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La biocompatibilidad se define como la compatibilidad de los materiales dentales y dispositivos de fabricacin artificial con los tejidos y lquidos corporales.

(6) Los materiales dentales pueden ser evaluados mediante pruebas In vitro, las cuales son pruebas que permiten un estudio rpido, reproducible, poco costosa, relativamente simple, aunque su analoga en cavidad oral no es del 100%, ya que no se evidencia la respuesta biolgica exacta del organismo. Otra forma de evaluar los materiales dentales es a travs de estudios en animales In vivo las cuales se realizan directamente sobre mamferos, por lo que la respuesta biolgica es ms significativa que las pruebas In vitro; sin embargo estas son pruebas ms costosas y requieren de mayor tiempo. Finalmente se encuentran las pruebas de evaluacin clnica las cuales son ms concluyentes y relevantes, pero requieren de ms tiempo son mucho ms costosas y tienen implicaciones etico-legales.(6) Las pruebas se han identificado como pruebas iniciales o primarias las cuales incluyen las pruebas de citotoxicidad y las de mutagenicidad o carcinognesis. Las pruebas de citotoxicidad permiten evaluar el efecto de los materiales sobre poblaciones celulares..(7) Dichas pruebas permiten estudiar el metabolismo celular, permiten analizar de forma rpida y econmica varias muestras y permiten su cuantificacin; sin embargo presentan algunas desventajas ya que no permiten evaluar ms de un tipo celular y no permite medir reacciones a largo plazo de algunos procesos orgnicos importantes como la respuesta inflamatoria o inmunolgica.(7) Dentro de las pruebas de citotoxicidad que se encuentran en directo contacto con el tejido celular se encuentran las pruebas sobre nmero y crecimiento de las clulas las cuales pretenden medir el crecimiento celular o la zona de inhibicin que puede presentarse en un cultivo celular luego de ser colocado el material dental. (8) Las pruebas de permeabilidad muestran la facilidad de un colorante para penetrar al interior de la clula utilizando dos tipos de colorantes: los vitales que se transportan activamente al interior de las clulas en donde ste puede quedar retenido si las clulas estn vivas o puede ser expulsado del interior celular si la clula ha muerto. Los colorantes no vitales no son transportados activamente al interior de la clulas si sta se encuentra viva y en contraste es captado internamente en caso de muerte celular.(8) Las pruebas de actividad biosinttica o enzimtica actan a nivel del DNA midiendo la radiacin Beta por medio de un contador de rayos beta. Una de las ms importantes es la prueba de MTT la cual mide la actividad de deshidrogenasa mitocondrial de la clula por medio de la molcula de MTT y determinando la cantidad de formazan producido para observar el nmero de clulas viables.(8) Existen otras pruebas que miden la citotoxicidad cuando el material no est colocado directamente sobre el cultivo celular para semejar algunas situaciones clnicas de la aplicacin de estos materiales. La prueba de cubierta de agar permite la difusin de sustancias txicas de los materiales dentales a travs del agar(9) Y las pruebas de barrera dentinal las cuales permiten que la dentina y sus tbulos dentinales sean la barrera a travs de la cual pueden pasar las sustancias de los materiales dentales.(10)

Las pruebas de mutagenicidad permiten valorar los efectos de los materiales sobre el material gentico celular. Pueden ser de tipo genotxico donde la alteracin se da a nivel del DNA o a nivel epigentico donde el dao se presenta como una alteracin bioqumica celular. Las ms conocidas son la prueba de Ames y la prueba de transformacin celular de styles. Las pruebas secundarias o intermedias permiten medir los niveles de reacciones inflamatorias o de respuestas inmunitarias frente a un material. La prueba de irritacin de mucosas permite determinar si un material puede inflamar mucosas o piel erosionada y por lo general se coloca en contacto de las mejillas de un hmster o de un conejo y luego se realiza una muestra histopatolgica para observar los resultados. La prueba de sensibilizacin cutnea muestra la capacidad que tiene un material de comportarse como un alergeno para el organismo. El material se coloca va intradrmica en animales o en forma de parches o adhesivos para luego mirar si hay formacin de edema o eritema. Y la prueba de implantacin determina la alergenicidad, inflamacin crnica o formacin de tumores, por lo general el material se coloca en tubos de polietileno que se implantan en el dorso de los animales se dejan 1 a 11 semanas o de 1 a 2 aos para luego ser analizados histopatolgicamente(6) Las ltimas pruebas que se utilizan para determinar la biocompatibiliad de un material son las terciarias o pruebas de uso; las cuales se realizan en animales y humanos una vez ya se hayan realizado pruebas primarias, secundarias y una aprobacin del comit internacional tico-legal.(6)

