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Historial del artículo: Las extracciones líquido-líquido (LLE) son un pretratamiento común de muestras en muchas aplicaciones analíticas. Esta
Recibido el 31 de marzo de 2009 Recibido en forma revisión tiene como objetivo proporcionar una descripción general crítica de los distintos enfoques automatizados basados
revisada el 28 de mayo de 2009 Aceptado el 30 de
en flujo continuo que se han desarrollado para la extracción líquido-líquido con el propósito de la preconcentración y/o
mayo de 2009
separación de múltiples analitos, como especies de metaloides y ultratrazas de metales. , compuestos fenólicos, tensioactivos,
Disponible en línea el 7 de junio de 2009
productos farmacéuticos, etc., combinados con muchas técnicas de detección, como espectrofotometría UV/vis, sistemas de
detección espectrométrica atómica y detectores luminiscentes, incluidas distintas estrategias de extracción y aplicaciones
Palabras clave:
como esquemas de extracción única y múltiple, extracción de película humectante, líquido soportado extracción de
análisis de flujo
membrana, extracción posterior, sistemas de circuito cerrado y la utilización de muestreo de zona, cromatomembranas y
Extracción líquido-líquido
Separación de analitos técnicas iterativas de inversión. El rendimiento analítico de los métodos LLE basados en flujo desarrollados y la influencia de
pre-concentración los componentes del colector de flujo, como el segmentador, el serpentín de extracción y el separador de fase, se enfatizan y
son objeto de discusión. Se realiza una presentación general de los componentes de cada sistema, selectividad, ventajas y
desventajas y se ejemplifica con aplicaciones seleccionadas.
Contenido
1. Introducción . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54
2. Modalidades de extracción líquido-líquido. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55
2.1. Extracción única. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55
2.2. Múltiples extracciones. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59
2.2.1. Sistemas de circuito cerrado. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59
2.3. Extracción trasera. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59
2.4. Sistemas sin separación de fases. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 60
2.4.1. Modo de muestreo de zona. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61
2.5. Sistemas sin segmentación y separación de fases. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61
2.5.1. Sistemas con membrana semipermeable o columna de sorción. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61
2.5.2. Sistemas con membrana líquida soportada. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61
2.5.3. Sistemas inversos iterativos. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62
2.5.4. Modo de película humectante. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62
2.5.5. Utilización de cromatomembranas. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62
2.5.6. Sistemas de optosensores. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
2.6. Nuevas tendencias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
3 Conclusiones. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
Agradecimientos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
Referencias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
1. Introducción
0003-2670/$ – ver portada © 2009 Elsevier BV Todos los derechos reservados. Duele:
10.1016/j.aca.2009.05.042
CIC Silvestre et al. / Analítica Química Acta 652 (2009) 54–65 55
Durante las últimas décadas, ha quedado bien demostrado el importante Tal como fue concebido por los trabajos pioneros de Bergamin et al.
papel que desempeñan las técnicas basadas en flujo para la automatización, [dos]y Karlberg et al.[3], un sistema de inyección de flujo líquido-líquido
la optimización simplificada y la miniaturización del manejo de soluciones en clásico se caracteriza por tres componentes principales: un
el pretratamiento de muestras. La posibilidad de características ventajosas segmentador de fase (o confluencia), un serpentín de extracción y un
exhibidas por estas técnicas, que incluyen la minimización del consumo de separador de fase. Después de la introducción de una muestra acuosa,
muestras y reactivos, el riesgo de contaminación de la muestra y la ya sea en un proceso continuo o en un volumen bien definido, en una
intervención del operador, así como un mayor rendimiento de muestreo y la corriente acuosa (que actúa como reactivo y corriente portadora), se
influencia del acoplamiento con distintas técnicas de detección tuvo un produce la homogeneización de las soluciones y se forma una zona de
profundo desarrollo. de nuevos enfoques analíticos y en el inicio de nuevas reacción, que se dirige hacia el segmentador. . En la segmentadora se
tendencias en términos de modularidad, flexibilidad y versatilidad del ponen en contacto las dos corrientes de fases inmiscibles acuosa y
sistema analítico. orgánica y se genera un único flujo de zonas alternas reproducibles de
Uno de los pretratamientos de muestras más comunes en un proceso ambas fases. Posteriormente, en el serpentín de extracción, tiene lugar
analítico implica extracciones líquido-líquido (LLE) que podrían usarse, por la transferencia de masa entre las múltiples interfaces de las dos fases
ejemplo, para aumentar la selectividad, aislando el analito de las especies creadas por el proceso de segmentación. Finalmente, en el separador
que interfieren en la matriz, o para mejorar la selectividad, concentrando el de fases,
analizar a partir de un gran volumen de muestra. Al igual que otras
manipulaciones de muestras, la implementación manual de esta operación
de transferencia de masa suele requerir mucha mano de obra y mucho En la literatura, se describen distintas configuraciones de múltiples
tiempo, lo que exige la mayor parte del tiempo grandes cantidades de sistemas de diferente complejidad. En las secciones subsiguientes,
productos químicos que podrían ser perjudiciales para el operador, costosos estos arreglos y modos operativos se discuten en detalle. Es importante
y peligrosos para el medio ambiente.[1]. Se han propuesto y explotado recalcar que solo se consideraron los trabajos que proponen sistemas
distintas estrategias de flujo continuo para superar estas deficiencias, ya sea LLE con sistema de detección.
