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Instituto Tecnolgico de Celaya
INSTITUTO TECNOLGICO DE CELAYA
DISEO DE UN MICROSENSOR PARA LA CARACTERIZACIN DE LAS PROPIEDADES ELCTRICAS DE LOS FRUTOS.
TESIS.
QUE PARA OBTENER EL TTULO DE: MAESTRO EN CIENCIAS EN INGENIERA ELECTRNICA
PRESENTA: CARLOS ISRAEL VALLEJO IBARRA.
ASESOR: DR. JUAN PRADO OLIVAREZ
CELAYA, GTO. JUNIO 2011
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Instituto Tecnolgico de Celaya TABLA DE CONTENIDO AGRADECIMIENTOS 4 RESUMEN 5 7 9 NOMENCLATURA Y ACRNIMOS NDICE DE FIGURAS Y TABLAS INTRODUCCIN OBJETIVOS HIPTESIS PROPUESTA 13 13 14 12
1. INTRODUCCIN A LAS MEDIDAS DE BIOIMPEDANCIA ELCTRICA EN TEJIDOS BIOLGICOSY SOLUCIONES SALINAS 15 16 17
1.1. 1.2.
Antecedentes de la impedancia compleja en tejidos biolgicos
Definicin de impedancia elctrica en soluciones y tejidos biolgicos La impedancia compleja, el modelo ideal y su relacin con la permitividad y la conductividad 18 21
1.3.
1.4. 1.5. 1.6.

2.
La espectroscopa de impedancia y su representacin grfica Propiedades elctricas en los tejidos biolgicos 22 Espectroscopa de impedancia en soluciones salinas 28
INSTRUMENTACIN EN LA ESPECTROSCOPA DE BIOIMPEDANCIA Electrodos de medicin 30 30
29
2.1.
2.1.1. Impedancia de electrodo 2.1.2. Potenciales de offset

32
2.1.3. La interfase electrodo tejido
33 34
2.1.4. Electrodos invasivos y no invasivos 2.1.6. Geometra de los electrodos 2.2.
2.1.5. Materiales para la elaboracin de los electrodos 35

36 37
2.1.7. Factores de seleccin para los electrodos

Sistemas de electrodos 38
2.2.1. El sistema de dos electrodos (sistema dipolar)
39
pg. 2
2.2.2. El sistema de cuatro electrodos 39 2.2.3. El sistema de tres electrodos 2.3. 2.4. 2.5.
3.
40
Mtodos de medicin
41 43 43
El Amplificador de Instrumentacin
La fuente de excitacin en la espectroscopa de impedancia
DESARROLLO Y EXPERIMENTACIN Simulacin en FEMLAB 46
45
3.1. 3.2.
Diseo y construccin del sistema de electrodos Diseo y construccin del sistema electrnico para la medicin de la impedancia compleja 50
48
3.3.
3.3.1. Fuente de corriente
50 51 55
3.3.1.1.El circuito Howland modificado 3.3.2. Mtodo de medida 3.3.3. Tcnica de medicin
3.3.1.2.Validacin del circuito Howland Modificado

58 59
3.3.4. Diagrama general del circuito utilizado para la medicin de impedancia 61
3.4.
Grficas y resultados del sistema sin acoplamiento de electrodos 63
3.5.
Grficas y resultados del sistema con acoplamiento de electrodos 67
DISCUSIN Y CONCLUSIONES REFERENCIAS 76
73
SECCIN DE APNDICES APNDICE A. CIRCUITO DETECTOR DE FASEAD8202 80 84 91
APNDICE B. EL GENERADOR DE ONDA AD9833 Y LA TCNICA DDS APNDICE C. ECUACIONES PARA EL CIRCUITO HOWLAND MODIFICADO APNDICE D. LISTADO DEL PROGRAMA 93
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A mi familia. A mis padres y hermanos. A ti Samantha, a tu fuerza, a tu valenta... a tu ocurrente y alegre recuerdo.
AGRADECIMIENTOS pg. 4
Instituto Tecnolgico de Celaya He pensado varias veces en este momento y la gran cantidad de agradecimientos que llegan a mi mente me complican el comienzo. En primer lugar, quiero dar las gracias al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa por dar la oportunidad a personas como yo para realizar investigaciones y aportar un poca a la actualizacin cientfica que tanto le hace falta a este gran pas. Es mi deseo expresar mi ms profundo agradecimiento a mi tutor y director de tesis Dr. Juan Prado Olivarez quien me brind la oportunidad de trabajar en este proyecto de investigacin, involucrarme en un tema de actualidad al igual que interesante y de mltiple aplicacin. Por la disponibilidad que en todo momento me brind para despejar mis dudas y principalmente no perder mi proyecto. Porque simplemente su ayuda fue invaluable. A todos los profesores del consejo del posgrado de electrnica de la especialidad en Sistemas Digitales, que brindaron parte de sus conocimientos en cada una de las asignaturas llevadas durante el posgrado, especialmente a los profesores Agustn Ramrez Agundis y No Vela Aguirre por estar dispuestos siempre en ayudar y por esa forma tan practica de resolver los problemas. Y como no darle las gracias a mis cuatro compaeros, pero ms importante amigos del posgrado de quienes me llev, ms que su apoyo incondicional, su verdadera amistad.
RESUMEN
El objetivo de este trabajo es disear, crear y probar un dispositivo sensor (sistema electrnico) que sea capaz de llevar a cabo mediciones de impedancia elctrica. La experimentacin y validacin del circuito o sistema se contemplan como un paso referente e importante para lograr, en una futura investigacin; la caracterizacin de soluciones electrolticas en general, medios o frutos a travs de
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Instituto Tecnolgico de Celaya la espectroscopa de impedancia (EDI) obteniendo un estimador o referente cuantitativo que nos permita conocer el estado de dichas muestras. Para conseguir este objetivo, la tesis se ha dividido en tres fases. La primera fase consisti en obtener informacin acerca de las soluciones salinas y sus propiedades elctricas medibles relacionadas con la impedancia elctrica. La segunda fase consta de un marco terico de la EDI as como la instrumentacin empleada para tales investigaciones. La tercera fase esta referenciada al diseo, simulacin, realizacin y validacin del sistema electrnico. Tambin se contempla aqu el diseo de un prototipo de un sistema de 4 electrodos utilizado para las mediciones de EDI. El diseo del sistema de electrodos fue primeramente simulado con un modelo 2D de elementos finitos (EF) y fsicamente creado sobre una placa PCB con electrodos de cobre. El diseo del circuito para la espectroscopa de bioimpedancia se implement basndose en el detector de ganancia y fase (DGF) AD8302 utilizando circuitos electrnicos de manufactura relativamente reciente con el fin de disminuir la complejidad del software y el hardware.
Se incluye en el sistema una fuente de corriente basada en el circuito Howland modificado (HHM por sus siglas en ingles) y una fuente de voltaje utilizando la tcnica de sntesis digital directa (SDD). La tcnica de medicin de impedancia est referida a un sistema de cuatro electrodos. Para llevar a cabo la automatizacin del dispositivo se program un microcontrolador utilizando el compilador C18. La frecuencia de la seal de excitacin se ajusta con un teclado matricial y la medicin de impedancia es mostrada en una pantalla LCD. Para validar las simulaciones y el sistema en general se realizaron pruebas utilizando, primeramente el circuito sin acoplamiento del sistema de electrodos. Esto con el fin de analizar la respuesta de las mediciones de (EDI) con elementos
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Instituto Tecnolgico de Celaya pasivos (resistencias y capacitores). Se calcul la impedancia terica y se compar con los valores medidos. Para la validacin del sistema completo (utilizando el sistema de electrodos) se realiz una experimentacin in vitro utilizando soluciones salinas y reflejando las mediciones en grficas para comprobar las cualidades tcnicas y el desempeo del sistema funcionando como un BIS. Se presentas las conclusiones y discusiones de los resultados y del proyecto en general
NOMENCLATURA Y ACRNIMOS Nomenclatura

Propiedad. Impedancia. Admitancia. Resistividad. Abreviacin Z Y UNIDADES.
(ohm)
S (siemens)
.m (ohm .
metro)
Conductividad. Susceptancia. Frecuencia. Frecuencia angular. Permitividad. Densidad de corriente. Potencial elctrico. Conductancia Resistencia Reactancia
S.m-1
S (siemens) Hz Rad. Hz coulombs2/N.m2
f w J E
G R X
Ampm2 Voltm
S (siemens)
(ohm) (ohm)
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Acrnimos
CST: Contenido de slidos solubles totales.
EDB: Espectroscopa de bioimpedancia.
AI: Amplificador de instrumentacin.
FCCV: Fuente de corriente controlada por voltaje.
CHM: Circuito Howland Modificado.
FBEC: Fuente basada en el espejo de corriente.
SDD: Sntesis digital directa.
DGF: Detector de ganancia y fase AD8302.
LCD: Pantalla de cristal lquido que.
EIE: Espectroscopa de Impedancia Elctrica.
EF: Elementos finitos.
MI: Microbiologa de Impedancia.
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NDICE DE FIGURAS Y TABLAS ndice de Figuras

CAPTULO I Figura 1. Modelo para la medicin de impedancia 17 Figura 2. La impedancia se comporta bsicamente como un fasor Figura 3. Modelo de celda ideal. (Geddes and Baker) Figura 4. Diagramas de Bode (arriba) y Cole (abajo) Figura 5. Membrana celular 23 18 21 18
Figura 6. Representacin ideal de la permitividad y resistividad de tejidos biolgicos 25 Figura 7. Modelo que representa los mecanismos principales 25 26
Figura 8. Circuitos elctricos que representan la ecuacin de Debye, con relajacin y =0 Figura 9. Circuito elctrico de Cole-Cole para un solo arco 27
CAPTULO II Figura 10. Interfase electrodo-electrolito 32 32
Figura 11. Representacin de las lneas equipotenciales desarrolladas en el electrodo Figura 12. Modelo de Warburg para la impedancia de polarizacin 34
Figura 13. Imagen de electrodos no invasivos (a la izquierda) e invasivos (a la derecha) Figura 14. Modelo de un sistema de cuatro electrodos Figura 15. Sistema de dos electrodos Figura 16. Sistema de cuatro electrodos Figura 17. Sistema de tres electrodos. Figura 18. Mtodo de medida I-V 42 Figura 19. Mtodo de puente balanceado 43 Figura 20. Anlisis de redes 43 40 41 42 38
36
Figura 21. Ejemplo de un amplificador de instrumentacin 45
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Figura 22. Sistema de medicin de impedancia del tejido con cuatro electrodos 46
CAPTULO III Figura 23. Lneas de campo elctrico del sistema simulado. 48 Figura 24. Valores de potencial elctrico producidos en el sistema simulado 50 Figura 25. Diseo del sistema de electrodos 51 52
Figura 26. Vista 3D del diseo del sistema de electrodos Figura 27. Modelo ideal de una fuente de corriente 53 Figura 28. Estructura bsica del generador Howland
54 54
Figura 29. Diagrama del generador de corriente mejorado de Howland Figura 30. Esquemtico del circuito de Howland modificado 56 Figura 31. Esquemtico del circuito Howland modificado con buffer 57
Figura 32. Magnitud de la corriente simulada en Multisim para una carga de 1K Figura 33. Fase de la corriente simulada en multisim con respecto a la frecuencia Figura 34. Modelo de impedancia electrodo-tejido. 59
58 58
Figura 35. Magnitud de la corriente simulada en multisim para la carga mostrada en la figura 35 Figura 36. Mtodo utilizado para la medicin de impedancia. 60 61
59
Figura 37. La tcnica de medicin est basada en el detector de ganancia y fase AD8302 Figura 38. Diagrama a bloques del circuito completo 64 65
Figura 39. Representacin grfica de Cole-Cole para R=200 y C=0.1uF
Figura 40. Grficas que muestran los resultados tericos y prcticos del circuito 1 RC en paralelo Figura 41. Representacin grfica de Cole-Cole para R=200 y C=0.22uF 67
66
Figura 42. Grficas que muestran los resultados tericos y prcticos del circuito 2 RC en paralelo Figura 43. Grficas de H2O 70
68
Figura 44. Grficas de la solucin de NaCl al 0.4% 71 Figura 45. Grficas de la solucin de NaCl al 0.8% 72 Figura.46 Circuito elctrico equivalente a la impedancia cobre-electrolito (Jos Mompn, 1988) 74
ndice de Tablas pg. 10

Tabla 1. Coeficientes de conductividad de los principales metales conductores Tabla 2. Caractersticas de los principales mtodos de medicin 44 49 36
Tabla 3. Coeficientes para el agua utilizados para la simulacin en FEMLAB
Introduccin
La espectroscopa de impedancia (EDI) est referida a mediciones de impedancia elctrica compleja de bio-materiales o sustancias en una amplia gama de frecuencias. A probado ser de considerable
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Instituto Tecnolgico de Celaya importancia para el diagnstico clnico, as como para la investigacin fundamental, en especial en la fisiologa y la patologa. Anlisis de EDI pueden proporcionar informacin valiosa sobre las propiedades qumicas de soluciones y medios. Adems de efectos fisiolgicos y estado de los tejidos vivos, tales como la isquemia (Salazar Munoz, 2000), edema pulmonar (Mayer, 2005), cncer de piel (Rigaud, 1996) y el tumor por va intramuscular (Skourou, 2004). Por otro lado, las medidas de bioimpedancia basadas en el modelo de Cole-Cole permiten determinar caractersticas de soluciones y tejidos biolgicos tales como la integridad de membrana y tamao celular por la valoracin de sus propiedades elctricas pasivas. En este sentido, las experimentaciones en soluciones salinas han sido ampliamente utilizadas en las mediciones de impedancia por su gran parecido a las muestras de sangre, cultivos o lquidos en general como parte de la experimentacin y calibracin del instrumento. La EDI ha sido empleada exitosamente para deteccin de isquemia cardiaca, tejidos cancerosos, valoracin de composicin de grasa corporal (Pedro Bertemes, 2001), actividad bacteriana, entre otros. Recientemente se ha fortalecido la aplicacin de esta tcnica en la estimacin de biomasa por la obtencin de espectros de impedancia en cultivos celulares, a esta tcnica se le conoce como microbiologa de impedancia (MI), y permite monitorear, detectar, cuantificar y en ciertos casos identificar microorganismos (Grimnes and Martinsen, 2000). El valor de impedancia presenta una componente real y una compleja que reflejan, en general el comportamiento de las propiedades elctricas pasivas de los cultivos; la parte real muestra el comportamiento resistivo del citoplasma celular y la parte compleja refleja el comportamiento capacitivo de la membrana celular esperando as valores altamente capacitivos para membranas celulares integras (Grimnes and Martinsen, 2000). Adems, con el modelo de Cole-Cole se pueden obtener parmetros que facilitan la caracterizacin de las muestras; por ejemplo, en el modelo de Cole-Cole, fc la frecuencia caracterstica, es la frecuencia a la que la componente imaginaria de la impedancia elctrica alcanza el mximo; de esta forma se obtiene informacin sobre el tamao de la clula, cuanta ms pequea es sta, mayor es la frecuencia caracterstica. Finalmente si se representa la parte imaginaria de la impedancia elctrica de un muestra biolgica respecto a la parte real de dicha impedancia la figura resultante se aproxima a un semicrculo, as nos da informacin sobre la desviacin respecto a un semicrculo perfecto (Foster and Schwans, 1996). Con la utilizacin cada vez ms amplia de la tcnica de impedancia elctrica en tales reas, los dispositivos de medicin ms cercanos a la portabilidad, bajo costo y bajo consumo de energa, y capaz de llevar a cabo medidas en tiempo real con una precisin adecuada sern muy convenientes tanto para hospitales, el hogar y centros de investigacin.
En este trabajo se describe el prototipo de un diseo para un sistema porttil para la medicin de impedancia sobre la base de la tcnica de relacin de magnitud y deteccin de la diferencia de fase la cual est basada en el detector de ganancia y fase (DGF) AD8302. Tal tcnica ofrece una alternativa rentable para las mediciones de impedancia en tiempo real.
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Instituto Tecnolgico de Celaya En las siguientes secciones se describen informacin relacionada con las mediciones de impedancia elctrica en tejidos biolgicos y/o soluciones salinas y las propiedades de conductividad y permitividad las cuales estn relacionadas directamente con la fisiologa de la muestra. Se describe le tcnica y el funcionamiento de cada una de las partes del prototipo, su validacin y calibracin utilizando elementos pasivos y soluciones salinas. El sistema de Espectroscopa de Impedancia elctrica est basado en el sistema de cuatro electrodos y admite medidas de impedancia en un rango de frecuencias comprendido entre los 100 Hz y 500KHz. Tal rango de dispersin se debe a la estructura celular de la muestra, y ha sido altamente utilizado en la caracterizacin celular en animales, soluciones y vegetales. La validacin se desarrollar utilizando soluciones salinas.
Objetivos
Disear un mtodo, una tcnica y un dispositivo sensor portable con los cuales se puedan obtener mediciones de bioimpedancia elctrica. Validando o comprobando el funcionamiento del prototipo utilizando soluciones salinas. Para alcanzar este objetivo se plantean los siguientes objetivos especficos:
Implementar una tcnica sencilla, efectiva
y capaz de llevar a cabo tales mediciones de
bioimpedancia compleja en un amplio rango de frecuencias. Utilizar componentes electrnicos de ltima generacin que minimicen la complejidad del instrumento. Disear y utilizar un sistema de cuatro electrodos de material de cobre en las medidas de bioimpedancia. Validar el sistema llevando a cabo mediciones sobre circuitos pasivos y soluciones salinas.
Hiptesis
Se pueden obtener mediciones de impedancia compleja utilizando la tcnica de deteccin de ganancia de magnitud y diferencia de fase basada en el circuito AD8302 en un prototipo porttil que utilice dispositivos de ltima generacin validando su funcionamiento y alcances utilizando soluciones salinas. Clculos dielctricos pueden ser contemplados a partir de estas mediciones en tales soluciones.
Propuesta
Las propiedades dielctricas (permitividad y conductividad) de soluciones electrolticas acuosas son de considerable importancia para la comprensin del comportamiento de soluciones en sus niveles de hidratacin (Conway, 1981) y complejidad qumica (Davies 1969) principalmente para la comprensin de
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Instituto Tecnolgico de Celaya mecanismos lquidos tales como conductividad elctrica, saturacin estructural (Hasted, 1973), friccin dielctrica (Zwanzig, 1995) y polarizacin kintica (Hubbard, 1981). Adems de tales aspectos fundamentales existen una gran variedad de aplicaciones relacionadas con la cantidad de slidos solubles totales como la humedad en muchos materiales o sustancias y sus propiedades dielctricas. Aunque la funcin principal de las soluciones salinas se estudian en la ingeniera qumica, sus propiedades dielctricas siguen siendo aun exploradas. En este proyecto se propone el diseo, construccin y validacin de un medidor porttil de impedancia compleja para soluciones salinas. Tales mediciones pueden ser utilizadas como informacin para la caracterizacin de los aspectos qumicos de tales sustancias o para la determinacin o aproximacin de las propiedades dielctricas de los mismos. Por otro lado, bsicamente dos tcnicas para medir biompedancia han sido utilizadas: La tcnica de demodulacin en cuadratura analgica (AQD Por sus siglas en ingles) la cual se basa en la demodulacin de fase y necesita dos canales bien ajustados en fase (I) y en cuadratura (Q) de los contrario causara grandes errores de medicin, la necesidad de evitar cualquier desfasamiento entre los dos canales siempre incrementa la complejidad en la realizacin del circuito AQD (Pallas-Areny and Webster, 1993). Por el otro lado, con el desarrollo de nuevas tcnicas basadas en DSP, el muestreo directo de las seales en la frecuencia portadora se ha hecho posible ya en los ltimos aos, lo que ha permitido la evolucin de la tcnica AQD a la tcnica de demodulacin digital en cuadratura (DQD por sus siglas en ingles), que ya no requiere referencias analgicas (I y Q). Sin embargo, la necesidad de una conversin analgica digital de alta velocidad en el DSP a menudo conduce a los altos costos y alto consumo de energa debido a la alta velocidad de muestreo requerida (Casanella, 2005). La propuesta de nuestro diseo se fundamenta en el funcionamiento del detector de ganancia y fase AD8302 y propone una tcnica relativamente sencilla basada en circuitos de ltima generacin.
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CAPTULO 1 INTRODUCCIN A LAS MEDIDAS DE BIOIMPEDANCIA.
1.1.
Antecedentes de la impedancia compleja en tejidos biolgicos.

