIVOS:

• Describir y analizar los principios básicos de la microscopía.


• Aprender el manejo de algunas técnicas básicas de microscopía, como el
montaje de preparaciones en portaobjeto y tinción de muestras.
• Aprender a realizar observaciones microscópicas con el objeto de
esquematizar, describir e interpretar adecuadamente lo observado.

ACTIVIDAD Nº1: Cálculo del aumento y límite de resolución del microscopio.

OBJETIVOS:

• Conocer los componentes principales de un microscopio.


• Comprender la función de los lentes oculares y objetivos.
• Calcular el aumento final de los objetos observados y el límite de resolución del
microscopio.

La función principal del microscopio es aumentar la resolución, la cual nos permite


observar detalles de los objetos que no es posible ver con el ojo humano. Al
aumentar la magnificación, el tamaño observado del objeto, también debe
aumentar la resolución; de otro modo, veríamos sólo una imagen de gran tamaño
pero sin nitidez.

El poder de resolución de un microscopio se define como la capacidad que


permite hacer perceptible por separado, dos puntos situados muy próximos entre
sí en el objeto. Esta capacidad está determinada por la apertura numérica (NA) de
la lente, siendo directamente proporcional a ésta, e inversamente proporcional a la
longitud de onda de la luz utilizada (λ).

Poder de resolución = NA

0,61*λ

El recíproco del poder de resolución corresponde al límite de resolución, la


distancia mínima que debe existir entre dos puntos para poder distinguirlos por
separado.

Límite de resolución = 0,61*λ

NA
Teniendo claros estos conceptos, podemos comenzar el estudio de los
componentes del microscopio, para llegar a calcular el aumento de las imágenes y
la distancia mínima que podemos llegar a distinguir al realizar una observación en
un microscopio compuesto.

IMPORTANTE: Recuerde que el microscopio es un instrumento óptico de


gran precisión, por lo que debe ser manejado siempre en forma cuidadosa.
Cualquier maltrato o golpe puede desajustar el instrumento y dañarlo
gravemente. Trate de no tocar las piezas cuya función no conoce.
Ante cualquier duda o problema, solicite siempre la ayuda de sus profesores
ayudantes.

ACTIVIDAD PRACTICA:

• Observe cuidadosamente los distintos componentes del microscopio que le ha


sido asignado. Compárelos con el esquema que fue entregado en la guía, y
asegúrese de comprender la función precisa de cada uno de ellos antes de
comenzar cualquier observación microscópica.
• Anote en la siguiente tabla el poder de aumento y apertura numérica de los
lentes objetivos. Estos valores se encuentran en la parte cilíndrica o “cañón”
de los lentes.

AUMENTO (X#) APERTURA NUMERICA (NA)

Anote el aumento y la apertura numérica de el o los lentes oculares.

AUMENTO (X#) APERTURA NUMERICA (NA)

• Anote ahora la apertura numérica del condensador:

APERTURA NUMERICA (NA)

• La resolución máxima de su microscopio depende de la apertura numérica


efectiva máxima que posea. Este valor máximo corresponde normalmente al
lente 100x o lente de inmersión. Observe ahora los siguientes valores:

Apertura del lente 100x:

Apertura numérica del condensador

Apertura numérica de la interfase de aire 1,0

Apertura numérica de la interfase de aceite 1,3-1,5

La apertura numérica efectiva máxima es el valor más bajo de los anteriores.


Utilizando este valor menor de apertura numérica de trabajo, calcule el límite de
resolución y la resolución de su microscopio asumiendo un λ= 400 nm,
correspondiente a la luz visible.

Límite de resolución: µ

Resolución: µ

• ¿Qué conclusión puede obtener de estos resultados?

ACTIVIDAD Nº 2. Manejo del Microscopio.

OBJETIVOS :

• Aprender a utilizar correctamente un microscopio, relacionando cada uno de


sus componentes con su función específica.
• Entender el principio de formación de la imagen, comparando el tamaño y la
posición de los objetivos observados a través de las lentes.