reduciendo las soluciones de consumo, minimizando así la generación de
residuos desde una perspectiva más respetuosa con el medio ambiente, 2. Modalidades de extracción líquido-líquido
limitando la intervención y exposición del operador, minimizando la
aparición de errores, aumentando la tasa de muestreo, etc. . 2.1. extracción única
Desde 1978 se han publicado casi 250 artículos que explotan la
extracción líquido-líquido en sistemas de flujo, con un crecimiento Varias publicaciones relacionadas con aplicaciones analíticas que
pronunciado en el número de publicaciones entre mediados de los años 80 y involucraron una sola operación de extracción se enumeran enTablas 1
los primeros años del siglo XXI, después de lo cual las nuevas publicaciones a 5siendo el sistema múltiple típico que ilustra su desempeño, según
son escasas (Higo. 1). La extracción líquido-líquido basada en flujo se ha las propuestas originales de Bergamin et al.[dos]y Karlberg et al.
aplicado a diversas áreas, como el análisis ambiental (38% de las [3], presentado enHigo. dos. Kubán[88]proporciona una descripción
publicaciones), farmacéutico, clínico y de alimentos, entre otros. El tipo de detallada de varios componentes del sistema de flujo LLE.
técnica de detección en el 67% de las publicaciones empleadas fue la Como se puede observar enHigo. 3, el manifold comprende una unidad de
espectrofotometría UV/visible, seguida del 16% de la espectrometría de propulsión, normalmente una bomba peristáltica, encargada de crear una
absorción atómica (EAA) y del 7% de la espectrofluorimetría. Como se puede corriente acuosa donde se introduce inicialmente la muestra. La corriente
percibir, los sistemas de detectores ópticos se ven favorecidos orgánica puede ser generada por una bomba peristáltica, un líquido
principalmente por la influencia de la fase orgánica. para desplazar-
Usualmente, la selección de una ura (usando
adecuada requiere la presencia de educación orgánica
analito Matriz solvente detección determinación rango lineal límite de detección Referencia
tasa (h−1)
aluminio Aguas potables, de río y residuales Cloroformo fluorimetría 20 20–800 -g L−1 6 -g L−1 [4]
aluminio Agua natural y del grifo Agua natural tolueno SAA 30 0.5–200 -g L−1 0.5 -g L−1 [5]
aluminio Cloroformo espectro ultravioleta/visible 85 Hasta 2 mg L−1 0,06 mg L−1 [6]
tensioactivos aniónicos agua industrial Cloroformo espectro ultravioleta/visible 80 0,25–1,25 mmol L−1 15 -mol L−1 [7]
tensioactivos aniónicos Agua de río y de tratamiento Cloroformo espectro ultravioleta/visible 60 0.04–3.5 -g mL−1 4 ng ml−1 [8]
tensioactivos aniónicos Agua de río 1,2-Diclorobenceno espectro ultravioleta/visible 20 hasta 7×10−5mol L−1 1×10−8mol L−1 [9]
cobre Agua de río 1,2-dicloroetano espectro ultravioleta/visible 22 64,5–4000 ng·ml−1 19,3 ng ml−1 [17]
cobre agua de rio Cloroformo espectro ultravioleta/visible 64 Hasta 2 mg L−1 0,04 mg L−1 [18]
cobre grifo y agua de lluvia xileno SAA 80 – 0,02 -g ml−1 [19]
cobre agua clorobenceno espectro ultravioleta/visible 30 hasta 3×10−5mol L−1 dos×10−8mol L−1 [20]
Dimetoxiditiofosfato DTAB Superficie del agua MIBK SAA – 25–200 g L−1 5 g L−1 [21]
agua MIBK SAA 35 0.4–9.0 -g mL−1 0,13 g ml−1 [22]
fluoruro agua hexanol PCI 36 0.03–1.3 -g mL−1 30 ng ml−1 [23]
Hierro (II) agua natural Cloroformo espectro ultravioleta/visible 85 Hasta 2 mg L−1 0,06 mg L−1 [6]
Hierro (III) agua natural Cloroformo espectro ultravioleta/visible 85 Hasta 2 mg L−1 0,06 mg L−1 [6]
Plomo agua natural MIBK SAA 25 3,0–250,0 -g L−1 1.4 -g L−1 [24]
oxina-cobre agua de rio Cloroformo quimioluminiscencia 6 28–1100 -g L−1 5,5 g L−1 [25]
paladio Partículas en el aire Agua de Cloroformo espectro ultravioleta/visible 20 Hasta 12 mg L−1 0,007 mg L−1 [26]
Fósforo río MIBK, Benceno espectro ultravioleta/visible 40 Hasta 1 -g mL−1 0,1 ng ml−1 [27]
potasio Agua de río y del grifo benceno, clorobenceno espectro ultravioleta/visible 15 hasta 2×10−4mol L−1 – [28]
potasio Agua de río y del grifo benceno, clorobenceno espectro ultravioleta/visible 12 hasta 8×10−5mol L−1 – [29]
potasio Agua de río benceno espectro ultravioleta/visible hasta 10−4mol L−1 – [30]
potasio agua de rio benceno, clorobenceno espectro ultravioleta/visible 20 hasta 1×10−4mol L−1 1×10−6mol L−1 [31]
potasio agua de rio benceno, clorobenceno espectro ultravioleta/visible 20 5×10−6-1×10−4mol L−1 – [32]
sodio Agua de río y del grifo benceno, clorobenceno espectro ultravioleta/visible 15 hasta 2×10−3mol L−1 – [28]
sodio Agua de río y del grifo benceno, clorobenceno espectro ultravioleta/visible 12 hasta 5×10−4mol L−1 – [29]
sodio Agua de río benceno, clorobenceno espectro ultravioleta/visible 20 1×10−4-dos×10−3mol L−1 – [32]
THAB agua MIBK SAA 35 0.6–14.3 -g mL−1 0,21 g ml−1 [22]
AAS: espectrometría de absorción atómica; DTAB: bromuro de dodeciltrimetilamonio; ICP: plasma acoplado inductivamente; MIBK: metilisobutilcetona; espectro UV/vis: espectrofotometría UV/visible; THAB: bromuro de tetraheptilamonio.