(Z) en tejidos biolgicos (Bioimpedancia elctrica) tiene una
Las medidas de impedancia elctrica
historia que se remonta a finales del siglo XVIII, con los experimentos realizados por Galvani (Schwan, 1995). Las medidas de impedancia elctrica determinan o infieren informacin acerca del tejido, siempre y cuando el evento en anlisis presente un cambio en dimensin, en sus propiedades dielctricas (movimiento de enlaces en el dielctrico) o en sus conductividad (movimiento de cargas libres) (Geddes, 1989). De acuerdo con Rigaud (Rigaud, 1996), no fue hasta principios del siglo XX cuando se
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Instituto Tecnolgico de Celaya estudi la estructura de los tejidos biolgicos basados en sus propiedades elctricas pasivas, lo cual demostr que tales tejidos son conductores y su resistencia variaba con la frecuencia. En la actualidad, las mediciones de impedancia compleja en tejidos biolgicos (frutas, plantas, animales, humanos, etc.) son llevadas a cabo para obtener informacin acerca de los procesos qumicos en ellos y por lo tanto, pueden ser usados para su caracterizacin o para el monitoreo de cambios fisiolgicos (Grimnes y Martinsen, 2000). Caractersticas tales como: niveles de hidratacin, patologas, edema, volumen de fluido corporal, niveles de grasa, etc. pueden ser obtenidos con mediciones de bioimpedancia compleja, de la misma manera se puede trabajar con frutos o verduras para caracterizarlos (Q. Fang, X. Liu, I. Cosic, 2007) y obtener: niveles de hidratacin, acides, fructuosa o sacarosa, madures y en general, el estado de los tejidos y de las clulas que lo constituyen. Bajo condiciones lineales y para el mismo tejido, la impedancia (Z), la admitancia (Y = 1/ Z), la permitividad compleja () y la conductividad compleja ( = j) contienen la misma informacin pero presentada de manera diferente. El tejido puede ser caracterizado como un dielctrico o un biomaterial electroltico y por un modelo de relajacin e inmitancia. La instrumentacin utilizada en las medidas de impedancia compleja es relativamente barata. Adems, es una tcnica no ionizante que puede ser o no invasiva. Estos hechos han animado su posible aplicacin en diferentes reas. Sin embargo, es una medida que est altamente influenciada por la geometra del tejido en estudio. Es preciso mencionar que en un tejido biolgico existe una inseparable alianza entre electricidad y qumica. Teora electroltica y electroqumica forman por lo tanto, una base importante para este campo.
1.2.
Definicin de impedancia elctrica en soluciones y tejidos biolgicos.
La impedancia es una medida de la cantidad de resistencia ofrecida por un sistema dado cuando una cantidad de fuerza trata de causar o mantener el paso de un flujo de carga a travs de l. Si podemos concebir que una variable fisiolgica (nivel de hidratacin, de glucosa, flujo sanguneo, etc.) pueda producir un cambio en la impedancia entre dos puntos cualesquiera y que, ms aun, este cambio poder ser registrado haciendo pasar una corriente alterna a travs de los puntos de referencia, esta es la funcin de un medidor de impedancias (Geddes and Baker, 1990).
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Instituto Tecnolgico de Celaya Ms especficamente, la bioimpedancia elctrica (BE) es la oposicin al cambio fisiolgico que presenta un tejido biolgico, cuando es sometido al paso de una corriente elctrica a travs de l. La impedancia elctrica Z representa un nmero complejo (cuando se tiene una componente capacitiva o inductiva, figura 2) que puede ser definido como la relacin entre la tensin medida (V) y el flujo de corriente total (I). La figura 1 muestra una descripcin del mtodo que se utiliza para llevar a cabo mediciones de impedancia. El tejido es estimulado por medio de una corriente elctrica de un valor que debe ser obtenido experimentalmente. La impedancia (bioimpedancia en caso de un tejido biolgico) crear un voltaje que puede ser medido. Para la corriente inyectada y la medicin de voltaje se utilizan electrodos de materiales altamente conductivos y, en muchos casos, biocompatibles como la plata o el platino.
Figura 1. Modelo para la medicin de impedancia.
Bsicamente la relacin de voltaje y corriente se puede utilizar para obtener el valor de la impedancia del tejido Z. La impedancia de un tejido es bsicamente un valor complejo y por lo tanto tiene magnitud y fase. Este hecho es debido a la componente capacitiva proporcionada por la interfase de las membranas de las clulas vegetales o animales en los tejidos biolgicos (Grimnes, S. and Martinsen, 2000).
Figura 2. La impedancia se comporta bsicamente como un fasor.
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1.3.
La impedancia compleja, modelo ideal y su relacin con la permitividad y la conductividad.
En la figura 3 se muestra una celda cilndrica de longitud d [m] y un rea de seccin transversal A [m2] con electrodos circulares (tambin de rea A [m2]) colocados en ambos lados. Para entender el mecanismo por el cual una variable fisiolgica puede producir modificaciones en la impedancia biolgica oponindose al paso de una corriente elctrica I, dos componentes elctricos simples son considerados a partir del modelo de la figura 3: un resistor y un capacitor de placas paralelas. A partir de este modelo se puede elaborar el siguiente anlisis:
Figura 3. Modelo de celda ideal. (Geddes and Baker, 1990).
En el primer caso, la resistencia entre dos bordes del cilindro de longitud d [m] y rea de seccin transversal A [m2] est dada por:
R= dA []
Ec. 1.0
Donde , [ohm.cm] representa la resistividad del material del cual el cilindro est hecho. El inverso de es la conductividad . El conocimiento de o es objeto de investigacin en materiales biolgicos (especialmente en vivo). Cualquier cambio en la geometra del tejido tendr, como consecuencia, un cambio en la resistencia del mismo. En el segundo caso se considera un capacitor de placas paralelas de rea A, separados por una distancia d, con un material aislante en medio. Si el material es el vacio el valor de capacitancia es Co; si, en su lugar, algn otro aislante es colocado (como puede ser un tejido), C ser el valor de la capacitancia. La relacin K= C/Co define la llamada constante dielctrica del material aislante. Con una simple expresin matemtica obtenemos Co.
Co= 0 (Ad)
Donde
Ec. 1.1
0 = coulombs2/N.m2 es la permitividad del vaco. De esta definicin de constante
dielctrica y por el uso de la ecuacin 2, la siguiente es obtenida,
C=KCo=K0 Ad= (Ad)

Donde representa la permitividad del medio. Es fcil ver adems que:
Ec. 1.2
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K=0
Permitiendo a la constante dielctrica del medio ser llamada permitividad relativa.
Ec. 1.3
Por otra parte, ya que tanto la resistencia R como la capacitancia de placas paralelas C que se tiene entre los bordes del cilindro experimentan la misma diferencia de potencial, el modelo de la figura 3 se puede representar por medio de los dos componentes mencionados anteriormente (resistor y capacitor) conectados de manera paralela. En ese caso se puede obtener la admitancia Y de la siguiente manera:
Y=1R+1XC=1R+1-j2fC=j2fC+1R
Ec. 1.4 Donde:
R= (dA)
Por lo tanto:
C= (Ad)
Ec. 1.5
Y=1 dA+j2fAd=Ad+Adj2f Y=Ad+jw [S]

Donde: Adems:
Ec. 1.6 Ec. 1.7
=1/
Z=Y-1=kcell1+jw []
Donde kcell=dA es el llamado factor de celda.
Ec. 1.8
Si quisiramos separa la parte real de la parte reactiva de la impedancia en la ltima ecuacin obtendramos que:
Z=dA1+jw*-jw-jw= dA -jw2+w2=dA 2+w2-jw2+w2

Ec. 1.9 Por lo tanto, podemos observar que si una variable fisiolgica induce algn cambio en la permitividad o en la geometra del sistema en estudio, entonces, modificaciones tambin sern producidas en la impedancia compleja del sistema. Tomando en cuenta una corriente I aplicada al tejido y adems que:
I=VZ [Amp] E=Vd [Voltm]

La densidad de corriente ser:
Ec. 1.10 Ec. 1.11
J=IA [Ampm2]
Ec. 1.12
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Instituto Tecnolgico de Celaya Entonces la densidad de corriente total estar dada por:
J=VA* Z=+jwVd=+jwE [Ampm2]
Ec. 1.13
Y a partir de aqu podramos obtener una expresin para obtener el valor de impedancia por medio de la corriente inyectada en el tejido y el voltaje medido en el mismo:
VI=Z= kcell1+jw
Ec. 1.14
Aunque el anlisis anterior se deriv a partir de un modelo ideal para un medio homogneo e istropo, las definiciones o conclusiones derivadas a partir de las ecuaciones obtenidas son prcticamente vlidas para cualquier tejido biolgico que sea expuesto al paso de una corriente elctrica alterna. El factor de celda kcell relaciona la impedancia del medio con la geometra del mismo e inclusive con el rea de los electrodos. En la figura 3 el rea de los electrodos es igual al rea de las superficies laterales del tejido en estudio, algo que en la prctica es casi imposible de obtener ya que la mayora de los tejidos tiene formas geomtricas diversas, no uniformes y asimtricas.
1.4.
La espectroscopa de impedancia y su representacin grfica.
Las mediciones de impedancia elctrica se han utilizado para estudiar sistemas biolgicos desde fines del siglo pasado. La mayora de los estudios realizados incluyen mediciones de impedancia compleja de diferentes tejidos, soluciones o cultivos. Para ello y para el anlisis de los datos obtenidos, surgi un nuevo campo denominado espectroscopa de impedancia (EDI). La espectroscopa de impedancia (EDI) es la medicin de impedancia en varios valores de frecuencia y es utilizada cuando se requiere caracterizar fisiolgicamente un tejido de manera ms precisa. La EDI puede representarse de varias formas aunque las dos ms importantes de hacerlo son por medio de los diagramas de Bode y Cole-Cole los cuales son mostrados en la figura 4. El diagrama de Bode muestra los valores de magnitud y fase de la impedancia a diferentes frecuencias de manera logartmica. Por otro lado el diagrama de Cole representa la parte real y la parte imaginaria o reactiva de la impedancia.
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Instituto Tecnolgico de Celaya (a)
(b)
Figura 4. Diagramas de Bode (a) y Cole-Cole (b).
En base a la determinacin de los valores de impedancia en tejidos en ciertos puntos de frecuencia se puede llevar a cabo la caracterizacin del tejido. Los mtodos de medicin en este caso son tcnicas utilizadas para caracterizar la impedancia compleja de un material en un determinado rango de frecuencias. La espectroscopa de impedancia no se limita a mediciones de impedancia, se puede tambin medir admitancia compleja, constantes dielctricas, etc. Sin embargo, aunque las mediciones son en principio simples, en la prctica presentan complicaciones debido a muchas razones como son las variables de temperatura, densidad de corriente, la impedancia de interfase electrodo/tejido, el tipo de electrodo, el ruido y la fisiologa propia del tejido son factores relevantes. El rango de frecuencia de medicin puede extenderse desde los 100Hz hasta ms de GHz dependiendo del mtodo de medicin, y por otro lado, los valores de la impedancia pueden tambin abarcar varios rdenes de magnitud en el rango de frecuencias de inters debido a los componentes resistivos y capacitivos del material (Schwan, 1995). El anlisis e interpretacin de los datos obtenidos es necesario para la caracterizacin del material estudiado. La primera etapa consiste generalmente en un anlisis de los espectros de frecuencia de los datos obtenidos. El anlisis grfico lleva al experimentador a formarse una idea sobre la estructura fsica y los procesos que se presentan en el material (Rigaud, B. 1996). Existen otras formas visuales en que pueden presentarse los datos. Las grficas de impedancia contra frecuencia (espectro) que ya se han mencionado son frecuentemente tiles en los casos en donde el material medido es en general conductivo. En casos no-conductivos, los espectros de admitancia y de constante dielctrica son ms tiles. Por otro lado los diagramas de Kenneth Cole y Robert Cole (Grimnes and Martinsen, 2000; Rigaud, 1996) y sus modelos matemticos asociados plantean una
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Instituto Tecnolgico de Celaya expresin para determinar la permitividad compleja y la caracterizacin con circuitos elctricos equivalentes.
1.5.
Propiedades elctricas en los tejidos biolgicos.
Los tejidos biolgicos al igual que las soluciones estn formados por matrices extracelulares o bien por adhesin directa de una clula con otra. El principal componente de las clulas (vegetales o animales) es su membrana celular (figura 5), cuya estructura se basa en una bicapa lipdica en la cual se encuentran distribuidas las protenas, permitiendo la formacin de canales para un intercambio inico con el exterior (Pethig, 1987). Por sus componentes moleculares, la membrana celular acta como una interfase dielctrica y puede ser considerada como las dos placas de un capacitor.
Figura 5. Membrana celular.
Por lo tanto, cuando se aplica un campo elctrico constante, se efecta una movilidad de iones de Na+ del medio intracelular y del K+ del intracelular al extracelular, desequilibrio que es compensado por la bomba Na+ y K+. Sin embargo, cuando el campo es alterno, al aumentar la frecuencia, aparecen corrientes de desplazamiento (corriente no fardica) a travs de la pared celular, produciendo un fenmeno de relajacin. La reorientacin del dipolo de las molculas de agua por efecto de la corriente alterna, da como resultado un fenmeno de relajacin a nivel celular. Los portadores de cargas son principalmente iones y la fuente principal de dipolos son las molculas polares del agua en los tejidos (Rigaud, 1996). El comportamiento elctrico de los tejidos biolgicos revela una dependencia de los parmetros dielctricos con la frecuencia de la corriente de entrada al tejido, debido a los distintos fenmenos de relajacin que ocurren cuando la corriente pasa a travs del mismo (Foster y Schwan, 1996). Cuando la frecuencia de la corriente aplicada aumenta, la conductividad en la mayora de los tejidos se incrementa (involucrando un decremento en la impedancia) desde un valor bajo en corriente directa, que
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Instituto Tecnolgico de Celaya depende del volumen extracelular, hasta un nivel constante en el rango de frecuencia desde 10 a 100MHz. Este incremento en conductividad est asociado a un decremento de permitividad que se puede representar en tres relajaciones: , y , tal como se muestra en la figura 6. Cada uno de estos pasos caracteriza un tipo de relajacin que ocurre en un rango de frecuencia especfico y es caracterstico para cada tejido, (Foster y Schwan, 1996). Una curva similar puede trazarse para la impedancia.
La dispersin : Esta dispersin aparece a frecuencias relativamente bajas (1 KHz o menos). Depende de muchos factores fisiolgicos (como la concentracin de electrolitos en el tejido). Es la consecuencia de varios mecanismos. Se cree que los tres mecanismos siguientes son los ms significativos:
Mecanismo de compuerta: la membrana celular puede tener poros responsables del

intercambio inico entre el interior y el exterior que puedan ser moduladas por accin mecnica. Estructura de la membrana celular: la membrana puede estar constituida de al menos dos capas de molculas diferentes (como lpidos o protenas). Conductancia superficial debido a la atmsfera inica: Existe una atmsfera inica alrededor de las clulas la cual puede causar procesos de relajamiento. La dispersin es muy difcil de medir en los tejidos musculares. Ocurre a frecuencias muy bajas (tpicamente menores a 10 Hz) y el cambio en impedancia es menor a 1 o 2%.
Dispersin : La dispersin se presenta para frecuencias por encima de la regin de dispersin (mayor a 1 KHz). Este comportamiento de dispersin se debe a la estructura celular del tejido, y su constante dielctrica (mayor a frecuencias bajas) se debe a la membrana de la clula. Relativamente, esta dispersin es fcil de determinar para la mayora de los tejidos animales y vegetales. Tpicamente, su frecuencia central se encuentra dentro del rango de 10 KHz a 1000 KHz, y el cambio en la impedancia es del 40 al 60%.
Dispersin : La dispersin aparece a frecuencias muy altas (ms de 100 MHz). A estas frecuencias, las propiedades elctricas del tejido estn determinadas por su cantidad de agua y de electrolitos, as como de su contenido de protena. La conductancia del tejido se incrementa rpidamente a ms de 1 GHz y su constante dielctrica se decrementa a ms de 3 GHz Ambos efectos se deben al comportamiento del agua a altas frecuencias. Una correcta medicin de la impedancia in vivo a estas frecuencias es muy difcil de lograr.
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Figura 6. Representacin ideal de la permitividad y resistividad de tejidos biolgicos en funcin de la frecuencia. Las tres principales dispersiones , y , estn caracterizadas por una frecuencia de relajacin central, F y variaciones de permitividad.
Los tejidos se pueden modelar utilizando un circuito elctrico de dos terminales, cuya impedancia represente aproximadamente a la del tejido estudiado. Estos modelos elctricos denominados modelos de parmetros concentrados permiten una interpretacin fsica o fisiolgica de la bioimpedancia. Tales modelos (Rabbat, 1988), se crean de una clula inmersa en un medio inico (figura 7) donde se contempla la resistencia del medio intracelular (Ri) y del medio extracelular (Re), la capacidad de la membrana celular (Cmc) y su resistencia (Rmc).
Figura 7. Modelo que representa los mecanismos principales que determinan la impedancia de una suspensin celular.
Este circuito elctrico equivalente modela la cada en la impedancia elctrica por variacin de la frecuencia. Cuando sta es baja (por debajo de los 10 kHz), la impedancia del capacitor Cmc es alta,
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Instituto Tecnolgico de Celaya debido a la presencia de membranas, permitiendo que slo pase corriente por la resistencia Re. Si la frecuencia es alta (por encima de 1 MHz), el capacitor acta como un cortocircuito y la corriente fluye a travs de ambas resistencias (Re y Ri). Existen otras representaciones de modelos elctricos, como son los modelos que cumplen con la ecuacin de permitividad de Debye:
*=+ s-1-j
Ec. 1.15 Donde s y son la permitividad a alta y baja frecuencia respectivamente y es el tiempo de relajacin. La figura 8 muestra la representacin elctrica, donde R2 representa la resistencia a baja frecuencia mientras que la combinacin de R1 en paralelo con R2 representa la resistencia a alta frecuencia. Esta representacin es til para modelar tejidos con componentes comerciales cuando se requiere hacer pruebas de equipos de medida.
Figura 8. Circuitos elctricos que representan la ecuacin de Debye, con relajacin y =0.
Sin embargo, ya que los tejidos biolgicos son medios heterogneos que involucran diversas constantes de tiempo. La funcin ms utilizada para representar esta situacin es la denominada ecuacin de permitividad de Cole-Cole:
*=+ s-1+j(c)(1-)-js0
Ec. 1.16 Donde es un parmetro emprico caracterstico de la distribucin de la frecuencia de relajacin fc
(c=12fc), dando una idea del grado de dispersin de las constantes de tiempo asociadas con el
fenmeno de relajacin. De esta forma, se encuentra una expresin anloga para la impedancia.
Z()=R+ R0-R1+j(12fc)(1-)
Ec. 1.17 Su representacin en modelo elctrico y las ecuaciones caractersticas respectivas se pueden observar en la figura 9.
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A=R0;B=R0RR0-R; A=R;B=R=R0-R C=-j R02R0-Rfcf1- C=-jR(fcf)(1-)

