II. MTODOS DE DETECCIN Y CONTROL DE LA BIOCORROSIN.

La inevitable presencia y posterior actividad de los microorganismos en el agua de alimentacin causa BE ya sea en agua de pozo de ri, estatuario o marina (Inverson, 1987). El resultado del BE, es funcin de la carga microbiana y de las caractersticas operacionales del sistema (velocidad de flujo, temperatura, diseo estructural), por ello la secuencia de los procesos correspondientes a su establecimiento y en consecuencia de los problemas de corrosin (Touvinen y Mair, 1986). Generalmente los tratamientos qumico implementados en a industria, no contemplan las interacciones entra los depsitos biolgicos e inorgnicos, ni la compatibilidad entre un tratamiento inhibidor de corrosin y un biocida de aplicacin simultanea (Kobrin, 1993). Las medidas para eliminar el BE, coinciden con el control de los depsitos orgnicos, aunque generalmente son estrategias que deben adecuarse al problema (Kearns y Little, 1994). El registro del sistema debe incluir variable mtodos que permitan medir el proceso dela BC y el BE. El mtodo mas frecuente utilizado en el control de BE es por clorinacin peridica o continua del agua de alimentacin, para matar los microorganismos de la BP y solubilizar parcialmente el MPE (De Beer et al., 1994), que cohesiona los componentes dela BP. En ciertos sistemas la cloracin no se emplea por razones de incompatibilidad qumica y ambiental. Lo cual ha llevado a implementar tratamiento biocidas y dispersantes de concepcin mas moderna con especula nfasis en la preservacin del ambiente (Leal et al., 1994). En investigaciones recientes se ha comprobado que la concentracin de cloro en el interior de la BP, con solo alcanza a los estratos mas superficiales (De Beer et al., 1994) y se limitan a una concentracin efectiva que representa solo el 20% del nivel del cloro en la fase liquida. Estas limitaciones en el uso del cloro en los ultimo aos, ha concentrado la atencin en otros biocidas alternativos de mejor compatibilidad con el ambiente (Leal et al., 1994). Entre ellos, el ozono es un biocida prometedor. La calidad de un biocida se evala en funcin de que no se pierda rpidamente se mxima actividad contra los microorganismos de una BP, responsables de la corrosin, periodo breve, por ello se considera que los mejores biocidas, deben tener propiedades pasavantes (proteccin), sobre ciertos metales y relaciones comunes en la industria e incluso accin antiincrustante, para evitar la acumulacin de nutrientes que atraen a los causantes de BC (Kobrin, 1993). En los ltimos aos el inters por el ozono como biocida en el sistema de enfriamiento, ha aumentado y numerosos reportes, as u factibilidad econmica ha sido recomienda por NACE. Identificacin de la BC. Aspecto superficial de la aleacin. Una de las formas de identificar la BC es la inspeccin microscpica de la muestra (Cragnolino, 1983).Varios tipos de cambios en la superficie del metal puede ser atribuidos a la presencia de microorganismos: depsito caractersticos, blandos y/o mucilaginosos (Dester et al., 1991) tubrculos o excrecencias del matal (Cragnolino, 1983; Kearns y Little, 1994) que contiene microorganismos vivos y perforaciones en las superficie de aleacin de acero inoxidable (Ballesteros et al., 1995; BallesterosAlmanza et al., 2000) acero ala carbn aleaciones de cobre (Cragnolino, 1983), en general distribuidos irregularmente, pequeos orificios con cavidades formadas por debajo de la superficie (Daumas et al., 1988). Estas estructuras son frecuentes en el

