EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO1 GUTIERREZ, Sebastián (273875) – PRIETO, Stefania (273891) – SANTODOMINGO, Olgher (132897) – ZULUAGA, Diego

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OBJETIVOS Estudiar los principios ópticos y propiedades del microscopio. Conocer y ejercitar el correcto manejo del microscopio. Determinar el diámetro del campo Óptico. Microscopio Compuesto El microscopio compuesto esta constituido por tres sistemas: uno mecánico otro de iluminación y uno que llamamos óptico. El sistema mecánico son todos aquellos mecanismos que hacen del microscopio una herramienta funcional, permite mover todas las

partes del microscopio: el cabezote, la platina, los objetivos, y el portaobjetos. El sistema de iluminación suministra la luz que hace visibles las muestras. El sistema óptico, son todas las lentes que se encuentran el microscopio: sus partes principales son: el Objetivo, el Ocular y el condensador. La figura 11 muestra las partes fundamentales de un microscopio. Ocular: Tiene como fin realizar la magnificación de la imagen aumentada por el objetivo, lleva los rayos de luz al observador, se puede girar para lograr enfocar las imágenes. Objetivo: Lente situada muy próxima al objeto de observación que llamamos simplemente objeto. Amplifica los rayos que atraviesan el objeto y proyecta una imagen aérea en el tubo del microscopio que después es amplificada por el ocular. Porta objetos: En el se fijan las laminas de vidrio en las que se deposita la muestra de interés.

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Imagen tomada y modificada de http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_ %C3%B3ptico

Olgher (132897) – ZULUAGA. en microscopios ópticos puede ser un espejo o una bombilla incandescente. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. El tornillo micrométrico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina.. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0. Tambor: En microscopio con más de un objetivo se implementa un tambor rotativo que permite cambiar de un objetivo a otro. Patina: Plataforma metálica horizontal entre la fuente de luz y la muestra. Fuente de Luz: Es la que suministra la luz al condensador. se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación. deslizándose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación. asciende o desciende el tubo del microscopio. que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos. consta de dos regletas micrométricas (una horizontal sobre el plano del objeto y otra vertical) que permiten realizar mediciones. Sebastián (273875) – PRIETO.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO2 GUTIERREZ. Diego (273919) Condensador: Lentes que concentran los rayos de luz provenientes de la fuente.001 mm. Brazo: Estructura que junto con el soporte construyen el microscopio. Principios Físicos y funcionamiento del microscopio . El tornillo macrométrico: girando este tornillo. cuenta con un tornillo micrométrico que permite acercar o alejar el objetivo a la muestra hasta lograr la distancia focal.

biooptic. Sin embargo.). Una vez que el objeto se ha aumentado hasta el punto en donde la imagen se vuelve borrosa. Diego (273919) La Figura 22 muestra cómo funciona el sistema de lentes de un microscopio para producir una imagen aumentada de una muestra diminuta. situada bajo la platina. La limitación fundamental no consiste en el aumento sino en el poder de resolución.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO3 GUTIERREZ. Olgher (132897) – ZULUAGA. Sebastián (273875) – PRIETO. La función del objetivo es comparable a la de una pequeña lente de proyección. En la figura 1. Este tipo de incremento inútil del aumento se llama "aumentos vacíos”. o sea. El Poder de aumento A Es el que determina el número de veces en el que se magnifica la imagen esta dado por la relación entre el tamaño real del objeto y el Imagen modificada de http://www. El ocular funciona prácticamente como una lupa. y los espejos y prismas del interior del tubo binocular. una imagen de tamaño más grande. debido al límite del poder de resolución. En realidad no hay un límite máximo de aumentos en un microscopio. proyecta la imagen primaria aumentada del objeto hacia arriba. la capacidad del microscopio de visualizar los detalles más finos del objeto. Más adelante veremos el sistema completo. indicando que se trata de aumentos más allá del límite útil en cuanto a la reproducción fiel de los detalles finos. con la diferencia principal de que aumenta una imagen aérea en vez de un objeto real. se ve el esquema del microscopio tradicional.com/introduccion/Teoria_de_la_Micro scopia . el hecho de aumentar el objeto aún más producirá. La lente condensadora. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. En la realidad. cerca del extremo superior del tubo del microscopio. no utilizamos una pantalla sino que visualizamos esta imagen a través 2 del ocular. sólo existe un límite en cuanto a los aumentos útiles. en vez de proyectar la imagen en una pantalla.” (La presencia de esta imagen podría visualizarse si se retirara el ocular y se instalara una pequeña pantalla translúcida en el plano de esta imagen aérea. Esta imagen primaria se forma en el aire y por lo tanto se denomina "imagen aérea. a la derecha. Con la finalidad de simplificar el dibujo 3 aquí sólo se ve el sistema de lentes del microscopio. sin embargo. pero también más borrosa y sin visualización de más detalles. inclusive el sistema de iluminación.

