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Mabel S.

Mendoza
Bióloga Marina
Investigadora – Programa Diversificación
CENIACUA
mmendoza@ceniacua.org
}  Definición y desarrollo histórico
}  Importancia y selección del Alimento Vivo
}  Fitoplancton

}  Rotíferos
}  Artemias

}  Copépodos
}  Floc
}  Estudio de caso - Cobia
}  El alimento vivo es el grupo de organismos
que componen el plancton (fitoplancton y
zooplancton), siendo la unidad básica de
producción del materia orgánica en los
ecosistemas acuáticos

}  Es un elemento clave durante la larvicultura


de las especies cultivables independiente de
la estrategia alimenticia durante la vida
adulta.
Peces marinos
Años 60
}  “Green water” compuesto principalmente de
protozoarios
}  Larvas trocóforas de bivalvos
}  Nauplios de copépodos
}  Nauplios de artemia
}  Rotífero Brachionus plicatilis

Años 70
}  Larvas trocóforas y rotíferos hasta el día 25
}  Larvas de copépodos hasta el día 35
}  Trozos de peces y alimento artificial a partir del
día 40
}  Factores que determinan la supervivencia de
las larvas en el ambiente

q  Externos ◉ Físicos


◉ Químicos

q  Internos ◉ Genéticos


◉ Etológicos
◉ Biológicos
◉ Nutricionales
Ontogenia Indirecta

Proceso Intervalo Alimento

}  Activación Embrión Endógeno

} Primera Larva
Alimentación
Oral

}  Metamorfosis Juvenil Exógeno

Adulto
}  Reproducción
Senectud
}  Muerte
Requisitos para selección de Alimento Vivo
}  Selección de presas de tamaño adecuado y
movimiento lento durante las primeras etapas de
desarrollo
}  Aporte nutricional (HUFAS)
}  Facilidad de producción masiva

Captura de alimento
}  1)Disponibilidad
}  2)Densidad
}  3)Apariencia
}  4)Tamaño
}  5)Estímulo Químico
}  Principales algas utilizadas en Acuicultura
Bacillariophyceae

Skeletonema costatum

Thalassiosira sp.

Chaetoceros sp.
Haptophyceae

Isochrysis galbana

Pavlova lutheri

Chrysophyceae

Tetraselmis suecica
Chrysophyceae

Chlorella sp.

Chrypthphyceae

Chroomonas salina

Cyanophyceae

Spirulina sp.
Protocolo de mantenimiento de cepas e inóculos iniciales

Metodología

Asepsia El área de trabajo se esteriliza con luz UV y alcohol al 70%.


Los nutrientes, cepas e inóculos se manejan tras la llama de
los mecheros
Calidad de agua El agua pasa por filtros de 5, 1 y 0.22 µm, se pasa por luz
UV y se coloca en autoclave
Rejuvenecimiento Se siembra la especie seleccionada en agar y tubos de
ensayo con agar enriquecido
Purificación Serie de diluciones sucesivas. Se disponen tubos de
ensayo con 9 ml de agua nutrida y luego se le adiciona a
uno de estos tubos 1 ml de la muestra inóculo, a
continuación se homogeniza y luego se este se toma 1 ml y
se inocula en el siguiente tubo y así hasta obtener diluciones
1/10, 1/100, 1/1000
Producción de Inóculos Estos se obtienen replicando una de las diluciones. Se
disponen tubos de ensayo con 9 ml de agua nutrida y se le
adiciona a cada tubo 1 ml del tubo inóculo.
…. Continuación

