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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENICAS

BIODIVERSISAS

INFORME SALIDA DE
CAMPO MERA
Sexto “A”

Realizado por
NAYELI ALEXANDRA FLORES VERDUGO

JOSSETH ELENA MORAN CABEZAS

MASHERLY STEFANÍA GAIBOR VERA

NAYELI FERNANDA MANITIO GUAMAN

WILSON VINICIO CANTOS URGILES

27/12/2022

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1. Objetivo General
 Realizar visita de campo para el reconocimiento de especies e identificar
elementos y características del ecosistema.
2. Objetivos Específicos
 Identificar los ecosistemas de la zona en la salida de campo.
 Cuantificar el número aproximado de las diversas especies encontradas en el
bosque húmedo tropical.
 Analizar el funcionamiento y procesos de la extracción de ADN aplicado a
ciencias Ambientales.
3. Procedimiento
3.1. Extracción de ADN (Kit Wizard Genomic DNA Purification Modificado)
 Esterilización del área de trabajo con Etanol 70% y papel absorbente
 Reconocimiento y preparación de muestra de tejido (hígado o músculo)
 Colocar el tejido en un microtubo de 15 mL estéril y añadir 200 uL Lysis
solution
 Macerar la muestra con un pistilo
 Lavar el pistilo con 300 uL lysis solution antes de sacarlo del tubo
 Añadir 15 uL de proteinasa K e incubar por 45 minutos a 1 hora (hasta que el
tejido este digerido)
 Añadir 3 uL de RNase e incubar por 10 minutos
 Enfriar a temperatura ambiente por 5 minutos
 Añadir 200 uL de precipitado de proteínas y centrifugar a 12000 rpm
 Retirar los microtubos sin perturbar el pellet (precipitado)
 Colocar el sobrenadante (600 uL aproximadamente) en un nuevo microtubo 1.5
mL
 Añadir 500 uL de Isopropano e invertir por 25 veces
 Centrifugar a 12000 rpm
 Decantar el sobrenadante
 Añadir 500 uL de etanol 70% y centrifugar a 12000 rpm por 5 min
 Decantar el sobrenadante y dejar secar los microtubos sobre papel absorbente
 Colocar 5 uL de buffer de rehidratación de ADN
3.2. Amplificación en cadena de la polimerasa

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3.2.1. Perfil térmico 165 SorL y 165 HbaR
Proceso Temperatura (°C) Tiempo Ciclos
(s)
Denaturación inicial 95 300 1
Denaturación 95 30 30
Annealing 59 30 3
Elongación 72 45 30
Elongación 72 300 1
Enfriamiento 4 - -

3.3. Semicuantificación

Electroforesis en gel de Agarosa


Analiza Integridad Funcionalidad
Visualizar ADN genómico Amplicones
Longitud >10 kb Depende de los primers
% Agarosa 1% 2%
Agarosa en gramos 0.2 0.4
Volumen TBE 1x 20 mL 20 L

3.4. Descripción del ecosistema (Bosque húmedo tropical)

El bosque húmedo tropical o selva neotropical, se caracteriza por no tener períodos de escasez
de agua, tiene condiciones cálidas y húmedas todo el año con precipitaciones entre 1500 y 4000
mL; y temperaturas constantes entre 26 a 27 °C. (Ohio, 2013).

Se presenta como una gran masa vegetal que llega muy poca luz al suelo, los cuales, son muy
profundos debido a que las intensas lluvias y temperaturas someten al estrato rocoso a un
continuo proceso de degradación, sin embargo, el suelo es pobre dado que la materia orgánica
se descompone muy rápidamente, y los nutrientes son rápidamente asimilados o lavados.

