Marcaje de radiofármacos:

Los más utilizados son los tecneciados ya que son las más fácil de marcar.
Kits fríos o equipos reactivos de marcaje  en radio farmacia
centralizada o en radio farmacia del hospital. Para radiofármacos
tecneciados.

1.Marcaje de kits fríos:

Marcaje: proceso mediante el cual se consigue la unión de átomos o
estructuras a una molécula confiriéndole propiedades específicas
(radiactividad). Se habla de radiomarcación cuando se trata de marcas
radiactivas.
1.1 Radiofármacos tecnificados (elaboración de radiofármacos):
 Equipos reactivos o kit frio.
 99mTc-Pertecnectato de sodio. (sino es tecneciado es un
radiofármaco)
 Incubación y marcaje.
 Control de calidad.
- En esta preparación debemos seguir lo establecido en la ficha técnica del
equipo reactivo. (protocolo que va indicado en la caja)
KIT FRÍO: equipos reactivos, fabricados por la industria radio farmacéutica,
para la preparación extemporánea (al momento) de radiofármacos.
(normalmente solo se usa para el tecnecio)
Características:
 Son considerados medicamentos (R.G.S.).
 Uno o varios viales que contienen todos los reactivos necesarios
para la obtención del radiofármaco final al combinarlo con un
radionucleido (procedente de un generador).
 La mayor parte de estos equipos están diseñados para obtener un
radiofármaco marcado con 99mTc.
Contenido:
 El sustrato a marcar (molécula que vas a marcar con el tc).
El pectecetato de sodio no suele marcar por eso hay que reducirlo
para que aumente el marcaje y se reduce con los agentes
reductores el que más se utiliza el cloruro estañoso.

 El agente reductor (normalmente SnCl2 cloruro estañóso). Lo más

importante sin él no podemos hacer nada.
 Aditivos, si son necesarios. (Ácidos, antioxidantes, soluciones
tamponantes reguladora de PH)
 Una atmósfera inerte (N2 o vacío) para mantener la integridad de
los componentes del kit.
Si la incubación no es correcta, el
marcaje no será completo y se
1.2 Realización del marcaje: obtendrá un radiofármaco defectuoso.

1. Se inyecta en el vial del kit la cantidad necesaria de pertecnetato

eluido del generador. ¡OJO LA PRESIÓN!
2. Agitar hasta disolución completa (enérgica)  Incubación de unos
pocos minutos (estufa)  Dispensación y administración
(radiofármaco)
- Si la incubación es incorrecta te afecta a la eficacia del marcaje.
Después que se pasa la incubación es cuando ya podemos hablar de
radiofármaco, la incubación suele ser a 37 grados centígrados.
Existen otros kits en los que es necesario un incremento de la
temperatura para que la reacción de formación del radiofármaco tenga
lugar (baño de agua hirviendo) 99Tc-MIBI. (sestamini en cardio).
Reducción del 99mTcO4-:
Generador de columna seca 99mTcO4- (+7 valencia) no reactivo, el nº
de átomos de TC en el eluido es muy pequeño 10-9. No se une por acción
directa necesitamos reducir a +3, +5…
Lo reducimos con: ácido ascórbico cloruro, cloruro ferroso, anión estañoso
8sn2+) este último con muy poca cantidad reduce poquito el tecnecio,
el más utilizado.
99mTcO4- + Sn2+  99mTc reducido + Sn 4+ (más reactivo y más
combinable)  no debemos olvidar de tener cuidado para que no se oxide
el tecnecio: https://www.osti.gov/etdeweb/servlets/purl/21262445

 En los kits fríos hay antioxidantes y un ácido para evitar hidrólisis

por el agua.
 No inyectar aire al vial.
En el compuesto marcado con 99mTc podemos encontrarnos con
tipologías diferentes:
 Tecnecio libre (pertecnetato no unido al sustrato) en forma de
pertecnetato (99mTcO4 - ) que no ha sido reducido por el Sn2+:
Esta molécula interfiere en la imagen al ser captada por las
glándulas salivales, tiroides o mucosa gástrica
 Tecnecio hidrolizado como el 99mTcO2 o 99mTc que reacciona con
el Sn2+ hidrolizado: Puede formar coloides que se localizan en el
sistema reticuloendotelial (SER) del hígado y bazo
 Tecnecio unido a la molécula de interés: Es el compuesto deseado
y útil para la exploración en Medicina Nuclear.