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Tabla 2
Publicaciones que explotan la extracción única en el análisis de flujo para otras determinaciones ambientales.
analito Matriz solvente detección determinación rango lineal límite de detección Referencia
tasa (h−1)
talio Cenizas volantes de carbón, orar benceno espectro ultravioleta/visible – Hasta 5 mg L−1 – [39]
uranio Lixiviados de minerales heptano espectro ultravioleta/visible 50 Hasta 50 mg L−1 0,1 mg L−1 [41]
zinc sol tetracloruro de carbono espectro ultravioleta/visible 60 Hasta 2 mg L−1 – [42]
AAS: espectrometría de absorción atómica; ICP: plasma acoplado inductivamente; MIBK: metilisobutilcetona; espectro UV/vis: Espectrofotometría UV/visible.
Tabla 3
Publicaciones que aprovechan la extracción única en análisis de flujo para determinaciones farmacéuticas.
AAS: espectrometría de absorción atómica; MIBK: metilisobutilcetona; espectro UV/vis: Espectrofotometría UV/visible.
Tabla 4
Publicaciones que aprovechan la extracción única en análisis de flujo para determinaciones clínicas.
analito Matriz solvente detección determinación rango lineal límite de detección Referencia
tasa (h−1)
AAS: espectrometría de absorción atómica; ICP: plasma acoplado inductivamente; MIBK: metilisobutilcetona; espectro UV/vis: Espectrofotometría UV/visible.
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Tabla 5
Publicaciones que aprovechan la extracción única en análisis de flujo para análisis de alimentos y química.
analito Matriz solvente detección determinación rango lineal límite de detección Referencia
tasa (h−1)
Higo. dos.Sistema típico de análisis de flujo de extracción líquido-líquido. C: portador; A: reactivo; P: unidad de propulsión; S: muestra; IV: válvula de inyección; MC: bobina mezcladora; DB: botella de desplazamiento; ORG:
disolvente orgánico; SG: segmentador; EC: serpentín de extracción; PS: separador de fase; D: detector; CR: bobina de restricción; W: desperdicio.
Una de las tres piezas principales del sistema de flujo LLE, el segmentador, es
responsable de la segmentación de fases. Los segmentadores se pueden dividir en
dos grupos diferentes: segmentadores de flujo continuo (incluidos los
segmentadores no coaxiales como las piezas en T, Y o W y los segmentadores
coaxiales) y los segmentadores mecánicos (como los inyectores de bucle
accionados por motor o neumáticos y las válvulas magnéticas).
El sistema de segmentación se coloca comúnmente después de la válvula
de inyección. Sin embargo, en algunos casos, el colector de flujo exhibe el
sistema de segmentación antes de la válvula de inyección.[90]. En este caso,
el nivel de dispersión alcanzado se minimiza ya que las muestras se inyectan
Higo. 3.Colector del sistema que representa la extracción en dos etapas (extracciones múltiples). C:
directamente en la corriente de flujo segmentada en lugar de en la no
portador; P: unidad de propulsión; S: muestra; IV: válvula de inyección; DB: botella de desplazamiento; ORG:
solvente orgánico (con o sin extractante); SG: segmentador; EC: serpentín de extracción; PS: separador de segmentada. En efecto, el proceso de dispersión que ocurre durante el
fase; D: detector; CR: bobina de restricción; W: desperdicio. transporte de la muestra a través de la mezcla/reacción
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bobina antes de entrar en la segmentadora y se elimina el separador de El acoplamiento de un sistema LLE con un detector AAS implica una
fases. configuración y operación múltiple más sofisticada[93]. El sistema analítico
El serpentín de extracción es el componente múltiple donde se consta de dos secciones autónomas, ya que se requieren diferentes caudales
produce la transferencia del analito entre fases, un proceso que se ve para las etapas de extracción y nebulización, y se basa en una introducción
afectado por factores como el tiempo de residencia y el área de continua de la muestra. Después de la separación de la fase orgánica en el
superficie de la interfaz líquido-líquido, así como el carácter hidrofílico o separador de fases, una fracción de la misma se inyecta periódicamente (por
lipofílico del material del tubo del serpentín ( dependiendo de si la medio de un bucle de muestreo del inyector) en una corriente de transporte
muestra se extraerá de la fase acuosa a la orgánica o viceversa) y el independiente que se bombea continuamente al espectrómetro.
