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COLEGIO DE ABOGADOS DE LAMBAYEQUE

DIPLOMADO INTERNACIONAL DE
CRIMINALISTICA MEDICINA LEGAL
Y CIENCIAS FORENSES EN EL SISTEMA
ACUSATORIO

MODULO Ill
CIENCIAS FORENSES Y CRIMINALISTICA DE
LABORATORIO

Tema
BIOLOGIA FORENSE

Profesor Jorge Hau Camoretti, Msc.


Biologo Forense

10 Octubre 2015
COLEGIO DE ABOGADOS DE LAMBAYEQUE — DIPLOMADO INTERNACIONAL
DE CRIMINALISTICA MEDICINA LEGAL Y CIENCIAS FORENSES
BIOLOGIA FORENSE

INTRODUCCION

La Biologia Forense permite la aplicacion de los conocimientos de las Ciencias


Biologicas en la Criminalistica, mediante e1 estudio sistemiitico de las huellas o indicios
biologicos dejados por el autor o victima, para identificar los indicios objetivos del hecho
delictuoso, determinar su relacion con éste, con la finalidad de apoyar técnico
cientificamente en la solucion de problemas policiales y judiciales.

En Criminalistica permite la aplicacion de sus diversas areas, tales como la


Hematologia, Espermatologia, Tricologia, Microbiologia, Bioquimica, Biologia
Molecular, Inmunologia, Botanica, Zoologia, Ecologia, etc.

La Biologia Forense, coadyuva al esclarecimiento de delitos como lesiones,


homicidios, violaciones sexuales, abortos, secuestros, asaltos y robos, terrorismo,
atentados a la salud por contaminacion de alimentos y bebidas, delitos economicos,
ecologicos, etc.; asimismo en la identificacion de personas o cadaveres desaparecidos en
desastres, mediante aniilisis de manchas de sangre, semen, pelos, restos de tejidos
organicos, secreciones y excreciones organicas en prendas de vestir, instmmentos materia
del delito, en personas, cadaveres y en e1 lugar de los hechos.

Permite la identificacion de restos, especimenes animates y vegetales relacionados


con hechos delictuosos, ex:imenes microbiologicos, parasitologicos en alimentos,
bebidas, muestras ambientales y otros examenes especiales biologicos; interviene
también en la identificacion de autores del crimen, personas o cadaveres desaparecidos
en desastres y en la solucion de casos de filiacion y paternidad, mediante la determinacion
de la huella genética o perfil genético de individuos por estudio del ADN (Acido
Desoxirribonucleico).

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BIOLOGY FORENSE

Objetivos Generales

P Obtener una vision de La Biologia Forense como aplicacion de los


conocimientos de las Ciencias Biologicas en la Criminalistica, mediante e1
estudio sistematico de las huellas o indicios biologicos dejados por el autor
o victima

R Identificar los indicios objetivos del hecho delictuoso, determinar su


relacion con éste, con la finalidad de apoyar de forma técnica y
cientificamente en la solucion de problemas policiales y judiciales.

Unidades Tern:iticas

R HEMATOLOGIA FORENSE
R ESPERMATOLOGIA FORENSE
R TRICOLOGIA,
R MICROBIOLOGIA,
R ENTOMOLOGIA FORENSE
R BIOLOGIA MOLECULAR ADN

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BIOLOGIA FORENSE

HEMATOLOGIA FORENSE

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Determinar e1 lugar o lugares en que estuvo la victima (una o mas habitaciones,


vehiculos y/o campo).

½• Determinar la presencia de sangre humana, para poder servir como elemento


reconstructor de un hecho delictivo como identificador de la victima y
victimario(s).

HEMATOLOGIA FORENSE

Es la aplicacion Criminalistica de la morfologia, serologia y bioquimica de la sangre.


Abarca tanto e1 aspecto reconstructor como identificador en e1 terreno policial, penal y
civil. En éste ultimo caso, en lo que se refiere a filiacion y paternidad

I. LA SANGRE COMO ELEMENTO RECONSTRUCTOR

Se refiere at estudio fisico o macroscopico de las manchas de sangre, encontradas


en el lugar del suceso de una accion delictuosa. p

Efectuada rigurosamente la proteccion del lugar del


suceso se procede a realizar el rastreo hematologico, de ahi
se procede a describir o caracterizar las manchas ,,,.p, p
hematicas, par luego tomar las muestras (frescas o secas).
Las muestras deberan ser manipuladas, guardadas, ’“'
embaladas cuidadosamente.

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La iluminacion con diferentes luces y, a distintos angulos, puede ayudar a la ubicacion

MANCHA. Es toda modificacion de una superficie, ya sea por alteracion del color o por
el deposito de una sustancia extrafia (liquida, solida, semisolida) que puede ser visible o
no.

SOPORTE. Cualquier superficie capaz de recibir o fijar determinadas sustancias (p.e. el


cuerpo humano, instmmentos, tejidos-prendas, papeles, pisos, paredes, techos, etc.)

DESCRIPCION DE LAS MANCHAS HEMATICAS

ASPECTO. Puede encontrarse fluida o coagulada, o como mancha seca. El Tiempo de


coagulacion normalrnente es de 3 a 5 minutos, y no hay coagulacion cuando fluye post
mortem.

COLOR. Es de color rojo vivo cuando la sangre fluye de las arterias, y rojo oscuro
cuando fluye de las venas. El color se modifica segun:

P Tie p_,m o la sangre se oscurece progresivamente, hasta convertirse en una


mancha de coloracion negmsca.
P Tipo de sojiorte, sea por sus caracteristicas (color, superficie) y/o
naturaleza (p.e. en el vidrio permanecen rojas durante meses).
P Temjieratura y condiciones del medic ambiente, sea cuando se expone a
temperaturas altas (o se expone at so1), adquiere una coloracion oscura.
P Estado de conservacién, ya que por efecto de sustancias quimica (acidos,
alcalis), o por una intoxicacion severa se modifica.

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FORMA

9 Proyeccién.- gotas o salpicaduras.

9 Esciirrimiento.- charco, reguero, rebabas.

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P Contacto.- como impresiones sangrantes de dedos, manos o pies.

P Jmprevnacién.- cuando hay inhibicion de tejidos.

P Limpiamiento.- por tentativa de lavado o de enjugado de un objeto


manchado.

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La forma también cambia segun:

< Tipo de soporte, presentandose:

•• Como diminutas masas esféricas o poliédricas brillantes e irregularmente


adheridas, cuando apenas impregne e1 soporte o es impermeable (p.e. género de
lana, vidrio, porcelana, metal, caucho, etc.)
•• Con contorno definidos, cuando se absorbe at soporte
• En costras o formando masas diminutas ligeramente convexas, cuando el soporte
no es absorbente.

< An8ulo de caida, que puede ser:

• Verticalmente, cuyas manchas son redondeadas y presentan dentellones cuando


caen sobre un plano horizontal, y se alargan si to hacen en un plano oblicuo.
• Poco agudo (> 50 ‘), formando manchas a manera de quilla.
• Agudo (<50 ‘), formando manchas que se alargan en hilo o barbas de pluma.

< Fuerza de Proveccién, lo cual permite hallar el plano de trayectoria o e1 sentido del
chorro.

+ Cantidad de sangre que puede calcular de acuerdo a la extension de la mancha, o


por numero de prendas manchadas, pudiendo en e1 primer caso presentarse como
gotas, charcos o lagunas.

Conviene ademas tener en cuenta el tamaiio y niimero de las manchas, asi como la
ubicacion precisa de las mismas.

La altura estimada de caida es importante en la investigacion, sin embargo hay que


tener en cuenta que mas alla de 1,5 in la variacion es minima.

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REGISTRO DE LAS MANCHAS DE SANGRE

Para conservar el aspecto y detallar la ubicacion de las manchas se hace necesario:

< Fotografias, en vista general, alcance medio y otras de detalle.


+ Bocetos, para mostrar e1 aspecto general de las manchas y su posicion relativa a otras
areas del lugar del suceso.

Manchas desconocidas y manchas patrones (correlacion). Tener en cuenta las


caracteristicas de las superficies sobre la cual se encuentran las mismas.

< Usar idénticas superficies de impacto.

II. LA SANGRE COMO ELEMENTO IDENTIFICADOR

Ademas del estudio fisico de las manchas de sangre, su estudio desde elpunto de
vista quimico y biologico permite hasta cierto punto individualizar su origen o
procedencia.

RECONOCIMIENTO ODIMICO DE LA SANGRE

1. ENSAYOS DE ORIENTACION O PRESUNTIVO. Necesario para comprobar si


una mancha es o no de sangre, permitiendo excluir manchas sospechosas (ciertos
alimentos, jugos vegetales, sales metiilicas, pinturas, etc.)

REACCION DE LA CATALASA (De agua oxigenada)

SENSIBILIDAD 1/ 40 000

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RESULTADO : burbujeo blanco (tiempo de reaccion 5”)

REACCION DE LA BENCIDINA (De Adler)


SENSIBILIDAD 1/ 100 000
RESULTADO : coloracion azul (tiempo de reaccion 10”)

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REACCION DE LA FENOLTALEINA

SENSIBILIDAD 1/ 100 000


RESULTADO : coloracion rojo — rosado (tiempo de reaccion 10”)

REACCION DE LA LEUCO-MALAQUITA

SENSIBILIDAD 1/ 300 000


RESULTADO : coloracion azul (tiempo de reaccion 10”)

REACCION DEL LUMINOL

COLOR DEL RECTVO : incoloro


SENSIBILIDAD : 1/5 000 000
RESULTADO (+) : fluorescencia

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2. ENSAYOS DE CERTEZA O PROBATORIO. Permite afirmar la presencia de


sangre, humana o no humana, inespecificamente.

REACCION DE TEICHMAN. Consiste en obtener cristales de hemina a partir de


hemoglobina en presencia de acido acético.

RESULTADO (+): at microscopio se observan cristales o prismas

alargados. ENSAYO PARA LA DETERMINACION DE ESPECIE

Observacién Microscéjiica de la Sangre Fresca. La ausencia de niicleo es


caracteristica de los globulos rojos de todo mamifero. Dentro de los mamiferos
difieren en cuanto a sus dimensiones, siendo pequefios en la cabra, carnero y caballo,
en la llama son elipticos. En las aves ademas de ser dos veces mas grande que el de
los humanos, son elipticos y biconvexos.

Reaccién lnmunolévica para Determinar la Especie. Empleo de sueros precipitantes


antihumanos permite establecer si la sangre es humana o de otra
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especie animal. La sangre presenta sustancias quimicas proteinicas (antigenas)


capaces de originar la produccion de otra sustancia (anticuerpo) en respuesta
transfusion e inoculacion que se da en miembros de especies diferentes, y en algunos
casos de la misma especie.

DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO

R Landsteiner reconocio la presencia de anticuerpos en el suero sefialo la


relacion reciproca que habia entre ellos y los antigenos presentes en los
globulos rojos (Sistema ABO)

R La presencia de antigeno A o B en los globulos rojos puede ser determinada


mediante pmebas serologicas empleando antisuero apropiado.

R Para excluir a un individuo que se quiere identificar y que de alguna forma


se encuentra involucrado en un hecho delictuoso, es importante determinar
su grupo sanguineo.

OTROS SISTEMAS DE GRUPO SANGUINEO

Sistema MNS. Como dice Prokop, este sistema fue descubierto por Landsteiner y Levine
en1927, y fue considerado durante mas de 20 anos un sistema sencillo; Schiff en 1930, to
estudio en 42 familias con 125 nifios, lo que lo acredito en la practica forense. Moureau,
en 1934, completo los estudios sobre su herencia. En 1948, Sanger, Race, Walsh y
Montgomery describieron e1 factor S admitiéndose que en el sistema MN parecian existir
cuatro genes: NS, NS, Ms y Ns. Estos mismos autores realizaron estudios amplios en
familias que se completaron con e1 descubrimiento por Levine, Kuhmichel, Wigod y
Koch en 1951 del antigeno s, confirmandose posteriormente la teoria de los cuatro genes.
En aquel entonces, segun Prokop, una exclusion de paternidad mediante elMN tenia valor
para certificar en términos de imposibilidad manifiesta.

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INCOMPATIBILIDADES SANGUINEAS DE FILIACION DEL SISTEMA MN

posibilidades de
Nifio Madre Posible Padres Excluidos
exclusién

M M M N
N Imposible
M N 20
N M Imposible
N N MN MM 30
N MN 30
MN M N MN M 30
N N MN N 20
sin 0
exclusion

Sistema P. Landsteiner y Levine lo describieron en 1927. Dahr y Zehner, en 1941,


demostraron que era de herencia mendeliana a través de un par de genes: P que determina
el aglutinogeno P y p, que determina su ausencia y es recesivo. Andresen y Jonsson en su
Tratado de Antropologia recogen que los receptores P de los eritrocitos no estaban
completamente formados en los recién nacidos. A lo largo de los afios cincuenta se
demostro que no era un sistema de un solo factor, sino de mayor complejidad

Sistema Rh. En 1940, Landsteiner y Wiener inmunizaron conejos con hematies del mono
Macacus rhesus, obteniendo un anticuerpo que aglutinaba at 85 % de las muestras de
sangre humana. A estas personas y al factor descrito en ellas se le llamo Rh positivo o
negativo este factor sirvio para explicar numerosas incompatibilidades transfusionales

Posteriormente, se fue conociendo su complejidad con la descripcion de nuevos


antigenos DdCcEe, to que llevo a sucesivas nomenclaturas propuestas por Wiener, Race
y Taylor, Fisher, Diamont y Mourant.

La forma en que se producia la herencia de estos caracteres se establecio con


seguridad en 1941, tras la investigacion de Lansteiner y Wiener en numerosas familias,
lo cual supuso una importante aportacion a la investigacion de la paternidad e
identificacion.

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En 1961 predominaba la teoria de Fisher y Race en la que los subgrupos del factor
Rh (C, D, E) v los del factor Hr (c, d, e) se heredan segfin una herencia intermediaria sin
dominancia ni recesividad, igual que e1 sistema MN. Las frecuencias de los antigenos
en la poblacién europea estaban alrededor de.-

Como en 1960 solo se disponla de los antisueros anti-C, anti-C, anti-D y anti-E,
cuando éstos se determinaban se precedia como st no habiendo dominancia para el Cc la
hubiera en los antigenos D y E. Los resultados asi obtenidos, aun siendo inferiores a los
teoricamente posibles, resultaron suficientes en muchos casos de investigacion de la
paternidad e identificacion.

Al final de los anos cuarenta principios de los cincuenta se pusieron de manifiesto


otros subgrupos de los que destaca el Cw descrito por Callender, Sheila y Race. En 1941.
Stratton describio el D mas dificil de individualizar y un Eu fue descrito por Cepellini,
Ikin y Mourant. Sin embargo, no se ha llegado a disponer de antisueros eficaces para
utilizarlos en la investigacion de la paternidad e identificacion.

En los anos cincuenta se siguieron describiendo otros factores sanguineos como


los que a continuacion se enumeran.

Sistema Lewis. Fue Mourant el que describio en 1946, en Ms. Lewis, un anticuerpo capaz
de aglutinar los hematies del 20 0 de sujetos con independencia de su ABO. Se Ie llamo
Lewis a, y en 1947 Andresen describio un segundo factor antitético a1 que llamo Lewis
b. En 1948, Grubb describio la estrecha relacion entre el sistema Lewis y el ABO,
encontrando que los sujetos que son Lewis a+ en la sangre no son secretores de sustancias
ABH en sus secreciones

Sistema Duffy. Descrito en 1950 por e1 equipo del Instituto Lister de Londres,
confirmado por Baker, Crewar, Lewis y otros en 1951, se Ie llamo anti-Duffy (anti-Fy a).
En 1951 v 1952, lk Mourant, Pettenkofer y Blumenthal descubrieron el Duffv b (Fy b).
Race y Sanger, en 1958, publicaron e1 estudio familiar mas numero so con una frecuencia
de Fy a entre el 62 y ci 69 % en poblacion europea y encontrando en raza negra casos de
Fy (a- b), to que implica la presencia de un nuevo gen (Fy c).

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Sistema Kell-Cellano. El anticuerpo anti-Kell (K) fue descrito por Coombs, Mourant
Race, en 1946, en una mujer cuvo hijo habia sufrido una anemia hemolitica. Este
antigeno esta presente en la poblacion europea con una frecuencia de 5-10 0 , no sobre
pasando en ninguna poblacion de T Q 0

En 1949, Levine, Backer, Vigod Ponder encontraron un anticuerpo a1 que


denominaron (como era habitual, con e1 apellido de la persona en la que lo encontraron)
Ceilano (anti-k), intimamente relacionado con e1 Kell y formando un sistema unico,
designandose Kk, inmediatamente se estudiaron sus frecuencias poblacionales y Race y
Sanger, en 1958, precisaron e1 mecanismo de su herencia y su complejidad genética

Sistema Lutheran. En una paciente politransfundida, Cailender y Race, en 1946,


encontraron un anticuerpo que se habla formado como respuesta a un antigeno del
donante, llamado Lutheran, por to que se llamo asi (Lu a); en 1956, Cutbush y Chanarin
encontraron e1 anticuerpo antitético anti-Lu b.

Sistema Kidd. Este anticuerpo descrito en 1951 por Alien, Diamont y Niedziela, tiene
una frecuencia de 75 0 en raza blanca y del 90 0 en raza negra; se eligio el simbolo (Jk
a), describiéndose e1 (Jk b) por Plaut, Ikin, Mourant, Sanger y Race en 1953. La
transmision hereditaria se completo en 1958 por Race y Sanger. Un nuevo tipo (Jk a- b-)
fue descrito por Pinkerton y cols. En 1959, otros antigenos de tipo individual o familiar
se describieron en los afios cincuenta, entre los que se cuentan el caracter racial Diego
(Levine, 1954), e1 grupo Auberger (Saimon, André, Tippet, Sanger, 1961) y e1 Xg (Man
y cois. 1962) como los mas importantes.

SISTEMA ANTIGENO NRO.


