Melaza de ACOR.

Optimización del medio de fermentación para Leuconosoc

mesenteroides CECT 8146. Diseño experimental de Plackett-Burman.

Inóculo

Con un asa de siembra, se coge una muestra del glicerinado y se siembra en el siguiente
medio líquido:

Concentración (g/l)
Sacarosa 150
Extracto de levadura 0,5
Triptona 1
KH2PO4 1
MgSO4·7H2O 0,2
MnSO4·H2O 0,015

El pH del medio debe ser aproximadamente de 6,0-6,5. El pH se ajusta añadiendo HCl.

Incubar a 30 ºC con una agitación de 150 rpm. Se inyecta N 2 en las botellas. Lo dejamos crecer
durante 24-30 horas.

Fermentación

Se prepara una dilución de melaza de modo que la concentración final de sacarosa sea de
aproximadamente 150 g/l.
Hay que preparar doce botellas de 50 ml diferentes, con estas concentraciones de nutrientes:

Extracto de levadura Triptona KH2PO4 MgSO4·7H2O MnSO4·H2O

Muestra
(g/l) (g/l) (g/l) (g/l) (g/l)
1 0 1 1 0,2 0
2 0,5 1 0 0,2 0
3 0,5 1 0 0,2 0,015
4 0,5 0 1 0,2 0
5 0 1 0 0 0
6 0 0 0 0,2 0,015
7 0,5 0 0 0 0,015
8 0,5 0 1 0 0
9 0,5 1 1 0 0,015
10 0 0 0 0 0
11 0 1 1 0 0,015
12 0 0 1 0,2 0,015

El pH se ajusta a 6,0-6,5. Todas las muestras llevan 5 g/l de CaCO 3 para controlar el pH. Se
inyecta N2 en las botellas. Se realiza la fermentación a 30 ºC y 150 rpm durante 5 días.