acero inoxidable por la actividad de bacterias del genero Gallionella (Belkin et al, 1986; Belkin et al, 1986). Estras brillantes, visibles despus de la remocin de depsitos (Rossmoore y Rossmoore. 1993). El aspecto de los depsitos pueden indicar cuales son los microorganismos participantes: fibroso; hongos filamentosos (Hill et al., 1987) negro: bacterias reductoras de sulfato (Daumas et al., 1988) naranja o castao: bacterias oxidantes de hierro como Gallionella spp,(King, 1995), mientras que las bacterias oxidantes de azufre con el genero Thiobacillus spp, grupo conocido que produce cambios en el material de color amarrillo, debido a la liberacin de cido sulfurillo que causan la oxidacin (corrosin del metal), o bien el color marrn del material capsular (mucopolisacridos), producidos por los microorganismos para adherirse y atrapar nutrientes, lo cual le da un aspecto viscoso, de las bacteria formadores de limo. Sin embargo esto es lo principio el anlisis microbiolgico, es fundamental para confirmar que la causa tiene origen biolgico. Todo lo anterior esta resumido de manera sencilla en el cuadro 2, lo cual permite realizar un diagnostico rpido de la BC (Childers et al., 1992). Dinmica de la biocorrosin. Es preciso identificar y enumerar los microorganismos causantes de la corrosin. As como: bacterias aerbicas totales, bacterias anaerbicas, hongos, que son indicadoras de la gravedad del problema (Sanders y Hamilton, 1986). Los microorganismos suspendidos en la fase planctnica causan el deterioro de la superficie metlica, por la produccin de metabolito corrosivos o indirectamente por el consumo de los inhibidores de la corrosin (Duquette, 1986; Gaylarde). La corrosin generalizada es una forma frecuente de corrosin de los metales atacados por los microorganismos adheridos a la superficie de la BP causan corrosin localizada en general mas severa (Videla, 1989). Se observa puntiforme, estras o reas brillantez en el metal, acuerdo con la localizacin y el tipo de depsito. La deteccin de los microorganismos se realiza mediante muestreos, de los depsitos de frase acuosa como se ha sealado en los cuadros 2 y 3 (Blumentals et al., 1990; Kearns y Lettle, 1994). Por ello existen laboratorios especializados en anlisis de muestras, para detectar la BC en base en diferentes aspectos biolgicos del deterioro demateriales, se han desarrollado recientemente mtodos como los empleados en biologa molecular (Belkin et al., 1986; Fiala y Stetter, 1986) a los mtodos elctricos (Dester et al., 1991) y aquellos que se usan como indicacin de la BC su actividad metablica: consumo de oxigeno, y produccin de CO2, cinticamente enzimtico. El anlisis de los depsitos pueden indicar el tipo de microorganismo de actividad: compuestos de azufre reducido (Sanders y Hamilton, 1986). Azufre oxidado, bacterias quimiolitotroficas del azufre (Alexander, 1995; Childers et al., 1992). xidos de hierro por bacterias quimiolitotroficas de este elemento (Brock y Gustafson, 1976). Las tcnicas empleadas son mtodos de rutina en qumica analtica y varan desde el microanlisis a la espectrometra de masa. El anlisis microbiolgico consta de dos partes (Kearns y Little, 1994): i) determinacin de microorganismos totales como la principal herramienta son los mtodos pticos o inmunolgicos. ii) deteccin, enumeracin e investigacin de microorganismos especifico como se presentan en los cuadros 2 y 4. Por ello de manera convencional se han sealado bsicamente tres mtodos de deteccin de la BC: i) enumeracin directa total: de clula viables, activas y latentes incluyen las muertas ii) clulas visibles (que se reproducen) en este caso se utiliza el crecimiento de las clulas en medios de cultivos

generales y/o selectivos y iii) la actividad celular (que no necesariamente es su cultivo artificial). Cuadro 2. Tcnicas pruebas de laboratorio para el diagnstico de la corrosin causada por microorganismos.
Test Organismos detectados Base de deteccin Detec. anaerbica + Uso en Rapidez campo Sensibilidad Costo

Plaqueo

Bacterias y hongos Crecimiento en medios Vivos slidos Bacterias y hongos Crecimiento Vivos

"Dip slides"

NMP

Organismos vivos

Crecimiento en medios lquidos

QuimiLuminiscencia ELISA

Organismos vivos

Evaluacin de + ATP

Org. Especificos Vivos y muertos

inmunolgico + (molculas superf) Inmunolgico + (molculas Superf.)