dimensionamiento y configuración del serpentín. [12,14,16,22,44,45,51,69,76,82,89,94–97]. Este sistema permite que el
sistema de extracción funcione independientemente del sistema de
El separador de fases es probablemente el componente más importante alimentación del nebulizador. Además, todo el sistema es respetuoso con el
de un sistema de flujo de extracción líquido-líquido. De hecho, la fase medio ambiente ya que, al trabajar en un colector cerrado, evita la
(aceptor) que participará en el proceso subsiguiente que conduce al paso de evaporación de los disolventes orgánicos involucrados, evitando la
medición debe mantenerse completamente libre de cualquier contaminación atmosférica.
contaminación de la fase de alimentación para asegurar, en la detección, También se logró la implementación de multiconmutación para
una señal analítica con un perfil adecuado y reproducible evitando la realizar LLE[98–100]. La red de caudal está formada por un conjunto de
ocurrencia de fluctuaciones que podrían afectar tanto la precisión como la electroválvulas y proporciona una importante reducción del consumo.
exactitud. Por lo tanto, el separador de fase está diseñado con una Además, la extracción se basó en el modo de extracción simple, aunque
configuración que podría manejar segmentos de volumen pequeño de las no se necesitó el segmentador ya que las electroválvulas eran capaces
dos fases inmiscibles, evitando así fenómenos perjudiciales/de dispersión de realizar el proceso de segmentación. Sin embargo, se notaron
que, además de una disminución de la sensibilidad, resultan en una pérdida algunos inconvenientes, como un aumento en el tiempo de lavado
de reproducibilidad. causado por la adsorción del solvente orgánico y una limitación del
Hay varios tipos de separadores de fase que recurren a distintos modos factor de preconcentración.
de separación: separadores de densidad (cámara) que se basan en la
gravedad para separar las fases; separadores de afinidad, que están hechos 2.2. extracciones múltiples
tanto de materiales lipófilos como hidrófilos, estando el proceso de
separación basado en la diferencia de afinidad entre las fases y los En un modo operativo de extracciones múltiples, el proceso de
materiales de la cámara del separador; separadores de fase de membrana separación se repite varias veces utilizando el mismo extractante o uno
que se basan en la permeabilidad selectiva de una membrana microporosa diferente en las etapas sucesivas.[101–103]. Su aplicabilidad está
hacia la fase que humedece el material de la membrana. El separador de asociada con el aislamiento del análisis de matrices de muestras
fases de membrana presenta algunas ventajas con respecto a otros tipos de complicadas. El systemmanifold es similar al utilizado en extracción
separadores como la posibilidad de utilización con una gran variedad de simple, sin embargo incluye más componentes que están directamente
solventes inmiscibles en agua ya que no se requiere una diferencia de relacionados con el número de extracciones realizadas (Higo. 3).
densidad/afinidad entre los dos solventes; presenta un menor volumen
interno que reduce la dispersión o dilución del analito; es compatible con 2.2.1. Sistemas de circuito cerrado
caudales elevados, lo que puede reducir el tiempo de análisis. En la práctica, En este tipo de sistema se consigue una extracción continua del analito
los separadores de fase de membrana son superiores a los separadores de en un pequeño volumen de la fase orgánica que circula en circuito cerrado.
fase de afinidad/densidad, pero tienen la desventaja de requerir un [104.105]. La muestra se introduce continuamente a través de una válvula de
reemplazo frecuente de la membrana y de tener un bajo porcentaje de conmutación de cuatro vías y se dirige a un segmentador de cuatro vías
recuperación de la fase que contiene el analito. donde se intercala con la fase orgánica. La corriente segmentada se dirige a
un serpentín de extracción seguido de un separador de fase. Aquí, la
Al aplicar separadores de dos fases en serie con un solo detector, fracción acuosa se elimina como desecho mientras que la fase orgánica se
algunos enfoques analíticos permiten el control simultáneo de las fases bombea de vuelta al segmentador donde se pone en contacto con una
orgánica y acuosa.[7,23,67,70,71]: uno de los separadores de fase es nueva alícuota de muestra entrante para un mayor enriquecimiento. A
responsable de aislar la fase orgánica que se dirige hacia el detector de medida que la fase orgánica se devuelve repetidamente al sistema de
celda de flujo, mientras que el segundo es responsable de acomodar la circuito cerrado (lo que permite un tiempo de residencia más largo), se
fase acuosa con trazas menores de la fase orgánica. La corriente logran factores de enriquecimiento más altos. Es importante notar la
acuosa separada fluye a través del segundo detector de celda de flujo existencia de un flujo de “reposición” o “recarga” del solvente orgánico para
para medir las especies solubles en agua. En otra propuesta, el compensar las pérdidas de volumen debidas a la formación de pequeñas
manifold incorporó dos detectores en paralelo[91]en lugar de un burbujas de vapores orgánicos, formación de pequeñas gotas de fase
detector con dos celdas de flujo, para la determinación simultánea de acuosa,[104]. La variedad esquemática se muestra enHigo. 4.