ABO 1901 A, AI, B, H 4
Rehsus 1941 D, C, c, E, e 43
MN Ss 1926 M, N, S, s, U, etc. 18
Lewis 1946 Lea, Leb Lec, Led 4
Kell 1946 K, L etc 18
Duffy 1950 Fya, Fyb, etc 6
Kidd 1951 Jka, Jkb 3
Lutheram 1945 Lua,Lub,etc 17
Diego 1955 Dia, Dib 2

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Todos los individuos poseen antigenos propios que pueden ser reconocidos e
identificados de alguna manera, de ahi su potencial para ser considerados como
marcadores. En e1 Sistema ABO la sangre se divide en cuatro grupos: O, A, B y AB. El
grupo al cual pertenece la sangre, depende de los anticuerpos encontrados en e1 suero y
de los antigenos encontrados en los globulos rojos.

Reaccion antigeno-anticuerpo. La reaccion entre el antigeno y su respectivo


anticuerpo puede producirse in vivo o in vitro. p.e.: Tn vivo.- reacciones hemoliticas
transfucionales enfermedad hemolitica del recién nacido Tn vitro.- se realizan en
condiciones artificiales o de laboratorio (aglutinacion, hemolisis, inhibicion, absorcion y
elusion, etc.)

Aglutinacion. El anticuerpo reacciona con e1 antigeno que es parte de una


estructura de mayor tamafio como en los globulos rojos, formandose masas o aglutinados
que pueden ser evidenciados a simple vista o con ayuda del microscopio. Los antigenos
de grupo sanguineos se heredan obedeciendo las leyes mendelianas, es decir bajo control
genético. El grupo sanguineo demostrable de un individuo es e1 resultado directo de la
herencia del antigeno de uno o ambos padres.

III. RECOLECCION Y ENVIO DE MUESTRA DE SANGRE

Para preservar las manchas de sangre, conviene en to posible enviarla at


laboratorio para su analisis sobre el objeto en e1 cual se encuentra.
Se debe tener en cuenta las caracteristicas del soporte en la adherencia de
la sangre. p.e. se adhiere fuertemente en tejido, papeles maderas, se adhiere
escasamente en superficies pintadas o pulidas.
Manchas secas

Materiales

Palillos de madera
Fibra de gasa
Papel transparente delgado
Papel filtro

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R Solventes: solucion fisiologica


R Agua destilada

Procedimiento

P Humedecer la fibra de gasa o papel con el solvente.


P Comprimir sobre la zona manchada
P Secar al aire dentro de un tubo de ensayo o placa de Petri, previa rotulacion
P Colocar por separado las manchas de muestras diferentes
R En superficies impermeables o pulidas se puede levantar o raspar la
mancha sobre un papel plegado a manera de sobre, empleando una hoja
de afeitar, o bisturi

Sangre aihi no coagulada

R Utilizar una pipeta y transferir a un tubo que contenga igual cantidad de


solucion fisiologica, mezclar suavemente.
R Enviar inmediatamente al laboratorio.
R Transportar en recipiente con hielo.
P Se puede embeber un recorte de gasa, desecar y enviar como mancha seca.

Prendas de vestir

P Se debe asegurar su desecacion antes de enviarlas al laboratorio. Se


prefiere la corriente de aire frio.
R No deberan plegarse o doblarse cuando una prenda est:i humedecida.
Extenderla completamente para su secado.
R Las prendas secas deberan embalarse por separado en bolsas de papel. No
utilizar bolsas plasticas.
R No se debe descartar e1 posible lavado de las ropas de un presunto
delincuente o sospechoso.

Err objetos dificil de trasladarse

P Seguir los pasos que se indica para e1 empleo de fibra de gasa o papel
humedecidos.
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R De ser posible recortar una porcion, siempre evitando alterar solucion de


continuidad por PAF, AB, etc.
R Remitir también una muestra control correspondiente a una porcion de la
zona no manchada.

Err el (los) sospechoso (s)

Ademas de la sangre recogida en e1 lugar del suceso, se remitiriin muestras de


sangre (o manchas) de la victima y del sospechoso. En e1 agua de piletas, lavaderos,
vertederos, cafierias, etc. se debera investigar la presencia de sangre.

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REACCION DE LA CATALASA

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ESPERMATOLOG FORENSE

OBJETIVOS ESPECIFICOS
R Detectar semen en e1 cuerpo o ropas de una supuesta victima de
violacion o por otras causas, en la escena del delito.

ESPERMATOLOGIA FORENSE

Es la ciencia que se ocupa del estudio de la morfologia y bioquimica del semen,


en los casos relacionados a delitos contra las buenas costumbres, o de otros de caracter
sexual (necrofilia, bestialismo, etc.). El semen at igual que la sangre se estudia tanto en
el aspecto reconstructor como identificador.

SEMEN, ESPERMA O LIQUIDO SEMINAL

Producto de la secrecion del aparato genital masculino después de la madurez


sexual.
Presenta aspecto lechoso, opalescente, ligeramente amarillento, de olor
suigeneris. Contiene los espermatozoides en suspension, los que pueden ser
separados por centrifugacion, obteniéndose e1 plasma seminal (componentes no
proteicos y proteicos)
Componentes no proteicos: cloruro de sodio, dioxido de carbono, fosforo
inorganico, fosforo de la espermina, Ca, glucosa, fructosa.
Componentes proteicos: globulinas, albuminas, nucleoproteinas, amilasa,
fosfatasa acida, colina.
pH : 7,2 - 7,3
N‘ de espermatozoides: 60 - 150 mi11ones/ml
Volumen: 1,5 a 5,0 ml
Glandulas y conductos del aparato genital masculino:
• Testiculos y glandulas anexas (vesiculas seminales, prostata y glandula de
Cowper)
• Epididimos, conducto deferente, conducto eyaculador y la uretra.

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La secrecion de las glandulas anexas contribuyen a la composicion del esperma,


los espermatozoides constituyen la ultima fraccion cuando se eyacula. Es posible la
presencia de mancha seminal sin espermatozoides (p.e. En sujetos vasectomizados).

ESTUDIO DEL SEMEN

Estudio morfologico Estudio bioquimico Estudio biologico


K Observacion R Pmeba de la fosfatasa Reacciones inmunologicas
directa acida para e1 diagnostico grupo
microscopica K R Estudio especifico o diagnostico de
Coloracion microcristalografico especie.
(Reaccion de Florence)

ENSAYO DE ORIENTACION

Reconocimiento Fisico de una Mancha de Semen

P Luz de Wood : rayos UV filtrados


R El esperma se presenta con una fluorescencia de coloracion blanca azulada
(espermina) en una camara oscura; a veces amarillenta, cuando la mancha es
antigua.
R Las manchas secas varian su aspecto segfin e1 soporte:
• Materiales porosos o absorbentes: se presentan de color grisaceo, que se hace
amarillento en las manchas viejas de bordes irregulares. Si e1 soporte es
flexible adquieren consistencia apergaminada a1 tacto.
• Materiales compactos no absorventes: las manchas at secarse dejan un
deposito caracteristico constituido por una pelicula de escamas brillosas
(costrosas)

Reconocimiento Ouimico del Semen

R Microcristalografico
o Reaccion de Florence. El esperma reacciona con una solucion yodo
yodurada formando cristales de colina (peryoduro de colina), de
coloracion pardo caoba, de aspecto de hoja de helecho o de punta de lanza,
de tamano variable.

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R Bioquimico o enzimatico
o Test de fosfatasa :icida. El esperma tras maceracion en un buffer, vira de
una solucion transparente por alcalinizacion del medio en un compuesto
de color amarillo. ENSAYO DE CERTEZA.

Reconocimiento Microscopico

P Confirma la presencia de formas completas o incompletas (cabezas) de


espermatozoides, y alternativamente determina su mezcla con otros materiales de
sangre (sangre, materia fecal y otros)
R La investigacion de espermatozoides negativo, no permite afirmar que la mancha
no era de esperma

Reconocimiento Biologico del Semen

P Determinacion de especie:

Microscopico (montaje coloreado)


Existen notables diferencias entre el espermatozoides humano y e1 de las
especies animales.
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• Reaccion inmunologica
Empleo de antisueros humanos
Ensayos inmunoelectroforético

EL SEMEN COMO ELEMENTO IDENTIFICADOR INDIVIDUO AL QUE


PERTENECE

< Diagnostico grupal: Determinacion del gmpo sanguineo en base a la condicion de


secretores o no secretores del Sistema ABO. El esperma puede o no contener la
sustancia soluble de grupo sanguineo, segun sea secretor (S) o no secretor(s).

Los espermatozoides o fragmentos (cabezas) persisten en la vagina después del


coito por mas de 12 horas. Son moviles dentro de las 24 horas.
Es posible recuperar los espermatozoides de la vagina de un cadaver intacto.
• El estudio de las manchas de semen se debe incluir la ropa y cualquier otra
superficie o soporte incluyendo piel y cabellos,

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RECOLECCION Y ENVIO DE MUESTRAS DE SEMEN

MUESTRAS QUE DEBEN REMITIRSE

o Prendas de vestir de la victima


o Prendas de vestir del sospechoso o acusado
o Prendas de cama
o Hisopo o liquido de lavado vaginal o rectal
o Hisopo o liquido de lavado balano prepucial
o Condones, con datos referentes a: donde se encontro, condiciones de
recoleccion, marca
o Papel higiénico, etc.

RECOLECCION Y TRASLADO DE MUESTRAS

o Sobre material poroso: se extrae una pequefia area de la mancha con agua
destilada.
o Sobre material compacto: se raspa una pequena cantidad
o La temperatura y la humedad son aspectos fisicos que afectan
directamente a la lectura obteniéndose falsos negativos.

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TRICOLOGIA FORENSE

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Estudiar comparativamente los caracteres macro-microscopico de las formas,


estructuras y biometria de los pelos y cabellos humanos, asi como de los pelos de
animales, relacionados de alguna manera con un hecho delictuoso.

Determinar la aptitud de los alimentos y bebidas para e1 consumo humano

Determinar la data de muerte por la presencia de la fauna cadavérica

EL PELO

< Filamento cornificado flexible que se desarrolla de la epidermis.


< Se forma por una invaginacion tubular de la piel, e1 foliculo piloso, cuyas paredes
estan formados por epidermis y dermis.
< Esta conformado por:
½• Extremo proximal o raiz (foliculo piloso: bulbo y papila pilosa)
• Tallo piloso
½• Extremo distal o punta
< Quimicamente contienen 28% proteinas, 2% lipidos y 70 % de agua.
< Son resistentes a la descomposicion quimica, manteniendo sus caracteristicas
estructurales por largos periodos.
< Su color, tamafio y disposicion varia de acuerdo con la raza y
region del cuerpo.

ESTRUCTURA DE UN PELO

De afuera hacia adentro se distingue:

< La cuticula o escama. Conformada por células especializadas queratinizadas que se


apilan (superpuestas) desde e1 foliculo piloso, es decir que apuntan hacia e1 extremo
distal.

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Configuracion: simple, aserrada, dentada, flatenada, crenada, elongada, ovalada y


acuminada.

La médula o canal formado a partir de células centrales de la raiz. Estas células son
grandes, vacuolizadas y poco queratinizadas. Es caracteristico de pelos gruesos.
Formas: ausente - continua - fragmentada simple - compuesta - globular

La corteza formada por células poco queratinizadas dispuestas en forma compacta


alrededor de la médula. Configuran microfibrillas alineadas en direccion a la punta y
paralelas entre si a la longitud del cabello. Aqui se hallan los granulos pigmentados
que originan el color del cabello.

En el caso de los seres humanos, los cabellos se clasifican en:

Lisotricos que son cabellos rigidos, lisos y ondulados planos.


Quimatotricos, que incluye a los cabellos de grandes ondas (ondulados) y e1 rizado.
Ulotrico, que abarca los cabellos crespos, muy rizados, en espiral y lanoso.

DIFERENCIA ENTRE PELO ANIMAL Y HUMANO

Dentro del diagnostico especifico del pelo, se reduce a estudiar los caracteres
diferenciales de las partes constitutivas del pelo humano y del pelo animal, que han sido
resumidas por Lambert y Balthazard en e1 siguiente cuadro:

PELO ANIMAL
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PELO HUMANO PELO ANIMAL


CANAL MEDULAR
Red :irea granulosa < Contenido aéreo in:is o menos
voluminoso
Células medulares indivisible < Células medulares aparentes
Indice medular: < 0,30 < Indice medular: > 0,50
Pelos del vello sin médula < Médula en escalones o
moniliformes en los pelos del vello
SUSTANCIA CORTICAL
Forma un grueso manguito < Constituye un cilindro hueco bastante
delgado
Pigmento en granulaciones < Pigmento en granulaciones
irregulares siempre mayores que en
el hombre
CUTICULA
Escamas delgadas, poco salientes, < Escamas gruesas, salientes y menos
pequefias e imbricadas imbricadas

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CABELLO CASTANO

El indice medular expresa el diiimetro de la médula relativo at diiimetro del pelo


y se expresa normalrnente por medio de una fraccion. Para los humanos e1 indice, por lo
comun, tiene un valor menor a un tercio (1/3). Para la mayoria de los animales el valor
es de un medio (1/2) o mayor.

El pelo humano puede no exhibir médula o tenerla fragmentada raramente muestra


una medula continua en cambio, la mayoria de los animales tienen médulas que son
continuas o ininterrumpidas.

INVESTIGACION CRIMINALISTICA DE PELOS

< Los pelos en e1 meconio indica que e1 feto se hallaba en e1 8vo rues vida intrauterina.
< En el lugar de los hechos:
Pelos arrancados: destelladuras

Pelos cortados: oblicuo - transversal - romo


Pelos traumatizados: agente contuso comprime (aspecto cuneiforme).
< Por accion del calor puede aumentar de longitud, forma burbujas a los 190‘, y se riza
a 210 —240‘
< Lesiones por PAF a quema ropa el fogonazo riza los pelos.

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CABELO CON BULBO

TRACCION PARCIAL

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TRACCION TOTAL

CABELLO CON LIENDRE

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MICROBIOLOGIA FORENSE

La microbiologia es la ciencia que se ocupa del estudio de los microorganismos


(bacterias, levaduras, parasitos, protozoos, etc.) que contaminan, conservan o alteran los
diversos tipos de alimentos (de origen animal, vegetal o mineral), tejidos (animal o
vegetal) secreciones organicas e inorganicas.

La Microbiologia permite identificar a los microorganismos infectantes o


contaminantes en los alimentos para consumo humano o animal, tejidos, en secreciones
biologicas y sustancias organicas o inorganicas, que hayan causado intoxicaciones o
enfermedades, a los cuales califica como aptos o no aptos para e1 consumo o
determinando la carga de microorganismos infectantes.

La identificacion de los microorganismos se realiza mediante:

P El examen macroscoico, en e1 que se observan elementos visibles a simple vista


o con una lupa esteroscopica, por ejemplo colonias de hongos, insectos, parasitos,
protozoarios, etc.
P El examen microscopico, en e1 cual se observan protozoarios, levaduras, hongos,
bacterias Gram positivos o negativas, huevos de parasitos, algas, etc.
R Cultivo, aislamiento e identificacion microbiologica, de acuerdo a los
requerimientos o la gravedad del caso se realizan la siembra bacteriana en medios
de cultivo, que pueden ser enriquecidos, selectivos o diferenciales.

Estos estudios son especificos para la identificacion de la especie contaminante o


infectante.

RECOLECCION DE LAS MUESTRAS

R Los liquidos se recogeran en botellas limpias y secas, lavada con una pequefia
parte de los mismos, que se verteran para llenarlos después. Utilizar tapones
nuevos y lacrados.

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Las materias grasas, pastosas y semiliquidas en frascos de boca ancha, limpios y


secos. Se cerraran con papel parafmado o apergaminado, con su respectiva tapa
debidamente lacrada.

Las muestras cuya desecacion debe evitarse tales como e1 café, harina, sat, etc.
deben colocarse en frascos de boca ancha, limpios, secos y recubiertos con una
hoja de papel parafina, con su tapon de corcho respectivo.

Los productos solidos o en polvo se recogeran en papel blanco o en papel


pergamino.

Las muestras de agua se recogeran en frascos esterilizados, provistos de tapon de


cristal o corcho que sea nuevo, parafinado o esterilizado.

El numero total de muestras a tomar y el tamafio de las mismas depende del


numero y la distribucion uniforme o no, de los microorganismos del alimento.
Cuanto mas uniforme bacteriologicamente sea éste, menor sera e1 numero de
muestras necesarias y mas pequefio su tamano. Algunos alimentos son
relativamente homogéneos dentro de una unidad o lote, pero varian
considerablemente de un lote a otro. En tales casos se halla indicado e1 muestreo
de diferentes totes, procediéndose luego at examen de cada muestra en particular
o at de todas ellas en conjunto.

Las muestras que deben recogerse seran las convenientemente minimas y de las
zonas sospechosas, por ejemplo came 200 gr, agua potable 500 ml, harina 150 gr.,
etc.

Cuando no se puede hacer e1 examen microbiologico inmediatamente, las


muestras de los alimentos susceptibles a alteracion deben enfriarse
inmediatamente (si no lo estaban ya) y transportarse y conservarse congeladas o
refrigeradas en e1 laboratorio, hasta que se utilicen.

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CONSERVAS CON OXIDADO EN LA PARTE EXTERNA

CONSERVAS CON INCHAMIENTO QUIMICO

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ENTOMOLOGIA FORENSE

Es el estudio morfologico y taxonomico de insectos que intervienen en la


destruccion de cadaveres y en sustancias que tienen relacion con hechos delictuosos.

La determinacion de la Data de la Muerte es uno de los problemas mas


complicados que se Ie pueden presentar al Perito Criminalista; pero también su
importancia criminologico es transcendental. Fijar con exactitud el momento en que se
ha producido una muerte puede equivaler en la mayor parte de las ocasiones a descubrir
al verdadero autor y a librar de una falsa acusacion at inocente.

