Effective
Monoclonal Anti-A
Monoclonal Anti-B
Monoclonal Anti-AB
Anticuerpos monoclonales (Suero de determinación de grupo
sanguínea) para Fenotipificación de los glóbulos rojos humanos
Monoclonal Anti-A, Monoclonal Anti-B y Monoclonal Anti-AB son anticuerpos
monoclonales de tipo IgM específicos contra antígenos de los glóbulos rojos
A y B.
Aplicación: Para uso in Vitro en pruebas de hemaglutinación en lámina
portaobjetos o solución salina para determinación del grupo sanguíneo
humano.
Reactivo: Anticuerpo Monoclonal de ratón contra antígenos de grupos
sanguíneos A y B.
Fuente: Se obtiene mediante la inmunización de ratones blancos Balb/c con
glóbulos rojos de los grupos sanguíneos A y B y fusión de los esplenocitos
de ratón con células de mieloma (SP2/0).
Almacenamiento: Este producto será bien conservado dentro del límite de
uso hasta la fecha de expiración, si se almacena a una temperatura entre
+2ºC y +8ºC.
Precaución: No congelar.
Principio:
Los antígenos de glóbulos rojos A o B se mezclarán con sus respectivos
anticuerpos produciendo aglutinación. La fenotipificación (Determinación de
grupo sanguíneo) se realiza mediante el análisis de la muestra de sangre
con Monoclonal Anti-A o Monoclonal Anti-B. La presencia de
hemaglutinación determina el grupo de la muestra de sangre.
Muestras:
Utilice sangre anticoagulada correctamente almacenada o suspensión salina
de glóbulos rojos al 10%. Para preparar la suspensión salina al 10% de RBC
(Glóbulos Rojos) añadir aproximadamente 5 volúmenes de solución salina
isotónica a la sangre total y centrifugar durante 2 minutos. Eliminar el
sobrenadante y lavar los glóbulos rojos sedimentados tres veces más con
solución salina como en el paso anterior. Después del lavado final, tomar
100µL de glóbulos rojos sedimentados, diluir hasta 1mL con solución salina y
mezclar bien antes de usar.
Procedimiento:
1. Prueba macroscópica en la lámina portaobjetos.
Paso 1: Etiquetar 2 láminas portaobjetos de vidrio con el nombre o número
de paciente y hacer dos círculos en cada lámina portaobjetos. Etiquetar los
círculos como A, B, AB y S (solución Salina).
Paso 2: Añadir una gota de anticuerpo monoclonal Monoclonal Anti-A en el
círculo A, Monoclonal Anti-B en el círculo B, Monoclonal Anti-AB en el
círculo AB y una gota de Solución Salina en el cuarto círculo.
Paso 3: Añadir una gota de sangre total o suspensión salina de glóbulos
rojos del paciente a cada círculo.
Paso 4: Mezclar los glóbulos rojos y el anticuerpo inmediatamente con un
aplicador y extender sobre un área de alrededor de 1 pulgada2 dentro del
círculo.
Paso 5: Incline suavemente la lámina portaobjetos hacia adelante y hacia
atrás a temperatura ambiente durante un máximo de 2 minutos.
Paso 6: Leer la lámina portaobjetos en búsqueda de hemoaglutinación.
2. Prueba Microscópica del tubos (Para aumentar la sensibilidad)
Paso 1: Use tubos de ensayo pequeños de 8 x 50mm. Para cada muestra,
coloque 4 tubos y etiquete con el nombre y número de código del paciente.
También marcar los tubos A, B, AB y S (solución Salina).
Paso 2: Añadir una gota de anticuerpos Monoclonal Anti-A, Monoclonal
Anti-B, Monoclonal Anti-AB y Solución Salina a los tubos respectivos.
Paso 3: Añadir una gota de suspensión salina de Glóbulos Rojos al 10% a
cada tubo.
Paso 4: Agitar bien cada tubo y centrifugar por 1 minuto a 1000 rpm, a
temperatura ambiente.
Paso 5: Agitar suavemente las células sedimentadas y leer en búsqueda
de hemoaglutinación, ya sea microscópica o macroscópica.
Interpretación:
La aglutinación de las células rojas de la sangre en dos minutos indica la
presencia de los antígenos correspondientes en los glóbulos rojos del
paciente. La ausencia de aglutinación indica la ausencia de tales antígenos
en los glóbulos rojos del paciente.
 6. Concentraciones de antígenos y anticuerpos incorrectas pueden
Resultados de aglutinación se interpretan de la siguiente manera para causar aglutinación falsa o retardada.
la fenotipificación:
Presentación:
Muestras de glóbulos rojos que reaccionan con 5mL y 10mL listos para usar, solución de anticuerpos conservada con
Resultado 0,1% de azida de sodio.
Monoclonal Monoclonal Monoclonal Solución
Anti-A Anti-B Anti-AB salina
Nº de Tamaño del
+ - + - Grupo A Reactivo Cantidad
código envase
- + + - Grupo B MBG 001 Monoclonal Anti-A 5mL 1 frasco
MBG 002 Monoclonal Anti-A 10mL 1 frasco
+ + + - Grupo AB MBG 011 Monoclonal Anti-B 5mL 1 frasco
- - - - Grupo O MBG 012 Monoclonal Anti-B 10mL 1 frasco
Variantes más MBG 041 Monoclonal Anti-AB 5mL 1 frasco
- - + - débiles grupo de A ó MBG 042 Monoclonal Anti-AB 10mL 1 frasco
B Envases a granel de 5 litros y superiores están también disponibles.
+ + + + (*)
Bibliografía
(*) Posibilidad de autoanticuerpos en la sangre que dan una reacción no
específica. El exámen debe ser repetido en su totalidad usando una suspensión
salina de glóbulos rojos al 10%. 1. Vox sanguinis, 1989, 56, 122.
2. Bio test bulletin, 1988, 3, 117.
Aunque los antisueros Monoclonal Anti-A y Monoclonal Anti-B son 3. WHO Expert committee on Biological standardization, Technical
suficientes para hallar el fenotipo ABO (sangre "O"), es aconsejable utilizar report series, 1977, 610, WHO, Geneva
sueros Monoclonal Anti-AB para descartar cualquier duda que surja debido a 4. American Association of blood banking technical Manual, 1990, 345.
las variantes más débiles de los subgrupos de A y B.
Correr los controles de prueba positivos y negativos por cada lote de sueros Fabricado por:
de determinación de grupo sanguíneo antes de proceder con las muestras Mediclone Biotech Pvt. Ltd.
de prueba reales.

Precauciones:
1. La gota de sangre en la lámina portaobjetos no se debe dejarse secar, el
secado parcial de la sangre podría ser malinterpretado como aglutinación.
2. La centrifugación debe ser exacta. El exceso de centrifugación o baja
centrifugación puede resultar en interpretación de falsos negativos.
3. La eliminación de los sedimentos de glóbulos rojos en el tubo de ensayo
se debe hacer lo más suavemente posible, la eliminación brusca puede
impedir aglutinaciones pequeñas o débiles y puede, por lo tanto, dar lugar a
interpretación falsos negativos.
4. El procedimiento debe llevarse a cabo a temperatura ambiente. Los
anticuerpos calientes o fríos en la muestra de sangre pueden causar
aglutinación y dar lugar a una interpretación errónea.
5. Las muestras de sangre hemolizadas no deben ser utilizadas.