UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

PRACTICA N° 6 Y 7: TRANSFERENCIA GENÉTICA NATURAL POR

Agrobacterium tumefaciens

MSc. Rosa María Liñán Abanto

https://www.youtube.com/watch?v=GCYMtDxo7Xw
OBJETIVOS

o Demostrar la transferencia genética natural a

dicotiledóneas mediada por A. tumefasciens.
o Aislar Agrobacterium tumefasciens de agallas de
dicotiledóneas
 Agrobacterium tumefasciens

o Es una bacteria aerobia facultativa, Gram negativa,

de forma bacilar y no producen esporas
o Forman colonias circulares, en forma de cúpula de
color crema (blanca o beige) y altamente mucosa en
medios ricos en hidratos de carbono.
o Se encuentran comúnmente en la rizósfera de la
planta y sólo infectan los tejidos al ingresar por
heridas.

El patógeno coloniza las heridas e infecta la planta al

transmitir una porción de su plásmido.
Se multiplica en los espacios intercelulares y sólo las
células en contacto con la bacteria se transforman en
cancerígenas.
 MATERIALES

o Muestra biológica: agallas de plantas dicotiledóneas

o Agua destilada estéril.
o Hipoclorito de sodio al 1%
o Set de Gram
o Medios de cultivo: D1, D2M y YEM-RCT
METODOLOGÍA

Desinfectar las agallas sin Enjuagar por 3 pasajes Cortar agallas en dados
cortar por inmersión en 15 min en agua destilada 5 min de 2 × 2 mm en forma
hipoclorito de sodio al 1 %, 5 min estéril c/u aséptica

Sembrar por estrías en 45 Macerar dados en

los medios Agitar en un vórtex
min agua destilada estéril
semidiferenciales y
diferenciales
D1. D2 Coloración
Gram
YEM-RCT
RESULTADOS
CARACTERIZACIÓN BIOQUIMICA DE A. tumefasciens