BIOTECNOLOGÍA PRACTICAS DE INMUNOLOGÍA

PRÁCTICA NO. 1 ANATOMIA DEL SISTEMA INMUNOLOGICO INTRODUCCIÓN Sistema inmunológico. Todas las expresiones de la respuesta inmunológica dependen de la existencia y función del sistema inmunológico. Este sistema incluye a los órganos linfoides, al tejido linfoide disperso y a los elementos de la circulación sanguínea y linfática. Órganos linfoides. En los mamíferos, los órganos linfoides están representados por el timo, la médula ósea, el bazo, las amígdalas, los ganglios linfáticos, también llamados linfonodos, el apéndice ileocecal y las placas de Peyer. En las aves existe un órgano adicional llamado "bolsa de Fabricio". Los órganos linfoides se clasifican en dos grandes grupos: los primarios o centrales (médula ósea, timo y bolsa de Fabricio), y los secundarios o periféricos (bazo, amígdalas, ganglios linfáticos, apéndice ileocecal, y las placas de Peyer). Existe además tejido linfoide que no se encuentra limitado por una cápsula de tejido conectivo, es el tejido linfoide disperso que se encuentra asociado a las mucosas (MALT), principalmente en la región subepitelial. En el tejido linfoide encapsulado y en menor grado en el disperso, las células linfoides se encuentran "contenidas" por el tejido de sostén formado por las células y fibras reticulares. En los órganos linfoides primarios o centrales, las células del tejido linfoide terminan su proceso de diferenciación y/o maduración que las hace inmunológicamente competentes. En los órganos linfoides secundarios o periféricos, las células del tejido linfoide hacen

que terminan su diferenciación y maduración en la médula ósea (o en la bolsa de Fabricio en las aves). estas células constituyen una población heterogéneo.contacto con el antígeno. Todas las células del sistema inmunológico se desarrollan a partir de células madre pluripotenciales presentes en médula ósea. Para empezar. muy probablemente de las mismas células pluripotenciales que las células linfoides y mieloides. lifocitos B y células NK (asesinas naturales o natural killer). a través de los factores . etc. células interdigitantes. y producen los efectores solubles de la respuesta inmune celular (citocinas) y de la respuesta inmune humoral (anticuerpos). proliferan en respuesta al estímulo antigénico. La diferenciación de los glóbulos blancos o leucocitos es a través de dos vías principales: la línea linfoide que produce linfocitos T. cuya diferenciación y maduración se completa en el timo. Células del sistema inmunológico. basófilos y eosinófilos. los linfocitos T cooperadores (Th) y los linfocitos T citotóxicos (Tc). células cebadas. Mientras que los primeros se consideran responsables de la respuesta inmune celular los segundos se involucran más con la respuesta humoral. existen dos tipos fundamentales de linfocitos: los linfocitos T. Aunque morfológicamente todos los linfocitos son iguales. aunque no se ha definido con precisión cuál es su célula progenitora. Existe una población heterogénea de leucocitos que tienen un papel fundamental en la inducción de una respuesta inmune. en realidad. Linfocitos. células celadas. monocitos y rnacrófagos. Las células presentadoras de antígeno se derivan de médula ósea. De los linfocitos T se distinguen dos subpoblaciones. en la que se encuentran las células de Langherhans. denominada de manera general como células presentadoras de antígeno. Los linfocitos Th2. los linfocitos Th1 y los linfocitos Th2. en la actualidad se reconocen al menos dos variedades de linfocitos T cooperadores. Más aún. y la línea mieloide que da lugar a los leucocitos polimorfonucleares (PMN) neutrófilos. y los linfocitos B. células dendríticas.

bazo. ganglios linfáticos y placas de Peyer). Microscopio óptico. placas de Peyer y apéndice ileocecal. Charola o tabla de disección. Equipo de disección: pinzas. Por último. estimulan la proliferación de los linfocitos B. el alumno deberá ser capaz de localizar e identificar los órganos más aparentes del sistema inmunológico como: timo.solubles que producen. bazo. bisturí. Detergente Cloro Jabón de manos Material por equipo Rata joven (4 a 6 semanas). MATERIAL Y MÉTODOS Material por grupo Papel higiénico. Deberá reconocer la estructura histológica general de los órganos linfoides más prominentes (timo. ganglio y placa de Peyer. Frotis sanguíneo teñido con sol Wrigth. Algodón. su transformación en células plasmáticas y su capacidad de síntesis de anticuerpos. OBJETIVO. aguja de disección y tijeras. llamadas linfocinas. Al finalizar el desarrollo de la práctica. Cortes histológicos tejidos de timo. Cloroformo. 3 pipetas Pasteur con bulbo. 10 Alfileres con cabeza de perla. deberá ser capaz de identificar y describir las células linfoides y mieloides que se encuentran en la circulación sanguínea. . Solución salina isotónica (SSF). ganglios linfáticos (linfonodos). bazo.