A estos datos para la determinacion de la fecha de la muerte se les llama también


Cronotanatodiagnostico los que son aplicados para determinar e1 intervalo post mortem o
tiempo desde la muerte hasta e1 hallazgo del cadaver. No hay método exacto sino
estimativo, tanto mas cuando mas tiempo a transcurrido.

La aplicacion de estos datos at cronotanatodiagnostico exige amplios


conocimientos entomologicos. Recogidas las muestras de los insectos presentes en e1
cadaver y de los restos de larvas, pupas, etc., identificadas las especies presentes se
determina el Grupo al que pertenecen ypor la sucesion de los ciclos vitales de los
géneros correspondientes podria deducirse la data de la muerte, a esto se ie
conoce como "FAUNA CADAVERICA" o "ENTOMOLOGIA FORENSE".

El estudio de insectos y acaros que infestan los alimentos (granos de cereales,


harinas) y otras sustancias tienen interés criminalistico para esclarecer casos de delitos
economicos, ecologicos y atentados a la salud.

La Fauna cadavérica, se llama también Entomologia Tanatologica, y esta


compuesta de aproximadamente unas veinte especies de insectos que formas 8 grupos en
corres-pondencia con los periodos en que entran en escena. Se distinguen,
cronologicamente, las faunas Californiana (desde la muerte), Sarco-faguiana (1 a 6
meses), Dermestiana(3 at 9 rues), Corinetiana( 10 rues), Silfiana (2do. afio), Acarina (2do
y 3er. ano).

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El grupo Californiano no esta representado mas que por moscas: Calliphora


ervtlirocephala y C. vomitaria (tipo agreste), grandes moscas azules de la came, Musca
doméstica, "mosca doméstica", M. corvina, Muscina stabulans, que ponen sus huevos
inmediatamente después de la muerte, sobre e1 cadaver fresco, alrededor de los orificios
naturales (labios, narices, angulo interno de los ojos) y a nivel de los pliegues cutiineos.
Las puestas, que agrupan 100 a 150 huevos, se escalonan de abril a octubre en nuestras
regiones.

Durante la estacion favorable, en 8 a 12 horas, los huevos se vuelven larvas o


gusanos muy voraces, 8 dras (musca) o 10 a 20 dras (Callphora) son necesarios para la
transformacion de estas en ninfas que se encierran en un capullo quitinoso de donde sale
el insecto perfecto tras una incubacion de 12 dras (verano) at rues; después, las
generaciones se suceden. El ciclo evolutivo completo (huevo, larva, ninfa, adulto) no dura
en pleno verano, mas que 12 dras. Es preciso pues un minimo de 12 dras para encontrar
capullos vacios bajo un cadaver, bajo los vestidos o en la tierra, a donde las larvas
emigran para enquistarse.

El grupo sarcofaguiano es atraido por el olor cadavérico de un tejido humano en


descomposicion. Se compone igualmente de moscas: Sarcophaga (mosca de color gris
cuyo abdomen esta cubierto de manchas torna-soladas), Lucilia (de 7 a 9mm de largo de
color verde brillante con manchas blancas a los lados) Cynomyia (abdomen azul
violaceo).

Si las crisalidas examinadas tienen los estigmas respiratorios posteriores situados


en e1 fondo de una depresion, proceden de sarcofagas, moscas que ponen larvar vivas
cuyo ciclo evolutivo es mas corto.

El grupo dermestiano coloniza e1 cadaver en e1 momento del desprendimiento de


los acidos grasos vo1iitiles (acido butirico de olor fuerte) procedente del enranciamiento
de las grasas. Comprende los coleopteros del genero Dermestes y una pequena mariposa,
Aglossa, que se nutren de grasa y devoran la grasa del cadaver.

En las regiones muy calidas, desérticas, las Dermestes son capaces de reducir un
cadaver at estado esquelético entre 40 y 100 dras, su ciclo evolutivo dura 30 dras.

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En el grupo corinetiano se encuentran pequenas moscas (Piohila Casei, mosca


muy comun en e1 queso, cuya larva se desplaza saltando) pero sobre todo coleopteros del
género Corynetes, de Swan de largo, azules o rojos. En Argelia son reemplazados por las
Necrobia mfipes. Estos insectos acuden en e1 momento de la "fermentacion caseaosa" de
las materias protéicas, que sigue a la fermentacion butirica de las grasas. Los insectos del
grupo silfiano son dipteos de pequefia talla, del tipo de los Phorides (Phora aterrima), de
los Ophira y de los coleopteros de la familia de los Silphides, de los que mas
representativos son los Necrophores. Son atraidos por las emanaciones amoniacales
procedentes de los liquidos saniosos.

El grupo acariano se compone de pequefios acaros, cuya talla es inferior a un


milimetro. Se desarrollaran en las ultimas serosidades putridas y secan e1 cadaver.

Después del tercer afio, atacan a los tendones, a las aponeurosis, a los cabellos, y
no dejan mas que los huesos; consumen también los restos de insectos abandonados,
estos iiltimos son coleopteros de la familia de los Anthrenes que también corroen las
pieles y destruyen las colecciones de la historia natural.
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ADIPOCIRA

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CADAVER CON ABUNDANTE LARVAS DE MOSCA

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LA ENTOMOLOGIA FORENSE Y SUS APLICACIONES A LA MEDICINA


LEGAL DATA DE MUERTE

Concha Magafia
Laboratorio de Antropologia. Instituto Anatémico Forense.
Ciudad Universitaria. Madrid
mcnm136@mncn.csic.es

Resumen: Se presenta una introduccién a la entomologia forense y a sus


aplicaciones a la medicina legal. La fauna cadavérica, incluyendo a los
artropodos, constituyen una valiosa ayuda para fijar la fecha o data de la muerte
en ciertos casos, asi como otros aspectos relacionados con las circunstancias
de la muerte y lugar de los hechos.

Palabras clave: Entomologia Forense, Data de la muerte.

“ Conferencia presentada en IX Congreso Ibérico de Entomologia, Zaragoza, 4-


8 julio, 2000.

La civilizacién de las moscas se ha visto incrementada recientemente por la


proliferacion de restos de materia organica y basura asi como por la
domesticacién de animales salvajes y la creacién de pueblos y ciudades. No
obstante, su estudio viene de muy antiguo. La 14a apida de la serie de Hurra-
Hubulla es una lista sistematica de animales salvajes terrestres del tiempo de
Hammurabi, de hace 3.600 af\os, basada a su vez en una lista sumeria aun mas
antigua. Se encuentra escrita en cuneiforme y es el primer libro de zoologia que
se conoce. Entre los 396 animales citados, 111 son insectos y 10 son moscas.
La "mosca verde" (Phaenicia) y la "mosca azul" (Ca/lip/›ora), muy comunes hoy
en casos forenses, son mencionadas aqui por primera vez.

En civilizaciones antiguas, las moscas aparecen como amuletos (Babilonia,


Egipto), como dioses (Baalzebub, El Senor de las Moscas), y es una de las
plagas en la historia biblica del Exodo. La metamorfosis de las moscas ya era
conocida en el antiguo Egipto, pues un papel encontrado en el interior de la boca
de una momia contiene la siguiente inscripcién: "Los gusanos no se volveran
moscas dentro de ti" (Papiro Gized nº 18026: 4: 14). La mayoria de los insectos
evitados en los embalsamamientos son los que ahora nos ayudan en la
resolucién de los casos de muerte (Greenberg, 1991).

El primer documento escrito de un caso resuelto por la entomologia forense se


remonta at siglo XIII en un manual de Medicina Legal chino referente a un caso
de homicidio en el que aparecio un labrador degollado por una hoz. Para resolver
el caso hicieron que todos los labradores de la zona que podian encontrarse
relacionados con el muerto, depositasen sus hoces en el suelo, at aire fibre,
observando que tan solo a una de ellas acudian las moscas y se posaban sobre
su hoja, to que llevé a la conclusién de que el dueno de dicha hoz debia ser el

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asesino, pues las moscas eran atraidas por los restos de sangre que habian
quedado adheridos at ‘arma’ del crimen.

Durante muchos afios en determinados ambientes, se pensaba que at morir una


persona las larvas que aparecian en el cadaver para devorarle bien aparecian
por generacion espontanea, o bien salian del propio cadaver. Estas creencias
perduraron hasta que Francisco Redi, un naturalista del Renacimiento se
propuso demostrar de una forma cientifica que estas larvas procedian de
insectos, los cuales depositaban sus huevos para que se desarrollasen sobre el
cadaver.

Para ello, realizé el siguiente experimento: expuso at aire fibre un gran ndmero
de cajas descubiertas y en cada una de ellas deposito un trozo de came, unas
veces cruda y otras cocida, para que las moscas atraidas por el olor vinieran a
desovar sobre ellas.

A las diversas carnes acudieron las moscas y desovaron ante la presencia de


Redi que observo como estos huevos depositados por los insectos se
transformaban primero en larvas, después en pupas y por dItimo cémo salian los
individuos adultos.

Redi distinguié cuatro tipos de moscas: Moscas azules (Ca/lip/›ora v'omiforia);


moscas negras con franjas grises (Sarcop/›aga carnaria); moscas analogas a las
de las casas (/\/usca domestica o quizas Curtonevra stabulans), y por fin moscas
de color verde dorado (Lucilia caesar).

Pero como es Iégico todo experimento tiene su contraprueba. Para ello, las
mismas carnes se colocaron en cajas, pero esta vez cubiertas con una gasa, a
fin de que también se produjese en ellas la putrefaccién, pero las moscas no
tuviesen acceso a ellas. Redi vio que evidentemente las carnes se corrompian,
pero que no aparecia sobre ellas ninguna larva. También observé que las
hembras de las moscas intentaban introducir la extremidad del abdomen por las
mallas tratando de hacer pasar a través de esta sus huevos y que algunas
moscas no depositaban huevos, sino larvas vivas, dos de las cuales pudieron
introducirse a través del tejido.

Redi también demostré que las moscas no cavan la tierra y que las lombrices de
tierra en ningdn caso se alimentan de los cadaveres enterrados.

Pero no fue hasta 1805 cuando Bergeret comienza a utilizar de una forma mas
o menos continua y seria la entomologia como ayuda en la medicina legal. El,
junto con Orfila y Redi, realizan estudios que son el punto de partida para que
Brouardel solicite el concurso de Megnin, quien amplio y sistematizé la
entomologia forense.

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La primera publicacién se realizé en "La Gazette hoddomaire de medicine et de


chirugie" en un articulo titulado "De I’appIication de I’entomoIogie a la medicine
Iégale", y después en una comunicacion a la Academia de Ciencias, en 1887,
bajo el titulo de "La Faune des Tombeaux".

Aunque, el auténtico nacimiento de la entomologia medico — legal tuvo lugar en


1894 con la publicacion de "La Fauna de los Cadaveres. Aplicacién de la
Entomologia a la Medicina Legal".

Los diferentes grupos de artrépodos fueron definidos por Megnin como


"escuadrillas de la muerte". Segdn el autor, estas escuadras son atraidas de una
forma selectiva y con un orden preciso: tan preciso que una determinada
poblacion de insectos sobre el cadaver indica el tiempo transcurrido desde el
fallecimiento.

Estudios posteriores han demostrado que esto no es ni mucho menos tan exacto
como pensaba Megnin y los primeros estudiosos del tema.

A pesar de los estudios realizados por Megnin y colaboradores, la Entomologia


medico — legal se vio estancada desde finales del siglo XIX hasta mitad del XX
por las siguientes razones:

1. Distanciamiento entre entomélogos y profesionales de la medicina legal.

2. El pequefio ndmero de casos en que los entomélogos eran requeridos.

3. La falta de entomélogos especializados en el estudio sistematico-


biolégico de la fauna de los cadaveres.

Aun a pesar de los inconvenientes expuestos anteriormente, en 1978 Marcel


Leclercq publica ‘Entomologia y Medicina Legal. Datacion de la Muerte’, y
posteriormente el inglés Smith publica en 1986 el ‘Manual de entomologia
forense’. A partir de este momento la trayectoria de la Entomologia Forense ha
sido imparable; siendo muchos los autores que han dedicado su tiempo y
conocimientos a estos estudios, e innumerables los casos policiales en los que
han contribuido entomélogos para su esclarecimiento.

Por dltimo, para concluir esta primera parte de datos generales deberiamos tener
claro cuales son los principales objetivos de la Entomologia Forense, que son:

A. Datacién de la muerte a través del estudio de la fauna cadavérica.

B. Determinacién de la época del ano en que ha ocurrido la muerte.

C. Verificar que un cadaver ha fallecido en el lugar donde ha sido hallado o


ha sido trasladado hasta el mismo.

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D. Dar fiabilidad y apoyo a otros medios de datacién forense.

Para un investigador criminalista que se enfrenta a un cadaver son tres las


preguntas fundamentales que se Ie plantean: Causa de la muerte y
circunstancias en las que se produjo, Data de la muerte y Lugar en el que se
produjo la muerte.

De estas tres cuestiones ("Causa", "Data" y "Lugar") los artrépodos poco o


nada pueden aportar respecto a la primera; esa labor, establecer la causa de la
muerte, corresponde at forense; sin embargo, tanto en la fijacion del momento
del fallecimiento como en la relativa a los posibles desplazamientos del cadaver,
los artrépodos pueden ofrecer respuestas y, en muchos casos definitivas.

La muerte de un ser vivo Ileva consigo una serie de cambios y transformaciones


fisico - quimicas que hacen de este cuerpo sin vida un ecosistema dinamico y
dnico at que van asociados una serie de organismos necréfagos, necréfilos,
omnivoros y oportunistas que se van sucediendo en el tiempo dependiendo del
estado de descomposicion del cadaver. EI estudio de esta fauna asociada a los
cadaveres recibe el nombre de entomologia forense.

La entomologia forense o medico — legal, por to tanto, es el estudio de los


insectos asociados a un cuerpo muerto para determinar el tiempo transcurrido
desde la muerte.

Este PMI o (intervalo postmortem) puede ser usado para confirmar o refutar la
coartada de un sospechoso y para ayudar en la identificacién de victimas
desconocidas enfocando la investigacién dentro de un marco correcto de tiempo.
Esta investigacion puede llegar a ser vital en la investigacién de un homicidio.

El problema de la determinacién del tiempo transcurrido desde la muerte es


complejo y debe ser tratado con mucha cautela, pues existen con frecuencia
muchos factores desconocidos, que hacen dificil llegar a unas conclusiones
definitivas.

En general, el tiempo transcurrido desde la muerte es determinado por analisis


de los restos a través de observacién externa, control fisico — quimico y
estimacién del deterioro producido por el paso del tiempo en artefactos como
ropa, zapatos, etc.

La observacién externa incluye factores como temperatura del cuerpo,


livideces cadavéricas, rigidez, signos de deshidratacién, lesiones externas,
accién por animales e invasién de insectos.

El segundo método de datacién incluye técnicas como determinacién de


elementos quimicos y compuestos como nitrégeno, aminoacidos y acidos
grasos.

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La tercera técnica viene con la valoracién del deterioro de tejidos plasticos, nylon
y materiales semejantes.

Después de la muerte, hay dos grupos de fuerzas postmortem que cambian la


morfologia del cuerpo.

El primer grupo incluye aquellos factores que vienen desde fuentes externas
como crecimiento bacteriano, invasién del cuerpo por los insectos y mordeduras
de animales.

El segundo grupo esta compuesto por factores que proceden del interior del
cuerpo, como el crecimiento de bacterias intestinales que aceleran la
putrefaccién y la destruccién enzimatica de los tejidos.

Los periodos mas importantes en la descomposicién de un cadaver son cuatro:

1. Periodo cromético
4 En esta fase se instaura la mancha verde en la fosa iliaca derecha;
esto suele suceder a partir de las 24 horas después del
fallecimiento.
4 Se empieza a ver el entramado venoso por la transformacién de la
hemoglobina.

2. Periodo enfisematoso
4 Aparecen los gases de putrefaccién y el cadaver comienza a
hincharse.
4 Comienza el desprendimiento de la epidermis.

3. Periodo colicuativo
4 Los tejidos se transforman en un magma putrilaginoso y
desaparece su forma habitual.

4. Periodo de reduccién esquelética


4 Desaparicion de las partes blandas.

Todos estos periodos se encuentran afectados por una serie de factores


que retardan o aceleran esta descomposicion; se trata de los siguientes:
1) Circunstancias de la muerte
2) Condiciones del cuerpo anteriores a la muerte
3) Temperatura
4) Humedad
5) Tipo de suelo en el que se produce la putrefaccién
6) Insectos
7) Otros animales

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Debido a la gran dificultad para calcular la tasa de descomposicién por el


crecimiento bacteriano, existe un gran numero de estudios sobre el efecto de los
insectos necrofagos en restos humanos encontrados at descubierto.

En los cadaveres se produce una progresién sucesiva de artrépodos que utilizan


los restos en descomposicion como alimento y como extensién de su habitat.
Esta sucesién de artropodos es predecible ya que cada estadio de la
putrefaccion de un cadaver atrae selectivamente a una especie determinada.
Aunque el papel de las diferentes especies de artrépodos es variable y no todas
participan activamente en la reduccién de los restos (Tabla I).

Tabla I

Sucesién de artrépodos en las diferentes fases de descomposicién de un


cuerpo (tiempo expresado en dias)
ARTROPODO

ASOCIADOS
Cromético enfisematoso colicuativo red.esquelética

Diptera:
Calliphoridae

Sarcophagidae

Muscidae

Piophilidae

Fanniidae

Hymenoptera:
Vespidae

Formicidae

Coleoptera:
Staphylinidae

Dermestidae

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Histeridae

Scarabaeidae

Tenebrionidae

Cleridae

Silphidae

Dermaptera:

Collembola:

Blattaria:

Los diferentes tipos de artrépodos que llegan a un cadaver pueden clasificarse


de la siguiente forma:

Especies necréfagas: son las que se alimentan del cuerpo. Incluye dipteros
(Calliphoridae y Sarcophagidae) y coleopteros (Silphidae y Dermestidae).

