Universidad Católica de la Santísima

Concepción
Facultad de Medicina / Escuela de Medicina
Bioquímica

PRACTICO Nº05
Examen físico-
químico y
microscópico
de Orina
Integrantes / Pilar L. Navarrete Briones
Yael R. Oñate Antilao
María J. Pérez Fernández
Carlos Pino Contreras
Carrera / Medicina
Sección / Nº2
Docentes / Dr. Reginaldo Del Pozo, Ph. D.
BQ. Javier Grandon
BQ. Mirna Muñoz, M. Sc.
QA. German Rotter
Fecha / Jueves 7 de Junio de 2007
 Los riñones son el principal medio que tiene nuestro organismo para eliminar los productos de
desecho metabólico; entre estos se encuentran la urea (metabolismo de amino ácidos)
principalmente, creatinina (de creatina muscular), ácido úrico (metabolismo de ácidos nucleicos),
productos de degradación de la hemoglobina (bilirrubina) etc. y son por supuesto los encargados de
eliminar por medio de la orina la mayoría de las toxinas y otras sustancias extrañas ingeridas por el
organismo.
La orina, una solución de filtrado renal, es un líquido acuoso que presenta aspecto
transparente, de color amarillo paja o ambar, con olor característico, cuyo principal componente es el
agua, además de electrolitos en baja cantidad, células epiteliales del tracto urinario y desechos
metabólicos. En condiciones normales presenta una densidad muy similar a la del agua (1.010-1.025
g/ml) y un pH que varia entre 4.8 y 7.5; nunca se debe encontrar elementos como glucosa, proteínas,
glóbulos rojos o blancos en elevada cantidad (mayor a 5 /pcm) o bacterias, ya que todo esto puede
ser determinante de daños hepáticos, diabetes, enfermedades hemolíticas, urológicas o nefróticas,
por lo que mediante el análisis de la orina ayuda en el diagnóstico de varias enfermedades tanto
directas como indirectas al tracto urinario, por lo que aquí es donde radica la importancia del examen
de orina, tema central de este laboratorio.
A diferencia de otros métodos de laboratorio, la toma de muestra es indolora, simple y no
implica un costo adicional para el paciente, además de ser de fácil transporte, pero si debe tenerse el
cuidado se seguir las indicaciones típicas del examen tales como; el adecuado aseo antes de la toma
de muestra y que se realice a primera hora de la mañana en ayuna y eliminando el primer chorro. La
información que obtenemos, además de ser variada, es rápida y económica. Sin embargo, al igual
que cualquier muestra, debe tratarse con cuidado para evitar errores en los resultados.
El examen de orina se compone de tres partes: exámen físico, exámen químico y sedimento
urinario, por lo que en este práctico conoceremos los tres. El examen físico incluye Color, pH,
aspecto y densidad. El examen químico se divide en análisis semi-cuantitativo, el cual incluye el
análisis de leucocitos, nitratos, glucosa, entre otros; y análisis cuantitativo, el cual incluye glucosa. El
sedimento urinario es el producto de la sedimentación de los elementos de la orina en forma de
suspensión, el cual se obtiene a través de la centrifugación de la orina y luego se observa en el
microscopio óptico normal. Este es un método diagnóstico muy sencillo, donde aparecen elementos
formales y no formales que detecta enfermedades renales, en vías urinarias u otras regiones.

Objetivos //

Conocer el procedimiento general de un exámen de orina.

Destacar la importancia de este exámen y su utilidad en la práctica médica, mediante el
conocimiento basado en la experiencia.
Relacionar anormalidades en una muestra de orina con ciertas patologías

Materiales//
 Muestra de orina de un Muestra de orina problema Probeta
integrante del grupo nº4

Micropipetas (5-50 µl y Microscopio Tubos de ensayo

200-1000 µl)

Gradilla Espectrofotómetro Cubetas

Puntas para micropipetas Centrífuga de mesa Porta objetos

Cubre objetos Pipeta Pasteur Tiras reactivas para

uroanálisis URISCAN

Vortex

Reactivos usados:
• Estándar Glucosa 100mg/dl (5.55 mmol/l)