Figura 9. Ecuaciones y circuitos elctricos de Cole-Cole para un solo arco.
En este sentido, si se representa la parte imaginaria de la impedancia elctrica de un sistema biolgico respecto a la parte real de dicha impedancia, a varias frecuencias (diagrama Cole-Cole), la figura resultante se aproxima a un semicrculo. Si la medida se realizara en una suspensin de clulas esfricas idnticas, la figura resultante sera un semicrculo perfecto. Estas figuras no slo se encuentran en la regin de la EIE que se utiliza en la tecnologa aqu presentada (500 Hz a 500 KHz), sino que tambin se pueden hallar en otros rangos de medida, como en el de los gigahercios (GHz) para la relajacin dipolar del agua (principio usado en los hornos microondas) o en el rango de los hercios (Hz) para la relajacin interfacial. La curva que corresponde a la relajacin o cada no es un semicrculo perfecto. Un modelo para esta curva que se asemeja a un semicrculo se puede expresar con la funcin de variable compleja presentada en la ecuacin 1.17, donde Z es la impedancia elctrica y se expresa como un nmero complejo, w la frecuencia angular de la corriente inyectada, R la resistencia a una terica frecuencia infinita (es decir, una frecuencia a la que la relajacin desaparece), R0 la resistencia a una terica frecuencia cero (una frecuencia a la que la relajacin empieza a tener lugar), fc la frecuencia caracterstica (frecuencia a la que la componente imaginaria de la impedancia elctrica alcanza el mximo). De esta forma se obtiene informacin sobre el tamao de la clula. Cuanta ms pequea es sta, mayor es la frecuencia caracterstica, por lo que la frecuencia caracterstica de una bacteria es mayor que la de una levadura. Finalmente, nos da informacin sobre la desviacin respecto a un semicrculo perfecto, de manera que esta informacin est directamente relacionada con la dispersin de tamaos del cultivo. Por tanto, R, R0, fc y son los cuatro parmetros que nos pueden dar informacin sobre la composicin de un cultivo celular: R0 corresponde al caso de baja frecuencia y, por tanto, es equivalente
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Instituto Tecnolgico de Celaya a Re (en el modelo de la figura 8), mientras que R, que corresponde al caso de alta frecuencia, es equivalente a Re en paralelo con Ri. La principal ventaja de usar este modelo es que se pueden obtener los valores tericos de los dos extremos planos del espectro de Cole. La informacin contenida en los parmetros fc y es muy importante para las aplicaciones en las que la poblacin de biomasa es variada. Como ya se ha indicado anteriormente, fc da informacin sobre el tipo de clulas y sobre la dispersin de tamaos de las clulas del cultivo. Tanto los modelos de Debye como el de Cole-Cole, lo podemos encontrar con una descripcin ms detallada en (Grimnes and Martinsen, 2000; Rigaud, 1996).
1.1.
Espectroscopa de impedancia en soluciones salinas.
Las medidas de bioimpedancia basadas en el modelo de Cole permiten determinar caractersticas de sistemas y tejidos biolgicos tales como la integridad de membrana y tamao celular por la valoracin de sus propiedades elctricas pasivas ( y ). Las mediciones de soluciones salinas han sido ampliamente utilizadas en las mediciones de impedancia por su gran parecido a las muestras de sangre, cultivos o lquidos en general como parte de la experimentacin y calibracin del instrumento. La EDI ha sido empleada exitosamente para deteccin de isquemia cardiaca, tejidos cancerosos, valoracin de composicin grasa corporal (J.R. Bourne, 1996), actividad bacteriana (Gersing E, 1991) entre otros. Recientemente se ha fortalecido la aplicacin de esta tcnica en la estimacin de biomasa por la obtencin de espectros de impedancia en cultivos celulares, a esta tcnica se le conoce como microbiologa de impedancia (MI), y permite monitorear, detectar, cuantificar y en ciertos casos identificar microorganismos (Casanella, 2005). El valor de impedancia presenta una componente real y una compleja que reflejan, en general el comportamiento de las propiedades elctricas pasivas de los cultivos; la parte real muestra el comportamiento resistivo del citoplasma celular y la parte compleja refleja el comportamiento capacitivo de la membrana celular esperando as valores altamente capacitivos para membranas celulares integras (Casanella, 2005). Por el modelo de Cole-Cole se obtienen adems parmetros que facilitan la caracterizacin de las muestras; Ro indica la resistencia de la muestra a una baja frecuencia, R es el valor de la resistencia a una terica frecuencia infinita (altas frecuencias), fc la frecuencia caracterstica es la frecuencia a la que la componente imaginaria de la impedancia elctrica alcanza el mximo. De esta forma se obtiene informacin sobre el tamao de la clula, cuanta ms pequea es sta, mayor es la frecuencia caracterstica. Finalmente si se representa la parte imaginaria de la impedancia elctrica de un muestra biolgica respecto a la parte real de dicha impedancia la figura resultante se aproxima a un semicrculo, as nos da informacin sobre la desviacin respecto a un semicrculo perfecto.
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CAPTULO 2 INSTRUMENTACIN PARA LA ESPECTROSCOPA DE BIOIMPEDANCIA.
2.1.
Electrodos de medicin.
La instrumentacin utilizada en las medidas de bioimpedancia es de suma importancia ya que de ella dependen varias cuestiones como el rango de frecuencia de trabajo, la precisin del instrumento, el costo
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Instituto Tecnolgico de Celaya y los alcances del mismo. Cabe mencionar que la instrumentacin est sujeta de manera muy particular a la aplicacin de la investigacin. Bsicamente se pueden contemplar cuatro partes principales en la instrumentacin: El sistema de electrodos. La fuente de excitacin. El mtodo de medicin. La tcnica de medicin
Probablemente, la cuestin ms crtica concerniente a la medicin de bioimpedancia es la conexin elctrica entre la instrumentacin y el tejido en estudio. Tal enlace se lleva a cabo con el uso de los electrodos. En esta parte se presenta un resumen de los aspectos tericos consultados en diferentes artculos.
2.1.1.
Impedancia de electrodo.
Un elemento indispensable para realizar las medidas de bioimpedancia son los electrodos. Estos constituyen el transductor entre la corriente electrnica en el sistema de medida y la corriente inica del tejido biolgico. La espectroscopa de impedancia consiste en la caracterizacin de un material biolgico en trminos de su impedancia elctrica medida en un amplio rango de frecuencia. Una forma de medir esta impedancia es inyectando una corriente constante a travs de dos electrodos y midiendo la diferencia de potencial resultante con los mismos electrodos o utilizando en par extra. De cualquier manera el uso de electrodos en la EDI es siempre necesario para hacer contacto elctrico con el material biolgico en estudio. Si dos electrodos son colocados sobre un material biolgico (o solucin) una interfase electrodo-electrolito se presenta (Figura 10). El electrolito puede ser una pasta o una solucin electroltica deliberadamente introducida (usada generalmente en electrodos superficiales) o quiz un fluido propio del tejido cuando los electrodos son insertados directamente en l. Cualquiera que sea el caso, existe una tendencia por parte de los electrones del metal (electrodo) a migrar dentro de la solucin, as mismo los iones del electrolito (tejido o solucin acuosa) tienden a combinarse con el metal. Esto resulta en una distribucin de carga en la vecindad inmediata del electrodo (Mc Adams, 1987). La distribucin espacial se torna compleja y depende particularmente de las reacciones que ocurren para una determinada combinacin electrodo-electrolito.
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Figura 10. Interfase electrodo-electrolito.
La distribucin de carga se manifiesta como un potencial elctrico entre el tejido y la solucin. El potencial debido a la impedancia de polarizacin depende del tipo de combinacin metal-electrolito, de la densidad de corriente y del material de los electrodos (Yeager and Salkind, 1998). La impedancia de la interfase electrodo-tejido es ms grande a bajas frecuencias y va disminuyendo conforme al aumento en frecuencia de la corriente inducida. Por otro lado el efecto de la geometra de los electrodos es importante en todas las frecuencias. La resistencia elctrica de los electrodos puede ser analticamente calculada asumiendo que el electrodo es un conductor hemisfrico perfecto sin efectos de interface y est colocado sobre un medio homogneo semi-infinito de conductividad . Asumiendo que una corriente I entra al electrodo de radio r. la densidad de corriente J desarrollada en el electrodo donde la corriente entra y a una distancia radial R del electrodo est dada por:
J= *E= I2r2ar
Ec. 2.0
Donde ar es el vector unitario en coordenadas esfricas en la direccin radial, adems de r y R que son el alcance del potencial a una distancia mnima y mxima respectivamente.
Figura 11. Representacin de las lneas equipotenciales desarrolladas en el electrodo.
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Instituto Tecnolgico de Celaya La ecuacin 2.1 puede ser usada para determinar la diferencia de potencial surgida de la corriente inyectada I en el electrodo.
V= I2* RrdRr2
Ec. 2.1
Suponiendo que el potencial en el infinito es cero, entonces el potencial a cualquier radio R puede ser obtenido como sigue:
V= I*2*r
Donde es la resistividad del medio en estudio.
Ec. 2.2
Como resultado, la impedancia del electrodo Ze puede ser calculada considerando el electrodo como un hemisferio pequeo de radio (b/2)12 como se muestra en la ecuacin 2.3:
Ze= 2*b
Donde b es el rea del electrodo.
Ec. 2.3
Por lo tanto el rea de los electrodos debera ser lo ms grande posible para minimizar la impedancia del electrodo. Sin embargo, tal requisicin en la mayora de las veces no es viable debido a las consideraciones importantes de las aplicaciones. Por ejemplo en el caso de aplicaciones mdicas cuando se utilizan electrodos de tipo invasivos. Es por esto que se han desarrollado algunas tcnicas (que se vern ms adelante) para disminuir la impedancia de electrodos.
2.1.2.
Potenciales de offset.
El potencial desarrollado cuando un metal est en contacto con un electrolito est en funcin del metal, del electrolito, de la temperatura y en general de las condiciones ambientales. El offset se refiere a un potencial de media celda ya que claramente no es posible medir el potencial de un solo electrodo. Potenciales de media celda para electrodos de materiales comnmente usados (oro, plata, cobre, acero inoxidable, etc.) estn resumidos por Geddes en un rango de -1.662 volts para el aluminio a +1.691 volts para el oro. Para dos electrodos de igual material a la misma temperatura en contacto con el mismo electrolito y con respecto al mismo electrodo estndar, los potenciales de offset deberan ser idnticos y de signo opuesto, de esta manera resultara en un potencial de cero medido entre los dos electrodos. Sin embargo, la mayora de las veces, las condiciones no son idnticas debido a las irregularidades en la superficie (del electrodo), posiblemente a contaminantes en el electrolito y en general a factores ambientales; diferencias de potenciales en el rango de los microvolts a cientos de milivolts pueden estar presentes dependiendo del tipo de material e interfase (Geddes, 1989). Los potenciales de offset no son estables y podran ser importantes sobre todo con electrodos que se utilizan por primera vez. De hecho, inestabilidades en el potencial de offset resultan en cambios
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Instituto Tecnolgico de Celaya transitorios los cuales se manifiestan como ruido (noise o popping) de electrodos que se reflejan en las mediciones de impedancia. Por otra parte, existen mtodos para tratar este fenmeno, uno de los ms efectivos es poner una capa de material electroltico sobre los electrodos (generalmente en electrodos superficiales). Con este mtodo, pueden ser fabricados electrodos con potenciales de offset muy pequeos y ms estables, otra alternativa radica en la circuitera del instrumento (Amplificadores de instrumentacin con valores grandes de rechazo de ruido) para eliminar el ruido producido por los potenciales de offset.
2.1.3. La interfase electrodo-tejido.

Si una corriente alterna pasa a travs de la interface, la distribucin de carga es alterada y el potencial de offset es modulado. Una transferencia de carga entre iones metlicos y electrolticos toma lugar por medio de reacciones qumicas, tal discontinuidad se resuelve mediante un mecanismo de conduccin, la corriente de desplazamiento en los electrodos y reacciones de oxidacin-reduccin en los electrodos no polarizables (Fricke H, 1932). Esta transferencia de electrones se lleva a cabo en una zona de transicin llamada comnmente doble capa elctrica; el potencial resultante del cambio de distribucin de carga se manifiesta como una resistencia y una reactancia capacitiva. Las reacciones electroqumicas resultantes requieren un tiempo finito resultando en una impedancia de polarizacin dependiente de la frecuencia (Geddes, 1989). Una de las primeras investigaciones acerca de la interface electrodo-electrolito fue llevada a cabo por Warburg quien desarrollo un modelo a base de una resistencia en serie con una capacitancia.
Figura 12. Modelo de Warburg para la impedancia de polarizacin.
Dnde:
R=R0f-12
C=C0f-12
Ec. 2.4
Segn Warburg, tanto la resistencia como la capacitancia varan inversamente con la raz cuadrada de la frecuencia. Adems R0 y C0 dependen del material del electrodo, de la concentracin de electrolito y de la temperatura.
Sin embargo, ms tarde en 1932 Fricke formul ecuaciones ms complejas en las cuales la capacitancia y la resistencia de polarizacin (C y R) varan con f-m y con fm-1 respectivamente donde m depende
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Instituto Tecnolgico de Celaya del tipo de interface. Un estudio experimental llevado a cabo por Geddes revel valores de m entre 0.11 y 0.623. La interfase electrodo-electrolito (recordar que electrolito es una forma genrica para referirse a una solucin) presenta una impedancia debido al flujo neto de electrolitos. McAdams (McAdams 1987) concluy que la no linealidad del sistema de electrodos est relacionada con la dispersin en frecuencia de la impedancia de interfase electrodo-electrolito como resultado de diferentes propiedades fsicas en la superficie del electrodo. Un modelo elctrico fue usado por McAdams para representar las propiedades elctricas de la interfase electrodo-electrolito. Segn la impedancia de interfase electrodo-electrolito est dada por:
Z=R+ R0- R1+ j wwc1-

Ec. 2.5 Donde wc es la frecuencia caracterstica angular, R0 es la resistencia en DC y R es la resistencia en alta frecuencia (en el infinito). Es interesante ver que la ecuacin de McAdams tiene la misma forma que la ecuacin de Cole (Cole 1941). La impedancia de polarizacin es importante a bajas frecuencias pero lo es menos cuando se consideran altas frecuencias.
2.1.4.
Electrodos invasivos y no invasivos.
Las medidas no invasivas se caracterizan por utilizar electrodos que estn en contacto con el tejido de forma superficial (Figura 13a). La configuracin de electrodos ms comunes estn basadas en electrodos metlicos (metales nobles) o electrodos de gel electroltico (electrodos ECG). Estos electrodos son ajustados a la superficie de la muestra o tejido en estudio de tal manera que sean maximizados los cambios de impedancia medidos debido a los eventos fisiolgicos que necesitan ser monitoreados. Por otro lado los electrodos invasivos (Figura 13b) hacen una incisin en el tejido en estudio cuando se quiere llegar a cierta seccin primordial que la aplicacin del estudio lo requiera. La geometra de este tipo de electrodos es importante porque la incisin que se haga puede daar el tejido o alterar fisiolgicamente el mismo y consecuentemente errar en los valores de medida.
pg. 33
Instituto Tecnolgico de Celaya (a) (b)
Figura 13. Imagen de electrodos no invasivos (a) e invasivos (b.
2.1.1.
Materiales para la elaboracin de los electrodos.
Existen principalmente, tres materiales usados para la elaboracin de los electrodos: 1) platino. 2) acero inoxidable. 3) plata. Los tres materiales comparten la propiedad de ser grandes conductores, sin embargo se ha demostrado que la plata y el platino son capaces de reducir ms la impedancia de interfase. Cabe mencionar que el platino es ampliamente usado en mediciones de bioimpedancia aplicadas en el rea de medicina y relacionadas con el cuerpo humano o animal debido a su buena biocompatibilidad comparada con otros materiales an, como la plata o el acero inoxidable. Sin embargo, una desventaja en el uso del platino como material de manufactura para los electrodos es su elevado costo.
Tabla 1. Coeficientes de conductividad de los principales metales conductores.
Metal Oro Plata Cobre Platino Acero inoxidable Aluminio
Conductividad 45.5 106 S/m 63.01 106 S/m 59.6 106 S/m 9.66 106 S/m 3.01 106 S/m 37.8 106 S/m
Fuente: Consuelo Jimnez. Qumica y Fsica para Ingenieros Qumicos. Pg. 119.
Por otro lado, adems de la conductividad de los materiales, la biocompatibilidad es ms utilizados en experimentaciones humanas o animales.
de suma
importancia a la hora de la eleccin del material de los electrodos, el acero inoxidable y platino son los
Adems del material utilizado para la fabricacin de los electrodos, existen los procesos de acabado de los mismos:
La platinizacin es el proceso de aadir una capa de platino negro sobre los electrodos de material de platino. En el caso de electrodos de acero o cobre se puede recurrir a un proceso de lijado fino. Por otro lado los electrodos de plata son baados con una solucin de cloruro de plata.
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Instituto Tecnolgico de Celaya Los procesos mencionados tienen el objetivo comn de disminuir la impedancia de interfase electrodotejido y el ruido generado en la misma.
2.1.1.
Geometra de los electrodos.
En la literatura, la formulacin de ecuaciones o hiptesis que relacionan la geometra de los electrodos con respecto a la impedancia de interfase (o impedancia de polarizacin) y a la impedancia en conjuncin con la geometra del tejido en estudio estn basadas en aproximaciones hechas a partir de un sistema o modelo ideal (celda electroltica). Adems de la dependencia geomtrica, segn Steendijk (Steendijk and Van Der Velde, 1993) en la prctica se ha demostrado que el factor de celda Kcell depende de la frecuencia, estrictamente hablando, Kcell es un nmero complejo y la importancia del rea radica en dos puntos principales:
A mayor rea de electrodo: disminuye la impedancia de interfase. A menor rea de electrodo: menos ruido y mejor la respuesta en alta frecuencia.
Esta seccin analiza la contribucin de la geometra del arreglo de electrodos a la realizacin de la prueba de impedancia. El principal objetivo es mostrar las consecuencias de la eleccin de la distancia de separacin entre los electrodos. El anlisis es llevado a cabo considerando un arreglo de cuatro electrodos montados sobre una superficie aislante.
La relacin entre el voltaje (V), la corriente inyectada (I), la resistividad de la muestra () y la distancia de separacin entre los electrodos (r) est dada por:
V=krI
Ec. 2.6
Donde k=(4)-1 en el caso de que el medio sea infinito y (2)-1 en el caso de que el medio sea semiinfinito, esto es, el arreglo de electrodos es aplicado sobre la superficie del medio el cual est limitado por otro medio de resistencia infinita como el aire. Por otro lado r representa la distancia entre los electrodos. La ecuacin anterior es vlida en el caso de que la distancia ente los electrodos sea constante, como se muestra en la figura 14 (a).
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(a)
(b)
Figura 14. Modelo de un sistema de cuatro electrodos con distancia de separacin (a) constante entre los electrodos y (b) no constante.
En el caso en que la distancia de separacin entre los electrodos no sea constante (figura 14b), entonces la primera ecuacin queda de la siguiente forma.
V=k2ba(a+b)
Ec. 2.7
En este caso se considera que la distancia entre los electrodos internos es b, la longitud total del arreglo es 2a+b y adems a<b. Esto implica que cuando la distancia entre los electrodos internos y externos, a, es reducida mientras la longitud total del arreglo permanezca constante, la diferencia de voltaje ser incrementada y el radio seal a ruido ser aumentado. Por lo tanto, reducir la distancia entre los electrodos internos y externos mejorar la diferencia de voltaje medible.
2.1.1. Factores de seleccin para los electrodos.