Especies predadoras y parésitas de necréfagos: este es el segundo grupo


mas significativo del cadaver. Incluye coleopteros como (Silphidae, Staphylinidae
e Histeridae), dipteros (Calliphoridae y Stratiomydae) e himenopteros parasitos
de las larvas y pupas de dipteros.

Especies omnivoras: se incluyen aqui grupos como las avispas, hormigas y


otros coleépteros que se alimentan tanto del cuerpo como de los artrépodos
asociados.

Especies accidentales: aqui se incluyen las especies que utilizan el cuerpo


como una extension de su habitat normal, como por ejemplo Collembola, araf\as,
ciempiés. Algunas familias de acaros que pueden alimentarse de hongos y moho
que crece en el cuerpo.

Existen dos métodos para determinar el tiempo transcurrido desde la muerte


usando la evidencia de los insectos. El primero utiliza la edad de las larvas y la
tasa de desarrollo (fig. 1). El segundo método utiliza la sucesién de insectos en

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la descomposicién del cuerpo. Ambos métodos se pueden utilizar por separado


o conjuntamente siempre dependiendo del tipo de restos que se estén
estudiando. Por to general, en las primeras fases de la descomposicién las
estimaciones se basan en el estudio del crecimiento de una o dos especies de
insectos, particularmente dipteros, mientras que en las fases mas avanzadas se
utiliza la composicién y grado de crecimiento de la comunidad de artrépodos
encontrada en el cuerpo y se compara con patrones conocidos de sucesién de
fauna para el habitat y condiciones mas proximas.

Los parametros médicos son utilizados para determinar el tiempo transcurrido


desde la muerte cuando éste es corto, pero después de las 72 horas la
entomologia forense puede llegar a ser mas exacta y con frecuencia es el unico
método para determinar el intervalo postmortem.

Existen casos de homicidios en que la victima es trasladada o asesinada en


lugares remotos, to que retrasa su hallazgo. Hay homicidios en los cuales las
victimas tardan meses en ser descubiertas, y en estos casos es muy importante
determinar el tiempo transcurrido desde la muerte.

Los insectos son con frecuencia los primeros en llegar a la escena del crimen, y
ademas llegan con una predecible frecuencia, como ya ha sido mencionado
anteriormente (Anderson, 1995).

A pesar de todo, es muy importante tener en cuenta, que la entomologia forense


se basa en el estudio de elementos biolégicos, por to que posee las limitaciones
inherentes a la propia variabilidad de estos elementos. La determinacién del PMI
es en realidad la determinacion de la actividad de los artrépodos, mas que la
determinacién del tiempo per se (Goff, 1993).
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Asi es posible en determinados casos que la data dada por el entomélogo no


coincida con la data proporcionada por el medico forense que ha practicado la
autopsia; esto puede ocurrir, bien porque los insectos no hayan colonizado el
cadaver en los primeros dias después de producirse la muerte (lugares de dificil
acceso para los insectos, casas perfectamente cerradas, etc.), o por ejemplo en
los casos de abandono y malos tratos en nifios y ancianos pueden existir heridas
y lesiones que por su falta de higiene sean colonizadas por los insectos antes de
producirse la muerte de la persona (fig. 2).

Asi pues para una correcta estimacién del intervalo postmortem (PMI) mediante
la entomologia hay que tener en cuenta que cada caso es dnico y diferente de
los demas. Aunque el proceso siga una secuencia general de eventos. Esta
secuencia general es presentada por Catts & Haskell en su monografia
"Entomology and Death: A Procedural Manual" que nos indica un modo general
de actuacién:

• Determinar la fase o estado fisico de descomposicién en que se encuentra


el cuerpo.
• Realizar un estudio exhaustivo de los insectos que se encuentran sobre
el cadaver asi como de los recogidos debajo de él para descartar la
posibilidad de que el cadaver haya sido trasladado de lugar. Si se tiene
alguna sospecha seria necesario un examen adicional tanto de los restos
como de las areas cercanas.
• Clasificar los especimenes recogidos tanto de los restos como de la
escena del crimen to mas exactamente posible. Criar los estados
inmaduros hasta el estadio adulto para su correcta identificacion. La
conservacién de estos estadios inmaduros debe ser correcta para no
afectar at tamafio que poseen en el momento de la recogida. La
distribucién estacional, geografica y ecolégica de cada grupo debe ser
determinada bien por la literatura o por alguna persona cualificada
para ello.

• En los cadaveres encontrados at aire fibre, es imprescindible recolectar


datos como la temperatura, pluviosidad, nubosidad, etc. ademas de
factores como vegetacion, arbolado, desniveles del terreno etc. Para las
escenas en el interior es igualmente necesario anotar temperatura,
existencia de calefactores automaticos, posicion del cadaver con respecto
a las puertas y ventanas, asi como cualquier otro detalle que nos pueda
dar informacién de cémo y cuando han llegado los insectos at cadaver.

• Durante la autopsia es importante tomar nota de la localizacién exacta de


los artropodos en el cuerpo, asi como de la causa y manera de la muerte.
También es importante anotar si existe evidencia de la administracién
antemortem de algun tipo de drogas o productos téxicos dado que la
presencia de este tipo de sustancias puede alterar la tasa de desarrollo y
los patrones de insectos que se hayan alimentado de los restos.

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La muerte conlleva una perdida de la temperatura del cuerpo, la cual se equilibra


con el medio ambiente en 24 horas, siempre que la temperatura exterior no sea
demasiado baja. Aparecen livideces en el cuello y las partes declives en la
primera hora, mientras que la rigidez cadavérica se generaliza at cabo de unas
siete horas para desaparecer segun las circunstancias en dos, tres o cuatro dias.

En estos momentos, en los que nada es visible para el ojo humano, es cuando
las primeras oleadas de moscas comienzan a llegar at cuerpo. Las hembras
gravidas llegan at cadaver, lamen la sangre u otras secreciones que rezuman de
heridas o los orificios naturales y realizan la puesta en los primeros momentos
después de la muerte.

Cémo y cuando llegan estos insectos at cadaver y como se desarrollan en él,


son las preguntas que debe hacerse toda persona que se interese por la
entomologia forense.

Las primeras oleadas de insectos llegan at cadaver atraidos por el olor de los
gases desprendidos en el proceso de la degradacion de los principios inmediatos
(glucidos, lipidos y prétidos), gases como el amoniaco (NH3). acido sulfdrico
(SH2), nitrégeno fibre (N2) y anhidrido carbonico (CO2). Estos gases son
detectados por los insectos mucho antes de que el olfato humano sea capaz de
percibirlos, hasta tal punto, que en algunas ocasiones se han encontrado
puestas en personas que aun se encontraban agonizando.

Tradicionalmente se menciona a los dipteros como los primeros colonizadores


del cadaver, donde estos insectos cumplen una parte importante de su ciclo vital.
Constituyen la primera oleada de necréfagos, que aparece inmediatamente
después de la muerte. Esta representada por dipteros pertenecientes a las
familias de Calliphoridae (Ca/lip/›ora v'icinia) y muy frecuentemente
Sarcophagidae (Sarcop/›aga carnaria) (fig. 3 y 4).

Estos dipteros braquiceros tienen un ciclo vital cuyas distintas etapas deben
conocerse en su duracion y caracteristicas, con fines de datacién. Las hembras
de estas familias suelen depositar sus huevos en los orificios naturales del
cadaver tales como ojos, nariz y boca, asi como en las posibles heridas que
pudiese tener el cuerpo. La familia Sarcophagidae no pone huevos, sino que
deposita larvas vivas.

Los huevos son aproximadamente de 2mm de longitud y poseen un corto periodo


embrionario. El estadio de huevo suele durar entre 24 y 72 horas, siempre
dependiendo de la especie (fig. 5).

Estas primeras puestas ya pueden proveer informacién at investigador, pues la


diseccién de los huevos y el analisis de su estado de desarrollo embrionario
puede delimitar el tiempo desde la ovoposicion, y con ello el tiempo de la muerte.

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El ndmero de huevos depende del estado nutricional de la hembra y de su


tamano corporal; existe una relacién inversa entre el tamano del huevo y el
ndmero de huevos por paquete (Greenberg, 1991).

Existen datos que indican que si dos cuerpos son expuestos a la vez, uno con
heridas o traumas y otro sin ellos, el que presenta las lesiones se descompone
mucho mas rapidamente que el que no presenta traumatismos debido a que la
mayoria de las moscas son atraidas por las heridas, donde tienen lugar muchas
de las ovoposiciones mas tempranas (Mann et at., 1990).

Tampoco hay que descartar como lugar de puesta la zona de contacto del cuerpo
con el sustrato, posiblemente porque en esa zona es donde se acumulan los
fluidos corporales, to que provee una humedad adecuada, asi como una
temperatura mas estable (Anderson & Vanlaerhoven, 1996).

Los huevos puestos en un cadaver normalrnente eclosionan todos a la vez, to


que da como resultado una masa de larvas que se mueven como un todo por el
cuerpo (Col & Lord, 1994).

Las larvas son blancas, cénicas, apodas y formadas por 12 segmentos; nacen y
se introducen inmediatamente en el tejido subcutaneo. Lo licuan gracias a unas
bacterias y enzimas y se alimentan por succion continuamente.

Cuando las larvas han finalizado su crecimiento, cesan de alimentarse y bien en


los pliegues del cuerpo, de la ropa o alejéndose del cuerpo, se transforman en
pupa. El crecimiento y la transformacién en pupa varian ademas de con cada
especie, con las condiciones exteriores y dependen de la causa de la muerte y
tipo de alimentacién.

Existen innumerables referencias de la temprana Ilegada de los dipteros at


cuerpo una vez acaecida la muerte; también existen referencias sobre la
presencia de puestas en cuerpos aun con vida, bien por la existencia de heridas
abiertas o por procesos inflamatorios purulentos (Nuorteva, 1977).

Las larvas que eclosionan en cuerpos con vida, en primer lugar se alimentan de
los tejidos necréticos para seguir alimentandose de los vivos, causando las
miasis.

Por to tanto, la presencia de los calliféridos en un cadaver reciente, es inevitable.


Toda ausencia de huella de este paso, pupas vacias, adultos muertos, debe
obligar a los investigadores a formular ciertas hipotesis:

A. Que el cadaver haya sido trasladado de lugar, y au en este caso se


encontraria algun resto de estos dipteros.

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B. Que el lugar del fallecimiento sea to suficientemente oscuro e inaccesible


a estos grandes dipteros cosa poco probable pues los calliforidos se
encuentran dentro de las casas durante todo el af\o.

C. Que los restos de los dipteros hayan desaparecido por la accién de los
necréfilos (depredadores o parasitos de los necréfagos), o animales
(aves insectivoras, hormigas, avispas).

Ello no ocurre practicamente nunca de modo completo, a no ser que el intervalo


postmortem sea muy largo. Y au en este caso, hay que tener en cuenta que la
cuticula de los artrépodos es practicamente indestructible, pudiendo permanecer
miles de anos; se han encontrado pupas fésiles de dipteros en el craneo de un
bisonte perteneciente at Cuaternario.

D. Que el cadaver haya sido impregnado con productos repugnatorios, que


hayan impedido el acceso de las primeras oleadas de insectos. En este
caso aparecerian en el cadaver restos de productos como arsénico,
plomo o formol, que se ha comprobado evitan la presencia de los
primeros necréfagos en el cadaver.

Normalrnente, y a la vez que los calliféridos, aunque en muy pocos casos


conviviendo en el mismo cadaver, aparece otro grupo de dipteros los
sarcofagidos. Concretamente la especie Sarcophaga carnaria, es la mas comun
en nuestras latitudes. Muy frecuentemente en los meses de Julio y Agosto, suele
ser la primera colonizadora de los cuerpos en descomposicion. Que no
aparezcan juntas con los calliféridos puede deberse a que las larvas de
Sarcop/›aga depredan a las de Calliphora.

Otros calliféridos que también pueden aparecer en los cadaveres aunque con
menos frecuencia que la Calliphora vicinia son los géneros Lucilia (L. sericata y
L. caesar), Phaenicia (Ph. Sericafa) y Chrysomyia (C/›. a/biceps). Estos géneros
son activos a partir de los 13” C y realizan sus puestas principalmente en los
pliegues del cuerpo, eclosionando entre las 10 y las 52 horas de la puesta, el
crecimiento de la larva dura entre 5 y 11 dias y la pupacién varia de forma
importante ya que a unos 13”C dura entre 18 y 24 dias mientras que a
temperaturas de 31ºC puede reducirse a entre 6 y 7 dias.

Es importante sef\afar que mientras los sarcofagidos pupan entre la ropa o en


los pliegues del cuerpo y aprovechan los orificios naturales para sus puestas, los
calliféridos se entierran para realizar la pupacion y prefieren hacer sus propios
orificios (fig. 6).

En nuestro pais, Chrysomyia albiceps aparece durante los meses de septiembre


y octubre, Sarcophaga carnaria de marzo a noviembre y Lucilia sericata de abril
a septiembre (Dominguez y Gomez, 1963).

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Con la aparicién del acido butirico en el cadaver aparecen los primeros grupos
de coleopteros derméstidos como Dermestes maculatus, D. frischii y D.
undulatus, y el lepidéptero Aglossa pinguinalis. Son bastante comunes en
cadaveres de aproximadamente un rues.

Los adultos de Dermestidae emergen at principio de la primavera, abandonan su


habitaculo de ninfa, se aparean y vuelan en busca de cadaveres o de restos de
animales en descomposicién. Las hembras efectuan puestas durante varias
semanas de entre 150 y 200 huevos en grupos de 2 a 10 en las fisuras de las
materias nutricias. Estos huevos eclosionan segun la temperatura entre 3 y 12
dias después de la puesta. Las larvas presentan un cuerpo alargado y
progresivamente afilado por detras, marron rojizo, erizados de pelos cortos y
largos y seis patas moviles (fig. 7). Su ciclo vital dura entre 4 y 6 semanas. Es
importante conocer que estas especies dan una sofa generacién anual o dos en
condiciones favorables a 18 — 20ºC de temperatura y 70% de humedad. Son
insectos que se alimentan especialmente de la grasa en descomposicion mudas
y desechos de las escuadras anteriores (fig. 8).

7 9 10 11 12

Estos coleépteros evolucionan sobre las grasas en fermentacién at mismo


tiempo que las orugas de una pequef\a mariposa de género Aglossa (A.
pinguinalis). Estos lepidépteros viven con mucha frecuencia en las cuevas, las
bodegas, las plantas bajas deshabitadas o utilizadas como almacenes de
alimentos. Revolotean at amanecer desde la mitad de junio hasta septiembre.
Las hembras hacen la puesta en varias veces, en los productos de origen animal
olvidados. El olor rancio de las grasas descompuestas las atrae poderosamente.
Desaparecen en el cuerpo y se alimentan un rues largo, después salen y se
transforman en crisalidas durante 20 dias en un capullo formado de restos
diversos. La temperatura provoca su eclosién si es suave o la retarda hasta la
primavera siguiente en caso contrario.

Después de la fermentacién butirica de las grasas aparece la fermentacién


caseica de los restos proteicos. En estos momentos, son atraidas las mismas
moscas que pueden acudir at producirse la fermentacién del queso o del proceso
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del secado del jamén: la especie mas importante es la Piophila casei, con un
ciclo vital de unos 30 dias. En este momento podemos encontrar otras grupos
de dipteros como Fannia scalaris, F. canicularis, F. incisurata, asi como
drosofilidos, sépsidos y esferocéridos.

Entre los coleépteros hace su aparicién la especie (Necrobia. violacea) con las
mismas preferencias nutritivas que Piophila casei”, e\ ciclo vital dura
aproximadamente entre 25 y 35 dias.

El siguiente proceso en aparecer es la fermentacién amoniacal. En este periodo


van a visitar el cadaver los dltimos grupos de moscas pertenecientes at género
Ophira (O. leucostoma, O. cadaverina y O. anfrax) y at grupo de los féridos
(Triphleba trinervis, T. hyalinata, T.opaca, Diploneura abdominalis, Prora
aterrina, etc). Estos grupos de moscas viven habitualmente en nidos de pajaros,
madrigueras de pequefios mamiferos, habitaculos de insectos sociales, etc. Y
se nutren a expensas de los restos alimenticios, excrementos o residuos
organicos de sus hospedadores.

Formando parte de esta escuadra encontramos a los coleépteros necréfagos por


excelencia. Especies como Necrophorus humator, N. vespilloides y N. vestigator,
Necrodes littoralis y Silpha obscura, son comunes en los cadaveres en avanzado
estado de descomposicién (fig. 9, 10 y 11).

Pertenecientes a la familia de los estafilinidos aparecen las especies Coprophilus


striatulus, Omalium rivulare y Creophilus maxillosus”, y entre los histéridos
miembros de los géneros /-/isfer (/-/. bimaculatus, H. unicilor, H. ignobi/is) y
Saprinus (S. semipunctatus, S. depresus, S. semis/riafus) (fig. 12).

Es curioso senalar que Omalium rivulare aparece en invierno, dato que puede
resultar muy significativo en una investigacion.

Han pasado ya mas de 6 meses y entramos en la etapa de Desaparicién de los


restos con el cadaver practicamente seco o con un grado de sequedad bastante
importante; en este momento aparecen en el cadaver verdaderas masas de
acaros, generalmente de tamaf\o microscopico, que se cuentan por millares de
individuos. Pertenecen a ocho o diez especies no bien conocidas. Los mas
estudiados son los que pertenecen at grupo de los tiroglifidos (Tyrog/yp/›us siro).
En ocasiones pueden ser observados en el jamén muy seco, cecina u otros
productos secos o ahumados.

Tras la desaparicién de los acaros el cadaver ya esta completamente seco.