• Muestra problema Glucosa N°4

• Reactivo para identificación de glucosa

 − Tampón fosfato pH 7.3; 100mmol/l

− Fenol 16 mmol/l

− 4 aminoantipirina 0.25 mmol/l

− Glucosa Oxidasa ≥ 20.000 U/l

− Peroxidasa ≥ 1.000 U/l

Método//

EXAMEN FISICO DE ORINA

En esta primera experiencia se vertieron aproximadamente 30 ml de la
muestra de orina previamente homogenizada en una probeta, para su
posterior observación y determinación de las siguientes características:
• Color

• Aspecto

• Transparencia

• Presencia de algún tipo de precipitado

EXAMEN QUIMICO

Estudio semi-cuantitativo con tiras reactivas.

Para realizar este estudio se debió:

1. Sumergir una tira reactiva en la muestra de orina. La tira

reactiva permaneció 1 segundo aproximadamente en la
probeta, en contacto con la orina.

2. Luego de sacar la tira, se secó el borde lateral del papel y se

superpuso sobre la escala cromática. Esta escala esta
graduada para distintos parámetros diferentes, estos son:
pH, niveles de Glucosa, sangre, leucocitos, nitritos,
proteínas, cuerpos cetónicos, urobilinógeno, bilirrubina,
densidad, acido ascórbico.
 3. Se comparó el color obtenido luego de sumergir la tira reactiva con la escala cromática
correspondiente, obteniéndose los valores aproximados de los parámetros ya mencionados.

4. El procedimiento anterior se realizó también con la muestra

problema nº4.

Estudio cuantitativo de orina: glucosa enzimática colorimétrica líquida (método GOD-PAP)

1. En este examen se prepararon tres soluciones: una solución blanco, un estándar con
duplicado y una solución con la muestra problema nº4 de glucosa. Se utilizaron las
cantidades de reactivos que se detallan a continuación:

Tubo Blanco Estándar Muestra problema

Reactivo nº4
Estándar ---- 10µl ----
Muestra ---- ---- 10µl
Reactivo 1 ml 1ml 1ml

2. Los tubos se agitaron en el vortex, para luego ser incubada a temperatura

ambiente por 10 minutos, para permitir que la reacción de identificación se
pueda dar.

3. Posteriormente, se tomaron los tubos y se deposito una muestra de

cada uno en las cubetas para luego ser leídas al espectrofotómetro a
una longitud de onda de 500 nm.

EXAMEN MICROSCOPICO: Análisis de Sedimento Urinario

1. Como primer paso se procedió a depositar 10 ml de cada muestra de orina en tubos de

ensayo. Esto se realizó luego de homogenizar las muestras.

Tubo nº1
Tubo nº2
2. Se sometió a los tubos con las muestras a una centrifugación, para poder separar cualquier
elemento sólido de la fase líquida. Este proceso se realizó en una centrífuga de mesa, por 7
minutos a 2000 rpm.
 3. Luego de la centrifugación, se eliminó el sobrenadante, para trabajar sólo con el sedimento
obtenido. Este luego se homogenizó para extraer una pequeña alícuota con una pipeta
pasteur y depositarla sobre un portaobjeto. Luego se cubre con un cubreobjteto.

4. Cada una de las muestras se observa al microscopio, y se busca la presencia en el sedimento

de los siguientes elementos:

•
Células: Cristales: Cilindros: Otros :
Hialinos bacterias
Células descamativas Uratos
Granulosos Tricomonas
Células tubulares Oxalato de calcio
Celulares Piocitos
Leucocitos Fosfatos amorfos
Eritrocitarios Espermatozoides
Glóbulos rojos Fosfato de amonio
Resultados//

Examen Físico
Muestra del grupo: Color : ámbar claro
Aspecto : transparente
Densidad : 1.025 g/mL
pH :5

Muestra problema (4): Color : nebuloso (posible presencia de glóbulos rojos)

Aspecto : semi-transparente nebuloso
Densidad : 1.020 g/mL
pH :7

Examen Químico Semi-cuantitativo

Muestra de Muestra de orina problema (4)

orina, del grupo (g/L)
(g/L)
Leucocitos 0 75
Nitritos 0 0
Proteínas 0 0
Glucosa 0 0
Bilirrubina 0 0
Urubilinógeno 0 0
Cuerpos 0 0
cetónicos
Acido ascórbico 10 0
Sangre 0 250

**Los resultados obtenidos con las tiras reactivas, son de carácter aproximado, debido a las
características ya mencionadas de estas.