3.4.1. Anfibios observados (Bosque húmedo tropical)

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IMAGEN DESCRIPCION
ORDEN:
Anura
FAMILIA:
Centrolenidae
ESPECIE:
Chimerella mariaelenae
ESTADO DE CONSERVACION:
Datos insuficientes
IMAGEN DESCRIPCION
ORDEN:
Anura
FAMILIA:
Hylidae
ESPECIE:
Dendropsophus
ESTADO DE CONSERVACION:
Menor preocupación
IMAGEN DESCRIPCION
ORDEN:
Anura
FAMILIA:
Strabomantidae
ESPECIE:
Pristimantis aff.
ESTADO DE CONSERVACION:
-
IMAGEN DESCRIPCION
ORDEN:
Anura
FAMILIA:
Hylidae
ESPECIE:
Dendropsophus - bokermanni
ESTADO DE CONSERVACION:
Menor preocupación
IMAGEN DESCRIPCION
ORDEN:
Anura
FAMILIA:
Hylidae
ESPECIE:
Dendropsophus - bifurcus
ESTADO DE CONSERVACION:
Preocupación menor
IMAGEN DESCRIPCION

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ORDEN:
Anura
FAMILIA:
Hylidae
ESPECIE:
Osteocephalus-derindens
ESTADO DE CONSERVACION: -

3.1. Bosque húmedo montano bajo oriental

Se localiza en las tres provincias al sur, en la Costa en la


cota 1500–2000 m s.n.m., en las estribaciones de la
Cordillera de Chilla, parte alta de Piñas vía Atahualpa, Los
tipos de bosque en el sur del Ecuador 43 en la provincia de
Loja en altitudes de 1800–2300 m s.n.m.

Se caracteriza por la abundancia de epífi tas,


especialmente orquídeas, helechos y bromelias.

Correspondencia con otros sistemas: S, matorral húmedo montano bajo, bosque siempre verde
montano bajo; C, bosque húmedo montano bajo, bosque muy húmedo montano bajo, bosque
muy húmedo premontano.

3.1.1. Anfibios observados (bosque húmedo montano bajo oriental)

Nombre Foto Descripción


Dendropsophus minutus El hocico es redondeado en vista dorsal y es
Familia: Hylidae truncado de perfil,membranas axilares ausentes.
Orden: Anura Los dedos de la mano poseen membrana hasta la
Especie: D. minutus; mitad de su longitud y los dedos del pie hasta cerca
(Peters, 1872) de 2/3 de su longitud. Los machos en reproducción
Estado de conservación: no tienen excrescencias nupciales. La piel es lisa en
Casi amenazada el dorso y granular en el vientre.
Osteocephalus mutabor. Ees una especie de anfibios de la familia Hylidae.
Hylidae. Habita en Ecuador y Perú. Sus hábitats naturales
Estado de conservación: incluyen bosques tropicales o subtropicales secos y
Vulnerable. a baja altitud, ríos y marismas intermitentes de agua
dulce. Está amenazada de extinción por la
destrucción de su hábitat natural.

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Enyalioides cofanorum. Esta especie se distingue de otras especies de
Iguanidae hoplocercinae. Enyalioides por la combinación de los siguientes
Estado de conservación: caracteres:
Datos insuficientes.  Varias escamas dorsales grandes y
proyectadas dispersas entre las
extremidades anteriores y posteriores
(inconspicuas o ausentes en algunos
juveniles y machos).
 Ventrales fuertemente quilladas.
 Parche grande oscuro en la parte posterior
de la región gular en ambos sexos.
 Franja clara que se extiende desde la región
post-timpánica hasta la región escapular.
Vegetación característica: Phytolacca dioica (Phytolaccaceae); Zanthoxylum lepidopteriphilum
(Rutaceae); Barnadesia arborea (Asteraceae); Ruagea pubescens (Meliaceae); Podocarpus
oleifolius y Prumnopitys montana (Podocarpaceae); Mauria simplicifolia (Anacardiaceae);
Oreopanax rosei (Araliaceae); Duranta mutisii (Verbenaceae); Brunellia sp. (Brunelliaceae);
Cyathea sp. (Cyatheaceae); Gunnera pilosa (Gunneraceae); Nectandra laurel (Lauraceae);
Miconia sp. (Melastomataceae); Odontoglossum sp., Pleurothallis sp. (Orchidaceae); Passifl
ora punctata (Passifl oraceae); Oreocallis grandifl ora, Panopsis metcalfi i (Proteaceae);
Guzmania gloriosa (Bromeliaceae). (Lozano, 2002)