Hacen entonces su aparicién una serie de coleépteros que van a alimentarse de


los restos de pelo, piel, ufias, etc., pertenecientes a los géneros Dermestes (D.
maculatus), Attagenus (A.verbasci), Rhizophagus, etc.; también vuelven a
aparecer algunas especies de derméstidos que ya habian aparecido en etapas

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anteriores. Aparecen también algunos lepidépteros con los mismos habitos


alimenticios en estado larvario: Aglossa caprealis, Tineola bisselliella, entre
otros. A partir de 1-1,5 anos de la muerte, en el cadaver no quedan mas que
escasos restos organicos, huesos y en su entorno restos de los artrépodos que
to han visitado. En este momento hacen su aparicion tres especies de
coleopteros muy caracteristicos que se alimentan a base de estos residuos
Ptinus brummeus, Trox hispanus y Tenebrio obscurus.

Pero no todos los cadaveres aparecen en tierra, pues frecuentemente aparecen


cadaveres sumergidos en agua, tanto dulce como salada. La fauna cadavérica
hidrica a la que hace mencién por primera vez Raimondi y Rossi en 1888, no es
conocida como la fauna terrestre, debido a la dificultad que entrana su estudio.

No obstante, Porta, en 1930, Ileva a cabo una serie de investigaciones que se


esquematizan en la Tabla II.

Tabla II
Fauna cadavérica hidrica por periodos

SUMERSI©N EN AGUA DE MAR | SUMERSI©N EN AGUA DULCE |


Fauna
Periodo Fauna cadavérica Periodo cadavérica
Larvas insectos de

Crustaceos
Moluscos
Cromatico Cromatico
Moluscos
Crustaceos (escasos)
Sanguijuelas

Larvas insectos de

Moluscos
Crustaceos (escasos)
Enfisematoso Enfisematoso
(abundantes)
Crustaceos
(abundantes)

Peces
Peces
De disolucién
Cualicuativo
inicial Protozoarios
Sanguijuelas

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Celenterados

Crustaceos
(excepcionalmente)
De disolucién
Peces
terminal

Ya hemos hablado anteriormente de la importancia de la temperatura a la hora


de la determinacién del intervalo postmortem, pero existen otros factores
importantes que hay que tener en cuenta aparte de la temperatura, como el
fenémeno de pedantismo y canibalismo entre los insectos; una particularidad
que no hay que dejar de tener en cuenta en entomologia tanatolégica es la
existencia de insectos predadores, como hormigas y avispas, que en ocasiones
capturan y destruyen las larvas de dipteros que se desarrollan en un cadaver, y
at no quedar sino vestigios de las mismas, pueden mover a confusién o a
interpretaciones erréneas.

Mas de una vez nos hemos visto en la imposibilidad de hacer acopio de larvas a
partir de cadaveres de animales, cuando éstos se encontraban situados en
lugares donde abundaban las hormigas.

Desde este punto de vista, el fenémeno mas interesante es el canibalismo


existente entre larvas de especies vecinas que se encuentran en un momento
determinado en un mismo lugar. Por ejemplo, las larvas de Sarcophaga carnaria
pueden convivir con las de Lucilia, pero en un momento determinado, si escasea
el alimento, estas Ultimas pueden ser devoradas por las de Sarcophaga.

Todos los elementos citados anteriormente, junto con algunos otros, habran de
ser tenidos en cuenta por el experto para asi poder ofrecer conclusiones mas
fiables a la hora realizar un informe para datacion de la muerte mediante la
entomologia.

A continuacién, y para terminar, se muestra un protocolo que deberia ser


conocido por toda persona que en algdn momento tenga que realizar una
recogida de muestras para la datacion de la muerte:

ENCUESTA ENTOMOLOGICA
Protocolo de recogida de muestras

• Recolectar una muestra completa de todos los insectos o acaros que se


encuentren tanto encima como debajo del cadaver.
• Recolectar ejemplares tanto vivos como muertos, en estado adulto o
larvario. Asi como sus mudas.
• En cadaveres recientes, se buscaran los huevos y larvas pequenas en
orificios naturales asi como en las posibles heridas.
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• Las muestras se guardaran por separado y convenientemente rotuladas,


si es posible indicando la zona de donde se obtuvieron.
• Parte de las larvas se sumergiran en agua hirviendo para después
conservarlas en alcohol y es conveniente que otra parte se mantengan
vivas, para su posterior desarrollo en el laboratorio.
• Los acaros, si los hubiese, seran conservados en alcohol de 70ºC.
• Se realizan una estimacién de abundancia de cada muestra.
• Se precisaran los datos de fecha y lugar y metodologicos del entorno del
cuerpo.
• Las muestras se enviaran at entomélogo a la mayor brevedad posible.

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complementarias)

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BIOLOGY MOLECULAR -ADN

OBJETIVOS ESPECIFICOS

P Explicar el conjunto de procedimientos técnico-cientifico que permiten establecer


ciertas diferenciaciones biologicas en cada uno de los individuos, y que ayudan a
diferenciarlo de otro.

P Explicar el método del ADN para la determinacion de la Paternidad y Maternidad


y en la Identificacion humana en hechos delictivos

ESTRUCTURA Y FUNCION DEL ADN

En los organismos vivos, la informacion hereditaria es ahnacenada en e1 écido


desoxirriboniicleico (ADN), constituyendo éste e1 material genético primordial, a
excepcion de algunos virus que alrnacenan su informacion genética en e1 acido
ribonucleico (ARN).

Cromosoma

Nucleo
Molécula de Localizacion del ADN en el
ADN de interior de una célula
doble cade

El ADN fue descubierto por Miescher en 1871, pero recién se to identifico como
portador de la informacion genética a mediados de nuestro siglo (Avery et a1, 1944;
Hershey and Chase, 1952). En 1953, Watson and Crick (1953 a, b) sugieren un modelo
tridimensional para su estructura y mecanismo de replicacion, confirmados
posteriormente.

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De acuerdo con e1 modelo propuesto, el ADN es una molécula bicatenaria,


constituida cada cadena por la secuencia de unidades quimicas denominadas niicleétidos.
Cada nucleotido esta compuesto por una pentosa, la deoxirribosa, un gmpo fosfato y una
base nitrogenada.

Los nucleotidos difieren solamente a nivel de las bases nitrogenadas, que son de
dos tipos: las purinas, representadas por la guanina (G) y la adenina (A),‘ y las
pirimidinas, constituidas por la citosina (C) y la timina (T). A to largo de la cadena
polinucleotidica, los nucleotidos se unen por uniones fosfodiéster, resultando una
secuencia alternante aziicar-fosfato y emergiendo las bases nitrogenadas en forma
perpendicular a esta estructura.

Las dos cadenas polinucleotidicas dextrohelicoidales, enrolladas sobre un mismo


eje, constituyen una doble hélice. Cada una de ellas presenta una orientacion de sus
puentes fosfodiéster 3'-5' internucleotidicos opuesta a la de la otra, determinandose asi e1
antiparalelismo de las cadenas. Las bases nitrogenadas de una de las cadenas se aparean,
sobre elmismo plano, con las emergentes de la otra cadena. Debido a problemas estéricos,
solo son posibles dos tipos de apareamiento: A-T y G-C, que son precisamente los que
presentan una exacta equimolaridad en todos los ADNs estudiados (Chargaff, 1950). El
par A-T esta mantenido por dos puentes de hidrogeno, en tanto que el par G-C lo esta por
tres.

Las bases nitrogenadas son hidrofobicas, ubicandose en el interior de la doble


hélice, en tanto que los aziicares y fosfatos, por estar cargados eléctricamente, estan
expuestos at contacto con e1 agua. De esta manera, la estructura del ADN no solo esta
mantenida por las uniones puente de hidrogeno, sino también por las interacciones
hidrofobicas generadas cooperativamente at apilarse las bases.

Las dos cadenas de la doble hélice no son idénticas, ni en composicion ni en


secuencia de nucleotidos, pero st mutuamente complementarias: enfrentada a una T
siempre habrii una A en la otra cadena, asi como enfrentada a una C de una cadena
siempre habra una G en la otra y viceversa. Esta complementariedad solo puede darse
en forma antiparalela, presentando una de las cadenas e1 sentido 5'-3' (determinado por
las uniones fosfodiéster internucleotidicas), y la otra el sentido 3'-5'.

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El modelo postulado por Watson y Crick sobre la estructura del ADN les permitio
proponer, a la vez, un mecanismo de replicacion: ya que las dos cadenas son
complementarias, durante la replicacion podria producirse la separacion de las cadenas
de la molécula, constituyendo cada una un molde sobre e1 que se sintetizaria la cadena
hija, complementaria.

Como resultado, se obtendrian dos moléculas hijas, constituida cada una de ellas
por una cadena parental y una sintetizada usando aquella como molde. Se plantearon asi
las bases de la replicacion semiconservativa del ADN, posteriormente comprobada en
forma experimental (Meselson and Stahl, 1958).

EL ADN EN LA IDENTIFICACION INDIVIDUAL

A partir del descubrimiento de polimorfismos hipervariables en e1 ADN por


Wyman and White (1980), y de la posibilidad de emplearlos en identificacion humana,
lograda por Jeffreys (1985), los rangos de probabilidad de exclusion se incrementaron
enormemente, a mas del 99,99 0 , superando incluso a la aplicacion de todos los sistemas
anteriores en conjunto.

Reseiia historica. En orden cronologico, puede decirse que el puntapié inicial de los
analisis de ADN se produce en abril de 1985, cuando e1 primer caso judicial es resuelto
por aplicacion de técnicas moleculares de caracterizacion de secuencias hipervariables en
el acido desoxirribonucleico (ADN) (Jeffreys et a1., 1985).

Los resultados obtenidos mediante e1 estudio de las Huellas Digitales Genéticas


(HDG) o "DNA-Fingerprinting" permitieron aclarar una disputa por inmigracion a Gran
Bretafia (Jeffreys et at 1985b). Poco tiempo después, una corte civil inglesa acepta la
evidencia de ADN en un caso de paternidad discutida.

El debut de esta prueba en la investigacion criminal se produce en octubre de


1986, en un caso de homicidio en e1 que se comprobo la inocencia del principal
sospechoso (Gill and Werret, 1987; Wong et al., 1987). Recién a partir del aiio 1987, las
pmebas de ADN son admitidas como evidencia en las Cortes Criminales de Gran
Bretaiia y de Estados Unidos. En 1988 se desarrollan técnicas de amplificacion de
ADN de pequenas regiones variables del genoma, partiendo de solo 1700 células
diploides, equivalentes a unos 10 nanogramos de ADN (Saiki et at, 1988).
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Estas técnicas, denominadas genéricamente reaccién en cadena de la polimerasa


("Polymerase Chain Reaction" o PCR), emplean iniciadores o primers, que son
secuencias de ADN complementarias de las zonas flanqueantes de la zona de interés
(Jeffreys et al, 1989), que es amplificado por una ADN polimerasa durante ciclos térmicos
adecuados, lograndose millones de copias de la region.

En 1989, y a causa de estudios de dudosa verosimilitud efectuados por la empresa


americana Lifecodes Corp. en un caso criminal, se discute en los Estados Unidos la
validez cientifica de estas pruebas para uso forense (Lander, 1989), resultando en una
revision critica de las técnicas utilizadas por los distintos grupos de investigadores.

En 1990, el U.S. Congress Office of Technology Assessment concluye que la


identificacion de individuos basada en las pruebas de ADN es cientificamente valida,
siempre que se disponga de la certeza metodologica de su realizacion. La estandarizacion
de las mismas ha sido encarada, entre otros, por los laboratorios del FBI (FBI Academy,
Quantico, 1989).

La razon fundamental de la amplia difusion de estas técnicas estriba en e1 hecho


de que, mientras la serologia clasica y los marcadores genéticos evaluables
fenotipicamente presentan un numero muy limitado de genotipos posibles, e1 continuo
descubrimiento de nuevas regiones hipervariables en e1 ADN resuelve e1 problema de la
identificacion certera de individuos y del establecimiento de vinculos biologicos de
parentesco (Chakraborty and Jin, 1993).

En los primeros trabajos con utilizacion de las técnicas de PCR, si bien resultaba
posible evaluar regiones de una muestra de ADN que podia estar muy degradada, la
escasa variabilidad entre los individuos componentes de la poblacion general conspiraba
contra la certeza incriminatoria del aniilisis: era factible que una evidencia coincidiera
con un sospechoso por azar, y mucho mas aun, que a un padre alegado le fuera atribuida
erroneamente la paternidad biologica de un descendiente putativo.

A partir de los ’90, la posibilidad de evaluar un gran numero de sitios variables


localizados en diferentes zonas del genoma (Edwards et at, 1991), permitio analizar,
aunque fuera parcialmente, muestras de tejido humano quemado y en estado de
putrefaccion, como e1 derivado del atentado a la Embajada de Israel (Corach et at, 1992).
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Posteriormente, la incorporacion de un niimero aiin mayor de sistemas hizo


posible e1 establecimiento de vinculos biologicos de parentesco a través de secuencias de
ADN de muy pequeiio tamano, con lo cual se logro la identificacion de cadaveres
momificados, con reduccion osea total o quemados (Penacino and Corach, 1993;
Penacino et al, 1994c) de una muestra con una sonda de locus especifico.

Reaccion en cadena de la polimerasa (PCR o Polymerase Chain Reaction): La


amplificacion mediante PCR requiere pequenas secuencias de ADN sintético los que
actiian como iniciadores oprimers, que son complementarios de las regiones flanqueantes
de la zona de interés. Se produce mediante varios ciclos (generalmente de 25 a 35), cada
uno de los cuales consta usualmente de tres pasos, efectuados mediante cambios de
temperatura:

R Desnaturalizacion: ruptura de los puentes de hidrogeno, quedando el ADN


como simple cadena.
R Reasociacion o annealing, Hibridacion: los primers se reasocian a las
zonas complementarias.
R Extension: se sintetiza ADN, con los nucleotidos y una ADN polimerasa
que se hallan en la mezcla de reaccion, generandose a1 final del proceso
millones de copias de la region de interés.

Secuencia
diana
Amplificacién Exponencial

ADD molde

2 copias 4 copias 8 copias 16 copias 35 — 34 • 9 pias

El uso de la enzima termoestable obtenida de la bacteria Thermus aquaticus,


denominada Tag polimerasa para la "extension" (Saiki et at, 1988), permitio la
automatizacion del proceso mediante e1 empleo de cicladores térmicos electronicos. El

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analisis genético podria efectuarse, entonces, en forma eficiente y fidedigna aun a partir
de una simple célula (Jeffreys et at. 1988, 1990).

Si bien se detectaron varios sistemas de minisatélites analizables por


amplificacion por PCR y aniilisis del tamano de los productos (Amp-FLP o
Polimorfismos de Longitud de Fragmentos Amplificados) como el Apo B (Boerwinkle et
al, 1989), el YNZ-22 (Wolffet al, 1988), y el COL2A1 (Wu et al, 1990), tal vez e1
sistema mas difundido to constituye la region altamente polimorfica, de gran tamafio,
constituida por 16 pares de bases repetidas de 18 a 42 veces, que se halla ubicada en e1
locus D1 S80 y presenta 22 alelos detectados en la poblacion general (Budowle et at,
1991; Sajantila et al, 1991; Baechtel et at, 1993; Kloosterman et at, 1993).

SISTEMAS BASADOS EN DIFERENCIAS EN LAS SECUENCIAS


NUCLEOTIDICAS

Variantes génicas nucleares. El primero y mas difundido aniilisis con aplicacion


forense, es el que estudia una region localizada en e1 segundo exon del gen HLA-DQ-a
del complejo mayor de histocompatibilidad (HMC). La corporacion Cetus (USA)
desarrollo un sistema que permite detectar, de esta region polimorfica, seis alelos
diferentes, denominados 1.1, 1.2, 1.3, 2, 3 y 4, por lo cual existen 21 genotipos distintos
en la poblacion general (Higuchi et at, 1988; Saiki et a1, 1989; Amplitype User Guide,
1990; Comey et al, 1993).

Posteriormente, Cetus Corp. implemento un sistema denominado "Polymarker",


que incluye, ademas del mencionado HLA-DQ-a otros cinco loci variables: LDLR,
GYPA, HBGG, D7S8, y Gc. Cada uno de ellos presenta dos o tres alelos diferentes en la
poblacion general (Budowle, 1994).

Variantes de ADN mitocondrial. Dentro de los sistemas cuya variacion reside en la


secuencia de nucleotidos, merece especial atencion e1 estudio del ADN presente en las
mitocondrias. En e1 afio 1981, Anderson y col. publican la secuencia completa del
genoma mitocondrial (Anderson et al., 1981), de aproximadamente 16,5 Kb, que
presenta una region no codificante, denominada D loop, donde se encuentra e1 origen
de replicacion, y que se caracteriza por presentar sitios con elevado indice de mutacion.

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Debido a que la informacion contenida en la secuencia mitocondrial es heredada


a partir de la via materna exclusivamente esto permite establecer vinculo de parentesco
entre individuos maternalmente relacionados (Giles et at, 1980) El analisis de la secuencia
permite diferenciar un individuo de otro de distinto linaje materno (Higuchi et at, 1988).

Esta caracteristica, sumada a que cada célula contiene una gran cantidad de
mitocondrias y por ello e1 genoma mitocondrial se halla mucho mas representado que e1
contenido en el nucleo celular, hace que este sistema sea de suma utilidad, principalmente
en los casos de material ampliamente degradado. A partir del analisis de esta secuencia
han sido caracterizados restos arqueologicos de varios miles de anos de antigiiedad, en
los que fue factible obtener ADN mitocondrial relativamente bien conservado (Paabo,
1990).

EVOLUCION METODOLOGICA Y PERSPECTIVAS

A partir de 1990, los aniilisis mediante PCR fueron ganando espacio en los
laboratorios forenses, debido a la relativa simplicidad de sus técnicas, menor costo e
interpretacion sencilla de los resultados, pero por sobre todo por requerir infimas
cantidades de ADN: actualmente, es posible partir de tan solo un nanogramo para analizar
cada uno de los sistemas variables.

En algunas muestras tales como pequenas manchas de sangre o semen, saliva,


pelos o cadaveres antiguos, constituye la unica posibilidad de lograr una caracterizacion
genética (Hagelberg et at, 1991; Jung et at, 1991; Comey et a1, 1991, 1993; Blake et at,
1992; Uchihi et at, 1992; Walsh et at, 1992).