desde el cuello hasta la cola. Los ganglios linfáticos inguinales se pueden notar dentro del depósito de grasa en la piel correspondiente a la región abdominal adheridos a la piel. Iniciar procedimiento de necropsia. tijeras y bisturí). realizando inspección externa. éstos son los ganglios de mayor tamaño y se encuentran constituyendo un "cinturón ganglionar" alrededor del cuello. Franela Metodología. utilizando un frasco con tapa de cierre hermético preparado para este efecto. Localizar los ganglios linfáticos cervicales. 2. 6. 8. Fijar la piel "suelta" a la charola de disección utilizando alfileres o agujas. Seguir las indicaciones del instructor y proceder a disecar los ganglios linfáticos cervicales. Sacrificar los animales con cloroformo. Disección del animal de experimentación Se recomienda manejar a los animales extremando las precauciones para evitar mordeduras.Papel de estraza Una caja de Petri (100 x 15 mm). 4. se observan como protuberancias discretas. 1. utilizando las pinzas y la parte roma de la tijera. protegidos por la capa de grasa subcutánea. realizar la incisión primaria haciendo una incisión longitudinal en el animal. Separar por disección roma la piel del cuerpo del animal. 7. 3. afectando solamente la piel y evitando cortar las capas más profundas (usar pinzas. los inguinales y los axilares. Su forma ovoide permite distinguirlos de las glándulas submandibulares localizadas también en la parte anterior del cuello. Colocar los animales boca arriba sobre la charola de disección y fijarlos a la misma utilizando alfileres o agujas. Levantar la piel del cuello para descubrir los ganglios cervicales. 5. Empapar el pelaje del animal con una torunda con alcohol. axilares e inguinales utilizando pinzas .

. enjuagar con agua corriente. Localizar el bazo en la cavidad abdominal.y tijeras finas. de las placas de Peyer. Localizar la región duodenal del intestino delgado (aquella parte que lo conecta al estómago) y. 11. teñir con sol. Tener cuidado de no destruir los ganglios y colocarlos en una caja de Petri que contenga SSF. Observar los órganos protegidos por la cavidad torácica. Depositarlo en la caja de Petri.Obtener una gota de sangre sin coagular y extenderla sobre un portaobjetos para realizar un frotis sanguíneo. 12. Identificar las placas de Peyer distribuidas a intervalos en esta región intestinal Localizar la parte donde el intestino delgado se une al intestino grueso e identificar el apéndice ileocecal. 9. 14. descansando sobre la parte apical del corazón en la región anterior de los grandes vasos) y removerlo sin lesionarlo. Dada la composición del contenido intestinal no se considera conveniente extirpar estos órganos linfoides. de un ganglio linfático. localizar la posición del timo (éste se encuentra en el rnediastino. 10. 15. extender el tubo intestinal cortando la fina membrana conectiva que lo mantiene en posición. Realizar la incisión secundaria cortando en el plano longitudinal la membrana que recubre la cavidad peritoneal y descubrir la cavidad torácica cortando la pared anterior de la misma (incluyendo las costillas). 13. de Wrigth durante 1 minuto. por encima de la curvatura mayor del estómago. Depositarlo en la caja de Petri. con cuidado. cuidar de no dañar los órganos internos.. del bazo y del frotis sanguíneo observando en el microscopio compuesto preparaciones de estos tejidos. proceder a su extirpación separando el órgano cuidadosamente del tejido conectivo que lo fija al estómago y al intestino delgado. Analizar y discutir con su instructor las características histológicas generales del timo. Buscar los ganglios linfáticos mesentéricos que se encuentran azarosamente distribuidos en las membranas que mantienen unidas las asas intestinales.

. de las placas de Peyer. rnonocitos y leucocitos polimorfonucleares (neutrófilos. del timo...¿Qué es y cuál es la función del MALT? 5. de consistencia y de color de los ganglios linfáticos. CUESTIONARIO.¿Cuáles son y cuál es la función de los órganos linfoides secundarios? 4.y del timo. del bazo y de las placas de Peyer...¿Qué es y cuál es la función del GALT? .. 1. basófilos y eosinófilos). Esquematizar las células observadas en las extensiones de sangre identificando los diferentes tipos celulares encontrados: linfocitos. Esquematizar la histología general de los ganglios linfáticos.¿Cuáles son los órganos linfoides? 2.RESULTADOS Anotar las características morfológicas. del bazo.¿Cuáles son y cuál es la función de los órganos linfoides primarios? 3. Discutir sus observaciones con su instructor.

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