Existen algunas caractersticas ideales que deben cubrir los electrodos para que se consideren eficientes: Buena conductividad elctrica. Baja impedancia de polarizacin: se busca que las variaciones en las propiedades de la interfase sean lineales. El material de los electrodos depende tanto de la aplicacin, como de los recursos con que se cuenten para su manufactura. Facilidad de fabricacin: esto influye directamente en el precio final del electrodo y es un motivo importante a la hora de la eleccin. Biocompatibles.
pg. 36
2.1.
Sistemas de electrodos.
La impedancia biolgica (bioimpedancia) ofrecida por el sistema en estudio representa la primera parte del sistema de medicin (compleja, no conocida y esencialmente imposible de controlar) de la cual es obtenida una seal para ser interpretada fisiolgica o clnicamente a travs de sus propiedades elctricas de permitividad y conductividad. Para monitorear tal seal los electrodos son utilizados, estos introducen una impedancia de interfase (segunda parte) de la cual solo se tiene cierto control; la tercer y ltima parte es la seccin electrnica la cual es casi completamente controlable para procesar la seal. Dentro de la seccin electrnica se ubican los sistemas de medicin. El radio del potencial resultante entre dos electrodos en contacto con el tejido y la corriente inyectada entre otros dos electrodos es llamado transferencia de impedancia. Todas las formas para medir transferencia de impedancia usan electrodos, los cuales inyectan una corriente constante (en diferentes frecuencias) dentro del tejido. Bsicamente, la espectroscopa de impedancia en los tejidos envuelve la inyeccin de una corriente constante dentro del tejido a diferentes frecuencias y los voltajes resultantes. El voltaje resultante puede ser medido usando los mismos dos electrodos que fueron utilizados para la inyeccin de la corriente (sistema de dos electrodos), sin embargo, la mayora de las mediciones se llevan a cabo con el sistema tetrapolar (de cuatro electrodos). Ambas tcnicas se describen en esta seccin. Bsicamente existen tres sistemas de medicin de bioimpedancia:
Sistema de dos electrodos. Sistema de tres electrodos. Sistema de cuatro electrodos.
2.1.1.
Sistema de dos electrodos (sistema dipolar).
En el sistema de dos electrodos (figura 15) se inyecta una corriente conocida dentro del tejido en estudio por medio de dos electrodos y se mide un voltaje usando los mismos dos electrodos. Este sistema tiene la desventaja de aadir una impedancia de polarizacin al sistema que aumenta sobre todo a bajas frecuencia, por otro lado tiene la ventaja de que si se conoce la impedancia del tejido en estudio y esta es mucho menor que la impedancia de interfase, entonces, se puede usar reduciendo costos ya que es el mtodo ms econmico. Sin embargo, si no se tiene conocimiento o referencia alguna sobre la impedancia del tejido en estudio, no sera adecuado usarlo ya que la posibilidad de que las mediciones resultaran ser errneas se incrementara en gran medida. La impedancia de entrada del medidor (puede ser un Amplificador operacional) y las capacitancias parasitas tambin degradan el rendimiento particularmente a altas frecuencias. Sin embargo, en algunos casos usando circuitera externa y con informacin acerca del tejido la medicin puede ser compensada. Aunque tiene algunas aplicaciones en piel y dientes, en la actualidad su uso es raro y cuestionable (Geddes, 1989).
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Figura 15. Sistema de 2 electrodos.
V0=I0[Zx+Zc1+Zc2] V0I0=Zmedida=[Zx+Zc1+Zc2]
Ec. 2.8 Ec. 2.9
En la ecuacin anterior se puede observar como las impedancias de interfase Zc1 y Zc2 influyen sobre la medicin de bioimpedancia Zmedida.
2.1.2.
Sistema de cuatro electrodos.
Este sistema (figura 16) usa un par de electrodos para inyectar una corriente dentro de la muestra y otro par de electrodos para medir el voltaje resultante. Ya que la corriente no fluye a travs del medidor de voltaje (Zin ), la corriente inyectada fluye en su mayora a travs del tejido y el voltaje en la muestra es el mismo que el medidor percibe. Sin embargo, la realidad es que la impedancia de interfase electrodo electrolito si tiene influencia en la medicin, particularmente a bajas frecuencias. La razn es que la impedancia del electrodo causa voltajes comunes que no pueden ser completamente rechazados por el amplificador diferencial del medidor de voltaje. Adems de esto, la impedancia interna del electrodo y las impedancias parsitas del medidor del voltaje causan un decremento en el CMRR. A altas frecuencias, la influencia de capacitancias parasitas tambin se manifiesta. A pesar de esto es el mtodo ms utilizado cuando no se tiene referencia o conocimiento alguno sobre valores de impedancia sobre el tejido en estudio.
pg. 38
Figura 16. Sistema de cuatro electrodos.
V0=I0Zx+Ze2+Ze3
Ec. 2.10
Dnde: Ze2 y Ze3=0 ya que tericamente las corrientes que pasan por las interfaces Ze2 y Ze3 son nulas debido a la alta impedancia del circuito medidor (Amplificador Operacional).
V0I0=Zmedida=Zx
Ec. 2.11
2.1.3.
El sistema de tres electrodos.
Si el rea del electrodo 4 de la figura 16 es suficientemente grande, su impedancia de interfase puede ser reducida para ser innecesario el electrodo 3 (el medidor de voltaje es conectado a los electrodos dos y cuatro) y de esta forma se simplifican las mediciones.
Figura 17. Sistema de tres electrodos.
Sin embargo este sistema de tres electrodos (figura 17) comparte las desventajas del sistema de dos electrodos. A altas y bajas frecuencias.
2.2.
Mtodos de medicin.
Existen varios mtodos de medicin de impedancia, los dos ms utilizados y sus caractersticas principales se presentan a continuacin:
pg. 39
1.
Mtodo de medida I-V (figura 18).
Se aplica una tensin o una corriente I a la impedancia desconocida Zx y se mide la corriente o la tensin tanto en R (valor conocido) como en Zx (impedancia desconocida). Es el mtodo ms habitual. Margen de medida de DC a 110 MHz
Figura 18. Mtodo de medida I-V.
1.
Mtodo de puente balanceado (figura 19).
Se aplica una tensin V a la impedancia desconocida Zx. Variar la salida del conversor I-V para que en L haya 0 voltios. Mtodo habitual en equipos de investigacin de materiales. Margen de medida de 20 Hz a 110 MHz
Figura 19. Mtodo de puente balanceado.
La tabla 2 muestra las caractersticas ms importantes de los mtodos de medicin de impedancia.
pg. 40
Tabla 2. Caractersticas de los principales mtodos de medicin.
Mtodo Medida de IV Puente balanceado Anlisis de redes.

Ventajas
Gran margen de Z. Gran exactitud. Costo medio. Gran margen de Z Gran precisin en todo el margen de f.
Desventajas
Perdida de exactitud a alta frecuencia. Medida referida a tierra. Grandes mrgenes de frecuencia no disponibles. Coste alto Necesario recalibrar para cada f de medida. Margen pequeo de Z.
Margen frecuencial DC a 110 MHz 20 Hz a 110 MHz 300 KHz a 40 GHz
Gran margen
frecuencial. Buena precisin.
Costo muy elevado. Fuente: Grimnes, S. and Martinsen, O.G. (2000), Bioimpedance and Bioelectricity Basics, 2da Ed.
2.1.
Amplificador de instrumentacin.
La impedancia de entrada del sistema de medicin de voltaje debe ser varios rdenes de magnitud mayor que la impedancia del tejido medido y que aquella de la interfase electrodo-tejido. As, toda la corriente inyectada pasa a travs del tejido, solamente una proporcin despreciable debe pasar a travs de los electrodos interiores para no cambiar la distribucin de corriente. Adems debe de rechazarse lo mayor posible el ruido generado. Es por esta razn que prcticamente el 90% de los mtodos que se utilizan para la medicin de bioimpedancia utilizan amplificadores de instrumentacin. Como la seal a captar tiene una amplitud comprendida entre los 10V y los 100 V se debe tener cuidado con las especificaciones de los medidores que se usarn en la medicin del voltaje generado en la muestra. De manera general, los amplificadores de instrumentacin (figura 21) deben cumplir con algunas caractersticas principales: Seales pequeas detectables a la entrada. Alta impedancia de entrada. Ganancia estable. Baja impedancia de salida. Alto factor de rechazo al modo comn (CMRR). Muy bajo nivel de ruido de entrada.
pg. 41
Figura 21. Ejemplo de un amplificador de instrumentacin.
Estos amplificadores son diseados para reducir las interferencias las cuales son seales elctricas que tienen un origen externo al sistema o circuito, pero que estn presentes a la salida. Estas pueden ser de tipo resistivo, capacitivo o inductivo.
2.1.
La fuente de excitacin en la espectroscopa de impedancia.
Uno de las caractersticas ms importantes en un sistema de medicin de impedancia es la precisin de la fuente de excitacin, la cual debera tener una corriente constante de salida sobre un amplio rango de frecuencias y cargas. Primeramente una seal de voltaje es generada para despus ser convertida en corriente. La mayora de los sistemas usan una onda senoidal para estimular el tejido. Existen tres formas principales para medir impedancia en tejidos sobre un amplio rango de frecuencias: 1) cambiando la frecuencia de la corriente y midiendo el voltaje generado (Griffiths 1987), aplicando una corriente con una seal que contenga mltiples ondas senoidales sumadas (Lozano, 1990), aplicando un pulso el cual contiene una amplia energa espectral (Waterworth, 2000). Los sistemas de medicin de impedancia pueden inyectar corriente al tejido mediante una fuente de voltaje o de corriente. En nuestro sistema utilizaremos la generacin de una fuente de corriente senoidal a partir de un voltaje senoidal utilizando un circuito FCCV conveniente para los tejidos biolgicos por las siguientes razones: ya que una fuente de voltaje no es
La corriente de excitacin depende de la impedancia del tejido y no es fcil de controlarla si se utiliza una fuente de voltaje (la magnitud de corriente variara con el cambio de impedancia). La densidad de corriente de excitacin debe estar en un rango especfico generalmente menor a 1 mA/cm2 para mantener la impedancia del tejido en un rango real. Una densidad de corriente alta puede inducir potenciales de accin en las clulas del tejido los cuales pueden causar contracciones e interferir con la medicin de la impedancia.
La corriente de excitacin inyectada se distribuye en el tejido siguiendo la ley de Ohm y forma superficies equipotenciales (figura 22). Cada electrodo se encuentra a un potencial dado, lo cual depende de la
pg. 42
Instituto Tecnolgico de Celaya posicin de los electrodos, la distribucin corriente a travs del tejido y las caractersticas elctricas y geomtricas de ste. Los dos electrodos interiores miden el voltaje a travs del tejido entre las dos superficies equipotenciales correspondientes. La impedancia medida es igual al voltaje entre los dos electrodos interiores dividido entre la corriente inyectada. La impedancia del tejido definida de esta forma corresponde a un volumen tridimensional del tejido con lmites definidos por las superficies equipotenciales correspondientes al rea sombrada en la figura siguiente:
Figura 22. Sistema de cuatro electrodos. La corriente se distribuye de forma heterognea y forma superficies equipotenciales. La impedancia del tejido est representada por el rea sombreada.
CAPTULO 3 DESARROLLO Y EXPERIMENTACIN. pg. 43
3.1.
Simulacin en FEMLAB.
El estudio abarca la parte de la relajacin y parte de la relajacin (1 KHz a 500 KHz) y est ligada estrechamente a las propiedades de la membrana celular y a la forma de agrupacin de las mismas para formar los distintos enlaces qumicos presentes en soluciones acuosas y tejidos biolgicos. El desarrollo de las actividades realizadas puede dividirse en 5 puntos principales: Simulacin en FEMLAB. Diseo y construccin del sistema de electrodos. Diseo y construccin del sistema electrnico para la medicin de la impedancia compleja. Experimentacin y validacin del sistema sin acoplamiento de electrodos. Experimentacin y validacin del sistema sin acoplamiento de electrodos utilizando soluciones salinas. La distribucin de campo elctrico del sistema de electrodos fue simulado usando un mdulo electromagntico del software FEMLAB versin 3.0a, el cual est basado en las ecuaciones de Maxwell para una hiptesis quasic-esttica. Se gener una forma ovalada con medidas parecidas a las dimensiones medias de un fruto promedio y un sistema de electrodos con las mediciones propuestas en contacto con la solucin. Las figuras se generaron conteniendo 11345 elementos tetraedros y 1134 elementos fronteras utilizando el mtodo de elementos finitos. Para llevar a cabo tal simulacin se coloc el sistema de cuatro electrodos en la posicin en la que se muestra en las figuras 23 y 24. Los electrodos fueron simulados con material de cobre mientras que la solucin a medir se simul con agua. La tabla 3 muestra los valores de los coeficientes o parmetros
pg. 44
Instituto Tecnolgico de Celaya demandados por FEMLAB para llevar a cabo la simulacin. Por ltimo la densidad de corriente introducida por los electrodos fue de 1.45 mA/mm2.
Tabla. 3 Coeficientes para el agua utilizados para la simulacin en FEMLAB. Modulo de Young. Radio de Poisson. Densidad. Coeficiente de expansin trmica. Capacidad calorfica. Conductividad trmica Coeficiente de difusin. Conductividad. ndice refractivo. Permitividad relativa. Permeabilidad relativa Qumicos. Pg. 221. ------------------------------------------------------------1000 Kg/m3 21C-1 (volumtrico) 1000 Kcal/m C 0.58 Wm-1K-1 ------------------------------0,005 (S/m) 1.333 nm 80 (a 20 C) 1
Fuente: Consuelo Jimnez. Qumica y Fsica para Ingenieros
La siguiente figura muestra la dispersin de las lneas del campo elctrico producidos en el lquido.
pg. 45
Figura 23. Lneas de campo elctrico del sistema simulado.
La figura 24 muestra el potencial elctrico producido en el sistema utilizando el diseo de electrodos propuesto.
Figura 24. Valores de potencial elctrico producidos en el sistema simulado.
El objetivo de la simulacin es comprobar que tanto el campo como el potencial elctrico se difunden por la simulacin de manera uniforme utilizando la geometra de los electrodos propuesta. Este hecho se puede comprobar observando las figuras 23 y 24 de las cueles se puede deducir que las lneas de campo elctrico se presentan de manera casi uniforme a lo largo de todo el espacio (simulado con H2O)
pg. 46
Instituto Tecnolgico de Celaya y que por otro lado, en la mayora de las regiones de la solucin se presenta un valor muy cercano de potencial elctrico a los 21 mV. Cabe mencionar que estos resultados fueron obtenidos en funcin de los parmetros simulados y que no representan al sistema real, sin embargo, es una aproximacin del comportamiento general del mismo.
3.1.
Diseo y construccin del sistema de electrodos.
Las medidas con electrodos no invasivos se caracterizan por utilizar electrodos que estn en contacto con el tejido de forma superficial. Para este proyecto se decidi disear un prototipo de un sistema de electrodos tipo invasivo teniendo en mente la investigacin de futuras mediciones de impedancia en frutos. En este sentido, la forma de medicin con electrodos no invasivos no es viable por varios factores:
La cscara del fruto incrementara la impedancia de interfase electrodo-tejido. Resultara complicado posicionar los electrodos sobre la superficie de la muestra de manera que se maximice la impedancia.
Una investigacin en frutos est enfocada al anlisis de la cantidad de slidos solubles (azcares) y niveles de hidratacin, caractersticas propias de la estructura qumica interna del fruto (medio extracelular e intracelular) y no de la cscara y secciones internas cercanas a ella.
El volumen de medicin efectivo estara mayormente limitado a la superficie del tejido y, por lo tanto, las propiedades elctricas internas no podran ser sensadas.
Por lo anterior se decidi trabajar con electrodos del tipo invasivos, este mtodo se efecta por medio de incisiones en el tejido en estudio (en nuestro caso soluciones salinas) con el objetivo de llegar al sitio de inters. Por otro lado, en lo que respecta a las medidas con electrodos invasivos, debido a las diferentes aplicaciones biolgicas y principalmente mdicas, se pretende siempre que la geometra de los mismos sea lo ms pequea posible, viendo a estos solo como dos puntos en el espacio capaces de utilizarse como medios para inyectar una corriente elctrica y/o (depende del mtodo de medicin) obtener mediciones de voltaje entre dos de ellos. Si bien es cierto, el rea de los electrodos tiene influencia importante en la densidad de corriente y en la reduccin de la impedancia de interfase, existen alternativas capaces de mejorar estos factores manteniendo al margen el tamao de los electrodos. A continuacin en las figuras 25 y 26 se muestran dos imgenes del diseo de electrodos utilizado para las medias de bioimpedancia. Como se puede observar el arreglo es un sistema de cuatro electrodos
pg. 47
con el fin de aminorar la suma de la impedancia de interfase, que se presentan en el sistema de dos
electrodos, con la impedancia del tejido.
Figura 25. Diseo del sistema de electrodos.
Se decidi utilizar por disposicin electrodos de cobre ya que adems cumplen relativamente con las caractersticas de escogencia mencionadas anteriormente. En lo que respecta al diseo geomtrico, los cuatro electrodos se encuentran montados en una placa de material aislante con forma trapezoidal, como se muestra en la figura 26. Las distancias entre los electrodos se tomaron de la simulacin en FEMLAB, con estas distancias se present una mejor y mayor distribucin de las lneas de campo elctrico en lo largo de la muestra de medicin.
Figura 26. Vista 3D del diseo del sistema de electrodos.
3.1.
Diseo y construccin del sistema electrnico para la medicin de la impedancia compleja.
pg. 48
Instituto Tecnolgico de Celaya En esta seccin se lleva a cabo una descripcin de la instrumentacin usada para la medicin de bioimpedancia de soluciones salinas. La instrumentacin que se presenta est referida al diseo de la fuente de corriente utilizada para estimulacin de tejido, el mtodo de medida y la tcnica (basada en el AD8302) empleados, as como la instrumentacin de control basada en el PIC18F452 (PIC18f452 data sheet 2003), el generador de onda AD9833 (AD9833 data sheet 2003) y la fuente de corriente.
3.1.1. La fuente de corriente.

