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Romero-Núñez, C.; Salas-Ramírez, M.; García-Contreras, A. C.; Mendoza-Martínez, G.; Plata-Pérez, F. X.; Cervantes-Ramírez, M.; Viana-Castrillón, T.; Morales-Trejo, A. EFECTO DE UNA FITASA EN LA DIGESTIBILIDAD Y ACTIVIDAD DE TRIPSINA Y QUIMIOTRIPOSINA EN CERDOS DESTETADOS Archivos de Zootecnia, vol. 58, núm. 223, septiembre, 2009, pp. 363-369 Universidad de Córdoba España
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Zootec. Plata-Pérez1.5 kg peso vivo).10) de 78. In the exp.1. 04960. La adición de fitasa incrementó la digestibilidad de la proteína (p<0.87 to 85. No differences were observed in digestibility of Ca. RESUMEN Se realizaron dos experimentos para evaluar el efecto de la adición de fitasa fungal (Aspergillus niger) en la actividad de tripsina y quimotripsina y digestibilidad de nutrientes en cerdos cruzados (Yorkshire x Landrace. El alimento se ofreció dos veces al día (08:00 y 20:00 h). La colección de jugo pancreático se hizo a intervalos de 15 min. P y Fe. Páncreas. MO. García-Contreras1. Mexicali. INTRODUCCIÓN Los cereales (maíz.C. dieta base. twenty pigs were fed with similar diets than exp. ni tampoco en la actividad de la tripsina y de la quimotripsina. Recibido: 20-9-07.EFECTO DE UNA FITASA EN LA DIGESTIBILIDAD Y ACTIVIDAD DE TRIPSINA Y QUIMIOTRIPOSINA EN CERDOS DESTETADOS EFFECT OF A PHTYASE FROM ASPERGILLUS NIGER ON NUTRIENT DIGESTIBILITY AND ACTIVITY OF TRYPSIN AND CHYMOTRYPSIN IN WEANLING PIGS Romero-Núñez. Digestion. Mg. de 08:00 a 20:00 h. M. México. los tratamientos (T) fueron los siguientes: T1. y T2. P and Fe.P. A. which were adapted to the diets during 5 days before sample collection. 1 se utilizaron seis cerdos canulados en conducto pancreático. FDN. SUMMARY Two experiments were conducted to evaluate the effects of addition of fungal phytase (Aspergillus niger) in activity of trypsin and chymotripsin and nutrient digestibility in crossed pigs (Yorkshire x Landrace. The feed was offered twice per day.11) from 81. 11. The digestibility of Mg and Zn were also not affected by phytase.10) from 78.87 a 85. 2. México. 1 six cannulated pigs in the pancreatic duct were used.54%. basal diet. B. No se observaron diferencias en la digestibilidad del Ca. P. previo a la colecta de muestras.60% y la de la FDN (p<0. Enzimas. En conclusión.C. In both experiments it was used a basal diet elaborated with sorghum and soybean meal.60% and NDF (p<0. estos resultados indican que la adición de fitasa fungal a dietas para cerdos no afecta la actividad de tripsina y quimotripsina ni la digestibilidad en tubo digestivo total de minerales en cerdos. La fitasa no tuvo efectos en el peso y la longitud del páncreas. En el exp. *Correspondencia: fiebrepc@senasica. C. base adicionada con 500 unidades de actividad fitásica (FTU) por kg de alimento. Enzymes. durante 5 d. 58 (223): 363-369. Viana-Castrillón2 y A. Aceptado: 21-2-08. 1 para estimar la digestibilidad total aparente de MS. Morales-Trejo2 Maestría en Ciencias Agropecuarias. F. Digestión. 11. basal plus 500 units of phytase activity (FTU) per kg In the exp.54%.gob. sorgo y trigo) y la Arch. and T2. 2009. 1 PALABRAS CLAVES ADICIONALES ADDITIONAL KEYWORDS Piglets.11) de 81. or either in the activity of the trypsin and chymotripsin. these results indicate that the addition of fungal phytase to pig diets did not affect trypsin and chymotrypsin activity neither total mineral digestibility in gastrointestinal tract. En ambos experimentos se empleó una dieta base formulada con sorgo y pasta de soya. Ca.mx 2 Universidad Autónoma de Baja California.81 a 81.81 to 81. 2 se utilizaron 20 cerdos alimentados con dietas similares del exp. In conclusion. M. los cuales fueron adaptados a las dietas durante 5 d. Salas-Ramírez1*. Distrito Federal. the treatments (T) were the following: T1. La digestibilidad de Mg y Zn tampoco se afectó por la adición de fitasa. . G. The collection of pancreatic juice was done at 15 min interval from 08:00 to 20:00. Mendoza-Martínez1. Universidad Autónoma Metropolitana.X. The phytase did not show effects in the weight and the length of the pancreas. Xochimilco. Pancreas. En el exp. C. T. Lechones. Cervantes-Ramírez2. The addition of phytase increased the digestibility of protein (p<0. 1. Zn y Fe.sagarpa.46 kg BW).

