(PO) EFECTO DEL AYUNO Y LA REALIMENTACIN SOBRE LAS CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DEL MSCULO DEL DENTN (Dentex dentex).

Surez, M.D. ; Ruiz-Cara, T , Abelln, E. , Arizcun, M.

(1) (1) (1) (2) (2)

y Cardenete, G.

(3)

Departamento de Biologa Aplicada. La Caada de San Urbano sn. Universidad de Almera. 04120 ALMERA (SPAIN) dsuarez@ual.es (2) Planta de Cultivos Marinos. Instituto Espaol de Oceanografa. Ctra. De la Azoha, s/n. Puerto de Mazarrn. MURCIA (SPAIN) (3) Dpt. Biologa Animal y Ecologa. Facultad de Ciencias. Campus Fuentenueva. Universidad de Granada. 18071 GRANADA (SPAIN). cardenet@ugr.es

Resumen Se ha estudiado la respuesta del msculo del dentn (Dentex dentex) al ayuno y posterior realimentacin a fin de comprobar qu componentes se ven afectados por estos procesos y cual es la capacidad del dentn para soportar periodos de ayuno sin consecuencias graves para su cultivo. Justificacin Los peces en su medio natural se ven frecuentemente sometidos a largos periodos de ayuno por diversas causas; por este motivo, estn muy bien adaptados para movilizar sus componentes corporales como fuente de energa para la supervivencia (Love,1970). En un cultivo intensivo tambin se ven sometidos a periodos en los que no se alimentan, la capacidad del pez para sobrevivir en estos periodos de ayuno va a ser esencial para la rentabilidad del cultivo. La estrategia utilizada para el suministro de energa en etapas de ayuno vara con la especie y con el tipo de alimentacin (Figueiredo-Garutti et al., 2002). La mayora de las especies estudiadas no muestran cambios en la concentracin de glucosa plasmtica despus de varias semanas de ayuno, lo que indica una baja capacidad de movilizacin del glucgeno heptico como almacn de energa. Aunque hay especies que consumen parcialmente sus reservas de glucgeno heptico, preservando una parte a expensas de los depsitos musculares (Soengas et al., 1996). Durante un ayuno prolongado, las protenas procedentes del msculo blanco de la mayora de los telesteos (que constituye cerca de la mitad del peso del pez) son movilizadas con gran intensidad (Beaulieu and Guderley, 1998). La movilizacin de protenas musculares en mamferos se realiza sobre todos los componentes en la misma intensidad (Bates et al., 1983), sin embargo, en peces como el bacalao (Dutil et al., 1998 y Guderley et al., 1996) y el salmn (Momsem et al., 1980) se ha comprobado que est favorecida la movilizacin de protenas sarcoplasmticas frente a las protenas insolubles. El objetivo del presente trabajo es estudiar la influencia del ayuno y la realimentacin sobre la composicin del msculo del dentn (Dentex dentex) a fin de comprobar qu componentes se ven afectados por estos procesos y cual es la capacidad de recuperacin de esta especie del dentn para soportar periodos de ayuno sin consecuencias graves para su cultivo. Material y Mtodos Cuatro lotes de dentones con un peso medio aproximado de 300g, se mantuvieron durante un periodo de 60 das en las instalaciones del Instituto Oceanogrfico de Mazarrn. Dos de los lotes se alimentaron con una dieta comercial y los otros dos se mantuvieron sin alimentacin. Al final del periodo experimental se sacrificaron 3 peces de cada lote. El resto de los peces de cada lote se mantuvieron durante otros 20 das alimentndose con la dieta control. Los animales tomados como muestra en cada tratamiento (Comidos, Ayunados y Realimentados) se anestesiaron introducindolos en agua con esencia de clavo, se diseccionaron y se extrajo la parte anterior del msculo dorsal, que se congel en nitrgeno lquido y se conserv a 80C hasta el momento de los anlisis. Se realizaron las siguientes determinaciones: Separacin y cuantificacin de protenas sarcoplsmicas (solubles) y miofibrilares (insolubles) segn el mtodo descrito por Beaulieu & Guderley (1998). Glucgeno y glucosa se han determinado segn la tcnica de Keppler & Decker (1974). El cido lctico se ha determinado con un kit de Spinreact.