La biocompatibilidad de los materiales utilizados en endodoncia, es de especial inters ya que muchos de sus componentes pueden llegar a producir irritacin o hasta degeneracin de los tejidos circundantes. En el caso de los cementos selladores utilizados, la biocompatibilidad con los tejidos es decisiva ya que estos quedan en contacto directo, especialmente cuando son extrudos hacia los tejidos periapicales.(11) Varias investigaciones han observado la citotoxicidad de los ms comunes cementos selladores encontrando que los cementos a base de xido de zinc-eugenol presentan un alto nivel de citotoxicidad; en contraste con los cementos a base de hidrxido de calcio que han ganado popularidad por su compatibilidad biolgica con los tejidos periapicales.(12) La biocompatibiliad de los cuatro cementos selladores ms comunes (a base de xido de zinceugenol, de hidrxido de calcio, de resinas epxicas o de ionomeros de vidrio)y la posibilidad de encontrar marcadores de PGE2 como seales de inflamacin han sido estudiados en los ltimos aos.. Se han utilizando fibroblastos gingivales y nasales tomados de regiones que presentaban niveles de inflamacin que luego fueron cultivados. La viabilidad celular fue determinada a travs de la medida de la actividad citoslica de las clulas por medio de tintes fluorescentes para tincin del ADN. Para determinar la posible influencia de estos materiales sobre la sntesis de protenas

los fibroblastos fueron sembrados sobre los diferentes materiales en varios pozos. Los cementos a base de hidrxido de calcio y en una escala cercana los cementos a base de xido de zinc-eugenol mostraron de acuerdo con la liberacin de PGE2 un menor efecto citotxico, en contraste con altos valores en la liberacin de PGE2 para los cementos a base de resina epxica o de ionmero de vidrio.(12) Otras tcnicas in vitro utilizando cultivos celulares han sido aplicadas para el estudio de la citotoxicidad de los cementos selladores, entre ellas la prueba MTT ha demostrado ser un buen mtodo de estudio por considerarse una prueba simple, rpida, precisa y que no requiere de radioistopos permitiendo cuantificar exactamente el nmero de clulas viables observando la deshidrogenasa mitocondrial. La cantidad de formazan producida es directamente proporcional al nmero de clulas viables.(13) Algunos investigadores han evaluado el efecto citotxico de tres cementos selladores en clulas del ligamento periodontal de Hmster y en una lnea celular (V79), utilizando Canals, N2, AH26, AHPlus y Sealapex respectivamente y empleando una prueba de MTT. La evaluacin de dichos cementos fue realizada a los 1,2,3, y 7 das encontrando que todos los cementos causaron citotoxicidad tanto para las clulas del ligamento periodontal como para las de la lnea celular. A pesar de que durante el primer da el Sealapex demostr ser el menos citotxico y el AH26 y el N2 los ms citotxicos al anlisis del primer da el nivel de citotoxicidad para estos cementos decreci significativamente llegando a estabilizarse al sptimo da, excepto para el N2 que se mantuvo casi igual durante toda la prueba.(14, 15) La utilizacin de los cementos a base de hidrxido de calcio se ha propuesto como cemento sellador ya que segn esta investigacin, slo muestra leve toxicidad en estados iniciales de fraguado; sin embargo otros reportes indican una considerable filtracin de sustancias permitida por la desintegracin del cemento sellador; esta inestabilidad en un medioambiente acuoso podra aumentar la liberacin de dichas sustancias y conllevar a la falla del tratamiento endodntico (16) El efecto irritante de los cementos selladores tambin ha sido evaluado histopatolgicamante examinando la respuesta del tejido alrededor o en contacto con el material.(17). Para el estudio in vivo de algunos de los cementos selladores (Apexit y Pulp canal) se han utilizado implantes en ratas, colocando cada cemento sellador en tubos de tefln e implantados en la zona dorsal de cada especmen para posteriormente ser removidos despus de 5, 15, 60 y 120 das y preparados histolgicamente para una evaluacin microscpica. Los resultados de esta investigacin se correlacionan con los estudios realizados en cultivos celulares, encontrando que ambos tipos de cementos mostraron una reaccin inflamatoria de moderada a severa hacia el quinto da, con reas de necrosis, caracterizadas por la presencia de neutrfilos, macrfagos y algunas pocas reas con linfocitos y clulas plasmticas, pero que disminuy significativamente entre los 60 y 120 das. La nica diferencia entre ambos materiales fue que el Apexit caus una mayor extensin inicial de la necrosis lo cual es atribuido a su alto pH , pero el Pulp canal mostr irritacin por un tiempo mayor que el Apexit.(18)