Tiempo Al cabo de 7 días estos cultivos son transferidos como


inóculos a volúmenes de 125 ml durante 4 días, luego estos
se transfieren a volúmenes de 3 litros
Parámetros Los cultivos se mantienen a 18º C de temperatura,
iluminación constante y sin aireación
Nutrientes El enriquecimiento del agua se realiza con medio conway
grado analítico
Medios de cultivo
CONWAY
Reactivos Volumen de Agua para
100 ml 1Lt 1.5 Lt 2 Lt 2.5 Lt 3 Lt
EDTA 4.5 gr 45 gr 67.5 gr 90 gr 112.5 gr 135 gr
Ácido Bórico 3.36 gr 33.6 gr 50.4 gr 67.2 gr 84 gr 100.8 gr
Nitrato de sodio 10 gr 100 gr 150 gr 200 gr 250 gr 300 gr
Fosfato de Sodio 2 gr 20 gr 30 gr 40 gr 50 gr 60 gr
Cloruro de 0.036 gr 0.36 gr 0.54 gr 0.72 gr 0.9 gr 10.8 gr
Manganeso
Cloruro Férrico 0.13 gr 1.3 gr 1.95 gr 2.6 gr 3.25 gr 3.9 gr
Nitrato de Potasio 11.6 gr 116 gr 158 gr 232 gr 290 gr 348 gr

* Se usa un mililitro de Conway por un litro de Agua de mar


METASILICATO DE SODIO
1 Lt de Agua Destilada 20 gr. de metasilicato de sodio.

VITAMINAS
Reactivos Agua Destilada Estéril
Mezcla para 1 Lt Mezcla para 2 Lt
Tiamina 2 gr. 4 gr.
Cianocobatan 0.1 gr. 0.2 gr.
Biotina (H) 0.1 gr. 0.2 gr.

* Se usa 0.1 mililitro por un litro de Agua de mar


METALES TRAZA
Reactivo Cantidad en 100 ml Cantidad en 1 Lt
ZnCl2 2.1 gr. 21 gr.
CoCl2 20. gr. 20 gr.
NH4Molibdato 0.9 gr. 9 gr.
CuSo4 2.0 gr. 20 gr.
Protocolo de producción de algas en 3 litros y volúmenes superiores

Metodología

Asepsia El área de trabajo se limpia con alcohol al 70% e hipoclorito


de sodio al 12%
Calidad de agua El agua para 3 litros es tratada igual que para cepas, el agua
de los demás volúmenes es filtrada hasta 1 micra y tratada
con luz UV y luego clorinada (12 ppm) y declorinada con
tiosulfato
Nutrientes El enriquecimiento del agua se realiza con medio conway
analítico para 3 litros e industrial para los demás volúmenes.
La vitamina solo se adiciona hasta 3 litros.
Parámetros La temperatura se mantiene a 24º C, el pH se controla con
CO2 adicionado generalmente 2 veces al día (10am y 2pm) a
través de la aireación que se mantiene constante al igual que
la luz.
Tiempo Son mantenidos en 3 litros por 4 días y en los demás
volúmenes 3 días antes de ser transferidos a volúmenes
superiores.
Seguimiento Se realizan conteos y se evalúa la calidad al final del cultivo
Montaje de cultivo
Protocolo para la producción masiva de microalgas (2000 litros) a la
intemperie

Metodología

Calidad de agua El agua es filtrada a 5 µm, clorinada y declorinada (tabla


anexa)
Nutrientes El agua es nutrida con base conway grado industrial

Parámetros Fotoperíodo natural, temperatura ambiente, aireación


constante y pH controlado con CO2.
Tiempo La duración del cultivo es de dos días con tiempo soleado

Seguimiento Se realizan conteos al final del cultivo y se evalúa la calidad


de las células producidas
Concentraciones utilizadas para la clorinación y declorinación

Volúmenes Hipoclorito Tiosulfato de Sodio


(L) (ml) (ml)
30 3.6 0.9
300 30 9
1250 150 30
1350 160 40.5
1500 180 46.5

***Pruebas con Ortotoludina***


Conteo

Para células grandes se


cuenta en los
cuadrados (4*4) y se
expresa como

Células* mL-1
= 10000 (x/4)
Brachionus plicatilis
Disco ciliar
Glándula
vitelina
Boca