especies extraíbles y no extraíbles. Se logró un rendimiento similar
usando solo un separador de fase (con una membrana dual) y dos Este enfoque permite la preconcentración y la purificación
detectores automatizadas de analitos en un volumen fijo de fase orgánica que circula
[43]. Cuando el detector está equipado con un soporte de celda con en un circuito cerrado, lo que significa que el sistema puede separar el
control de temperatura, la fase separada se puede medir en función del analito y/o eliminar las interferencias sin necesidad de separadores de fase
termocromismo de los complejos asociados a iones formados en la adicionales. Sin embargo, el sistema presenta una desventaja ya que solo se
reacción.[46,48,92]. puede utilizar cuando se dispone de un volumen de muestra relativamente
Un aspecto importante a tener en cuenta cuando se utiliza un grande.
separador de membrana es la utilización de bobinas de restricción o
válvulas de aguja después del detector. Podrían usarse para regular la 2.3. Extracción trasera
sobrepresión a través de la membrana del separador de fases y pueden
disponerse para producir una contrapresión que fuerce a la fase Esta disposición ofrece una extracción de varias etapas en la que la
orgánica a través de la membrana hidrofóbica. Además, estos muestra acuosa se extrae inicialmente en un medio orgánico y luego se
componentes se pueden utilizar para eliminar las trazas restantes del vuelve a extraer en otra fase acuosa, donde se llevan a cabo las
disolvente orgánico, junto con la fase acuosa, en los residuos. mediciones (Higo. 5)[106–108].
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Higo. 5.Colector del sistema que ilustra la extracción hacia atrás en el análisis de flujo. C: portador; SR: reactivo de decapado; P: unidad de propulsión; S: muestra; IV: válvula de inyección; DB: botella de
desplazamiento; ORG: solvente orgánico (con o sin extractante); SG: segmentador; EC: serpentín de extracción; PS: separador de fase; AAS: espectrofotómetro de absorción atómica; W: desperdicio.
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Higo. 6.Tipos de colectores de sistema sin separación de fases. C: portador; A: reactivo; P: unidad de propulsión; S: muestra; IV: válvula de inyección; DB: botella de desplazamiento; ORG: solvente
orgánico (con o sin extractante); SG: segmentador; EC: serpentín de extracción; D: detector; CR: bobina de restricción; W: desperdicio.
se utiliza para reconocer las fases y un segundo monitorea la concentración de separador de fases, exhibe una menor eficiencia de extracción debido al
análisis. También se podría utilizar una tercera longitud de onda para llevar a cabo área de superficie restringida y al corto tiempo de contacto entre las dos
la corrección de las fluctuaciones de la señal. fases inmiscibles.
Una alternativa a la unidad de membrana que proporcionó una
2.4.1. Modo de muestreo de zona mayor eficiencia de extracción consiste en el uso de una columna llena
Una característica importante del método de muestreo por zonas es la de una resina que adsorbe selectivamente la fase acuosa[124]. En este
capacidad de aislar segmentos individuales de fases orgánicas o acuosas sin caso, la muestra acuosa se inyecta en una corriente orgánica y la
una unidad de separación de fases.[117]. En una primera etapa, se inyecta extracción del analito se produce durante su transporte hacia ya través
un segmento de extractante (fase orgánica o acuosa) en una corriente de de la columna. La fase acuosa se absorbe selectivamente y solo la fase
muestra que fluye. Si es necesario, esta corriente de muestra podría haberse orgánica fluye hacia el detector. El principal inconveniente de este
fusionado previamente con corrientes de reactivos. Posteriormente, el enfoque es que a veces se observa una mayor contrapresión en la
segmento extractante se aísla a medida que fluye a través del circuito de una columna.
válvula de inyección accionada electrónicamente. La activación de esta
válvula se determina detectando su estado de llenado del circuito con
2.5.2. Sistemas con membrana líquida soportada
sondas de conductividad (insertadas en los puertos de carga y de desecho) o
La membrana líquida está formada por una fina capa de fase
mediante un control adecuado basado en el tiempo. Cuando el bucle de la
orgánica (normalmente con reactivos disueltos) entre dos fases
válvula está completamente lleno de la fase deseada, esta se cambia a la
acuosas de distinta composición. Esta fina capa de fase orgánica se
posición de inyección para permitir que todo el contenido del bucle se
puede inmovilizar sobre un soporte microporoso inerte adecuado, que
inyecte en una corriente portadora miscible que fluye hacia el detector. Este
cuando se interpone entre dos soluciones acuosas apropiadas se
método presenta la ventaja de permitir la realización de más tratamientos
denomina membrana líquida soportada (SLM).