Sebastián (273875) – PRIETO. según la ecuación [3]. Esto se aprecia mirando las imágenes comparativas. en el cual se visualizan nítidamente otros objetos.A El poder de resolución El poder de resolución de un microscopio por lo general Poder de definición En el microscopio nos permite formar imágenes con contornos claros y definidos. Olgher (132897) – ZULUAGA. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. El objetivo que recibe un cono de luz mayor. P.biooptic. y nos indica que la imagen esta aumentada 100 del tamaño del objeto. hay un margen finito por encima y por debajo de este objeto. Diego (273919) tamaño de la imagen esta dado por la ecuación [1]. depende del diseño del objetivo.pdf . El poder de resolución esta determinado por la ecuación [2].A del objetivo. tendrá mejor poder de resolución que un objetivo limitado a un cono de luz más pequeño.R = λ [2] 2 N . ya que el ojo es capaz de realizar un cierto grado de acomodación según la ecuación [4]. Poder de profundidad Al enfocar un objeto por medio de un microscopio. 3 Imagen modificada de http://www. Este margen se llama profundidad de foco del microscopio y varía considerablemente en función de la N. A= TIm agen TObjeto [1] detalles más finos. figura 3 proporciona una imagen que reproduce mucho mejor los ( N − ( NA) ) d= 2 2 ( NA) 2 [3] Para la visualización del objeto. Un objetivo capaz de aprovechar un gran cono angular de luz procedente de la muestra. hay que añadir más profundidad. de esta manera un aumento de 100 diámetros se representa por 100X.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO4 GUTIERREZ. La figura 33 nos muestra la relación entre el poder de resolución y la apertura numérica.com/introduccion/Teoria_de_la_Microsc opia.

ya que la humedad puede causar fricción y esta puede dañar el mecanismo del carro. así. • Descargue suavemente el microscopio sobre la mesa de trabajo. es recomendado poner la muestra en la platina y mover el tornillo macrométrico hasta lograr enfocar la muestra. en el caso de los microscopio del laboratorio se trata de microscopios parafocales y esto es fácil de comprobar al fijar la preparación y cambiar de objetivo. En Microscopios parafocales basta enfocar la muestra con el objetivo de menor aumento X10 y todos los demás objetivos pueden ser usados haciendo una pequeña corrección con el tornillo micrométrico. al realizar este procedimiento se observa que la imagen queda enfocada para todos los objetivos. Sebastián (273875) – PRIETO. observando por el ocular se acerca el objetivo Normas y Recomendaciones generales para el buen uso del Microscopio • Transporte el Microscopio con ambas manos. Desplazar el objetivo a una distancia aproximada de 2 cm de la muestra. Olgher (132897) – ZULUAGA. condición que contiene los microscopios de este tipo.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO5 GUTIERREZ. • El portaobjetos no debe estar húmedo por la parte inferior. después se puede cambiar a los demás objetivo solo resta enfocar finamente. una tomando el brazo y la otra sosteniendo la base del estático y derecho. • Si usa liquido de inmersión debe limpiarlo antes de guardar el microscopio. Diego (273919) d′=d+ 250 [4] M2 no en la parte inferior de la platina para evitar desajustes en el diafragma y condensador. Enfoque visual a menor aumento (x10) Después de poner la intensidad de la luz en bajo encender el aparato. • Regule la menor luminosidad cuando deje de hacer observaciones por un periodo largo. En esta práctica determinaremos cual es la distancia de trabajo o distancia frontal con el fin de al trabajar predeterminar la distancia de trabajo y así no es necesario mover la cremallera evitando desgastes innecesarios del tornillo micrométrico y la cremallera. • Al guardar el microscopio debe enrollarse el cable en el tubo y . al encender o apagar el microscopio verifique que la intensidad lumínica se encuentra en el mínimo. • Haga inventario de las partes del microscopio e informe cualquier irregularidad. • Use papel para lentes en caso de ser necesario limpiarlos. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. se dispone el tambor en el de menor aumento (x10).