Examen Químico Cualitativo

Absorbancia
Blanco 0.000
Estándar 1 0.271
Estándar (duplicado) 0.285
Muestra Problema (4) 0.116
Muestra Problema (4) 0.124
(duplicado)

Absorbancia N°1  0.271

Promedio: 0.278
Absorbancia N°2  0.285

Muestra de cálculo:

Glucosa en mmoles/l: Glucosa en mg/dl:

Glucosa = Abs muestra x 5.55 mmol/l Glucosa = Abs muestra x 100 mg/l
Abs estándar Abs estándar
Glucosa = 0.116 x 5.55 mmol/l Glucosa = 0.116 x 100 mg/dl
0.278 0.278
Glucosa = 2.31 mmol/l Glucosa = 41.72 mg/dl

Duplicados:
 Glucosa en mmoles/l: Glucosa en mg/dl:
Glucosa = Abs muestra x5.55mmol/l Glucosa = Abs muestra x 100 mg/l
Abs estándar Abs estándar
Glucosa = 0.124 x 5.55 mmol/l Glucosa = 0.124 x 100 mg/dl
0.278nm 0.278nm
Glucosa = 2.47 mmol/l Glucosa = 44.60 mg/dl
Promedios:
Glucosa = 2.39 mmol/l Glucosa = 43.16mg/dl

Discusión//

Prueba N°1:
*Exámen físico:
• Al analizar la muestra del grupo esta resulto ser normal.
• La muestra problema N4, se vio de aspecto turbio y con sedimento color rojo lo que
podría indicar hematuria.
*Examen químico con tiras reactivas:
• Al analizar la muestra del grupo se detectó sobre el rango únicamente la presencia
de acido ascórbico, que es normal en orina, pero su hallazgo puede interferir con la medición de
otras sustancias especialmente en las reacciones para sangre o glucosa, esta también podría
deberse a que nuestro compañero estuviera recibiendo grandes cantidades de vitamina c, donde su
exceso es eliminado correctamente en la orina, de la misma forma que ocurriría con un fármaco.
• En la muestra problema N°4 encontramos presencia de sangre, leucocituria moderada y una
leve variación de ph (7); estos datos podrían sugerir una inflamación, siendo o no causada por un
agente infeccioso y la hematuria que indicaría desde un problema glomerular hasta una lesión en
la vía urinaria, por lo que se reafirma una vez mas la importancia de realizar el examen de
sedimento urinario a continuación de la tiras reactivas.

Elemento ¿Cómo se mide? ¿Porqué se mide? ¿Su presencia

indica?
Ácido Ascórbico. Reactivo de tillmans Podría entorpecer el Estado del filtración
( coloración Azul valor de la glicemia y glomerular para
Grisácea o otros parámetros. fármacos y vitaminas
Anaranjada  +)
Urobilínogeno. Sal de Diazonio Indicador del estado Aumento de la
hepático entre otras destrucción d
cosas eritrocitos en el
organismo

Billirrubina. Sal de diazonio Indicador del estado Ictericia hepática,

(distinta de la hepático entre otras aumento en la
anterior) cosas destrucción de
eritrocitos
Nitritos. Prueba de Griess Presencia de Infección bacteriana
bacterias
Glucosa. Glucosa Oxidasa – Estado de la filtración Exceso del valor 
Peroxidasa renal de glucosa Diabetes

Pesquisar
Leucocituria. Actividad estereásica infecciones Inflamación/ infección
de los granulocitos bacterianas o de otro de la vía urinaria
tipo
Hematuria. Oxidación de un Indicador del estado Lesion de las vias
indicador en de la función renal o urinarias, patología
presencia de de lesiones PRE o
Hemoglobina o urinarias. POSTglomerular
Mioglobina ( no distingue en te
Hm libre y células )
Densidad. Colorante azul de Medida de la Componentes iónicos
bromitol concentración de la en la orina ( Na+, Cl-,
orina etc…)
Proteínas. Error proteico de Indica estado de Permeabilidad
indicadores de pH filtración glomerular aumentada en el
glomérulo
Cuerpos Prueba de Legal Cetoacidosis por Aumento de
Cetónicos. diabetes, intoxicación Catabolismo de las
por metanol. grasas bajo
condiciones
patológicas
pH. Indicadores de pH La alcalinidad o Alcalinainfección
rango 5-9 acidez de la orina se urinaria , trastornos
asocia a a patologías metabóicos,etc
Ácidadesnutrición,
diarrea, diabetes,etc.

