UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA MICROBIOLOGÍA Y BIOANÁLISIS INMUNOLOGÍA Y LABORATORIO 2007-I DILUCIONES

1. Dilución Simple (Método del factor de dilución) Una dilución simple es aquella en la cual una unidad de volumen de un material líquido de interés se combina con un volumen apropiado de un solvente líquido para alcanzar la concentración deseada. El factor de dilución es el número total de unidades de volumen en los cuales su material será disuelto. El material diluido se debe mezclar muy bien para alcanzar una dilución verdadera. Ejemplo: La pulpa de jugo congelada generalmente se debe diluir en 4 vasos de agua (el solvente de la dilución) dando un factor de dilución 5. Es decir, el concentrado de jugo representa 1 unidad de volumen al cual usted le adiciona 4 unidades más de volumen (el agua). De esta forma, su pulpa de jugo está distribuida en las 5 unidades de volumen. Esta sería una dilución 1:5 y ahora la pulpa de jugo es 1/5 del concentrado original. Así pues, en una dilución simple usted agrega una unidad de volumen de solvente de acuerdo con el factor de dilución deseado. 2. Dilución seriada Una dilución seriada es simplemente una serie de diluciones simples que amplifican el factor de dilución rápidamente, comenzando con una pequeña cantidad inicial de muestra (cultivo de bacterias, un reactivo químico, un jugo, etc.). La fuente del material para diluir en cada paso viene del material diluido en el tubo anterior. En una dilución seriada el factor de dilución total en cualquier punto es el producto del factor de dilución individual en cada uno de los tubos. Ejemplo: En el laboratorio de microbiología usted realizará una dilución seriada 1:100 de un cultivo de bacterias en tres pasos (ver figura). El paso inicial combina 1 unidad de volumen del cultivo con 99 unidades de volumen de caldo = dilución 1: 100. En el siguiente paso usted combina 1 unidad de volumen del cultivo diluido 1:100 con 99 unidades de volumen de caldo de cultivo. Usted ahora tiene una dilución 1:10.000 (1:100 x 100 = 1:10000). En el tercer paso usted combina 1 unidad de volumen del cultivo diluido 1:10000 con 99 unidades de volumen de caldo de cultivo. Usted ahora tiene una dilución 1:1.000.000 (1:100 x 10,000 = 1:1,000,000). La concentración del cultivo es ahora una millonésima parte menos que en la muestra original.

Este valor es desconocido para usted. C2 = 25 mg/ml (la nueva concentración) Por ordenamiento algebraico: V1 = (V2 x C2) / C1 V1 = (0. en cualquier unidad que usted esté trabajando (Atributos de la solución fuente) V1C1=V2C2 (atributos de la nueva solución) Ejemplo: Suponga que usted tiene 3 ml de una solución madre de ampicilina a una concentración de 100 mg/ml y usted quiere hacer 200 ul de una solución que tenga una concentración de 25 mg/ml. microgramos) o para evitar el desperdicio de material. donde: V = volumen. V1 = El volumen de la solución madre con el cual usted partirá para hacer la segunda solución. Cómo hacer volúmenes fijos de concentraciones específicas: Método de V1C1=V2C2 Con frecuencia usted necesita hacer una cantidad determinada de una solución con una concentración conocida debido a la disponibilidad limitada de materiales (algunos químicos son muy costosos y solo se venden o utilizan en pequeñas cantidades e. C = concentración.05 ml = 50 ul . C1 = 100 mg/ml (la concentración de la solución madre) V2 = 200 ul (volumen total de la solución que usted va a preparar con una nueva concentración). g.2 ml x 25 mg/ml) / 100 mg/ml = 0.3. Usted necesita saber qué volumen de la solución madre necesita usar para hacer los 200 ul del volumen total necesitado. La fórmula V1C1 = V2C2 es un método rápido para calcular tales diluciones.