Campo de trabajo para Microscopio en el laboratorio. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. La Figura 5 muestra la imagen de un objeto puntiforme. En el momento en el que se logra enfocar la preparación debe graduarse los lentes del ocular para lograr las distancias interpupilares del observador.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO6 GUTIERREZ. Las aberraciones principales de una imagen formada por una lente esférica son las siguientes: l. Diego (273919) lentamente hacia la platina hasta lograr enfoque. Por medio de combinaciones inteligentes de formas de lentes y tipos de cristal se consigue contrarrestar los defectos de una superficie aplicando defectos iguales u opuestos en otras superficies de forma que el resultado final se aproxime a la Imagen. Para superar este problema se realizan combinaciones de lentes convergentes y divergentes. Objetiv o x4 x10 x40 Campo de Trabajo 20 mm 8 mm 1 mm . Olgher (132897) – ZULUAGA. Aberración esférica Término aplicado para describir el hecho de que los rayos procedentes de un punto y que atraviesan la parte más externa de la lente tienen distinto foco que los que pasan por el centro de la misma. Todos los sistemas de lentes tienen un número menor o mayor de aberraciones según la complejidad del diseño. Determinación del campo óptico Φ diámetro Tabla 1. comparando la con la figura 6 que nos muestra la imagen distorsionada que debido a la aberración esférica algunos rayos de luz que deberían pasar por el Al conseguir claramente la imagen medimos la distancia de trabajo como se muestra en la figura 4. Los sistemas de lentes están compuestos por lentes individuales con superficies esféricas. Sebastián (273875) – PRIETO. y una de las características de las superficies esféricas es que no forman imágenes perfectas. Aberración en la imagen del los lentes ópticos El sistema de lentes no es perfecto. Para los diferentes objetivos obtuvimos las distancias de campo consignadas en la tabla 1. que se consigue girando el ocular.

Stefania (273891) – SANTODOMINGO. Figura 5. será un claro ejemplo de que el objetivo está dañado.com/introduccion/Teoria_de_la_Microsc opia. Sebastián (273875) – PRIETO. Coma Se dice que una lente está afectada por coma cuando diferentes zonas circulares concéntricas de la superficie de la lente proporcionan aumentos diferentes a una imagen desplazada del eje. que son paralelos o perpendiculares al radio del campo. Imagen distorsionada por aberración esférica. En la figura 84 se puede apreciar el grave deterioro que sufre la imagen de un objeto puntiforme debido a la aberración de coma. una imagen astigmática nunca puede enfocarse de modo que resulte una imagen nítida. Figura 7.biooptic. Esta difusión desfavorable causa una pérdida de contraste en las imágenes.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO7 GUTIERREZ. la imagen de un objeto puntiforme aparece en forma de cometa.Imagen afectada por astigmatismo III. II. Astigmatismo Se produce cuando objeto puntiforme situado fuera el eje se visualiza como dos imágenes lineales separadas. Diego (273919) centro han sido dispersados hacia fuera. el resultado es un deterioro general de la imagen desplazada del eje.pdf . Olgher (132897) – ZULUAGA. Si en el centro del campo tenemos aberración de coma. Debido a este defecto. las cuales se encuentran a diferentes distancias de la superficie de la lente. La figura 7 nos muestra esta aberración en una imagen puntiforme. a la estructura de aro. Figura 6. Imagen de objeto puntiforme. a excepción de los detalles 4 Imagen tomada de http://www. sin embargo.