se realizó este estudio para evaluar el efecto de la adición de fitasa fungal elaboradas con sorgo-pasta de soya sobre la actividad de proteasas pancreáticas. Adicionalmente. (2006) en cerdas adultas con cánula ileocecal.5 kg peso vivo). (1991) mostraron que la adición de fitasa aumentó la digestibilidad a nivel ileal de los compuestos nitrogenados en un 3% y la actividad de tripsina en 10. 2000). Mroz et al. Los cerdos no canulados fueron alimentados con dietas sólidas para crecimiento (tabla I). 223. seguida de los demás minerales y proteínas. fierro y magnesio. en un experimento realizado por Radcliffe et al. 364. Seis cerdos se sometieron a un procedimiento de cirugía de canulación de conducto pancreático de acuerdo al procedimiento descrito por Romero (2006) y los 20 restantes se usaron en un ensayo de digestibilidad y comportamiento productivo. cada tratamiento estuvo formado por 10 repeticiones.9%. Este efecto lo atribuyeron a la formación de complejos fitato-enzima y a la formación de quelatos entre fitatos y los minerales requeridos para la activación de la enzima. .07) y aminoácidos (p<0. En un estudio realizado con cerdas. Es posible que los efectos benéficos de la fitasa en la digestibilidad de la proteína se detecten sólo a nivel intestinal. Un segundo mecanismo de acción indirecto. núm. 250 y 500 unidades). Los cerdos canulados se alojaron en jaulas individuales. durante 7 días y agua ad libitum. MATERIAL Y MÉTODOS Se utilizaron 26 cerdos híbridos Yorkshire x Landrace. y que el efecto en heces puede no detectarse.10). principalmente. Además del fósforo. Considerando lo expuesto. se tienen evidencias in vitro de que los fitatos afectan negativamente la actividad de las enzimas proteolíticas pancreáticas. y proteínas formando complejos fitato-minerales-proteínas. lo cual podría estimular la colecistoquinina y la secreción pancreática (Jacob et al. Las fitasas exógenas podrían tener dos efectos benéficos en la secreción y actividad de las enzimas pancreáticas. El resultado de la interacción es una reducción importante en la digestibilidad del fósforo. Singh y Krikorian (1982) encontraron in vitro una reducción sustancial en la actividad de tripsina debido a la presencia de fitatos. 1996). principales ingredientes de las dietas para cerdos. sería como consecuencia de una mayor digestibilidad de proteína y su consecuente absorción de aminoácidos en el intestino. p. los fitatos interactúan con otros minerales como el calcio. uno directo y otro indirecto En forma directa las fitasas podrían reducir la formación de los quelatos entre fitatos y tripsina (Singh y Krikorian. reduciendo la actividad de la tripsina hasta 46%. digestibilidad y crecimiento de cerdos. zinc. en etapa de crecimiento (11. hubo respuesta lineal en la digestibilidad de la proteína (p<0. se ha documentado ampliamente (Cromwell. durante siete días de adaptación. a 28 ± 2°C y 45 ± 2% humedad relativa. Los 20 cerdos sin canular se alojaron en jaulas con piso elevado y se asignaron aleatoriamente a dos tratamientos: a) fitasa fungal en el alimento y b) grupo testigo sin fitasa. A los cerdos canulados se les dio un periodo de adaptación a la dieta (tabla I) y Archivos de zootecnia vol.ROMERO-NUÑEZ ET AL. La dieta fue formulada de acuerdo con NRC (1998). pasta de soya. indicando que a nivel duodenal la disponibilidad de nutrientes es mayor. contienen niveles elevados de fitatos (Maga. enzima exógena que se adiciona de manera regular a las dietas para cerdos para liberar el fósforo de los fitatos.. La forma mas común de los fitatos es un éster de ácido fosfórico e inositol denominado ácido fítico o ácido hexafosfórico de mio-inositol (Reddy et al. 58. 1982).. Posteriormente se les ofreció alimento adicionado 500 unidades fitasa (FTU) de Aspergillus niger (Natuphos® BASF) por kg de dieta. 1982). con niveles de fitasa (0. (1994). 1982) lo cual podría explicar la mayor actividad de la tripsina observada por Mroz et al. La eficacia de la fitasa microbiana.