Las muestras de interés forense a ser amplificadas mediante PCR requirieron


tratamientos especiales en cuanto a la extraccion y purificacion del ADN, que fue
encarado por varios equipos de investigacion, lograndose métodos eficientes a partir de
infimas cantidades de material (unos 3 microlitros de sangre) (Chelex protocols, 1990;
Corach, 1991; Jung et at, 1991).

El desarrollo reciente de un método alternativo que utiliza bromuro de cetil


trimetil amonio (CTAB) permite extraer ADN de huesos, dientes, piel y musculos
humanos, con una notable reduccion de contaminantes que dificultarian e1 analisis
posterior (Corach et al, 1994a). Esta situacion representa una gran ventaja respecto a los

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métodos tradicionales que emplean combinaciones de enzimas proteoliticas (proteinasa


K, pronasa, etc.), y agentes caotropicos (lauril sulfato de sodio, etc.).

Asi, sintetizando la breve historia de la metodologia empleada por la Biologia


Molecular Forense desde sus inicios, podemos observar como los analisis mediante
sondas mii/ii/ecus fueron reemplazados por las sondas de focus unico, en caso de poder
obtenerse ADN suficiente (alrededor de 200 nanogramos); y por sistemas de analisis
basados en PCR si el ADN se encuentra en menor cantidad, ambos sistemas altamente
reproducibles y de facil interpretacion (Hochmeister et at, 1991; Mangin et at, 1991;
Mulhare et at, 1991). Otra modificacion de las técnicas tradicionales consiste en e1
paulatino abandono de los métodos que emplean isotopos radiactivos, que son
reemplazados con eficiencia similar por sistemas quimioluminiscentes (Sheffield et a1,
1992; FBI, 1993).

IDENTIFICACION GENETICA EN ASPECTO LEGAL

El concepto de identificacion de un individuo puede defmirse como la


determinacion de una serie de rasgos o cualidades que hacen que se distinga del resto de
los individuos de su clase. Por to tanto, podria decirse que identificar es establecer la
individualidad o identidad de una persona. No obstante, existe un pequefio matiz que
diferencia los términos de identificacion e individualizacion ya qla ue, mientras que el
primer concepto se centra en la persona y la considera como diferente de las de su grupo,
el segundo la define como elemento del grupo al que pertenece (Lorente y Lorente, 1995).

En la investigacion forense, todas las cuestiones relacionadas con ambos


conceptos tienen enorme importancia, aunque e1 problema que se plantea en uno y otro
caso es completamente diferente, originandose dos ramas diferentes:

R La Antropologia forense, que parte del sujeto vivo, del cadaver o de sus
restos y que generalmente pretende establecer su identidad y algunas
caracteristicas de los hechos de los que forma parte como victima.

R La Criminalistica que estudia los indicios dejados en el lugar de los hechos,


gracias a los cuales podemos contestar a las principales preguntas que
surgen ante la comision de un delito: ¿quién es e1 autor? ( a veces también:
¿quién es la victima?) y ¿cuales fueron las circunstancias que rodearon a1

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hecho?. En el proceso judicial, la criminalistica trata de convertir los


indicios en pruebas admisibles por los tribunales.

La criminalistica, dentro del campo penal, exige la existencia de un hecho


delictivo, mientras que en e1 caso de la antropologia puede ser que éste no exista y que e1
problema sea exclusivamente e1 de la identificacion (Lorente y Lorente, 1995). Para la
investigacion médico-legal se necesitan elementos que estén directamente relacionados
con los hechos y que aporten la informacion necesaria para llegar a la identificacion del
individuo. Estos elementos son los indicios organicos que at poseer material biologico
posibilitan la aplicacion de técnicas analiticas.

En general, la identificacion humana en Biologia Forense es un proceso de


comparacion entre los resultados obtenidos en e1 aniilisis de los indicios y los obtenidos
a partir de las muestras de origen conocido (muestras indubitadas). La forma por la que
se llega a la identificacion es a través de la individualizacion. Conforme se analizan
caracteristicas de la persona las posibilidades de que exista otra persona que comparta
dichas caracteristicas disminuyen. Las caracteristicas analizadas con e1 estudio del ADN
permiten, estadisticamente, identificar a un individuo con una probabilidad muy proxima
al 1000

Aparte de identificar at individuo, la investigacion medico—forense lo relaciona


con una serie de hechos que forman parte de la investigacion criminal, lo cual confiere a
la Medicina Legal un componente social.

La falta de una regulacion especifica en materia de la prueba pericial,


remontandose al marco general de la ley de Enjuiciamiento Criminal, sin indicaciones
especificas a la situacion actual con la incorporacion, sobre todo de la denominada
“tecnologia del ADD’, puede hacer que las enormes posibilidades de la técnica queden
mermadas a la hora de adoptar determinadas resoluciones en la investigacion durante la
fase de instruccion (Lorente y Lorente, 1995).

Los calculos de paternidad, se reporta por la probabilidad de paternidad, es por


esta razon que en Espana, se dio la Sentencia del Tribunal Constitucional de 17 de enero
de 1994, cuando dice”. . ..la ciencia biologica y la jurisprudencia muestran que el grado
de certeza es absoluto cuando e1 resultado es negativo para la paternidad; y cuando es
positivo. Los laboratorios de Medina Legal sefialan los grados de probabilidad del 99%”,

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O la Sentencia del Tribunal Supremo de 11 de Julio de 1991, que reconoce expresamente


la validez de los predicados verbales de Hummel reproduciéndose como sigue:

Probabilidad de paternidad > 99.73 % : Paternidad Practicamente Probada


Probabilidad de paternidad del 99.7% — 99 0 Paternidad Altamente Probable
Probabilidad de paternidad del 98.9% — 95 0 Paternidad Muy Probable
Probabilidad de paternidad del 94.9 %—90 0 : Paternidad Probable
Probabilidad de paternidad < 90 0 : Paternidad insegura

Desde 2003
Probabilidad de paternidad > 99.99 % Paternidad Practicamente Probada

CASUISTICAS

Evidencia

Anélisis Por SLPs de un caso de violacién.

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CASO DE EXCLUSION DE PATERNIDAD

LOCI GENETICOS Supuesto


Madre Hija
ESTUDIADOS padre
HLA DQ AI 1.3 3 3
4.2/4.3 4.2/4.3 1.1
B A A
B B B
B A A
GYPA B B A
B B B
HBGG B B B
B A* B
A A B
C A* C
B B C
21 19* 24
FGA 20 20 25
17 15* 17
VWA 15 15 18
14 18* 15
15 15 16
29 30* 28
29 29 33.2
14 13* 11
D8 51179 13 13 15
11 11* 09
12 12 10
09 09 09
DI3 5317 12 12 08
11 12 12
11 11 07
17 15 15
D3 51358 15 15 15
09 11 11
DI6 5539 12 12 11
08 08 08
TPOX 11 11 09
12 11* 10
12 12 12
07 07 07
THOI 07 07 09
AMELOGENINA XX XY

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CASO INCLUSION DE PATERNIDAD

LOCI GENETICOS Madre Hijo Supuesto


ESTUDIADOS padre
HLA DQ AI 4.2/4.3 3 3
1.2
B A A
A A B
A A A
GYPA A A B
B B B
HBGG A A A
B B B
A A B
B C' C
A A C
15 17 17
D3SI358 15 15 16
16 20 20
VWA 16 16 17
23 24 24
FGA 21 21 21

D8 51179 14 14 12
312 32.2 32.2
28 28 30.2
17 15 15
15
12
07
07 12
09 10 10
DI3S3I 7 09 09 10
12 12 12
10
12 12 12
DI6 5539 10 10
09.3 09.3 09.3
THOI 09.3 09.3 07

TPOX 08 08 08
12 12
CSFIPO 10 10
AMELOGENINA XY XY

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RECOMENDACIONES PARA LA RECOGIDA Y REMISION DE


MUESTRAS CON FINES DE IDENTIFICACION HUMANA POR ADN
(GRUPO ESPANOL Y PORTUGUES DE LA SOCIEDAD
INTERNACIONAL DE GENETICA FORENSE)

INTRODUCCION

El objetivo, por tanto, de este documento es establecer un conjunto de


recomendaciones para la recogida y remision de muestras, que
permitan garantizar su autenticidad e integridad. Y convertirse,
ademas, en un marco consensuado para conseguir altos estandares de
calidad en estos procesos, permitiéndonos at mismo tiempo garantizar
otros aspectos fundamentales como la privacidad y
confidencialidad. Estas recomendaciones deben actualizarse de forma
periodica y su aplicacion debe llevarse a cabo por cada Centro segun
sus propias caracteristicas.

2. PERSONAL ENCARGADO DE LA RECOGIDA DE


MUESTRAS

El personal encargado de la recogida de indicios bioléigicos


y muestras de referencia con fines de identificaciéin genética
debe tener la formacion, conocimientos técnicos y
experiencia adecuada para el desempeiio de estas funciones,
por lo que seria recomendable el desarrollo de programas
de formacién y entrenamiento en esta area, que deberian
ir adaptandose a los avances técnicos que se vayan
produciendo.

3. PRECAUCIONES DURANTE EL PROCESO DE


RECOGIDA Y ENVIO DE MUESTRAS

Cuando se lleva a cabo la recogida de muestras, tanto


dubitadas como de referencia, deben mantenerse una serie
de precauciones encaminadas a proteger tanto al personal
que realiza dicha recogida como a la propia muestra, que
como veremos en el desarrollo de este apartado también
puede verse afectada, si el proceso no se Ileva a cabo con las
suficientes garantias.

a) PROTECCION DEL PERSONAL.

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Siempre que se manipula material biologico humano es prudente


asumir que este tipo de material puede contener patogenos
potencialmente peligrosos y por tanto ser una posible fuente de
infeccion (VIH, hepatitis, tuberculosis, meningitis... etc). Por ello
es necesario mantener una serie de precauciones universales como
las que a continuacion se detallan:

1) Prevenir, en todo momento, el contacto directo del operario


con la muestra mediante e1 uso de guantes, mascarilla, bata
u otro tipo de ropa protectora.

2) Prohibir el consumo de comidas y bebidas, asi como de tabaco.

3) Extremar las condiciones de asepsia y siempre que sea posible


utilizar material desechable. Una vez terminada la recogida
de muestras, tirar todo e1 material desechable utilizado en
bolsas de basura o contenedores, para eliminarlo
posteriormente segfin las normas de destruccion de residuos,
vigentes en cada Centro.

4) Recomendar la vacunacién al personal que esta en contacto


con este tipo de muestras.

Cuando la recogida de muestras se realiza en la sala de autopsias,


estas precauciones deben extremarse at in:iximo.

b) PROTECCION DE LAS MUESTRAS.

Son numerosos los procesos que pueden afectar a la integridad de


una muestra y por tanto a la posible obtencion de perfiles genéticos
a partir de los vestigios biologicos existentes en ella. Estos
procesos, que en algunos casos son inherentes a la muestra, en
otros pueden producirse o incrementarse cuando la recogida y
envio de muestras al laboratorio se lleva a cabo de una forma
defectuosa. Estos procesos son:

• Contaminacion per material biologico humano. Se debe at


deposito de material biologico humano, en e1 lugar de los
hechos y/o en e1 cuerpo de la victima, con posterioridad a la
produccion del delito. Puede estar causada por personas ajenas
a la investigacion como curiosos o familiares, o por personas
que colaboran en la investigacion y que de forma accidental o
por desconocimiento, producen la contaminacion. Es frecuente
durante el proceso de recogida de indicios si no se mantienen
unas precauciones minimas y también por defectos en e1
empaquetado de las muestras.

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• Transferencia de indicios biologicos. Se debe at traslado,


normalrnente accidental, de los indicios de una localizacion a
otra, lo que puede dar lugar a una contaminacion o puede
ocasionar la pérdida de una prueba. Los vestigios biologicos
que sufren con mas facilidad este cambio de localizacion son
los pelos.

• Contaminacion microbiologica. Este tipo de contaminacion


tiene lugar por e1 desarrollo de microorganismos y suele estar
favorecida por la humedad y las altas temperaturas.
Normalrnente se produce o incrementa por defectos en e1
empaquetado y conservacion de las muestras hasta su envio a1
laboratorio.

• Contaminacion quimica. Se debe a la presencia de productos


quimicos que van a dificultar algunos de los procesos del
analisis genético, fundamentalmente la amplificacion y
extraccion de ADN. Se produce fundamentalrnente cuando las
muestras se envian inmersas en productos conservantes como
el formol o cuando se realizan estudios previos con sustancias
quimicas (p.e., estudio de huellas dactilares) que pueden
comprometer e1 aniilisis de ADN.

Los procesos descritos podrlan evitarse o minimizarse si se


mantienen algunas precauciones b:isicas como son:

• Aislar y proteger, lo mas rapidamente posible la escena del


delito y salvo que alguna circunstancia to impida, los indicios
biologicos deben ser los primeros en ser recogidos.

• Usar guantes limpios que deben cambiarse con frecuencia,


especialmente cuando se manipulan indicios susceptibles de
tener distinto origen.

• Evitar hablar o estornudar sobre las muestras. Usar mascarilla.

• Usar bata u otro tipo de ropa protectora.

• Utilizar instrumental desechable (de un solo uso) siempre que


sea posible o limpiarlo bien antes de recoger cada indicio.
• No afiadir conservantes a las muestras.

• Dejar las muestras secar a temperatura ambiente, en un lugar


protegido, antes de empaquetarlas para su envio definitivo al
laboratorio.

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• Empaquetar cada muestra por separado.

• Empaquetar las muestras en bolsas de papel o cajas de carton


evitando utilizar plastico siempre que sea posible.

• Una vez terminada la recogida de muestras, tirar todo e1


material desechable utilizado (guantes, pipetas, papeles) en
bolsas de basura o contenedores, para eliminarlo
posteriormente segun las normas de destruccion de residuos
vigentes en cada Centro.

4. DOCUMENTACION EN CASOS DE INTERES CRIMINAL

Cuando se inicia e1 proceso de recogida de muestras es necesario crear


un archivo que debe incluir:

a. Documentacion imprescindible.

• Formulario de envio de muestras.

(Para agresiones sexuales ver apartado 9.a.1)

En este formulario debe constar:

• La investigacién solicitada (p.e.: Investigacion de restos de


sangre, investigacion de restos de semen, identificacion de
restos cadavéricos...).

• Antecedentes y datos de interés sobre el caso, como:

- Causa de los hechos.


- Lugar de los hechos.
- Fecha de los hechos.
Instrumento utilizado en la agresion
Si hay cadaver: Antigiiedad, conservacion....etc.

• Datos de la/s victima/s, como:

- Edad.
- Sexo.
- Grupo poblacional.
Causa de la muerte (si se ha producido e1 obito) o existencia de
lesiones.
Relacion con e1 sospecho.

• Datos del/los sospechoso/s, como:

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- Edad.
- Sexo.
- Grupo poblacional.
Existencia de lesiones, traumatismos, heridas...etc.

b. Identificacion de las muestras.

En todos los formularios debe aparecer un listado donde se


identifiquen y describan brevemente las muestras.

1) Lista do de las muestras de referencia donde debe especificarse:

Numero de referencia de la muestra.


Tipo de muestra (sangre, saliva, pelos...). Si la muestra elegida
es sangre liquida, describir e1 tipo de anticoagulante utilizado
en el envio.
Nombre de la persona a la que se realiza la toma o codigo
elegido para identificarla.
Relacion con e1 caso (victima, sospechoso....)

2) Lista do de los indicios biologicos donde debe especificarse:

N‘ de referencia de la muestra.
Tipo de muestra con una descripcion breve Ip.e., toma vaginal,
camisa azul, cuchillo con mango de madera...).
A quien pertenece (victima, sospechoso...) o donde se ha
localizado (p.e., coche, garaje, cuerpo victima...).
Tipo de indicio en concreto que debe estudiarse (semen,
sangre, saliva...)

3) Cadena de custodia.

En todos los formularios debe aparecer un apartado dedicado a la


cadena de custodia donde debe constar:

Nombre de la/s persona/s que realiza/n la recogida de muestras.


Fecha y hora de la recogida.
Condiciones de almacenaje de las muestras hasta su envio at
laboratorio.

Documentacion recomendable.

1) Informe preliminar de autopsia.


2) Informe clinico en casos de muestras tales como tumores...etc.
3) Informe o datos de la inspeccién ocular.
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4) Documentacion adicional sobre la localizacién de las muestras o


indicios biolégicos en e1 lugar de los hechos o en e1 cuerpo de la
victima, mediante esquemas, dibujos, videos...etc.

5) Fotografias de los indicios biologicos, que deben ser realizadas


antes de ser recogidos del lugar de los hechos o del cuerpo de la
victima.

5. DOCUMENTACION EN CASOS DE INVESTIGACION


BIOLOGICA DE PATERNIDAD

a. Documentacion imprescindible.
1) Formulario de envio de muestras.
En este formulario debe constar:

o Datos identificativos del individuo:

o Nombre y apellidos.
o DNI.
o Lugar de nacimiento.
o Fecha de nacimiento
o Lugar de residencia.
o Grupo poblacional.

b. Antecedentes patologicos:

Transfusiones de sangre recientes.


Transplantes recientes.
Enfermedades de transmision genética que puedan afectar a la
estabilidad somatica de los marcadores analizados y por tanto a la
valoracion del analisis.
Enfermedades infecto-contagiosas

2) Identificacion de las muestras.

En todos los formularios debe aparecer un listado donde se


identifiquen y describan brevemente las muestras.

a) Listado de muestras donde debe especificarse:

Numero de referencia de la muestra.


Tipo de muestra (sangre, saliva....).

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Nombre de la persona a la que se realiza la toma o codigo


elegido para identificarla.
Relacion con e1 caso (madre, hijo....).

3) Cadena de custodia.
En todos los formularios debe aparecer un apartado dedicado a la
cadena de custodia donde debe constar:

Nombre de la persona que realiza la recogida de muestras.