ACTIVIDAD PRACTICA:

• Utilizando el lente objetivo 10x observe la preparación con una letra e impresa
con tinta sobre papel que le será entregada. Tenga presentes las instrucciones
para el manejo correcto del microscopio que se encuentran en la Introducción
de la presente guía.
• Compare la orientación de la letra e en su portaobjetos (preparación) y en su
campo visual (lo que observa a través del ocular del microscopio). ¿A qué se
debe la diferencia observada?
• Rote el revólver portaobjetivo hasta llegar al lente 40x y colóquelo en posición.
Centre y enfoque la preparación con la letra e. ¿Hay algún cambio en la
orientación de la letra e?
• Dibuje a lápiz mina la imagen observada de la letra e con el objetivo 10x:

OBSERVACION DE PREPARACION CONTENIENDO UNA LETRA e IMPRESA

[10X]

ACTIVIDAD Nº3:Observación de preparaciones biológicas permanentes.

OBJETIVO :

• Conocer aspectos generales de las técnicas de fijación


• Realizar observaciones microscópicas de preparaciones biológicas con el
objeto de aprender a esquematizar, descubrir e interpretar adecuadamente lo
observado.

La fijación es un método que se utiliza para preservar la morfología y la


composición química de las células que componen una preparación microscópica.
Consiste en agregar agentes fijadores a la muestra como acetona, formaldehído o
glutaraldehído, los cuales mantienen las interacciones entre las moléculas
(proteínas, ácidos nucleicos, etc.) y permiten que las preparaciones duren en buen
estado durante meses o años.

Uno de los métodos más utilizados para realizar preparaciones permanentes


consiste en fijar el material de interés en una solución FAA (formaldehído-alcohol-
ácido acético), concentración (entre 50 y 100%) y finalmente embeberlo en
parafina para obtener bloques que puedan ser cortados en secciones muy finas
utilizando un micrómetro.

Estas secciones que contienen material fijado y desecado se colocan


cuidadosamente en un portaobjetos, y se disuelve la parafina con un solvente
orgánico como xilol. Una vez hecho esto, la muestra se tiñe para contrarrestar las
distintas estructuras celulares y se protege con un cubreobjeto montado sobre una
sustancia sellante.

ACTIVIDAD PRACTICA:

• Elija dos de las siguientes preparaciones biológicas:

Célula animal Tej12 Frotis de sangre Tej20


Célula vegetal Tej38 Intestino de rata Tej16

• Observe al microscopio cada una de las preparaciones escogidas y realice un


dibujo de las células observadas en el espacio asignado para tal fin en su
informe.

• Al hacer su dibujo tenga presentes las siguientes recomendaciones:


- Los dibujos deben realizarse siempre a lápiz mina, evitando borrones y colores
oscuros. La utilización de lápices de colores es opcional, pero el colorear su
dibujo le puede ayudar a diferenciar con mayor claridad las estructuras
observadas.
- Realice un dibujo simple o esquemático, pero lo suficientemente grande como
para mostrar todos los detalles importantes.
- Trate de mantener una escala apropiada al tamaño de las estructuras
observadas.
- Acompañe su dibujo de notas explicativas, escritas en forma ordenada, clara y
breve. Si lo desea, anote los nombres de las estructuras identificadas en su
observación.
- Indique siempre el aumento con que está observando su preparación. Ej: [40x
].

ACTIVIDAD Nº 4. Observación de una preparación fresca (muestra real).

OBJETIVO:

• Realizar la preparación y observación microscópica de una muestra real


líquida.

ACTIVIDAD PRACTICA:

• Coloque una gota de la muestra real líquida en el centro de un portaobjetos


limpio, utilizando una pipeta Pasteur con gotario.
• Tome cuidadosamente un cubreobjeto (sin dejar marcas de huellas dactilares)
y colóquelo en un ángulo de 45º sobre el portaobjetos. Deslícelo hasta ponerlo
en contacto con la gota de agua y déjelo caer gradual y lentamente sobre ella.
Trate de evitar la formación de burbujas de aire pues interferirán con su
observación.
• Limpie el exceso de agua con un trozo de papel absorbente, cuidando de no
dejar pelusas sobre el cubreobjeto.
• Comience la observación microscópica de su preparación en el objetivo 10x y
prosiga aumentando gradualmente el aumento.
• Realice un dibujo de los organismos que observe. Descríbalos en forma clara
y breve.

