POLICÍA BOLIVIANA

ACADEMIA NACIONAL DE POLICÍAS

POLICIA NACIONAL FROM, DACA 1

DIRECCIÓN NACIONAL DE INSTRUCCIÓN DEPARTAMENTO ACADEMICO
Y ENSEÑANZA
UNIVERSIDAD POLICIAL
ACADEMIA NACIONAL DE POLICÍAS

CURSO DE FORMACIÓN PROFESIONAL

CURSO :
SEMESTRE :
GESTIÓN :
ASIGNATURA:

TEMA:

CATEDRÁTICO:

CADETES:

FECHA:
LA PAZ-BOLIVIA

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TRABAJO PRACTICO

ESPECTROSCOPIA RAMAN

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I. TITULO

ESPECTROSCOPIA RAMAN

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II. OBJETIVO

II.I. OBJETIVO GENERAL

Conocer en detalle el estudio de la Espectroscopia Raman

II.II. OBJETIVO ESPECIFICO

 Detallar el estudio que lleva la Espectroscopia Raman

 Conocer los puntos de la espectroscopia Raman

 Conocer la utilidad de la Espectroscopia Raman

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III. FUNDAMENTO QUIMICO DE LA TECNICA

La Espectroscopía Raman es una técnica fotónica de alta resolución que proporciona

en pocos segundos información química y estructural de casi cualquier material o
compuesto orgánico y/o inorgánico permitiendo así su identificación. El análisis
mediante espectroscopía Raman se basa en el examen de la luz dispersada por un
material al incidir sobre él un haz de luz monocromático. Una pequeña porción de la luz
es dispersada inelásticamente experimentando ligeros cambios de frecuencia que son
característicos del material analizado e independiente de la frecuencia de la luz
incidente. Se trata de una técnica de análisis que se realiza directamente sobre el
material a analizar sin necesitar éste ningún tipo de preparación especial y que no
conlleva ninguna alteración de la superficie sobre la que se realiza el análisis, es decir,
es no-destructiva.

 COMPONENTES

 Láser: Es la fuente de excitación y es el componente principal sin él la luz no

pueda dispersarse, existen muchos tipos de láser pero el más recomendado es
el color rojo Helio-Neón, que produce una gran potencia. Otros tipos de láser
utilizados son los de Ar.
 Fibra óptica: Es el medio por donde viaja la luz láser, para alcanzar la muestra y
excitarla.
 Cabeza óptica: Está compuesto de diferentes dispositivos entre ellos;

El filtro, donde ocurre la interferencia de longitud de onda

El espejo, su objetivo es reflejar la luz que va a la muestra que se va a

caracterizar.

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Lente: enfoca la concentración de luz láser en el área donde se analiza la

muestra

Cámara: permite controlar el área donde la incidencia del láser se produce

correctamente.

 Monocromador: principal objetivo es capturar dicha señal enviada por el

láser y separar los componentes de los especímenes.
 Dispositivo de carga aplicada: CCD es un condensador que convierte los
fotones enviados por el láser a través de la fibra óptica, después de pasar
a través de los espejos en una señal similar, el CCD es responsable de
capturar esta señal, la recibe digitaliza los datos enviados y finalmente lo
envía a una computadora que muestra los espectros de luz del material.
 Software: a través de este programa de computadora se puede visualizar
el patrón espectral obtenido.

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IV. TOMA DE MUESTRA

Las muestras sólidas se pueden manipular de dos formas:

1. Colocando la muestra directamente sobre un porta objetos de vidrio. Esta

opción se recomienda cuando se desea recuperar el cien por ciento del material a
analizar o cuando la muestra consiste en fragmentos sólidos.

2. Montando la muestra sobre cinta de doble cara colocada previamente en un

porta objetos de vidrio. Esta alternativa se recomienda cuando la muestra
presenta estática o tiene una superficie irregular de forma que la cinta permite fijar
el material para evitar que se mueva del porta objetos.