Fecha y hora de la recogida.
Condiciones de almacenaje hasta su envio a1 laboratorio.

6. TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIA.

La toma de muestras de referencia en personas vivas debe hacerse con


autorizacion judicial y tras e1 consentimiento informado de la persona a
la cual se le realiza la toma, debiendo existir un documento firmado con la
autorizacion expresa de que se cede la muestra para la realizacion del
analisis genéticos a efectos exclusivamente identificativos.

a. Muestras indubitadas en personas vivas.

1) Sangre.

Es la muestra indubitada clasica utilizada para la obtencion de


ADN, y se puede obtener por:

a) Puncion venosa. Muestra de unos 5 ml. de sangre que deben


introducirse en un tubo que contenga un anticoagulante tipo
EDTA.

Si se requiere sangre para la realizacion de otro tipo de analisis


(toxicologico, serologico) deberan recogerse muestras
adicionales de sangre.

b) Puncion dactilar. Con una aguja o lanceta quiriirgica se pincha


la cara anterior de algun dedo de la mano y las gotas de sangre
se depositan sobre un papel secante. Lo normal es depositar 3-
4 gotas de sangre y dejarlas secar a temperatura ambiente en
un lugar protegido.
En la actualidad existen kits estandarizados para este tipo de
tomas.

2) Células epiteliales bucales (Saliva).

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Obtenidas frotando la parte interna de los carrillos con hisopos de


estériles en seco. Se realizan dos tomas: Con un hisopo se frota la
cara interna del carrillo derecho y con e1 otro, la cara interna del
carrillo izquierdo. Los hisopos, correctamente identificados, deben
dejarse secar a temperatura ambiente en un lugar protegido. Es
fundamental no introducirlos en las fundas hasta que no estén
totalmente secos, ya que en la saliva hay bacterias que proliferan
rapidamente con la humedad, produciendo la degradacion del
ADN.

También pueden utilizarse cepillos conicos o hisopos tipo cepillo


para tomas endocervicales que son apropiados para este tipo de
tomas y secan con gran facilidad.

Es conveniente que las tomas se realicen a1 menos una hora


después de que la persona haya comido, para evitar la presencia de
restos alimenticios. O bien que se realicen enjuagues bucales.

En la actualidad existen kits estandarizados para este tipo de


tomas.

3) Pelos

De 15-20 cabellos arrancados con raiz.

b. Muestras indubitadas en personas transfundidas.

Si una persona ha recibido una transfusion de sangre, es conveniente


utilizar como muestra de referencia, una toma de saliva o cabellos, ya
que en la sangre se podria detectar la presencia del ADN constitucional
en mezcla con el procedente del material transfundido, al menos en un
corto periodo de tiempo posterior a la transfusion.

c. Muestras indubitadas en cad:iveres en buen estado de


conservacion

1) Sangre postmortem.

Se recoge una muestra de unos 10 ml de sangre que debe


introducirse en un tubo que contenga un anticoagulante tipo
EDTA.

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Si se requiere sangre para la realizacion de otro tipo de analisis, deberan recogerse
muestras adicionales.

2) Musculo esquelético.

Se seleccionan dos fragmentos de musculo esquelético de la zona


mejor conservada, de unos 10 g de peso (aproximadamente de 2
cm de lado) que se introducen en un recipiente de plastico con
boca ancha y tampon de rosca.

Se elige este tipo de tejido por ser, junto con el musculo cardiaco,
el mas resistente a la putrefaccion.

Si existen dudas sobre la conservacion del cadaver, conviene


extraer 4 piezas dentales, si es posible molares, y reservarlas, para
evitar la posible exhumacion del cadaver.

Muestras indubitadas en cad:iveres carbonizados

A pesar de to que la apariencia externa pueda indicar, la estabilidad


del ADN a altas temperaturas permite que, en cadaveres en los que la
carbonizacion no es total, e1 an:i1isis genético se pueda llevar a cabo a
partir de fragmentos de musculo esquelético de zonas profundas y de
la sangre semisolida que permanece en e1 interior de las cavidades
cardiacas.

Si la carbonizacion es total, to recomendable es ponerse en contacto


con el Laboratorio para valorar, en funcion de las muestras disponibles
y de su estado, cuales son las mas adecuadas para e1 analisis.

e. Muestras indubitadas en cad:iveres en avanzado estado de


putrefaccion o esqueletizados

1) Huesos

Se limpiaran de restos de putrilago y siempre que sea posible se


seleccionarii un hueso largo, preferiblemente un femur.

Si no es posible disponer de esta muestra, to recomendable es


ponerse en contacto con e1 Laboratorio para valorar, en funcion de
las muestras disponibles y de su estado, cuales son las mas
adecuadas para e1 an:i1isis.

2) Dientes

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Se seleccionan at menos 4 piezas dentales, si es posible molares,


que no estén externamente daiiados ni hayan sido sometidos a
endodoncias.

f. Muestras indubitadas en cad:iveres embalsamados

En los cadaveres embalsamados (cadaveres conservados


artificialmente mediante la utilizacion de liquidos conservantes tipo
formol) el ADN sufre procesos de degradacion que hacen, en la mayor
parte de los casos, muy dificil el analisis. Para seleccionar las muestras
mas adecuadas, to recomendable es ponerse en contacto con e1
Laboratorio y en funcion de la técnica de embalsamamiento,
antigiiedad...etc, valorar que muestras son las mas idoneas para e1
analisis.

Otras muestras de referencia en personas fallecidas

En aquellos casos en los que no se puede exhumar un cadaver para la


obtencion de muestras indubitadas o en los casos en los que se solicita
una identificacion de restos cadavéricos y no hay familiares vivos
disponibles para realizar esta investigacion, podemos utilizar otras
estrategias como son:

1) El an:ilisis de restos biologicos del fallecido existentes en


Centros
hospitalarios.

Es posible analizar muestras de sangre, biopsias incluidas en


parafina, preparaciones histologicas...etc, del fallecido que puedan
conservarse en hospitales. No es recomendable e1 analisis de
tejidos fijados en formol, ya que este compuesto modifica el ADN,
dificultando cuando no imposibilitando la obtencion de resultados.

2) El an:ilisis de restos biologicos del fallecido que aim


permanezcan en el :imbito familiar.

Es posible analizar muestras que contengan restos biologicos del


fallecido, tales como sobres escritos que pueden contener restos de

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saliva en la solapa y en e1 sello, maquinillas de afeitar, peines,


cepillos...etc.

Este tipo de muestras, en muchos casos deben ser autentificadas


mediante aniilisis genético de familiares, ya que suelen ser
aportadas por la familia que en algunos casos puede ser parte
interesada en e1 proceso judicial.

7. RECOGIDA DE INDICIOS BIOLOGICOS EN EL LUGAR DE


LOS HECHOS

Manchas secas en muestras pequenas y de I:icil transporte.


En general, este tipo de muestras seran recogidas e introducidas por
separado en bolsas de papel o cajas de carton.

A continuacion vamos a describir algunas de las muestras mas


recuentes:

1) Colillas: Deben recogerse con pinzas e introducirse por separado


en bolsas de papel o cajas de carton pequefias.

2) Chicles: Deben recogerse con pinzas e introducirse por separado


en envases de plastico duro.

3) Sobres y sellos: Sin despegarse, se recogen con unas pinzas


limpias y se introducen en bolsas de papel o plastico.

4) Armas blancas: Se deben recoger con mucho cuidado para no


afectar at estudio de huellas dactilares. Colocarlas en cajas de
carton, preparadas especialmente para este tipo de muestras, de ta1
manera que queden bien sujetas. Si no se cuenta con este tipo de
cajas, se debe proteger la hoja e introducir por separado en bolsas
de papel.

5) Llaves, monedas, joyas... etc: Se recogen con unas pinzas limpias


y se introducen por separado en bolsas de papel.

b. Manchas secas en muestras grandes no transportables

La recogida de este tipo de manchas va a depender fundamentalmente


del soporte sobre el que asienta la mancha:

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1) Soportes no absorbentes (p.e.: cristales, metales...etc). En estos


casos los indicios pueden recogerse de dos maneras:

a) Frotando con un hisopo estéril ligeramente mojado con agua


destilada.

b) Raspando la mancha con un bisturi sobre un papel, que debe


ser cuidadosamente doblado e introducido en una bolsa de
papel.

2) Soportes absorbentes (p.e.: telas, tapicerias, alfombras...etc). En


estos casos lo mas adecuado es recortar la mancha con un bisturl
o unas tijeras e introducirla en una bolsa de papel.

c. Indicios hiimedos

1) Ropas u otros objetos con indicios hiimedos.

Las ropas de vestir son las muestras que de forma mas frecuente
pueden contener indicios hiimedos, generalmente manchas de
sangre. No obstante puede haber otras muestras como las ropas de
cama, toallas, cortinas, tapicerias de coche...etc.

En estos casos, las muestras completas o las manchas objeto de


estudio deben introducirse en bolsas de plastico y trasladarse a las
instalaciones del personal que lleva a cabo la recogida, donde se
dejaran secar en un lugar protegido, sobre una superficie
limpia.

Las muestras completas o las manchas, una vez secas, se envuelven


por separado en papel y se introducen en bolsas de papel
independientes.

d. Indicios liquidos

1) Sangre.

a) Sangre en gran cantidad. Se debe recoger con una pipeta de


plastico desechable e introducir en un tubo que contenga un
anticoagulante tipo EDTA.
b) Sangre en escasa cantidad. Se debe recoger con un hisopo
estéril.
c) Sangre coagulada. Se debe recoger con una cucharilla de
plastico e introducir en un tubo o frasco de plastico.

2) Semen:
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a) Los preservatives con semen liquido se atan bien para que no


se derrame e1 contenido y se recogen con unas pinzas
introduciéndolos en un frasco de plastico.
b) Semen en escasa cantidad. Se debe recoger con un hisopo
estéril.

3) Liquido amniotico.

Se recoge una muestra de unos 10 ml que se introduce en un tubo.

4) Orina u otros fluidos biologicos.

Deben recogerse con una pipeta de plastico desechable e


introducirse en tubos o frascos.

e. Pelos dubitados

Los pelos dubitados deben ser recogidos con unas pinzas, colocando
cada pelo o cada grupo de pelos en un papel pequeiio que debe ser
doblado con cuidado e introducido en una bolsa de papel pequena.

f. Restos cadavéricos

1) Organos y tejidos blandos.

Recoger los organos y los restos de tejidos con unas pinzas y


colocar cada muestra en un frasco o contenedor, mas o menos
grandes dependiendo del tamano de las muestras y sobre todo sin
liquido fijador.

2) Dientes y huesos.

Recoger los dientes y los huesos y colocarlos por separado en


bolsas de papel, mas o menos grandes dependiendo del tamano de
las muestras.

Restos fetales y placentarios

Se recogen con unas pinzas y se colocan por separado en frascos de


boca ancha y tapon de rosca, y sobre todo sin liquido fijador.

8. RECOGIDA DE INDICIOS BIOLOGICOS EN EL CUERPO DE LA


VICTIMA

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a. Manchas de sangre, semen u otros fluidos biologicos.

Recoger la mancha con un hisopo estéril ligeramente mojado con agua


destilada. Limpiar todo e1 area presionando suavemente y si es
posible con un solo hisopo.

b. Saliva en marcas de mordeduras.

Recoger la mancha con un hisopo estéril ligeramente mojado con


agua destilada. Limpiar de forma circular la marca dejada por los
dientes y todo e1 area interior que delimita.

Examinar las manos y unas de la victima, recogiendo con una pinzas


los pelos o fibras que puedan existir y posteriormente cortar e1 borde
superior de las ufias para analizar en el laboratorio la posible presencia
de restos de sangre y piel. Recoger por separado las ufias de ambas
manos en un papel, envolverlas con cuidado e introducir en bolsas de
papel pequefias.

d. Pelos dubitados.

Deben ser recogidos con unas pinzas, colocando cada pelo o grupo de
pelos en un papel pequeiio que sera doblado con cuidado e introducido
en una bolsa de papel pequena.

9. AGRESIONES SEXUALES

Las agresiones sexuales, por ser un tipo de delito en e1 que se requiere una
informacion muy particular tanto de los hechos como de la victima y una
recogida de muestras muy estandarizada, necesita un apartado especifico
en este documento, donde se va a detallar tanto la informacion requerida
como las muestras que son imprescindibles para llevar a cabo una
investigacion adecuada sobre este tipo de agresion.

a. Documentacion requerida.

Para poder realizar una seleccion adecuada de las muestras que se


deben analizar y para poder valorar los resultados del aniilisis (que
suele ser bastante complejo en este tipo de casos), es imprescindible
conocer una serie de datos sobre los hechos y la victima, para to cual
es necesario que e1 Médico Forense obtenga esa informacion que debe
remitir junto con las muestras, para lo cual debe rellenar un formulario
especifico para este tipo de agresiones en e1 que deben constar los
siguientes datos:

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1) Formulario de envio de muestras para agresiones sexuales.

Datos de la victima:

Edad.
Sexo.
Grupo poblacional.
Relaciones sexuales proximas a la agresion (especificar
tipo, fecha y hora).
Uso de productos vaginales (lubricantes,
desodorantes...etc).
Si se ha lavado antes del reconocimiento.
Si lleva la ropa de la agresion.
Datos del reconocimiento ginecologico que puedan ser de
interés.

b) Datos de la agresion:

Lugar de los hechos.


Fecha y hora de los hechos.
Tiempo aproximado transcurrido entre los hechos y la
toma.

Tipo de agresion:
Penetracion: vaginal, anal y/o bucal.
Introduccion de objetos: vaginal o anal.
Otros: cunilinguo, tocamientos....etc.

Numero de agresores.
Relacion de parentesco victima—agresor.
Si hubo uso de preservativos.
Si hubo eyaculacion y si fue interior o exterior.

c) Un listado de las muestras de referencia y de los indicios


biologicos remitidos, donde deben especificarse los datos ya
detallados en e1 apartado 4.a.2.

Los datos de la cadena de custodia ya detallados en e1


apartado 4.a.3.

b. Recogida de indicios biologicos.

La selecciéin de indicios bioléigicos, que se realizara


teniendo en cuenta los antecedentes y datos aportados por la
victima. En este tipo de tomas es fundamental numerar los

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hisopos, para comenzar los analisis por el que haya sido


recogido en primer lugar.

1) Tomas bucales. Se recogeran los posibles restos de semen con


hisopos estériles que se pasaran con cuidado y sin frotar mucho,
por debajo de la lengua, alrededor de las encias, de los dientes y
por e1 paladar.

Esta es la primera toma que debe realizarse porque en la boca los


restos de semen desaparecen con cierta celeridad.

2) Superficie corporal. Hay que buscar manchas de semen o saliva


asi como posibles mordeduras...que deben recogerse con
hisopos estériles, segun se indica en e1 apartado 8.
3) Peinado de vello piibico y recogida de pelos dubitados, sobre un
papel que sera doblado con cuidado e introducido en una bolsa de
papel pequena.

4) Dos tomas cervicales, 2 tomas vaginales y 1 toma de genitales


externos que se realizaran con hisopos estériles, limpiando con
cuidado e1 cuello uterino, la cavidad vaginal y la region vulvar.

Si se requieren tomas para aniilisis de ETS deberan realizarse con


posterioridad, para evitar la perdida de espermatozoides.

5) Lavado vaginal que se llevara a cabo después de la toma con


hisopos, para to cual se utilizaran unos 10 ml. de suero fisiologico
estéril que se recogera en un tubo o frasco de plastico.

6) Dos tomas anales y 1 toma del margen anal mediante hisopos


estériles, limpiando con cuidado el conducto anorectal y el
margen anal, respectivamente.

7) Las ropas vestidas per la victima en el momento de la agresién


que deben envolverse por separado en papel e introducirse en
bolsas de papel independientes.

c. Recogida de muestras indubitadas.

1) Muestras indubitadas de la victima. Ademas de las descritas en


el apartado 6.1, en los casos de agresion sexual hay que enviar de
15-20 vellos piibicos.

2) Muestras indubitadas del sospechoso (Cuando proceda).


Descritas en el apartado 6.1.

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10. RECOGIDA DE MUESTRAS EN CASOS DE INVESTIGACION


BIOLOGICA DE LA PATERNIDAD

a. Cuando el presunto padre, el hijo y/o la madre est:in vivos.

Seguir las recomendaciones del apartado 6.1

b . Cuando el presunto padre biologico ha fallecido.

1) An:ilisis a partir de restos éseos y piezas dentales procedentes


de la exhumacién del cad:iver.

Seguir las recomendaciones de los apartados 6.5. y 6.6

An:ilisis de muestras biolégicas del fallecido existentes en


centros hospitalarios o en el :imbito familiar.

Seguir las recomendaciones del apartado 6.7

An:ilisis de muestras biolégicas procedentes de familiares del


fallecido.

En este caso podemos deducir el patrimonio genético del fallecido


a partir del aniilisis genético de muestras biologicas de sus
familiares. En este caso las muestras mas idoneas son las que se
recomiendan en e1 apartado 6.1

c. Investigacion de paternidad a partir de restos fetales.

Seguir las recomendaciones del apartado 7.7 para la recogida de


restos fetales y 6.1 para las muestras indubitadas de la madre y e1
supuesto padre.

11. SISTEMAS DE EMPAQUETADO Y PRESERVACION DE


MUESTRAS

La adecuada preservacion de las muestras desde su recogida hasta su


llegada al laboratorio es fundamental, ya que los indicios biologicos,
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especialmente los indicios hiimedos y los liquidos son vulnerables a la


degradacion del ADN en pocas horas. Por ello es fundamental realizar un
correcto empaquetado y que los indicios liquidos, los tejidos blandos y
Organos y los indicios hiimedos (si por algun motivo no es posible
dejarlos secar) se mantengan y envien refrigerados.