Furca
Estómago

Huevo

}  Alternancia de reproducción sexual y asexual


}  Polífago
Montaje cultivo intensivo
Condiciones óptimas de cultivo
Calidad del agua
Para obtener una salinidad de 18-22 ppm se usa
agua de mar diluida con agua dulce
El medio de cultivo debe ser filtrado y clorinado (5
ppm de cloro activo por 1 hora) y finalmente
neutralizado (5-6 ppm de tiosulfato de sodio)
Temperatura
25-28 °C
Aireación
Bastante suave manteniendo el oxígeno >3.5 mg/L
Los difusores de oxígeno se suspenden 15 cm
encima del fondo
Conteo y Registro

Tabla de Datos Rotíferos

Mes/Año: Tanque:
Salinidad (ppt)

Tanque Vol (L)


Día de cultivo

Presenci

motilidad ****

ciliados *****
Relaciò Tasa de a de
% Huevos

n Total aliment Alimen Algas/Ali


Fecha

Temp. OD Huevos Rots Recambi o (g/106 to total mento


(°C) (mg/l) pH Amonio Rot/m l * (X106) o H2O Δ rotifers) (g) ***
1 * Relación huevos = total huevos
2 /total rotíferos
3 ***Presencia de alimento en el cultivo
4 0 vacío, +medio, ++ lleno
5 ****Motilidad= ++ Activo, + Lento
6 *****Ciliados 0 limpio, + medio
7 contaminación, ++alta contam
8 Notas mensuales:
9
10
Cálculo de Alimentación
MANTENIMIENTO 95% 5%
Rot * 10 Factor Total Alimento Levadura Protein
6
Alim. Plus
64,08 0,2 12,82 12,2 0,6
64,08 0,3 19,22 18,3 1,0
64,08 0,4 25,63 24,4 1,2
 

Porcentajes
ENRIQUECIDO 45% 42,5% 2,5% 5% 2,5% 2,5%
6
Rot * 10 Factor Total Levadura 3050 Protein Plus ARA AstaRose Alga
Alim. Alimento
165,6 0,2 33,12 14,90 14,08 1,66 1,66 0,83 0,83
78 0,3 23,4 10,53 9,95 1,17 1,17 0,59 0,59
1,2 0,4 0,48 0,22 0,20 0,02 0,02 0,01 0,01
 

****Probiótico****
• 1ml por cada litro de alimento
• 1 ml por cada 100 litros de cultivo
Probióticos
Como uso alterno a los antibióticos, a nivel mundial se está
probando el uso de probióticos, los cuales han demostrado su
efectividad con especies ícticas, favoreciendo no sólo la respuesta
inmune frente a los principales agentes infecciosos sino además
promoviendo el crecimiento de los animales y mejorando la calidad
de agua. Los principales mecanismos de los microorganismos que
son considerados probióticos son:

1. Antagonismo frente a cepas patógenas, debido a su capacidad de


producción de sustancias antimicrobiales como ácidos orgánicos,
peróxido de hidrógeno o sideróforos entre otros

2. Capacidad de colonizar y adherirse al tracto gastrointestinal

3. Resistir las condiciones del intestino y estómago en cuanto a sales


biliares, pH y temperatura con un mayor crecimiento que bacterias
oportunistas o potencialmente patógenas
Enriquecedores
}  Algamac 3050: alga Schizochytrium, deshidratada y en presentación
de hojuelas. Alto contenido (43%) de ácidos grasos esenciales poli
insaturados (DHA) de la serie omega-3 (22:6w3).

}  Protein Plus: mezcla de especies fototróficas y heterotróficas.


Células inactivadas y secadas, presentación en polvo. Proporciona
411 cal/100g.

}  ARA: ácido araquidónico obtenido a partir del hongo filamentoso


Mortierella alpina. Ácido graso esencial poliinsaturado de la serie
omega-6.

}  Astarose: pigmento astaxantina en presentación de polvo rojo


oscuro.
Ø Tiempo enriquecimiento:
12-20 horas
Ø Aireación moderada y
oxígeno
Ø Cosecha con agua filtrada
Ø Se lleva a neveras y se le
colocan botellas con agua
para mantener bajo el
metabolismo
Fotografías: UM-RSMAS Ø Cálculo de raciones por
alimentación
Crustáceo branquiópodo que
habita aguas hipersalinas,
filtrador no selectivo.