químicos del analito,
En esta técnica de extracción en tres fases[1,93,120–122, 125–134], los
analitos se extraen de una muestra acuosa que fluye continuamente a través
2.5. Sistemas sin segmentación y separación de fases de una fase líquida orgánica a otra fase acuosa normalmente
temporalmente estancada. Esto da como resultado el transporte selectivo
En esta estrategia LLE, la variedad analítica no incluye un del analito, desde la solución de alimentación (donante) a través del SLM
segmentador de fase ni un separador de fase. hasta una solución de separación (aceptora). La fase orgánica se mantiene
típicamente en una membrana hidrofóbica microporosa por fuerzas
2.5.1. Sistemas con membrana semipermeable o columna de capilares.
sorción La técnica de extracción SLM se puede combinar con el reconocimiento
En este tipo de sistemas, no se requiere segmentación ni separación inmunológico[131,133], introduciendo anticuerpos específicos del analito
de las fases, ya que las corrientes acuosa y orgánica se dirigen como reactivos de captura en el aceptor de SLM. El pH de la fase donante se
individualmente a ambos lados de una unidad de membrana.[118–123]. ajusta para que el analito se descargue aumentando su carácter lipófilo y,
El analito extraído se transfiere de la corriente acuosa a través de la por lo tanto, su capacidad de extracción en la membrana orgánica. El analito
membrana semipermeable (que está saturada con el disolvente sin carga (antígeno) se extrae del donante al aceptor como resultado del
orgánico) a la fase orgánica o viceversa, y luego se bombea a la celda gradiente de concentración establecido, que se mantiene mediante la unión
de flujo del detector. Aunque este sistema resuelve problemas del antígeno al anticuerpo específico del analito, en el aceptor. El analito
inherentes asociados con la presencia de un segmentador y un queda así atrapado en el aceptor.
62 CIC Silvestre et al. / Analítica Química Acta 652 (2009) 54–65
como complejos analito-anticuerpo que a su vez están excluidos del en cambio, se coloca después[139,140]o antes[141,142]la válvula de
SLM debido a su baja solubilidad en medios orgánicos[133]. inyección. En este último caso, se utilizaron ultrasonidos para acelerar
En consecuencia, el uso de SLM presenta varios beneficios, como el uso de el proceso de extracción. Sin embargo, la heterogeneidad inherente de
pequeñas cantidades de reactivos orgánicos, pérdidas mínimas de reactivos la irradiación ultrasónica en el baño de agua que contiene la bobina de
orgánicos, manejo reducido de reactivos potencialmente tóxicos, simplicidad y extracción fue un parámetro importante a tener en cuenta. Este modo
facilidad de automatización. Dado que el uso de disolventes orgánicos en grandes de operación permite el monitoreo continuo de la señal analítica con un
cantidades es innecesario, el análisis es más económico y respetuoso con el medio solo detector en un enfoque de detección múltiple que proporciona
ambiente y, en algunos casos, menos peligroso. Sin embargo, la vida útil limitada información útil adicional a partir de la inserción de una sola muestra,
de la membrana líquida, especialmente cuando se utilizan disolventes orgánicos que podría usarse para distintos propósitos analíticos. Por ejemplo, es
polares, su susceptibilidad al deterioro por parte de algunos tipos de matrices de posible estudiar en continuo la transferencia de analitos entre ambas
muestra, así como la tasa de enriquecimiento relativamente baja que da como fases y su dispersión en la fase orgánica, así como implementar
resultado tiempos de enriquecimiento prolongados cuando se necesitan factores medidas de velocidad de reacción convencionales con fines teóricos y
de enriquecimiento muy grandes, constituyen los principales inconvenientes. prácticos.
Modo operacional analito Matriz solvente detección determinación Rango lineal límite de detección Referencia
tasa (h−1)
película humectante 2-nitrofenol Aguas destiladas, del grifo, subterráneas, de mar y residuales Aguas 1-octanol espectro ultravioleta/visible 4 3,0–32,8 -mol L−1 0,26 -mol L−1 [145]
2-nitrofenol destiladas, del grifo, subterráneas, de mar y residuales Aguas 1-octanol espectro ultravioleta/visible 11 2–43 -mol L−1 0,11 -mol L−1 [146]
3-nitrofenol destiladas, del grifo, subterráneas, de mar y residuales Aguas 1-octanol espectro ultravioleta/visible 4 4.3–80.9 -mol L−1 0,33 -mol L−1 [145]
Cromatomembrana tensioactivos aniónicos acuoso Cloroformo espectro ultravioleta/visible – 0,02–5,0 mg L−1 – [156]
cobre productos farmaceuticos Cloroformo espectro ultravioleta/visible 10 0.05–0.8 -g mL−1 0,04 -g ml−1 [157]
productos de aceite agua natural hexano fluorimetría 6 1-1000 -g L−1 – [158]
Fenol Aguas naturales y residuales cloroformo, hexano espectro ultravioleta/visible 15 1.0–10 -g L−1 – [159]
Fenol Aguas naturales tributilfosfato fluorimetría 6 0.5–100 -g L−1 – [158]
zinc productos farmaceuticos Cloroformo espectro ultravioleta/visible 10 0.05–0.6 -g mL−1 0,04 -g ml−1 [157]
AAS: espectrometría de absorción atómica; Bq: becquerelio; MIBK: metilisobutilcetona; espectro UV/vis: espectrofotometría UV/visible; THAB: bromuro de tetraheptilamonio.