2.Control de calidad:
Tras la preparación de un radiofármaco es necesario verificar una serie de
controles para comprobar la calidad del radiofármacocomprobar que el
comportamiento del radiofármaco será el correcto y que de su aplicación
se obtendrá el beneficio que justifica su utilización. (siempre se debe
hacer el control de calidad antes de administrar al paciente)
Los controles de calidad de los radiofármacos afectan a los aspectos físico-
químicos (aspecto, pH), biológicos (libre de microorganismos) y
radiológicos de la preparación radiofarmacéutica.
Cada radiofármaco debe tener su propio plan de control de calidad, según
su naturaleza:
 Los radiofármacos listos para su uso (extemporánea): Su control
debe incluir verificación del acondicionamiento, comprobación de la
identidad, dosis y fecha de calibración, lote de producción y
caducidad, etc. Periódicamente se debe comprobar la actividad,
pureza radionúclido, etc. (viene de una radiofarmacia centralizada)
 Los radiofármacos preparados de generadores y equipos reactivos:
los generadores deben ser inspeccionados como los radiofármacos
listos para su uso.

Los controles de calidad se hacen con el sobrante ya

que tiene que ser estéril
-Controles fisicoquímicos:
Características físicas:
Debemos estar familiarizados con la apariencia física del radiofármaco
(color, transparencia):
 Preparados marcados con 99mTc: transparentes, incoloros o poco
coloreados.
 Preparados de microesferas y macroagregados de albúmina:
blancos
 Presencia de formas hidrolizadas del Tc o del estaño: turbidez.
pH y osmolalidad:
 El pH ideal sería el de la sangre (7,4), pero a veces las necesidades
de conservación obligan a alejarnos de este valor.
 La sangre tiene un alto poder tamponante y permite que el pH del
producto inyectado varíe de 2 a 9. ¡OJO RADIOFÁRMACOS
INTRARRAQUÍDEOS!
 Para analizar el pH de la solución se puede usar un pH metro o
evaluarlo mediante tiras colorimétricas de pH.
 Papel tornasol para el PH y osmolaridad con un aparato que lo
mide.
 Los RF deben isotónicos y de concentración osmolar adecuada para
poder administrar a humanos. Este parámetro se mide por
conductimétrica.
Pureza radionúcleida:
 Fracción de la actividad total que se encuentra en la forma del
núclido deseado presente en el radiofármaco. (pectecnectato
reducido ya marcado) esto se mide en el activímetro (espectro de
emisión).
 En 99mTc son debidas fundamentalmente a la presencia de 99Mo.
 Se analiza el espectro de emisión.
Pureza radioquímica: (Para Tc >95%):
-(cuanta de la actividad total del vial que hemos preparado en la forma
química deseada tecnecio reducido + biomolécula)
  Proporción de actividad total presente en la forma química deseada
(la del radiofármaco).
 Se deben a la alteración producida en el radiofármaco por:
o Acción del solvente.
o Temperatura.
o pH. o Luz.
o Radiólisis.
 En 99mTc, las impurezas radioquímicas son el Tc libre y el Tc
hidrolizado.
 Dan lugar a una baja calidad de la imagen gammagráfica por la
pobre localización del radiofármaco en el órgano de interés y el alto
fondo.
 La pureza radioquímica se determina mediante diversas técnicas
analíticas:
o la precipitación
o la cromatografía: resultado en pocos minutos. La mas usado
o la electroforesis
o la extracción con solventes entre otros
Radioensayó:
Se calcula la dosis por talla y peso
En el proceso:
 Se debe determinar y medir la actividad que debe administrarse a
un individuo concreto.
 El cálculo de la actividad debe realizarse según tablas de dosis que
atienden al peso y la talla del individuo y, en el caso de niños las
dosis deben ser menores que las del adulto y calculadas utilizando
tablas o fórmulas adaptadas.
 La medida de la dosis que se debe administrar se mide con el
activímetro calibrador de dosis.
-controles biológicos:
Lo que sale del generador tiene que ser 
Esterilidad: estéril y a pirógeno, si es estéril es a pirógeno

Ausencia de cualquier tipo de bacteria o microorganismo en la

preparación. Métodos habituales para esterilizar:
- La esterilización en autoclave (10-15 min 121 grados) para
productos termoestable. (sino tiene problema con la temperatura)
 - La filtración por membrana para producto termolábil (termo
sensible) filtro milipore 22µm (se deja y se pone donde haga calor
durante 24 horas y después miras si creció alguna bacteria)
- Para demostrar que el preparado radiofarmacéutico carece de
microorganismos, se deben realizar una serie de test
microbiológicos o mediante un test rápido (3- 24h) (14C-glucosa).