Debido a que la cantidad de material que se requiere para medir los espectros Raman
es muy pequeña, se pueden montar varias muestras en un mismo porta objetos.
Existe la posibilidad de analizar algunas muestras líquidas, principalmente aquellas
que tienen presencia de solidos dispersos en algún líquido volátil. Este tipo de
muestras se monta colocando una gota de muestra directamente sobre el porta
objetos esperando a que se evapore el exceso de líquido.

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V. PROCEDIMIENTO

V.I. TRANSFERENCIA DE ENERGIA

La exploración con espectroscopia Raman se basa en hacer incidir un haz de luz

monocromática, generalmente en el intervalo de luz visible o infrarroja, sobre una
muestra cuyas características moleculares se desconocen con la finalidad de estudiar la
dispersión de la luz por el material. Si la dispersión es inelástica, se tiene una distorsión
momentánea de los electrones distribuidos alrededor del enlace de la molécula
(polarización); seguida por una relajación y reemisión de la radiación cuando el enlace
vuelve a su estado normal.

Antes de que la radiación interactúe con el sistema molecular, la radiación incidente

tiene n fotones, cada uno de ellos con energía ℎ 0, y la molécula se encuentra en un
estado inicial i con energía 𝐸i. La interacción de la radiación con la molécula conduce a
la aniquilación de un fotón de energía ℎ 0 y la creación de un fotón de energía ℎ 𝑠;
entonces la radiación contiene (𝑛 − 1) fotones con energía ℎ 0 y un nuevo fotón ℎ 𝑠, y la
molécula transita al estado f con energía 𝐸ƒ.

La radiación incidente tiene como objetivo perturbar a la molécula y abrir la posibilidad

de una transición, por lo que puede o no generar tránsitos espectroscópicos. Dado que
las oscilaciones entre niveles se realizan a frecuencias bien definidas en función de las
masas de las partículas que intervienen y del comportamiento dinámico de los enlaces

existentes, les corresponde un valor determinado de energía molecular, por lo cual, es

necesario que la energía ℎ 0 sea mayor que la diferencia de energía entre dos niveles
rotacionales, vibracionales o electrónico.

La variación energética debida a la excitación espectral por efecto Raman no es un

proceso cuantizado, razón por la cual, en función de la frecuencia de la radiación de la
fuente, la energía de la molécula puede tomar cualquiera de los infinitos valores entre

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un estado y otro (estados virtuales) que no respetan las leyes de conservación de la

energía.

Comúnmente, el fenómeno más probable en la interacción de los fotones con las

moléculas es la transferencia de energía a moléculas en un estado específico y la
reemisión al retornar a dicho estado (Fig. 1). Eso significa que la radiación dispersada
mantiene la misma frecuencia que la radiación incidente ( 𝑠 = 0), por lo que no existe
tránsito en los estados de la molécula (ƒ = i) y no se posee información sobre la
composición de la muestra analizada (dispersión Rayleigh).

Fig. 1 Diagrama energético en el que las líneas horizontales representan distintos estados vibracionales reales o virtuales
(líneas punteadas), y en el que se muestran transiciones entre estados energéticos para las distintas interacciones de
dispersión.

En contraposición, la dispersión Raman sí presentan tránsitos en los estados de la

molécula (ƒ G i) y las frecuencias pueden ser mayores o menores que la frecuencia de
excitación ( 𝑠 = 0 ± 𝑚)*. Si la frecuencia es mayor que la frecuencia incidente ( 𝑠 = 0 +

𝑚) y el tránsito es entre un estado de energía menor a otro de mayor energía (𝐸ƒ >
𝐸i), se denominan transiciones Stokes. Si, por otra parte, la transición es de mayor a
menor energía (𝐸ƒ < 𝐸i) y la frecuencia es menor ( 𝑠 = 0 − 𝑚) que la frecuencia
incidente, la transición se designan anti – Stokes†.
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Se advierte además que las bandas de Raman de una vibración particular dependen
del cambio de la polarizabilidad en función de la distancia. Mientras que la intensidad de
la dispersión Raman es proporcional a la cuarta potencia de la frecuencia ( 0 ± 𝑚)4,
definiendo el signo el tipo de dispersión Raman obtenida.