La mayora de las tcnicas de medicin de impedancia utilizan una fuente de corriente controlada por voltaje (FCCV) el cual convierte un voltaje senoidal Vs en una corriente IL cuya magnitud no est afectada por la impedancia de la carga RL. La figura 27 muestra un modelo simple de una fuente de corriente. Un anlisis del circuito de la figura 27 muestra que el voltaje VA en el nodo A es igual al voltaje de carga VL y que IS = IZ + IL. La corriente de carga IL est dada por la ecuacin 28 y es idealmente igual a IS cuando se asume que ZS >> ZL. En la prctica las capacitancias parsitas atenan el valor de la magnitud de ZS a altas frecuencias. Por lo tanto la corriente IL decrece con el incremento en la frecuencia.
Figura 27. Modelo ideal de una fuente de corriente. Donde IS es la corriente de salida de la fuente de corriente controlada por VZ, ZS es la impedancia de salida de la fuente de corriente y ZL es la carga.
IL= 11+ZLZS* IS
Ec. 3.0
Un buen funcionamiento de la fuente de corriente es imprescindible y muy importante en el diseo de sistemas dedicados a la EDB (Denyer, 1994), (Blad, 1994). En la prctica es muy complicado disear una fuente de corriente precisa para cargas grandes y/o frecuencias altas (Lu, 1995). La forma ms simple de implementar un FCCV para medidas de bioimpedancia es usar una fuente de corriente con retroalimentacin negativa aislada donde el tejido est aislado de la circuitera por un transformador. Esta fuente trabaja bien a una sola frecuencia pero es limitada a bajas frecuencias por el funcionamiento del transformador. La mayora de los diseos de FCCV que trabajan en un amplio rango de frecuencias son de dos categoras: uno es el circuito Howland modificado (MMH por sus siglas en ingles) que usa retroalimentacin positiva (Cusick, 1994); y el otro usa la arquitectura de espejo de
pg. 49
Instituto Tecnolgico de Celaya corriente de Bragos (FCB) (Bragos, 1994). Ambos FFCV presentan finalmente resultados muy parecidos en cuanto a la precisin de la corriente de salida en funcin con la carga y la frecuencia, sin embargo el circuito Howland es ms sencillo y ms prestable para diseos de sistemas de medicin para fines portables (Cusick, 2002). En esta tesis se opt por utilizar el circuito Howland para la fuente de corriente.
3.1.1.1.
El circuito Howland modificado.
La mayora de las FCCV recurridos en la espectroscopa de impedancia estn basadas en el circuito Howland. Bsicamente se utiliza un amplificador operacional con retroalimentacin positiva y negativa (Figura 29). La corriente de salida IL puede ser calculada de acuerdo a la ecuacin 3.1. Se puede apreciar que la corriente IL puede ser definida por la resistencia Ri y la entrada Vi. Por otro lado, la impedancia de salida tericamente ser infinita si las retroalimentaciones son idnticas (R 1 = R2 = R3 = R4 = R). Sin embargo, diferencias entre los resistores, las capacitancias parasitas y los lmites de frecuencia del amplificador limitaran la impedancia de salida.
Figura 28. Estructura bsica del generador Howland, donde Vi es la entrada de voltaje e IL es la corriente en la carga.
IL= ViRi+RL*1-R1R2*R4R3
Ec. 3.1
En adicin a la limitacin de la impedancia de salida, el mximo voltaje V L en la carga est limitado por la ganancia de lazo cerrado G y por la alimentacin Vcc del operacional. Por ejemplo, si R1 = R2 = R3 = R4 = 1 K, Vcc = 5 Volts y Vi = 1 Volt, la carga mxima no debera exceder los 2.5 K. Valores ms grandes de carga saturaran la salida del amplificador operacional y el desempeo de la FCCV estara afectado. En 1995 Lu (Lu, 1995) us un generador Howland mejorado, el cual se aprecia en la figura 29. Se puede ver que el voltaje en la entrada no inversora es un divisor de voltaje del voltaje en la carga. Como resultado, la fraccin del voltaje de carga en este punto como un voltaje en modo comn es disminuido. Por lo tanto el voltaje mximo a travs de la carga puede ser incrementado.
pg. 50
Figura 29. Diagrama del generador de corriente mejorado de Howland, donde Vi es el voltaje de entrada, I0 es la corriente de salida y Co es el capacitor para eliminar las seales de DC.
De la figura 30 se puede concluir que la corriente Io en la carga est dada por:
Io= R4*R2- R1*(R3+ R5)R1*R3(R4+ R5)* VL- R2R1*R3* Vi

Ec. 3.2
Donde VL es el voltaje de carga. Los electrodos de Cu-AgCl cambian sus caractersticas cuando una corriente de DC pasa a travs ellos. Para prevenir que la corriente DC pase a travs los electrodos, es necesario poner un capacitor en serie con la fuente de corriente (como se muestra en la figura 29). La ecuacin 3.2 asume que el amplificador operacional es ideal, lo cual significa que su impedancia de salida es cero y su impedancia de entrada es infinita. Por definicin, la corriente de salida I0 de una fuente de corriente no debera depender del voltaje de carga VL. Esto es posible haciendo el valor de R4 igual a la suma de R3 y R5, y los valores de R1 y R2 idnticos. Si estas condiciones se satisfacen la corriente I0 estar determinada por R3 y la impedancia de salida sera infinita. En la prctica, es muy complicado mantener la impedancia de salida alta sobre un gran rango de frecuencia sin causar que el circuito oscile, especialmente a altas frecuencias (mayores a 1 MHz). En los sistemas multifrecuencia se requiere un cuidadoso ajuste de la red de retroalimentacin para retener estabilidad y aumentar la impedancia de salida. Algunos autores han sugerido la inclusin de un
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Instituto Tecnolgico de Celaya buffer configurado como seguidor de voltaje en el lazo de retroalimentacin positiva del circuito Howland (Bertemes-Filho, 2000). En esta tesis, la fuente de corriente controlada por voltaje basada en el circuito Howland modificado con buffer en la retroalimentacin positiva fue implementada. El circuito mostrado en la figura 31 solo trabajara si el primer trmino en la ecuacin 3.3 tiende a cero. Esta condicin se satisface haciendo R4 igual a la suma de R5 y Z3. La impedancia Z3 (combinacin entre R3 y C3) determinara el funcionamiento de la fuente de corriente a bajas frecuencias. Tanto las ecuaciones de corriente e impedancia de salida obtenidas de la figura 31 se describen en el apndice C.
Io= R4*R2- R1*(R5- R1*Z3)R1*Z3(R4+ R5)* VL- R2R1*Z3* Vi

Ec. 3.3
Donde VL es igual a Iout * RL.
Figura 30. Esquemtico del circuito de Howland modificado, donde Vi es el voltaje de entrada, CDC es capacitor que remueve la seale de DC, RL es la carga y A, B y C son los nodos usados en la seccin de apndices.
Cuando R1 = R2 = R5 = R y R4 = R3+ R entonces el trmino entre corchetes de la ecuacin 3.3 se hace cero si la impedancia de C3 puede ser menospreciada. La fuente de corriente en este proyecto esta implementada usando el op-amp OPA656 (OPA656 Data sheet 2001), el cual es un amplificador operacional de banda ancha con entrada FET manufacturado por Texas Instrumentes. La corriente de salida es de 1.2 mAp-p para un voltaje senoidal de entrada de 0.6 Vp-p
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Instituto Tecnolgico de Celaya (proveniente del generador de voltaje AD9833) sobre un rango de frecuencia de 500 Hz a 500 KHz. Por esto el valor de R3 debe ser de 1 K. Se usaron los valores de R 1 = R2 = R3 = 47 K, C3 es de 10 uF. C3 combinada con el resistor R3 de 1 K producir un error de 13uAp-p y -0.1 de fase en la salida de corriente a 1 KHz. Aunque, la precisin de la salida de corriente depende de la igualdad de de los resistores R1, R2 y R5; por otro lado, la precisin de la impedancia de salida depende de la igualdad del resistor R4 con R3 + R5. Por lo tanto los resistores deben ser seleccionados con una tolerancia de aproximadamente 0.5% (Pedro Bertemes Filho, 2001). Para prevenir parte de la corriente de salida a travs de R3 pase a travs de R4 y R5, se sugiri utilizar un op-amp (OPA656) configurado como buffer de ganancia unitaria en la retroalimentacin positiva (Pedro Bertemes Filho, 2001). El circuito se puede ver la figura 31.
Figura 31. Esquemtico del circuito Howland modificado con buffer en la retroalimentacin positiva, donde RBias es el resistor para el Amplificador Operacional.
Como resultado, la corriente de salida del circuito mostrado en la figura 31 puede ser calculada por medio de la ecuacin 3.4, asumiendo R1 = R2 y R4 = R5 (En el apndice C se desglosa la ecuacin 3.4).
Iout= - 1R3+ X3* Vi
Ec. 3.4
Donde X3 es la impedancia de C3. Un esquemtico del circuito propuesto para la generacin de corriente (FCCV) utilizado en este proyecto se puede apreciar en la seccin de apndices
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Instituto Tecnolgico de Celaya 3.1.1.2. Validacin del circuito Howland Modificado.
A continuacin se muestran las grficas de corriente con respecto a la variacin en la frecuencia y en la carga. Tales grficas se obtuvieron por medio de simulaciones utilizando el software Multisim Power Pro Edition versin 10.0 manufacturado por National Instruments. Y tambin por medio de implementacin fsica. En lo que respecta a la parte de simulacin, la FCCV se simul sobre un rango de frecuencia ms grande (100 Hz a 1 MHz) con respecto al rango de inters (500Hz a 500KHz) con el objetivo de obtener un mejor anlisis en particular, del FCCV basado en el circuito Howland. Se utiliz una carga de 1 KHz y adems una carga que emula la impedancia el tejido y de los electrodos. Las simulaciones (MMH sin buffer) y mediciones fsicas (MMH con buffer) fueron comparadas. La figura 32 muestra que la corriente de salida fue casi constante sobre un rango de frecuencia de 1 KHz a 1 MHz, usando una carga de 1 k.
Figura 32. Magnitud de la corriente simulada en Multisim para una carga de 1K.
En la figura 33 se aprecia el desfasamiento introducido por la fuente de corriente. Aunque se obtuvo un desplazamiento en fase significativo en las mediciones. Tal cambio no es importante en nuestra aplicacin, esto debido a la tcnica utilizada la cual est basada en el AD8302. Lo importante es medir el desfasamiento entre el voltaje en el tejido (Vz) y el voltaje generado en la resistencia Rs (Vase mtodo de medicin). Rs reflejar el ngulo (sea cual sea) de la seal de corriente inyectada al tejido, en su voltaje Vs.
Figura 33. Fase de la corriente simulada en multisim con respecto a la frecuencia.
La fuente de corriente est diseada para producir una corriente constante dentro de la solucin a travs de los electrodos. La impedancia electrodo-electrolito es principalmente capacitiva y por lo tanto tendr una alta impedancia a bajas frecuencias. Las simulaciones (MMH sin buffer) y mediciones fsicas (MMH con buffer) fueron repetidas usando la carga mostrada en la figura 34. Los resultados se muestran en la figura 35.
pg. 54
Figura 34. Modelo de impedancia electrodo-tejido. Este modelo da una impedancia en magnitud de 2850 a 1KHz y 200 a 1 MHz.
Se puede apreciar que la respuesta en bajas frecuencias no est afectada, por otro lado, a altas frecuencias el comportamiento es an mejor. Sin embargo, debe mencionarse que las simulaciones no toman en cuenta las capacitancias parsitas las cuales se encuentran presentes en la implementacin del circuito. Esto afectar el comportamiento en altas frecuencias (mayores a 1 MHz).
Figura. 35. Magnitud de la corriente simulada y fsicamente para la carga mostrada en la figura 34.
El valor absoluto de la corriente de salida es importante, sin embargo ms importante aun es la estabilidad de la misma corriente de salida del FCCV, tal estabilidad est determinada por la impedancia de salida. La impedancia de salida de la fuente de corriente Zs fue evaluada en simulacin por medio de un cortocircuito en el voltaje de entrada Vi y conectando una fuente de corriente Is en la salida del FCCV presentndose buenos resultados. La impedancia de salida queda entonces definida como el radio entre el voltaje V a travs de Rl y la corriente I que fluye en Zs.
3.1.2.
Mtodo de medida.
Para llevar a cabo las medidas de impedancia elctrica se decidi utilizar el mtodo de medida I-V (Figura 18) el cual se describi anteriormente y cuyas caractersticas de frecuencia de trabajo se encuentra en el rango de las dispersiones y de la grfica que representa de manera ideal la permitividad y resistividad de tejidos biolgicos en funcin de la frecuencia de la corriente de excitacin. El mtodo tiene un margen de frecuencia de trabajo aceptable (mayor a 1 MHZ) y un amplio rango margen de impedancia Z. Aunque el mtodo de medida I-V est referido a tierra (introduccin de ruido) y pierde exactitud a altas frecuencias, debajo de 1 MHz la precisin de este es aceptable.
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Fig. 36. Mtodo de medida utilizado para la medicin de impedancia.
Como se puede apreciar, el mtodo de medida I-V funciona bsicamente como un divisor de voltaje. En el circuito Zx representa la impedancia de la muestra en estudio, Rs es un resistor de referencia de valor conocido conectado en serie con Zx. Si una corriente sinodal fluye a travs de Zx y Rs. El voltaje generado en Zx puede ser medido con un par de electrodos y despus amplificado con el amplificador de instrumentacin Az, por otro lado el voltaje generado en Rs tambin es medido y amplificado utilizando el amplificador de instrumentacin. Si asumimos que los amplificadores Az y As (INA128P Data sheet 2000) son idnticos y comparten la misma ganancia podremos entonces decir que:
Zx=Rs VazVas
Ec. 3.5
3.1.3.
Tcnica de medicin.
La tcnica de medicin est basada en el detector de ganancia y fase (DGF) AD8302 (AD8302 Data sheet 2000). Un diagrama a bloques del circuito utilizado se presenta en la siguiente figura.
pg. 56
Figura 37. La tcnica de medicin est basada en el detector de ganancia y fase AD8302 manufacturado por la empresa Analog Device.
En la parte A del diagrama a bloques de la figura 37, para igualar la impedancia de entrada de 50 del AD8302, dos buffers de entrada B1 y B2 son construidos utilizando dos amplificadores de baja impedancia de entrada y alto slew rate (THS3062 Data sheet 2002). Cada buffer consiste de una unidad de ganancia dada por los AOP THS3062 y una unidad de atenuacin de voltaje diseada con un resistor de 1 K y otro resistor de 50 adems se aade un capacitor para eliminar las seales de CD. Los buffers y ms especficamente la parte de atenuacin tiene dos funciones principales que son: igualar la impedancia de entrada del AD8302 (50 ) y reducir la amplitud de la seal dentro del rango de 316 uV pico y 316 mV pico para el (DGF). Por otro lado, si asumimos que los dos buffers de entrada al AD8302 son idnticos podemos entonces comprobar que:
Zx=Rs VazVas =Rs VaVb(a-b)

Ec. 3.6 Donde: Va = Voltaje de entrada al AD8302 que representa el voltaje medido en la impedancia de la solucin. Vb = Voltaje en la resistencia Rs. Cabe mencionar que en la ecuacin 3.6 va implcito el ngulo de las seales Va y Vb. la seal Va estar desfasada cierto ngulo con respecto a la seal Vb, esto como resultado de la componente capacitiva en los tejidos biolgicos forjada por la membrana celular. Tal diferencia a-b es medida con ayuda del AD8302.
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Instituto Tecnolgico de Celaya Para la parte B de la figura 37 se tiene el AD8302 (GPD) el cual compara dos seales de entrada y da como resultado a su salida dos voltajes de DC proporcionales al radio de magnitud K y a la diferencia de fase de los dos voltajes de entrada (Vase apndice A).
Vmag=30mVdB*logVaVb+ 900mV Vphs=-10mVdB*(a-b-90)+ 900mV
Ec. 3.7 Ec. 3.8
De las ltimas tres ecuaciones podemos obtener el valor de Zx en magnitud y fase haciendo un despeje en las ecuaciones 3.7 y 3.8 como sigue:
VaVb=Zm= Rs* 10Vmag-0.90.6

Ec. 3.9
a-b= = -0.9-Vphs0.01 + 90
Por lo tanto la impedancia estar dada por: ZX=Zm ang Donde: Zm es la magnitud de la impedancia.
Ec. 3.10
: es la fase de la impedancia.
Zx = es la impedancia medida en magnitud y fase.
En la figura 37 se tienen 2 capacitores C4 y C5 de 47 uF los cuales estn conectados a los pines OFSA y OFSB respectivamente, estos componentes colocan la frecuencia de corte del filtro pasa altas de la compensacin de offset interna de acuerdo a la frmula FHP(KHz)=2Cc uF, donde Cc es la capacitancia total desde OFSA o OFSB a tierra, incluyendo los 10 pF internos (AD8302 data sheet 2002). En esta aplicacin Cc = 47 uF, entonces FHP=43 Hz, lo cual significa que tericamente, el AD8302 puede trabajar a frecuencias tan bajas como 43 Hz.
FHP(KHz)=2Cc uF=247=43Hz
Ec. 3.11
Tambin podemos determinar los valores mximo y mnimos de impedancia detectables por el sistema o circuito:
pg. 58
Zx min= 316uVA*G*Io
Ec. 3.12
Zx max= Vo max (mV)G*Io o 316mVA*G*Io