El contenido en colgeno se ha determinado segn el mtodo descrito por Palka et.al (1999), basado en la determinacin del contenido en hidroxiprolina (mtodo ISO 3496; BS 4401 parte11). Para cuantificar los contenidos de colgeno se utiliz un factor de conversin 11.42 (Sato 1989). La separacin de las distintas fracciones de colgeno, ASC (colgeno soluble en cido), PSC (colgeno soluble en pepsina) e ISC (colgeno insoluble) se ha realizado segn el mtodo descrito por Sato et al. (1988). En cada una de las fracciones ASC, PSC e ISC se determin el contenido en Hidroxiprolina. Resultados y Discusin Las modificaciones que se producen en el msculo del dentn como consecuencia de un periodo de ayuno de dos meses afectan a su contenido en lpidos, hidratos de carbono y protenas. La realimentacin permite una recuperacin parcial de todos los componentes a excepcin de las protenas miofibrilares. En 60 das de ayuno, el glucgeno muscular no se ha consumido totalmente, sin embargo, ha habido una drstica disminucin del contenido lipdico y una relativa deplecin de las protenas miofibrilares. Al contrario de los mamferos, que en situaciones de ayuno consumen en primer lugar el glucgeno y a continuacin comienzan a consumir el resto de los componentes musculares, los peces carnvoros presentan dificultades en la movilizacin del glucgeno heptico y muscular, sin que puedan consumirlo totalmente. Esto hecho se ha observado en especies como la trucha (Kieffer y Tufts, 1998) y los autores lo explican debido a la necesidad de conservar un mnimo de poder energtico muscular de utilizacin rpida para mantener su capacidad de ataque o huida. En el msculo de los dentones realimentados se recupera parcialmente el glucgeno, vuelven a disminuir los niveles de glucosa y el contenido en cido lctico disminuye tambin con respecto a los niveles anteriores. Hay una considerable deplecin de los lpidos en el ayuno y una recuperacin de los mismos con la realimentacin que pone de manifiesto la capacidad de los lpidos de hacer frente a etapas de restriccin del alimento frente a otros componentes musculares. El contenido en protenas totales disminuye significativamente en los dentones ayunados, aunque en menor proporcin que los lpidos. Estos resultados son similares a los de Regost et al. (2001) en truchas, que obtienen una deplecin de los lpidos y las protenas musculares del 12 y 5% respectivamente, indicando una relativa capacidad para conservar sus protenas frente a periodos de ayuno. Mientras las protenas sarcoplsmicas no se alteran, las miofibrilares disminuyen estadsticamente en los dentones ayunados pero no se recuperan en los realimentados, sino que permanecen en niveles significativamente inferiores. El consumo preferente de las protenas miofibrilares sobre las sarcoplsmicas indica poca capacidad de adaptacin al ayuno prolongado de esta especie, ya que el componente miofibrilar constituye la parte ms compleja de la clula muscular y de recuperacin ms lenta, como lo indican los bajos valores obtenidos en el msculo de peces realimentados. Estos resultados contrastan con los obtenidos en peces como el bacalao (Dutil et al., 1998 y Guderley et al., 1996) y el salmn (Momsem et al., 1980) en los que est favorecida la movilizacin de protenas sarcoplasmticas frente a las protenas insolubles. Sin embargo, resultados publicados por Beaulieu y Guderley, 1998 muestran en el bacalao aparicin de fragmentos de actina en la fraccin de protenas sarcoplsmicas de peces ayunados, que indican una parcial rotura de las protenas miofibrilares en estos peces. El contenido en colgeno aumenta significativamente en los dentones ayunados y vuelve a disminuir, aunque no hasta los valores iniciales, en los realimentados. La fraccin soluble en pepsina es, de entre las fracciones del colgeno, la que aumenta; mientras las dems permanecen invariables. Este aumento del colgeno muscular se debe fundamentalmente a la disminucin proporcional del resto de los componentes musculares, ya que este componente muscular es uno de los ms importantes en la integridad del mismo y uno de los ltimos en ser consumidos en caso de falta de alimento. La fraccin soluble en pepsina es la parte ms estable de este componente muscular. Agradecimientos Este trabajo ha sido subvencionado por el Proyecto de investigacin del Ministerio de Ciencia y Tecnologa (INIA) ACU00-011-C4-2 Bibliografa BEAULIEU, M.A. Y GUDERLEY, H. 1998. Changes in qualitative composition of white muscle with nutritional status of Atlantic cod, (Gadus morhua). Comparative Biochemistry and Physiology. 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GUDERLEY,H., DUTIL, J.D. Y PELLETIER, D. 1996. The physiological status of Atlantic cod, Gadus morhua, in the wild and the laboratory: estimates of growth rates under field conditions. Can J Fish. Aquat Sci 53 : 550557. ISO 3496; BS 4401 parte 11 (1978). International Organitation for Standarization. ISO 3496-1978. Meat and meat products- Determination ofl(-)-hydroxiproline content (Reference method). KEPPLER , D.Y DECKER, K. 1970. Methoden der enzymatischen analyse. Vol II (Ed. By H.U. Bergmeyer), p. 1089. Verlag Chemie, Weinheim/ Berstrae, Germany KIEFFER, J.D. AND TUFTS, B.L. 1998. Effects of food deprivation on white muscle energy reserves in rainbow trout (Oncorhiynchus Mykiss): the relationships with body size and temperature. Fish Physiology and Biochemistry, 19: 239-245. LOVE, R. M. 1970. The chemical biology of fishes. Academic Pres, London, 323 pp. MOMSEM , T.P.; FRENCH, C.J. Y HOCHACHKA, P.W. 1980. Sites and patterns of protein and aminoacid utilization during the spawning migration of salmon. Can. J. Zool., 58: 1785-1799. PALKA, K. 1999. Changes in intramuscular connective tissue and collagen solubility of bovine m. semitendinosus during retorting, Meat Science, 53: 189-194 REGOST, C.; ARZEL, J.; CARDINAL, M.; LAROCHE, M. Y KAUSHIK, S.J.2001. Fat deposition and flesh quality in seawater reared, triploid brown trout (Salmo trutta) as affected by dietary fat levels and starvation. Aquaculture 193: 325-345 SATO, K.; YOAHINKA, R.; SATO, M.; TOMITA, J. 1989. Biochemical characterization of collagen in myocommata and endomysium fractions in carp and spotted mackerel muscle. J. Food Sci., 54: 15111514. SATO, K; YOSHINAKA, R.; SATO, M.; ITOH, Y. Y CHIMIZU, Y. 1988. Isolation of types I and V collagens from carp muscle. Comp. Biochem. Physiol. 90 B: 155-158. SOENGAS, J.L.; STRONG, E.F.; FUENTES, J.; VEIRA, J.A.R. Y ANDRS, M.D.1996. Food deprivation and refeeding in Atlantic Salmon, Salmo salar: effects on brain and liver carbohydrate and ketone bodies metabolism. Fish Physiology and Biochemistry,15:491-511.