Ademas es imprescindible que todos los recipientes, ya sean tubos, bolsas,


cajas...etc, estén correctamente identificados y precintados. Ya que esto es
lo que nos va a garantizar la autenticidad e integridad de las muestras.

a. Identificacion de las muestras.

En todos los recipientes debe haber un espacio reservado para la


identificacion de las muestras, en e1 que debe constar:

1) El numero de referencia de la muestra.


2) Tipo de muestra.
3) A quien pertenece y/o la localizacion.

b. Cadena de custodia.

También debe haber un espacio dedicado a la cadena de custodia en e1


que debe constar:

1) Nombre de la persona que realiza la recogida.


2) Fecha y hora de la recogida.

Sistemas de empaquetado.

En la actualidad hay numerosos tipos de recipientes que nos pueden


servir para empaquetar las muestras e incluso se estan desarrollando
algunos kits que pueden tener gran interés.

A continuacion vamos a describir algunos sistemas de empaquetado


en funcion de las muestras o vestigios que se quieran enviar a1
laboratorio.

1) Tubos con indicios liquidos.

Los tubos con indicios liquidos seran introducidos en tubos de


transporte con cierre irreversible, que seran correctamente
identificados y se mantendr:in y enviar:in refrigerados al
laboratorio, to runs r:ipidamente posible.

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Foto. - Conservacion en el Laboratorio de Reactivos e indicios


liquidos en Refrigeraciéru

Frascos o recipientes con indicios liquidos o con Organos,


tejidos blandos...etc.

Estos recipientes que deben tener un cierre de rosca o hermético


seran precintados, correctamente identificados y se mantendr:in y
enviar:in refrigerados at laboratorio, to in:is r:ipidamente
posible.

Hisopos estériles en seco.

Una vez recogidos los vestigios, los hisopos seran empaquetados


en cajas de carton pequenas comercializadas de forma especial
para tal fin. Este tipo de cajas permite que los hisopos estén
protegidos y se sequen totalmente. Una vez identificadas seran
precintadas y enviadas at laboratorio sin refrigerar.

Si no es posible disponer de estos kits, los hisopos, una vez


recogidos los vestigios biologicos, deben identificarse o numerarse
y dejarse secar totalmente a temperatura ambiente, en un lugar
protegido, antes de ser introducidos en sus fundas. Posteriormente
se introducen en las fundas que seran correctamente identificadas
y precintadas para su envio at laboratorio.

4) Muestras con manchas secas.

Cada muestra sera colocada sobre un papel (para que no se pierdan


indicios biologicos como pelos, costras...etc) que sera doblado e
introducido en una bolsa de papel precintada y correctamente
identificada. Enviar at laboratorio sin refrigerar.

Pelos dubitados.

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Deben ser recogidos en papeles pequenos que ser n doblados con


cuidado y posteriormente introducidos en bolsas de papel
precintadas y correctamente identificadas. Enviar at laboratorio sin
refrigerar.

6) Costras, raspaduras, unas...etc.

Deben ser recogidas en papeles pequenos que seran doblados con


cuidado y posteriormente introducidos en bolsas de papel
precintadas y correctamente identificadas y enviadas al laboratorio
sin necesidad de refrigerar.

7) Huesos y dientes.

Se introducen en bolsas de papel y cajas de carton adecuadas a su


tamafio, que deben ser precintadas y correctamente identificadas,
pudiendo enviarse at laboratorio sin refrigeracion.
Los huesos, si por algtin motivo mantienen restos de putrilago,
deben ser introducidos en recipientes plasticos de cierre hermético
que seran precintados y correctamente identificados,
manteniéndose y envi:indose refrigerados at laboratorio, to
in:is r:ipidamente posible.

Termociclador empleado en el Laboratorio para realizar la


Reaccién en Cadena de la Polimerasa (PCR).

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12. RECEPCION DE MUESTRAS EN EL LABORATORIO DE


GENETICA FORENSE

a. Normas de recepcion de muestras.

Recibir las muestras y rellenar la hoja de custodia donde debe


constar:

a) Nombre de la persona que entrega las muestras.

b) Nombre de la persona que recibe la muestra.

c) Fecha y hora de la entrega.

d) Empresa que realiza el transporte (si procede).

2) Chequear e1 numero de referencia de cada muestra y compararlo


con el formulario enviado per el Medice Forense o por la
Policia Judicial. Anotar las discrepancias, si las hay.
Comprobar que todas las muestras est:in bien empaquetadas
y que los precintos estan integros.

4) Al abrir los recipientes, bolsas...etc. que contienen las


muestras comprobar que la identificacion y descripcion
son correctas. Anotar las discrepancias.
Fotografiar las muestras y anotar su estado de conservacion.

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Analizador Genetico ABT PRISM 310 que realiza el Secuenciamiento del ADD.

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MODELO DE DICTAMEN PERICIAL DE ADN FORENSE

DICTAMEN PERICIAL DE BIOLOGIA FORENSE — ADN

A. PROCEDENCIA VIGESIMO CUARTO JUZGADO ESPECIALIZADO PENAL


DE CUSCO
B. ANTECEDENTE Oficio Nº 2109-2014-24do JEPP
C. REFERENCIA
D. SOLICITA Identificacion y homologacion de evidencias biologicas,
mediante la prueba de ADN.
E. RECIBO Caso gratuito
F. PERITOS Jorge Eduardo Hau Camoretti,
O Comandante Biologo PNP.,
identificado con DNI N 08578685, CIP N“ 190003 y
Colegiatura de Biologo del Perd N“ 1470 y Claudia LOPEZ
DEO CERNA, ComandanteO Biologa PNP., identificado con DNI
N 02451973, CIP N 190027 y Colegiatura de Biologa del
O
Peru N 1572, ambos con domicilio procesal en la Av.
Aramburu NO 50 — Surquillo.
G. EXAMEN DE
ADN

1. Descripcién de muestras:

El dia 05 de Mayo del 2014, en el laboratorio de Biologia y Genética Molecular de


la Direccion de Criminalistica PNP, se recepciono el Oficio Nº 2324-2010-22do
JEPP, muestra signada con el Nº 18560, cuya descripcion se detalla a
continuacion:

Un sobre manila sellado y lacrado, con manuscrito que entre otros dice “OF. 2109-
2014-24do JUZGADO PENAL PUNO", en cuyo interior se hallo:

Un sobre manila sellado y lacrado, con etiqueta de evidencia PNP con manuscrito
“OF. 1109-14-CPNP-JLO-SI-“A" 02May14 - Nº 01 UN (01) CALZONCILLO
COLOR AZUL — Nº 02 UN (01) CALZON COLOR ROJO", conteniendo:

BM Nº 1097: Un sobre manila sellado y lacrado, con manuscrito “REF. OF. 1109-
14-CPNP-JLO-SI-“A" DEL 02May14 — MUESTRA Nº 01 : EDUARDO
(26)", conteniendo Un (01) calzoncillo de fibra de algodon, de color
amarillol, marca “SUPRA", talla “M", usado y sucio, presenta
manchas blanquecinas en diferentes partes del interior anterior de
la prenda.

BM Nº 1098: Un sobre manila sellado y lacrado, con manuscrito “REF. OF. 1109-
14-CPNP-JLO-SI-“A" DEL 02May14 — MUESTRA Nº 02: VIOLETA
(38)", conteniendo Un (01 ) calzon de fibra de algodon, de
color
blanco, sin marca ni talla, presenta un bordado de una flor en la parte
anterior, usada y sucia, el mismo que presenta manchas parduscas
en la entrepierna.

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BM Nº 1099: Un sobre manila sellado y lacrado, con manuscrito “EDUARDO (26)
— MUESTRAS: SANGRE EDTA — SANGRE GASA — HISOPADO
BUCAL", conteniendo:
a. Una envoltura de papel, sellado y lacrado, con manuscrito
“EDUARDO (26) — MUESTRA: SANGRE EDTA", conteniendo Un
(1) ELMER (26)", conteniendo una solucion rojiza.

b Una envoltura de papel, sellado y lacrado, con manuscrito “


EDURADO (26) — HISOPADO BUCAL", conteniendo dos (02)
hisopos con mango de madera, que presentan manchas
amarillentas en el algodén.

Una envoltura de papel, sellado y lacrado, con manuscrito


“EDUARDO (26) — SANGRE GASA", conteniendo tres (03)
fragmentos de gasa, que presenta manchas rojizas de tipo
impregnacion en toda su superficie.

2. Determinaciones solicitadas:
Identificacion y homologacion de evidencias biologicas Calzoncillo amarillo (BM
Nº 1097), Calzon blanco (BM Nº 1098) y las muestras rotuladas como
EDURADO (BM Nº 1099), mediante la prueba de ADN.

3. Técnicas utilizadas:
a. Extraccion Método Organico y FTA Technolgy
Extraccion diferencial
b. Cuantificacién Espectrofotometria, Lambda Bio 10 PE.
c. Amplificacién — PCR Técnica PCR con kit ldentifiler
d. Electroforesis Utilizando el Analizador Genético Automatizado ABl
PRISMTM 310, mediante electroforesis capilar.
e. Tipificacién y Anélisis Utilizando el Analizador Genético Automatizado ABl
PRISMTM 310. Con el software GeneMapper® ID v3.2.
f. Célculos estadisticos Utilizando la frecuencia poblacional peruana, publicada en
el Journal Science Forensic e International Forensic
Science.

4. Resultados:

Anélisis de Marcadores Genéticos


En la siguiente tabla se representan los resultados de los marcadores de ADN
estudiados, los cuales vienen dados por dos alelos, los que deben ser idénticos
entre las diferentes muestras investigadas para su homologacion.

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TABLA N” 01
Estudio comparativo entre los perfiles genéticos obtenidos de las células epiteliales y
espermatozoides hallados en el Calzoncillo amarillo (BM Nº 1097).

BM N’ 1097 BM N’ 1097
LOCI
Calzoncillo Amarillo Calzoncillo Amarillo
N° ESTUDIADOS (Células epiteliales) (Espermatozoides) FRACCION
FRACCION FEMENINA MASCULINA

D8S1179 13, 13 12, 13

2. D21S11 31.2, 32.2 29, 31


3. D7S820 10, 11 11, 12
4. CSF1 PO 11, 12 10, 11
5. D3S1358 14, 17 15, 15

6. TH01 09, 09.3 07, 09


7. D13S317 12, 12 09, 12
8. D16S539 09, 12 11, 12
9. D2S1338 17, 19 17, 21

10. D19S433 14, 14.2 14.2, 15.2


11. VWA 15, 17 15, 16
12. TPOX 08, 11 08, 11
13. D18S51 14, 15 15, 17
14. D5S818 11, 12 07, 11

15. FCA 22, 24 22, 25

16. Amelogenina X, X X, Y

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TABLA N” 02
Estudio comparativo entre los perfiles genéticos obtenidos de las células epiteliales y
espermatozoides hallados en el Calzon Blanco (BM Nº 1098).

BM N’ 1098 BM N’ 1098
LOCI
Calzén Blanco (Células Calzén blanco
N° ESTUDIADOS epiteliales) (Espermatozoides) FRACCION
FRACCION FEMENINA MASCULINA

D8S1179 13, 13 12, 13

2. D21S11 31.2, 32.2 29, 31


3. D7S820 10, 11 11, 12
4. CSF1 PO 11, 12 10, 11
5. D3S1358 14, 17 15, 15

6. TH01 09, 09.3 07, 09


7. D13S317 12, 12 09, 12
8. D16S539 09, 12 11, 12
9. D2S1338 17, 19 17, 21

10. D19S433 14, 14.2 14.2, 15.2


11. VWA 15, 17 15, 16
12. TPOX 08, 11 08, 11
13. D18S51 14, 15 15, 17
14. D5S818 11, 12 07, 11

15. FCA 22, 24 22, 25

16. Amelogenina X, X X, Y

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TABLA N” 03
Perfil genético obtenido de las muestras rotuladas como Eduardo
(BM Nº 1099).

LOCI BM N’ 1099
N° ESTUDIADOS EDUARDO
(Sangre y raspado de epitelio bucal)

D8S1179 12, 13

2. D21S11 29, 31
3. D7S820 11, 12
4. CSF1PO 10, 11
5. D3S1358 15, 15

6. TH01 07, 09
7. D13S317 09, 12
8. D16S539 11, 12
9. D2S1338 17, 21

10. D19S433 14.2, 15.2


11. VWA 15, 16
12. TPOX 08, 11
13. D18S51 15, 17
14. D5S818 07, 11

15. FCA 22, 25

16. Amelogenina X, Y

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TABLA N” 04
Estudio comparativo entre los perfiles genéticos obtenidos de los espermatozoides
hallados en el Calzoncillo amarillo (BM Nº 1097), Calzon blanco (BM Nº 1098) y las
muestras rotuladas como EDUARDO (BM Nº 1099).

BM N’ 1097 y 1098
LOCI Calzoncillo Amarillo y BM N’ 1099
N° ESTUDIADOS Calzén Blanco EDUARDO
(Espermatozoides) (Sangre y raspado de epitelio bucal)
FRACCION MASCULINA

D8S1179 12, 13 12, 13

2. D21S11 29, 31 29, 31


3. D7S820 11, 12 11, 12
4. CSF1 PO 10, 11 10, 11
5. D3S1358 15, 15 15, 15

6. TH01 07, 09 07, 09


7. D13S317 09, 12 09, 12
8. D16S539 11, 12 11, 12
9. D2S1338 17, 21 17, 21

10. D19S433 14.2, 15.2 14.2, 15.2


11. VWA 15, 16 15, 16
12. TPOX 08, 11 08, 11
13. D18S51 15, 17 15, 17
14. D5S818 07, 11 07, 11

15. FCA 22, 25 22, 25

16. Amelogenina X, Y X, Y

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5. Anélisis de los resultados:


Utilizando dieciséis marcadores genéticos, se ha determinado to siguiente:

a. El perfil genético de las células epiteliales halladas en el Calzoncillo amarillo


(BM Nº 1097) y Calzon blanco (BM Nº 1098) (TABLAS Nº 01 y 02).

b El perfil genético de los espermatozoides hallados en el Calzoncillo amarillo


(BM Nº 97) y Calzon blanco (BM Nº 1098) (TABLAS Nº 01 y 02).

El perfil genético de las muestras rotuladas como EDUARDO (BM Nº 1099)


(TABLA Nº 03).

d. Todos los marcadores genéticos obtenidos de las muestras rotuladas como


EDUARDO (BM Nº 1099), SON COMPATIBLES con los espermatozoides
hallados en el Calzoncillo amarillo (BM Nº 1097) y Calzon blanco (BM Nº
1098) (TABLA Nº 04).

e. El marcador Amelogenina determina el sexo de las personas estudiadas:


• X, X Femenino
• X, Y Masculino

H. CONCLUSION:

El perfil genético de las muestras biologicas rotulada como EDUARDO (BM Nº


1099), CORRESPONDE at perfil genético de la los espermatozoides hallados en el
Calzoncillo amarillo (BM Nº 1097) y Calzon blanco (BM Nº 1098), con una
probabilidad de coincidencia de 99.9999999999999 % y una frecuencia genotipica
de 1 en cada 141 965" 510 930' 095 000 individuos.
I. OBSERVACION:
• La muestra Nº 1560 fue devuelta a la seccion de mesa partes de la DIVLACRI
PNP
Surquillo, 24 Mayo del 2015

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TALLER APLICATIVO

IDENTIFIQUE LAS EVIDENCIAS BIOLOGICAS DE INTERES


CRIMINALISTICO

CASO: En horas de la madrugada se recibio la solicitud telefonica de la comisaria del


Miraflores en la cual solicita la presencia del personal de Peritos Médicos, Biologo,
Toxicologo, Ingeniero, Balistica y recojo de huellas. En la calle Gardenias 211 —
Santiago de Surco. Ante la presencia del representante del Ministerio Publico se
procedio a la inspeccion de la escena del delito:

INGRESO A LA ESCENA DEL DELITO: En el domicilio, en la segunda planta en la


habitacion principal de 3.5 x 4 in con puerta de acceso de madera la cual presenta la
cerradura con signos de deterioro, se encontro sobre e1 piso un colchoneta de aire de una
plaza cubierto con una sabana amarilla y sobre este e1 cadaver de Pedro Pablo Ollanta
Toledo de 48 anos, quien se encontraba con signos evidentes de descomposicion, vestido
con ropa de deporte y evidenciando una herida en el torax.

En la habitacion se observa sobre e1 piso y a1 lado derecho del occiso una botella Coca
Cola y con residuos de liquido ambarino, tres vasos de vidrio dos de ellos con contenido
liquido y el otro con sustancia blanquecina en el fondo y un cenicero con tres cigarrillos
a medio terminar, por debajo del colchon se encontro un pequefio envoltorio de papel de
guia telefonica con adherencia de sustancia blanquecina. En e1 cadaver se observo herida
en el pectoral izquierdo de forma estrellada y con orificio de salida en su parte posterior.

Se observa sobre el lado derecho del cadaver mancha pardo rojiza. La posicion de la mano
izquierda era sobre el pecho sujetando una pistola Pietro Bereta 9 mm. y cercano a ella
un casquillo 9 mm. En e1 bolsillo derecho se encontro un papel con manuscrito “uro de
potasio”..... Se observo en la pared manchas pardo rojizas tipo salpicadura y un orificio
caracteristico de rebote de proyectil aproximadamente a 120 cm. del cadaver, hacia el
lado izquierdo del occiso se ubicaba una cuna de madera con perforacion en uno de sus
lados por proyectil y por debajo de ella tres fragmentos de papel higiénico. Hacia el frente
del cadaver se ubicaba una mesa con un televisor de 20 pulgadas apagado.

--- Prepare un esqiiema de la escena, indicando la presencia de las evidencias

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Del caso anteriormente descrito:

1) Describa usted la manera de recojo de las evidencias identificadas en la areas


solicitadas.
2) Cual cree usted seria la manera mas adecuada de remision de las muestras halladas.
3) Plantear una hipotesis de to sucedido basandose en las evidencias identificadas.

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Hau Camoretti, Jorge. Revision y Sistematizacion de la Informacion. UNFV - 2004

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