Ec. 3.13
Donde G es la ganancia de los amplificadores de instrumentacin y A es el coeficiente de atenuacin que puede ser determinado por:
A= R5(R5+R3)
Ec. 3.14 En las ecuaciones 312 y 3.13 A es el coeficiente de atenuacin G es la ganancia de los amplificadores de instrumentacin en nuestro caso A = 1/16 y G = 2. La fuente de corriente Io = 1.2mA. En este caso Las impedancias mxima y mnima alcanzadas para este circuito son de 57 K y 9 respectivamente.
3.1.4.
Diagrama general del circuito completo utilizado para la medicin de impedancia.
La figura 38 muestra un diagrama a bloques del circuito completo utilizado para la medicin de impedancia para este proyecto. En la figura se muestran tres partes principales: 1. La parte del microcontrolador.
2. La de generacin de la seal que estimulara el tejido. 3. La pantalla de cristal lquido que (LCD) que visualiza el proceso.
El microcontrolador utilizado es el PIC18F4520 (PIC18F4520 Data sheet 2008) el cual lleva a cabo muchas tareas de procesamiento con los dems componentes del circuito. El microcontrolador genera y manda las palabras de (16 bits) para los registros de frecuencia (32 bits), fase (16 bits) y control (16 bits) del DDS AD9833 para generar las seales senoidales Vout de salida a la frecuencia seleccionada por medio de un teclado matricial (de 16 teclas), tal teclado tambin est conectado al microcontrolador. El PIC 18F4520 cuenta con 13 canales para conversin analgico-digital de 10 bits y 100K muestras por segundo. Los canales ADC 1 y 2 (pines 2 y 3 del PIC) fueron utilizados para realizar la conversin de las seales de DC provenientes del AD8302 y que contienen la informacin de magnitud y fase de la impedancia medida. El microcontrolador lleva a cabo las operaciones necesarias (ecuaciones 3.9 y 3.10) para finalmente desplegar el valor de la impedancia compleja del tejido en una pantalla LCD. La LCD utilizada est conformada por una pantalla de 2 lneas y 16 caracteres cada una y tiene internamente el controlador Hitachi HD47780. La LCD tiene la funcin de visualizar todo el proceso mencionado anteriormente.
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Instituto Tecnolgico de Celaya El ADC interno del microcontrolador es de 10 bits y logra una resolucin de 4.9 mV referenciado a un voltaje de 5 Volts. Esto significa que el sistema puede alcanzar una resolucin de 0.163 dB en ganancia (basado en una escala de 30 mV/dB) y 0.49 en fase (basado en una escala de 10 mV/grado). El compilador utilizado para la programacin del PIC fue el compilador C18 (mplab c18 c compiler Users guide, 2005) el cual es proporcionado por la empresa Microchip Technology (en versin estudiantil) y el desarrollo utilizado fue el ambiente de desarrollo integrado MPLAB (versin 8.1, Microchip Technology Inc.).
Figura 38. Diagrama a bloques del circuito completo utilizado para la medicin de bioimpedancia para este proyecto.
El bloque de generacin de seal comprende el generador de seales DDS AD9833 (vase ms sobre la tcnica DDS y el generador AD9833 en la seccin de apndices) el cual es controlado por el PIC18F4520 y la fuente de corriente controlada por voltaje (VCCS) la cual, como ya se menciono anteriormente, est basada en el circuito Howland modificado (Pedro Bertemes, 2001). La FCCV genera una corriente proporcional al voltaje de entrada. El circuito primeramente, se valid sin utilizar el sistema de electrodos y se prob midiendo la impedancia de tres arreglos de circuitos RC en paralelo a diferentes frecuencias. La impedancia terica de un circuito RC se obtiene como sigue:
Z=Xc*RXc+R
Ec. 3.15
Z= R1-jWRC
Separando la parte real de la parte imaginaria:
Ec. 3.16
pg. 60
R1+w2R2C2- jwR2C1+w2R2C2
Ec. 3.17
Obtenemos la magnitud y la fase de la impedancia:
Z=R1+w2R2C22+wR2C1+w2R2C22
Ec. 3.18
=tan-1-wR2C1+w2R2C2R1+w2R2C2=tan-1(-wRC)
Ec. 3.19
3.1.
Grficas y resultados del sistema sin acoplamiento de electrodos.
A continuacin se presentan las grficas de magnitud y fase llenadas con los valores de impedancia obtenidos de manera terica y prctica para un circuito RC en paralelo con valores de R=200 y C=0.1uF.
Fig. 39. Representacin grfica de Cole-Cole para R=200 y C=0.1uF.
Fig. 40. Grficas que muestran los resultados tericos y prcticos del circuito 1 RC en paralelo.
Revisando las ecuaciones y observando las grficas mostradas se puede percibir que a partir de una frecuencia f= 500 KHz tanto la fase como la magnitud medidas se alejan de los valores tericos. Esto es debido, principalmente a que el AD8302 ya no alcanza a reflejar en su salida los valores tan pequeos de voltaje (menores a 30 mV) que se deberan tener para estos valores altos de frecuencia. Sin embargo, se puede percibir que la tendencia de los valores prcticos obtenidos siguen muy de cerca a la de los valores tericos, hacindose ms grande la diferencia entre estos a altas frecuencias. Precisamente, tales diferencias en altas frecuencias se pueden percibir con ms claridad en la grfica de conductividad obtenida a partir de los valores de impedancia en magnitud y fase. Las cuales demuestran que a partir f = 500 KHz el sistema se vuelve inestable. Cabe mencionar que el valor de clula k no
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Instituto Tecnolgico de Celaya afecta la informacin que arroja la grfica de conductividad ya que la diferencia entre los valores tericos y prcticos ser proporcional sin importar el valor de k (m-1).
Z=VI=k1(+j) =k.G G=1Z(cos)

Donde: Z = Impedancia (ohms)
Ec. 3.20 Ec. 3.21 Ec. 3.22
= conductividad (S/m)
G= conductancia (S) Ahora se presentan las grficas obtenidas para de un circuito RC en paralelo con los valores de R=200 y C=0.22uF.
Fig. 41. Representacin grfica de Cole-Cole para R=200 y C=0.22uF.
Fig. 42. Grficas que muestran los resultados tericos y prcticos del circuito 2 RC en paralelo.
Al igual que el caso anterior en altas frecuencias, el sistema se vuelve un tanto inestable. Se debe mencionar aqu que para cada caso las condiciones de estabilidad se ven alteradas por varios factores como el CMRR, las capacitancias parasitas y los armnicos de la corriente de excitacin.
3.2.
Grficas y resultados del sistema con acoplamiento de electrodos.
La permitividad (adimensional) y la conductividad elctrica (S/m) de una sustancia o tejido biolgico no puede ser medida directamente, es necesario medir la impedancia compleja (ohms) y realizar las ecuaciones 3.21 y 3.22 para calcular las propiedades elctricas de la muestra a evaluar.
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Instituto Tecnolgico de Celaya En la prctica, la conductividad elctrica de una solucin se mide mediante el uso de una corriente alterna (AC) con el fin de evitar los efectos de la polarizacin. Cuando se usa una corriente continua (DC) los iones vecinos al electrodo emigran hacia este, produciendo un empobrecimiento de electrolitos en el medio. Esto hace que la conductividad se altere como consecuencia de la variacin en la concentracin. Este fenmeno se llama polarizacin de los electrodos y hace imposible medir la conductividad por medio de corriente DC. Por tal motivo se utiliza una corriente de AC, cuya frecuencia vara, en nuestro caso puede variar, desde los 100 Hz hasta 500 KHz. Por otro lado la forma de seal utilizada puede ser cuadrada o senoidal (depende del diseo del circuito) aunque la eficiencia de la primera es ms baja que la onda sinusoidal y ms susceptible a interferencias y/o ruido. Para llevar a cabo la experimentacin y validacin del sistema de electrodos acoplado al electrnico, se realiz un estudio con muestras de soluciones electrolticas. En lo que respecta al diseo geomtrico, los cuatro electrodos se encuentran montados en una placa de material aislante con forma trapezoidal, como se muestra en la figura 26. La separacin no constante entre electrodos optimiza la relacin seal/error de la medida a la vez que mejora su resolucin espacial (Rigaud, 1996). Por resolucin espacial se entiende la distancia a la que debe encontrarse una discontinuidad del medio estudiado para que se vea afectada la medida. El diseo, comprende un circuito construido sobre una placa para impresos PCB en la cual se dibujaron los cuatro electrodos de contacto. La placa se sumergi en cido hasta obtener solo los electrodos de contacto de cobre circulares y las pistas para hacer las conexiones y soldaduras pertinentes. Las pistas sobre la placa de PCB fueron cubiertas con una resina epxica aislante para asegurar que la solucin solo tuviera contacto con los cuatro electrodos. En este punto se decidi determinar la conductividad elctrica de diversas soluciones en funcin de la concentracin de un determinado soluto. La conductividad elctrica es la propiedad natural caracterstica de cada cuerpo que representa la facilidad con la que los electrones pueden pasar por l. La conductividad en medios lquidos (solucin) est relacionada con la presencia de sales en solucin, cuya disociacin genera iones positivos y negativos capaces de transportar la energa elctrica si se somete el lquido a un campo elctrico. Estos conductores inicos se denominan electrolitos o conductores electrolticos (Grimnes and Martinsen, 2000). El agua pura, prcticamente no conduce la corriente, sin embargo el agua con sales disueltas conduce la corriente elctrica. Los iones cargados positiva y negativamente son los que conducen la corriente, y la cantidad conducida depender del nmero de iones presentes y de su movilidad. Entre mayor sea la cantidad de sales disueltas, mayor ser la conductividad, este efecto contina hasta que la solucin est tan llena de iones que se restringe la libertad de movimiento y la conductividad puede disminuir en lugar de aumentar, dndose casos de dos diferentes concentraciones con la misma conductividad. circuito
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Instituto Tecnolgico de Celaya Un aumento en la temperatura, disminuye la viscosidad del agua y permite que los iones se muevan ms rpidamente, conduciendo ms electricidad. Este efecto de la temperatura es diferente para cada in, pero tpicamente para soluciones acuosas diluidas, la conductividad vara de 1 a 4 % por cada C. Conociendo estos factores, la medicin de la conductividad nos permite tener una idea muy aproximada de la cantidad de sales disueltas o la cantidad de slidos totales disueltos en el agua (CST). El factor de conversin entre la conductividad elctrica y el TDS est entre 0,64 y 0,70. El proceso de experimentacin con soluciones salinas se llev a acabo de la siguiente manera: Materiales:
Medidor de impedancia. Balanza analtica. 5 vasos pirex de 100 ml cada uno. Probeta graduada de 25 ml.
Reactivos:
Agua potable. Vaso de precipitado. Cloruro de sodio.
Se prepararon 3 soluciones con diferentes concentraciones:
1000 ml de Agua potable. 996 ml de H2O con 4gr de NaCl (0.4% de NaCl) 992 ml de H2O con 8gr de NaCl (0.8% de NaCl)
Cada una de estas muestras son colocadas en un vaso de precipitado distinto. Los clculos para la preparacin de las soluciones de NaCl se muestran a continuacin:
%w=w solutow solucion100