150 0. Ingrediente Cerdos Ensayo de canulados digestibilidad 20.00 69. Se determinó la materia seca. fibra detergente neutro (Van Soest et al.. La actividad enzimática en jugo pancreático se analizó en jugo pancreático la proteína soluble por el método de Bradford (1976) usando seroalbúmina bovina como estándar. 223. (Percent composition of diets used for cannulated pigs and for digestibility assay). 1991). µ= media general. La actividad de la quimotripsina se determinó con la hidrólisis de N-acetil-L-tirosina-etil-ester (Hibbard et al. y otros minerales (calcio. (1961) usando benzoil-Larginina-etil-ester como substrato.98 0. p.250 0.112 0. . Una unidad de actividad de tripsina fue igual a la hidrólisis de 1 µmol de substrato por minuto por mg de proteína.[(100* CIA d x nutriente h)/(CIAh + nutriente d)] donde: CIA d= cenizas insolubles en ácido en la dieta (%). 1993): Digestibilidad nutriente= 100 . para determinar los nutrientes y las cenizas insolubles en ácido como marcador interno. 1990).10 1. posteriormente a la mitad de los cerdos (3) se les ofreció alimento adicionado con 2500 UF por kg de dieta. Pasta de soya Sorgo grano Aceite de soya Premezcla vitamínica Premezcla mineral Sal Saborizante Carbonato de calcio Fosofato monodicálcico Ortofosfato L-Lisina HCl DL-Metionina L-Treonina L-Triptofano Los resultados de ganancia de peso se analizaron usando el peso inicial como covariable (Steel y Torrie.27 0. zinc y hierro). de 08: 00 a 20: 00 h.02 0.14 0. La colección de jugo pancreático se hizo a intervalos de 15 min. 1996). Una unidad de actividad de quimotripsina fue igual a la hidrólisis de 1 µmol de substrato por minuto por mg de proteína. Nutriente h= nutriente en heces (%). Nutriente d= nutriente en dieta (%).00 0. durante 5 días.020 27. 365. La actividad de la tripsina se determinó por el método de Erlanger et al..00 1. Composición porcentual de las raciones usadas para los cerdos canulados y para el ensayo de digestibilidad. fósforo total por la técnica de Harris y Popat (1954).00 0. para calcular la digestibilidad in vivo con las siguientes ecuaciones (Osuji et al. CIA h= cenizas insolubles en ácido en heces (%). 1977). Pi= efecto del nivel de fitasa.684 0. núm. Tabla I.01 ANÁLISIS ESTADÍSTICOS Se realizó el análisis de varianza de las variables respuesta con un modelo estadístico con un solo criterio de clasificación (nivel de fitasa): El modelo estadístico usado fue: Y ijkl= µ + Pi + εijkl donde: Yijklm = variable respuesta. magnesio. Archivos de zootecnia vol. por espectrofotometría de absorción atómica (Slavin. se analizaron con el procedimiento de mediciones repetidas del SAS (1999).FITASAS EN CERDOS DESTETADOS. 1992). 1968).. εijkl= error aleatorio. materia orgánica (AOAC.566 75. Las enzimas fueron activadas con enteroquinasa porcina (Sigma).553 1. DIGESTIBILIDAD Y ENZIMAS PANCREÁTICAS la cánula de cinco días. Se analizaron las cenizas ácido insolubles (Keulen y Young. durante cinco días. Se hizo una muestra compuesta de heces por cada cerdo. 58.042 0.014 0.19 0. Estos cerdos se alimentaron ad libitum y se les registró el consumo debido a que el tiempo se dedicó al muestreo de jugo pancreático. Los resultados de actividad enzimática (tripsina y quimotripsina).350 1.17 0.259 0.12 0.