Curvatura del campo Como su nombre indica.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO8 GUTIERREZ. Este defecto se controla combinando adecuadamente los diferentes tipos de cristal. Figura 8. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. Diego (273919) Figura 9. cuando la parte central de la imagen está claramente enfocada los límites del campo parecen quedar fuera del foco. aquí la lente sufre de curvatura del campo. Esto se debe a que el centro y los límites de la imagen se enfocan a distancias distintas. La figura 8 muestra la imagen del mismo rayado cruzado que se ve en figura 9. . IV. Distorsión en el sistema de lentes VI. Distorsión en el sistema de lentes Provoca que las líneas rectas aparezcan curvadas. esta aberración produce una imagen curvada de un objeto plano. Aberración cromática Se debe a que la distancia focal de la lente varía con la longitud de onda. y viceversa. V. Imagen afectada por coma. Olgher (132897) – ZULUAGA. Fíjese en las líneas curvadas cerca del contorno. Como consecuencia. Sebastián (273875) – PRIETO. Curvatura de campo. sin embargo. Figura 9.

implementó la luz polarizada para la observación discriminada de sustancias químicas el los objetos observados. “Fisiología de las plantas”. En 1849 J. BIBLIOGRAFIA NASON. México. De las primeras investigaciones realizadas con el microscopio se resaltan los descubrimientos realizados por Robert Hooke quien mediante observaciones de un corcho plantea una teoría de células. rápidamente aparecieron los Microscopios de interferencia quien los presenta al mundo en 1930. que fue perfeccionado por Kepler en 1611 que lo establece como un microscopio compuesto. en 1674 mediante el perfeccionamiento del microscopio compuesto Leeuwenhock logra observar los protozoarios. Ed. Sebastián (273875) – PRIETO. A. Reseña Histórica Se estima que el primer microscopio fue desarrollado por Anton van Leeuwenhoek hacia 1600. SALISBURY. . muy poco quedo por hacer después de que Ernest Ruska Y Max Knoll en 1932 desarrollan el microscopio Electrónico que mediante herramientas computacionales mostraron los rincones mas íntimos de las células y en la actualidad permiten observaciones nanométricas. Nicol en el año de 1828. Gracias a su uso se logra en 1838 observar los núcleos celulares. se identifica la célula como unidad estructural y funcional en animales y plantas. Limusa. Paraninfo. Aberración cromática de aumento Se produce cuando los rayos de luz de un determinado color se proyectan con más aumentos que los rayos de luz de otro color. Descubrimientos científicos implantados en los microscopios por W. Quekett publica un tratado sobre el uso del microscopio aun usado. Diego (273919) VII. Olgher (132897) – ZULUAGA. diferenciándose un gran número de células y tejidos animales cuando Retzius en 1881 se asuma a un con fines investigativos. “Biología”. Para 1908 se implementa en el microscopio la luz fluorescente por Köhler y Sicdentopf.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO9 GUTIERREZ. y Zernike diseña en 1932 el Microscopio de contraste de fases. consistía en una pequeñamente convexa que funcionaba como una lupa. F. 2000. DF. y un tornillo fino. que pigmentadas y expuestas a alguna frecuencia lumínica polarizada permitían determinar composición de las muestras. Madrid 2000. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. En el año de 1608 Zacharrias Cansen desarrolla el microscopio con dos lentes convexas. Ed.

Diego (273919) [En línea] http://es. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. Sebastián (273875) – PRIETO.ite.natureduca.educacion. Olgher (132897) – ZULUAGA.org/wiki/Microsc opio http://www.html http://www.com/botan_o rgan_tallo1.es/w3/eos /MaterialesEducativos/primaria/con ocimiento/reinovegetal/temas/temas framfoto.wikipedia.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO10 GUTIERREZ.ph .

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