Ec. 3.23
w soluto=%ww solucion100
Ec. 3.24
1grm H2O=1ml H2O

Ec. 3.35
w soluto=0.41000 ml100=4 grm de NaCl

Ec. 3.26
w soluto=0.81000 ml100=8 grm de NaCl

Ec. 3.27
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Los valores obtenidos por medicin directa fueron la impedancia (Z) y el ngulo de fase (). Los valores calculados (a partir de ecuaciones matemticas) fueron los de conductividad () (Ec. 47). Los resultados se muestran en las siguientes grficas. Idealmente las medidas de impedancia de soluciones salinas no sufren variacin con la frecuencia en el comportamiento de sus propiedades elctricas pasivas (LLamosa, 2005) por lo tanto se esperara una respuesta constante a lo largo del espectro de frecuencia. Las figuras siguientes muestran el resultado del espectro de impedancia en cada una de las soluciones salinas, en tales imgenes se puede observar que el comportamiento no es el esperado ya que no se encuentra una constante en las medidas de impedancia en el espectro de frecuencia medido. La impedancia de interfase creada entre la solucin y los electrodos de contacto (cobre) influye altamente a bajas frecuencias como lo menciona Rigaud (Riguad 1995). Por otro lado las capacitancias parasitas influyen a altas frecuencias A pesar de la impedancia de interfase y las capacitancias parsitas es justo mencionar que las soluciones con mayor concentracin de NaCl presentan valores menores de impedancia y consecuentemente valores mayores de conductividad en cada una de las frecuencias a partir de 500Hz.
Fig. 43. Grficas que muestran los resultados fsicos de magnitud y fase de la impedancia medida y la conductividad para el H2O.
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Instituto Tecnolgico de Celaya Fig. 44. Grficas que muestran los resultados de magnitud y fase de la impedancia medida y la conductividad de la solucin de NaCl al 0.4%.
Fig. 45. Grficas que muestran los resultados de magnitud y fase de la impedancia medida y la conductividad de la solucin de NaCl al 0.8%.
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
La principal diferencia entre el mtodo DGF (utilizado en este proyecto) y la tcnica de demodulacin en cuadratura (AQD por sus siglas en ingles) radica en el hecho de que el mtodo DGF se centra en la deteccin de la amplitud relativa y la fase de la impedancia, mientras que el mtodo AQD tiene como objetivo medir las partes real e imaginaria de la impedancia de las seales acopladas, de aqu que para medir la ganancia y la fase requiere de instrumentos o circuitos complejos y costosos, en nuestro caso solo requerira programacin extra para presentar la informacin de impedancia en su forma ya sea polar o compleja. Esta tarea se pudo conseguir de una manera relativamente sencilla a travs de un circuito integrado compacto: el AD8302 el cual es un circuito monoltico diseado para medir con precisin tanto la ganancia y la diferencia de fase entre dos seales independientes. El par de amplificadores logartmicos de precisin incluidos internamente en la estructura del mismo chip disminuye los errores asociados a cada etapa y por lo tanto ofrece una gran eficiencia. Por otro lado el dispositivo tiene dos desventajas principales: el AD8302 no distingue entre una diferencia de fase positiva y una negativa (Vase la figura B.2 en la seccin de apndices), aunque en nuestro caso tal ambigedad no importa debido a la componente capacitiva de los tejidos (la diferencia de fase se mantendr entre 0 y 90). En segundo lugar, se encontr en los experimentos que el dispositivo no resulta confiable en mediciones en frecuencias inferiores a 1 KHz mientras que se sabe que los espectros de bioimpedancia menores a 1 KHz contienen informacin til (Osypka y Gersing 1995). Este fenmeno se puede observar en las figuras 40 y 41 del captulo 3. No est de ms mencionar que el AD8302 se desarroll principalmente para aplicaciones de radio frecuencia y de frecuencia intermedia (en el proyecto se configur el ad8302 para que trabajara en frecuencias mayores o iguales a 43 Hz (ver seccin 3.3.4). En este sentido se espera una mejora a bajas frecuencias en los nuevos chips que ayuden a mejorar la eficiencia del sistema. El desempeo de la FCCV juega un papel importante para obtener mediciones de bioimpedancia precisas, se espera siempre una corriente de excitacin constante para cargas de impedancia diferentes.
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Instituto Tecnolgico de Celaya Aunque la respuesta a bajas frecuencias presenta problemas, el error mximo registrado de la fuente de corriente fue de cerca del 1.7 % para la experimentacin fsica (fuente con buffer) para un rango de frecuencia de 500 Hz a cerca de 1MHz. Aunque la magnitud de corriente se puede controlar variando Vi o R3 (Vase apndice C para desglose de ecuaciones), en nuestro caso solo se tiene acceso a la variacin de Ri (resistencia de instrumentacin) ya que Vi viene directamente del generador de onda senoidal AD9833 con un valor de amplitud de 0.6 Vpp ya determinado (Vase apndice B). Esto se puede mejorar aumentando una etapa de amplificacin a la salida del generador de onda AD9833. Por otro lado, aunque la fase de la corriente de la fuente FCCV presenta desviaciones importantes a bajas frecuencias (menores a 1 KHz), esto no afecta el funcionamiento del sistema ya que la misma corriente fluye a travs de Zx (bioimpedancia) y la resistencia de referencia Rs. El AD8302 medir la diferencia de fase entre estas dos, que es lo que realmente nos interesa para esta tcnica de medicin. En lo que al mtodo de medida se refiere, el rango de impedancia medible por el sistema puede ser aumentado haciendo ms pequeos los valores de A, G y Io (figura 37) o aumentando el voltaje de salida del amplificador de instrumentacin A1 (Vo max) usando una fuente de alimentacin mayor a 5 Volts (hasta mximo 15 V), se debe tener en cuenta que esto est relacionado con la portabilidad del instrumento. Para finalizar esta parte se debe mencionar que la resistencia de referencia Rs sirvi como una medida de calibracin dinmica del instrumento ya que su valor se debe ajustar para permitir que se logre una seal medible (voltaje medido de la solucin) por el amplificador de instrumentacin A2, en nuestro caso se utilizo una resistencia de instrumentacin. La manufactura artesanal del sistema de electrodos y el material (cobre) con que se elaboraron fue uno de los principales factores que disminuyeron el buen funcionamiento del medidor de impedancias. Jos Mompn Poblet en su libro de Introduccin a la Bioingeniera presenta un circuito elctrico equivalente a la impedancia electrodo-tejido para electrodos de cobre (Figura 46) donde: Ehc es el potencial de media clula (0.349 V), Rd y Cd son la resistencia y capacitancia de interfase respectivamente (30K y 53 nF) y Rs es la resistencia del electrolito. Poblet comprueba con este circuito que la impedancia que presenta el electrodo disminuye al aumentar la frecuencia de excitacin con un valor asinttico de 1 Kohm, algo que se visualiza (500) claramente en las pruebas de NaCl aqu presentadas. En este sentido es importante mencionar tambin, la presencia de corrosin debido a la reaccin oxido-reduccin en los electrodos de cobre, misma que para Gonzales et al. (1993) afectan las mediciones a bajas frecuencias con la inclusin de ruido en las mediciones. Por otro lado, uno de los mtodos ms importantes para la proteccin de los metales frente a la corrosin consiste en la utilizacin de inhibidores orgnicos que permitan la proteccin de la superficie metlica respecto al medio corrosivo en el que se encuentra. Es decir, la presencia de agentes orgnicos activos superficialmente actan retardando la corrosin metlica a travs de la formacin de pelculas superficiales protectoras (J.E Gonzales 1999).
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Figura. 46 Circuito elctrico equivalente a la impedancia cobre-electrolito (Jos Mompn, 1988). En el caso particular del cobre est bien establecido por Gonzalez et al. (1993) que los compuestos heterocclicos que contienen nitrgeno son muy efectivos como inhibidores de su corrosin en una amplia variedad de medios y de aplicaciones destacando en especial el benzotriazol (BTA) y el 5 metilbenzotriazol (TTA). El estudio de electrodos de cobre por medidas de impedancia en disoluciones de cloruro de sodio (NaCl) en presencia de BTA y TTA inhibe fuertemente la corrosin del cobre en este medio (J.E Gonzales 1999). Tales protecciones anticorrosivas pueden ser de gran utilidad para mejorar la respuesta del sistema. Las formas de medicin y las condiciones ambientales que, aunque se trataron de mantener estabilizadas o estandarizadas para las mediciones en vivo, resultaron variantes afectaron las mediciones. Se puede hacer mencin aqu de una futura mejora para el instrumento aadiendo una etapa de calibracin a base de software o hardware, tal mejora ser menos importante a medida que se mejore el sistema de electrodos (vase seccin 2.1.5) Para concluir nuestro estudio, se puede mencionar que los resultados experimentales preliminares confirman la aplicabilidad de la propuesta del dispositivo basado en el detector de ganancia y fase AD8302, el mtodo presentado en este trabajo es muy simple y fcil de implementar con el uso del mencionado chip, Adems el compilador C18 ofreci una manera sencilla de programar el PIC18F452 para llevar acabo tanto los clculos de las ecuaciones para determinar la magnitud y la fase de la impedancia como la configuracin del generador de seales AD9833. Este diseo simple basado en una nueva generacin de componentes electrnicos integrados ofrece un buen desempeo en una amplia gama de frecuencias, pequeas dimensiones de los circuitos, bajo consumo de energa y una precisin comparable. Se espera que una mejora en el diseo y manufactura del sistema de electrodos aunado a una posible calibracin del instrumento (en software y/o hardware) ayudarn en gran medida a acercarse a una respuesta eficiente del medidor de bioimpedancia y a validar, en un futuro, la hiptesis planteada en esta tesis.
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SECCIN DE APNDICES
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APNDICE A. CIRCUITO DETECTOR DE FASE AD8302. El circuito integrado AD8302 es capaz de medir la ganancia o la prdida de dos seales elctricas, as como tambin el corrimiento de fase que existe entre ellas con una exactitud de 10 mV/Grado, el ancho de banda en el que el circuito puede medir va de seales casi estacionarias hasta seales de 2.7 GHz, cuando se tiene un acoplamiento en los canales de entrada, A y B, del circuito de 50 (Figura A.1). La impedancia interna est en funcin de la frecuencia y a baja frecuencia esta alrededor de 3 K. Este circuito tiene aplicaciones en sistemas de precisin de control de R F, sistema de monitoreo y diagnostico remoto, entre otras. El diagrama a bloques del AD8302 de la figura A.1 muestra dos entradas (canal A y B) para mdulos que constan de siete detectores amplificadores logartmicos. Ambos entregan una seal de CD de acuerdo a la seal a medir, y son comparadas una con otra para entregar un voltaje referido al corrimiento de fase o un voltaje referido a la ganancia o perdida de ambas seales en cantidad de dB.
Figura A.1 Diagrama interno del circuito AD8302.
El AD8302 tiene un encapsulado (TSSOP) con dimensiones fsicas (RU-14A) para montaje superficial, consta de 8 pines con dos entradas (canal A y canal B) y dos salidas (Vout phase y Vout Gain/Loss dB).
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Instituto Tecnolgico de Celaya En la tabla A.1 se muestra la descripcin y la funcin que tiene cada pin. La respuesta en corrimiento de fase y ganancia y prdida de dos seales se muestra en la figura A.2.
Tabla A.1. Pines del AD8302. No de Pin 1, 7 2 3 4 5 Nombre COMM INPA OFSA VPOS OFSB Funcin Tierra. Canal A tiene que ser acoplado a AC. Al colocar un capacitor a tierra, este pin, provee un desacoplamiento a la entrada INPA. Voltaje de alimentacin 2.7 V 5.5 V Se coloca un capacitor a tierra para compensar el filtro y provee de una entrada desacopladora INPB. 6 8 9 INPB PFLT VPHS Canal A tiene la misma forma que canal B. Filtro paso bajo para pin de salida de fase. Proporciona una seal de salida debida a la diferencia de fase entre el canal y el canal B. 10 PSET Pin de retroalimentacin para escalar la salida de voltaje VPHS, suministra un voltaje setpoint para modo controlador. 11 12 VREF MSET Inicializa el voltaje de referencia (1.8 V) Pin de retroalimentacin para el modo de salida VMAG, acepta un voltaje set pin en modo controlador. 13 VMAG Proporciona un voltaje que corresponde a una pendiente en dB de la razn entre los canales A y B. 14 MFLT Filtro pasa bajas, para la salida en magnitud Gin/Loss.
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Figura. A.2. Respuesta del circuito AD8302.
La respuesta del AD8302 de la figura A.2 es ideal. En realidad esta es funcin de la frecuencia de trabajo, el acoplamiento de los canales y la temperatura de operacin, lo que implica tener una limitacin en la exactitud del circuito. En la figura A.3 se muestra la respuesta del circuito a seales de 10 KHz y 100 MHz.
Figura A.3 voltaje en funcin de la fase a 10 KHz para Cc = 1uF, adems, voltaje en funcin de la fase a 100 MHz. Se muestra tambin el error de las mediciones.
En base a estas curvas el circuito presenta mejor respuesta a corrimientos de fase de 70 a 110 y de -70 a -110, por lo que conviene trabajar con instrumento que estn desfasados 90 uno con respecto al otro. Acoplamiento del AD8302. Para ser operado el AD8302 se debe tener una etapa de acoplamiento de 50 , independientemente de la frecuencia que se maneje. Sin embargo, de acuerdo a las especificaciones del fabricante la impedancia interna de este incrementa desde 50 hasta 3 K a medida que la frecuencia de operacin decae desde 2,7 GHz hasta seales casi de CD. Para el circuito bsico de conexin del AD8302 a baja frecuencia se recomienda el circuito de acoplamiento de la figura A.4. la impedancia de entrada en los dos canales tiene que ser acoplada a 50 (R1 = R2 = 50 ), los capacitores Cc sirven para eliminar las
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Instituto Tecnolgico de Celaya seales de DC, y se fijan valores a la frecuencia de operacin (450 KHz) de acuerdo a las hojas de especificacin o como si se tomara un filtro pasa-altas R-C (R = 50 y Cc = 100 nF).
Figura A.4 circuito bsico de conexin del AD8302; Cc = 100 nF, Cflt = 1 uF, R1 = R2 = 50 , C3 = 100 pF, C7 = 0.1 uF.
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APNDICE B. LA TCNICA DDS Y EL GENERADOR DE SEALES AD9833. Sntesis digital directa (DDS) es un mtodo para producir una forma de onda analgica, por lo general una onda senoidal, generando una seal variante en el tiempo de forma digital y luego llevando a cabo una conversin analgica-digital. Dado que las operaciones dentro de un dispositivo de DDS son principalmente digitales, se puede ofrecer la conmutacin rpida entre las frecuencias de salida, una fina resolucin de la frecuencia y una operacin en un amplio espectro de frecuencias. Con los avances en diseo y tecnologa de procesos, los dispositivos DDS de hoy en da son muy compactos y consumidores de poca energa. La habilidad de producir y controlar con precisin las formas de onda de diferentes frecuencias se ha convertido en un requisito fundamental en un gran nmero de aplicaciones industriales, de comunicaciones y biomdicas, en este ltimo caso, generando estmulos de frecuencias variables para aplicaciones en equipos biomdicos. La comodidad, el tamao reducido y el bajo costo son consideraciones importantes del diseo. La tcnica DDS est ganando rpidamente la aceptacin en la generacin de formas de onda debido a que son dispositivos de un solo chip que pueden generar una seal analgica programable de onda simple y con alta resolucin y precisin. Adems, la mejora continua tanto en la tecnologa de proceso y el diseo se han traducido en bajos niveles de costo y consumo de energa que antes eran impensable. Por ejemplo, el AD9833, un generador de onda programable basado en la tcnica DDS (Figura B.1), opera a 5.0 V con un reloj de 25 MHz (aunque puede usar uno menos rpido), consume una energa mxima de 30 milivolts.
Figura B.1. El AD9833, un generador de onda basado en la tcnica DDS. Los dispositivos DDS como el AD9833 pueden ser programados por medio de comunicacin SPI, y slo necesitan un reloj externo para generar ondas sinusoidales, triangulares o cuadradas. La frecuencia de la seal de salida depende de la frecuencia del reloj maestro conectado al pin MCLK y del modelo del dispositivo. (Se pueden generar seales hasta de 400 Hz basado en un reloj de 1 GHz). Los beneficios de su baja consumo de potencia, bajo costo y pequeo encapsulado (TSSOP o SSOP), combinado con su excelente desempeo inherente y la capacidad digital de ser programados y reprogramados para cubrir diferentes formas de onda a diferentes frecuencias y con fase variada hacen de los dispositivos DDS una solucin extremadamente atractiva.
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Instituto Tecnolgico de Celaya La figura B.2 muestra un diagrama a bloques de u la circuitera interna de un dispositivo DDS. Sus componentes principales son un acumulador de fase, un convertidor fase-amplitud y un DAC (convertidor analgico a digital).
Figura B.2. Componentes de un sintetizador digital directo. Un DDS produce una onda sinusoidal de una frecuencia dada. La frecuencia depende de dos variables, la frecuencia de referencia proveniente del reloj (system clock) y el nmero binario programado en el registro de la frecuencia (tuning word). El nmero binario en el registro de frecuencia proporciona la entrada principal para el acumulador de fase. El acumulador de fase calcula el ngulo de fase (por medio de una tabla de bsqueda), el convertidor de fase-amplitud devuelve el valor digital de amplitud correspondiente al seno de ese ngulo, el DAC convertir ese nmero a un valor correspondiente de voltaje analgico. Para generar onda senoidal de una determinada frecuencia, un valor constante (el incremento de la faseque est determinada por el nmero binario) se aade a la fase de acumulador con cada ciclo de reloj. Si el incremento de fase es grande, el acumulador de fase pasar rpidamente a travs de la tabla de bsqueda y por lo tanto generar una onda senoidal de frecuencia alta. Si el incremento de la fase es pequeo, el acumulador de fase tendr muchas ms medidas, por lo tanto generar una forma de onda lenta.
Las seales senoidales continuas en tiempo tienen una amplia fase repetitiva angular de 0 a 2. La implementacin digital no es diferente. Esto se entiende mejor si se puede visualizar la oscilacin de onda senoidal como un vector de rotacin alrededor de un crculo de fase (figura B.3). Cada punto designado en la rueda de fase corresponde a un punto equivalente de un ciclo de una onda sinusoidal. Mientras el vector gira alrededor de la rueda, se puede visualizar que el seno del ngulo correspondiente genera una onda senoidal de salida. Una revolucin del vector alrededor de la rueda de fase, a una velocidad constante, resulta en un ciclo completo de la onda senoidal de salida. El acumulador de fase proporciona los valores angulares equidistantes que acompaa a la rotacin del vector en la rueda de fase. Los contenidos del acumulador de fase corresponden a los puntos en el ciclo de la onda senoidal de salida.
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Figura B.3. Rueda de la fase digital. El acumulador de fase es en realidad un mdulo M que incrementa su nmero almacenado cada vez que recibe un pulso de reloj. La magnitud del incremento est determinada por la palabra binaria de entrada. Esta palabra constituye la talla de los pasos de la fase en las actualizaciones de reloj de referencia es decir, establece cuntos puntos saltar alrededor de la rueda de fase. Cuanto mayor sea el tamao del salto, ms rpido completara su equivalente de un ciclo de onda senoidal. El nmero de puntos discretos que figuran en la fase de la rueda est determinado por la resolucin del acumulador de fase (n) Para un n = 28-bit de acumulador de fase, un valor M de 0000 ... 0001 dara lugar a la fase de desbordamiento del acumulador despus de 2 a la 28 ciclos de reloj de referencia (incrementos). Esta relacin se encuentra en la ecuacin de ajuste de base para la arquitectura DDS:
fout=M*fc2n
Donde:
fout M fc n
= frecuencia de salida = palabra binaria = frecuencia de referencia del reloj interno (reloj del sistema) = longitud de la fase de acumulador, en bits
Los cambios en el valor de M resultan en cambios de fase en la frecuencia de salida. A medida que aumenta la frecuencia de salida, el nmero de muestras por ciclo disminuye. Ya que la teora del
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Instituto Tecnolgico de Celaya muestreo determina que al menos dos muestras por ciclo son necesarias para reconstruir la forma de onda de salida, la mxima frecuencia de salida fundamental de la DDS es fc/2. Cuando se genera una frecuencia constante, la salida del acumulador de fase se incrementa linealmente por lo que la forma de onda analgica que genera es de por s una rampa. Aqu el convertidor se faseamplitud se utiliza para convertir el valor instantneo del acumulador (28 bits para AD9833), con algunos bits eliminados por el truncamiento, en la informacin de amplitud de la onda (10 bits) que irn al convertidor D/A. Todo esto se muestra grficamente en la figura B.4.
Figura B.4. Flujo de seales a travs de la arquitectura DDS. Debido a que un DDS es digitalmente programable, la fase y la frecuencia de una onda se pueden ajustar fcilmente sin la necesidad de cambiar los componentes externos que normalmente tendran que ser cambiados cuando se utilizan generadores tradicionales anlogos programados. DDS permits simple adjustments of frequency in real time to locate resonant frequencies or compensate for temperature drift. El AD9833 permite ajustes de frecuencia en tiempo real. Tal caracterstica permite el diseo de fuentes de frecuencia ajustables para medicin de impedancia, o para el examen de atenuacin en redes locales o cables telefnicos. El AD9833 es un generador de onda programable capaz de crear seales senoidales, triangulares o cuadradas en un rango de frecuencias de 0 a 12.5 MHz. Tiene dos registros de frecuencia de 28 bits y dos registros de fase de 12 bits cuyos valores pueden ser usados para calcular la frecuencia y la fase de la seal de salida. Este integrado est perfectamente situado para usarse con el PIC18f4520, se puede controlar con comunicacin SPI. El diagrama de conexin se muestra en la figura B.5. El pin MCLK puede estar conectado directamente al oscilador del PIC o a un oscilador VCO externo (recomendado), y las tres lneas de comunicacin SPI pueden estar conectadas directamente a tres pines del PIC.
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Figura B.5 conexin del AD9833. Para establecer una comunicacin entre el PIC y el AD9833, se necesita establecer la configuracin del mdulo SPI para los pines que usaremos. En el caso de este proyecto se utiliz el compilador C18 de Microchip. El siguiente cdigo fue adherido al programa para tal propsito. Los primeros tres argumentos determinan cuales de los tres pines sern utilizados: DO es el pin SDATA del ad9833, CLK es el pin SCLK y ENABLE es el pin FSYNC. Los siguientes argumentos indican que el nmero mximo de trasferencia es de 16 bits y que el maestro es el PIC y el AD9833 el esclavo. El FSYNC del AD9833 es activo en bajo. El pin SCLK debe permanecer en alto cuando no est en uso. #use spi(DO = PIN_A3, CLK = PIN_A2, ENABLE = PIN_A1, BITS = 16, MASTER, ENABLE_ACTIVE = 0, MSB_FIRST, IDLE = 1) Para programar el generador de frecuencia, se necesita escribir a sus registros internos de control. Los cuales son utilizados para resetear el chip, configurar el modo de operacin y seleccionar los registros de fase y frecuencia en los cuales la salida estar basada Cada uno de los 16 bits transferidos tiene un significado el cual est indicado en la siguiente tabla B1.
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Tabla B1. Pines del AD9833
Bit D15,D14(MSB) D13
Significado Den ser 00 para el registro de control Permite cargar en los registros dos palabras completas en dos operaciones de escritura. If D15,D14 = 11, 0 = escritura en PHASE0, 1 = escritura en PHASE1
D12 D11 D10 D9 D8 D7 D6 D5 D4 D3 D2 D1 D0
0 = solo cambia el LSB del registro de frecuencia, 1 = solo cambia el MSB 0 = la salida se basa en el FREQ0, 1 = la salida se basa en FREQ1 0 = la salida se basa en el PHASE0, 1 = la salida se basa en el PHASE1 Se pone en cero 0 = RESET deshabilitado 1 = RESET habilitado. 0 = reloj interno habilitado, 1 = reloj interno deshabilitado 0 = DAC activo, 1 = pone el DAC a dormir. 0 = la salida depende de D1, 1 = la salida es una onda cuadrada. Se coloca en cero.. 0 = onda cuadrada de frecuencia media. 1 = onda cuadrada. Se coloca en cero. si D5 = 1, D1 = 0 salida senoidal, D1 = 1 salida triangular Se coloca en cero.
La frecuencia y la fase de la seal de salida estn dadas por las siguientes frmulas:
fout= fMCLK228*FREQREG out= 24096*PHASEREG
En otras palabras, la frecuencia y fase de salida no son los valores de los registros de frecuencia y fase, sino que estn relacionados con las ecuaciones de arriba. Por ejemplo si se enva 200 al registro FREQ y 100 al de fase y utilizamos un reloj de 20 MHz tendramos una salida de 14.9 Hz de frecuencia con una fase de 0.15 radianes. El chip tiene dos registros de fase (FREQ0 y FREQ1) y dos registros de fase (PHASE0 y PHASE1). Utilizando los bits D10 y D11 del registro de control se seleccin que registros sern utilizados. Para escribir al registro de fase, los dos bits ms significativos de la palabra de 16 bits transmitidos deben ser 11. El siguiente bit indica cual registro se usara (PHASE0 o PHASE1), el siguiente no importa y los dems representan el valor a ser escrito.
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Instituto Tecnolgico de Celaya Para escribir en el registro de control los dos primeros bits deben ser 00. Los otros bits deberan ser dependiendo de los valores deseados encontrados en la tabla B.1. La escritura de los registros de frecuencia se puede hacer en dos formas: 1) ambos los 14 MSB y los 14 LSB del registro de frecuencia sern alterados. 2) solo el MSB o el LSB sern escritos. Para especificar cul de las dos formas se usar se deben acomodar los bits D12 y D13 del registro de control. Para especificar cul de los dos registros sern escritos se necesita poner en 11 los dos MSB y despus 01 para referirse al FREQ0 o 10 para el FREQ1. En la pgina de la empresa analog device se encuentra una herramienta dedicada al funcionamiento de los dispositivos DDS: http://designtools.analog.com/dt/ad98334/ad9833.html Un tutorial completo sobre la tecnologa DDS se puede encontrar en: http://www.analog.com/static/imported-files/tutorials/450968421DDS_Tutorial_rev12-299.pdf
Figura B.6. Grficas de salida del AD9833 a 1 MHz.
APNDICE C. ECUACIONES PARA EL CIRCUITO HOWLAND MODIFICADO.
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Figura C.1 Circuito de Corriente. A continuacin se presentan las ecuaciones para la corriente de salida y la impedancia de salida del generador MMH (Monopolar Modified Howland generator) de la figura 30 de la seccin 4.3.2. Se asume que el amplificador operacional OPA656 es ideal, por lo tanto, el voltaje en el nodo A es el voltaje VR4 a travs del resistor R4 como se muestra en la ecuacin C.1.
VA= R4R4+ R5* VC

Ec. C.1 Donde VC es el voltaje en la carga RL. Aplicando las leyes de Kirchhoff a la rama de retroalimentacin negativa y la ley de Ohm al resistor de retroalimentacin R2, el voltaje VB en el nodo B puede ser obtenido de acuerdo a la ecuacin C.2.
VB= 1+R2R1*VA-R2R2*Vi
Ec. C.2 Sustituyendo la ecuacin R.1 en la ecuacin C.2, se puede obtener lo siguiente.
VB=R4R4+R5*1+R2R1* VL- R2R1* Vi

Ec. C.3 Donde VL es el voltaje a travs de la carga RL. La corriente de salida Iout puede ser obtenida aplicando las leyes de Kirchhoff en el nodo B, de la siguiente forma:
Iout= IZ3-IR5= VBZ3-1Z3+1R4+R5*VL

Ec. C.4 Donde IZ3 es la corriente que fluye en la impedancia Z3 derivada de la combinacin del resistor R3 y el capacitor C3. Finalmente, la corriente de salida Iout puede ser obtenida sustituyendo la ecuacin E.3 en la ecuacin E.4 de la siguiente forma:
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Iout= R4R2-R1R5-R1Z3Z3R1*R4+R5*VL-R2R1Z3*Vi
Ec. C.5 El primer trmino de la ecuacin E.5 es la corriente que no fluye en la carga. Esta corriente fluye a tierra por medio de una impedancia de salida equivalente del VCCS. Por lo tanto, la impedancia de salida est definida como el radio entre el cambio en el voltaje de carga y el cambio en la corriente que fluyen en la carga. Como resultado, la impedancia de salida para este VCCS puede ser calculada de acuerdo a la ecuacin C.6.
Zout=VLIL=Z3R1*(R4+R5)R4R2-R1R5-R1Z3
EC. C.6
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APNDICE D. LISTADO DEL PROGRAMA.