Una alternativa útil al tratamiento anterior es considerar que la radiación

electromagnética incidente posee una frecuencia circular 𝜔0. Cuando la molécula no
está vibrando, la polarizabilidad molecular 𝛼 es independiente del tiempo y el dipolo
eléctrico p posee la misma frecuencia circular que la radiación incidente (dispersión
Rayleigh). Sin embargo, si la molécula está vibrando, con una frecuencia circular M la
polarizabilidad adquiere una parte que depende del tiempo; como resultado, el dipolo
eléctrico inducido adquiere componentes de frecuencia circular 𝜔0 ± 𝜔𝑀 que generan
radiación con frecuencia 𝜔0 ± 𝜔𝑀. Así, el acoplamiento necesario entre los
movimientos nucleares y el campo electrónico está dado por éstos últimos, cuyo
reordenamiento con el movimiento nuclear impone una variación armónica en la
polarizabilidad.

La información anterior representa el contenido de número de onda de la radiación

dispersada, no da información sobre la naturaleza de la interacción entre la radiación
incidente y una molécula, o los factores que determinan las transiciones moleculares
que pueden participar en la dispersión Raman.

 Ruido en la espectroscopia Raman

En la adquisición de señales, la captación de ruido de fondo es siempre inevitable. En el

caso de la espectroscopia Raman, los ruidos más habituales son: el ruido shot, el ruido
generado por la muestra, el ruido generado por la instrumentación, el ruido
computacional y el ruido generado por fuentes externas.

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Fig. 2. Ruido en la espectroscopia Raman.

De ellos, los más habituales son el ruido shot, resultado de la naturaleza aleatoria de la
luz; el ruido por fuentes externas generalmente es causado por alguna fuente de luz
externa que contamina la señal; y el ruido generado por la muestra que incluye
emisiones ópticas no deseadas y generadas por la misma muestra como es el caso de
la fluorescencia. Este último encierra también los cambios de intensidad debidos a la
concentración y el ruido a causa de la heterogeneidad de la muestra. El ruido
computacional se debe a la digitalización de la señal y el ruido causado por la
instrumentación depende del tipo de arreglo utilizado; éste incluye el ruido térmico, el
ruido de lectura y la dependencia de la eficiencia del detector con la longitud de onda.

Dado que la identificación por espectroscopia Raman requiere de una localización

precisa de la posición de las bandas características de cada compuesto, la

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identificación y minimización – en la medida de lo posible – de estos ruidos permitirá

una mayor eficiencia de dicha técnica.

 Variantes de la Espectroscopia Raman

Las desventajas antes descritas para la espectroscopia Raman, han propiciado la

búsqueda de modificaciones que eliminen o minimicen los efectos del ruido en las
señales Raman. En esta vía se han generado nuevas formas de espectroscopia Raman
que logran disminuir ciertas desventajas, pese a ello, los resultados aún no resultan
óptimos. A continuación se enuncian algunos de estas variantes:

 Subtracted Shiftred Raman Spectroscopy (SSRS): Esta técnica representa una

alternativa que permite eliminar la interferencia; en ella se obtienen varios
espectros Raman de la misma muestra con un ligero corrimiento entre ellos, se
restan, se ajustan y se reconstruye el espectro. No obstante se logra una
considerable mejoría en los espectros, este método presenta dificultades
relacionadas con la necesidad de contar con el equipo adecuado para adquirir
los espectros corridos.
 Surface Enhanced Raman Spectroscopy (SERS): La espectroscopia Raman
Aplicada en Superficies es una técnica que permite amplificar significativamente
la señal Raman al mismo tiempo que ocurre un proceso de extinción de la
fluorescencia. Para ello se utiliza un coloide de nanopartículas metálicas–
generalmente, oro (Au), plata (Ag) o cobre (Cu) – y se vincula la dispersión
elástica por las partículas metálicas y la dispersión inelástica por las moléculas.
Se entiende que el SERS es primariamente un fenómeno asociado con la
amplificación del campo electromagnético alrededor de un pequeño objeto
metálico, excitado ópticamente en las cercanías de una resonancia dipolar
intensa y aguda.

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 Tip Enhanced Raman Spectroscopy (TERS): La espectroscopia Amplificada por

Puntas en Sondas es una variante del SERS en la cual se depositan
nanopartículas metálicas en el extremo de una fibra óptica que se utiliza para
transportar la señal del láser de excitación y la señal emitida por el analito.
 Shell – Isolate Nanoparticles Enhanced Raman Spectroscopy (SHINERS): Esta
técnica es otra variante del SERS en la cual se sintetizan nanopartículas
metálicas recubiertas por una capa inerte y se obtiene un polvo, logrando con
ello un amplificador de la señal Raman y pueden estudiarse puntos discretos o
toda el área, haciendo un mapeo.

VI. RESULTADOS

Como ya hemos visto, la espectroscopía Raman es una técnica que se realiza

directamente sobre el material a analizar, y que tiene las ventajas frente a otras
técnicas de caracterización de compuestos que no requiere ningún tipo de
preparación y que no conlleva ninguna alteración de la superficie sobre la que se
realiza el análisis. Con esta técnica se puede analizar la composición química de
compuestos orgánicos e inorgánicos sin destruir las muestras y sin preparación
especial y además se pueden analizar materiales en cualquier estado: sólido, líquido
o gaseoso. Otras técnicas de análisis son más restrictivas: la difracción de rayos-x
sólo permite determinar la composición a nivel atómico de cristales y aleaciones
inorgánicas muy bien ordenadas, la espectroscopía de fotoelectrones permite la
identificación de compuestos sólidos superficiales y necesita de ultra vacío, la
espectroscopía de infrarrojo permite analizar la composición química de sólidos
orgánicos e inorgánicos pero requiere la preparación de muestras muy delgadas
para que sean transparentes al IR, la fluorescencia de rayos-x permite sólo un
análisis por elemento de sólidos, requiere de vacío y protección para el operario etc.
Además, todas estas técnicas mencionadas anteriormente requieren unos equipos de
análisis de valor similar o superior al necesario para llevar a cabo análisis Raman.
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Es por tanto claro que la Espectroscopía Raman es una de las técnicas analíticas más
potentes de las existentes en la actualidad y, sin lugar a dudas la que más se adapta
a las exigencias del análisis de obras de arte. Sin embargo hay que destacar que
la espectroscopia Raman es una técnica con implicaciones en todos los ámbitos de
la investigación científica debido a que está basada en las vibraciones moleculares
y estas tienen lugar en cualquier cuerpo. Algunos de sus campos de aplicación son
los siguientes:

 Industria Petroquímica: la espectroscopía Raman fue introducida en esta

industria hace más de 20 años para resolver problemas de control de calidad en
polímeros y emulsiones. También ayuda a resolver problemas de desactivación
de catalizadores o su contaminación.
 Aplicaciones Biomédicas: el uso de la técnica ha destacado en el estudio de
proteínas y estructuras polipépticas en su estado fisiológico natural.
Variaciones

de esta técnica han sido exitosamente usadas en la determinación de colesterol,

lípidos, inmunoglobulina, oligosacáridos y otras moléculas biológicamente
activas.

 Industria Alimentaria: esta técnica se ha usado en la industria de alimentos para

determinar la presencia de macro-componentes tales como proteínas, lípidos,
carbohidratos y agua.