V.62 Peso inicial2 11.47 92. Zn y Cu.07) y aminoácidos (p<0.35 11.66 15. (2007) evaluaron dosis crecientes de fitasas (0.10) en 2.32 93.6 unidades (p<0. Pero.36 0.01).26 0.91 5.01) y Ca (p<0.11 0. puede reaccionar con proteínas reduciendo su disponibilidad (Reddy et al. no detectaron efectos en la MS ni en la energía. la adición de la fitasa fungal de Aspergillus niger sólo incrementó la digestibilidad de la proteína (p<0.57 77. Ca (p<0.67 0.219 b 1 2.10) en las digestibilidades de los otros componentes de la dieta ni de los minerales. Medias con distinta literal son diferentes (p<0.65 0. .88 14.63 0. proteína (p<0. detectaron efectos en la digestibilidad ileal de la fitasa en la digesti- Tabla II.73 53.55 Proteína (%) 78. Mg y Fe.54 Ca (%) 71. 60 y 68%). lo cual explica que la adición de fitasas mejore la disponibilidad de la proteína. 1982). RESULTADOS Y DISCUSION De los nutrientes analizados (tabla II). P. La mayoría de los estudios muestran efectos más consistentes sobre el fósforo. se han logrado detectar efectos en la digestibilidad aparente de la MS y de otros nutrientes. MS (p<0. (Effect of fungal phytase (500 units/kg feed) on apparent digestibility of nutrientes and perfomance of weaning pigs). no se observaron diferencias (p= 0. núm.24 11.8 unidades porcentuales y la de la fracción de la FDN en 3. 500 y 1000 unidades de fitasa) en cerdos destetados y observaron una respuesta lineal en la digestibilidad del fósforo (47. Item Testigo Fitasa C. Pero cuando midieron la digestibilidad en las heces.28 0. 223.56 P (%) 51.12).47 Zn (%) 92. pero sí tuvieron efecto lineal en las de P (p<0. En un experimento con cerdos suplementados con Natuphos® (0. (1997) al incrementar la dosis de la fitasa Natuphos® de 250 a 500 U por kg de alimento.16 4. Algunos estudios donde se han evaluado dosis mayores a las 500 unidades. Este experimento nos indica que es posible que las fitasas tengan efecto a nivel intestinal. Los resultados en este experimento.004).11).58 88.11). sin embargo. Por su parte.(%) P1 Digestibilidad: Materia seca (%) 87.27 0. se incrementaba la disponibilidad aparente de Ca.87 85. pero que no siempre se pueda detectar el efecto al medir la digestibilidad en heces.08 4.68 Peso final 2 13. (2006) en cerdas adultas con cánula ileocecal.81 81.58 0. bilidad del P (lineal. En evaluaciones con cerdos en crecimiento y finalización..90 13. proteína y energía.05). debido a que forma complejos (quelatos) con gran variedad de minerales esenciales como Ca. lo cual explicaría muchas de las faltas de consistencia de efectos reportadas en la literatura.10 0.187 a 0. Efecto de una fitasa fungal (500 unidades/kg alimento) en la digestibilidad aparente de nutrientes y en el comportamiento de lechones destetados.77 15. a pesar de haberse estimado que la digestibilidad del P se podría incrementar en un 30%. Zn. Harper et al. 366.31 3. p<0.10).79 Fe (%) 86. no encontraron efectos en la digestibilidad de Mg y Mn. Olukosi et al. tampoco no encontraron respuesta en la digestibilidad de calcio en dietas con baja concentración de fósforo. 250 y 500 Unidades por kg de dieta) realizado por Radcliffe et al.02 ab Probabilidad de error tipo I. sin encontrar efectos en la materia seca.75 Ganancia diaria2 0. Se ha reportado que el fitato puede for- Archivos de zootecnia vol.79 19. p. y se puede concluir que el uso de fitasas permite reducir la excreción de P y la contaminación de este mineral hasta en un 30 a 40% (Harper et al.60 FDN (%) 81.. Adeola et al. tampoco encontraron efecto en la digestibilidad de la materia seca.ROMERO-NUÑEZ ET AL.42 88. 58. (1995) observaron que con 1500 unidades de fitasa en el alimento.44 5. son similares a los reportados en la literatura. 2kg. 1997).92 0.98 Mg (%) 94. El fitato se considera como agente antinutricional. 49 y 56%) y del calcio (53.