05 ml. Cuando se usan reactivos líquidos la concentración en porcentaje se basa en volumen por volumen. i.0 L) de solvente (usualmente agua).Por lo tanto. Cuántos gramos deben disolverse en 25 ml de agua para hacer esta solución? g?/25 ml = 0. 4. Soluciones Molares (unidad = M = moles/L) Algunas veces puede ser más eficiente usar Molaridad cuando se están calculando concentraciones.0 M) es equivalente a un peso fórmula (pm) (g/mole) de reactivo químico disuelto en 1 litro (1. # ml / 100 ml. Cuando se trabaja con químicos secos este se mezcla como masa seca (g) por volumen donde # g/100 ml = Concentración en porcentaje.0 g de NaCl en 100 ml de agua (o el equivalente para el volumen que usted necesita). Una solución 1. Soluciones con concentraciones en porcentaje Muchos reactivos se mezclan como concentraciones en porcentaje.e. 50 ul de la solución madre y diluirla con 150 ul de solvente para lograr los 200 ul de la solución con una concentración de 25 mg/ml (recuerde que la cantidad de solvente utilizada se basa en el volumen final que se necesita de tal forma que usted debe restar el volumen inicial del volumen final para poder calcular la cantidad de solvente). Ejemplo: Si usted quiere hacer una solución de etanol al 70%. El peso fórmula o peso molecular siempre está registrado en la etiqueta del reactivo. Ejemplo: Un químico tiene un peso molecular de 180 g/mol y usted necesita 25 ml (0.025 L) de una solución de 0. Usted puede usar Molaridad en la ecuación de arriba en lugar de otras unidades de concentración. es decir. Ejemplo: Si usted quiere hacer una solución de NaCl al 3% usted debe disolver 3.675 g/25 ml 5..15 M (= moles/L).025 L x 0.0 Molar (1. usted debe mezclar 70 ml de etanol al 100% con 30 ml de agua (o el equivalente para el volumen que usted necesita). . usted debe tomar 0.15 mole/L x 180 g/mole = 0.

Si ud. 6. normalidad.1M de IgM (p.3 gr) 4. Calcule la concentración en molaridad. Cl: 35.25M? (Na: 23gr. Calcule el número de gramos en 0. Calcule la molalidad de una solución que contiene 45 gr de MgCl2 disueltos en 620 gr de agua.2 M? (p. Calcule el peso de sulfato de anfetamina contenido en 70 ml de una solución al 0. 10.5 gr de sucrosa en suficiente agua para producir 100 ml de solución. 11. de la dextrosa = 180.48 gramos de aspirina en 30 ml de agua. 7. tiene una solución hecha con 1.3 g de agua. Cual es la Normalidad de una solución de H3PO4 2M? 9.92 gr de NaCl y 252. 3. Se disolvieron 0.TALLER Teniendo como base los elementos teóricos suministrados en el documento guía. Cuántos gr de dextrosa hay en 45 ml de una solución 0.5gr ). Calcule el volumen de una solución al 1. Cuál es la concentración de la aspirina en términos de % P/V? 2. de la sucrosa = 342. 1. Si ud. cuál es la molaridad y la molalidad de esta solución? (Densidad del agua = 1gr/ml). cual es la concentración final de la solución? 12. Cuanto NaCl (en gramos) debe disolver para preparar 200 ml de una solución de NaCl 0.2 gr) 5.m. resuelva el siguiente taller relacionado con el tópico de soluciones y diluciones. Este se socializará al inicio del laboratorio para lo cual será imperativa su participación.m. . Cuál es la molaridad (M) de la sucrosa en esta solución? (p. de la IgM = 900000 daltons). molalidad y % en masa de 25 gramos de KBr disueltos en 750 ml de solvente. 8.75 % (P/V) que contiene 4375 gr de soluto. Se disolvieron 1. tiene 10 ml de una solución stock 10 mM y realiza 5 diluciones seriadas base 10.14% (% P/V).m.

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