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64 CIC Silvestre et al. / Analítica Química Acta 652 (2009) 54–65
del medio biporoso para el flujo de gas o líquido no polar. El suministro de fueron innovadores ya que ofrecen alternativas para simplificar la
las dos fases al CMC y su separación final se produce mediante la adecuada configuración de los manifolds ya sea evitando el uso del segmentador
colocación de membranas de PTFE microporoso que garantiza el traspaso de o del separador de fases.
ambas fases. En consecuencia, las corrientes de dos fases se mueven de La extracción líquido-líquido en el análisis de flujo, en comparación con
forma independiente debido a la presencia de estos dos tipos de tamaños de los métodos manuales, contribuyó no solo a la reducción del consumo de
poros significativamente diferentes en el PTFE.[157,162]. solventes orgánicos, reactivos y muestras, lo que llevó a análisis menos
El procedimiento analítico de un sistema de flujo que comprende costosos, sino que aseguró soluciones analíticas más respetuosas con el
una CMC consiste básicamente en llenar los microporos con fase medio ambiente con una disminución en la generación de desechos. y en los
orgánica; en la entrega de la fase acuosa que contiene el analito a la riesgos de exposición de los operadores. Además, al trabajar como un
CMC; extracción del analito en la fase orgánica en los microporos; sistema cerrado, se evita la contaminación, y la combinación de alta tasa de
elución del análisis extraído con una fase orgánica y transporte hacia el determinación, bajo nivel de mantenimiento y fácil manejo lo convierte en
detector para la medición. El CMC es responsable de la concentración una de las operaciones analíticas más interesantes para implementar en
previa del análisis y de la separación de las fases. De esta forma, el sistemas de flujo analítico, pudiendo aplicarse en un variedad de áreas, la
sistema de flujo no necesita una unidad de segmentación ni de mayoría de las cuales requieren la separación y preconcentración de analitos
separación, lo que hace que el uso de un CMC sea una técnica muy de matrices muy complejas.
prometedora porque los tres pasos del procedimiento de extracción se
combinan y se llevan a cabo en un solo pequeño dispositivo. Además, Expresiones de gratitud
requiere solo volúmenes muy pequeños de fase orgánica y, si es
necesario, puede permitir una extracción o preconcentración continua. Los autores agradecen al consorcio binacional (FCT/CAPES) por el
apoyo financiero. Cristina IC Silvestre agradece a la Fundação para a
Ciência e Tecnologia y FSE (III Community Support Framework) por la
beca de doctorado (SFRH/BD/31107/2006).
Referencias
2.5.6. Sistemas de optodetección
Otro enfoque que evita el uso del segmentador, y también la bobina
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y el separador de fase, se basa en un pequeño tapón de utilización de Trojanowicz (Ed.), Avances en métodos de análisis de flujo, Wiley-VCH, Weinhem,
fase orgánica que se introduce en una cubeta convencional colocada en 2008, pp. 291–320.
[2] H. Bergamin, JX Medeiros, BF Reis, EAG Zagatto, Anal. quim. Acta 101 (1978) 9.
el portacubetas del detector. La fase acuosa que contiene el analito se
pasa a través de la fase orgánica y se controla continuamente su [3] B. Karlberg, S. Thelander, Anal. quim. Acta 98 (1978) 1.
enriquecimiento gradual con el analito. De esta forma, se puede pasar [4] A. Alonso, MJ Almendral, MJ Porras, Y. Curto, CG de María, Anal. quim. Acta 447
un gran volumen de muestra a través de un pequeño volumen (2001) 211.
[5] LG Danielsson, A. Sparen, Anal. quim. Acta 306 (1995) 173.
orgánico para lograr un alto factor de preconcentración que depende [6] N. Clark, LG Danielsson, Anal. quim. Acta 306 (1995) 5.
del volumen total de la muestra.[163–165]. [7] J. Kawase, A. Nakae, M. Yamanaka, Anal. química 51 (1979) 1640.
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2.6. nuevas tendencias
[10] S. Motomizu, Y. Hazaki, M. Oshima, K. Toei, Anal. ciencia 3 (1987) 265.
[11] T. Sakai, H. Harada, X. Liu, N. Ura, K. Takeyoshi, K. Sugimoto, Talanta 45 (1998)
Como en muchos otros campos, la miniaturización de los procedimientos 543.
[12] M. Gallego, M. Silva, M. Valvarcel, Anal. química 58 (1986) 2265.