ni tampoco en la actividad de la tripsina y de la quimotripsina en los 5 días de colección de jugo pancreático (tabla III). en este estudio no se ha encontrado efecto de la fitasa en la digestibilidad de Mg. por lo que no existe evidencia directa de que las fitasas puedan mejorar la digestión de la FDN. que es lo que pudo haber ocurrido como efecto indirecto al haber suministrado la fitasa.811 23.62 14.94 0..421 60.184 Día 2 3. .01 Día 5 3.40 10.. DIGESTIBILIDAD Y ENZIMAS PANCREÁTICAS mar sales insolubles con Ca.276 Día 3 3. Zn y Fe (tabla II). Las investigaciones con fitasas se han enfocado a micro minerales y aminoácidos.731 41.14 27. Los mayores crecimientos al adicionar fita- sa en cerdos son el resultado de un mayor consumo de nutrientes.24 3.23 Día 2 2.13 P1 0. Harper et al. Sin embargo. Zn. pero no se han medido los efectos en la digestibilidad en la FDN. Solamente se observó una tendencia a mayor actividad de la tripsina (p= 0.789 3.16 Fitasa CV (%) 33.391 3. En un experimento con aves. 2005).26 0.11 0. p.73 Día 3 2. la degradación del ácido fítico reduciría la formación de complejos solubles y quelatos insolubles con diversos minerales como Zn.71 Quimotripsina (Unidades/mg proteína) Día 1 2.12 7. 58. 223. núm. por lo que el efecto de evitar la formación de quelatos fue prácticamente nulo. treonina.19 0. la combinación de fitasas con xilanasas mejoró la energía metabolizable del alimento (Ravindran et al. (2002) mostraron que el crecimiento de cerdos se puede mejorar al tener un mayor suministro de aminoácidos digestibles de lisina. (1997) observaron mayores ganancias de peso con la fitasa en dietas con baja concentración de fósforo en cerdos en crecimiento y finalización asociadas a mayor consumo de alimento y a una mayor digestibilidad de fósforo. la adición de fitasa mejoró (p< 0. Ca y Fe (Maenz et al.752 3. 1999) incrementando la disponibilidad para su absorción. Mn.03 1 0.14 Día 4 2. Mn y Cu disminuyendo la disponibilidad de esos minerales. Testigo Páncreas peso (g) longitud (mm) 32. es importante tener presente que el ácido fítico es un componente común de las plantas y es almacenado en un complejo grande con sales de Mg y K junto con proteínas dentro de membranas simples en partículas de granos y semillas (López et al.93 0. triptófano y metionina.11) la digestibilidad de la FDN en cerdos.05) en el peso y la longitud del páncreas. mientras que en otros estudios no ha obtenido respuesta (Juanpere et al. y solamente en algunos estudios se han combinado con enzimas fibrolíticas. (1995) indicaron que la digestibilidad del Zn se mejoró al adicionar fitasa a la dieta de cerdos destetados. 367. Cu. en los cuales la proteína tiene un impacto determinante y que se reporta en varios experimentos. 1999).951 4.731 3..835 3.63 0.510 2.893 6. Archivos de zootecnia vol. En este estudio.680 34.191 3. Efecto de una fitasa fungal (500 unidades/kg alimento) en características del páncreas y actividad de tripsina y quimotripsina. Fe.62 Probabilidad de error tipo I.35 11. Esto explicaría por qué en este experimento la adición de las fitasas tendió a mejorar (p= 0. A pesar de que no siempre se detecten efectos de la fitasa. Otro nutriente que ha sido responsabilizado de causar mayor crecimiento es el fósforo.FITASAS EN CERDOS DESTETADOS.17 0. Adeola et al. (Effect of fungal phytase (500 units/kg feed) on pancreas characteristics and activity of trypsin and quimotrypsin). La adición de fitasa no tuvo efectos (p<0. 2000).25 Tripsina (Unidades/mg proteína) Día 1 3.076 2.41 0.11) en el primer día de Tabla III.785 4.661 Día 5 3.673 Día 4 3. Co.64 0.63 0.222 39..44 10.34 14. Gómez et al.05) la ganancia de peso (tabla II) lo cual podría asociarse a la mayor disponibilidad de proteína de la dieta. No obstante.

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