Criptobiosis = cistos secos o


durmientes

Las hembras adultas poseen un


saco de puesta o útero

Los machos desarrollan unos


apéndices curvados y prensiles
Estado larval I

Estado larval II

15 mudas sucesivas
hasta llegar a
adulto. Dimorfismo
sexual
400 – 500 µm, alto
contenido de
reserva vitelina,
imposibilitada para
alimentarse
Consumidor activo
de partículas de
1-40 µm
Ciclo de Vida

Cepas Zigogenéticas Cepas Partenogenéticas

♀ ♂ ♀ Partenogenética

Copulación
Oviparidad Ovoviviparidad
Fertilización

Oviparidad Ovoviviparidad Quistes Nauplios

Quistes Nauplios
Montaje cultivo Artemia salina
Hidratación Siembra Cosecha

Previamente preparado con:


Durante 1 hora con alta Cosecha 3:00 a 4:00 pm
35 ml Cloro (7%)
aireación en agua dulce con Se suspende la aireación, se
20 g Tiosulfato de sodio
50 ml de Cloro (7%) espera que se dirijan por
175 g Bicarbonato de sodio
03:00 a 4:00 pm fototropismo + hacia el canal de
Alta aireación
Siembra 4:00 a 5:00 pm cosecha y se descarta la primera
Duración 24 horas porción que corresponde a cistos
Se usa un cosechador con malla
de 200 µm y aireación suave
dentro de este y se concentra a
20 Litros
Baño formol añadir 8 ml por 5
minutos y volver a lavar
Entregar a Sala de Peces para
enriquecimiento
Condiciones óptimas de cultivo
Siembra: Ver etiqueta del fabricante para optimizar
eclosión Ej.:
A. salina
Cistos secos por gramo: 250,000-280,000
Salinidad: 25
T° Agua: 27-30°C
pH= 8,0
Densidad de siembra: 2 g o menos por Litro
Tanque cónico con constante aireación e iluminación
Tiempo de eclosión: 24 h (entre más caliente el agua
se acorta el tiempo)
Probiótico durante la eclosión y el enriquecimiento (1
ml por cada 10 litros de cultivo)
Conteo y Registro

Mes/Año:

Fecha Hora de Cantidad Art * 106 Total alimento Conteos submuestras Art * 106 % de
siembra sembrada esperada enriquecido 1 2 3 4 5 6 real eclosión
(gr de (gr)
cistos)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
Cálculo de Alimentación
Porcentajes
ENRIQUECIMIENTO 85% 10% 2.5% 2.5% ml alga
6
Art * 10 Factor Total 3050 ARA AstaRose Instant Algae 9
Alim. Alimento
30 0.3 9 7.65 0.90 0.23 0.23 2.025
 

Ø Tiempo enriquecimiento:
8-12 horas
Ø Fuerte aireación
Ø Cosecha con agua filtrada
Ø Se lleva a neveras y se le
colocan botellas con agua
para mantener bajo el
metabolismo
Ø Cálculo de raciones por
alimentación
}  Principales especies de copépodos utilizados
en Acuicultura
Acartia tonsa

Temora longicornis

Tigriopus californicus
}  Se ha encontrado que los copépodos tienen
un valor nutricional mayor que Artemia aún
cuando ésta sea enriquecida, en términos de
sobrevivencia, crecimiento, pigmentación y
desarrollo ocular de larvas de peces.

}  Genera una mejor respuesta predadora por


parte de las larvas

}  Sin embargo al realizar una comparación


económica basada en los costos por unidad
de biomasa, su cultivo no se ve favorecido
Paracalanus parvus

Ciclo de vida 6 días


11 estadíos desde nauplio
hasta reproductor
20 huevos por hembra/día
Prosoma

Genosegmento

Nauplio
Huevo

Paracalanus parvus
Fotografías: Gustavo Torres
Monitoreo

}  Sobrevivencia hasta adultos listos para reproducirse.