*Metodo enzimatico glucosa GOD-PAP:

**Nuestro grupo no utilizo este método en la muestra de nuestro compañero, ni en la muestra

problema N°4 ya que las tiras reactivas no mostraron la presencia de glucosa.

RESULTADOS GLUCOSA –OXIDASA PEROXIDASA:

Según la comparación con los siguientes valores de glucosa:

L.C.R. :40-75 mg/dl, (32,22-4,16mmol/l)

Glicemia : 40-75mg/dl, (3,89-6,11mmol/l)
Glucosuria : normal 0

Muestra problema N°4 promedio

concentración de Glucosa 43,16mg/dl,

El valor de la concentración de glucosa en esta muestra (que es distinta a las muestras de orina
del grupo y a la muestra N°4 de orina) quedo claramente establecido por el método GOD-PAD, no
sabemos si esta muestra es de orina, si así fuera el paciente dueño de ella podría tener una
alteración en la excreción renal de la misma, el problema debería ser a nivel de túbulos
contorneados lugar en el cual se reabsorbe esta sustancia, o también podria ser factible pensar en un
cuadro diabético, de hecho el valor se asemeja bastante a la concentración de glucosa en el líquido
cefalorraquídeo, por lo que incluso llegamos a pensar que la muestra podría haber sido de LCR.
La glucosuria es uno de los aspectos más relevantes al momento de hacer un examen de orina, lo
cierto es que debe ser asociada a otras medidas para que tenga un valor real, particularmente en lo
que se refiere a la diabetes mellitus (medida de valor de glicemia).

Para el desarrollo de este práctico es importante tener presente las siguientes

consideraciones:
*De la toma de muestra:
• Se debe colectar el segundo chorro de la micción espontánea, para evitar contaminantes y
especialmente en la mujer la presencia de secreciones vaginales, esto se realiza en un recipiente
estéril y previa limpieza de zona genital.
• El momento más adecuado para toma de muestras es la mañana, puesto que la ingesta de líquidos
durante el día podrían alterar los resultados (diluir la orina).
*Examen: el análisis debe ser efectuado lo antes posible, período máximo 1-1.5 horas de espera, ya
que de lo contrario los resultados podrían ser alterados.
 Físico : también llamado Urinoscopía, se realiza observando la orina en un medio a contraluz.
 Químico : a través de tiras reactivas, cuando se usan para medir enfermedades de la vía
urinaria deben contemplar: proteínas, nitritos, leucocitos, pH y sangre; algunas de las desventajas
de este método son:
 • Sangre en la orina: cuando se detecta sangre en al orina no se puede saber si se trata de
hematíes, hemoglobina o mioglobina.
• Nitritos: no todas las bacterias responsables de infecciones urinarias producen nitritos.

Sedimento Urinario: este se analiza previa centrifugación, la cual acelera el proceso de

sedimentación, el estudio del sedimento nos ofrece una visión panorámica y general del estado de la
orina, a diferencia de la observación de la orina nativa (no centrifugada) en la que se observa un
porcentaje mínimo de los elementos urinarios. El sedimento debe ser homogeneizado.

En nuestra muestra problema se encontró:

>> Hematuria con Hematíes homogéneos, este hallazgo nos reafirma lo encontrado con las
tiras reactivas y nos indica claramente de que hay pérdida de eritrocitos completos, con morfología
normal, por lo que descartamos un problema glomerular, ya que si fuera así, estos estarían
desformes por la gran presión que habrían experimentado, por lo que esta excreción es
postglomerular.
>> Leucocituria moderada, al observar en el microscopio comprobamos la presencia de
leucocitos en una proporción de más de 5 por campo focal, pero esta es carácter moderado y reciente
porque no hay exceso de ellos.
>> Bacterias baciliformes (probablemente  Escherichia Coli, dato proporcionado por la
profesora Mirna Muñoz), lo que indica claramente una infección urinaria; a pesar de que el examen
con las tiras reactivas no registro presencia de nitritos, ya que las bacterias y otros gérmenes
patógenos de la orina tienen la capacidad de reducir los nitratos de la orina a nitritos durante su
crecimiento esto puede haber ocurrido por: deficiencia de nitratos en la dieta, muy baja de
concentración de nitritos, orina muy diluida, traspaso del límite tiempo para la observación; sumado a
que la sensibilidad de las tiras reactivas para este parámetro es de alrededor de 50%. Para
determinar el tipo de bacteria que es el agente infeccioso, se debe someter la muestra a un
Urocultivo.
Referente a la Infección Urinaria (IU) es importante mencionar que esta constituye una de las
causas más frecuentes de enfermedad infecciosa encontrada en clínica y se caracteriza por altas
tasas de incidencia y morbilidad en la población pediátrica y adulta en diferentes regiones del mundo.
En general se considera que la mayoría de estas infecciones son causadas por gérmenes presentes
en la flora intestinal.

Porcentaje Germen
93% Bacilos gramnegativos (Escherichia coli)
6% Coco grampositivos
1% Levaduras, virus, protozoos y parasitos
**Según la Revista Cubana de Pediatría

Conclusión //

 La secuencia de experimentos de esta semana nos permitió darnos cuenta del gran valor
de métodos de apoyo diagnósticos tan sencillos como el examen de orina.

 La orina, tal como se ha mencionado muchas veces en literatura, representa una

verdadera biopsia, que nos indica el estado no sólo de la vía urinaria sino de todo el
organismo.

 El examen de orina no constituye por si mismo la herramienta para un diagnóstico

definitivo, debido a que existen márgenes de error en lo que se refiere por ejemplo a la
especificad de detección de la tiras reactivas y a la no posibilidad de identificación de
bacterias en caso de un bacteriuria en el sedimento urinario por lo que debe necesariamente
completarse con otros exámenes como urocultivo, examen sanguíneo y además con la
información otorgada durante el trato directo médico médico – paciente.

 Volviendo a insistir en lo anterior, es muy importante el criterio y la experiencia a la hora

de examinar la orina de un paciente, sólo con estos elementos lograremos evaluar
correctamente todos los parámetros involucrados (morfología de eritrocitos, presencia de
cilindros, etc).

 Siguiendo con el tema de las ventajas y desventajas del examen de orina, la posiblidad
de contaminación de la muestra es algo no se debe despreciar, de ahí la importancia de
respetar los tiempos de análisis. Y respecto de las ventajas el examen de orina este es
rápido, no invasivo, sencillo y ofrece un panorama general del estado urinario.

 Los resultados del examen de orina pueden ser similares en muchas patologías renales
y otras alteraciones orgánicas (nefritis, pielonefritis, glomerulitis, cistitis, etc)

 El examen de orina además de ser instrumento de apoyo diagnóstico es un impotante

instrumento de seguimiento en la evolución de patologías como la diabetes.

 La determinación de la concentración de glucosa según el método GOD-PAD se

fundamenta una vez más en métodos espectrofométricos; la concentración de glucosa
presente en una muestra es directamente proporcional a la absorbancia de la sustancia
cromófora presente en la misma, la cual se logra mediante reacciones enzimáticas.
(Reacción 1:1).

Bibliografía//
GUÍA DE TRABAJOS PRÁCTICOS, Carrera de Medicina 2007 Universidad Católica de la Santísima
Concepción. Dr. Reginaldo del Pozo, Ph.D.; BQ Javier Grandón, BQ Mirna Muñoz, M.Sc.; QA
German Rotter.

EL SEDIMENTO URINARIO, ATLAS TECNICAS DE STUDIO, VALORACION. (1994),

5° Edición, Editorial Panamericana: Robert Heintz-Sabine Althof.

Revista Cubana de Pediatría 2006 http://bvs.sld.cu/revistas/ped/vol78_03_06/ped05306.htm

http://www.prolab.com.co/nove.php?id=3

http://www.med.ufro.cl/tecmed/descargas/ITU%20TM%20LICENCIATURA%202.ppt#259,3,Gener
alidades