Los ensayos de esterilidad propios de una radiofarmacia son (se le hace

control de calidad): vial de la elución y a los viales del kit frio
- De un elúido no manipulado para chequear el proceso de elución
del generador.
- De restos de un eluído empleado para la preparación de
radiofármacos para detectar la posible contaminación
microbiológica al extraer el 99mTcO4 - del vial del eluído.
- De restos de solución de un kit para detectar la posible
contaminación microbiológica en el proceso de marcaje y extracción
de dosis del kit.
Pirogenidad:
 Falta de capacidad del radiofármaco para producir fiebre.
 La reacción de pirogenicidad tiene lugar entre los 30 minutos y las 2
horas de la administración del radiofármaco y persiste durante unas
10-12 horas.
 Para conocer la pirogenicidad de un preparado se deben hacer
estudios en animales por medio de inyecciones o utilizar el test del
Limulus polyphernus, que se basa en la formación de un gel opaco
cuando se mezclan los pirógenos existentes en la preparación con el
lisado de amebocitos sanguíneos del Límulus polyphemus.
Toxicidad:
 Muy importante calcularlas, aunque se trate de compuestos inertes
y muy baja dosis.
 Se determina la dosis letal 50 (DL50) del radiofármaco trabajando
con lotes de ratones.
 Una vez determinada la DL50, se realizan comprobaciones de la
toxicidad aguda del preparado administrando a ratones el mismo
preparado en dosis por peso corporal entre 100 y 500 veces
 mayores que las que se administran al paciente, controlando la
posible aparición de reacciones adversas en un período de 6 horas
 Los animales serán sacrificados posteriormente y se investigarán
cualquier cambio patológico en sus órganos

3. Marcaje celular:
Pasos:
1. Separación celular, se debe obtener una muestra “pura” celular
(suelen marcas células sanguíneas para obtener serie blanca o
roja) se suele hacer por sedimentación, precipitación o
centrifugación se obtiene el botón celular (al conjunto de células
específicas que vas a marcar con el radiofármaco).
2. Marcaje: coges el radionúclido y el botón celular, obtienes
radiofármaco.
Los radionúclidos más habituales para el marcaje celular:
 Quelados de indio (111I)
 Tecnecio 99 metaestable (99TCm) casi siempre con HMPAO (para
estudiar cerebro)
 Croma 51 en forma de cromato sódico
 TODOS SE UNEN AL BOTON CELULAR QUE CORRESPONDE.
Requisitos para el marcaje celular de un radiofármaco: Componentes biológicos
 Radionúclido adecuado (T1/2, E, etc.).  Células sanguíneas
 Escasa manipulación de células. (leucocitos, eritrocitos y
plaquetas)
 Elevada especificidad para las células de interés.
 Componentes del plasma
 Alta eficiencia de marcaje en plasma. (albúmina)
 Alta estabilidad en plasma.
 No alterar funcionalismo ni viabilidad celular (no desnaturalizar).
 No metabolizable en caso de abandonar la célula
Método no invasivo que aprovecha los patrones de biodistribución
específico de cada población celular, para llevar a cabo estudios cinéticos
o de diagnóstico por la imagen.
 Los radionúclidos más empleados: 99mTc, 111In y 51Cr.
  Para PET: marcaje de hematíes con 68Ga-oxina y 15N-glicina y
plaquetas con 68Gaoxina y 68Gaóxido-N-mercaptopiridina. (oxinas
para PET marcaje de hematíes y plaquetas)
 Marcaje in vitro (Condiciones de trabajo asépticas) con poblaciones
celulares del paciente a partir de una muestra de sangre. (se saca y
se realiza el marcaje en el laboratorio y después se inyecta)
 Finalizado el marcaje y control de calidad reinyectadas; la
biodistribución esperada es función del tipo de célula y de la
patología del paciente.

Es esencial que el
comportamiento de Marcaje de Hematíes:
las células marcadas
Marcaje de hematíes con 99mTc:
 En este caso no es necesaria la separación celular.
 Puede hacerse in vitro, in vivo e in vivitro.
¿Por qué marcaje de hematíes?
1) Son los más abundantes de todos los elementos celulares de la
sangre.
2) Son fáciles de separar y manejar in vitro y no muy susceptibles a los
daños de manipulaciones físicas o químicas.
3) No son tan dependientes in vitro de requerimientos energéticos y
nutricionales como los otros elementos celulares.
4) En relación con otras células muestran mayor facilidad de marcaje
con radionúclidos debido a la hemoglobina, rica en sitios con
posibilidad de unión a metales.