ACTIVIDAD Nº 5: Observación de tejidos vegetales frescos y con tinción


(Catáfilo de cebolla).

OBJETIVO:

• Aprender a realizar preparaciones de tejidos temporales con tinción.

La mayoría de los colorantes de células o tinciones son de naturaleza orgánica y


aromática. Existen dos tipos generales de colorantes: básicos y ácidos. En los
básicos, el grupo cromóforo (que da el color) es básico o catiónico, por ejemplo el
grupo azo (N=N). Los colorantes ácidos poseen generalmente grupos nitrilo (NO 2)
o aromáticos. Ejemplos de colorantes ácidos son eosina y azul de anilina. De
colorantes básicos, azul de metileno, cristal violeta y azul de toluidina.
El mecanismo de acción de la mayoría de los colorantes se basa en la propiedad
de proteínas, ciertos polisacáridos y ácidos nucleicos de ionizarse como ácidos o
como básicos, lo que les permite reaccionar con los grupos cromóforos de las
tinciones.
La carga neta de las moléculas es la que determina con que tipo de colorante
reacciona, y es lo que permite realizar tinciones especificas para distintos tipos de
moléculas y estructuras celulares.

ACTIVIDAD PRACTICA:

• Tome el trozo de cebolla que le ha sido entregado, y con una hoja de gillete
limpia realice un pequeño corte en forma transversal al tejido. Levante
cuidadosamente el epitelio de la cebolla y tire de él hasta obtener un trozo
adecuado de tejido que le permita realizar una buena observación
microscópica. Si el trozo que usted cortó es demasiado grande, córtelo para
darle un tamaño adecuado.
• Coloque una gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio, utilizando
una pipeta Pasteur con gotario o una pizeta.
• Sobre la gota ubique un trozo de catáfilo de cebolla de tamaño adecuado para
que pueda ser cubierto posteriormente por el cubreobjetos. Su muestra debe
quedar completamente cubierta por el agua.
• Ponga una gota de la tinción a utilizar a un lado de su muestra e incline el
portaobjetos de tal modo que el colorante baje por capilaridad hasta atravesar
el tejido. Limpie el exceso de colorante con un papel absorbente.
• Tome cuidadosamente un cubreobjeto (sin dejar marcas de huellas dactilares)
y colóquelo en un ángulo de 45º sobre el portaobjetos. Deslícelo hasta ponerlo
en contacto con la muestra de catáfilo de cebolla y déjelo caer gradual y
lentamente sobre ella. Trate de evitar la formación de burbujas de aire pues
interferirán con su observación.
• Limpie el exceso de agua con un trozo de papel absorbente, cuidando de no
dejar pelusas sobre el cubreobjeto.
• Limpie el exceso de agua con un trozo de papel absorbente, cuidando de no
dejar pelusas sobre el cubreobjeto.
• Comience la observación microscópica de su preparación en el objetivo10x y
prosiga aumentando gradualmente el aumento.
• Realice en su informe un dibujo esquemático del tejido de la cebolla antes y
después de la tinción, describiendo brevemente lo observado.

BIBLIOGRAFIA Y LECTURA RECOMENDADA

Biología Celular y Molecular. De Robertis y de Robertis.


11ed., 2da impresión, 1998, Ed. El Ateneo, Bs. Aires.

Molecular Biology of the Cell. Alberts, Bray, Lewis, Raff Roberts & Watson.
3ra ed., 1994, Garland Publishing Inc., new York & London.

Microscopy
http://ostracon .biologie.uni-kl.de/b online/e03/03.htm

Fluorescence Microscopy
www.cimc.cornell.edu/Pages/Fluor.htm

Cell & Molecular Biology Online


http://www.cellbio.com/cuorses.htm
Ejemplo de imagen obtenida con microscopía óptica.

Ejemplo de imagen obtenido con microscopía electrónica.

Ejemplo de imagen obtenida con microscopio de contraste de fases

Ejemplo de imagen obtenida con microscopio de fluorescencia