 Medio Ambiente: la espectroscopía Raman ha sido usada para analizar

compuestos orgánicos o inorgánicos en suelos y aguas y determinar su
contaminación por complejos metálicos, fenoles, ácidos poliorgánicos e
hidrocarbones.
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 Análisis de polímeros: estudio y caracterización de la cristalinidad en polímeros.

 Identificación de materiales pictóricos: esta técnica tiene un amplio campo de

aplicaciones a desarrollar en el mundo del arte que resultan muy útiles tanto
para el conocimiento de la historia del arte como para los trabajos de
conservación y restauración de las obras analizadas.

VII. INTERPRETACION

La espectroscopia Raman se ha aplicado al análisis cualitativo y cuantitativo de

sistemas inorgánicos, orgánicos y biológicos.

Es posible realizar análisis cuantitativos de muestras muy pequeñas debido a que los
haces láser se pueden enfocar con mucha precisión. Para estos análisis se utilizan
instrumentos denominados microsondas de láser. Las microsondas de laser se han
utilizado para determinar analitos en células bacterianas aisladas, componentes en
partículas individuales de humo y cenizas en suspensión y especies en inclusiones
microscópicas en minerales.

 Sistemas inorgánicos

En técnica Raman para la investigación espectroscópica de sistemas inorgánicos se

pueden utilizar disoluciones acuosas, además, las energías vibracionales de los
enlaces metal-ligando se encuentran, por lo general, entre 100 y 700 cmˆ-1.

Los espectros Raman son fuentes de información potencialmente útiles respecto a la

composición, estructura y estabilidad de los compuestos de coordinación.

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A través de esta técnica espectral numerosos complejos de halógenos y halogenoides

pueden investigarse y también, gracias a la misma, se han podido calcular las
constantes de disociación de ácidos fuertes como el H2SO4, HNO3, entre otros.

 Sistemas orgánicos

Los espectros Raman presentan regiones útiles para la detección de grupos funcionales
y también, regiones que permiten identificar compuestos específicos, además de
proporcionar información acerca de ciertos tipos de compuestos orgánicos.

La banda Raman es intensa y su posición depende de la naturaleza de los

sustituyentes y de su geometría. Los estudios de esta espectroscopia son apropiados
para proporcionar información útil acerca de los grupos funcionales olefínicos y también
de los derivados cicloparafínicos, estos últimos, tienen un pico Raman característico en
la región de 700 a 1.200 cmˆ-1 en donde se atribuye a una vibración de respiración en
la que los núcleos se mueven hacia adentro y hacia afuera simétricamente con respecto
al centro del anillo. La posición del pico disminuye de forma continua desde 1.190 cmˆ-1
para el ciclopropano hasta 700 cmˆ-1 para el ciclooctano, por lo tanto, la espectroscopia
Raman constituye una excelente herramienta para la estimación del tamaño del anillo
en las parafinas cíclicas.

 Sistemas biológicos

La espectroscopia Raman se ha aplicado ampliamente para el estudio de sistemas

biológicos. Entre las ventajas de esta técnica se incluyen el pequeño tamaño de
muestra requerido, la mínima interferencia del agua, el detalle espectral y la sensibilidad
respecto a los factores conformacionales y del entorno.

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VIII. CONCLUSION

En el examen de documentos cuestionados, donde se pretenda establecer la existencia

de manipulaciones o adulteraciones en el mismo o corroborar su autenticidad por medio
de análisis de la composición de los pigmentos de sus tintas para posterior
comparación, se ha optado siempre por utilizar métodos y técnicas no destructivas a fin
de obtener confiable y valiosa información sin perder ni alterar la evidencia documental.
Sin embargo, los mismos por lo general ofrecen resultados meramente cualitativos y
son muy sensibles con poca cantidad de muestra, siendo necesario recurrir a técnicas
más efectivas, como las cromatografías y espectrométricas, pero que requieren la
extracción de muestra del documento para su correcto análisis, comprometiendo su
integridad.