4. Conclusiones
 Se logró identificar 2 tipos de ecosistemas en el área de conservación en la cabecera del
Río Anzu - Cantón Mera, Provincia de Pastaza, Ecuador, siendo así el primer ecosistema
de tipo Bosque tropical lluvioso caracterizado por presentar precipitaciones entre 1500
y 4000 mL y una Temperatura promedio de 27 °C y segundo ecosistema es el Pantanoso
o conocidos como humedal caracterizado principalmente tener sus superficies asentadas
debido al mal drenaje del agua.

 En cuanto a la diversidad animal y vegetal de la zona de estudio se identificó 5 zonas


de muestreo que son: Bosque primario con 69 especies de las cuales las más

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representativas son: Pristimantis quaquaversus (10.6%), Pristimantis altamnis (10.2%),
Pristimantis ventrimarmoratus (6.5%) , Enyalioides praestabilis (3.7%) y
Gelanesaurus flavogularis (2.6%); Bosque secundario con 38 especies siendo las más
representativas la Boana almendarizae (35.3%), Pristimantis altamnis (9.8%),
Dendropsophus parviceps (5.5%) , Enyalioides praestabilis (6.2%) y Bothrocophias
microphthalmus (3.3%); Área intervenida con 32 especies de las cuales se han visto con
frecuencia la Leptodactylus wagneri (21.5%), Boana almendarizae (19.8%),
Dendropsophus sarayacuensis (8.5%), Potamites ecpleopus complex (3.7%) y
Cercosaura oshaughnessyi (1.7%); Cuerpos de agua con diversidad de 69 especies entre
ellos Boana almendarizae (27.7%), Leptodactylus wagneri (13.5%), Dendropsophus
parviceps (6.0%), Potamites ecpleopus complex (3.3%) y Bothrocophias
microphthalmus (2.0%) y al finalmente las áreas secas con 55 especies entre las
representativas tenemos: Pristimantis altamnis (16.3%), Pristimantis quaquaversus
(10.8%), Pristimantis ventrimarmoratus (6.6%), Enyalioides praestabilis (5.9%) y
Gelanesaurus flavogularis (2.8%)

 Para finalizar se comprobó que el “Kit Wizard Genomic DNA Purification” esta
diseñado para purificar ADN células de sangre y células de animales y para ello se
realiza un proceso de 3 pasos que son: 1) Lisis celular y nuclear, 2) digestión con RNasa,
3) precipitación salina de lisis celular y nuclear y 4) concentración del ADN por
eliminación de sales y precipitación con isopropanol (Technical Manual Wizard®
Genomic DNA Purification Kit).

5. Bibliografía

Lozano, P. (10 de Junio de 2002). researchgate. Obtenido de Los tipos de bosque en el Ecuador:

https://www.researchgate.net/profile/Pablo-Lozano-

3/publication/233936622_Los_tipos_de_bosque_en_el_sur_del_Ecuador/links/09e415

0d2590560376000000/Los-tipos-de-bosque-en-el-sur-del-Ecuador.pdf

Ohio, M. (2013). The Tropical Rain Forest. New York: Checkmark.

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6. Anexos

Anexo A Anexo B
Tejido en el microtubo de 1.5mL estéril
Especie de extracción

Anexo C Anexo D
3 uL de RNase en la solución Mini columnas de centrifugado
microtubos de 5uL

Anexo E Anexo F
Buffer de rehidratación de ADN Cámara de electroforesis

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Anexo G Anexo H
Kit Wizard Genomic DNA Purification
Electroforesis en gel de Agarosa
Modificado
(Resultado)

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