Al evaluar cementos a base de resina(Ah26) comparndolos con los de hidrxido de calcio (selapex) y (CRCS) los tubos de tefln implantados en las ratas fueron removidos a los 7,14 y 21 das, preparados histolgicamente y observados microscpicamente encontrando severas reacciones inflamatorias con el AH26 a los 7 das despus de la implantacin con abundantes macrfagos, linfocitos y clulas gigantes de cuerpo extrao, la respuesta a los 14 das fue similar, pero al da 21 ya la inflamacin fue de tipo moderado, mientras que con el CRCS y el Sealapex la inflamacin a los 7 das fue de tipo moderado y disminuy a los 14 y 21 das.(14) Con respecto al Ah26 estos autores estn de acuerdo con otras investigaciones en donde coinciden con el gran efecto irritativo inicial pero es una respuesta tisular que tiende a disminuir progresivamente as como avanza el tiempo. Los otros dos selladores que contienen hidrxido de calcio en su composicin presentaron moderada reaccin inflamatoria que a su vez tambin se redujo gradualmente, aunque el Sealapex no mostr tanta reduccin como el CRCS que contiene xido de zinc y por lo tanto el eugenol ha sido parcialmente remplazado por el eucaliptol. (19) Se realiz otro estudio para evaluar la respuesta inflamatoria de los cementos a base de hidrxido de calcio: Sealapex, CRCS, Apexit, Sealer 26, mediante implantacin subcutnea y en cavidad peritoneal de ratones. Se analiz la respuesta del tejido subcutneo a los 2, 4, 8 y 16 das. En todos los cementos se observ una intensa migracin de neutrfilos durante los periodos iniciales. Se encontraron diferencias en cuanto a la presencia de necrosis y del nmero de clulas inflamatorias. En la fase intermedia, se encontr una marcada diferenciacin celular del sistema fagoctico mononucleado en macrfagos, clulas epiteliales y clulas gigantes multinucleadas con Sealapex. La respuesta fue menos intensa con el CRCS y con el Apexit. La necrosis del tejido se observ nicamente en las interfases con el cemento solamente durante las etapas iniciales con el Sealapex, pero fue observado durante todo el experimento con los otros cementos. Los animales fueron inyectados con soluciones que contenan los cementos selladores y fueron sacrificados a las 6, 24 horas, 5 y 15 das despus. Durante las etapas iniciales (6-24 horas) se observ una intensa migracin de leucocitos polimorfonucleares en la cavidad peritoneal en reapuesta a los cementos. Un incremento de clulas mononucleadas fue observado luego de 6 a 24 horas y a los 5 das para todos los cementos selladores y no se encontraron diferencias en relacin con el grupo control a los 15 das.(20) En otro estudio se evalu la citotoxicidad de varios cementos a base de resina con cementos a base de hidrxido de calcio, mediante el uso de fibroblastos de ratn (L929), encontrndose que el mayor grado de citotoxicidad lo present el AH Plus que mostr igual o mayor citotoxicidad que el AH 26 y que el Diaket, mientras que el Apexit fue el menos txico. (21)