LLE ha suscitado un profundo interés y ha sido el centro de muchas
[13] AN Anthemidis, GA Zachariadis, JA Stratis, J. Anal. Átomo. Espectro. 18 (2003) 1400.
implementaciones recientes. La miniaturización de las metodologías de
extracción por solventes conduce a una reducción significativa en el [14] AN Anthemidis, GA Zachariadis, CG Farastelis, JA Stratis, Talanta 62 (2004)
437.
consumo de soluciones (solvente y reactivo) y una disminución inherente en
[15] S. Motomizu, M. Oshima, N. Yoneda, T. Iwachido, Anal. ciencia 6 (1990) 215.
la generación de desechos líquidos.[93]. Entre las diversas técnicas que [16] V. Kuban, J. Komarek, D. Cajkova, Collect. Checo. química común 54 (1989) 2683.
exhiben un alto potencial analítico, la microextracción de gota única (SDME)
[17] P. Richter, MI Toral, R. Manríquez, Bol. social niño kim 44 (1999) 451.
y la microextracción líquido-líquido dispersivo (DLLME) están siendo las más
[18] JS Lobinska, M. Trojanowicz, Anal. ciencia 6 (1990) 415.
explotadas. SDME se basó inicialmente en la utilización de una pequeña gota [19] MA Memon, ZX Zhuang, ZL Fang, Atom. espectro 14 (1993) 50.
de solvente orgánico, formada y suspendida en la punta de una aguja de [20] S. Motomizu, K. Korechika, Nippon Kagaku Kaishi 6 (1991) 795.
microjeringa, que se sumergió en la muestra acuosa.[166–169]. El suministro [21] DO de Blas, JLP de Paz, J. AOAC Int. 82 (1999) 1436.
[22] P. Martínez-Jiménez, M. Gallego, M. Valcárcel, Anal. quim. Acta 215 (1988)
continuo de muestra acuosa fresca por medio de un sistema de flujo 233.
continuo condujo a una mejora notable en términos de eficiencia de [23] JL Manzoori, A. Miyazaki, Anal. química 62 (1990) 2457.
extracción[170–174]. DLLME se basa en sistemas de componentes ternarios [24] AN Anthemidis, Talanta 77 (2008) 541.
[25] M. Uechi, T. Fujiwara, Y. Okamoto, Bunseki Kagaku 53 (2004) 285.
que se basan en una combinación de disolventes de extracción y dispersión [26] AN Anthemidis, DG Themelis, JA Stratis, Talanta 54 (2001) 37.
con alta miscibilidad tanto en el medio acuoso como en el extractante. La [27] S. Motomizu, M. Oshima, Analista 112 (1987) 295.
mezcla de disolventes se inyecta en la corriente de flujo de la muestra [28] S. Motomizu, M. Onoda, Anal. quim. Acta 214 (1988) 289.
[29] K. Yoshida, S. Motomizu, Bunseki Kagaku 40 (1991) T107.
acuosa, lo que da como resultado la formación de finas gotas de disolvente
[30] T. Iwachido, M. Onoda, S. Motomizu, Anal. ciencia 2 (1986) 493.
de extracción dispersas en la fase acuosa. Las gotas que contienen el analito [31] S. Motomizu, M. Onoda, M. Oshima, Analista 113 (1988) 743.
extraído se retienen posteriormente en una microcolumna y luego se eluyen [32] S. Motomizu, N. Yoneda, T. Iwachido, Bunseki Kagaku 37 (1988) 642.
[33] M. Yamamoto, Y. Obata, Y. Nitta, F. Nakata, T. Kumamaru, J. Anal. Átomo. Espectro.
para su detección.[175].
3 (1988) 441.
[34] O. Klinghoffer, J. Ruzicka, EH Hansen, Talanta 27 (1980) 169.
3 Conclusiones [35] T. Kumamaru, Y. Nitta, F. Nakata, H. Matsuo, Anal. quim. Acta 174 (1985) 183.
[36] T. Blanco, N. Maniasso, MF Gine, AO Jacintho, Analista 123 (1998) 191.
[37] SL Lin, H. Hwang, Talanta 40 (1993) 1077.
Después de 30 años de los trabajos pioneros de Bergamin y Karlberg, se han [38] DO Blas, JLP Paz, JH Méndez, Talanta 38 (1991) 857.
desarrollado varias estrategias diferentes para llevar a cabo la extracción líquido- [39] H. Koshima, H. Onishi, Anal. ciencia 6 (1990) 421.
líquido en el análisis de flujo. Las mejoras fueron significativas, los autores [40] H. Koshima, H. Onishi, Anal. quim. Acta 232 (1990) 287.
[41] TP Lynch, AF Taylor, JN Wilson, Analista 108 (1983) 470.
intentaron simplificar las propuestas originales resolviendo algunos de sus [42] L. Sun, L. Li, Z. Fang, Fenxi Huaxue 13 (1985) 447.
inconvenientes inherentes. La mayoría de estos avances [43] L. Fossey, FF Cantwell, Anal. química 55 (1983) 1882.
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