InmunoFluorescencia

Org. Especificos Vivos y muertos

M/A

Hidrogenasa

Org. Activos (hidrogenasa posit)

Actividad Enzimatica

B= bajo M= medio A= alto ATP = Trifosfato de adenosina (compuesto de transferencia de energia de las clulas). ELISA ensayo inmunoenzimatico (Manual prctico de biocorrosin y biofoulling para la industria, 1995). Aqu se considera a accin de una enzima, o la liberacin de un producto especifico del metabolismo de los microorganismos involucrados, cultivarlos. Por ello las enzimas como sustrato para su transformacin. Cuadro 3. Pruebas bsicas para el diagnostico sencillo, rpido y eficaz de biocorrosin en diversos ambientes.

Parmetro Microscopa Facilidad Rapidez Aparato completo Personal entrenado Sensibilidad Biofilms in situ -finos -densos Costo + + + + + +

Inmunologa Vivas

Activas

0 + + + -

+ 0

+ + 0 0 0 + + 0

+ = ventaja - = desventaja 0 = normal (Manual prctico de biocorrosin y biofoulling para la industria, 1995). De tal forma que la codificacin genetica de ciertas enzimas en bacterias relacionadas directamente con la corrosin, ha permitido la elaboracin de "Kits" que facilitan la rpida deteccin de los microorganismos ejemplo de ello, se presenta en la tabla 1. Kit hidrogenaza Rapidchek MR. El Kit hidrogenasa se basa en la determinacin de la actividad de la hodrogenasa (Bolivin, 1990; Bryant et al., 1991; Burdige y Nelson, 1986), enzima del metabolismo del Hidrgeno en un amplio numero de bacterias anaerbicas como: Desulfovidrio, Desulfotomaculum, Clostridium, en la BC. Esta enzima cataliza la reduccin H2---------2H+ +2 e- oxida el hidrgeno que proviene de la accin catdica y es detectado por un indicador del potencial redox (Kearns y Little, 1994; King, 1995), aunque un aspecto importante que debe considerarse son las

condiciones a las cuales muestran deben someterse para el diagnostico de la BC como se muestra en el cuadro 5. Cuadro 4. Pruebas comerciales para el diagnostico de biocorrosin en general..
Nombre comercial Sanicheck MR Principio Crecimiento y produccin de H2S en medio slido ELISA para detencin de la enzimaAPS Fabricante Biosan Laboratories Inc., Warren. MI, USA

RapidcheckMR

HydrogenaseMR

BTI-SRBMR

Strategic Dianostic Inc., Deteccin de la enzima hidrogenasa por reaccion Newark,DE, USA colorimetrica Caproco International Inc., Crecimiento y produccin Conroe, TX, USA De H2S Bioindustrial Technologies Inc., Georgetown, TX, USA

(Manual prctico de biocorrosin y biofoulling para la industria, 1995). La utilizacin del sulfato por las BRS, requieren la actividad de la enzima repara la reduccin del sulfato a sulfito, una reductasa de fosfo-sulfonato de adenosina. Est enzima existe en todas las BRS y se detectan por mtodos inmunolgicos con el Kit Rapidcheck. La actividad de la enzima se demuestra por cambio de color, un indicador. Cuadro 5. Mtodos de dispersin de muestras para detectar biocorrosin.
Diluyentes Agua destilada Soluciones fisiolgicas de cloruro de sodio Soluciones templo de pH adecuada Agua de mar artificial Medio nutritivo Aditivos Agente Redox (por ej. Ascorbato, para el aislamiento de bacterias anaerbicas). Agentes tensioactivo (por ej. Tween 20, para remover celular de muestras particuladas). Mtodos de dispersin Agitacin manual Agitacin elctrica (agitador tipo Vortex) Homogenizador elctrico para muestras slidas. Ultrasonido de baja frecuencia