Asimismo, es cada vez más evidente el interés por el análisis forense de documentos
impresos por inyección de tinta o laser, ya que, han proliferado enormemente en
oficinas y hogares en los últimos tiempos por la gran cantidad que ofrecen y los costos
relativamente accesibles, que las han convertido rápidamente en herramientas idóneas
para la falsificación de documentos tales como pasaportes y billetes, siendo necesario
un método eficaz que pueda diferenciar y comparar sus tintas.

Es por ello que los métodos espectroscópicos de Raman han adquirido gran notoriedad
en los últimos tiempos para este tipo de análisis, puesto que no requieren la alteración
del documento por la extracción de muestra, y brindan la posibilidad de reproducir los
resultados obtenidos.

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IX. ANALISIS COMENTARIO

Sacando un análisis sobre el trabajo expuesto y presentado podemos decir que la

espectroscopia raman pertenece a la categoría de espectroscopia vibratoria. Esto
significa que analiza una muestra químicamente, mediante el uso de la luz para crear
(excitar) movimiento molecular, e interpretar esta interacción después.

Se basa en la dispersión inelástica de la luz que se produce cuando la materia es

irradiada por una fuente de luz monocromática. Después de que esta luz
monocromática haya interactuado con la muestra, una parte muy pequeña de ella ha
cambiado su longitud de onda.

Esto se llama: el efecto raman. Ahora podemos recopilar esa luz y podemos usarla para
obtener información sobre la muestra.

Cuando los fotones (luz) "golpean" importan, la mayor parte de la luz dispersa
permanece sin cambios en su longitud de onda. Por ejemplo, si apunta un puntero láser
verde a una pared, siempre verá un punto verde. La luz dispersa obviamente tiene el
mismo color y este fenómeno se llama dispersión de rayleigh.

Sin embargo, también pueden ocurrir procesos de dispersión inelásticos, que luego
conducen a la emisión de luz con una longitud de onda diferente. Esto suele ocurrir en
relación con la vibración molecular. Este fenómeno de dispersión, que fue predicho por
adolf smekal en 1923 y descubierto por c.v. raman en 1930, se llama el efecto raman.

Descubrir y entender el efecto raman abrió la puerta a un nuevo tipo de espectroscopia.

Sin embargo, fue sólo con el descubrimiento del láser que raman realmente arraigó, ya
que, como se mencionó anteriormente, la espectroscopia raman necesita luz
monocromática.

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Por lo tanto, la muestra se irradia con un láser y parte de la luz dispersa se analiza con
un espectrógrafo (tecnología dispersa o ft). Al final obtenemos un espectro raman que
nos muestra señales características o "bandas" para el material bajo investigación.

X. ANEXOS

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XI. BIBLIOGRAFIA

1 LONG D., “Introduction to Raman Spectroscopy”. En: EDWARD H. & J. Chalmers

(eds.), 2005, “Raman Spectroscopy in Archaeology and Art History”, The Royal
Society of Chemistry, pp. 17 – 40.

2 “Fundamentos de la espectroscopia Raman”

<http://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/6887/03Rpp03de1
1.pdf;jsessionid=B295F62A982B91275075E5F24406BD07.tdx 2?sequence=3>[En
línea, consulta 25 de octubre de 2012].

3 CASANOVA – González, E., 2012, “Espectroscopias Raman y SERS para el

estudio de patrimonio cultural mexicano” Tesis para obtener el título de Doctor
en Ciencia e Ingeniería de Materiales, Instituto de Física, UNAM, pp. 7 – 22.

 http://www.academia.edu/11438441/Espectroscop
%C3%ADa_Raman_aplicada_al_An
%C3%A1lisis_Forense_de_Tintas_de_Impresora

 Libro: “Principios de análisis instrumental 5ª Ed” - Douglas Skoog, James

Holler, Timothi Nieman

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