}  Densidad adultos 70 – 240 /L

}  Fecundidad. (N° descendientes por hembra por día)

}  Parámetros Físico- químicos

}  Abundancia de glóbulos de aceite en el prosoma de los copepoditos


y nauplios

}  Presencia y abundancia de huevos en el prosoma de los adultos

}  Densidad de nauplios 0.5 - 1/ml


Sin glóbulos de aceite Con glóbulos de aceite

B
A
A huevo
A

B
A: ♀ CON HUEVOS; B: ♀ SIN HUEVOS
Fotografías: Gustavo Torres
Cosecha

Estadío Tamaño Ojo de Malla


40 µm 100 µm 200 µm
Adultos X X X
Copepoditos X X
1er y 2do copepodito X
Nauplio X
1)  Manipulación ciclos N y C
2)  Comunidades bacterianas
3)  Aireación permanente

Objetivo
Mejorar aprovechamiento de insumos, aumentar
densidad de siembra, controlar la calidad del
agua, minimizar consumo de agua, reducir el
vertimiento de efluentes y producir proteína
unicelular (bacteriana) asimilable por parte de los
animales cultivados.
Limitaciones en cultivos intensivos

Oxígeno Nitrógeno
Disuelto Inorgánico
Disuelto

Alimento Fertilizantes
Balanceado

Proteína

75% 25%
Se pierde Asimilado por
(desechos) el pez

20% 80%
Bacterias
Heces – **NH4 **-
heterotróficas
Alimento no Úrea
ingerido
Síntesis de Proteínas
en presencia de
fuentes de C
Requerimientos para implementación del floc en sistemas super
intensivos

v  Protocolos Bioseguridad


v  Aislamiento estanque en tierra / estanques (concreto/fibra)
v  Mínimo recambio de agua y alta proporción C:N
v  Adición Carbono
v  Intensa aireación / mezcla permanente columna de agua

Producción Bio floc


v  Suministro sustratos orgánicos para la bacterias heterotróficas
(alimento, actividad fitoplanctónica, excreción, alimento no utilizado
por el pez; calidad del sustrato → melaza y ponedora)
v  Ingesta de Bio floc: según las características de alimentación de la
especie, talla, tamaño flóculo, densidad del floc y presencia/tasa de
alimento balanceado
v  Biodegración del floc: depende de las bacterias, protozoos y otros
v  Otras variables ha tener en cuenta son temperatura, salinidad,
recambio, mezcla agua, entre otros.
Piscina en tierra recubierta con
geo-membrana y aireadores
Cultivo de tilapia roja en floc y agua de
mar (densidad de siembra 20 peces/m3)
Generalidades de la especie

Las características que hacen que la cobia sea un pez ideal para la
acuicultura son:

v  Presenta altas tasas de fecundidad (400.000 a más de 5'000.000


huevos / hembra, dependiendo de la talla del ejemplar
v  Talla comercial en corto período de tiempo (6-8 Kg/año)
v  Excelente rendimiento en canal (70-80%)
v  Creciente demanda en el mercado internacional por la textura y
calidad de su carne
Tabla de alimentación durante el ciclo de larvicultura

Reserva  Vitelina
Algas
Rotífero  e nriquecido
A.  franciscana
Nauplio  A.  salina
A.  salina  e nriquecida
B1
B2
C1
C2
EP1
EP2
DPE 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32

Inicio  de  destete


Durante el proceso de larvicultura en tan sólo 30 días se entregan
animales de 5 gramos de peso promedio.
Uso del estadío “paracaidista”
para acortar los días de uso
de los rotíferos

Tratamiento profiláctico con


oxytetraciclina (antibiótico)
durante la eclosión a 20 ppm,
se lava con agua (filtrada y
con U.V), después se
desinfecta con formol a 400
ppm durante 5 minutos.

Durante el enriquecimiento
se usa oxytetraciclina a 50
ppm durante 12 horas y se
aplica el mismo tratamiento
de desinfección.
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