/*/////////////////////////////////////////// // LCD //
///////////////////////////////////////////*/
#include <p18f4520.h> #include <delays.h> #include <stdio.h> #include <stdlib.h> #include <math.h> #include <adc.h>
// incluimos libreria del PIC // incluimos libreria de retardos // incluimos libreria de conversiones // incluimos libreria de salida // incluimos libreria matematica // incluimos libreria del ADC
/*///////////////////////////////////////// // configuracion de fuses // /////////////////////////////////////////*/
#pragma config OSC = XT #pragma config FCMEN = OFF #pragma config IESO = OFF #pragma config PWRT = ON #pragma config BOREN = OFF #pragma config WDT = OFF #pragma config MCLRE = OFF #pragma config PBADEN = OFF #pragma config LVP = OFF /*///////////////////////////// // Alias PIN //
// oscilador de cristal // Fail-Safe Clock Monitor disabled // Interrupciones deshabilitadas // power up time disabled // will not reset the device for a fail in vdd // not will reset for time-out // MCLR is disabled // not use PBADEN for ADC chanels configuration.
/////////////////////////////*/
#define LCD_PORTD PORTD #define LCD_TRISD TRISD
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#define TCL_PORTB PORTB #define TCL_TRISB TRISB
//lineas de control #define LCD_E PORTDbits.RD3 #define LCD_RW PORTDbits.RD1 #define LCD_RS PORTDbits.RD2 // habilita LCD // lectura (RW = 1) -- escritura (RW = 0) // modo de dato (RW = 1) -- de comando (RW = 0)
//canales para el ADC #define canal_0 ADC_CH0 #define canal_1 ADC_CH1 // canal AN0 del ADC para Vmag del AD8302 // canal AN1 del ADC para Vphs del AD8302
/*//////////////////////////////////////////// // Delays necesarios ////////////////////////////////////////////*/ //
//delays para la LCD
void delay100us (void) {Delay100TCYx(1); return; }
void delay5ms (void) {Delay1KTCYx(15); return; }
void delay3s (void) {Delay10KTCYx(300); return; }
void delay10s (void) {Delay10KTCYx(1000); return; }
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//delays para el teclado
//antirrebotes
/*/////////////////////////// // LCD Enable ////////////////////////////*/ //
void enable(void) { LCD_E = 1; Nop(); LCD_E = 0; Nop(); }
/*/////////////////////////////////////////// // Enviar nibles LCD ////////////////////////////////////////////*/ //
void send_nible(unsigned char b) { LCD_PORTD = (LCD_PORTD & 0x0F) | (b & 0xF0); enable(); }
void send_byte(unsigned char b) { send_nible(b); send_nible(b << 4); //nible bajo //nible alto
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}
/*/////////////////////////////////////////// // Enviar comando ////////////////////////////////////////////*/ //
void send_cmd(unsigned char b) { LCD_RS = 0; send_byte(b); delay5ms(); } //en modo de comando
/*///////////////////////////// // Enviar dato //////////////////////////////*/ //
void send_data(unsigned char b) { LCD_RS = 1; send_byte(b); delay100us(); } // en modo de dato
/*//////////////////////////////////// // Escribir cadena ////////////////////////////////////*/ //
void send_CadLCD(const rom unsigned char *buffer) { while(*buffer) { send_data(*buffer); buffer++; }
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return; }
/*//////////////////////////////////// // Escribir variable //
////////////////////////////////////*/
void send_VarLCD(unsigned char *buffer) { while(*buffer) { send_data(*buffer); buffer++; } return; }
/*//////////////////////////////////// // Inicializacion LCD // ////////////////////////////////////*/
void lcd_init() { delay15ms(); //Delay inicial para inicializar la LCD LCD_E = 0; LCD_RW = 0; LCD_RS = 0;
//Inicia inicializacion send_nible(0x30); delay5ms(); send_nible(0x30); delay5ms(); send_nible(0x30);
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delay5ms(); send_nible(0x20); delay100us(); // interface de 4 bits
send_cmd(0b00101000); send_cmd(0b00001000); send_cmd(0b00001100); send_cmd(0b00000110); send_cmd(0b00000010); send_cmd(0b00000001); delay15ms(); delay15ms(); }
//Function set: 4 bit interface //lcd off //lcd on, cursor on, blink off //Entry mode: increment, no shift //Cursor home //Clear DDRAM/LCD //Delay final para inicializar LCD
/*/////////////////////////////////////////////////////////////////////// // funcion barrido para teclado //
////////////////////////////////////////////////////////////////////////*/
unsigned char barrido(unsigned char i) { unsigned char codigo; codigo = 0; switch (i) { case 0: codigo = 0b11111110; case 1: codigo = 0b11111101; case 2: codigo = 0b11111011; case 3: codigo = 0b11110111; return (codigo); } } break; break; break; break;
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/*///////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////// // funcion para leer tecla //
//////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////*/
unsigned char Lee_Tecla (unsigned valor3,unsigned char valor4) {
char
u_d_c,unsigned char valor1,unsigned char valor2,unsigned char
unsigned char tecla, posi, i,a_1[1],b_2[1],c_3[1],d_4[1],e_5[1],codigo;
tecla=0; i=0; posi=0; codigo=0; INTCON=0; INTCON2bits.RBPU=0; // deshabilito interrupciones // habilito Pullups
// inicia barrido para lectura de tecla.//
TRISB = 0xF0; PORTB = 0; send_cmd(1); delay15ms(); send_CadLCD("Teclea la frec.: "); send_cmd(192); send_CadLCD("**Frec. = "); // Pasamos a la segunda linea del LCD itoa(valor1,a_1); itoa(valor2,b_2); itoa(valor3,c_3); itoa(valor4,d_4); // convertimos a cadena
if (u_d_c == 0x01) {send_VarLCD(a_1);} if (u_d_c == 0x02) {send_VarLCD(b_2);} if (u_d_c == 0x03) {send_VarLCD(c_3);} if (u_d_c == 0x04) {send_VarLCD(d_4);} // Mostramos valor 1, 2, 3 y 4 // Mostramos valor 1, 2 y 3 // Mostramos valor1 y 2 // Mostramos valor1
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for (i=0; i<=3; i++) { codigo = barrido(i); PORTB = codigo;
// hacemos el chequeo de cada uno de los pines superiores del PORTB // para detectar columna if (PORTBbits.RB4 == 0) { delay100ms(); if (PORTBbits.RB4 == 0) { while (PORTBbits.RB4 == 0) { Nop();} posi = 1; break; } } if (PORTBbits.RB5 == 0) { delay100ms(); if (PORTBbits.RB5 == 0) { while (PORTBbits.RB5 == 0) { Nop();} posi = 2; break; } } if (PORTBbits.RB6 == 0) { delay100ms(); if (PORTBbits.RB6 == 0) { while (PORTBbits.RB6 == 0) { Nop();} posi = 3; break; }
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} if (PORTBbits.RB7 == 0) { delay100ms(); if (PORTBbits.RB7 == 0) { while (PORTBbits.RB7 == 0) { Nop();} posi = 4; break; } } delay5ms(); if (i == 3) {i = -1;} } // case que detecta fila y despues tecla. switch (posi) { case 1: if (i == 0) { if (i == 1) { if (i == 2) { if (i == 3) { case 2: if (i == 0) { if (i == 1) { if (i == 2) { if (i == 3) tecla = 9; break;} tecla = 6; break;} tecla = 3; break;} tecla = 13; break;} tecla = 12; break;} tecla =11; break;} tecla = 10; break;}
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{ case 3: if (i == 0) { if (i == 1) { if (i == 2) { if (i == 3) { tecla = 0; break;} tecla = 8; break;} tecla = 5; break;} tecla = 2; break;} tecla = 16; break;}
case 4: if (i == 0) { if (i == 1) { if (i == 2) { if (i == 3) { return (tecla); } } tecla = 15; break;} tecla = 7; break;} tecla = 4; break;} tecla = 1; break;}
/*///////////////////////////////////////////////////////////////////////// // Genarar valor de frecuencia //
/////////////////////////////////////////////////////////////////////////*/
unsigned short long generar_valor (void) { abrimos la funcion main unsigned char tecla,u_dec_cent; unsigned short long Val_fin,valor1,valor2,valor3,valor4; u_dec_cent=5; valor1=0; valor2=0; valor3=0; valor4=0; //
tecla = Lee_Tecla(u_dec_cent, valor1, valor2, valor3, valor4);
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while (tecla >= 10) {send_cmd(1);send_CadLCD("Oprima digitos "); send_cmd(192); send_CadLCD("primero");delay10s(); tecla = Lee_Tecla(u_dec_cent,valor1,valor2,valor3,valor4);}
u_dec_cent=4; valor4 = tecla;
tecla = Lee_Tecla(u_dec_cent,valor1,valor2,valor3,valor4);
if (tecla <= 9) {u_dec_cent=3; valor3 = valor4; valor4 = tecla;} else { if (tecla == 10) {Val_fin = valor4;} if (tecla == 11) {Val_fin = valor4*1000;} if (tecla == 12) {Val_fin = 0;} return (Val_fin); } // el valor de la frecuencia es de 1 digitos.
if (tecla <= 9) {u_dec_cent=2; valor2 = valor3; valor3 = valor4; valor4 = tecla;} else { if (tecla == 10) {Val_fin = ((valor3*10)+ valor4);} if (tecla == 11) {Val_fin = ((valor3*10)+ valor4)* 1000;} if (tecla == 12) {Val_fin = 0;} // el valor de la frecuencia es de 2 digitos.
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return (Val_fin); }
if (tecla <= 9) {u_dec_cent=1; valor1 = valor2; valor2 = valor3; valor3 = valor4; valor4 = tecla;} else { if (tecla == 10) {Val_fin = (valor2 * 100) + (valor3 * 10)+ valor4;} if (tecla == 11) {Val_fin = ((valor2 * 100) + (valor3 * 10)+ valor4) * 1000;} if (tecla == 12) {Val_fin = 0;} return (Val_fin); } // el valor de la frecuencia es de 3 digitos.
if (tecla <= 9) {u_dec_cent=1; valor1 = valor2; valor2 = valor3; valor3 = valor4; valor4 = tecla;} else { if (tecla == 10) {Val_fin = (valor1 * 1000)+(valor2 * 100) + (valor3 * 10)+ valor4;} if (tecla == 11) {Val_fin = ((valor1 * 1000)+(valor2 * 100) + (valor3 * 10)+ valor4) * 1000;} if (tecla == 12) {Val_fin = 0;} return (Val_fin); } // el valor de la frecuencia es de 4 digitos.
while (tecla <= 9) {send_cmd(1); send_CadLCD("No valor mayor ");
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send_cmd(192); send_CadLCD(" a 4 digitos ");delay10s(); tecla = Lee_Tecla(u_dec_cent,valor1,valor2,valor3,valor4);}
if (tecla == 10) {Val_fin = (valor1 * 1000)+(valor2 * 100) + (valor3 * 10)+ valor4;} if (tecla == 11) {Val_fin = ((valor1 * 1000)+(valor2 * 100) + (valor3 * 10)+ valor4) * 1000;} if (tecla == 12) {Val_fin = 0;} return (Val_fin); }
/*//////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////// // funcion operacion magnitud //
//////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////*/ float OperMag (float aux1) { aux1 = 100 * (pow (10,(((aux1*0.0048828)-0.9) /0.6))); aux1 = aux1 * 100; return aux1; } // valor de magnitud
/*///////////////////////////////////////////////////////////////////////// // funcion operacion fase //
/////////////////////////////////////////////////////////////////////////*/ float OperFase (float aux2) { aux2 = ((((0.9-(aux2*0.0048828))/0.01)+90)); aux2 = (aux2 * 100); return aux2; } // valor de fase
/*//////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////
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// funcion operacion parte real //
//////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////////*/ float OperReal (float aux1, float aux2) { aux1 = (aux1 * 6.283) / 360; aux1 = sin ((-aux1)); aux2 = (6 * aux2); return aux2; } // conversion de grados a radianes // valor de magnitud
/*///////////////////////////////////////////////////////////////////////// // funcion operacion parte compleja //
/////////////////////////////////////////////////////////////////////////*/ float OperImag (float aux1, float aux2) { aux1 = (aux1 * 6.283) / 360; // conversion de grados a radianes aux1 = cos(aux1); aux2 = (7 * aux2); return aux2; } // valor de fase
/*////////////////////////////////////////////////////// // desplegar magnitud y fase //
//////////////////////////////////////////////////////*/ void Mag_Fase (float aux1, float aux2) { int magint, faseint, magdec, fasedec, mag2, fase2; float mag, fase, real, imag; char i1s[4], i2s[4], i3s[4], i4s[4]; // variables para magnitud y fase.
mag2 = aux1; magint = mag2/100; magdec = mag2%100;
pg. 99

itoa(magint,i1s); itoa(magdec,i2s); // convertimos parte entera de mag. a cadena // convertimos parte decimal de mag. a cadena
fase2 = aux2; faseint = fase2/100; fasedec = fase2%100; itoa(faseint,i3s); itoa(fasedec,i4s); // convertimos parte entera de fase. a cadena // convertimos parte decimal de fase. a cadena
// Mostramos valores de magnitud y fase en LCD.
send_cmd(1); send_CadLCD("mag: "); send_VarLCD(i1s); send_CadLCD("."); send_VarLCD(i2s); send_CadLCD(" Ohm"); send_cmd(192); send_CadLCD("Fase: -"); send_VarLCD (i3s); send_CadLCD("."); send_VarLCD(i4s); send_CadLCD(" grd"); delay500ms(); delay10s(); } // mensaje de grados // Pausa de 0.5 seg // mostramos Mag y fase solo 10 segundos // Mostramos valor de fase. parte decimal // mensaje de ohm // Pasamos a la segunda linea del LCD // Mostramos valor de fase. parte entera // Mostramos valor de mag. parte decimal
/*////////////////////////////////////////////
pg. 100

// Funcion principal ////////////////////////////////////////////*/ //
void main() { unsigned char regresa, fr[5]; unsigned long frec; unsigned int leeADC1, leeADC2; float mag, fase;
frec = 0; regresa=0;
LCD_TRISD = 0x00; LCD_PORTD = 0x00; ADCON1=0x0F; // incluimos libreria ADC con canales AN0 y AN1 para conversion y Vref = Vcc = 5V OpenADC( ADC_FOSC_4 & ADC_RIGHT_JUST & ADC_2_TAD, ADC_CH0 & ADC_CH1 & ADC_INT_OFF & ADC_VREFPLUS_VDD & ADC_VREFMINUS_VSS, 13); // Inicializamos la LCD lcd_init(); send_CadLCD(" ***TECLADO*** "); delay10s(); while (regresa == 0) { frec = generar_valor(); send_cmd(1); if (frec < 100 || frec > 1000000) {regresa = 0; send_CadLCD("Solo rango de:");send_cmd(192); send_CadLCD("100Hz <Frec> 1MHz");delay10s();} else {regresa = 1;} }
send_cmd(1); ultoa (frec,fr);
pg. 101

send_CadLCD("Frecuencia"); send_cmd(192); send_CadLCD("F = "); send_VarLCD(fr); send_CadLCD(" Hz"); delay10s();
send_cmd(1);send_CadLCD("teclado"); send_cmd(192); send_CadLCD("*** OK ***");delay10s(); send_cmd(1);send_CadLCD("**** ADC ****"); send_cmd(192); delay10s();
// leemos canal 1 del ADC SetChanADC(canal_0 ); ConvertADC(); while (BusyADC()); leeADC1 = ReadADC(); mag = OperMag(leeADC1); // Seleccin CANAL 0 (AN0) pin 2 del micro. // Activamos la conversion // Esperamos a que termine la conversion // guardamos el valor del ADC en mag
// leemos canal 2 del ADC SetChanADC(canal_1 ); ConvertADC(); while (BusyADC()); leeADC2 = ReadADC(); fase = OperFase(leeADC2); Mag_Fase (mag,fase); delay10s(); send_cmd(1);send_CadLCD(" ADC "); send_cmd(192); // Seleccin CANAL 1 (AN0) PIN 3 MICRO // Activamos la conversion // Esperamos a que termine la conversion // guardamos el valor del ADC en fase
send_CadLCD("*** OK ***");delay10s(); while(1) { } } //Ciclo
pg. 102

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Instituto Tecnolgico de Celaya

INSTITUTO TECNOLGICO DE CELAYA

DISEO DE UN MICROSENSOR PARA LA CARACTERIZACIN DE LAS PROPIEDADES ELCTRICAS DE LOS FRUTOS.

QUE PARA OBTENER EL TTULO DE: MAESTRO EN CIENCIAS EN INGENIERA ELECTRNICA

PRESENTA: CARLOS ISRAEL VALLEJO IBARRA.

ASESOR: DR. JUAN PRADO OLIVAREZ

CELAYA, GTO. JUNIO 2011

1. INTRODUCCIN A LAS MEDIDAS DE BIOIMPEDANCIA ELCTRICA EN TEJIDOS BIOLGICOSY SOLUCIONES SALINAS 15 16 17

Antecedentes de la impedancia compleja en tejidos biolgicos

1.4. 1.5. 1.6.

INSTRUMENTACIN EN LA ESPECTROSCOPA DE BIOIMPEDANCIA Electrodos de medicin 30 30

2.1.1. Impedancia de electrodo 2.1.2. Potenciales de offset

2.1.3. La interfase electrodo tejido

2.1.4. Electrodos invasivos y no invasivos 2.1.6. Geometra de los electrodos 2.2.

2.1.5. Materiales para la elaboracin de los electrodos 35

2.1.7. Factores de seleccin para los electrodos

2.2.1. El sistema de dos electrodos (sistema dipolar)

Instituto Tecnolgico de Celaya

La fuente de excitacin en la espectroscopa de impedancia

DESARROLLO Y EXPERIMENTACIN Simulacin en FEMLAB 46

3.3.1. Fuente de corriente

3.3.1.2.Validacin del circuito Howland Modificado

3.3.4. Diagrama general del circuito utilizado para la medicin de impedancia 61

Grficas y resultados del sistema sin acoplamiento de electrodos 63

Grficas y resultados del sistema con acoplamiento de electrodos 67

DISCUSIN Y CONCLUSIONES REFERENCIAS 76

SECCIN DE APNDICES APNDICE A. CIRCUITO DETECTOR DE FASEAD8202 80 84 91

Instituto Tecnolgico de Celaya

NOMENCLATURA Y ACRNIMOS Nomenclatura

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CST: Contenido de slidos solubles totales.

EDB: Espectroscopa de bioimpedancia.

AI: Amplificador de instrumentacin.

FCCV: Fuente de corriente controlada por voltaje.

CHM: Circuito Howland Modificado.

FBEC: Fuente basada en el espejo de corriente.

SDD: Sntesis digital directa.

DGF: Detector de ganancia y fase AD8302.

LCD: Pantalla de cristal lquido que.

EIE: Espectroscopa de Impedancia Elctrica.

EF: Elementos finitos.

MI: Microbiologa de Impedancia.

Instituto Tecnolgico de Celaya

NDICE DE FIGURAS Y TABLAS ndice de Figuras

CAPTULO II Figura 10. Interfase electrodo-electrolito 32 32

Figura 21. Ejemplo de un amplificador de instrumentacin 45

Instituto Tecnolgico de Celaya

Figura 39. Representacin grfica de Cole-Cole para R=200 y C=0.1uF

ndice de Tablas pg. 10

Instituto Tecnolgico de Celaya

Tabla 3. Coeficientes para el agua utilizados para la simulacin en FEMLAB

Implementar una tcnica sencilla, efectiva

y capaz de llevar a cabo tales mediciones de

Instituto Tecnolgico de Celaya

CAPTULO 1 INTRODUCCIN A LAS MEDIDAS DE BIOIMPEDANCIA.

Antecedentes de la impedancia compleja en tejidos biolgicos.

Las medidas de impedancia elctrica

Definicin de impedancia elctrica en soluciones y tejidos biolgicos.

Figura 1. Modelo para la medicin de impedancia.

Figura 2. La impedancia se comporta bsicamente como un fasor.

Instituto Tecnolgico de Celaya

La impedancia compleja, modelo ideal y su relacin con la permitividad y la conductividad.

Figura 3. Modelo de celda ideal. (Geddes and Baker, 1990).

0 = coulombs2/N.m2 es la permitividad del vaco. De esta definicin de constante